JP2013139442A - 組織を含む生物物質の流体潅流システム - Google Patents
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Abstract
【解決手段】組織を含む生物物質の流体潅流システム。該システムは、生物物質を貯蔵する貯蔵容器200と、貯蔵容器200の内容物を冷却する温度制御デバイス400と、保存ガスを発生させるガス発生器と、保存ガスを生物物質に供給するためにガス発生器に連通し組織に挿入可能である流体管550と、ガス発生器および温度制御デバイスの稼働を制御するプロセスコントローラ300とを備えていてもよい。該ガス発生器はさらに、電気化学的酸素濃縮器および/または保存ガスを発生させる水電解槽を備えていてもよい。該システムはさらに、液体潅流液の槽と、槽から生物物質に液体潅流液を供給する流体供給管と、生物物質から液体潅流液を排出する流体排出管とを含む液体潅流システムを備えていてもよい。
【選択図】図1
Description
本願は、2010年6月18日に出願された発明者Tempelmanらによる米国特許出願第12/803,083号の一部継続出願であり、合衆国法典第35巻第119条(e)項の下で2009年6月18日に出願された米国仮特許出願第61/268,973号の利益を主張するものであり、両出願の開示は参照により本明細書に援用される。
米国政府は、本発明における支払い済みのライセンスと、米国国立衛生研究所によって授与された米国中小企業技術革新研究プログラム第1期契約番号R43DK070400、R43DK070400−02S1、およびR44DK070400の条件によって規定されるような合理的な条件で特許権者が他者にライセンスを与えることを必要とする限定された状況における権利とを有する。
前述のシステムの別の特徴によると、ガス発生器は気体酸素を発生させる電気化学的手段を備えていてもよい。
前述のシステムのさらなる特徴によると、気体酸素を発生させる電気化学的手段は電気化学的酸素濃縮器を備えていてもよい。
前述のシステムのさらなる特徴によると、保存ガスはさらに水蒸気を含んでもよい。
前述のシステムのさらなる特徴によると、ガス発生器は保存ガスにおける気体酸素の濃度を調整する手段を備えていてもよい。
前述のシステムのさらなる特徴によると、保存ガスは気体酸素からなっていてもよい。
前述のシステムのさらなる特徴によると、ガス発生器は保存ガスを含むガス流を出力する少なくとも1つの出口を備えていてもよい。
前述のシステムのさらなる特徴によると、ガス発生器は保存ガスを含む対応する複数のガス流を出力する複数の出口を備えていてもよい。
前述のシステムのさらなる特徴によると、ガス流は、独立して調整可能な流量を有していてもよい。
前述のシステムのさらなる特徴によると、システムは、組織を含む生物物質を受容するのに適した寸法に形成された容器をさらに備えていてもよい。
前述のシステムのさらなる特徴によると、容器は断熱された容器であってもよい。
前述のシステムのさらなる特徴によると、システムはさらに前記容器の内容物を所望温度に維持する温度制御手段を備えていてもよい。
前述のシステムのさらなる特徴によると、温度制御手段は前記容器内の温度を感知する温度センサーと、前記容器内の温度を変更する温度制御デバイスと、前記温度センサーに応答して前記温度制御デバイスの稼働を制御するプロセスコントローラとを備えていてもよい。
前述のシステムのさらなる特徴によると、液体潅流システムは、液体潅流液の槽と、槽から組織を含む生物物質に液体潅流液を供給する流体供給管と、組織を含む生物物質を潅流した液体潅流液を排出する流体排出管とを備えていてもよい。
前述のシステムのさらなる特徴によると、システムはさらに大量の液体を備えていてもよく、この中で、保存ガスは、流体管によって組織に供給されるガス/液体溶液を形成するよう、液体中に溶解している。
前述のシステムのさらなる特徴によると、液体は液体細胞培地と、臓器保存溶液と、塩類溶液と、HEPES緩衝液と、これらの組み合わせからなる群から選択されてもよい。
