JP2013153714A - 細胞計数方法、細胞計数装置、及び細胞計数プログラム - Google Patents
細胞計数方法、細胞計数装置、及び細胞計数プログラム Download PDFInfo
- Publication number
- JP2013153714A JP2013153714A JP2012018403A JP2012018403A JP2013153714A JP 2013153714 A JP2013153714 A JP 2013153714A JP 2012018403 A JP2012018403 A JP 2012018403A JP 2012018403 A JP2012018403 A JP 2012018403A JP 2013153714 A JP2013153714 A JP 2013153714A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- cell
- cells
- image
- counting
- mass
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 33
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 435
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 claims abstract description 46
- 238000012937 correction Methods 0.000 claims description 14
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 abstract 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 6
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 6
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 5
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 4
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 3
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 3
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 2
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 2
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 1
- 230000001678 irradiating effect Effects 0.000 description 1
- 229920000092 linear low density polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 239000004707 linear low-density polyethylene Substances 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
- G01N15/10—Investigating individual particles
- G01N15/14—Optical investigation techniques, e.g. flow cytometry
- G01N15/1429—Signal processing
- G01N15/1433—Signal processing using image recognition
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M41/00—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
- C12M41/30—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of concentration
- C12M41/36—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of concentration of biomass, e.g. colony counters or by turbidity measurements
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
- C12Q1/04—Determining presence or kind of microorganism; Use of selective media for testing antibiotics or bacteriocides; Compositions containing a chemical indicator therefor
- C12Q1/06—Quantitative determination
-
- G—PHYSICS
- G06—COMPUTING; CALCULATING OR COUNTING
- G06F—ELECTRIC DIGITAL DATA PROCESSING
- G06F18/00—Pattern recognition
- G06F18/20—Analysing
- G06F18/23—Clustering techniques
-
- G—PHYSICS
- G06—COMPUTING; CALCULATING OR COUNTING
- G06T—IMAGE DATA PROCESSING OR GENERATION, IN GENERAL
- G06T7/00—Image analysis
- G06T7/0002—Inspection of images, e.g. flaw detection
