JP2013015537A - アミノ官能性化合物の分析方法及び分析試薬 - Google Patents
アミノ官能性化合物の分析方法及び分析試薬 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2013015537A JP2013015537A JP2012216013A JP2012216013A JP2013015537A JP 2013015537 A JP2013015537 A JP 2013015537A JP 2012216013 A JP2012216013 A JP 2012216013A JP 2012216013 A JP2012216013 A JP 2012216013A JP 2013015537 A JP2013015537 A JP 2013015537A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- group
- carbamate
- compound
- analysis
- reagent
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/58—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
- C07D207/46—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with hetero atoms directly attached to the ring nitrogen atom
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6803—General methods of protein analysis not limited to specific proteins or families of proteins
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6803—General methods of protein analysis not limited to specific proteins or families of proteins
- G01N33/6806—Determination of free amino acids
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6803—General methods of protein analysis not limited to specific proteins or families of proteins
- G01N33/6848—Methods of protein analysis involving mass spectrometry
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2458/00—Labels used in chemical analysis of biological material
- G01N2458/15—Non-radioactive isotope labels, e.g. for detection by mass spectrometry
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2560/00—Chemical aspects of mass spectrometric analysis of biological material
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10T436/13—Tracers or tags
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10T436/14—Heterocyclic carbon compound [i.e., O, S, N, Se, Te, as only ring hetero atom]
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10T436/14—Heterocyclic carbon compound [i.e., O, S, N, Se, Te, as only ring hetero atom]
- Y10T436/145555—Hetero-N
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10T436/24—Nuclear magnetic resonance, electron spin resonance or other spin effects or mass spectrometry
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Bioinformatics & Computational Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Spectroscopy & Molecular Physics (AREA)
- Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
- Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
- Pyrrole Compounds (AREA)
Abstract
【解決手段】アミノ官能性化合物を含む試料中のアミノ官能性化合物を、p−トリメチルアンモニウムアニリル−N−ヒドロキシスクシンイミジルカルバメートアイオダイド等の特定カルバメート化合物でアミノ官能性化合物を標識して選択性を高め、簡便かつ高感度に分析する。特に、MS/MS法等、質量分析法により目的化合物を定量的に分析することができる。更に、このために使用する質量分析用の標識試薬やこの標識試薬に使用することができる新規化合物。
【選択図】図1
Description
フェニル基、ナフチル基(1−及び2−ナフチル基)、アントリル基(1−、2−及び5−アントリル基)、ピリジル基(2−、3−及び4−ピリジル基)、ピラジル基、キノリル基(3−、6−及び8−キノリル基)、9−アクリジル基、6−クマリル基、p−ジアルキルアミノフェニル基、p−トリアルキルアンモニウムフェニル基、1−(3−トリアルキルアンモニウム)ナフチル基、1−(5−トリアルキルアンモニウム)ナフチル基、1−(3−ジアルキルアミノ)ナフチル基、1−(5−ジアルキルアミノ)ナフチル基、p−スルホフェニル基、1−(3−スルホ)ナフチル基、1−(5−スルホ)ナフチル基、p−ホスホフェニル基、1−(3−ホスホ)ナフチル基、1−(5−ホスホ)ナフチル基、p−グアニジノフェニル基、1−(3−グアニジノ)ナフチル基、1−(5−グアニジノ)ナフチル基等。
p−ジメチルアミノアニリル−N−ヒドロキシスクシンイミジルカルバメート;
3−アミノピリジル−N−ヒドロキシスクシンイミジルカルバメート;
p−トリメチルアンモニウムアニリル−N−ヒドロキシスクシンイミジルカルバメートアイオダイド;及び
アミノピラジル−N−ヒドロキシスクシンイミジルカルバメート。
本発明における分析方法においては質量分析が使用されるが、その原理等について先ず説明する。
本発明において使用する質量分析法には特に制限は無いが、より好ましい例として幾つか紹介する。
プリカーサーイオンスキャン分析では、第一のマスアナライザー(Q1等)は指定された質量範囲に従ってスキャンされ、この範囲のイオンは、例えばQ2でのCIDにより解離する。このとき第二のマスアナライザー(Q3等)は、特定のフラグメントイオン(例えば、TAHSの場合m/z =177)を選択するように設定する。得られるスペクトルには特定のフラグメントイオンを生成するプリカーサーイオン(親イオン)だけが記録される。