前述のシステムのさらなる特徴によると、液体はさらに、抗酸化物質と、抗アポトーシス剤と、血管拡張剤/血管収縮剤と、酸素担体と、キレート剤と、毒素結合剤と、抗凝固剤からなる群から選択される添加物を含んでもよい。
前述のシステムの一特徴によると、保存ガスは気体酸素を含んでもよい。
前述のシステムの別の特徴によると、ガス発生器は気体酸素を発生させる手段を備えていてもよい。
前述のシステムのさらなる特徴によると、気体酸素発生手段は気体酸素を発生させる電気化学的手段を備えていてもよい。
前述のシステムのさらなる特徴によると、気体酸素を発生させる電気化学的手段は電気化学的酸素濃縮器を備えていてもよい。
前述のシステムのさらなる特徴によると、システムはさらに、流体管を通して組織に搬送されるガス/ガス混合物を形成するよう前記保存ガスを希釈する手段を備えていてもよい。
前述のシステムのさらなる特徴によると、液体潅流システムは、液体潅流液の槽と、槽から組織を含む生物物質に液体潅流液を供給する流体供給管と、組織を含む生物物質を潅流した液体潅流液を排出する流体排出管とを備えていてもよい。
前述のシステムのさらなる特徴によると、システムはさらに、ガス発生器もしくは槽を出る流体または容器に入るもしくは容器を出る流体、のうちの少なくとも1つにおけるガス濃度を監視する少なくとも1つのガスセンサーを備えていてもよい。
前述のシステムの特徴によると、少なくとも1つのガス流は複数のガス流を含んでもよく、前記複数のガス流は、独立して調整可能な流量を有していてもよい。
前述のシステムの別の特徴によると、システムはさらにガス発生器の稼働を制御する手段を備えていてもよい。
前述のシステムのさらなる特徴によると、システムはさらに流体潅流システムを備えていてもよい。
前述のシステムの特徴によると、システムはさらに、生体内原位置で発生した保存ガスを流体で希釈する手段を備えていてもよく、この中で、前記潅流する手段は、希釈された生体内原位置で発生した保存ガスを用いて組織を潅流することを含む。
アノード:2H2O←→4H++4e−+O2(純粋) [1]
カソード:O2(空気)+4H++4e−←→2H2O [2]
正 味:カソードにおけるO2(空気)←→アノードにおけるO2(純粋)[3]
(実施例)
実施例1:
電気化学的酸素発生による改良された膵島気体潅流酸素化法の実例による説明
膵島分離に及ぼす気体潅流の影響は、5つの臓器の各々を3つの葉に分割し、膵頭部を即時分離のために採取し、膵尾部を気体潅流で6時間保存し、膵体部をTLMで6時間保存することによって試験された。一実験では、保存が24時間まで延長された。気体潅流システムでは、40cm2の活発に触媒される面積を有しかつセパレータ107および水浸透気化膜115としてNAFION(登録商標)NRE−112膜を採用するEOCを利用した。アノード103およびカソード105では、それぞれが4mg/cm2負荷量の白金−イリジウム黒触媒および白金黒触媒を有するセパレータ107に適用される溶射インクデカールを含んでいた。いずれも21℃において、EOC槽に脱イオン水を、カソードに空気を300cm3で供給した場合、このEOCの性能は、8A(200mA/cm2)で0.84Vであり、12A(300mA/cm2)で0.93Vであった。気体潅流システムはさらに図2に示すように構成された。単一膵葉の気体潅流は、15〜22cm3の40%酸素および約20mmHgの圧力を使用して行われ、これには0.94〜1.4AのEOC電流を必要とした。各臓器をその葉に分離する方法は、ドナーのばらつきを排除することによって保存方法の対応のある比較ができるように選定された。5つの臓器の個数が少なかったので、各条件に対して使用される葉を(無作為化するよりもむしろ)標準化することにした。
表1.分離後0日後の膵島の形態学スコア
0日後の形態学スコア
ブタ膵臓ID 保存時間 t=0 PSF TLM
――――――――――――――――――――――――――
P647 6時間 3.0 2.0
P648 6時間 7.0 7.5 7.0
P649 6時間 5.0 7.5 6.0
P650 24時間 6.0 6.0 4.0
P656 6時間 6.0 9.0 7.0
―――――――――――――――――――――――――――
平均 6.0 6.6 5.2
標準偏差 0.82 2.3 2.2