- G06T7/0012—Biomedical image inspection
-
- G—PHYSICS
- G06—COMPUTING; CALCULATING OR COUNTING
- G06T—IMAGE DATA PROCESSING OR GENERATION, IN GENERAL
- G06T7/00—Image analysis
- G06T7/10—Segmentation; Edge detection
- G06T7/11—Region-based segmentation
-
- G—PHYSICS
- G06—COMPUTING; CALCULATING OR COUNTING
- G06V—IMAGE OR VIDEO RECOGNITION OR UNDERSTANDING
- G06V20/00—Scenes; Scene-specific elements
- G06V20/60—Type of objects
- G06V20/69—Microscopic objects, e.g. biological cells or cellular parts
-
- G—PHYSICS
- G06—COMPUTING; CALCULATING OR COUNTING
- G06V—IMAGE OR VIDEO RECOGNITION OR UNDERSTANDING
- G06V20/00—Scenes; Scene-specific elements
- G06V20/60—Type of objects
- G06V20/69—Microscopic objects, e.g. biological cells or cellular parts
- G06V20/695—Preprocessing, e.g. image segmentation
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
- G01N15/10—Investigating individual particles
- G01N2015/1006—Investigating individual particles for cytology
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
- G01N15/10—Investigating individual particles
- G01N15/14—Optical investigation techniques, e.g. flow cytometry
- G01N2015/1486—Counting the particles
-
- G—PHYSICS
- G06—COMPUTING; CALCULATING OR COUNTING
- G06T—IMAGE DATA PROCESSING OR GENERATION, IN GENERAL
- G06T2207/00—Indexing scheme for image analysis or image enhancement
- G06T2207/10—Image acquisition modality
- G06T2207/10056—Microscopic image
-
- G—PHYSICS
- G06—COMPUTING; CALCULATING OR COUNTING
- G06T—IMAGE DATA PROCESSING OR GENERATION, IN GENERAL
- G06T2207/00—Indexing scheme for image analysis or image enhancement
- G06T2207/30—Subject of image; Context of image processing
- G06T2207/30004—Biomedical image processing
- G06T2207/30024—Cell structures in vitro; Tissue sections in vitro
-
- G—PHYSICS
- G06—COMPUTING; CALCULATING OR COUNTING
- G06T—IMAGE DATA PROCESSING OR GENERATION, IN GENERAL
- G06T2207/00—Indexing scheme for image analysis or image enhancement
- G06T2207/30—Subject of image; Context of image processing
- G06T2207/30242—Counting objects in image
Landscapes
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Theoretical Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Computer Vision & Pattern Recognition (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Multimedia (AREA)
- Data Mining & Analysis (AREA)
- Quality & Reliability (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Radiology & Medical Imaging (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Signal Processing (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Pathology (AREA)
- Bioinformatics & Computational Biology (AREA)
- Evolutionary Biology (AREA)
- Artificial Intelligence (AREA)
- Evolutionary Computation (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