SRM分析では、対象となるイオンを第一のマスアナライザー(Q1等)で選択し、このイオンを衝突セルの中で解離させ、第二のマスアナライザー(Q3等)で特定のフラグメントイオン(例えば、TAHSの場合m/z =177)を選択してモニタリングする。この方法により、定量対象化合物と同一の保持時間でかつプリカーサーイオンと同一の質量を有する夾雑成分が存在しても、夾雑成分が定量対象化合物のフラグメントイオンを生じない限り、その影響を排除できるので、感度・選択性が飛躍的に向上する。
コンスタントニュートラルスキャン分析では、第一のマスアナライザー(Q1等)は指定された質量範囲に従ってスキャンされ、この範囲のイオンは、例えばQ2でのCIDにより解離する。このとき第二のマスアナライザー(Q3等)は、特定のニュートラルフラグメント(例えば、1−ナフチルアミノ−N−ヒドロキシスクシンイミジルカルバメートの場合 m/z =170)を選択するように設定する。得られるスペクトルにはある特定の中性分子が脱離する全てのプリカーサーイオン(親イオン)を検出するスキャン法を採用する。
次に、本発明に関し、一般的な実施方法について説明する。試料中のアミノ官能性化合物としてアミノ酸混合溶液を用いた。
b) Columun:Develosil C30 UG 5μm 4.6mmI.D×250mm;
c) 検出器:質量分析装置 Sciex API365;及び
d) 移動相
移動相A:0.2% AcOH
移動相B:0.2% AcOH in CH3CN
勾配:0min:0% → 20min:30%;及び
e)温度:40℃。
目的とする標識試薬については、従来法(例えば、Iwaki, K., Yoshida, S., Nimura, N., Kinoshita, T., Takeda, K., and Ogura, H., Chromatographia 23 899 (1987)等参照。)により、容易に調製することができる。例えば、下記一般式(1):
本発明によればアミノ官能性化合物、特にアミノ酸の短時間分析を行うことができる。p−トリメチルアンモニウムアニリル−N−ヒドロキシスクシンイミジルカルバメートアイオダイド(TAHS)等の標識試薬を用いることで短時間分析が可能となる。この結果、分析時間を大幅に短縮できるので処理能力が改善する。例えば、従来のAQC試薬を用いたアミノ酸分析では35分程度の分析時間を有しており(AccQ・TagTMアミノ酸分析法(Waters))、本発明による分析時間は短くなる。
本発明方法においては、アミノ官能性化合物の同位体を測定することができ、その結果アミノ官能性化合物の同位体比率を高感度で補正計算せずに求めることができる。
天然とは異なる同位体組成を利用した分析方法は古くから用いられている。例えば、13C、2H(D)、15N、18O等の天然存在比の低い安定同位体、或いは放射性同位体を含む基質を生体に導入することで基質の生体内における分布や変化を知ることは医学や、薬学のみならず様々な研究分野で用いられている。同位体を高感度に定量的に評価することができれば、同位体原子の挙動をトレースすることが可能となり、更なる情報の獲得につながる。しかしながら、アミノ官能性化合物を直接的に質量分析計で測定するには、感度面が問題となっている。一方、標識試薬で誘導化したアミノ官能性化合物の同位体比率を質量分析計で高感度に分析するためには、アミノ官能性化合物以外の骨格部分の天然同位体分布を考慮する必要があり、分析結果を補正し目的化合物の同位体比を算出する必要があった。
特に、アミノ官能性化合物のアミノ基と試薬骨格のカルボニル基の位置で規則的に開裂することが重要であることに着目して、タンデム質量分析計において、アミノ官能性化合物と試薬骨格由来の結合位で規則的な開裂を起こし、フラグメントイオンを得ることにより、試薬骨格に相当する部位の天然同位体分布の補正無しに、目的のアミノ官能性化合物の同位体比率を求めることが可能である。また、例えば、三連四重極型の質量分析装置を用いると、広いダイナミックレンジにある同位体比の高感度分析が可能になる。
この発明においてはタンデム質量分析法のうち、Selected Reaction Monitoring法を採用する。但し、同位体という1マスユニット差の化合物の定量を行うために、1マスユニットが識別可能な分解能で測定を行うことができる。
本発明の標識試薬を用いると、
(1)標識化されるものは一級及び二級アミノ官能性化合物である。
(2)精密質量から組成式を求めることができる。
(3)(1)及び(2)の情報から未知化合物の構造絞込みが容易となる。
紫外吸収或いは蛍光を有する試薬で誘導化し、分析を行った際に現われた未知のピークについては誘導化に用いた試薬との反応性から化合物の官能基の推定程度しか行うことができなかった。また、NMRを用いる場合には感度面から微量の化合物の解析は困難であることが多い。
サンプル中から特異的なピーク或いは目的のピークを見出し、その特異的或いは目的のピークに該当する化合物の同定或いはその構造の推定を行う。
本発明においては、前記本発明の分析方法を利用して、標識試薬のうち、試薬内の原子の一部或いは全部が天然とは異なる同位体組成を有する化合物を用いることにより複数試料(サンプル)を同時に測定することができる。
複数の試料(サンプル)中のアミノ官能性化合物を分析する際には、サンプルの数の回数分析を行うことが必要となる。このような場合には、測定間誤差、即ち精度が問題となる。特に、質量分析計を検出器として用いた場合、試料ごとにイオン化効率が異なることが広く知られており、サンプル間の化合物量を比較する場合、内部標準物質による補正が必須であった。
次の手順に従ってp−ジメチルアミノアニリル−N−ヒドロキシスクシンイミジルカルバメートを合成した。アセトニトリル{純正化学株式会社}25ミリリットル中にN,N−ジメチルアミノ−p−フェニレンジアミン{和光純薬工業株式会社}535mg(5ミリモル)を溶解させ、滴下漏斗に入れた。炭酸N,N’−ジスクシンイミジル(DSC){和光純薬工業株式会社}1.28g(5ミリモル)をアセトニトリル50ミリリットル中に溶解させ、攪拌した。この溶液に、N,N−ジメチルアミノ−p−フェニレンジアミン溶液を2時間かけて滴下した。滴下が完了した後に、更に22時間攪拌し、反応混合物からアセトニトリルを留去した。5ミリリットルのアセトニトリルに溶解させ、析出物を濾取した。収量は597mg(収率48%)であった。
QTOFMS:m/z 278[M+H]+、Molecular formula:C13H16N3O4(高分解能QTOFMS;m/z 278.1141,[M+H]+,Δ−4.4ppm)。
次の手順に従って、p−トリメチルアンモニウムアニリル−N−ヒドロキシスクシンイミジルカルバメートアイオダイドを合成した。アセトニトリル8mL、ジクロロメタン{純正化学株式会社}2mLの混合溶媒中に、p−ジメチルアミノアニリル−N−ヒドロキシスクシンイミジルカルバメート264mg(1.1ミリモル)を溶解させ、攪拌した。この溶液にヨウ化メチル{ナカライテスク株式会社}0.4mL(8当量)添加し、23時間攪拌し、析出物を濾取した。収量:354mg(収率76%)。
QTOFMS:m/z 292[M]+、Molecular formula:C14H18N3O4(高分解能QTOFMS;m/z 292.1297,[M]+,Δ−2.9ppm)。
次の手順に従って、2−アミノピリジルカルバメートを合成した。アセトニトリル25ミリリットル中に3−アミノピリジン{和光純薬工業株式会社}470mg(5ミリモル)を溶解させ、滴下漏斗に入れた。炭酸N,N’−ジスクシンイミジル(DSC)1.28g(5ミリモル)をアセトニトリル50ミリリットル中に溶解させ、攪拌した。この溶液に、3−アミノピリジン溶液を2時間かけて滴下した。滴下が完了した後に、更に21時間攪拌し、反応混合物からアセトニトリルを留去した。得られた、非結晶性固体の112mgを2ミリリットルのジエチルエーテル{純正化学株式会社}に溶解させ、12時間、冷暗所に放置し、析出物を濾取した。収量:32mg(収率29%)。
QTOFMS:m/z 236[M+H]+、Molecular formula:C10H9N3O4(高分解能QTOFMS;m/z 236.0671,[M+H]+,Δ−1.5ppm)。