対応のあるt検定による比較 0.134|0.0086
ブタ膵臓およびヒト膵臓に関する電気化学的酸素濃縮器(EOC)を用いた
追加的な気体潅流実験
これらの実験では、膵島分離が含まれており、保存されていない葉(対照)からの結果を、二層法(TLM)を使用してまたは気体潅流によって24時間保存された葉からの結果と比較した。その結果、分離に使用されたブタ膵臓の数は7個であり、そのうちの4個を6時間保存の評価に使用し、残りの3個を24時間保存の評価に使用した。ブタ膵臓で実施した実験に加えて、本発明者らは研究等級のヒト膵臓を入手することができ、この膵臓は気体潅流技術を試験するために利用した。いくつかの重要な発見は以下の通りである。すなわち、(1)電気化学的に発生した酸素を用いた気体潅流での24時間保存では、TLMでの24時間貯蔵と比べて優れた結果が得られ(図11および12参照)、(2)ヒト膵臓の気体潅流は実現可能であり、ブタ膵臓の気体潅流ほど外科的に複雑ではない。加えて、ヒト膵臓の気体潅流は、膵臓を2分割すると膵臓の一部分で達成されることができる。この実証は、今後の研究において同じ臓器を使って、気体潅流保存とTLMの間、または気体潅流保存と保存なしの間の直接的な対応のある比較が可能となるので重要である。
103 アノード
105 カソード
143 大気
200 容器
203 酸素センサー
205 温度センサー
300 プロセスコントローラ
400 温度制御デバイス
500 電源
550 流体管
1100 気体潅流システム
1200 容器
1203 酸素センサー
1205 温度センサー
1207 二酸化炭素センサー
1300 プロセスコントローラ
1400 温度制御デバイス
1500 電源
1600 液体潅流システム
1700 切換システム
Claims (14)
- 組織を含む生物物質の流体潅流システムであって、
(a)保存ガスを製造するガス発生器と、
(b)大量の液体潅流液を備える液体潅流システムと、
(c)前記ガス発生器におよび/または前記液体潅流システムに連結されるのに適合し、かつ前記保存ガスおよび前記液体潅流液の一方または両方を組織に供給するために前記組織に挿入可能である、流体供給管と、
を備える流体潅流システム。 - 前記保存ガスは気体酸素を含む、請求項1に記載の流体潅流システム。
- 前記ガス発生器は気体酸素を発生させる電気化学的手段を備える、請求項2に記載の流体潅流システム。
- 気体酸素を発生させる前記電気化学的手段は電気化学的酸素濃縮器を備える、請求項3に記載の流体潅流システム。
- 前記保存ガスはさらに水蒸気を含む、請求項2に記載の流体潅流システム。
- 前記ガス発生器は前記保存ガスにおける気体酸素の濃度を調整する手段を備える、請求項2に記載の流体潅流システム。
- 前記保存ガスは気体酸素からなる、請求項1に記載の流体潅流システム。
- 組織を含む前記生物物質を受容するのに適した寸法に形成された容器をさらに備える、請求項1に記載の流体潅流システム。
- 前記容器は断熱された容器である、請求項8に記載の流体潅流システム。
- 前記容器の内容物を所望温度に維持する温度制御手段をさらに備える、請求項9に記載の流体潅流システム。
- 前記温度制御手段は、前記容器内の温度を感知する温度センサーと、前記容器内の前記温度を変更する温度制御デバイスと、前記温度センサーに応答して該温度制御デバイスの稼働を制御するプロセスコントローラとを備える、請求項10に記載の流体潅流システム。
- いかなる保存ガスおよび/または組織を含む前記生物物質を潅流した液体潅流液も排出する流体排出管をさらに備える、請求項1に記載の流体潅流システム。
- 前記液体潅流液は液体細胞培地と、臓器保存溶液と、塩類溶液と、HEPES緩衝液と、これらの組み合わせからなる群から選択される、請求項1に記載の流体潅流システム。
- 前記液体潅流液は、さらに、抗酸化物質と、抗アポトーシス剤と、血管拡張剤/血管収縮剤と、酸素担体と、キレート剤と、毒素結合剤と、抗凝固剤とからなる群から選択される添加物を含む、請求項13に記載の流体潅流システム。
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