Abstract
【解決手段】 培養細胞の画像を取得し、この画像から、細胞塊の画像と単独細胞の画像を分離し、細胞塊の画像と単独細胞の画像のそれぞれに基づいて、細胞塊の細胞数と単独細胞の細胞数を算出する細胞計数方法とする。
【選択図】 図9
Description
このような細胞の大量培養にあたり、浮遊細胞を培養する場合、培養中の細胞数を計数して、細胞数の経時変化や、増殖効率の変化を把握したいという要請がある。ところが、培養中の細胞数を正確に計数することには、従来様々な問題があった。
従来は、これらの培養細胞を上方または下方から撮影し、得られた画像における培養細胞の投影面積に基づいて、細胞塊の投影面積を一個あたりの平均細胞面積により除算し、細胞数を計数することが行われていた。
しかしながら、細胞塊は立体的であるため、このようにして得られた細胞数は、細胞塊の実際の細胞数よりも少なく計数されてしまう。また、単独細胞が平面的に密集して連なっている場合、単独細胞の投影面積を一個あたりの平均細胞面積により除算して得られた細胞数は、単独細胞の実際の細胞数よりも多く計数されてしまう。このため、培養細胞の投影面積にもとづき計数された細胞数は、正確な値ではないという問題があった。
しかしながら、一般的に細胞塊の崩し過ぎは、細胞の増幅効率の低下を招くというさらなる問題がある。このため、従来は培養途中に正確な計数を行うことができず、細胞回収時のみにしか正確な計数を行うことができなかった。
ここで、培養細胞の細胞数を計数する従来の方法として、例えば特許文献1に記載の細胞数計測方法を挙げることができる。この方法では、培養容器内に存在する培養細胞の観察画像を取得し、取得された観察画像内において培養細胞の占有する面積の比率を占有面積率として算出し、算出された占有面積率と所定の関係式とから培養容器内に存在する培養細胞の細胞数を算出している。
本発明は、上記の事情にかんがみなされたものであり、培養中の培養細胞の画像を取得し、この画像から、細胞塊の画像と単独細胞の画像を分離し、細胞塊の画像と単独細胞の画像を別個に画像処理して、細胞塊の細胞数と単独細胞の細胞数をそれぞれ算出することで、細胞塊が存在していてもこれを崩すことなく、正確に細胞数を計数することが可能な細胞計数方法、細胞計数装置、及び細胞計数プログラムの提供を目的とする。
まず、本実施形態の細胞計数方法について、図1〜図6を参照して説明する。
本実施形態の細胞計数方法は、培養容器中の培養細胞数を計数する方法であって、培養容器中の所定の領域の画像を取得し、この画像から、細胞塊の画像と単独細胞の画像を分離し、細胞塊の画像と単独細胞の画像を別個に画像処理して、細胞塊の細胞数と単独細胞の細胞数をそれぞれ算出するものであれば良く、実施形態及び実施例の具体的な構成により限定されるものではないが、例えば以下の工程を備えたものとすることができる。
まず、培養容器中の所定の領域を撮影して、画像を取得する。具体的には、例えば透明の培養容器の上方から光を照射し、下方から顕微鏡を介してカメラにより、自動的に培養細胞を撮影して、培養容器中の所定の領域の画像を取得することができる。以下、この画像を「観察画像」と称する場合がある。図1は、このようにして得られた培養容器中の浮遊細胞を撮影して得られた観察画像を示している。同図には、細胞塊1、単独細胞2が、培養液3に存在しているようすが示されている。
なお、培養容器中の所定の領域のみを撮影して、この領域における細胞数を計数した後に、培養容器全体における当該領域の割合に基づいて、培養容器全体の培養細胞数を算出することができる。
次に、観察画像における細胞塊1と単独細胞2の画像を分離して、細胞塊の画像と、単独細胞の画像をそれぞれ作成する。
具体的には、まず図3に示すように、細胞塊1のみの細胞投影面積21を表す細胞塊の画像を作成する。そして、この細胞塊の画像を用いて、細胞塊1の細胞投影面積21を計測する。
同図に示すように、培養の初期には、培養細胞の直径が次第に増加するが、一定時間経過後は、反対に直径が小さくなる傾向が見られる。したがって、単独細胞の平均面積は、観察時間により変化するため、上記の通り、培養細胞を計数するタイミングで、単独細胞の平均面積を計測することが好ましい。
一方、例えばある種の腫瘍細胞のように、培養細胞の種類によっては、培養中の大きさがあまり変化しないものもある。このような培養細胞の場合には、培養細胞を計数するタイミングで単独細胞の平均面積を計測する必要はない。すなわち、単独細胞の平均面積は、後述する細胞塊の細胞数の算出に用いられるが、このような培養細胞の場合は、平均面積の計測に変えて、単独細胞の体積を予め設定しておき、これを培養細胞の計数に使用することも好ましい。
次に、細胞塊の画像にもとづき得られた細胞投影面積21を用いて、細胞塊1の体積を球形として算出する。そして、このようにして算出された細胞塊1の球形の体積を、補正係数を用いて補正する。具体的には、この球形の体積を補正係数で除算して、より実際の値に近い細胞塊1の体積を得ることができる。
[補正係数]=1.1003×[細胞塊の投影面積(×10−5cm2)]−0.1885
ただし、細胞塊の投影面積が、1.0802×10−5cm2未満の場合は、補正係数は1となる。
次に、補正して得られた細胞塊1の体積を、単独細胞2の体積で除算して、細胞塊1の細胞数を算出する。単独細胞2の体積は、単独細胞2の平均面積にもとづき算出できる。
以上のようにして、単独細胞2の細胞数と、細胞塊1の細胞数を得ることができ、これらを加算することで、観察画像の領域における細胞数を算出することができる。そして、得られた細胞数に、観察画像の領域に対する培養液の体積の比率を乗算することで、培養細胞の細胞数を算出することができる。
次に、本実施形態の細胞計数装置、及び細胞計数プログラムについて、図7〜図8を参照して説明する。図7は、本発明の一実施形態に係る細胞計数装置の構成を示すブロック図であり、図8は、この細胞計数装置により実行される細胞計数プログラムによる処理手順を示すフローチャートである。