次の手順に従って、1−ナフチルアミノ−N−ヒドロキシスクシンイミジルカルバメート[N. Nimura, K. Iwaki, T. Kinoshita, K. Takeda and H. Ogura , Anal. Chem., 58 (1986) 2372参照。]を合成した。アセトニトリル25ミリリットル中に1−ナフチルアミン{ICN}715mg(5ミリモル)を溶解させ、滴下漏斗に入れた。炭酸N,N’−ジスクシンイミジル(DSC)1.28g(5ミリモル)をアセトニトリル50ミリリットル中に溶解させ、攪拌した。この溶液に、1−ナフチルアミン溶液を2時間かけて滴下した。滴下が完了した後に、更に18時間攪拌し、反応混合物からアセトニトリルを留去し目的の化合物558mg(収率28%)を得た。
次の手順に従ってPAHS [N. Nimura, K. Iwaki, T. Kinoshita, K. Takeda and H. Ogura , Anal. Chem., 58 (1986) 2372参照。]を合成した。アセトニトリル25ミリリットル中にアニリン{和光純薬}467mg(5ミリモル)を溶解させ、滴下漏斗に入れた。炭酸N,N’−ジスクシンイミジル(DSC)1.28g(5ミリモル)をアセトニトリル50ミリリットル中に溶解させ、攪拌した。この溶液にアニリン溶液を2時間かけて滴下した。滴下が完了した後に、更に23時間攪拌し、反応混合物からアセトニトリルを留去し、目的の化合物を混合物として得た。
アミノ官能性化合物の標識は、芳香族カルバメートの極性の違いにより、以下の二つの方法(反応条件)を用いた。
b)Columun:Develosil C30 UG 5μm 4.6mmI.D×250mm;
c)検出器:質量分析装置 Sciex API365;
d)移動相;
移動相A:0.2% AcOH
移動相B:0.2% AcOH in CH3CN;及び
e)温度:40℃。
p−トリメチルアンモニウムアニリル−N−ヒドロキシスクシンイミジルカルバメートアイオダイド(TAHS)により、前記例6に記載した(1)の反応条件によって調製した標識アミノ酸を逆相カラムによりHPLC分離し、Selected Reaction Monitoringにおいて検出した。
SRMモードによる測定は、第一のマスアナライザー(Q1)で指定アミノ酸の標識体である質量(アミノ酸+標識化試薬−HOSu)を選択し、第二のマスアナライザー(Q3)では試薬由来のフラグメントイオンm/z=177を選択し検出する。(HOSuはN−ヒドロキシスクシンイミドを意味する。)
但し、Arg, His, Lys, CysにおいてはQ1で標識アミノ酸の2価イオンを選択する。
p−トリメチルアンモニウムアニリル−N−ヒドロキシスクシンイミジルカルバメートアイオダイド(TAHS)により、前記例6に記載した(1)の反応条件によって調製した標識アミノ酸を逆相カラムによりHPLC分離し、Precursor Ion Scan において検出した。
Precursor Ion Scanモードによる測定は、第一のマスアナライザー(Q1)ではm/z =100〜600の質量範囲を設定した。第二のマスアナライザー(Q3)では試薬由来のフラグメントイオンm/z =177を設定した。分析した結果を図2に示す。
p−ジメチルアミノアニリル−N−ヒドロキシスクシンイミジルカルバメート(DAHS)により、前記例6に記載した(2)の反応条件によって調製した標識アミノ酸を逆相カラムによりHPLC分離し、Selected Reaction Monitoringにおいて検出した。
質量分析装置の設定方法については前記例7と同様であるが、試薬由来のフラグメントイオンを検出するQ3はm/z=163を設定した。
但し、Arg, His, Lys, CysにおいてはQ1で標識アミノ酸の2価イオンを選択する。
3−アミノピリジルカルバメート(APDS)により、前記例6に記載した(1)の反応条件によって調製した標識アミノ酸を逆相カラムによりHPLC分離し、Selected Reaction Monitoringにおいて検出した。
質量分析装置の設定方法については、前記例7と同様であるが、試薬由来のフラグメントイオンを検出するQ3はm/z=121を設定した。
但し、Lys,CysにおいてはQ1で標識アミノ酸の2価イオンを選択する。
6−アミノキノリル−N−ヒドロキシスクシンイミジルカルバメート(AQC)により、前記例6に記載した(1)の反応条件によって調製した標識アミノ酸を逆相カラムによりHPLC分離し、Selected Reaction Monitoringにおいて検出した。
HPLC分離の勾配条件は、移動相B 0min 0%→20min 30%を用いた。
但し、Arg, His, Lys, CysにおいてはQ1で標識アミノ酸の2価イオンを選択する。
1−ナフチルアミノ−N−ヒドロキシスクシンイミジルカルバメート(NAHS)により、前記例6に記載した(2)の反応条件によって調製した標識アミノ酸を逆相カラムによりHPLC分離し、Constant neutral loss Scan において検出した。
PAHSにより、前記例6に記載した(2)の反応条件によって調製した標識アミノ酸を逆相カラムによりHPLC分離し、Constant neutral loss Scan において検出した。
Constant neutral loss Scanモードは、第一マスアナライザー(Q1 )では、m/z =150〜400の質量範囲を設定した。第二マスアナライザー(Q3)は、試薬骨格に相当する質量119をニュートラルロスとして設定し、m/z =150〜400の質量範囲をスキャンした。分析の結果を図7に示す。
p−トリメチルアンモニウムアニリル−N−ヒドロキシスクシンイミジルカルバメートアイオダイド(TAHS)により、前記例6に記載した(1)の反応条件によって調製した標識アミノ酸を逆相カラムによりHPLC分離し、Selected Reaction Monitoringにおいて検出した。
分離用カラムには野村化学Develosil C30−UG(粒子径3μm、4.6I.D×30mm)を用い、HPLC分離の勾配条件には、移動相B 0min→3min = 0%→56%を用いた。
SRMモードによる測定は、第一のマスアナライザー(Q1)で指定アミノ酸の標識体である質量(アミノ酸+標識化試薬−HOSu)を選択し、第二のマスアナライザー(Q3)では試薬由来のフラグメントイオンm/z=177を設定した。
但し、Arg、Lys、及びCysにおいてはQ1で標識アミノ酸の2価イオンを選択する。
結果を図8に示す。
20種類のアミノ酸が3min(洗浄・平衡化時間を含めて8min/cycle)で分析を終了させることができた。
尚、Ile/Leuは識別できなかった。
Selected Reaction Monitoring法でのアミノ酸の検出限界を下記の通り測定した。
6−アミノキノリル−N−ヒドロキシスクシンイミジルカルバメート(AQC){ウォーターズ}により、前記例6に記載した(1)の反応条件によって調製した標識アミノ酸を逆相カラムによりHPLC分離し、Selected Reaction Monitoringにおいて検出した。
SRMモードによる測定は、第一のマスアナライザー(Q1)で指定アミノ酸の標識体である質量(アミノ酸+標識化試薬−HOSu)を選択し、第二のマスアナライザー(Q3)では試薬由来のフラグメントイオンm/z=171.1を選択し検出する。(HOSu: N−ヒドロキシスクシンイミド)
Q1:m/z=302.2(m、13Cが0個)/Q3:m/z=171.1
Q1:m/z=303.2(m+1、13Cが1個)/Q3:m/z=171.1
Q1:m/z=304.2(m+2、13Cが2個)/Q3:m/z=171.1
Q1:m/z=305.2(m+3、13Cが3個)/Q3:m/z=171.1
Q1:m/z=306.2(m+4、13Cが4個)/Q3:m/z=171.1
Q1:m/z=307.2(m+5、13Cが5個)/Q3:m/z=171.1
Q1:m/z=308.2(m+6、13Cが6個)/Q3:m/z=171.1
を用いた。
結果を表2に示す。
フェニルアラニンが質量、フラグメントイオン、組成式が未知であると仮定して、以下の実験操作を行った。以下、標品として用いたフェニルアラニンを未知化合物と表記し、フェニルアラニンと同定するまでの工程を記す。
次の手順に従って、p−トリメチルアンモニウムアニリル−N−ヒドロキシスクシンイミジルカルバメートアイオダイド−d3を合成した。アセトニトリル8mL、ジクロロメタン{純正化学株式会社}2mLの混合溶媒中にp−ジメチルアミノアニリル−N−ヒドロキシスクシンイミジルカルバメート264mg(1.1ミリモル)を溶解させ、攪拌した。この溶液にヨウ化メチル−d3{日本酸素株式会社}0.4mL(8当量)添加し、50時間攪拌し、析出物を濾取した。
p−トリメチルアンモニウムアニリル−N−ヒドロキシスクシンイミジルカルバメートアイオダイド−d3(TAHS−d3)により、前記例6に記載した(1)の反応条件によって調製した標識アミノ酸(アミノ酸の濃度は5nmol/mL)及びp−トリメチルアンモニウムアニリル−N−ヒドロキシスクシンイミジルカルバメートアイオダイド(TAHS)により、前記例6に記載した(1)の反応条件によって調製した標識アミノ酸(アミノ酸の濃度は濃度は10nmol/mL)の反応液を混合したものを逆相カラムによりHPLC分離し、Selected Reaction Monitoringにおいて検出した。
SRMモードによる測定は、第一のマスアナライザー(Q1)で指定アミノ酸の標識体である質量(アミノ酸+標識化試薬−HOSu)を選択し、第二のマスアナライザー(Q3)では試薬由来のフラグメントイオンを選択し検出する。
TAHS−d3により標識されたPheはQ1:m/z=345/Q3:m/z=180
TAHSにより標識されたPheはQ1:m/z=342/Q3:m/z=177を用いた。
結果を図9に示す。
p−トリメチルアンモニウムアニリル−N−ヒドロキシスクシンイミジルカルバメートアイオダイド−d3(TAHS−d3)により、前記例6に記載した(1)の反応条件によって調製したサンプルA及びp−トリメチルアンモニウムアニリル−N−ヒドロキシスクシンイミジルカルバメートアイオダイド(TAHS)により、前記例6に記載した(1)の反応条件によって調製した試料(サンプル)Bの反応混合液の分析結果を、例えば、視覚的に代謝マップ上に表現した結果を図10に示す。
Claims (7)
- 当該極性置換基がスルホン酸基、グアニジル基、リン酸基、ジアルキルアミノ基、及びトリアルキルアンモニウム基から選択される請求項1記載の新規化合物。
- 当該ジアルキルアミノ基及びトリアルキルアンモニウム基のアルキル基はそれぞれ独立的に、炭素数1〜5のアルキル基を表す請求項2記載の新規化合物。
- 当該新規化合物が、p−ジメチルアミノアニリル−N−ヒドロキシスクシンイミジルカルバメート、p−トリメチルアンモニウムアニリル−N−ヒドロキシスクシンイミジルカルバメートアイオダイド及びアミノピラジル−N−ヒドロキシスクシンイミジルカルバメートである請求項1記載の新規化合物。
- 当該新規化合物において、構造中O=C−NH−Arに含まれる少なくとも一つの原子(但し、交換性の水素原子は除く。)に安定同位体元素を含むことを特徴とする請求項1〜4記載の新規化合物。
- 当該安定同位体が13C、2H(D)、15N、及び18Oから選択される請求項5記載の新規化合物。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2012216013A JP5842775B2 (ja) | 2002-02-14 | 2012-09-28 | アミノ官能性化合物の分析方法及び分析試薬 |
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2002036446 | 2002-02-14 | ||
JP2002036446 | 2002-02-14 | ||
JP2012216013A JP5842775B2 (ja) | 2002-02-14 | 2012-09-28 | アミノ官能性化合物の分析方法及び分析試薬 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2009269796A Division JP5136542B2 (ja) | 2002-02-14 | 2009-11-27 | アミノ官能性化合物の分析方法及び分析試薬 |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2015188056A Division JP6278210B2 (ja) | 2002-02-14 | 2015-09-25 | アミノ官能性化合物の分析方法及び分析試薬 |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2013015537A true JP2013015537A (ja) | 2013-01-24 |
JP2013015537A5 JP2013015537A5 (ja) | 2014-05-01 |
JP5842775B2 JP5842775B2 (ja) | 2016-01-13 |
Family
ID=27678084
Family Applications (6)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2003568398A Expired - Lifetime JP4453363B2 (ja) | 2002-02-14 | 2003-02-13 | アミノ官能性化合物の分析方法及び分析試薬 |
JP2009269796A Expired - Lifetime JP5136542B2 (ja) | 2002-02-14 | 2009-11-27 | アミノ官能性化合物の分析方法及び分析試薬 |
JP2012216013A Expired - Lifetime JP5842775B2 (ja) | 2002-02-14 | 2012-09-28 | アミノ官能性化合物の分析方法及び分析試薬 |
JP2015188056A Expired - Lifetime JP6278210B2 (ja) | 2002-02-14 | 2015-09-25 | アミノ官能性化合物の分析方法及び分析試薬 |
JP2017234081A Expired - Lifetime JP6699645B2 (ja) | 2002-02-14 | 2017-12-06 | アミノ官能性化合物の分析方法及び分析試薬 |
JP2020008872A Expired - Lifetime JP7055267B2 (ja) | 2002-02-14 | 2020-01-23 | アミノ官能性化合物の分析方法及び分析試薬 |
Family Applications Before (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2003568398A Expired - Lifetime JP4453363B2 (ja) | 2002-02-14 | 2003-02-13 | アミノ官能性化合物の分析方法及び分析試薬 |
JP2009269796A Expired - Lifetime JP5136542B2 (ja) | 2002-02-14 | 2009-11-27 | アミノ官能性化合物の分析方法及び分析試薬 |
Family Applications After (3)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2015188056A Expired - Lifetime JP6278210B2 (ja) | 2002-02-14 | 2015-09-25 | アミノ官能性化合物の分析方法及び分析試薬 |
JP2017234081A Expired - Lifetime JP6699645B2 (ja) | 2002-02-14 | 2017-12-06 | アミノ官能性化合物の分析方法及び分析試薬 |
JP2020008872A Expired - Lifetime JP7055267B2 (ja) | 2002-02-14 | 2020-01-23 | アミノ官能性化合物の分析方法及び分析試薬 |
Country Status (6)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US7148069B2 (ja) |