まず、図7に示されるように、本実施形態の細胞計数装置100は、画像入力手段101、画像記憶手段102、画像分離手段103、単独細胞計測手段104、細胞塊体積算出手段105、細胞塊細胞数算出手段106、及び細胞数出力手段107を備えている。この細胞計数装置100は、スマートフォン、タブレットコンピュータ、パーソナルコンピュータ、ワークステーション、サーバーなどの各種コンピュータを用いて構成でき、上記各構成は、コンピュータにおけるCPU及びメモリー等から構成することができる。また、このような各構成を備えた専用の計数装置として構成することもできる。
画像分離手段103は、観察画像における細胞塊と単独細胞を分離して、細胞塊画像と、単独細胞画像を作成し、それぞれ画像記憶手段102に記憶させる。
細胞塊体積算出手段105は、細胞塊画像を用いて、細胞塊の投影面積を計測する。また、細胞塊体積算出手段105は、細胞塊の体積を、球形として、細胞塊の投影面積にもとづき算出する。さらに、細胞塊体積算出手段105は、算出された球形の体積に補正係数を用いて、補正後の細胞塊の体積を算出する。
そして、細胞数出力手段107は、観察画像上の領域における細胞数、及び/又は、培養液中の細胞数を、細胞計数装置100に接続されたディスプレイなどの表示装置(図示していない)に出力する。
次に、細胞計数装置100における画像分離手段13は、観察画像を用いて、細胞塊1と単独細胞2の画像を分離し、細胞塊の画像と単独細胞の画像を作成して、これらを画像記憶手段102に記憶させる(ステップ11)。
また、細胞計数装置100における細胞塊体積算出手段105は、細胞塊の画像を用いて、細胞塊の投影面積を計測し、この投影面積を用いて、細胞塊を球形と仮定した場合の体積を算出する(ステップ13)。
さらに、この細胞塊体積算出手段105は、算出された球形の体積を補正して、より実際に近い細胞塊の体積を算出する(ステップ14)。
以上によって、細胞塊の細胞数と、単独細胞の細胞数をそれぞれより正確に算出することができるため、培養細胞の細胞数を一層正確に把握することが可能となる。
しかしながら、本実施形態によれば、細胞塊の細胞数を正確に計数することが可能となる。また、単独細胞についても従来に比較してより正確に計数することができる。このため、培養中の細胞数を一層正確に把握することが可能となる。
また、その結果、細胞増殖履歴を記録することができ、培養中の細胞の状態を把握することが可能となる。
さらに、本実施形態の細胞計数装置により培養中の細胞数を把握できるため、目視観察によるバラツキをなくすことができ、継代のタイミングの判断をより正確に行うことが可能となる。
上述した実施形態の細胞計数方法、細胞計数装置、及び細胞計数プログラムを用いて、培養容器中の培養細胞を計数した。
具体的には、培養容器として、LLDPE製バック(厚み100μm,サイズ230×620mm)を用いた。培地には、AlyS505N−7(細胞科学研究所)を使用し、播種細胞としてヒト末梢血単核球細胞を6.4×106cells播種した。そして、培養開始から66時間後、104時間後、174時間後、222時間後、234時間後に、培養細胞数を計数した。
その結果、実施例1により算出された細胞数は、図9に示すように、それぞれ1.60×108cells、4.07×108cells、8.41×108cells、1.16×109cells、1.19×109cellsであった。
実施例1で用いたものと同じ培養容器と培養細胞を使用して、実施例1と同じタイミングで、従来の方法により培養細胞を計数した。すなわち、培養容器中の所定の領域を撮影して得られた培養細胞の観察画像を用い、細胞の投影面積画像を取得した。そして、細胞の投影面積を計測し、得られた投影面積を細胞一個当たりの平均面積で除算して、細胞数を算出した。
その結果、比較例1により算出された細胞数は、図9に示すように、それぞれ1.12×108cells、3.79×108cells、4.34×108cells、1.08×109cells、1.11×109cellsであった。
実施例1と同じ条件で細胞を培養し、培養細胞を計数する際に、細胞塊を崩し、全て単独細胞にしてから計数を行った。このとき、培養容器中の所定の領域を撮影して得られた観察画像を用いて、単独細胞を円形近似し、細胞数を計測した。
なお、培養容器は計数タイミング毎に個別に準備し、それぞれ一回の計数のみに使用した。したがって、本参考例では、細胞塊を崩すことによる培養効率の低下の影響はなく、かつそれぞれの計数タイミングにおいて、比較的現実の細胞数に近い正確な計数結果が得られていると考えられる。
その結果、参考例1により算出された細胞数は、図9に示すように、それぞれ1.45×108cells、4.34×108cells、8.48×108cells、1.25×109cells、1.24×109cellsであった。
これに対して、実施例1に示される本実施形態における細胞計数方法、細胞計数装置、及び細胞計数プログラムによれば、細胞塊を崩すことなく細胞数を計数しても、参考例1に示される細胞塊を崩して全て単独細胞にしてから計数を行う場合と、ほぼ同等の正確な計数を行えていることがわかる。
例えば、上記実施形態では、細胞塊のみの細胞投影面積を計測してから、単独細胞数と平均面積を計測しているが、これらの順番は入れ替えてもよい。また、補正係数を細胞数や培養条件に応じて変更するなど適宜変更することが可能である。
2 単独細胞
3 培養液
11 細胞投影面積
21 細胞塊の細胞投影面積
22 円形近似された単独細胞
100 細胞計数装置
101 画像入力手段
102 画像記憶手段
103 画像分離手段
104 単独細胞計測手段
105 細胞塊体積算出手段
106 細胞塊細胞数算出手段
107 細胞数出力手段
Claims (7)
- 培養細胞を計数する方法であって、
前記培養細胞の画像を取得し、
この画像から、細胞塊の画像と単独細胞の画像を分離し、
前記細胞塊の画像と前記単独細胞の画像のそれぞれに基づいて、前記細胞塊の細胞数と前記単独細胞の細胞数を算出する
ことを特徴とする細胞計数方法。 - 前記単独細胞の画像に基づいて、単独細胞の円形近似を行い、前記単独細胞の細胞数と平均面積を算出することを特徴とする請求項1記載の細胞計数方法。
- 前記細胞塊の投影面積に基づいて、前記細胞塊の体積を算出し、
前記単独細胞の平均面積に基づいて、前記単独細胞の体積を算出し、
前記細胞塊の体積を前記単独細胞の体積で除算することで、前記細胞塊の細胞数を算出する
ことを特徴とする請求項2記載の細胞計数方法。 - 前記単独細胞の体積を予め設定しておき、
前記細胞塊の投影面積に基づいて、前記細胞塊の体積を算出し、
前記細胞塊の体積を予め設定された前記単独細胞の体積で除算することで、前記細胞塊の細胞数を算出する
ことを特徴とする請求項1又は2記載の細胞計数方法。 - 前記細胞塊の体積は、細胞塊の体積を球状として計算した後、補正係数を乗算して算出することを特徴とする請求項3又は4記載の細胞計数方法。
- 培養細胞を計数するための細胞計数装置であって、
前記培養細胞の画像を取得する手段と、
この画像から、細胞塊の画像と単独細胞の画像を分離する手段と、
前記細胞塊の画像と前記単独細胞の画像のそれぞれに基づいて、前記細胞塊の細胞数と前記単独細胞の細胞数を算出する手段と、を備えた
ことを特徴とする細胞計数装置。 - 培養細胞を計数するための細胞計数プログラムであって、
コンピュータに、
前記培養細胞の画像を入力させ、
この画像から、細胞塊の画像と単独細胞の画像を分離させ、
前記細胞塊の画像と前記単独細胞の画像のそれぞれに基づいて、前記細胞塊の細胞数と前記単独細胞の細胞数を算出させる
ことを実行させることを特徴とする細胞計数プログラム。
Priority Applications (6)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2012018403A JP5447546B2 (ja) | 2012-01-31 | 2012-01-31 | 細胞計数方法、細胞計数装置、及び細胞計数プログラム |
PCT/JP2013/000290 WO2013114816A1 (ja) | 2012-01-31 | 2013-01-22 | 細胞計数方法、細胞計数装置、及び細胞計数プログラム |
EP13743827.1A EP2811033B1 (en) | 2012-01-31 | 2013-01-22 | Cell counting method, cell counting device, and cell counting program |
CN201380007099.1A CN104080922B (zh) | 2012-01-31 | 2013-01-22 | 细胞计数方法、细胞计数装置和细胞计数程序 |
KR1020147021240A KR101691563B1 (ko) | 2012-01-31 | 2013-01-22 | 세포 계수 방법, 세포 계수 장치 및 세포 계수 프로그램 |
US14/340,125 US9535001B2 (en) | 2012-01-31 | 2014-07-24 | Cell counting method, cell counting device, and computer-readable medium storing cell counting program |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2012018403A JP5447546B2 (ja) | 2012-01-31 | 2012-01-31 | 細胞計数方法、細胞計数装置、及び細胞計数プログラム |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2013153714A true JP2013153714A (ja) | 2013-08-15 |
JP5447546B2 JP5447546B2 (ja) | 2014-03-19 |
Family
ID=48904868
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2012018403A Active JP5447546B2 (ja) | 2012-01-31 | 2012-01-31 | 細胞計数方法、細胞計数装置、及び細胞計数プログラム |
Country Status (6)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US9535001B2 (ja) |
EP (1) | EP2811033B1 (ja) |
JP (1) | JP5447546B2 (ja) |
KR (1) | KR101691563B1 (ja) |
CN (1) | CN104080922B (ja) |
WO (1) | WO2013114816A1 (ja) |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105334191A (zh) * | 2014-07-25 | 2016-02-17 | 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 | 单个红细胞的血红蛋白浓度、体积修正方法及装置 |
JP2016154450A (ja) * | 2015-02-23 | 2016-09-01 | 大日本印刷株式会社 | 培養液の培養状態解析システム及び培養状態解析方法、並びに、プログラム |
US10385300B2 (en) | 2015-01-29 | 2019-08-20 | Olympus Corporation | Cell analysis apparatus and method |
Families Citing this family (15)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP6071007B2 (ja) * | 2013-08-22 | 2017-02-01 | 富士フイルム株式会社 | 観察画像撮影評価装置および方法並びにプログラム |
JP6762080B2 (ja) * | 2014-06-30 | 2020-09-30 | 澁谷工業株式会社 | 自動培養操作装置 |
US9747490B2 (en) * | 2014-11-05 | 2017-08-29 | Vanderbilt University | Cell size imaging |
DE112015006266T5 (de) * | 2015-04-07 | 2017-11-30 | Olympus Corporation | Zellanalysegerät und Zellanalyseverfahren |