EP (3) | EP2336763A1 (ja) |
JP (6) | JP4453363B2 (ja) |
AU (1) | AU2003211941A1 (ja) |
CA (1) | CA2475011C (ja) |
WO (1) | WO2003069328A1 (ja) |
Families Citing this family (38)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2003069328A1 (fr) | 2002-02-14 | 2003-08-21 | Ajinomoto Co., Inc. | Procede d'analyse aminofonctionnelle et reactif analytique |
US20050014279A1 (en) * | 2003-07-14 | 2005-01-20 | Nguyen Hoa Duc | Method of analysis of amine by mass spectrometry |
WO2005050188A1 (ja) * | 2003-11-21 | 2005-06-02 | Eisai Co., Ltd. | 同位体標識化内部標準物質を用いる定量方法、該定量方法を実行する解析システムおよび該解析のためのプログラム |
US20080206737A1 (en) * | 2004-05-19 | 2008-08-28 | Hunter Christie L | Expression quantification using mass spectrometry |
US20070054345A1 (en) * | 2004-05-19 | 2007-03-08 | Hunter Christie L | Expression quantification using mass spectrometry |
EP1750126B1 (en) * | 2004-05-26 | 2015-09-16 | Ajinomoto Co., Inc. | Method and apparatus for analyzing aminofunctional compound |
US20070048752A1 (en) | 2004-07-12 | 2007-03-01 | Applera Corporation | Mass tags for quantitative analyses |
WO2006017208A1 (en) * | 2004-07-12 | 2006-02-16 | Applera Corporation | Mass tags for quantitative analyses |
US8969089B2 (en) | 2004-10-12 | 2015-03-03 | Quest Diagnostics Investments, Inc. | Analysis of amino acids in body fluid by liquid chromatography-mass spectrometry |
US20060183238A1 (en) | 2005-02-09 | 2006-08-17 | Applera Corporation | Amine-containing compound analysis methods |
JP2007163423A (ja) * | 2005-12-16 | 2007-06-28 | Ajinomoto Co Inc | 質量分析計によるアミノ酸分析方法 |
CN101379074A (zh) * | 2006-02-08 | 2009-03-04 | 日本电气株式会社 | 修饰肽的方法和鉴定肽的方法 |
CN101379402A (zh) * | 2006-02-08 | 2009-03-04 | 日本电气株式会社 | 一种裂解肽的c端肽键的方法和确定肽的c端氨基酸序列的方法 |
CA2691974C (en) * | 2007-06-29 | 2016-08-30 | Quest Diagnostics Investments Incorporated | Analysis of amino acids in body fluid by liquid chromatography-mass spectrometry |
JPWO2009054350A1 (ja) | 2007-10-25 | 2011-03-03 | 味の素株式会社 | 耐糖能異常の評価方法、耐糖能異常評価装置、耐糖能異常評価方法、耐糖能異常評価システム、耐糖能異常評価プログラムおよび記録媒体、ならびに耐糖能異常の予防・改善物質の探索方法 |
US20100285593A1 (en) * | 2007-11-26 | 2010-11-11 | Waters Technologies Corporation | Internal standards and methods for use in quantitatively measuring analytes in a sample |
WO2009100155A1 (en) * | 2008-02-04 | 2009-08-13 | Prozyme, Inc. | Compounds and methods for rapid labeling of n-glycans |
DE102009060102A1 (de) * | 2009-12-21 | 2011-06-22 | Martin-Luther-Universität Halle-Wittenberg, 06108 | Derivatisierungsreagenzien zur tandem-massenspektrometrischen Quantifizierung von Proteinen |
JP6072686B2 (ja) | 2011-07-21 | 2017-02-01 | 和光純薬工業株式会社 | 血漿中アミノ酸分析用標準液 |
CN108947885A (zh) | 2011-09-28 | 2018-12-07 | 沃特世科技公司 | 具有增强的ms信号的聚糖和其它生物分子的快速荧光标记 |
US10436790B2 (en) | 2011-09-28 | 2019-10-08 | Waters Technologies Corporation | Rapid fluorescence tagging of glycans and other biomolecules with enhanced MS signals |
US11352325B2 (en) | 2011-09-28 | 2022-06-07 | Waters Technologies Corporation | Rapid fluorescence tagging of glycans and other biomolecules with enhanced MS signals |
EP3557605B1 (en) | 2011-11-23 | 2021-07-14 | Quest Diagnostics Investments Incorporated | Kisspeptin-54 detection by tandem mass spectrometry |
EP4033223A1 (en) | 2014-10-30 | 2022-07-27 | Waters Technologies Corporation | Methods for the rapid preparation of labeled glycosylamines and for the analysis of glycosylated biomolecules producing the same |
EP3744708B1 (en) | 2014-11-13 | 2023-08-09 | Waters Technologies Corporation | Calibrant for liquid chromatography calibration of labeled n-glycans |
KR101627841B1 (ko) * | 2015-05-27 | 2016-06-07 | 다이아텍코리아 주식회사 | 싸이오크로멘 타입 화합물 및 그 용도 |