CN104794710A (zh) * | 2015-04-13 | 2015-07-22 | 上海泽煜实验设备有限公司 | 一种图像处理方法及装置 |
US10641706B2 (en) * | 2015-06-16 | 2020-05-05 | Konica Minolta, Inc. | Cell morphology image processing and corrections |
CN106022303B (zh) * | 2016-06-06 | 2019-07-19 | 南昌航空大学 | 基于无透镜全息成像的淡水藻类粗分类与计数方法 |
WO2018019383A1 (en) * | 2016-07-28 | 2018-02-01 | Curevac Ag | Method for analyzing a cell pellet |
CN110099995A (zh) * | 2017-01-06 | 2019-08-06 | 奥林巴斯株式会社 | 细胞观察系统 |
CN107219195B (zh) * | 2017-05-23 | 2019-07-23 | 山东中医药大学附属医院 | 一种血液白细胞检测装置和方法 |
CN108693097A (zh) * | 2017-12-13 | 2018-10-23 | 青岛汉朗智能医疗科技有限公司 | 红细胞聚集检测方法及系统 |
JP2020182412A (ja) * | 2019-05-08 | 2020-11-12 | Stemcell株式会社 | 計数法学習装置、細胞計数装置、計数法学習方法及び細胞計数方法、並びに、計数法学習方法及び細胞計数方法のプログラム及びそれらのプログラムを記録した記録媒体 |
TWI717910B (zh) * | 2019-11-21 | 2021-02-01 | 長庚大學 | 計算細胞體積之方法 |
CN114813522B (zh) * | 2022-06-29 | 2022-10-21 | 深圳安侣医学科技有限公司 | 基于显微放大数字图像的血液细胞分析方法及系统 |
CN115326685B (zh) * | 2022-10-13 | 2023-01-03 | 深圳安侣医学科技有限公司 | 基于显微放大图像的血液目标细胞体积获取方法及系统 |
Citations (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2002218995A (ja) * | 2000-11-22 | 2002-08-06 | Masahito Taya | 細胞増殖能評価方法、装置及びプログラム |
JP2003021628A (ja) * | 2001-07-06 | 2003-01-24 | Japan Tissue Engineering:Kk | 接着細胞選別装置、細胞増殖能評価装置、それらのプログラム及びそれらの方法 |
WO2006101056A1 (ja) * | 2005-03-22 | 2006-09-28 | Medinet Co., Ltd. | 細胞培養評価システム、細胞培養評価方法および細胞培養評価プログラム |
JP2008076088A (ja) * | 2006-09-19 | 2008-04-03 | Foundation For Biomedical Research & Innovation | 細胞のモニター方法およびモニター装置 |
JP2008261631A (ja) * | 2007-03-19 | 2008-10-30 | Yamaguchi Univ | 植物培養細胞塊の状態を判別する方法、そのための装置および植物培養細胞塊の状態を判別するためのプログラム |
WO2010103748A1 (ja) * | 2009-03-09 | 2010-09-16 | 東洋製罐株式会社 | 細胞培養方法、細胞培養装置、容器内の計数対象物の計数方法、及び計数用装置 |
WO2010143420A1 (ja) * | 2009-06-12 | 2010-12-16 | 株式会社ニコン | 細胞塊の状態判別手法、この手法を用いた画像処理プログラム及び画像処理装置、並びに細胞塊の製造方法 |
WO2010146802A1 (ja) * | 2009-06-19 | 2010-12-23 | 株式会社ニコン | 細胞塊の状態判別手法、この手法を用いた画像処理プログラム及び画像処理装置、並びに細胞塊の製造方法 |
WO2011013319A1 (ja) * | 2009-07-31 | 2011-02-03 | 株式会社ニコン | 細胞塊の成熟判定手法、この手法を用いた画像処理プログラム及び画像処理装置、並びに細胞塊の製造方法 |
Family Cites Families (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6387707B1 (en) * | 1996-04-25 | 2002-05-14 | Bioarray Solutions | Array Cytometry |
US7374906B2 (en) * | 2000-11-08 | 2008-05-20 | Surface Logix, Inc. | Biological assays using gradients formed in microfluidic systems |
US6982171B2 (en) * | 2002-03-12 | 2006-01-03 | Surface Logix, Inc. | Cell motility and chemotaxis test device and methods of using same |
CA2522543A1 (en) * | 2003-04-14 | 2004-10-28 | Surface Logix, Inc. | Devices and assays for monitoring/measuring cellular dynamics to create subject profiles from primary cells |
JP4394376B2 (ja) * | 2003-05-21 | 2010-01-06 | 正仁 田谷 | 細胞増殖能評価装置及びその方法 |
WO2006104201A1 (ja) * | 2005-03-29 | 2006-10-05 | Olympus Corporation | 細胞画像解析方法、細胞画像解析プログラム、細胞画像解析装置、スクリーニング方法およびスクリーニング装置 |
JP2007124913A (ja) | 2005-11-01 | 2007-05-24 | Olympus Corp | 細胞数計測方法、細胞数推移計測方法、細胞数計測装置および細胞数推移計測装置 |
CN100495034C (zh) * | 2006-04-18 | 2009-06-03 | 李奕 | 基于机器视觉的血细胞分析方法 |
WO2008005426A2 (en) * | 2006-06-30 | 2008-01-10 | University Of South Florida | Computer-aided pathological diagnosis system |
KR101489014B1 (ko) * | 2007-04-27 | 2015-02-02 | 도요세이칸 그룹 홀딩스 가부시키가이샤 | 세포배양장치, 세포배양시스템 및 세포배양방법 |
EP2440649B1 (en) * | 2009-06-10 | 2021-08-11 | Universität Zürich | Device for the production of cell clusters of defined cell numbers and cluster sizes |
CN102184420B (zh) * | 2011-04-18 | 2013-04-10 | 四川大学 | 一种免疫组化图像处理方法 |
-
2012
- 2012-01-31 JP JP2012018403A patent/JP5447546B2/ja active Active
-
2013
- 2013-01-22 KR KR1020147021240A patent/KR101691563B1/ko active IP Right Grant
- 2013-01-22 EP EP13743827.1A patent/EP2811033B1/en active Active
- 2013-01-22 CN CN201380007099.1A patent/CN104080922B/zh active Active
- 2013-01-22 WO PCT/JP2013/000290 patent/WO2013114816A1/ja active Application Filing
-
2014
- 2014-07-24 US US14/340,125 patent/US9535001B2/en active Active
Patent Citations (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2002218995A (ja) * | 2000-11-22 | 2002-08-06 | Masahito Taya | 細胞増殖能評価方法、装置及びプログラム |
JP2003021628A (ja) * | 2001-07-06 | 2003-01-24 | Japan Tissue Engineering:Kk | 接着細胞選別装置、細胞増殖能評価装置、それらのプログラム及びそれらの方法 |
WO2006101056A1 (ja) * | 2005-03-22 | 2006-09-28 | Medinet Co., Ltd. | 細胞培養評価システム、細胞培養評価方法および細胞培養評価プログラム |
JP2008076088A (ja) * | 2006-09-19 | 2008-04-03 | Foundation For Biomedical Research & Innovation | 細胞のモニター方法およびモニター装置 |
JP2008261631A (ja) * | 2007-03-19 | 2008-10-30 | Yamaguchi Univ | 植物培養細胞塊の状態を判別する方法、そのための装置および植物培養細胞塊の状態を判別するためのプログラム |
WO2010103748A1 (ja) * | 2009-03-09 | 2010-09-16 | 東洋製罐株式会社 | 細胞培養方法、細胞培養装置、容器内の計数対象物の計数方法、及び計数用装置 |
WO2010143420A1 (ja) * | 2009-06-12 | 2010-12-16 | 株式会社ニコン | 細胞塊の状態判別手法、この手法を用いた画像処理プログラム及び画像処理装置、並びに細胞塊の製造方法 |
WO2010146802A1 (ja) * | 2009-06-19 | 2010-12-23 | 株式会社ニコン | 細胞塊の状態判別手法、この手法を用いた画像処理プログラム及び画像処理装置、並びに細胞塊の製造方法 |
WO2011013319A1 (ja) * | 2009-07-31 | 2011-02-03 | 株式会社ニコン | 細胞塊の成熟判定手法、この手法を用いた画像処理プログラム及び画像処理装置、並びに細胞塊の製造方法 |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105334191A (zh) * | 2014-07-25 | 2016-02-17 | 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 | 单个红细胞的血红蛋白浓度、体积修正方法及装置 |
US10385300B2 (en) | 2015-01-29 | 2019-08-20 | Olympus Corporation | Cell analysis apparatus and method |
JP2016154450A (ja) * | 2015-02-23 | 2016-09-01 | 大日本印刷株式会社 | 培養液の培養状態解析システム及び培養状態解析方法、並びに、プログラム |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP2811033B1 (en) | 2019-10-09 |