WO2016196311A1 (en) | 2015-05-29 | 2016-12-08 | Prozyme, Inc. | Compounds for labeling amine-containing compounds, and their use |
CN105548432A (zh) * | 2015-12-18 | 2016-05-04 | 乐普药业股份有限公司 | 一种比伐卢定中氨基酸的检测分析方法 |
CN109154604B (zh) | 2016-04-24 | 2023-07-21 | 沃特世科技公司 | 用于对用两亲强碱性部分改性的聚糖进行分析的带电表面反相色谱材料方法 |
CN109642906A (zh) | 2016-06-21 | 2019-04-16 | 沃特世科技公司 | 对用两亲强碱性部分改性的聚糖进行电喷雾电离的方法 |
CN109641846A (zh) | 2016-06-21 | 2019-04-16 | 沃特世科技公司 | 通过用于增强的ms信号的还原胺化的聚糖和其他生物分子的荧光标记 |
CN109690297A (zh) | 2016-07-01 | 2019-04-26 | 沃特世科技公司 | 使用分子量截留过滤和过滤器上去糖基化从复杂基质快速制备标记的葡基胺的方法 |
CN110023763A (zh) | 2016-10-03 | 2019-07-16 | 沃特世科技公司 | 可用于lc-ms分析的标记的聚糖氨基酸复合物及其制备方法 |
BR112020004444A2 (pt) * | 2017-09-08 | 2020-09-15 | F. Hoffmann-La Roche Ag | reagente à base de sulfóxido para espectrometria de massa |
JP7151723B2 (ja) | 2017-12-28 | 2022-10-12 | 味の素株式会社 | 給餌管理システムおよび給餌管理方法 |
KR20210064340A (ko) | 2018-09-26 | 2021-06-02 | 아지노모토 가부시키가이샤 | 경도 인지 장애의 평가 방법, 산출 방법, 평가 장치, 산출 장치, 평가 프로그램, 산출 프로그램, 기록 매체, 평가 시스템 및 단말 장치 |
CN114354801B (zh) * | 2021-12-31 | 2023-07-18 | 山东大学 | (R)-3-Boc-氨基哌啶中三种氨基吡啶异构体含量的分析方法 |
CN115925614B (zh) * | 2022-12-02 | 2024-03-08 | 中山大学 | 用于发现可与醛基反应的活性物质的小分子探针 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2000020870A1 (en) * | 1998-10-01 | 2000-04-13 | Brax Group Limited | Characterising polypeptides through cleavage and mass spectrometry |
JP2001151795A (ja) * | 1999-11-22 | 2001-06-05 | Sumitomo Chem Co Ltd | ペプチドのアミノ酸配列決定方法 |
WO2002008767A2 (en) * | 2000-07-25 | 2002-01-31 | The Procter & Gamble Company | Methods and kits for sequencing polypeptides |
Family Cites Families (24)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4003912A (en) * | 1973-06-11 | 1977-01-18 | Monsanto Company | Dicarboximido-N-phenylsubstituted carbamates and derivatives |
JPS5855754A (ja) | 1981-09-30 | 1983-04-02 | Hitachi Ltd | アミノ酸分析方法 |
JPS6444848A (en) | 1987-08-14 | 1989-02-17 | Hitachi Ltd | Analysis of amino acid |
US5296599A (en) * | 1991-09-19 | 1994-03-22 | Millipore Corporation | Activated carbamates compounds |
AU687109B2 (en) * | 1994-07-08 | 1998-02-19 | City Of Hope | N-terminal protein sequencing reagents and methods which form amino acid derivatives |
JP3346965B2 (ja) | 1995-09-14 | 2002-11-18 | 株式会社日立製作所 | アミノ酸分析装置 |
TW358097B (en) * | 1996-05-24 | 1999-05-11 | Hoffmann La Roche | Beta-lactams and their process and pharmaceutical compositions |
JP4085443B2 (ja) | 1997-05-07 | 2008-05-14 | 株式会社島津製作所 | アミノ酸の分析試薬及びアミノ酸の分析方法 |
US6379971B1 (en) * | 1998-02-24 | 2002-04-30 | Target Discovery, Inc. | Methods for sequencing proteins |
JP3345401B2 (ja) * | 1998-08-25 | 2002-11-18 | ユニバーシティ オブ ワシントン | 複合した混合物中のタンパク質またはタンパク質機能の迅速定量分析 |
US6629040B1 (en) * | 1999-03-19 | 2003-09-30 | University Of Washington | Isotope distribution encoded tags for protein identification |
US6677114B1 (en) * | 1999-04-20 | 2004-01-13 | Target Discovery, Inc. | Polypeptide fingerprinting methods and bioinformatics database system |
JP3341041B2 (ja) * | 2000-02-23 | 2002-11-05 | 独立行政法人産業技術総合研究所 | ペプチドのアミノ酸配列解析方法 |
AUPQ664300A0 (en) * | 2000-04-03 | 2000-05-04 | Proteome Systems Ltd | Macromolecule detection |
US6716634B1 (en) * | 2000-05-31 | 2004-04-06 | Agilent Technologies, Inc. | Increasing ionization efficiency in mass spectrometry |
JP4212353B2 (ja) * | 2000-07-11 | 2009-01-21 | 財団法人神奈川科学技術アカデミー | 液状試料の質量分析用プローブ |
JP3508710B2 (ja) | 2000-09-01 | 2004-03-22 | 株式会社日立製作所 | アミノ酸分析方法および装置 |
DE60117849T2 (de) * | 2000-10-23 | 2006-09-21 | Genetics Institute, LLC, Cambridge | Säureempfindliches isotop-codiertes extrahiermittel (alice) in massenspectrometrieanalyse |
JP4141834B2 (ja) * | 2000-10-23 | 2008-08-27 | ジェネティックス インスティテュート エルエルシー | マトリックス支援レーザー脱離イオン化マススペクトロメトリーを使用したハイスループットなタンパク質の同定及び定量のための同位体コードイオン化増強試薬(icier) |
US20030045552A1 (en) * | 2000-12-27 | 2003-03-06 | Robarge Michael J. | Isoindole-imide compounds, compositions, and uses thereof |
US6818454B2 (en) * | 2001-02-16 | 2004-11-16 | Battelle Memorial Institute | Phosphoprotein binding agents and methods of their use |
JP3464665B2 (ja) | 2002-01-07 | 2003-11-10 | 株式会社日立製作所 | アミノ酸分析装置 |
WO2003069328A1 (fr) * | 2002-02-14 | 2003-08-21 | Ajinomoto Co., Inc. | Procede d'analyse aminofonctionnelle et reactif analytique |
EP1750126B1 (en) * | 2004-05-26 | 2015-09-16 | Ajinomoto Co., Inc. | Method and apparatus for analyzing aminofunctional compound |
-
2003
- 2003-02-13 WO PCT/JP2003/001463 patent/WO2003069328A1/ja active Application Filing
- 2003-02-13 AU AU2003211941A patent/AU2003211941A1/en not_active Abandoned
- 2003-02-13 EP EP10012964A patent/EP2336763A1/en not_active Withdrawn
- 2003-02-13 JP JP2003568398A patent/JP4453363B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2003-02-13 EP EP10012963.4A patent/EP2317307B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2003-02-13 CA CA2475011A patent/CA2475011C/en not_active Expired - Lifetime
- 2003-02-13 EP EP03705088.7A patent/EP1475632B1/en not_active Expired - Lifetime
-
2004
- 2004-08-16 US US10/918,380 patent/US7148069B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2006
- 2006-09-01 US US11/514,130 patent/US9274123B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2009
- 2009-11-27 JP JP2009269796A patent/JP5136542B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
2012
- 2012-09-28 JP JP2012216013A patent/JP5842775B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
2015
- 2015-09-25 JP JP2015188056A patent/JP6278210B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
2016
- 2016-01-21 US US15/003,235 patent/US9658234B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2017
- 2017-12-06 JP JP2017234081A patent/JP6699645B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
2020
- 2020-01-23 JP JP2020008872A patent/JP7055267B2/ja not_active Expired - Lifetime
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2000020870A1 (en) * | 1998-10-01 | 2000-04-13 | Brax Group Limited | Characterising polypeptides through cleavage and mass spectrometry |
JP2001151795A (ja) * | 1999-11-22 | 2001-06-05 | Sumitomo Chem Co Ltd | ペプチドのアミノ酸配列決定方法 |
WO2002008767A2 (en) * | 2000-07-25 | 2002-01-31 | The Procter & Gamble Company | Methods and kits for sequencing polypeptides |
Non-Patent Citations (4)
Title |
---|
JPN6014015175; VAN EIJK,H.M.H. 他: '"Determination of amino acid isotope enrichment using liquid chromatography-mass spectrometry"' ANALYTICAL BIOCHEMISTRY Volume 271, Issue 1, 19990615, Pages 8-17 * |
JPN6014015177; MACKO,S.A. 他: '"Stable Nitrogen Isotope Analysis of Amino Acid Enantiomers by Gas Chromatography/Combustion/Isotop' ANALYTICAL CHEMISTRY Volume 69, Number 5, 19970301, Pages 926-929 * |
JPN6014029293; SCHMEER,K. 他: '"Compositional analysis of the phenylthiocarbamyl amino acids by liquid chromatography-atmospheric' Journal of Chromatography A Volume 691, Issues 1-2, 19950203, Pages 285-299 * |
JPN6014029294; CHACE,D.H. 他: '"Rapid Diagnosis of Phenylketonuria by Quantitative Analysis for Phenylakanine and Tyrosine in Neon' Clinical Chemistry Volume 39, Number 1, 199301, Pages 66-71 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP1475632B1 (en) | 2013-05-22 |
US9658234B2 (en) | 2017-05-23 |
EP2336763A1 (en) | 2011-06-22 |
EP1475632A1 (en) | 2004-11-10 |
EP1475632A4 (en) | 2008-06-25 |
JP7055267B2 (ja) | 2022-04-18 |
CA2475011C (en) | 2015-07-07 |
US20050079624A1 (en) | 2005-04-14 |
EP2317307B1 (en) | 2013-11-20 |
EP2317307A3 (en) | 2012-03-14 |
EP2317307A2 (en) | 2011-05-04 |
JP4453363B2 (ja) | 2010-04-21 |
JP5842775B2 (ja) | 2016-01-13 |
JP6278210B2 (ja) | 2018-02-14 |
US20060286673A1 (en) | 2006-12-21 |
JP2020073916A (ja) | 2020-05-14 |
JPWO2003069328A1 (ja) | 2005-06-09 |
JP2018052972A (ja) | 2018-04-05 |
US7148069B2 (en) | 2006-12-12 |
AU2003211941A1 (en) | 2003-09-04 |
US20160139134A1 (en) | 2016-05-19 |
JP6699645B2 (ja) | 2020-05-27 |
JP2016029068A (ja) | 2016-03-03 |
US9274123B2 (en) | 2016-03-01 |
WO2003069328A1 (fr) | 2003-08-21 |
JP2010071995A (ja) | 2010-04-02 |
CA2475011A1 (en) | 2003-08-21 |
JP5136542B2 (ja) | 2013-02-06 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP7055267B2 (ja) | アミノ官能性化合物の分析方法及び分析試薬 | |
Chahrour et al. | Stable isotope labelling methods in mass spectrometry-based quantitative proteomics | |
Sinz | Chemical cross‐linking and mass spectrometry to map three‐dimensional protein structures and protein–protein interactions | |
JP5503358B2 (ja) | 分析物分析に関する方法、混合物、キット、および組成物 | |
CA2775118A1 (en) | Mass labels | |
Feeney et al. | Proteomic approaches to analyze protein tyrosine nitration | |
US8309359B2 (en) | Isobaric tags for analyte detection and quantification | |
US20120165227A1 (en) | Compounds and methods for detection and quantification of carboxylic acids | |
EP1589341A2 (en) | Method of selective peptide isolation for the identification and quantitative analysis of proteins in complex mixtures | |
Burton et al. | sCIP-ing towards streamlined chemoproteomics | |
JP2005049164A (ja) | ペプチドの高感度測定又は定量のためのラベル化試薬及び方法 | |
JP2023548079A (ja) | 遊離チオール検出のための蛍光エルマンアッセイ | |
JP2023091200A (ja) | 有機化合物、試薬、及び分析方法 | |
Degliesposti | Probing Protein Complexes Composition, Stoichiometry, and Interactions by Peptide-Based Mass Spectrometry | |
Li et al. | A Rapid and Sensitive Method for Chiroptical Sensing of a-Amino Acids via Click-like Labeling with o-Phthaladehyde and p-Toluenethiol | |
Burton et al. | Functionalizing tandem mass tags for streamlining click-based quantitative chemoproteomics | |
JP2016017054A (ja) | アミノ酸のアミノ基及びカルボキシル基を対象としたプレカラム誘導体化lc−ms分析法 | |
KR101207742B1 (ko) | 라벨링제 및 이를 이용한 아미노산 서열 및 단백질 다중 정량 동시 분석방법 | |
JP2005232132A (ja) | ダンシル基を有するチオール基特異的標識用試薬、その製法、および該標識試薬を用いた標識法 | |
Gilany et al. | Mass spectrometry-based proteomics in the life sciences: a review | |
Pennington | Development of fluorescent/stable isotope tagging strategies for proteins containing DOPA | |
Trivedi et al. | APPLICATIONS OF LIQUID CHOMATOGRAPHY MASS SPECTROMETRY FOR PROTEOMICS |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20140317 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20140415 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20140612 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20140715 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20140916 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20150224 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20150525 |
|
A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20150601 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20150728 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20150925 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20151020 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20151102 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 5842775 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
EXPY | Cancellation because of completion of term |