EP2811033A4 (en) | 2015-09-16 |
WO2013114816A1 (ja) | 2013-08-08 |
EP2811033A1 (en) | 2014-12-10 |
US9535001B2 (en) | 2017-01-03 |
CN104080922B (zh) | 2017-07-21 |
JP5447546B2 (ja) | 2014-03-19 |
KR101691563B1 (ko) | 2016-12-30 |
CN104080922A (zh) | 2014-10-01 |
KR20140107653A (ko) | 2014-09-04 |
US20160025612A1 (en) | 2016-01-28 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP5447546B2 (ja) | 細胞計数方法、細胞計数装置、及び細胞計数プログラム | |
CN110033486B (zh) | 透明晶体生长过程边缘及体积实时监测方法及系统 | |
JP2017077414A5 (ja) | ||
US10494598B2 (en) | Observation image capturing and evaluation device, method, and program | |
US11066635B2 (en) | Method of culturing cells | |
Scott et al. | Identifying and recording key morphological (nonmetric) crown and root traits | |
US20160161464A1 (en) | Stem cell differentiation determination device, method, and program | |
WO2015193951A1 (ja) | 観察装置、観察方法、観察システム、そのプログラム、および細胞の製造方法 | |
CN115273077B (zh) | 细胞模型构建方法、计算机设备及存储介质 | |
JP2018520710A5 (ja) | ||
Zhang et al. | Efficient characterization of tetraploid watermelon | |
JP2013039113A (ja) | 細胞品質管理方法及び細胞の生産方法 | |
EP3009842A3 (en) | Method for supporting diagnosis of risk of colorectal cancer recurrence, program and computer system | |
CN102573641A (zh) | 图像处理装置及图像处理方法 | |
US20190078047A1 (en) | Cell culture apparatus | |
CN102911852B (zh) | 克隆菌株自动筛选装置及方法 | |
Chang et al. | Temporal distinction between male and female floral organ development in Nicotiana tabacum cv. Xanthi (Solanaceae) | |
JP2018108064A5 (ja) | ||
Bai et al. | Study on the Impact Damage Characteristics of Transplanting Seedlings Based on Pressure Distribution Measurement System | |
JP2023015674A (ja) | 細胞塊の内部予測方法、プログラム、及び、画像処理装置 | |
TW201018882A (en) | System and method for correcting an image | |
JP2021036830A5 (ja) | ||
TWI754945B (zh) | 利用光動力學技術之人工智慧的細胞檢測方法及其系統 | |
Montag | Embryo Culture and Assessment via Time-Lapse Microscopy in the IVF laboratory | |
Liu et al. | Cabbage (Brassica oleracea var. capitata) Development in Time: How Differential Parenchyma Tissue Growth Affects Leafy Head Formation |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20130802 |
|
A871 | Explanation of circumstances concerning accelerated examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A871 Effective date: 20130802 |
|
A975 | Report on accelerated examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971005 Effective date: 20130820 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20130827 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20131023 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20131203 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20131216 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 5447546 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |