JP2012520282A - 代謝障害治療のための化合物 - Google Patents

Abstract

本発明はＧＰＲ１１９アゴニストとしての活性を有し、２型糖尿病を含む代謝障害の治療に有用な治療化合物に関する。

Description

本発明は、２型糖尿病を含む代謝障害の治療に有用な治療化合物に関する。特に、本発明はＧＰＲ１１９アゴニストとしての活性を有する化合物に関する。

インスリン非依存性２型糖尿病に関連する病態生理を標的とする薬剤は多くの副作用を有し、大多数の患者における脂質代謝異常および高脂血症に適切に対処していない。治療はしばしば、食事、運動、血糖降下剤およびインスリンを用いて個々の患者における必要性に焦点を合わせるが、新規抗糖尿病薬、特により副作用が少なく、より忍容性が高いであろう薬剤は常に必要とされてきた。

同様に、メタボリックシンドローム（シンドロームＸ）は人々を高い冠動脈疾患のリスク下に置き、中心性肥満（腹部における過剰な脂肪組織）、耐糖能障害、高トリグリセライドおよび低ＨＤＬコレステロール、および高血圧などの危険因子の集団として特徴付けられる。心筋虚血および微小血管障害は、未治療または不完全に治療されたメタボリックシンドロームとの関連で確立された病的状態である。

肥満は体の大きさに比べて過剰な脂肪組織量で特徴付けられる。臨床的には、体脂肪量は肥満度指数（ＢＭＩ;体重（ｋｇ）／慎重（ｍ）^２）または腹囲で見積もられる。ＢＭＩが３０を超えると各人は肥満と見なされ、過体重であることの医学的帰結は確立されている。体重の増加、特に腹部の体脂肪によるものが、糖尿病、高血圧、心疾患、および多数の別の合併症、例えば関節炎、脳卒中、胆嚢疾患、筋肉および呼吸器における問題、背部痛、さらにはいくつかの癌のリスクの増加と関連することは、長い間受け入れられてきた医学的見解となっている。

新規抗糖尿病薬、特により副作用が少なく、より忍容性が高い薬剤、および特に体重と無関係または好ましくは体重の低下を引き起こす薬剤は常に必要とされてきた。

ＧＰＲ１１９（以前はＧＰＲ１１６と呼ばれていた）はヒトおよびラットの受容体を開示するWO00/50562においてＳＮＯＲＦ２５として同定されたＧＰＣＲであり、また、US 6,468,756はマウスの受容体（受入番号：ＡＡＮ９５１９４（ヒト）、ＡＡＮ９５１９５（ラット）およびＡＮＮ９５１９６（マウス））も開示している。

ヒトにおいて、ＧＰＲ１１９は膵臓、小腸、結腸および脂肪組織において発現されている。ヒトＧＰＲ１１９受容体の発現プロファイルは、その糖尿病治療の標的としての高い有用性を示している。

ＧＰＲ１１９アゴニストは胃腸管からのＧＬＰ−１の放出を刺激することが示されている。それにより、ＧＰＲ１１９アゴニストは、（１）膵臓からのグルコース依存的インスリンの放出を増強し、経口グルコース耐性を改善し；（２）β−細胞のｃＡＭＰ濃度を増加させることにより疾患の進行を減弱し；（３）おそらくはＧＬＰ−１の摂食低下能を通して体重の減少を引き起こす。

国際特許出願 WO2005/061489、WO2006/070208、WO2006/067532、WO2006/067531、WO2007/003960、WO2007/003961、WO2007/003962、WO2007/003964、WO2007/116229、WO2007/116230、WO2007/138362、WO2008/081204、WO2008/081205、WO2008/081206、WO2008/081207、WO2008/081208、WO2009/050522、WO2009/050971、WO2010/004343、WO2010/004344、WO2010/004345、 WO2010/004347およびWO2010/00166はＧＰＲ１１９受容体アゴニストを開示する。

ジペプチジルペプチダーゼＩＶ（ＤＰＰ−ＩＶ）はユビキタスだが特異性の高いセリンプロテアーゼであり、最後から２番目の位置のＬ−プロリンまたはＬ−アラニンでポリペプチドからＮ−末端側のジペプチドを切り出す。ＤＰＰ−ＩＶ阻害剤を用いた研究から、ＧＬＰ−１の不活性化におけるＤＰＰ−ＩＶの重要な役割が示された。ＧＬＰ−１が活性である期間を延ばすことにより、インスリンの分泌が刺激され、グルカゴンの放出が阻害され、胃内容排出が遅延される。ＤＰＰ−ＩＶ阻害剤は２型糖尿病の治療に有用であり、ＤＰＰ−ＩＶ阻害剤の例は、例えばビルダグリプチン、シタグリプチン、アログリプチンおよびサクサグリプチンである。

ＧＰＲ１１９アゴニストおよびＤＰＰ−ＩＶ阻害剤を組み合わせて用いる可能性は示唆されてはいるが、これには患者への２つの別々の製剤または２つの活性成分を含む複合製剤の投与が必要であり、２つの活性成分の物理化学的、薬物動態学的、および薬力学的性質の適合性の達成に関する問題を孕んでいる。本願の優先日より後に公開された国際特許出願WO2009/034388はＧＰＲ１１９アゴニストおよびＤＰＰ-ＩＶ阻害剤としての２つの活性を有する化合物を開示している。

本発明の化合物もまた、ＧＰＲ１１９アゴニストおよびＤＰＰ-ＩＶ阻害剤としての２つの活性を有し得る。

本発明は、ＧＰＲ１１９アゴニストとしての活性を有し、ＤＰＰ−ＩＶ阻害剤としての活性も有し得、２型糖尿病を含む代謝障害の治療に有用な化合物に関する。

（発明の詳細な説明）
本発明は式（Ｉ）：

［式中、
ｐは１または２であり；
ｐが２のとき、ＺはＣＨＲ^１またはＮＲ^２であり；
および、ｐが１のとき、Ｚは−Ｎ−ＣＨ_２−Ｐｈ（ここで、ＰｈはＣ_１−４アルキル、Ｃ_１−４ハロアルキルおよびハロから独立して選択される１または２個の基により適宜置換されていてもよい）であり；
Ｒ^１は−Ｎ（ＣＨ_３）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ_２−４アルキルまたは−Ｎ（ＣＨ_３）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ_３−６シクロアルキル（ここで、シクロアルキルはＣ_１−４アルキルで適宜置換されていてもよい）であり；
Ｒ^２は−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ_２−４アルキル、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ_３−６シクロアルキル（ここで、シクロアルキルはＣ_１−４アルキルで適宜置換されていてもよい）、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ_２−４アルキル、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ_３−６シクロアルキル（ここで、シクロアルキルはＣ_１−４アルキルで適宜置換されていてもよい）であるか、あるいはＲ^２は：

（ここで、Ｔはそれに属す−Ｎ＝Ｃ−と共に、Ｎ、ＯおよびＳから選択される最大２個のヘテロ原子をさらに適宜含んでいてもよい５または６員のヘテロアリール環を形成する:）であり；
Ｔがそれに属す−Ｎ＝Ｃ−と共に５員のヘテロアリール環を形成するとき、Ｒ^６はＣ_１−４アルキルで適宜置換されていてもよいＣ_２−４アルキルまたはＣ_３−６シクロアルキルであり、Ｔがそれに属す−Ｎ＝Ｃと共に６員のヘテロアリール環を形成するとき、Ｒ^６はＣ_２−４アルキル、フルオロまたはクロロであり；
Ｑは−Ｏ−、−Ｏ−ＣＲ^８Ｈ−または−ＣＲ^８Ｈ−Ｏ−であり；
ＸはフェニルまたはＮ、ＯおよびＳから選択される１つまたはそれ以上のヘテロ原子を含む５もしくは６員のヘテロアリール基であり；ただし、Ｑが−Ｏ−ＣＲ^８Ｈ−のとき、Ｘは６員のヘテロアリール基ではなく；
Ｙは結合、−ＣＨ_２−または−ＣＨＭｅ−であり；
Ｒ^３およびＲ^３ａは水素、フルオロまたはクロロから独立して選択されるか、あるいはＲ^７がシアノであるとき、Ｒ^３はメチルでもよく；ただし、Ｙが結合であり、Ｒ^３およびＲ^３ａがＹ基のオルト位にあるとき、それらは共に水素であり；
Ｒ^４は水素であるか、あるいはＹが−ＣＨ_２−または−ＣＨＭｅ−のとき、Ｒ^４はフェニル環の＊位に−ＣＨ_２−結合して縮合６員含窒ヘテロ環を形成してもよく；
Ｒ^５は１つまたはそれ以上のフルオロ、シクロ、シアノまたはメチル基で適宜置換されていてもよいベンジルであるか、あるいはＲ^５は：

（ここで、
ｒは１または２であり、ｍは０、１または２であり；
ＷはＣＨ_２であるか、あるいはｒが２のとき、ＷはＳでもよく；
ＷがＣＨ_２のとき、Ｒ^７はフルオロまたはシアノであり、ＷがＳのとき、Ｒ^７はシアノである）であり；
Ｒ^８は水素またはメチルである］
の化合物、またはその医薬的に許容される塩を提供する。

好ましい実施態様において、本発明の化合物は式（Ｉａ）で定義される立体化学を有し、かかる化合物はＤＰＰ−ＩＶ阻害活性を示す：

本発明の実施態様の１つにおいて、各ｐは独立して１または２であり、即ち、４、５または６員環を形成する。本発明の実施態様の別の１つにおいて、各ｐは同じであり、即ち、４または６員環を形成する。本発明の化合物において、ｐは好ましくは２である。
Ｚは好ましくはＮＲ^２である。
本発明の実施態様の１つにおいて、Ｒ^２は−Ｃ（Ｏ）ＯＲ^４である。
本発明のさらなる実施態様において、Ｒ^２は：

である。
Ｒ^２が：

のとき、本明細書中で述べられるＴがそれに属す−Ｎ＝Ｃ−と共に形成する５または６員のヘテロアリール環はオキサジアゾールおよびピリミジンである。
Ｑは好ましくは−Ｏ−または−ＣＲ^８Ｈ−Ｏ−であり、より好ましくは−ＣＲ^８Ｈ−Ｏ−である。
Ｘは好ましくはメタもしくはパラ結合フェニルまたは１つもしくは２つの窒素原子を含むメタもしくはパラ結合６員ヘテロ芳香族環であり、より好ましくはパラ結合フェニルまたは１つもしくは２つの窒素原子を含む６員ヘテロ芳香族環である。
Ｘは好ましくはフェニルまたはピリジルである。
Ｒ^３は好ましくはフルオロである。
Ｒ^４は好ましくは水素である。
Ｒ^５は好ましくは：

である。
Ｗは好ましくはＣＨ_２である。
ｒは好ましくは２である。

各可変部における好ましい基を上で各可変部について概説したが、本発明の好ましい化合物は、式（Ｉ）においていくつかの可変部または各可変部が各可変部の好ましい基から選択される化合物を含む。故に、本発明は記載された好ましい基の全ての組み合わせを包含するよう意図される。

特に挙げられる代表的な本発明の化合物は、遊離塩基またはその医薬的に許容される塩として実施例で提供されるものである。

本発明の化合物の分子量は、好ましくは８００未満であり、より好ましくは６００未満である。

特に断らない限り、本明細書中で用いられる用語「アルキル」は直鎖または分枝鎖の炭素鎖を意味する。アルキル基の例は、例えばエチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ−およびｔｅｒｔ−ブチルである。

用語「ヘテロアリール」環は、Ｎ、ＯおよびＳから選択されるヘテロ原子を最大２個含む５または６員の含窒ヘテロアリール環を意味する。かかるヘテロアリール環の例は、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、トリアゾリル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、ピリジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、およびトリアジニルである。

本明細書中に記載される化合物は、１つまたはそれ以上の不斉中心を有していてもよく、故に、ジアステレオマーおよび光学異性体が生じ得る。本発明は、全てのかかるジアステレオマーおよびそれらのラセミ混合物、高純度に分割されたエナンチオマー、全ての存在可能な幾何異性体、ならびにそれらの医薬的に許容される塩を包含する。本発明は、本発明の化合物の全ての立体異性体およびその医薬的に許容される塩を包含する。さらに、立体異性体の混合物ならびに単離された特定の立体異性体もまた、包含される。かかる化合物の製造に用いられる合成方法の過程、または当業者に周知のラセミ化もしくはエピマー化手法を使用する際において、かかる方法の生成物は立体異性体の混合物であってもよい。

本発明の化合物の互変異性体が存在するとき、特に設定または記載されない限り、本発明の化合物は全ての可能な互変異性体およびその医薬的に許容される塩、およびそれらの混合物を包含する。

本発明の化合物またはその医薬的に許容される塩が溶媒和物または多形相の形態で存在するとき、本発明は全ての存在可能な溶媒和物および多形相の形態を包含する。溶媒和物を形成する溶媒の種類は、溶媒が医薬的に許容される限り、特に限定されない。例えば、水、エタノール、プロパノール、アセトンなどが用いられ得る。

用語「医薬的に許容される塩」は、医薬的に許容される無毒な塩基または酸から形成される塩を意味する。本発明の化合物が酸性の場合、その対応する塩は、無機塩基および有機塩基を含む医薬的に許容される無毒な塩基から製造することができる。かかる無機塩基に由来する塩は、例えばアルミニウム、アンモニウム、カルシウム、銅（１価および２価）、三価鉄、二価鉄、リチウム、マグネシウム、カリウム、ナトリウム、亜鉛などによる塩である。特に好ましいものは、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、カリウムおよびナトリウム塩である。医薬的に許容される無毒な有機塩基に由来する塩は、例えば１級、２級および３級アミン、ならびに環状アミン、例えば天然に存在する置換アミンおよび合成置換アミンの塩である。塩を形成し得る別の医薬的に許容される無毒な有機塩基 は、例えばアルギニン、ベタニン、カフェイン、コリン、Ｎ’，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リジン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ポリアミンレジン、プロカイン、プリン類、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、トロメタミンなどである。

本発明の化合物が塩基性の場合、その対応する塩は無機および有機酸を含む医薬的に許容される無毒な酸から製造することができる。かかる酸は、例えば、酢酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、クエン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコン酸、グルタミン酸、臭化水素酸、塩酸、イセチオン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、粘液酸、硝酸、パモ酸、パントテン酸、リン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、ｐ−トルエンスルホン酸などである。

本発明の化合物は医薬的使用を意図されるため、それらは高純度な形態で提供されることが好ましく、例えば、少なくとも純度６０％において、より適切には少なくとも純度７５％において、とりわけ少なくとも純度９８％（％は重量に基づく）において提供される。

式（Ｉ）の化合物は以下のようにして製造可能であり、ここで、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^３ａ、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８、Ｘ、Ｙ、Ｗ、Ｑ、Ｚ、ｍ、ｐおよびｒは式（Ｉ）と同義である。ＰＧは保護基であり、Ｈａｌはハロゲン、Ｔｆはトリフレートである。

ｐが２であり、Ｑが−Ｏ−または−ＣＲ^８Ｈ−Ｏ−であり、Ｘが２−ピリジルまたは２−ピリミジルであり、Ｒ^２が−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ_２−４アルキルではない式（Ｉ）の化合物は、スキーム１に概説されるように合成することができる。式（ＩＶ）の化合物は、式（ＩＩ）のトリフレートと式（ＩＩＩ）のボロネートを、例えば、ＤＭＦ／水などの適切な溶媒中、８０℃において［１，１−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウムを用いる鈴木条件下で反応させることにより合成することができる。式（ＶＩ）の化合物は、標準的な条件下、例えばマイクロ波反応器内、１５０℃、ＴＨＦなどの適切な溶媒中のＫＯ^ｔＢｕにおける式（ＩＶ）のアリールハライドと式（Ｖ）のアルコールとの反応により製造することができる。当業者に周知の標準的な条件を用いたアミン官能性の脱保護反応により、上記の式（Ｉ）の化合物が得られる。

ｐが２であり、Ｑが−Ｏ−または−ＣＲ^８Ｈ−Ｏ−であり、Ｘが２−ピリジルまたは２−ピリミジルであり、Ｒ^２が−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ_２−４アルキルである式（Ｉ）の化合物は、スキーム２に概説されるように合成することができる。式（ＶＩＩＩ）のアリールブロミドは、６０℃、ＮａＨなどの適切な塩基の存在下、ＴＨＦなどの適切な溶媒中における式（Ｖ）のアルコールと式（ＶＩＩ）のアリールクロリドの反応により製造することができる。式（ＩＸ）のアリールボロネートは、１１０℃、［１，１−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウムなどの適切な触媒の存在下、１，４−ジオキサンなどの適切な溶媒中における式（ＶＩＩＩ）のアリールブロミドとビス（ピナコレート）ジボロンの反応により製造することができる。式（ＶＩ）の化合物は、例えば、８０℃、ＤＭＦ／水などの適切な溶媒中で［１，１−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウムを用いる鈴木条件下における、式（ＩＩ）のトリフレートと式（ＩＸ）のボロネートの反応により製造することができる。当業者に周知の標準的な条件を用いたアミン官能性の脱保護反応により、上記の式（Ｉ）の化合物が得られる。

ｐが２であり、Ｑが−Ｏ−または−ＣＲ^８Ｈ−Ｏ−であり、Ｘがフェニルである式（Ｉ）の化合物は、スキーム３に概説されるように製造することができる。式（ＸＩ）のアリールハライドは、例えば、アゾジカルボン酸ジピペリジドおよびトリブチルホスフィンを用いる光延条件下における、式（Ｖ）のアルコールとフェノール（Ｘ）の反応により製造することができる。式（ＸＩＩ）のアリールボロネートは、１１０℃、［１，１−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウムなどの適切な触媒の存在下、１，４−ジオキサンなどの適切な溶媒中における式（ＸＩ）のアリールハライドとビス（ピナコレート）ジボロンの反応により製造することができる。式（ＶＩ）の化合物は、例えば、マイクロ波反応器内、８０℃、ＤＭＦ／水などの適切な溶媒中で［１，１−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウムを用いる鈴木条件下における式（ＩＩ）のトリフレートと式（ＸＩＩ）のボロネートの反応により製造することができる。当業者に周知の標準的条件を用いたアミン官能性の脱保護反応により、上記の式（Ｉ）の化合物が得られる。

ｐが２であり、Ｑが−Ｏ−または−ＣＲ^８Ｈ−Ｏ−であり、Ｘが５−ピリジルまたは５−ピリミジルである式（Ｉ）の化合物はスキーム４に概説されるように製造することができる。式（ＶＩＩＩ）のアリールブロミドは、例えば、アゾジカルボン酸ジピペリジドおよびトリブチルホスフィンを用いる光延条件下における式（Ｖ）のアルコールと式（ＸＩＩＩ）のアリールブロミドの反応により製造することができる。式（ＶＩ）の化合物は、例えば、マイクロ波反応器内、８０℃、ＤＭＦ／水などの適切な溶媒中で［１，１−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウムを用いる鈴木条件下における式（ＶＩＩＩ）のアリールブロミドと式（ＸＩＶ）のボロネートの反応により製造することができる。当業者に周知の標準的条件を用いたアミン官能性の脱保護反応により、上記の式（Ｉ）の化合物が得られる。

ｐが２であり、Ｑが−Ｏ−ＣＲ^８Ｈ−であり、Ｘがフェニルである式（Ｉ）の化合物は、スキーム５に概説されるように製造することができる。式（ＸＶＩ）のメシレートは、トリエチルアミンなどの適切な塩基の存在下、ＤＣＭなどの適切な溶媒中における式（ＸＶ）のアルコールとメタンスルホニルクロリドとの反応により製造することができる。式（ＸＩ）のアリールブロミドは、ＮａＨなどの適切な塩基の存在下、ＴＨＦなどの適切な溶媒中における式（ＸＶＩ）のメシレートと式（ＸＶＩＩ）のアルコールとの反応により製造することができる。式（ＸＩＩ）のアリールボロネートは、１１０℃、［１，１−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウムなどの適切な触媒の存在下、１，４−ジオキサンなどの適切な溶媒中における式（ＸＩ）のアリールハライドをビス（ピナコレート）ジボロンとの反応により製造することができる。式（ＶＩ）の化合物は、例えば、マイクロ波反応器内、８０℃、ＤＭＦ／水などの適切な溶媒中で［１，１−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウムを用いる鈴木条件下における式（ＩＩ）のトリフレートと式（ＸＩＩ）のボロネートとの反応により製造することができる。当業者に周知の標準的条件を用いたアミン官能性の脱保護反応により、上記の式（Ｉ）の化合物が得られる。

ｐが１であり、Ｘが２−ピリジルまたは２−ピリミジルである式（Ｉ）の化合物は、スキーム６に概説されるように製造することができる。式（ＶＩＩＩ）のアリールブロミドは、６０℃、ＮａＨなどの適切な塩基の存在下、ＤＭＦなどの適切な溶媒中における式（Ｖ）のアルコールと式（ＶＩＩ）のアリールブロミドとの反応により製造することができる。式（ＶＩ）の化合物は、例えば、マイクロ波反応器内、８０℃、ＤＭＦ／ 水などの適切な溶媒中で［１，１−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウムを用いる鈴木条件下における式（ＶＩＩＩ）のアリールブロミドと式（ＸＩＶ）のボロネートとの反応により製造することができる。当業者に周知の標準的条件を用いたアミン官能性の脱保護反応により、上記の式（Ｉ）の化合物が得られる。

ｐが１であり、Ｘがフェニル、５−ピリジルまたは５−ピリミジルである式（Ｉ）の化合物は、スキーム７に概説されるように製造することができる。式（ＶＩＩＩ）のアリールブロミドは、例えば、アゾジカルボン酸ジピペリジドおよびトリブチルホスフィンを用いる光延条件下における式（Ｖ）のアルコールと式（ＸＩＩＩ）のアリールブロミドの反応により製造することができる。式（ＶＩ）の化合物は、例えば、マイクロ波反応器内、８０℃、ＤＭＦ／水などの適切な溶媒中で［１，１−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウムを用いる鈴木条件下における式（ＶＩＩＩ）のアリールブロミドと式（ＸＩＶ）のボロネートの反応により製造することができる。当業者に周知の標準的条件を用いたアミン官能性の脱保護反応により、上記の式（Ｉ）の化合物が得られる。

ｐが２であり、Ｑが−Ｏ−ＣＲ^８Ｈ−であり、Ｘがオキサジアゾール−３−イルである式（Ｉ）の化合物は、スキーム８に概説されるように製造することができる。式（ＸＶＩＩＩ）のニトリルは、７０℃、［１，１−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウムなどの適切な触媒の存在下、ＤＭＦなどの適切な溶媒中における式（ＩＩ）のトリフレートとＺｎＣＮの反応により製造することができる。式（ＸＩＸ）のアミドオキシムは、７８℃、Ｋ_２ＣＯ_３などの適切な塩基の存在下、エタノール／水などの適切な溶媒中における式（ＸＶＩＩＩ）のニトリルとヒドロキシルアミンヒドロクロリドの反応により製造することができる。式（ＶＩ）の化合物は、ＤＭＦなどの適切な溶媒中におけるクロロギ酸イソブチルおよびトリエチルアミンなどの標準的条件下での式（ＸＩＸ）のアミドオキシムと式（ＸＸ）の酸の反応により製造することができる。当業者に周知の標準的条件を用いたアミン官能性の脱保護反応により、上記の式（Ｉ）の化合物が得られる。

ｐが２であり、Ｑが−Ｏ−ＣＲ^８Ｈ−であり、Ｘがオキサジアゾール−５−イルである式（Ｉ）の化合物は、スキーム９に概説されるように製造することができる。式（ＸＸＩ）の酸は、８０℃、酢酸パラジウムなどの適切な触媒の存在下、ＤＭＦなどの適切な溶媒中における式（ＩＩ）のトリフレートと一酸化炭素の反応により製造することができる。式（ＶＩ）の化合物は、ＤＭＦなどの適切な溶媒中のクロロギ酸イソブチルおよびトリエチルアミンなどの標準的な条件下における式（ＸＸＩ）の酸と式（ＸＸＩＩ）のアミドオキシムの反応により製造することができる。当業者に周知の標準的条件を用いたアミン官能性の脱保護反応により、上記の式（Ｉ）の化合物が得られる。

ｐが２であり、Ｑが−Ｏ−ＣＲ^８Ｈ−であり、Ｘがチアゾール−２−イルである式（Ｉ）の化合物は、スキーム１０に概説されるように製造することができる。式（ＸＸＩＩＩ）のアミドは、水／ＤＭＳＯなどの適切な溶媒中における式（ＸＶＩＩＩ）のニトリルと過酸化水素の反応により製造することができる。式（ＸＸＩＶ）のチオアミドは、例えば、トルエンなどの適切な溶媒中、還流下においてローソン試薬（Lawesson’s reagent）を用いるような標準的な条件における式（ＸＸＩＩＩ）のアミドの反応により製造することができる。式（ＶＩ）の化合物は、Ｋ_２ＣＯ_３などの適切な塩基の存在下、アセトンなどの適切な溶媒中における式（ＸＸＩＶ）のチオアミドと式（ＸＸＶ）のクロリドの反応により製造することができる。当業者に周知の標準的条件を用いたアミン官能性の脱保護反応により、上記の式（Ｉ）の化合物が得られる。

ｐが２であり、Ｑが−Ｏ−ＣＲ^８Ｈ−であり、Ｘがチアゾール−４−イルである式（Ｉ）の化合物は、スキーム１１に概説されるように製造することができる。式（ＸＸＶＩ）のケトンは、８０℃、ＤＭＦなどの適切な溶媒中、酢酸パラジウムなどの適切な触媒の存在下における式（ＩＩ）のトリフレートとビニルブチルエーテルの反応により製造することができる。次いで、室温でＨＣｌ水溶液を用いたワークアップを行う。式（ＸＸＶＩＩ）のブロモケトンは、ＴＨＦなどの適切な溶媒中のにおける式（ＸＸＶＩ）のケトンとトリメチルフェニルアンモニウム トリブロミドの反応により製造することができる。式（ＶＩ）の化合物は、例えば、室温においてエタノールを用いる標準的なハンチュ（Hantzsch）条件下における式（ＸＸＶＩＩ）のブロモケトンと式（ＸＸＶＩＩＩ）のチオアミドの反応により製造することができる。当業者に周知の標準的条件を用いたアミン官能性の脱保護反応により、上記の式（Ｉ）の化合物が得られる。

式（ＸＩＶ）の化合物はスキーム１２に概説されるように製造することができる。式（ＸＩＶ）の化合物は、１１０℃、［１，１−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウムなどの適切な触媒の存在下、１，４−ジオキサンなどの適切な溶媒中における式（ＩＩ）のトリフレートとビス（ピナコレート）ジボロンの反応により製造することができる。

Ｒ^５がベンジルである式（ＩＩ）の化合物は、スキーム１３に概説されるように製造することができる。式（ＸＸＸ）のアルデヒドは、例えば、室温、アセトニトリルなどの適切な溶媒中でＮ−フェニルトリフルオロメタンスルホンイミドを用いる標準的な条件下における式（ＸＸＩＸ）のフェノールの変換により製造することができる。式（ＸＸＸＩ）のアミンは、式（ＸＸＸ）のアルデヒドとＬｉＨＭＤＳの反応、次いで得られたイミンと適切なグリニャール試薬との反応により製造することができる。例えばジ炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルを用いて得られたアミン基を保護することにより、式（ＩＩ）の化合物が得られる。

Ｒ^５がアミドであり、ＷがＣＨ_２またはＳであり、ｍが１であり、Ｒ^７がシアノである式（ＩＩ）の化合物は、スキーム１４に概説されるように製造することができる。式（ＸＸＸＩＩＩ）のアミドは、例えば、ＤＣＭなどの適切な溶媒中でＨＯＢＴおよびＥＤＣＩを用いる標準的なアミドカップリング条件下における式（ＸＸＸＩＩ）の酸と適当なアミンの反応により製造することができる。式（ＸＸＸＩＶ）のトリフレートは、室温、アセトニトリルなどの適切な溶媒中においてＮ−フェニルトリフルオロメタンスルホンイミドを用いる標準的な条件下における式（ＸＸＸＩＩＩ）のアミドの変換により製造することができる。上記の式（ＩＩ）の化合物は、例えば、ＴＨＦなどの適切な溶媒中で無水トリフルオロ酢酸およびピリジンを用いる標準的な脱水条件下における式（ＸＸＸＩＶ）の化合物の反応により製造することができる。

Ｒ^５がアミドでありＲ^７がシアノではない式（ＩＩ）の化合物は、スキーム１５に概説されるように製造することができる。式（ＸＸＸＶ）のアミドは、例えば、ＤＣＭなどの適切な溶媒中でＨＯＢＴおよびＥＤＣＩを用いる標準的なアミドカップリング条件下における式（ＸＸＸＩＩ）の酸と適当なアミンの反応により製造することができる。式（ＩＩ）のトリフレートは、例えば、室温、アセトニトリルなどの適切な溶媒中でＮ−フェニルトリフルオロメタンスルホンイミドを用いる標準的な条件下における式（ＸＸＸＩＩＩ）のアミドの変換により製造することができる。

特に、Ｒ^３がフッ素、Ｒ^３ａが水素、ＹがＣＨＭｅ、およびＲ^４が水素である式（ＸＸＸＩＩ）のキラル化合物は、スキーム１６に概説されるように製造することができる。式（ＸＸＸＶＩＩ）の化合物は、還流下、ＴＨＦなどの適切な溶媒中における４−ベンジルオキシ−２−フルオロベンズアルデヒド（ＸＸＸＶＩ）とメチル（トリフェニルホスホラニリデン）アセテートの反応により製造することができる。けん化、次いで得られたカルボン酸の、例えばピバロイルクロリドによる活性化、次いでｎ−ブチルリチウムなどの適切な塩基で脱プロトン化した（Ｒ）−（−）−４−フェニル−２−オキサゾリジンとの反応により、式（ＸＸＸＩＸ）の化合物が得られる。ＴＨＦなどの適切な溶媒中における硫化ジメチル、メチルマグネシウムブロミドおよび臭化銅（Ｉ）−ジメチルスルフィドとの反応により、式（ＸＬ）の化合物が得られる。これに次ぐジブチルボロントリフレートおよびＮ−ブロモスクシンイミドとの反応、次いでＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルグアニジンアジドとの反応により、式（ＸＬＩＩ）の化合物が得られる。過酸化水素および水酸化ナトリウムを用いてフェニルオキサゾリジン−２−オン基を除去することにより、式（ＸＬＩＩＩ）の化合物が得られる。標準的な条件下における還元、次いで生じたアミン基の、例えば、ジ炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルによる保護により、上記の式（ＸＸＸＩＩ）の化合物が得られる。

特に、Ｒ^３がフッ素、Ｒ^３ａが水素、ＹがＣＨ_２、Ｒ^４が水素である式（ＸＸＸＩＩ）の化合物は、スキーム１７に概説されるように製造することができる。式（ＸＬＶＩ）の化合物は、１２０℃、無水酢酸中における２−フルオロ−４−メトキシベンズアルデヒド（ＸＬＶ）と酢酸ナトリウムおよびアセチルアミノ酢酸との反応により製造することができる。得られたアルケン酸（ＸＬＶＩ）の標準的な条件下における還元により式（ＸＬＶＩＩ）のラセミ化合物が得られる。［Ｒｈ（ｃｏｄ）（ＰＰ）］ＯＴｆおよび（Ｓ，Ｓ）−Ｅｔ−Ｄｕｐｈｏｓなどのキラル触媒を用いたアルケン酸（ＸＬＶＩ）の還元により、式（ＸＬＶＩＩ）の化合物が高い鏡像体過剰率において得られる。標準的な酸性条件下におけるアセチル基の除去、次いで、例えば、ジ炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルによるアミン基の保護により、上記の式（ＸＸＸＩＩ）の化合物が得られる。

ｐが２であり、Ｑが−Ｏ−ＣＲ^８Ｈ−である式（ＸＸＶ）の化合物は、スキーム１８に概説されるように製造することができる。式（ＸＶＩＩ）のアルコールを、Ｋ_２ＣＯ_３などの適切な塩基の存在下、ＤＭＦなどの適切な溶媒中において１，３−ジクロロアセトンで処理することにより、上記の式（ＸＸＶ）の化合物が得られる。

ｐが２であり、Ｑが−Ｏ−ＣＲ^８Ｈ−である式（ＸＸＶＩＩＩ）の化合物は、スキーム１９に概説されるように製造することができる。式（ＸＬＩＸ）のアミドは、例えば、ＤＣＭなどの適切な溶媒中でＨＯＢＴおよびＥＤＣＩを用いる標準的なアミドカップリング条件下における式（ＸＸ）の酸と適当なアミンの反応により製造することができる。式（ＸＸＶＩＩＩ）のチオアミドは、例えば、トルエンなどの適切な溶媒中、還流下でローソン試薬を用いる標準的な条件下における式（ＸＬＩＸ）の反応により製造することができる。

式（Ｉ）の別の化合物は、上記と同様の方法またはそれ自体周知の方法により製造されてもよい。式（Ｉ）の化合物の製造に関するさらなる詳細は、実施例に述べる。

式（Ｉ）の化合物は、単独で製造されてもよく、少なくとも２個、例えば５個から１０００個、好ましくは１０から１００個の式（Ｉ）の化合物を含む化合物ライブラリーとして製造されてもよい。化合物ライブラリーは、コンビナトリアル「split and mix」アプローチ、または多重パラレル合成により、液相もしくは固相化学を用い、当業者に周知の方法を用いて製造されてもよい。

式（Ｉ）の化合物の製造中、中間体化合物の不安定な官能基、例えばヒドロキシ、カルボキシならびにアミノ基は保護されてもよい。保護基は、式（Ｉ）の化合物の製造中のいずれのステージにおいて除去されてもよく、あるいは最終的な式（Ｉ）の化合物に存在していてもよい。種々の不安定な官能基を保護することができる方法および得られた保護誘導体を切断する方法に関する包括的な議論は、例えば、Protective Groups in Organic Chemistry, T.W. Greene and P.G.M. Wuts, (1991) Wiley-Interscience, New York, 2nd editionに見られる。

上に記載したような式（Ｉ）の化合物およびその中間体の製造工程もまた、本発明のさらなる態様に包含される。

上のスキームまたは実施例で定義したいずれの新規中間体もまた、本発明の範囲に包含される。故に、本発明のさらなる態様により、上と同義の式ＩＩ、ＩＶ、ＶＩ、ＸＩＶ、 ＸＶＩＩＩ、ＸＩＸ、ＸＸＩ、ＸＸＩＩＩ、ＸＸＩＶ、ＸＸＩＶ、ＸＸＶＩ、ＸＸＶＩＩ、ＸＸＸＩ、ＸＸＸＩＶのいずれか１つの化合物が提供される。好ましい基の式（Ｉ）の化合物に関連して上に記載される変数は、中間体化合物にも適用される。

上で示されるように、本発明の化合物はＧＰＲ１１９アゴニストとして、例えば糖尿病の治療および／または予防に有用である。かかる使用のために、本発明の化合物は通常医薬組成物の形態で投与される。

本発明の化合物はまた、デュアルＧＰＲ１１９アゴニスト／ＤＰＰ−ＩＶ阻害剤として、例えば糖尿病の治療および／または予防に有用である。かかる使用のために、本発明の化合物は通常医薬組成物の形態で投与される。

本発明はまた、薬剤として使用するための本発明の化合物、またはその医薬的に許容される塩を提供する。

本発明はまた、本発明の化合物を医薬的に許容される担体との組み合わせで含む医薬組成物を提供する。

好ましくは、該組成物は医薬的に許容される担体および無毒で治療上有効量の本発明の化合物、またはその医薬的に許容される塩を含む。

さらに、本発明の化合物はまた、ＧＰＲ１１９および適宜ＤＰＰ−ＩＶを調節し、糖尿病の治療または予防効果を得ることにより疾患の治療に有用であり、医薬的に許容される担体および無毒な治療上有効量の本発明の化合物、またはその医薬的に許容される塩を含む医薬組成物を提供する。

該医薬組成物は別の治療上の成分またはアジュバントを適宜含んでいてもよい。該組成物は、経口、経直腸、局所、および非経口（例えば、皮下、筋肉内、静脈内）投与に適した組成物を含むが、与えられたいずれの例における大半の適切な経路は、特定のホスト、ならびに活性成分が投与される目的の病態の性質および重篤度に依存する。該医薬組成物は便宜上単位投与剤形で存在してもよく、製剤学分野で周知のいずれの方法により製造されてもよい。

医療現場において、本発明の化合物またはその医薬的に許容される塩は、一般的な医薬品配合技法により活性成分として医薬的担体と緊密な混合物に組み合わせてもよい。該担体は、投与、例えば経口または非経口（静脈内を含む）投与のための製造形態に依存して、様々な形態を取り得る。

故に、該医薬組成物は、各々が所定量の活性成分を含む経口投与に適した個別の単位、例えばカプセル剤、カシェ剤または錠剤として提供されてもよい。さらに、該組成物は、粉剤、顆粒剤、液剤、水性の液体による懸濁剤、非水性の液剤、水中油エマルジョン剤、または油中水液体エマルジョン剤として提供され得る。上で設定した一般的な投与剤形に加え、本発明の化合物またはその医薬的に許容される塩はまた、放出制御されるような方法および／または送達装置で投与されてもよい。該組成物はいずれの製剤学的方法により製造されてもよい。一般的に、かかる方法は、活性成分と、１つまたはそれ以上の必要成分を構成する担体を会合させる工程を含む。一般的に、該組成物は、活性成分と液体の担体または微細に破砕した固体の担体またはその混合物を均一かつ緊密に混合することにより製造される。生成物は次いで、目的の形態に便利に剤形化され得る。

本発明の化合物または医薬的に許容される塩はまた、１つまたはそれ以上の別の治療上の活性成分と組み合わせて医薬組成物に含まれ得る。

用いられ得る医薬的担体は、例えば、固体、液体または気体である。固体の担体の例は、乳糖、白土、ショ糖、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アラビアゴム、ステアリン酸マグネシウムおよびステアリン酸である。液体の担体の例は、液糖、ピーナツ油、オリーブ油および水である。気体の担体の例は、二酸化炭素および窒素である。

経口投与剤形の製造には、いずれの便利な媒体が用いられてもよい。例えば、水、グリセロール、油、アルコール、香料、保存剤、着色剤などが経口用液剤、例えば懸濁剤、エリキシル剤および液剤の製造に用いられてもよい；他方、デンプン、砂糖、結晶セルロース、希釈剤、造粒剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤などの担体は、経口用の固形製剤、例えば粉剤、カプセル剤および錠剤の製造に用いられてもよい。投与が簡便であるため、錠剤およびカプセル剤が好ましい経口投与単位であり、これには固体の医薬的担体が用いられる。適宜、錠剤は標準的な水性または非水性の技法によりコーティングされてもよい。

本発明の化合物を含む錠剤は、適宜１つまたはそれ以上の付属の成分またはアジュバントと共に圧縮または成形して製造されてもよい。圧縮された錠剤は、適切な機械により、流動性のよい形状（free flowing form）、例えば粉末または顆粒の活性成分を、適宜結合剤、滑沢剤、不活性な希釈剤、界面活性剤または分散剤と混合して圧縮することにより製造されてもよい。成形錠剤は、適切な機械により、粉末の化合物を不活性な液体の希釈剤で湿潤させた混合物を成形して製造してもよい。各錠剤は、好ましくは、約０．０５ｍｇから約５ｇの活性成分を含み、各カシェ剤またはカプセル剤は、好ましくは約０．０５ｍｇから約５ｇの活性成分を含む。

例えば、ヒトへの経口投与を意図する製剤は、総組成の約５から９５％の適当で都合のよい量の担体原料を配合した約０．５ｍｇから約５ｇの活性薬剤を含んでいてもよい。投与単位剤形は一般的に約１ｍｇから約２ｇの活性成分、典型的には２５ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、２００ｍｇ、３００ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇ、６００ｍｇ、８００ｍｇまたは１０００ｍｇを含む。

非経口投与に適した本発明の医薬組成物は、活性成分を含んだ水溶液または水懸濁剤として製造されてもよい。適切な界面活性剤、例えばヒドロキシプロピルセルロースが含有され得る。グリセロール、液体ポリエチレングリコール、またはそれらの油混合物を用いて分散液を製造することもできる。さらに、微生物の有害な成長を防ぐために、保存剤を含んでいてもよい。

注射による使用に適した本発明の医薬組成物は、滅菌水による水溶液または分散液を含む。さらに、該組成物は、かかる滅菌された注射用溶液または分散液の即時調製のための滅菌された粉末の形態を取っていてもよい。全ての場合において、最終的な注射用の形態は滅菌された状態でなくてはならず、簡単に注射できるような効果的な液体でなくてはならない。該医薬組成物は、製造および保存条件において安定でなくてはならず；故に、好ましくは、バクテリアや真菌による汚染作用から保護されるべきである。担体は例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコールおよび液体ポリエチレングリコール）、植物油、それらの適切な混合物を含む溶媒でも分散媒体でもよい。

本発明の医薬組成物は、局所使用に適した剤形、例えば噴霧剤、クリーム剤、軟膏剤、ローション剤、散布剤などでもよい。さらに、該組成物は、経皮装置における使用に適した剤形でもよい。これらの製剤は、本発明の化合物、またはその医薬的に許容される塩を一般的な製造方法により含有する。例えば、クリーム剤または軟膏剤は親水性材料と水を、約５ｗｔ％から約１０ｗｔ％の化合物と混合し、目的の固さを有するクリーム剤または軟膏剤を生成することにより製造される。

本発明の化合物の医薬組成物は、経直腸投与に適した剤形（ここで、担体は固体である）でもよい。混合物が投与単位の座剤を形成することが望ましい。適切な担体は、例えばココアバターおよび該分野で一般的に用いられる別の材料である、座剤は便宜上、まず組成物を軟化または融解させた担体と混合し、次いで冷却、成形することにより製造されてもよい。

前述の担体成分に加え、上記の医薬製剤は、適当な１つまたはそれ以上の追加の担体成分を希釈剤、緩衝剤、香料、結合剤、界面活性剤、増粘剤、滑沢剤、保存剤（抗酸化剤を含む）などを含んでいてもよい。さらに、該製剤を目的のレシピエントの血液と等張に保つために別のアジュバントを含んでいてもよい。本発明の化合物またはその医薬的に許容される塩を含む組成物は、粉剤、または濃縮液剤の形態で製造されてもよい。

一般的に、上で示した病態の治療には１日あたり約０．０１ｍｇ／ｋｇから約１５０ｍｇ／ｋｇ体重のオーダーの投与レベルが有用であり、あるいは１日あたり約０．５ｍｇから約７ｇが有用である。例えば、肥満は１日あたり、体重１ｋｇあたり約０．０１から５０ｍｇの化合物の投与で効果的に治療され得、あるいは患者１日あたり約０．５ｍｇから約３．５ｇである。

しかしながら、いずれの特定の患者における特定の投与レベルは、様々な因子、例えば年齢、体重、全体的な健康状態、性別、食事、投与時間、投与経路、排泄速度、薬の組み合わせおよび治療下にある特定の疾患の重篤度に依存することは理解されるべきである。

本発明の化合物は、ＧＰＲ１１９および適宜ＤＰＰ−ＩＶが関連する病態または疾患の治療に使用され得る。

故に、本発明はまた、ＧＰＲ１１９および適宜ＤＰＰ−ＩＶが関与する疾患または病態の治療方法であって、治療上有効量の本発明の化合物またはその医薬的に許容される塩を治療が必要な対象に投与することを特徴とする方法を提供する。かかる疾患または病態は、糖尿病、肥満、耐糖能障害、インスリン抵抗性および糖尿病合併症（例えば神経症、腎症、網膜症、白内障、心血管系合併症ならびに脂質代謝異常)である。また、摂取した脂肪に異常な感受性を有し機能性胃腸症を発症する患者の治療方法も提供される。本発明の化合物はまた、代謝性疾患、例えばメタボリックシンドローム（シンドロームＸ）、耐糖能障害、高脂血症、高トリグリセライド血症、高コレステロール血症、低ＨＤＬレベルおよび高血圧の治療に用いられ得る。

本発明はまた、２型糖尿病の治療方法であって、治療上有効量の本発明の化合物またはその医薬的に許容される塩を治療が必要な患者に投与することを特徴とする方法を提供する。

本発明はまた、肥満、メタボリックシンドローム（シンドロームＸ）、耐糖能障害、高脂血症、高トリグリセライド血症、高コレステロール血症、低ＨＤＬレベルおよび高血圧の治療方法であって、治療上有効量の本発明の化合物またはその医薬的に許容される塩を治療が必要な患者に投与することを特徴とする方法を提供する。

本発明はまた、本発明の化合物またはその医薬的に許容される塩の、上と同義の病態の治療における使用を提供する。

本発明はまた、本発明の化合物またはその医薬的に許容される塩の、上と同義の病態の治療薬の製造における使用を提供する。

本発明の方法における用語「治療」は、治療的および予防的治療を含む。

本発明の化合物は、糖尿病の治療のための既知の化合物または組み合わせに比べ、有利な性質を示し得る。

本発明の化合物またはその医薬的に許容される塩は、単独、または１つもしくはそれ以上の別の治療的に活性な化合物との組み合わせで投与されてもよい。別の治療的に活性な化合物は、本発明の化合物と同じ、または異なる疾患または病態の治療のためのものでもよい。治療的に活性な化合物は、同時、時間差、または別々に投与されてもよい。

本発明の化合物は、肥満および／または糖尿病の治療のための別の活性な化合物、例えばインスリンならびにインスリンアナログ、胃リパーゼ阻害剤、膵リパーゼ阻害剤、スルホニル尿素およびそのアナログ、ビグアナイド系化合物（例えば、メトホルミン）、α２アゴニスト、グリタゾン、ＰＰＡＲ−γアゴニスト、ＰＰＡＲ−α／γアゴニスト混合物、ＲＸＲアゴニスト、脂肪酸酸化阻害剤、α−グルコシダーゼ阻害剤、β−アゴニスト、ホスホジエステラーゼ阻害剤、脂質低下剤、グリコーゲンホスホリラーゼ阻害剤、抗肥満薬（例えば、膵リパーゼ阻害剤、ＭＣＨ−１アンタゴニストおよびＣＢ−１アンタゴニスト（またはインバースアゴニスト））、アミリンアンタゴニスト、リポキシゲナーゼ阻害剤、ソモスタチンアナログ、グルコキナーゼ活性化剤、グルカゴンアンタゴニスト、インスリンシグナリングアゴニスト、ＰＴＰ１Ｂ阻害剤、糖新生阻害剤、抗脂肪分解剤、ＧＳＫ阻害剤、ガラニン受容体アゴニスト、食欲低下薬、ＣＣＫ受容体アゴニスト、レプチン、セロトニン作動性／ドパミン作動性抗肥満薬、再取込み阻害剤（シブトラミン）、ＣＲＦアンタゴニスト、ＣＲＦ結合タンパク質、甲状腺ホルモン様化合物、アルドース還元酵素阻害剤、グルココルチコイド受容体アンタゴニスト、ＮＨＥ−１阻害剤またはソルビトール脱水素酵素阻害剤と共に投与されてもよい。

本発明の化合物またはその医薬的に許容される塩、および少なくとも１つの別の薬剤、例えば糖尿病または肥満の別の治療薬の組み合わせの療法は、本発明のさらなる態様を表す。

本発明はまた、哺乳類（例えばヒト）における糖尿病の治療方法であって、治療上有効量の本発明の化合物またはその医薬的に許容される塩、および別の薬剤、例えば糖尿病または肥満の別の１つの治療薬を治療が必要な哺乳類に投与することを特徴とする方法を提供する。

本発明はまた、本発明の化合物またはその医薬的に許容される塩、および別の薬剤の糖尿病の治療における使用を提供する。

本発明はまた、本発明の化合物またはその医薬的に許容される塩の、糖尿病の治療のために別の薬剤と組み合わせて用いる薬物の製造における使用を提供する。

本発明の化合物またはその医薬的に許容される塩、および別の薬剤は同時投与されてもよく、あるいは時間差もしくは別々に投与されてもよい。

同時投与は、本発明の化合物またはその医薬的に許容される塩および別の薬剤を含む製剤の投与、または各薬剤の異なる製剤の同時もしくは時間差での投与を含む。本発明の化合物またはその医薬的に許容される塩、および別の化合物の薬理学的プロファイルが許すなら、２つの薬剤の同時投与が好ましい。

本発明はまた、本発明の化合物またはその医薬的に許容される塩、および別の化合物の糖尿病の治療のための薬物の製造における使用を提供する。

本発明はまた、本発明の化合物またはその医薬的に許容される塩、および別の抗糖尿病薬、および医薬的に許容される担体を含む医薬組成物を提供する。本発明はまた、上記の方法におけるかかるその使用を包含する。

本明細書中の全ての刊行物、例えば、限定されないが、本明細書中で引用される特許及び特許出願は、個々の刊行物が引用により完全に説明されたかのように具体的かつ個別に組み入れられるよう、引用によりここに取り込む。

本発明は以下の実施例の言及により記載されるが、これは例示が目的であり、本発明の範囲の限定を意図するものではない。

材料および方法
特に断らない限り、カラムクロマトグラフィはＳｉＯ_２（４０−６３メッシュ）で行った。ＬＣＭＳデータは以下のようにして得た：Ａｔｌａｎｔｉｓ ３μＣ１８ カラム（３．０ｘ２０．０ｍｍ、流速＝０．８５ｍＬ／分）、０．１％ ＨＣＯ_２Ｈを含んだＨ_２Ｏ−ＣＨ_３ＣＮ溶液で溶出、６分間、２２０ｎｍでＵＶ検出。グラジエントの情報：０．０−０．３分、１００％Ｈ_２Ｏ；０．３−４．２５分：１０％Ｈ_２Ｏ−９０％ＣＨ_３ＣＮに上昇；４．２５−４．４分：１００％ＣＨ_３ＣＮに上昇；４．４−４．９分：１００％ＣＨ３ＣＮでホールド；４．９−６．０分：１００％Ｈ_２Ｏに回復。質量分析はｐｏｓｉｔｉｖｅ（ＥＳ^＋）またはｎｅｇａｔｉｖｅ（ＥＳ⁻）イオンモードのエレクトロスプレーイオン化ソースを用いて行った。

ＬＣＭＳデータ（方法２）は以下のようにして得た：Ｃｈｒｏｍｏｌｉｔｈ ＳｐｅｅｄＲＯＤカラム（４．６ｘ５０．０ モノリス、流速＝３．０ｍＬ／分）、０．１％ＴＦＡを含んだＨ_２Ｏ−ＣＨ_３ＣＮ溶液で溶出、３分間、２２０ｎｍでＵＶ検出。グラジエントの情報：０−２分：９９％Ｈ_２Ｏ、１％ＭｅＣＮから１００％ＭｅＣＮ；２−３分：１００％ＣＨ_３ＣＮでホールド。質量分析は、ｐｏｓｉｔｉｖｅ（ＥＳ^＋）モードのエレクトロスプレーイオン化ソースを用いて行った。

キラル−ＨＰＬＣは、Ｄａｉｃｅｌ ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＩＡ ２５０ｘ２０ｍｍ、５μＭカラムで行った。

略語および頭字語：Ａｃ：アセチル；ＡｃＯＨ：酢酸；ＡＤＤＰ：アゾジカルボン酸ジピペリジド；Ｂｏｃ：ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル；ｔ−Ｂｕ：ｔｅｒｔ−Ｂｕｔｙｌ；ＤＢＵ：１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン；ＤＣＥ：１，２−ジクロロエタン、ＤＣＭ：ジクロロメタン；ＤＩＰＥＡ：Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチレンアミン；ＤＭＦ：ジメチルホルムアミド；ＥＤＣＩ：１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルガルボジイミド 塩酸塩；ＥｔＯＨ：エタノール；Ｅｔ：エチル；ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル；ｅｑ：当量；ｈ：時間；ｍｉｎ：分；ＨＡＴＵ：Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム ヘキサフルオロホスフェート；ＨＣｌ：塩酸；ＨＰＬＣ：高速液体クロマトグラフィ；Ｈ２Ｏ：水；ＨＯＢｔ：１−ヒドロキシベンゾトリアゾール；ＩＨ：イソへキサン；ＬｉＨＭＤＳ：リチウムビス（トリメチルシリル）アミド；ＭｅＯＨ：メタノール；Ｍｅ：メチル；ＭｅＣＮ：アセトニトリル；ＭＰ：Ｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓポリスチレン；ＭｇＳＯ_４：硫酸マグネシウム；ＭＴＢＥ：メチル ｔｅｒｔ−ブチルエーテル；Ｎａ_２ＣＯ_３：タン酸ナトリウム；Ｎａ_２ＳＯ_３：亜硫酸ナトリウム；Ｎａ_２ＳＯ_４：硫酸ナトリウム；ＮａＨＣＯ_３：炭酸水素ナトリウム；ＮａＯＨ：水酸化ナトリウム；ＮＨ_４Ｃｌ：塩酸アンモニウム；ＰＢｕ_３：トリ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフィン；ＰＥ−ＡＸカラム：シリカベース四級アミンカラム；ＲＰ：逆相；ＲＴ：保持時間；ｒ．ｔ．：室温；ｓａｔ：飽和；ＳｉＯ_２：シリカ；ＴＢＡＦ：テトラ−ブチルアンモニウムフルオリド；ＴＨＦ：テトラヒドロフラン；ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸；ＴＦＡＡ：無水トリフルオロ酢酸：ＴＭＳ：トリメチルシリル。

以下の化合物の合成は他で記載されている：［１−（３−イソプロピル−［１，２，４］オキサジアゾール−５−イル）ピペリジン−４−イル］メタノール：Jing et. al.、WO2008/070692；（４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル カルバミン酸エステル：Ackermann et. al., WO02/014267；４−カルボキシメトキシピペリジン−１−カルボン酸 イソプロピルエステル：Fyfe et.al.、WO2007/116229。他の全ての化合物は市販の供給源から利用可能である。

製造１：４−ヒドロキシメチル ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

４−ピペリジン メタノール（１２ｇ、１０４．１２ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２００ｍＬ）溶液にＤＩＰＥＡ（２３．６ｍＬ、１３５．４２ｍｍｏｌ）を加え、反応物を０℃に冷却した。クロロギ酸イソプロピル（１２０ｍＬ、１１９．７９ｍｍｏｌ）のトルエン（１２０ｍＬ）溶液を１．５時間かけて滴下して加え、次いで反応液を室温に昇温し、さらに２．５時間撹拌した。混合物を１Ｍ ＨＣｌ溶液（２００ｍＬ）で分液処理し、有機層を除去し、１Ｍ ＨＣｌ溶液（２００ｍＬ）、ブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、乾燥した（ＭｇＳＯ_４）。溶媒を減圧除去し、表題化合物を得た：
¹H NMR δ_H (400MHz, CDCl₃)： 4.96 - 4.86 (m, 1H), 4.09 - 4.25 (m, 2H), 3.51 (d, J = 6.2 Hz, 2H), 2.80 - 2.68 (m, 2H), 1.78 - 1.62 (m, 3H), 1.49 - 1.41 (m, 1H), 1.29 - 1.09 (m, 8H).

製造２：４−ヒドロキシピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

表題化合物を、４−ヒドロキシピペリジンから、製造１で説明される方法と類似の方法を用いて製造した：
¹H NMR δ_H (400MHz, CDCl₃)： 4.96 - 4.87 (m, 1H), 3.94 - 3.82 (m, 3H), 3.13 - 3.04 (m, 2H), 1.92 - 1.82 (m, 2H), 1.57 - 1.54 (m, 1H), 1.54 - 1.42 (m, 2H), 1.26 - 1.22 (m, 6H).

製造３：４−（４−ブロモフェノキシ）ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

４−ヒドロキシピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造２、４．６８ｇ、２５ｍｍｏｌ）、４−ブロモフェノール（５．１９ｇ、３０ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（７．８７ｇ、２５ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１２５ｍＬ）に溶解し、ジｔｅｒｔ−ブチルアゾジカルボキシレート（６．９０ｇ、３０ｍｍｏｌ）を２０分間かけて滴下して加えた。反応物を室温で７２時間撹拌し、次いでＤＣＭ（１５０ｍＬ）で希釈した。有機溶液を２Ｍ ＮａＯＨ溶液（２ｘ２００ｍＬ）、ブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、次いで乾燥した（ＭｇＳＯ_４）。溶媒を減圧除去し、カラムクロマトグラフィ（ＳｉＯ_２、ＩＨ：ＥｔＯＡｃ、９０：１０、８０：２０、７０：３０）で精製し、表題化合物を得た：
保持時間＝4.09分
m/z（ES⁺）=342.1,344.0［M+H］⁺．

製造４：４−（５−ブロモピリジン−２−イルオキシ）ピペリジン−１−カルボン酸 イソプロピルエステル

アルゴン下の４−ヒドロキシピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造２、１０ｇ、５３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ乾燥溶液を０℃に冷却した。水素化ナトリウム（６０％／ミネラル油、２．５４ｇ、６４ｍｍｏｌ）を一度に加えた。反応混合物上を室温に昇温し、さらに４５分間撹拌した。５−ブロモ−２−シクロピリジン（１２．３２ｇ、６４ｍｍｏｌ）を加え、反応物を６０℃で４０時間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、ＥｔＯＡｃを加えた。有機溶液をブラインで洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、溶媒を減圧除去した。粗物質をイソ−ヘキサン（２ｘ６ｍＬ)から、次いで実施例エチルエーテルからトリチュレートし、表題化合物をえた：保持時間＝3.98分;m/z (ES⁺) = 343.0, 345.0 [M + H]⁺.

製造５：４−（５-ブロモピリジン−２−イルオキシメチル）ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

表題化合物を４−ヒドロキシメチル ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造１、２．５ｇ、１２．４２ｍｍｏｌ）および５−ブロモ−２−シクロピリジン （２．８ｇ、１４．４ｍｍｏｌ）から製造４で説明される方法と類似の方法を用いて製造した：保持時間＝4.20分; m/z (ES⁺) = 357.1, 359.1 [M + H]⁺.

製造６：４−メタンスルホニルオキシメチルピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

アルゴン下の４−ヒドロキシメチルピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造１、２．５ｇ、１２．４２ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（３０ｍＬ）乾燥溶液にトリエチルアミン（２．０８ｍＬ、１４．９ｍｍｏｌ）を加え、混合物を０℃に冷却した。メタンスルホニルクロリド（１．０６ｍＬ、１３．６６ｍｍｏｌ）を４分間かけて滴下して加え、反応物を０℃で３０分間撹拌した。混合物をＤＣＭ（５０ｍＬ）で希釈し、有機層を水（２ｘ５０ｍＬ）、０．５Ｍ ＨＣｌ溶液（２ｘ５０ｍＬ）、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥した（ＭｇＳＯ_４）。溶媒を減圧除去し、表題化合物を得た：¹H NMR δ_H (400MHz, DMSO-d₆)： 4.95 - 4.85 (m, 1H), 4.25-4.18 (m, 2H), 4.17 - 4.07 (m, 2H), 3.31 (s, 3H), 2.98 - 2.79 (m, 2H), 2.08 - 1.96 (m, 1H), 1.85 - 1.75 (m, 2H), 1.35 - 1.17 (m, 8H).

製造７：４−（４−ブロモフェノキシメチル）ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

アルゴン下の４−メタンスルホニルオキシメチルピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造６、３．４ｇ、１２．１７ｍｍｏｌ）および４−ブロモフェノール（２．３２ｇ、１３．３９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（７０ｍＬ）溶液に炭酸カリウム（３．３６ｇ、２４．３４ｍｍｏｌ）を加え、反応物を９０℃で１６時間加熱した。反応溶媒を減圧除去し、粗残渣をＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）に溶解し、水（３ｘ１００ｍＬ）で洗浄した。水層を合わせ、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせ、飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（２ｘ１５０ｍＬ）、ブライン（１５０ｍＬ）で洗浄し、次いで乾燥した（ＭｇＳＯ_４）。溶媒を減圧除去し、表題化合物を得た：保持時間＝4.36分; m/z (ES⁺) = 356.2, 358.2 [M + H]⁺.

製造８：１−ピペリジン−４−イル エタノール

α−メチル−４−ピリジン メタノール（３．７ｇ、３０ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（１００ｍＬ）溶液にＡｃＯＨ（１．９ｍＬ、３３ｍｍｏｌ）および酸化白金（０．５ｇ、２．２ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物を水素雰囲気下、室温で１６時間撹拌した。混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮した。残渣をＭｅＯＨに溶解し、それにＮａＯＨ（１．６ｇ、４０ｍｍｏｌ）および水（１．６ｍＬ）のＭｅＯＨ溶液を加えた。反応物を３０分間開撹拌し、溶媒を減圧除去し、得られた残渣をジエチルエーテルに３０分間懸濁した。混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮し、表題化合物を得た：¹H NMR δ_H (400MHz, CDCl₃)： 3.63 - 3.55 (m, 1H), 3.39 - 3.31 (m, 2H), 2.7 - 2.6 (m, 2H), 2.01 - 1.92 (m, 2H), 1.76 - 1.69 (m, 1H), 1.67 - 1.54 (m, 2H), 1.51 - 1.42 (m, 1H), 1.1 - 1.14 (m, 3H).

製造９：４−（１−ヒドロキシエチル）ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

表題化合物を１−ピペリジン−４−イル エタノール（製造８、２．７ｇ、２０．９３ｍｍｏｌ）から製造１で説明される方法を用いて製造した：¹H NMR δ_H (400MHz, CDCl₃)： 4.97 - 4.87 (m, 1H), 4.28 - 4.14 (m, 2H), 3.66 - 3.55 (m, 1H), 2.77 - 2.63 (m, 2H), 1.88 - 1.81 (m, 1H), 1.67 - 1.59 (m, 1H), 1.48 - 1.38 (m, 1H), 1.26 - 1.16 (m, 11H).

製造１０：４−[１−（５−ブロモピリジン−２−イルオキシ）エチル］ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

４−(１−ヒドロキシエチル）ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造９、７．４ｇ、５７．３６ｍｍｏｌ）を２−シクロ−５−ブロモピリジン（１３．２ｇ、６８．８ｍｍｏｌ）と製造４で説明される方法と類似の方法を用いて反応させることにより表題化合物を製造した：保持時間＝4.34分; m/z (ES⁺) = 371.2, 373.2 [M + H]⁺.

製造１１：４−(１−メタンスルホニルオキシエチル）ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

表題化合物を４−(１−ヒドロキシエチル）ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造９、４．３ｇ、２０ｍｍｏｌ）から製造６で説明される方法と類似の方法を用いて製造した：¹H NMR δ_H (400MHz, CDCl₃)： 4.98 - 4.86 (m, 1H), 4.69 - 4.61 (m, 1H), 4.31 - 4.17 (m, 2H), 3.01 (s, 3H), 2.76 - 2.66 (m, 2H), 1.84 - 1.63 (m, 3H), 1.44 - 1.38 (m, 3H), 1.35 - 1.22 (m, 8H).

製造１２：４−[１−（４−ブロモフェノキシ）エチル］ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

４−(１−メタンスルホニルオキシエチル）ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造１１、１００ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）を製造４に説明される条件を用いて４−ブロモフェノール（６９ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）と反応させた。ワークアップは酢酸エチルと水による反応混合物の分液処理を含む。有機相を分離し、１Ｍ ＮａＯＨ溶液、水、ブラインで洗浄し、乾燥した（ＭｇＳＯ_４）。溶媒を減圧除去し、次いでカラムクロマトグラフィ（ＳｉＯ_２、ＩＨ：ＥｔＯＡｃ、４：１）で精製し、表題化合物を得た：保持時間＝4.5分; m/z (ES⁺) = 370.2, 372.1 [M + H]⁺.

製造１３：４−（４−ブロモピリジン−２−イルオキシメチル）ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

４−ヒドロキシメチル ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造１、１．１ｇ、５．４７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液に水素化ナトリウム（６０％／ミネラル油、２１８ｍｇ、５．４７ｍｍｏｌ）を加え、反応物を室温で１時間撹拌した。４−ブロモ−２−シクロピリジン（０．６２ｍＬ、５．４７ｍｍｏｌ）を加え、反応物を９０℃で４時間加熱し、水（１０ｍＬ）でクエンチした。有機溶液をＥｔＯＡｃ（３ｘ１５ｍＬ）で抽出し、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、溶媒を減圧除去した。カラムクロマトグラフィ（ＳｉＯ_２、ＩＨ：ＥｔＯＡｃ、９：１）で精製し、表題化合物を得た：保持時間＝4.16分; m/z (ES⁺) = 357.1, 359.1 [M + H]⁺.

製造１４：アゼチジン−３−オール

１−ベンズヒドリルアゼチジン−３−オール（３０．５ｇ、１３０ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（５００ｍＬ）溶液に前もって混合したトリエチルアミン（５５ｍＬ、３９０ｍｍｏｌ）およびギ酸（１５ｍＬ、３９０ｍｏｌ）のエタノール（１００ｍＬ）溶液を加えた。パラジウム炭素（２．４０ｇ）を加え、混合物を３時間加熱還流した。混合物を室温に冷却し、ｃｅｌｉｔｅを通して濾過し、表題化合物をエタノール溶液として得た。

製造１５：１−（４−イソプロピルベンジル）アゼチジン−３−オール

アゼチジン−３−オール（製造１４、６．８４ｍｍｏｌ）および４−イソプロピルベンズアルデヒド（８．２１ｍｍｏｌ）のエタノール（４５ｍＬ）溶液に酢酸（０．５ｍＬ）を加えた。１時間撹拌後、ナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（８．２１ｍｍｏｌ）を加え、撹拌を７２時間続けた。塩酸水溶液（１Ｍ、３０ｍＬ）を加え、混合物を濃縮してエタノールを除去した。混合物をジエチルエーテル（ｘ２）で抽出し、残った水性の混合物に２Ｍ ＮａＯＨ溶液を加えて塩基性化した。該溶液をＤＣＭ（ｘ３）で抽出した。ＤＣＭ抽出物をあわせ、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、濃縮し、表題化合物を得た；保持時間＝2.00分; m/z (ES⁺) = 206.1 [M + H]⁺.

製造１６：５−ブロモ−２−[１−（４−イソプロピルベンジル）アゼチジン−３−イルオキシ］ピリジン

アルゴン下の１−（４−イソプロピルベンジル）アゼチジン−３−オール（製造１５、５００ｍｇ、２．４４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液を０℃に冷却した。水素化ナトリウム（６０％／ミネラル油、１２０ｍｇ、２．９２ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温に昇温させた。５−ブロモ−２−シクロピリジン（５６２．４ｍｇ、２．９２ｍｍｏｌ）を加え、反応物を６０℃で１６時間加熱した。溶媒を減圧除去し、カラムクロマトグラフィ（ＳｉＯ_２、ＤＣＭ：ＭｅＯＨ、１００：０、９０：１０）で精製し、表題化合物を得た：保持時間＝2.98分; m/z (ES⁺) = 361.2, 363.2 [M + H]⁺.

製造１７：４−［５−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン−２−イルオキシ]ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

４−（５−ブロモピリジン−２−イルオキシ）ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造４、５．０ｇ、１４．６ｍｍｏｌ）のジオキサン（１００ｍＬ）溶液に酢酸カリウム（４．３ｇ、４３．７ｍｍｏｌ）、［１，１−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ ジクロロパラジウム（１．２ｇ、１．５ｍｍｏｌ）およびビス（ピナコレート）ジボロン（４．４２ｇ、１７．４ｍｍｏｌ）を加えた。アルゴンを通して１５分間混合物をバブルした。反応物を１１０℃で１６時間加熱し、さらに室温で７２時間加熱した。溶媒を減圧除去し、次いでカラムクロマトグラフィ（ＳｉＯ_２、ＤＣＭ）で精製し、表題化合物を得た：保持時間＝4.00分; m/z (ES⁺) = 391.2 [M + H]⁺.

以下の化合物は、製造１７で説明される方法と類似の方法を用いて適当なアリールまたはヘテロアリールブロミドをビス（ピナコレート）ジボロンと反応させることにより製造された：

製造２４：４−（３−ブロモフェノキシメチル）ピペリジン−１−カルボン酸 ｔｅｒｔ−ブチルエステル

製造３で説明される方法を用い、４−ヒドロキシメチルピペリジン−１−カルボン酸 ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１．０７５ｇ、５ｍｍｏｌ）を３−ブロモフェノール（１．０２６ｇ、６ｍｍｏｌ）と反応させることにより表題化合物を製造した：保持時間＝4.50分; m/z (ES⁺) = 370.2, 372.2 [M + H]⁺.

製造２５：４−（３−ブロモフェノキシメチル）ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

４−（３−ブロモフェノキシメチル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（製造２４、１．５ｇ、４．０５ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（８ｍＬ）溶液にＴＦＡ（２ｍＬ）を加え、反応混合物を室温で１５分間撹拌した。混合物をＤＣＭ（１５０ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（１５０ｍＬ）でクエンチした。有機溶液を分離し、ブラインで洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、溶媒を減圧除去した。残渣をＤＣＭ（２０ｍＬ）に再溶解し、ＤＩＰＥＡ（０．８ｍＬ）を加え、０℃に冷却した。シリンジを通してクロロギ酸イソプロピル（１Ｍ／トルエン、４．８６ｍＬ、４．８６ｍｍｏｌ）を加え、反応物を室温に昇温し、さらに１６時間撹拌した。混合物をＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）で希釈し、得られた溶液を１Ｍクエン酸溶液、次いでブラインで洗浄し、乾燥した（ＭｇＳＯ_４）。溶媒を減圧除去し、表題化合物を得た：保持時間＝4.34分; m/z (ES⁺) = 355.2, 357.2 [M + H]⁺.

製造２６：４−［３−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）フェノキシメチル]ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

４−（３−ブロモフェノキシメチル）ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステルのジオキサン溶液（製造２５、４３０ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）に酢酸カリウム（３５５ｍｇ、３．６２ｍｍｏｌ）およびビス（ピナコレート）ジボロン（３６９ｍｇ、１．４５ｍｍｏｌ）に加え、混合物をアルゴンでパージした。［１，１−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（９８ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を加え、混合物をさらに５分間パージし、１００℃で２０時間加熱した。この後、ｃｅｌｉｔｅを加え、混合物を濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。得られた有機物の濾液を飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（１５０ｍＬ）、次いでブライン（１５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥した（ＭｇＳＯ_４）。溶媒を減圧除去し、カラムクロマトグラフィ（ＳｉＯ_２、ＩＨ：ＥｔＯＡｃ、７：３）で精製し、表題化合物を得た：保持時間＝4.44分; m/z (ES⁺) = 404.3 [M + H]⁺.

製造２７：（Ｓ）−２−アミノ−３−（２−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）プロピオン酸 臭化水素酸塩

無水酢酸（５４０ｇ、５．３０ｍｏｌ）を撹拌下の２−フルオロ−４−メトキシベンズアルデヒド（２４０ｇ、１．５６ｍｏｌ）、Ｎ−アセチルグリシン（２１９ｇ、１．８７ｍｏｌ）および酢酸ナトリウム（１２８ｇ、１．５６ｍｏｌ）の混合物に周囲温度で加えた。懸濁物を１００℃で１８時間加熱した。溶液を周囲温度に冷却し、残渣をＤＣＭ（５ｘ５００ｍＬ）および水（５ｘ２００ｍＬ）で交互に抽出した。残った結晶性の固形物を乾燥し、４−[１−（２−フルオロ−４−メトキシフェニル）メタ−（Ｅ）−イリデン］−２−メチル−４Ｈ−オキサゾール−５−オンを得た。ＤＣＭ抽出物を合わせ、乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、減圧濃縮した。残渣をＥｔＯＨから２回再結晶化し、さらなる４−[１−（２−フルオロ−４−メトキシフェニル）メタ−（Ｅ）−イリデン]−２−メチル−４Ｈ−オキサゾール−５−オンを得た：保持時間＝3.00分 (LCMS 方法２).

ジオキサン（７００ｍＬ）中の４−[１−（２−フルオロ−４−メトキシフェニル）メタ−（Ｅ）−イリデン］−２−メチル−４Ｈ−オキサゾール−５−オン（１５０．９ｇ、０．６４２ｍｏｌ）に１Ｍ ＨＣｌ溶液（１０００ｍＬ）を加え、混合物を還流条件下で９０分間加熱した。大部分のジオキサンをエバポレートして除去し、水層をＥｔＯＡｃ（ｘ２）およびＤＣＭ（ｘ２）で抽出した。有機層を合わせ、エバポレートし、残渣をＥｔＯＡｃ／ヘプタンから再結晶化し、（Ｚ）−２−アセチルアミノ−３−（２−フルオロ−４−メトキシフェニル）アクリル酸を得た：保持時間＝1.73分 (LCMS 方法2).
（Ｚ）−２−アセチルアミノ−３−（２−フルオロ−４−メトキシフェニル）アクリル酸（３５．０ｇ、１３８ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（６７０ｍＬ）に溶解し、［Ｒｈ（ｃｏｄ）（ＰＰ）］ＯＴｆ（２７７μｍｏｌ）を触媒、（Ｓ，Ｓ）−Ｅｔ−Ｄｕｐｈｏｓ（２７７μｍｏｌ）を配位子として用い、オートクレーブ中８バール、５０℃において９６時間水素付加を行った。溶液を冷却し、エバポレートし、粗生成物をＥｔＯＡｃ（５５０ｍＬ）に溶解した。混合物を６０℃に加熱し、次いでゆっくりとヘプタン（２００ｍＬ）を加え、ゆっくりと周囲温度に冷却した。固形物を単離し、（Ｚ）−２−アセチルアミノ−３−（２−フルオロ−４−メトキシフェニル）アクリル酸を得た。保持時間＝1.21分 (LCMS 方法2).
タンタル（tantal）オートクレーブに（Ｚ）−２−アセチルアミノ−３−（２−フルオロ−４−メトキシフェニル）アクリル酸（７１．０ｇ、２７８ｍｍｏｌ）、臭化水素酸水溶液（４８％、４２０ｍＬ）および酢酸（３２０ｍＬ）を入れ、１０５℃で１６時間加熱した。溶媒をエバポレートし、残渣をジエチルエーテルおよびｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルで順にトリチュレートし、３０℃で３時間減圧乾燥し、表題化合物を得た：保持時間＝0.815分; m/z (ES⁺) = 200.0 [M + H]⁺ (LCMS 方法2).

製造２８：（Ｓ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（２−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）プロピオン酸

（Ｓ）−２−アミノ−３−（２−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）プロピオン酸 臭化水素酸塩（製造２７、１５ｇ、５３．５ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１５．６４ｍＬ、１１２．２５ｍｍｏｌ）のジオキサン（１５０ｍＬ）および水（１５０ｍＬ）混合物による懸濁液（０℃）にジ炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（１２．８４ｇ、５８．８５ｍｍｏｌ）を加えた。得られた懸濁液を室温に昇温し、４８時間撹拌し、ジオキサンを減圧除去した。得られた残渣をＥｔＯＡｃと水で分液処理し、次いで水相を分離し、１Ｍクエン酸溶液でｐＨ３に酸性化した。生成物をＥｔＯＡｃに抽出し、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、溶媒を減圧除去し、表題化合物を得た：保持時間＝2.82分, m/z (ES⁺) = 300.1 [M + H]⁺.

製造２９：（Ｓ）−［２−（（Ｓ）−２−カルバモイルピロリジン−１−イル）−１−（２−フルオロ−４−ヒドロキシベンジル）−２−オキソエチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル

（Ｓ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（２−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）プロピオン酸（製造２８、１５．３ｇ、５１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２００ｍＬ）溶液にＥＤＣＩ（１２．２１ｇ、６３．７５ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（６．９４ｇ、５１ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１７．７３ｍＬ、１０２ｍｍｏｌ）を加え、反応物を２０分間撹拌した。混合物をＬ−（−）−プロリンアミド（６．５１ｇ、５６．１ｍｍｏｌ）で処理し、撹拌を室温で１８時間続けた。溶媒を減圧除去し、得られた残渣をＤＣＭで希釈した。有機溶液を２Ｍ Ｎａ_２ＣＯ_３溶液、次いで０．１Ｍクエン酸溶液で洗浄し、乾燥した（ＭｇＳＯ_４）。溶媒を減圧除去し、表題化合物を得た：保持時間＝2.67分, m/z (ES⁺) = 396.3 [M + H]⁺.

製造３０：（Ｓ）−トリフルオロメタンスルホン酸４−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（（Ｓ）−２−カルバモイルピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル］−３−フルオロフェニルエステル

（Ｓ）−［２−（（Ｓ）−２−カルバモイルピロリジン−１−イル）−１−（２−フルオロ−４−ヒドロキシベンジル）−２−オキソエチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（製造２９、１７．６５ｇ、４４．４６ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（８．５ｍＬ、４８．９１ｍｍｏｌ）のＭｅＣＮ溶液（０℃）にＮ−フェニルトリフルオロメタンスルホンイミド（１５．９４ｇ、４４．４６ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を室温で２時間撹拌し、溶媒を減圧除去した。残渣をカラムクロマトグラフィ（ＳｉＯ_２、ＥｔＯＡｃ）で精製し、表題化合物を得た：保持時間＝3.42分, m/z (ES⁺) = 528.3 [M + H]⁺.

製造３１：（Ｓ）−トリフルオロメタンスルホン酸４−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（（Ｓ）−２−シアノピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル]−３−フルオロフェニルエステル

（Ｓ）−トリフルオロメタンスルホン酸４−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（（Ｓ）−２−カルバモイルピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル］−３−フルオロフェニルエステル（製造３０、７．４２ｇ、１４．０８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１５０ｍＬ）溶液にピリジン（２．２６ｍＬ、２８．１６ｍｍｏｌ）を加え、混合物を０℃に冷却した。反応物をＴＦＡＡ（９．７８ｍＬ、７０．４ｍｍｏｌ）で処理し、５分間撹拌し、ＤＣＭ（１００ｍＬ）で希釈し、飽和Ｎａ_２ＣＯ_３溶液で洗浄し、乾燥した（ＭｇＳＯ_４）。溶媒を減圧除去し、カラムクロマトグラフィ（ＳｉＯ_２、ＩＨ：ＥｔＯＡｃ、４：１）で精製し、表題化合物を得た：¹H NMR δ_H(400MHz, DMSO-d₆)： 7.59 - 7.48 (m, 2H), 7.35 - 7.22 (m, 2H), 4.76 - 4.70 (m, 1H), 4.52 - 4.42 (m, 1H), 3.56 - 3.34 (m, 2H), 3.11 - 2.99 (m, 1H), 2.91 - 2.81 (m, 1H), 2.23 - 1.84 (m, 4H), 1.24 (s, 9H).

製造３２：（Ｓ）−［１−（２−フルオロ−４−ヒドロキシベンジル）−２−オキソ−２−ピロリジン−１−イルエチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル

製造２９で説明される方法を用い、（Ｓ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（２−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）プロピオン酸（製造２８、４．２ｇ、１４ｍｍｏｌ）をピロリジン（１．２７ｍＬ、１５．４ｍｍｏｌ）と反応させることにより、表題化合物を製造した：保持時間＝2.97分, m/z (ES⁺) = 353.3 [M + H]⁺.

製造３３：（Ｓ）−トリフルオロメタンスルホン酸−４−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−オキソ−３−ピロリジン−１−イルプロピル）−３−フルオロフェニルエステル

製造３０で説明される方法を用い、（Ｓ）−［１−（２−フルオロ−４−ヒドロキシベンジル）−２−オキソ−２−ピロリジン−１−イルエチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（製造３２、５ｇ、１４．０ｍｍｏｌ）をＮ−フェニルトリフルオロメタンスルホンイミド（５．５ｇ、１５．４ｍｍｏｌ）と反応させることにより、表題化合物を製造した：保持時間＝3.92分, m/z (ES⁺) = 485.3 [M + H]⁺.

製造３４：（Ｓ）−［１−（２−フルオロ−４−ヒドロキシベンジル）−２−（（Ｓ）−３−フルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル

製造２９で説明される方法を用い、（Ｓ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（２−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）プロピオン酸（製造２８）を（Ｓ）−３−フルオロピロリジン塩酸塩と反応させることにより、表題化合物を製造した：保持時間＝2.96分, m/z (ES⁺) = 371.2 [M + H]⁺.

製造３５：（Ｓ）−トリフルオロメタンスルホン酸４−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（（Ｓ）−３−フルオロピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル]３−フルオロフェニルエステル

製造３０で説明される方法を用い、（Ｓ）−[１−（２−フルオロ−４−ヒドロキシベンジル）−２−（（Ｓ）−３−フルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（製造３４、４．４２ｇ、１１．９４ｍｍｏｌ）をＮ−フェニルトリフルオロメタンスルホンイミド（４．６ｇ、１２．８７ｍｍｏｌ）と反応させることにより表題化合物を製造した：保持時間＝3.77分, m/z (ES⁺) = 503.1 [M + H]⁺.

製造３６：（Ｓ）−［２−（３，３−ジフルオロピロリジン−１−イル）−１−（２−フルオロ−４−ヒドロキシベンジル）−２−オキソエチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル

製造２９で説明される方法と類似の方法を用い、ただしトリエチルアミンを塩基として用いて（Ｓ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（２−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）プロピオン酸（製造２８）を３，３−ジフルオロピロリジン塩酸塩と反応させることにより表題化合物を製造した：保持時間＝3.13分, m/z (ES⁺) = 389.2 [M + H]⁺.

製造３７：（Ｓ）−トリフルオロメタンスルホン酸４−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（３，３−ジフルオロピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル]３−フルオロフェニルエステル

製造３０で説明される方法を用い、（Ｓ）−［２−（３，３−ジフルオロピロリジン−１−イル）−１−（２−フルオロ−４−ヒドロキシベンジル）−２−オキソエチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（製造３６、４．４２ｇ、１１．９４ｍｍｏｌ）をＮ−フェニルトリフルオロメタン スルホンイミド（４．６ｇ、１２．８７ｍｍｏｌ）と反応させることにより表題化合物を製造した：保持時間＝3.93分, m/z (ES⁺) = 521.1 [M + H]⁺.

製造３８：（Ｓ）−４−（５−｛４−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（３，３−ジフルオロピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル]−３−フルオロフェニル}ピリジン−２−イルオキシ）ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

４−［５−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン−２−イルオキシ]ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造１７、２５０ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（４．０ｍＬ）および水（１．３ｍＬ）混合物溶液に（Ｓ）−トリフルオロメタンスルホン酸４−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（３，３−ジフルオロピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル］３−フルオロフェニルエステル（製造３７、２７８ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）、［１，１−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（４４ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（２２３μＬ、１．６ｍｍｏｌ）を加え、反応物をマイクロ波反応器内において８０℃で２０分間加熱した。混合物をＥｔＯＡｃに溶解し、ブラインで洗浄し、乾燥した（ＭｇＳＯ_４）。溶媒を減圧除去し、カラムクロマトグラフィ（ＳｉＯ_２、ＩＨ：ＥｔＯＡｃ、１００：０、９０：１０、８０：２０、７０：３０、５０：５０、０：１００）で精製し、表題化合物を得た：保持時間＝4.23分; m/z (ES⁺) = 635.3 [M + H]⁺.

製造３９：（Ｓ）−４−（５−｛４−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（（Ｓ）−３−フルオロピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル]−３−フルオロフェニル}ピリジン−２−イルオキシ)ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

製造３８で説明される方法を用い、４−［５−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン−２−イルオキシ]ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造１７、２００ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）および（Ｓ）−トリフルオロメタンスルホン酸４−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（（Ｓ）−３−フルオロピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル]−３−フルオロフェニルエステル（製造３５、２１４ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）から表題化合物を製造した：保持時間＝4.10分; m/z (ES⁺) = 617.4 [M + H]⁺.

製造４０：（Ｓ）−４−（５−｛４−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（（Ｓ）−２−シアノピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル]−３−フルオロフェニル}ピリジン−２−イルオキシメチル）ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

製造３８で説明される方法を用い、４−［５−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン−２−イルオキシメチル]ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造１８、２４０ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）および（Ｓ）−トリフルオロメタンスルホン酸４−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（（Ｓ）−２−シアノピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル]３−フルオロフェニルエステル（製造３１、２５０ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）から表題化合物を製造した：保持時間＝4.32分; m/z (ES⁺) = 638.5 [M + H]⁺.

製造４１：（Ｓ）−４−（５−｛４−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（（Ｓ）−３−フルオロピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル]−３−フルオロフェニル}ピリジン−２−イルオキシメチル）ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

製造３８で説明される方法を用い、４−［５−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン−２−イルオキシメチル]ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造１８、２４２ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）および（Ｓ）−トリフルオロメタンスルホン酸４−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（（Ｓ）−３−フルオロピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル］３−フルオロフェニルエステル（製造３５、２５０ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）から表題化合物を製造した：保持時間＝4.25分; m/z (ES⁺) = 631.5 [M + H]⁺.

製造４２：［２−（（Ｓ）−３−フルオロピロリジン−１−イル）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−オキソエチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル

アルゴン下のｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ（４−ヒドロキシフェニル）酢酸（３．０ｇ、１１．２２ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（３０ｍＬ）およびＤＭＦ（６ｍＬ）混合物溶液にＨＯＢｔ（２．０６ｇ、１３．４７ｍｍｏｌ）およびＥＤＣＩ（２．８０ｇ、１４．５９ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で１５分間撹拌した。反応物に（Ｓ）−３−フルオロピロリジン塩酸塩（１．５５ｇ、１２．３５ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（４．８９ｍＬ、２８．０６ｍｍｏｌ）を加え、撹拌をさらに１６時間続けた。溶媒を減圧除去し、粗物質をＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）および水（１００ｍＬ）で分液処理した。水層を除去し、有機相を水（１００ｍＬ）、ＮａＨＣＯ_３溶液（１００ｍＬ）、１Ｍ ＨＣｌ溶液（１００ｍＬ）、次いでブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥した（ＭｇＳＯ_４）。溶媒を減圧除去し、カラムクロマトグラフィ（ＳｉＯ_２、ＤＣＭ：ＭｅＯＨ、９５：５）で精製し、表題化合物を得た：保持時間＝2.76分; m/z (ES⁺) = 339.3 [M + H]⁺.

製造４３：トリフルオロメタンスルホン酸４−[１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−（（Ｓ）−３−フルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル］フェニルエステル

アルゴン下の［２−（（Ｓ）−３−フルオロピロリジン−１−イル）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−オキソエチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（製造４２、２．２８ｇ、６．７４ｍｍｏｌ）のＭｅＣＮ（１００ｍＬ）溶液を０℃に冷却した。ＤＩＰＥＡ（１．２９ｍＬ、７．４１ｍｍｏｌ）、次いでＮ−フェニルトリフルオロメタン スルホンイミド（２．６５ｇ、７．４１ｍｍｏｌ）を加え、反応物を０℃で１０分間撹拌し、次いで室温で１６時間撹拌した。反応溶媒を減圧除去し、粗残渣をＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）に再溶解した。有機溶液を飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（６０ｍＬ）、次いでブライン（６０ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、溶媒を減圧除去した。カラムクロマトグラフィ（ＳｉＯ_２、ＩＨ：ＥｔＯＡｃ、１：１）で精製し、表題化合物を得た：保持時間＝3.74分; m/z (ES⁺) = 471.3 [M + H]⁺.

製造４４：（Ｓ）−４−｛４’−［１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−（（Ｓ）−３−フルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル］ビフェニル−４−イルオキシ｝ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

アルゴン下のトリフルオロメタンスルホン酸４−[１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−（（Ｓ）−３−フルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル］フェニルエステル（製造４３、５４４ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ）および４−［４−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−フェノキシ］ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造１９、３００ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）のトルエン（５ｍＬ）およびＥｔＯＨ（５ｍＬ）混合物溶液にＮａ_２ＣＯ_３溶液（２Ｍ、１．９３ｍＬ、３．８５ｍｍｏｌ）を加え、混合物を５分間撹拌した。［１，１−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（１２６ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を加え、反応物をアルゴンで５分間バブルし、８０℃で１６時間加熱した。反応溶媒を減圧濃縮し、得られた残渣をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）および水（１００ｍＬ）で分液処理した。有機層を分離し、水（５０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（１００ｍＬ）、次いでブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥した（ＭｇＳＯ_４）。溶媒を減圧除去し、カラムクロマトグラフィ（ＳｉＯ_２、ＩＨ：ＥｔＯＡｃ、１：１）およびキラルＨＰＬＣで精製し、表題化合物を得た：保持時間＝4.06分; m/z (ES⁺) = 584.6 [M + H]⁺.

製造４５：［２−（（Ｓ）−２−カルバモイルピロリジン−１−イル）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−オキソエチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル

ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ（４−ヒドロキシフェニル）酢酸（３．０ｇ、１１．２ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（７５ｍＬ）溶液に（Ｓ）−プロリンアミド（１．５４ｇ、１３．５ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（２．１５ｇ、１１．２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（２．０６ｇ、１３．４７ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（４．６９ｍＬ、２６．９ｍｍｏｌ）を加え、反応物を室温で２４時間撹拌した。反応混合物をＤＣＭで希釈し、１Ｍクエン酸、飽和ＮａＨＣＯ_３溶液、水、次いでブラインで洗浄し、乾燥した（ＭｇＳＯ_４）。溶媒を減圧除去し、カラムクロマトグラフィ（ＳｉＯ_２、ＤＣＭ：ＭｅＯＨ、９５：５、９０：１０）で精製し、表題化合物を得た：保持時間＝2.50分; m/z (ES⁺) = 364.3 [M + H]⁺.

製造４６：トリフルオロメタンスルホン酸４−[１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−（（Ｓ）−２−カルバモイルピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル］フェニルエステル

製造４３で説明される方法を用い、［２−（（Ｓ）−２−カルバモイルピロリジン−１−イル）−１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−オキソエチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（製造４５、１．９３ｇ、３．１３ｍｍｏｌ）から表題化合物を製造した：保持時間＝3.37分; m/z (ES⁺) = 496.4 [M + H]⁺.

製造４７：トリフルオロメタンスルホン酸４−[１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−(（Ｓ）−シアノピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル］フェニルエステル

トリフルオロメタンスルホン酸４−[１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−（（Ｓ）−２−カルバモイルピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル］フェニルエステル（製造４６、１．５５ｇ、３．１３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（６０ｍＬ）溶液を０℃に冷却し、ピリジン（０．５３ｍＬ、６．５７ｍｍｏｌ）、次いでＴＦＡＡ（２．３９ｍＬ、１６．８９ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で５分間撹拌し、次いで飽和ＮａＨＣＯ_３溶液を加えてクエンチした。有機物をＥｔＯＡｃで抽出し、１Ｍクエン酸、水、次いでブラインで洗浄し、乾燥した（ＭｇＳＯ_４）。溶媒を減圧除去し、次いでカラムクロマトグラフィ（ＳｉＯ_２、ＩＨ：ＥｔＯＡｃ、１：１、次いでＤＣＭ：ＥｔＯＡｃ、９５：５を用いた第２のカラム）で精製し、表題化合物を得た：保持時間＝3.80分; m/z (ES⁺) = 478.4 [M + H]⁺.

製造４８：（Ｓ）−４−｛４’−[１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−（（Ｓ）−２−シアノピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル］ビフェニル−４−イルオキシ｝ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

製造３８で説明される方法と類似の方法を用い、４−［４−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−フェノキシ］ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造１９、２３４ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）をトリフルオロメタンスルホン酸４−[１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−(（Ｓ）−シアノピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル］フェニルエステル(製造４７、２４０ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）と反応させた。キラルＨＰＬＣで精製し、表題化合物を得た：保持時間＝4.17分; m/z (ES⁺) = 591.3 [M + H]⁺.

製造４９：（Ｓ）−４−［４’−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−オキソ−３−ピロリジン−１−イル−プロピル）−３’−フルオロビフェニル−４−イルオキシメチル］ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

４−［４−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）フェノキシメチル]ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造２０、２００ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１．５ｍＬ）および水（０．５ｍＬ）混合物溶液を（Ｓ）−トリフルオロメタンスルホン酸−４−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−オキソ−３−ピロリジン−１−イルプロピル）−３−フルオロフェニルエステル（製造３３、２００ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）、［１，１−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（３４ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２１６μＬ、１．２４ｍｍｏｌ）と合わせた。反応物をマイクロ波反応器内において８０℃で２０分間加熱した。ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）を加え、溶液を水（３ｘ５０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（２ｘ５０ｍＬ）、次いでブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥した（ＭｇＳＯ_４）。溶媒を減圧除去し、次いでカラムクロマトグラフィ（ＳｉＯ_２、ＩＨ：ＥｔＯＡｃ、１：１）で精製し、表題化合物を得た：保持時間＝4.53分; m/z (ES⁺) = 612.5 [M + H]⁺.

以下の化合物は、製造４９で説明される方法を用い、４−［４−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）フェノキシメチル]ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造２０）を適当なトリフルオロメタンスルホネートエステル中間体と反応させることにより製造された：

製造５２：４−（６−ブロモピリジン−３−イルオキシメチル）ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

アゾジカルボン酸ジピペリジド（５．０１ｇ、１９．８７ｍｍｏｌ）のトルエン（２００ｍＬ）乾燥溶液にトリｎ−ブチルホスフィン（４．９５ｍＬ、１９．８７ｍｍｏｌ）、次いで２−ブロモ−５−ヒドロキシピリジン（１．７３ｇ、９．９４ｍｍｏｌ）を加え、反応物を０℃で５分間冷却した。４−ヒドロキシメチルピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造１、２．０ｇ、９．９４ｍｍｏｌ）のトルエン（５０ｍＬ）溶液を該溶液に５分間かけて滴下して加え、反応物を０℃で１６時間撹拌し、イソ−ヘキサン（２００ｍＬ）を加え、反応物を１０分間撹拌し、濾過して沈殿物を除去した。濾液を２Ｍ ＮａＯＨ溶液（２ｘ１５０ｍＬ）、水（１５０ｍＬ）、１Ｍ ＨＣｌ溶液（２ｘ１５０ｍＬ）、ブライン（１５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥した（ＭｇＳＯ_４）。溶媒を減圧除去し、カラムクロマトグラフィ（ＳｉＯ_２、ＩＨ：ＥｔＯＡｃ、４：１、３：１）で精製し、表題化合物を得た：保持時間＝3.87分; m/z (ES⁺) = 357.2, 359.1 [M + H]⁺.

製造５３：（Ｓ）−｛１−［２−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）ベンジル］−２−オキソ−２−ピロリジン−１−イルエチル｝カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル

アルゴン下の（Ｓ）−トリフルオロメタンスルホン酸−４−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−オキソ−３−ピロリジン−１−イルプロピル）−３−フルオロフェニルエステル（製造３３、３２０ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）のジオキサン（１２ｍＬ）溶液にビス（ピナコレート）ジボロン（２０１ｍｇ、０．７９ｍｍｏｌ）、酢酸カリウム（１９４ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）および１，１−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン（３７ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）を加え、混合物にアルゴンを５分間バブルした。［１，１−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（５４ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）を加え、反応物にアルゴンをさらに１０分間バブルし、９０℃で１６時間加熱した。Ｃｅｌｉｔｅを通して反応混合物を濾過し、カラムクロマトグラフィ（ＳｉＯ_２、ＩＨ：ＥｔＯＡｃ、６：４）で精製し、表題化合物を得た：保持時間＝4.07分; m/z (ES⁺) = 463.4 [M + H]⁺.

以下の化合物は、製造５３で説明される方法を用い、ビス（ピナコレート）ジボロンを適当なトリフルオロメタンスルホネートエステル中間体と反応させることにより製造された：

製造５６：（Ｓ）−４−｛６−［４−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−オキソ−３−ピロリジン−１−イルプロピル）−３−フルオロフェニル]ピリジン−３−イルオキシメチル｝ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

４−（６−ブロモピリジン−３−イルオキシメチル）ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造５２、１３３ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）、（Ｓ）−｛１−［２−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）ベンジル]−２−オキソ−２−ピロリジン−１−イルエチル｝カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（製造５３、１９０ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）、［１，１−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（３１ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１９５ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１．５ｍＬ）および水（０．５ｍＬ）の混合物中で合わせ、反応物をマイクロ波反応器内において８０℃で２５分間加熱した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈し、水（３ｘ３０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（２ｘ３０ｍＬ）、次いでブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、乾燥した（ＭｇＳＯ_４）。溶媒を減圧除去し、カラムクロマトグラフィ（ＳｉＯ_２、ＤＣＭ：ＥｔＯＡｃ、７：３）で精製し、表題化合物を得た：保持時間＝4.10分; m/z (ES⁺) = 613.5 [M + H]⁺.

以下の化合物は、製造５６で説明される方法を用い、４−（６−ブロモピリジン−３−イルオキシメチル）−ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造５２）を適当なボロネートエステル中間体と反応させることにより製造された：

製造５９：（Ｓ）−[１−（２−フルオロ−４−｛６−[１−（４−イソプロピルベンジル）アゼチジン−３−イルオキシ]ピリジン−３−イル｝ベンジル）−２−オキソ−２−ピロリジン−１−イルエチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル

製造３８で説明される方法を用い、５−ブロモ−２−[１−（４−イソプロピルベンジル）アゼチジン−３−イルオキシ]ピリジン（製造１６、９２ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）および（Ｓ）−｛１−［２−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）ベンジル]−２−オキソ−２−ピロリジン−１−イルエチル｝カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（製造５３、１４０ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）から表題化合物を製造した：保持時間＝3.23分; m/z (ES⁺) = 617.5 [M + H]⁺.

製造６０：（Ｓ）−［２−（（Ｓ）−シアノピロリジン−１−イル）−１−（２−フルオロ−４−｛６−［１−（４−イソプロピルベンジル）アゼチジン−３−イルオキシ]ピリジン−３−イル｝ベンジル）−２−オキソエチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル

製造３８で説明される方法を用い、５−ブロモ−２−[１−（４−イソプロピルベンジル）アゼチジン−３−イルオキシ］ピリジン（製造１６、１１１．１ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）および（Ｓ）−｛２−（（Ｓ）−２−シアノピロリジン−１−イル）−１−［２−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）ベンジル]−２−オキソエチル｝カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（製造５５、１８０ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）から表題化合物を製造した：保持時間＝3.22分; m/z (ES⁺) = 642.5 [M + H]⁺.

製造６１：（Ｓ）−４−［１−（５−｛４−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（（Ｓ）−２−シアノピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル]−３−フルオロフェニル｝ピリジン−２−イルオキシ）エチル］ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

４−｛１−［５−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン−２−イルオキシ］エチル｝ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造２１、４９ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）、（Ｓ）−トリフルオロメタンスルホン酸４−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（（Ｓ）−２−シアノピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル]−３−フルオロフェニルエステル（製造３１、５０ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）、［１，１−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（８ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（４１μＬ、０．２９ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（０．７５ｍＬ）および水（０．２５ｍＬ）混合物中で合わせ、反応物をマイクロ波反応器内において８０℃で３ｘ２０分間加熱した。次いで、Ｃｅｌｉｔｅを通して混合物を濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。濾液を水（ｘ４）、１Ｍクエン酸、次いでブラインで洗浄し、乾燥した（ＭｇＳＯ_４）。溶媒を減圧除去し、次いでカラムクロマトグラフィ（ＳｉＯ_２、ＩＨ：ＥｔＯＡｃ、１：１）で精製し、表題化合物を得た：保持時間＝4.43分; m/z (ES⁺) = 652.6 [M + H]⁺.

以下の化合物は、製造６１で説明される方法と類似の方法を用い、適当なアリールまたはヘテロアリールボロネートエステルを適当なトリフルオロメタンスルホネートエステル中間体と反応させることにより製造された：

製造６８：（Ｓ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（４−トリフルオロメタンスルホニルオキシ-フェニル）プロピオン酸メチルエステル

（Ｓ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（４−ヒドロキシフェニル）プロピオン酸メチルエステル（２．９０ｇ、９．３ｍｍｏｌ）のＭｅＣＮ（１００ｍＬ）溶液にＮ−フェニルトリフルオロメタンスルホンイミド（４．９８ｇ、１３．９ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１．９４ｍＬ、１１．１ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で１２時間撹拌した。減圧濃縮後、残渣をＥｔＯＡｃ（４００ｍＬ）に再溶解し、それを濃ＮＨ_４Ｃｌ溶液、水およびブラインで洗浄し、乾燥した（ＭｇＳＯ_４）。溶媒を減圧除去し、次いでカラムクロマトグラフィ（ＳｉＯ_２、ＩＨ：ＥｔＯＡｃ、２：１）で精製し、表題化合物を得た：保持時間＝4.01分； m/z (ES⁺) = 450.18 [M + Na]⁺.

製造６９：（Ｓ）−４−［４’−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−メトキシカルボニルエチル）ビフェニル−４−イルオキシメチル]ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

（Ｓ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（４−トリフルオロメタンスルホニルオキシ-フェニル）プロピオン酸メチルエステル（製造６８、３１１ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ）、４−［４−（４，４，５，５−テトラメチル［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）フェノキシメチル]ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造２０、３５２ｍｇ、０．８７ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．３ｍＬ、２．１５ｍｍｏｌ）および［１，１−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（７８ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（４ｍＬ）および水（１ｍＬ）溶液による混合物をマイクロ波反応器内において８０℃で２０分間加熱した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）で希釈し、次いで１Ｍ ＨＣｌ水溶液、水およびブラインで精製し、乾燥した（ＭｇＳＯ_４）。溶媒を減圧除去し、カラムクロマトグラフィ（ＳｉＯ_２、ＩＨ：ＥｔＯＡｃ、２：１）で精製し、表題化合物を得た：保持時間＝4.64分； m/z (ES⁺) = 572.46 [M + NH₄]⁺.

製造７０：（Ｓ）−４−［４’−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−カルボキシエチル）ビフェニル−４−イルオキシメチル]ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

（Ｓ）−４−［４’−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−メトキシカルボニルエチル）ビフェニル−４−イルオキシメチル]ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造６９、２０２ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液（０℃）に水（３ｍＬ）および水酸化リチウム水和物（４９ｍｇ、１．１７ｍｍｏｌ）を加えた。氷浴を取り外し、撹拌を室温で１８時間続けた。水（５０ｍＬ）を加え、混合物のｐＨを希塩酸で２−３に調整した。反応混合物をＥｔＯＡｃで抽出し、有機相をブラインで戦場視し、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、溶媒を減圧除去し、表題化合物を得た：保持時間＝4.15分； m/z (ES⁺) = 558.5 [M + NH₄]⁺.

製造７１：（Ｓ）−４−｛４’−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（（Ｓ）−３−フルオロピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル]ビフェニル−４−イルオキシメチル｝ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

（Ｓ）−４−［４’−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−カルボキシエチル）ビフェニル−４−イルオキシメチル］ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造７０、８８ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）および（Ｓ）−(+)−３−フルオロピロリジン塩酸塩（４２ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液にＨＯＢｔ（２６ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（４２ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．１２ｍＬ、０．６９ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１２時間撹拌後、反応混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）および水／ブライン（１：１、１００ｍＬ）で分液処理した。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（３ｘ５０ｍＬ）で分液処理した。有機層を合わせ、１Ｍ ＨＣｌ溶液（５０ｍＬ）、１Ｍ ＮａＯＨ溶液（５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥した（ＭｇＳＯ_４）。溶媒を減圧除去し、次いでカラムクロマトグラフィ（ＳｉＯ_２、ＩＨ：ＥｔＯＡｃ、２：３）で精製し、表題化合物を得た：保持時間＝4.24分; m/z (ES⁺) = 612.5 [M + H]⁺.

製造７２：（Ｓ）−４−｛４’−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（（Ｓ）−２−カルバモイルピロリジン−１−イル）−３−オキソ−プロピル］ビフェニル−４−イルオキシメチル}ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

製造７１で説明される方法を用い、（Ｓ）−４−［４’−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−カルボキシエチル）ビフェニル−４−イルオキシメチル]ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造７０、８８ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）およびＬ−（−）−プロリンアミド（４０ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）から表題化合物を製造した：保持時間＝3.98分; m/z (ES⁺) = 637.5 [M + H]⁺.

製造７３：（Ｓ）−４−｛４’−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（（Ｓ）−２−シアノピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル］ビフェニル−４−イルオキシメチル｝ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

（Ｓ）−４−｛４’−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（（Ｓ）−２−カルバモイルピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル]ビフェニル−４−イルオキシメチル｝ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造７２、７１ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（５ｍＬ）溶液（０℃）にピリジン（２０μＬ、０．２５ｍｍｏｌ）およびＴＦＡＡ（８０ｍＬ、０．５８ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を０℃で１０分間撹拌し、飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（１００ｍＬ）を加えてクエンチした。有機物をＥｔＯＡｃ（３ｘ５０ｍＬ）で抽出した。抽出物をあわせ、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、減圧濃縮し、次いで残渣をカラムクロマトグラフィ（ＳｉＯ_２、ＩＨ：ＥｔＯＡｃ、１：２）で精製し、表題化合物を得た：保持時間＝4.35分； m/z (ES⁺) = 636.5 [M + NH₄]⁺.

製造７４：（Ｓ）−｛１−［２−フルオロ−４−（６−フルオロピリジン−３−イル）ベンジル］−２−オキソ−２−ピロリジン−１−イルエチル｝カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル

（Ｓ）−トリフルオロメタンスルホン酸−４−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−オキソ−３−ピロリジン−１−イルプロピル）−３−フルオロフェニルエステル（製造３３、６５０ｍｇ、１．３４ｍｍｏｌ）のＴＨＦおよび水（５：１、１７ｍＬ）混合物溶液に２−フルオロピリジル−５−ボロン酸（２４６ｍｇ、１．７５ｍｍｏｌ）、リン酸カリウム（４６２ｍｇ、２．０１ｍｍｏｌ）および［１，１−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（１０９ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）を加え、反応物をマイクロ波反応器内において８０℃で２０分間加熱した。さらなる２−フルオロピリジル−５−ボロン酸（３０ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）、リン酸カリウム（１００ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）および［１，１−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（１０ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）を加え、反応物を８０℃でさらに２０分間加熱した。混合物をＤＣＭ（１５０ｍＬ）および水（１００ｍＬ）で分液処理し、有機相を分離し、飽和Ｎａ_２ＣＯ_３溶液（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥した（ＭｇＳＯ_４）。溶媒を減圧除去し、残渣をジエチルエーテルでトリチュレートし、表題化合物を得た：保持時間＝3.67分, m/z (ES⁺) = 432.3 [M + H]⁺.

製造７５：（Ｓ）−４−（５−｛４−［ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（（Ｓ）−２−シアノピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル]−３−フルオロフェニル｝ピリジン−２−イルオキシ）ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

４−［５−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン−２−イルオキシ］ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造１７、２３９ｍｇ、０．６１ｍｍｏｌ）、（Ｓ）−トリフルオロメタンスルホン酸４−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（（Ｓ）−２−シアノピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル]−３−フルオロフェニルエステル（製造３１、２５０ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）、パラジウムテトラキス（１１３ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（１６９ｍｇ、１．２３ｍｍｏｌ）のトルエン（５ｍＬ）混合物をアルゴンで５分間バブルし、次いでマイクロ波反応器内において７５℃で３０分間加熱した。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、有機物を水、次いでブラインで洗浄し、乾燥した（ＭｇＳＯ_４）。溶媒を減圧除去し、次いでカラムクロマトグラフィ（ＳｉＯ_２、ＩＨ：ＥｔＯＡｃ、７５：２５、６０：４０）で精製し、表題化合物を得た：保持時間＝4.08分; m/z (ES⁺) = 624.6 [M + H]⁺.

製造７６：（Ｓ）−４−｛４’−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（（Ｓ）−２−シアノピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル］−３’−フルオロビフェニル−４−イルオキシ｝ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

製造３８で説明される方法を用い、４−［４−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）フェノキシ］ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造１９、３００ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）および（Ｓ）−トリフルオロメタンスルホン酸４−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（（Ｓ）−２−シアノピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル]−３−フルオロフェニルエステル（製造３１、３１４ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ）から表題化合物を製造した：保持時間＝4.25分; m/z (ES⁺) = 623.6 [M + H]⁺.

製造７７：（Ｓ）−４−｛５−［４−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−オキソ−３−ピロリジン−１−イルプロピル）−３−フルオロフェニル]ピリジン−２−イルオキシメチル｝ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

製造３８で説明される方法を用い、４−［５−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン−２−イルオキシメチル］−ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造１８、２６１ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）および（Ｓ）−トリフルオロメタンスルホン酸−４−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−オキソ−３−ピロリジン−１−イルプロピル）−３−フルオロフェニルエステル（製造３３、２５０ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）から表題化合物を製造した：保持時間＝4.32分; m/z (ES⁺) = 613.6 [M + H]⁺.

製造７８：（Ｓ）−４−｛１−［４’−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−オキソ−３−ピロリジン−１−イルプロピル）−３’−フルオロビフェニル−４−イルオキシ］エチル｝ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

製造３８で説明される方法を用い、４−｛１−［４−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）フェノキシ］エチル｝ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造２２、１０７．７ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）および（Ｓ）−トリフルオロメタンスルホン酸−４−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−オキソ−３−ピロリジン−１−イルプロピル）−３−フルオロフェニルエステル（製造３３、１００ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）から表題化合物を製造した：保持時間＝4.57分; m/z (ES⁺) = 626.6 [M + H]⁺.

製造７９：（Ｓ）−４−（１−｛４’−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（（Ｓ）−３−フルオロピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル］−３’−フルオロビフェニル−４−イルオキシ｝エチル）ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

製造３８で説明される方法を用い、４−｛１−[４−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）フェノキシ］エチル｝ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造２２、２６０ｍｇ、０．６３ｍｍｏｌ）および（Ｓ）−トリフルオロメタンスルホン酸４−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（（Ｓ）−３−フルオロピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル]３−フルオロフェニルエステル（製造３５、２５２ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）から表題化合物を製造した：保持時間＝4.42分; m/z (ES⁺) = 644.6 [M + H]⁺.

製造８０：（Ｓ）−７−ヒドロキシ−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−２，３−ジカルボン酸−２−ｔｅｒｔ−ブチルエステル

（Ｓ）−７−ヒドロキシ−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−３−カルボン酸（５ｇ、２５．２９ｍｍｏｌ）、ジ炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（６．６ｇ、３０．３５ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（３．４２ｍＬ、２５．２９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４０ｍＬ）混合物を室温で１時間撹拌した。混合物をＥｔＯＡｃ（２５０ｍＬ）および１Ｍクエン酸溶液（５００ｍＬ）で分液処理し、有機相を分離し、ブライン（５００ｍＬ）で洗浄し、乾燥した（ＭｇＳＯ_４）。溶媒を減圧除去し、ジエチルエーテルでトリチュレートし、表題化合物を得た：保持時間＝3.15分, m/z (ES⁺) = 294.1 [M + H]⁺.

製造８１：（Ｓ）−３−（（Ｓ）−２−カルバモイルピロリジン−１−カルボニル）−７−ヒドロキシ−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−２−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル

製造２９で説明される方法と類似の方法を用い、ただしトリエチルアミンを塩基として用いて（Ｓ）−７−ヒドロキシ−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−２，３−ジカルボン酸−２−ｔｅｒｔ−ブチルエステル（製造８０、２．０５ｇ、７．０ｍｍｏｌ）をＬ−（−）−プロリンアミド（１．６ｇ、１４．０ｍｍｏｌ）と反応させることにより表題化合物を製造した：保持時間＝2.62分, m/z (ES⁺) = 390.3 [M + H]⁺.

製造８２：（Ｓ）−３−（（Ｓ）−２−カルバモイルピロリジン−１−カルボニル）−７−トリフルオロメタンスルホニルオキシ−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−２−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル

製造３０で説明される方法を用い、（Ｓ）−３−（（Ｓ）−２−カルバモイルピロリジン−１−カルボニル）−７−ヒドロキシ−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−２−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（製造８１、９００ｍｇ、２．３１ｍｍｏｌ）をＮ−フェニルトリフルオロメタン スルホンイミド（９０９ｍｇ、２．５４ｍｍｏｌ）と反応させることにより表題化合物を製造した：保持時間＝3.41分, m/z (ES⁺) = 522.3 [M + H]⁺.

製造８３：（Ｓ）−３−（（Ｓ）−２−シアノピロリジン−１−カルボニル）−７−トリフルオロメタンスルホニルオキシ−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−２−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル

製造４７で説明される方法を用い、（Ｓ）−３−（（Ｓ）−２−カルバモイルピロリジン−１−カルボニル）−７−トリフルオロメタンスルホニルオキシ−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−２−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（製造８２、１．２ｇ、２．３ｍｍｏｌ）をＴＦＡＡ（１．６２ｍＬ、１１．５２ｍｍｏｌ）で処理することにより表題化合物を製造した：保持時間＝3.93分, m/z (ES⁺) = 504.3 [M + H]⁺.

製造８４：（Ｓ）−３−（（Ｓ）−２−シアノピロリジン−１−カルボニル）−７−［６−（１−イソプロポキシカルボニルピペリジン−４−イルメトキシ）ピリジン−３−イル］−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−２−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル

製造３８で説明される方法を用い、４−［５−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン−２−イルオキシメチル]ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造１８、１４５ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）を（Ｓ）−３−（（Ｓ）−２−シアノピロリジン−１−カルボニル）−７−トリフルオロメタンスルホニルオキシ−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−２−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（製造８３、１５１ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）と反応させることにより表題化合物を製造した：保持時間＝4.32分, m/z (ES⁺) = 632.6 [M + H]⁺.

製造８５：４−（４−ブロモベンジルオキシ）ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

製造１６で説明される方法を用い、４−ヒドロキシピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造２、２．０５ｇ、１２ｍｍｏｌ）を４−ブロモベンジルブロミド（３．０ｇ、１２ｍｍｏｌ）と反応させることにより表題化合物を製造した：保持時間＝4.20分, m/z (ES⁺) = 356.1, 358.1 [M + H]⁺.

製造８６：４−[４−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）ベンジルオキシ］ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

製造２６で説明される方法を用い、４−（４−ブロモベンジルオキシ）ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造８５、２．３ｇ、６．４６ｍｍｏｌ）から表題化合物を製造した：保持時間＝4.30分, m/z (ES⁺) = 404.4 [M + H]⁺.

製造８７：（Ｓ）−４−［４’−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−オキソ−３−ピロリジン−１−イルプロピル）−３’−フルオロビフェニル−４−イルメトキシ］ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

製造３８で説明される方法と類似の方法を用い、４−[４−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）ベンジルオキシ]ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造８６、３００ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）を（Ｓ）−トリフルオロメタンスルホン酸−４−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−オキソ−３−ピロリジン−１−イルプロピル）−３−フルオロフェニルエステル(製造３３、２４０ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）と反応させることにより表題化合物を製造した：保持時間＝4.43分, m/z (ES⁺) = 612.5 [M + H]⁺.

製造８８：（Ｓ）−４−｛４’−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（（Ｓ）−３−フルオロピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル］−３’−フルオロビフェニル−４−イルメトキシ｝ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

製造３８で説明される方法と類似の方法を用い、４−[４−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）ベンジルオキシ] ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造８６、３００ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）を（Ｓ）−トリフルオロメタンスルホン酸４−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（（Ｓ）−３−フルオロピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル]−３−フルオロフェニルエステル（製造３５、２４９ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）と反応させることにより表題化合物を製造した：保持時間＝4.20分, m/z (ES⁺) = 630.5 [M + H]⁺.

製造８９：（Ｅ）−３−（４−ベンジルオキシ−２−フルオロフェニル）アクリル酸メチルエステル

メチル （トリフェニルホスホラニリデン）アセテート（２５．０ｇ、７４．８ｍｍｏｌ）を４−ベンジルオキシ−２−フルオロベンズアルデヒド（９．１０ｇ、３９．５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４００ｍＬ）溶液に加え、得られた溶液を還流条件下で１６時間撹拌し、シリカに吸着させ、カラムクロマトグラフィ（ＩＨ：ＥｔＯＡｃ、３：１）で精製し、表題化合物を得た：保持時間＝4.15分; m/z (ES⁺) = 287.2 [M + H]⁺.

製造９０：（Ｅ）−３−（４−ベンジルオキシ−２−フルオロフェニル）アクリル酸

１Ｍ ＮａＯＨ溶液（４０ｍＬ、３９．８ｍｍｏｌ）を（Ｅ）−３−（４−ベンジルオキシ−２−フルオロフェニル）アクリル酸メチルエステル（製造８９、９．５０ｇ、３３．２ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（３００ｍＬ）溶液に加え、得られた懸濁液を周囲温度で撹拌し、次いで還流条件下で１時間加熱し、溶液を得た。溶媒を減圧除去し、残渣をＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）および水（６００ｍＬ）に溶解し、１Ｍ ＨＣｌ溶液（５０ｍＬ）を加え、周囲温度で３０分間撹拌した。水層を分離し、さらにＥｔＯＡｃ（ｘ２）で抽出した。有機層を合わせ、ブラインで洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、減圧濃縮し、表題化合物を得た：保持時間＝3.72分; m/z (ES⁺) = 562.3 [2M + NH₄]⁺.

製造９１：（Ｒ）−３−［（Ｅ）−３−（４−ベンジルオキシ−２−フルオロフェニル）アクリロイル］−４−フェニルオキサゾリジン−２−オン

トリエチルアミン（４．６０ｍＬ、３３．０ｍｍｏｌ）およびピバロイルクロリド（３．６０ｍＬ、２８．２ｍｍｏｌ）を（Ｅ）−３−（４−ベンジルオキシ−２−フルオロフェニル）アクリル酸（製造９０、６．２０ｇ、２２．８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２００ｍＬ）溶液（−７８℃）に加え、この温度で１５分間撹拌し、次いで０℃で１時間撹拌した。別の反応フラスコ内で、ｎ−ブチルリチウム（１．６Ｍ／ヘキサン、２０ｍＬ、３２．０ｍｍｏｌ）をＲ−（−）−４−フェニル−２−オキサゾリジノン（５．００ｇ、３０．６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２００ｍＬ）溶液（−７８℃）に加え、この温度で２０分間撹拌し、次いで上記の溶液をカニューレで加えた。得られた混合物を−７８℃で１．５時間撹拌し、次いで周囲温度で１６時間撹拌した。反応混合物を濃縮ＮＨ_４Ｃｌ水溶液（３００ｍＬ）に加え、次いで水層を分離し、さらにＥｔＯＡｃ（２ｘ２００ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせ、ブラインで洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、減圧濃縮した。再結晶化（ＩＨ：ＥｔＯＡｃ、１：１、２５０ｍＬ）により表題化合物を得た：保持時間＝4.08分; m/z (ES⁺) = 418.2 [M + H]⁺.

製造９２：（Ｒ）−３−［（Ｒ）−３−（４−ベンジルオキシ−２−フルオロフェニル）ブチリル］−４−フェニルオキサゾリジン−２−オン

ジメチルスルフィド（３０ｍＬ）およびメチルマグネシウムブロミド（３．０Ｍ溶液／Ｅｔ_２Ｏ、１３．０ｍＬ、３９．０ｍｍｏｌ）を臭化銅（Ｉ）−ジメチルスルフィド（８．８０ｇ、４２．９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（６０ｍＬ）懸濁液（−４０℃）に加え、得られた反応混合物をこの温度において３０分間撹拌し、−２０℃から−１５℃に昇温した。（Ｒ）−３−［（Ｅ）−３−（４−ベンジルオキシ−２−フルオロフェニル）アクリロイル］−４−フェニルオキサゾリジン−２−オン（製造９１、４０．０ｇ、９．５８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４０ｍＬ）溶液を、温度を−２５℃から−１５℃の間に保ちながら滴下して加え、溶液をこの温度において２．５時間撹拌し、次いで周囲温度において７２時間撹拌した。反応を濃縮ＮＨ_４Ｃｌ水溶液（５０ｍＬ）でクエンチし、Ｃｅｌｉｔｅを通して濾過した。濾液をＥｔＯＡｃで希釈し、水およびブラインで洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、減圧濃縮した。カラムクロマトグラフィ（ＩＨ：ＥｔＯＡｃ、３：１、２：１）で精製し、表題化合物を得た： 保持時間＝4.35分; m/z (ES⁺) = 434.3 [M + H]⁺.

製造９３：（Ｒ）−３−［（２Ｒ，３Ｓ）−３−（４−ベンジルオキシ−５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−２−ブロモブチリル］−４−フェニルオキサゾリジン−２−オン

ジブチルボロントリフレート（１０．０ｍＬ、１０．０ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１．８０ｍＬ、１０．３ｍｍｏｌ）を（Ｒ）−３−［（Ｒ）−３−（４−ベンジルオキシ−２−フルオロフェニル）ブチリル］−４−フェニルオキサゾリジン−２−オン（製造９２、３．００ｇ、６．９２ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５０ｍＬ）溶液（−７８℃）に加えた。得られた反応混合物を−７８℃で１０分間、次いで０℃で１時間撹拌した。反応物をー７８℃に冷却し、前もって−７８℃に冷却したアルゴン下のＮ−ブロモスクシンイミド（３．７１ｇ、２０．８ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５０ｍＬ）溶液にカニューレで移した。得られた反応物を−７８℃で２時間、０℃で２時間撹拌し、０．５Ｍ ＮａＨＣＯ_３水溶液でクエンチした。ＤＣＭを減圧除去し、ＥｔＯＡｃを加え、有機層を水、ブラインで洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、減圧濃縮した。カラムクロマトグラフィ（ＩＨ：ＥｔＯＡｃ、３：１）で精製し、表題化合物を得た：¹H NMR δ_H (400MHz, CDCl₃) 7.51 - 7.30 (m, 11H), 6.68 (m, 1H), 6.12 (m, 1H), 5.26 (m, 1H), 5.13 (s, 2H), 4.59 (m, 1H), 4.20 (m, 1H), 3.63 (m, 1H), 1.52 (m, 3H).

製造９４：（Ｒ）−３−［（２Ｓ，３Ｓ）−２−アジド−３−（４−ベンジルオキシ−５−ブロモ−２−フルオロフェニル）ブチリル］−４−フェニルオキサゾリジン−２−オン

Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルグアニジンアジド（３．７０ｇ、２３．４ｍｍｏｌ）を（Ｒ）−３−［（２Ｒ，３Ｓ）−３−（４−ベンジルオキシ−５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−２−ブロモブチリル］−４−フェニルオキサゾリジン−２−オン（製造９３、３．４０ｇ、５．７５ｍｍｏｌ）のＭｅＣＮ（２５ｍＬ）溶液に加え、得られた溶液を周囲温度で１６時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、水およびブラインで洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、減圧濃縮した。カラムクロマトグラフィ（ＩＨ：ＥｔＯＡｃ、２：１）で精製し、表題化合物を得た：保持時間＝4.58分; m/z (ES⁺) = 570.1, 572.1 [M + NH₄]⁺.

製造９５：（２Ｓ，３Ｓ）−２−アジド−３−（４−ベンジルオキシ−５−ブロモ−２−フルオロフェニル）ブタン酸

過酸化水素（３５％水溶液、５．００ｍＬ）および水酸化リチウム一水和物（８１０ｍｇ、１９．３ｍｍｏｌ）を（Ｒ）−３−［（２Ｓ，３Ｓ）−２−アジド−３−（４−ベンジルオキシ−５−ブロモ−２−フルオロフェニル）ブチリル］−４−フェニルオキサゾリジン−２−オン（製造９４、３．０２ｇ、５．４６ｍｍｏｌ）のＴＨＦおよび水（３：１、１００ｍＬ）の混合物溶液（０℃）に加え、得られた溶液をこの温度において６時間撹拌した。反応物を１０％（ｗ／ｖ） Ｎａ_２ＳＯ_３水溶液でクエンチし、周囲温度で１時間撹拌し、次いで水（２５０ｍＬ）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（４ｘ２００ｍＬ）で抽出した。有機物を合わせ、０．５Ｍ ＨＣｌ溶液およびブラインで洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、減圧濃縮し、表題化合物を得た：保持時間＝4.03分; m/z (ES⁺) = 425.0, 427.0 [M + NH₄]⁺.

製造９６：（２Ｓ，３Ｓ）−３−（２−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−２−メチルブタン酸塩酸塩

１０％パラジウム炭素（１．６５ｇ）を（２Ｓ，３Ｓ）−２−アジド−３−（４−ベンジルオキシ−５−ブロモ−２−フルオロフェニル）ブタン酸（製造９５、２．２３ｇ、５．４６ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨおよび水（９：１、２００ｍＬ）混合物溶液に加え、得られた反応混合物を水素雰囲気下で７２時間撹拌し、Ｃｅｌｉｔｅを通して濾過した。濾液を減圧濃縮し、残渣を水および１Ｍ ＨＣｌ溶液に溶解し、ＥｔＯＡｃで洗浄し、減圧濃縮し、表題化合物を得た：保持時間＝1.71分; m/z (ES⁺) = 214.0 [M + H]⁺.

製造９７：（２Ｓ，３Ｓ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルオキシ−２−フルオロフェニル）ブタン酸メチルエステル

トリエチルアミン（７００μＬ、５．００ｍｍｏｌ）およびジ炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（１．６０ｇ、７．３３ｍｍｏｌ）を（２Ｓ，３Ｓ）−３−（２−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−２−メチルブタン酸塩酸塩（製造９６、６８２ｍｇ、２．７３ｍｍｏｌ）のジオキサンおよび水（１９：１、５０ｍＬ）混合物溶液に加え、得られた溶液を７２時間撹拌した。溶媒を減圧除去し、残渣にＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）および水（１００ｍＬ）を加えた。混合物を１Ｍ ＨＣｌ溶液で酸性化し、激しく撹拌した。水層をさらにＥｔＯＡｃ（２ｘ１００ｍＬ）で抽出し、有機層を合わせ、ブラインで洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、減圧濃縮した。残渣をトルエンおよびＭｅＯＨ（４：１、５０ｍＬ）の混合物に溶解し、０℃に冷却し、トリメチルシリルジアゾメタン（２Ｍ／ヘキサン、２．５ｍＬ、５．０ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を３０分間かけて０℃から周囲温度で撹拌し、次いでＡｃＯＨ（１ｍＬ）でクエンチし、減圧濃縮した。カラムクロマトグラフィ（ＩＨ：ＥｔＯＡｃ、３：１）で精製し、表題化合物を得た：保持時間＝4.10分; m/z (ES⁺) = 428.2 [M + H]⁺.

製造９８：（２Ｓ，３Ｓ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルオキシ−２−フルオロフェニル）ブタン酸

製造７０で説明される方法を用い、（２Ｓ，３Ｓ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルオキシ−２−フルオロフェニル）ブタン酸メチルエステル（製造９７、５７４ｍｇ、１．５３ｍｍｏｌ）から表題化合物を製造した：¹H NMR δ_H (400MHz, CD₃OD): 7.35 (m, 1H) 6.95 (m, 2H), 4.43 (m, 1H), 3.49 (m, 1H), 1.55 (s, 9H), 1.36 (m, 12H).

製造９９：（１Ｓ，２Ｓ）−炭酸 ４−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（３，３−ジフルオロピロリジン−１−イル）−１−メチル−３−オキソプロピル]−３−フルオロフェニルエステルｔｅｒｔ−ブチルエステル

製造７１で説明される方法と類似の方法を用い、（２Ｓ，３Ｓ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルオキシ−２−フルオロフェニル）ブタン酸（製造９８、３１８ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）を３，３−ジフルオロピロリジン塩酸塩（２２６ｍｇ、１．５７ｍｍｏｌ）と反応させることにより表題化合物を製造した：保持時間＝4.05分, m/z (ES⁺) = 503.5 [M + H]⁺.

製造１００：（１Ｓ，２Ｓ）−［１−（３，３−ジフルオロピロリジン−１−カルボニル)−２−（２−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）プロピル]カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル

（１Ｓ，２Ｓ）−炭酸 ４−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（３，３−ジフルオロピロリジン−１−イル）−１−メチル−３−オキソプロピル]−３−フルオロフェニルエステルｔｅｒｔ−ブチルエステル（製造９９、２３２ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（８ｍＬ）溶液にピペリジン（２．０ｍＬ、２０．２ｍｍｏｌ）を加え、反応物を室温で１６時間撹拌した。得られた混合物をＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）および１Ｍ ＨＣｌ溶液（１００ｍＬ）で分液処理し、有機層を分離し、水、次いでブラインで洗浄し、乾燥した（ＭｇＳＯ_４）。溶媒を減圧除去し、表題化合物を得た：保持時間＝3.40分, m/z (ES⁺) = 403.2 [M + H]⁺.

製造１０１：（１Ｓ，２Ｓ）−トリフルオロメタンスルホン酸４［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（３，３−ジフルオロピロリジン−１−イル）−１−メチル−３−オキソプロピル]−３−フルオロフェニルエステル

製造３０で説明される方法を用い、（１Ｓ，２Ｓ）−［１−（３，３−ジフルオロピロリジン−１−カルボニル)−２−（２−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）プロピル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（製造１００、１８５ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）をＮ−フェニルトリフルオロメタンスルホンイミド（２５２ｍｇ、０．７１ｍｍｏｌ）と反応させることにより表題化合物を製造した：保持時間＝3.96分, m/z (ES⁺) = 535.4 [M + H]⁺.

製造１０２：４−（５−｛４−［（１Ｓ，２Ｓ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（３，３−ジフルオロピロリジン−１−イル）−１−メチル−３−オキソプロピル]−３−フルオロフェニル｝ピリジン−２−イルオキシメチル）ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

製造６１で説明される方法を用い、４−［５−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン−２−イルオキシメチル]ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造１８）を（１Ｓ，２Ｓ）−トリフルオロメタンスルホン酸４［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（３，３−ジフルオロピロリジン−１−イル）−１−メチル−３−オキソプロピル]−３−フルオロフェニルエステル（製造１０１）と反応させることにより表題化合物を製造した：保持時間＝4.37分; m/z (ES⁺) = 663.5 [M + H]⁺.

製造１０３：（Ｓ）−３−（（Ｓ）−２−シアノピロリジン−１−カルボニル）−７−｛６−［１−（１−イソプロポキシカルボニルピペリジン−４−イル）エトキシ］ピリジン−３−イル｝−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−２−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル

製造３８で説明される方法を用い、４−｛１−［５−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン−２−イルオキシ］エチル｝ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造２１、１５０ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）を（Ｓ）−３−（（Ｓ）−２−シアノピロリジン−１−カルボニル）−７−トリフルオロメタンスルホニルオキシ−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−２−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（製造８３、１５６ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）と反応させることにより表題化合物を製造した：保持時間＝4.39分, m/z (ES⁺) = 646.6 [M + H]⁺.

製造１０４：（Ｓ）−３−（（Ｓ）−２−シアノピロリジン−１−カルボニル）−７−｛６−［（Ｓ）−１−(１−イソプロポキシカルボニルピペリジン−４−イル）エトキシ］ピリジン−３−イル｝−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−２−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル

（Ｓ）−３−（（Ｓ）−２−シアノピロリジン−１−カルボニル）−７−｛６−［１−(１−イソプロポキシカルボニルピペリジン−４−イル）エトキシ］ピリジン−３−イル｝−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−２−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（製造１０３）のキラルＨＰＬＣによる分離により、表題化合物を得た：Daicel chiral pack IA 250 ｘ 20 mm, MTBE：EtOH：DEA, 40：60：0.1, 10mL/分, 285nm.

製造１０５：（Ｓ）−３−（（Ｓ）−２−シアノピロリジン−１−カルボニル）−７−｛６−［（Ｒ）−１−（１−イソプロポキシカルボニルピペリジン−４−イル）エトキシ］ピリジン−３−イル｝−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−２−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル

（Ｓ）−３−（（Ｓ）−２−シアノピロリジン−１−カルボニル）−７−｛６−［１−(１−イソプロポキシカルボニルピペリジン−４−イル）エトキシ］ピリジン−３−イル｝−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−２−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル(製造１０３）のキラルＨＰＬＣによる分離により、表題化合物を得た： Daicel chiral pack IA 250 ｘ 20 mm, MTBE：EtOH：DEA, 40：60：0.1, 10mL/分, 285nm.

製造１０６：（Ｓ）−４−（４｛４−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（（Ｓ）−３−フルオロピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル]−３−フルオロフェニル｝ピリジン−２−イルオキシメチル）ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

４−[４−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン−２−イルオキシメチル]ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造２３、９１０ｍｇ、２．２５ｍｍｏｌ）およびフッ化水素カリウム（８７８ｍｇ、１１．２４ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（９ｍＬ）溶液を室温で１６時間撹拌した。溶媒を減圧除去し、次いで残渣をジエチルエーテルで洗浄し、ＭｅＣＮから再結晶化し、白色の固形物を得た。該物質をトルエン（５ｍＬ）および水（１ｍＬ）混合物中の（Ｓ）−トリフルオロメタンスルホン酸４−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（（Ｓ）−３−フルオロピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル]３−フルオロフェニルエステル（製造３５、５８８ｍｇ、１．１７ｍｍｏｌ）、酢酸パラジウム（ＩＩ）（２６ｍｇ、１．１７ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（４６２ｍｇ、３．３５ｍｍｏｌ）と合わせ、反応物を１１０℃で２４時間加熱した。室温に冷却後、反応混合物をＤＣＭ（３ｘ１０ｍＬ）で抽出し、有機画分を合わせ、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、溶媒を減圧除去した。カラムクロマトグラフィ（ＳｉＯ_２、ＩＨ：ＥｔＯＡｃ、７：３、１：１）で精製し、表題化合物を得た：保持時間＝4.20分; m/z (ES⁺) = 631.4 [M + H]⁺.

実施例１：（Ｓ）−４−（５−｛４−［２−アミノ−３−（３，３−ジフルオロピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル]−３−フルオロフェニル｝ピリジン−２−イルオキシ）ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

アルゴン下の（Ｓ）−４−（５−｛４−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（３，３−ジフルオロピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル]−３−フルオロフェニル｝ピリジン−２−イルオキシ）ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造３８、２８０ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）溶液を０℃に冷却した。ＴＦＡ（１ｍＬ）を加え、反応混合物を０℃で２時間撹拌した。ＴＦＡ（０．５ｍＬ）のさらなる一部を加え、撹拌を１時間続けた。反応物を飽和ＮａＨＣＯ_３溶液でクエンチし、有機物をＤＣＭに抽出した。有機相をブラインで洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、溶媒を減圧除去した。カラムクロマトグラフィ（ＳｉＯ_２、ＤＣＭ：ＭｅＯＨ、９８：２、９７：３、９５：５、９０：１０、８０：２０）で精製し、表題化合物を得た：保持時間＝3.18分; m/z (ES⁺) = 535.3 [M + H]⁺.

以下の実施例は、実施例１で説明される方法と類似の方法を用い、適当なｔｅｒｔ−ブチルカルバメートで保護されたアミンをＴＦＡで処理することにより製造された：

実施例１７：（Ｓ）−４−（５−｛４−［２−アミノ−３−（（Ｓ）−３−フルオロピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル]−３−フルオロフェニル｝ピリジン−２−イルオキシ）ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル塩酸塩

アルゴン下の（Ｓ）−４−（５−｛４−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（（Ｓ）−３−フルオロピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル]−３−フルオロフェニル｝ピリジン−２−イルオキシ）ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル(製造３９、２３０ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（４ｍＬ）溶液を０℃に冷却した。ＴＦＡ（１ｍＬ）を加え、反応物を１６時間撹拌した。混合物をＤＣＭで希釈し、飽和Ｎａ_２ＣＯ_３溶液を加えてｐＨを調整した。有機層をフェーズセパレーターに通し、溶媒を減圧除去した。カラムクロマトグラフィ（ＳｉＯ_２、ＤＣＭ：ＭｅＯＨ、１００：０、９５：５、９３：７）で精製し、表題化合物をその遊離塩基として得た。生成物を４Ｍ ＨＣｌ／ジオキサンに溶解し、室温で１５分間撹拌した。溶媒を減圧除去し、表題化合物を得た：保持時間＝2.81分; m/z (ES⁺) = 517.4 [M + H]⁺.

実施例１８：（Ｓ）−２−アミノ−３−（２−フルオロ−４−｛６−［１−（４−イソプロピルベンジル）アゼチジン−３−イルオキシ]ピリジン−３−イル｝フェニル）−１−ピロリジン−１−イル プロパン−１−オンｐ−トルエンスルホン酸塩

アルゴン下の（Ｓ）−[１−（２−フルオロ−４−｛６−［１−（４−イソプロピルベンジル）アゼチジン−３−イルオキシ］ピリジン−３−イル｝ベンジル）−２−オキソ−２−ピロリジン−１−イルエチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（製造５９、７５ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（４ｍＬ）溶液を０℃に冷却した。ＴＦＡ（１ｍＬ）を加え、反応物を３時間撹拌した。混合物をＤＣＭで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３溶液を加えてｐＨを調整した。有機相を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、溶媒を減圧除去した。カラムクロマトグラフィ（ＳｉＯ_２、ＤＣＭ：ＭｅＯＨ、１００：０、９８：２、９５：５、９０：１０）で精製し、表題化合物を遊離アミンとして得た。生成物をＤＣＭに溶解し、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（１当量、１５．２ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ溶液として加えた。混合物を１５分間撹拌した。溶媒を減圧除去し、表題化合物を得た：保持時間＝2.57分; m/z (ES⁺) = 517.5 [M + H]⁺.

以下の実施例は、実施例１８で説明される方法と類似の方法を用い、適当なｔｅｒｔ−ブチルカルバメートで保護されたアミンをＴＦＡで処理することにより製造された。

実施例２１： Ｓ）−４−｛４’−[１−アミノ−２−（（Ｓ）−３−フルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル］ビフェニル−４−イルオキシ｝ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

アルゴン下の４−｛４’−[１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−（（Ｓ）−３−フルオロピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル］ビフェニル−４−イルオキシ｝ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造４４、１０６ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）溶液を０℃に冷却した。ＴＦＡ（１ｍＬ）を加え、反応物を０℃で１．５時間撹拌した。飽和Ｎａ_２ＣＯ_３溶液（３０ｍＬ）溶液を加えて反応をクエンチし、有機物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で抽出した。有機層をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥した（ＭｇＳＯ_４）。溶媒を減圧除去し、表題化合物を得た：保持時間＝2.85分; m/z (ES⁺) = 484.5 [M + H]⁺.

実施例２２：４−［（Ｒ）−１−（５−｛４−［（Ｓ）−２−アミノ−３−（（Ｓ）−２−シアノピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル]−３−フルオロフェニル｝ピリジン−２−イルオキシ）エチル］ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

（Ｓ）−４−[１−（５−｛４−［２−アミノ−３−（（Ｓ）−２−シアノピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル]−３−フルオロフェニル｝ピリジン−２−イルオキシ）エチル］ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（実施例１０）をキラルＨＰＬＣにより分離することにより表題化合物を得た： Daicel chiral pack IA 250 ｘ 20 mm, MeCN：MeOH：DEA, 25：75：0.1, 15mL/分, 265nm.

以下の実施例は、実施例２２で説明される方法と類似の方法を用い、関連するジアステレオマーをキラルＨＰＬＣで精製することにより得られた。

実施例２８：（Ｓ）−４−｛４’−［２−アミノ−３−（（Ｓ）−２−シアノピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル］ビフェニル−４−イルオキシメチル｝ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル塩酸塩

（Ｓ）−４−｛４’−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（（Ｓ）−２−シアノピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル]ビフェニル−４−イルオキシメチル｝ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造７３、５６ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ）のＤＣＭ溶液にＴＦＡ（２．５ｍＬ）を加えた。室温で２．５時間撹拌後、反応混合物を濃縮し、残渣をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）および飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（１００ｍＬ）で分液処理した。層を分離し、水相をＥｔＯＡｃ（３ｘ５０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、減圧濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィ（ＳｉＯ_２、ＤＣＭ：ＭｅＯＨ、１００：７．５）で精製し、表題化合物を遊離アミンとして得た。生成物をＭｅＯＨ（５０ｍＬ）に溶解し、１Ｍ ＨＣｌ溶液（１ｍＬ）で洗浄した。溶媒を減圧除去し、ＭｅＯＨ（２ｘ５０ｍＬ）で共蒸留し、表題化合物を得た：保持時間＝2.97分; m/z (ES⁺) = 519.5 [M + H]⁺.

実施例２９：（Ｓ）−４−｛４’−［２−アミノ−３−（（Ｓ）−３−フルオロピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル］ビフェニル−４−イルオキシメチル｝ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル塩酸塩

実施例２８で説明される方法を用い、（Ｓ）−４−｛４’−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（（Ｓ）−３−フルオロピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル］ビフェニル−４−イルオキシメチル｝ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造７１、７５ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）から表題化合物を製造した：保持時間＝3.03分; m/z (ES⁺) = 512.4 [M + H]⁺.

実施例３０：２−アミノ−３−（２−フルオロ−４−｛６−［１−（６−メチルピラジン−２−イル）ピペリジン−４−イルメトキシ］ピリジン−３−イル｝フェニル）−１−ピロリジン−１−イル−プロパン−１−オン

［１−（６−メチルピラジン−２−イル）ピペリジン−４−イル］メタノール（１４４ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ）およびカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（６７ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３ｍＬ）溶液を５分間撹拌し、（Ｓ）−｛１−［２−フルオロ−４−（６−フルオロピリジン−３−イル）ベンジル]−２−オキソ−２−ピロリジン−１−イルエチル｝カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（製造７４、７５ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を加え、マイクロ波反応器内において１５０℃で３０分間加熱した。反応混合物をＭｇＳＯ_４のプラグを通して濾過し、溶媒を減圧除去した。残渣をプレパラティブＨＰＬＣで精製し、表題化合物を得た：保持時間＝2.82分; m/z (ES⁺) = 519.5 [M + H]⁺.

以下の実施例は、実施例３０で説明される方法を用い、（Ｓ）−｛１−［２−フルオロ−４−（６−フルオロピリジン−３−イル）ベンジル］−２−オキソ−２−ピロリジン−１−イルエチル｝カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（製造７４）を適当なアルコールで処理することにより製造された。

実施例３４：（Ｓ）−２−アミノ−３−（２−フルオロ−４−｛６−［１−（３−イソプロピル−［１，２，４］オキサジアゾール−５−イル）ピペリジン−４−イルメトキシ］ピリジン−３−イル｝フェニル）−１−ピロリジン−１−イル−プロパン−１−オン

実施例３０で説明される方法を用い、［１−（３−イソプロピル−［１，２，４］オキサジアゾール−５−イル）ピペリジン−４−イル］メタノール（１５７ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ）を（Ｓ）−｛１−［２−フルオロ−４−（６−フルオロピリジン−３−イル）ベンジル］−２−オキソ−２−ピロリジン−１−イルエチル｝カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（製造７４、７５ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）と反応させることにより表題化合物を製造した。さらに、キラルＨＰＬＣで精製することにより表題化合物を得た：保持時間＝2.77分; m/z (ES⁺) = 537.4 [M + H]⁺.

実施例３５：（Ｓ）−１−（４−｛５−［４−（２−アミノ−３−オキソ−３−ピロリジン−１−イルプロピル）−３−フルオロフェニル］ピリジン−２−イルオキシメチル｝ピペリジン−１−イル）−３−メチルブタン−１−オン

実施例３０で説明される方法を用い、１−（４−ヒドロキシメチルピペリジン−１−イル）−３−メチルブタン−１−オン（４９ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）を（Ｓ）−｛１−［２−フルオロ−４−（６−フルオロピリジン−３−イル）ベンジル]−２−オキソ−２−ピロリジン−１−イルエチル｝カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（製造７４、７０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）と反応させることにより表題化合物を製造した。さらにキラルＨＰＬＣで精製することにより、表題化合物を得た：保持時間＝2.77分; m/z (ES⁺) = 511.5 [M + H]⁺.

実施例３６：（Ｓ）−４−｛５−［４−（２−アミノ−３−オキソ−３−ピロリジン−１−イルプロピル）−３−フルオロフェニル］ピリジン−２−イルオキシメチル｝ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

実施例２１で説明される方法を用い、（Ｓ）−４−｛５−［４−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−オキソ−３−ピロリジン−１−イルプロピル）−３−フルオロフェニル］ピリジン−２−イルオキシメチル｝ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造７７）から表題化合物を製造した：保持時間＝2.96分; m/z (ES⁺) = 513.4 [M + H]⁺.

実施例３７： ４−｛（Ｓ）−１−［４’−（（Ｓ）−２−アミノ−３−オキソ−３−ピロリジン−１−イルプロピル）−３’−フルオロビフェニル−４−イルオキシ］エチル｝ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

（Ｓ）−４−｛１−［４’−（２−アミノ−３−オキソ−３−ピロリジン−１−イルプロピル）−３’−フルオロビフェニル−４−イルオキシ］エチル｝ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（実施例１５）のキラルＨＰＬＣによる分離により表題化合物を得た：Daicel chiral pack IA 250 ｘ 20 mm, MeCN：MeOH：THF：DEA, 50：50：2：0.1, 15mL/分, 285nm.

実施例３８：４−｛（Ｒ）−１−［４’−（（Ｓ）−２−アミノ−３−オキソ−３−ピロリジン−１−イルプロピル）−３’−フルオロビフェニル−４−イルオキシ］エチル｝ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

（Ｓ）−４−｛１−［４’−（２−アミノ−３−オキソ−３−ピロリジン−１−イルプロピル）−３’−フルオロビフェニル−４−イルオキシ］エチル｝ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（実施例１５）のキラルＨＰＬＣによる分離により表題化合物を得た：Daicel chiral pack IA 250 ｘ 20 mm, MeCN：MeOH：THF：DEA, 50：50：2：0.1, 15mL/分, 285nm.

実施例３９：４−（（Ｒ）−１−｛４’−［（Ｓ）−２−アミノ−３−（（Ｓ）−３−フルオロピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル］−３’−フルオロビフェニル−４−イルオキシ｝エチル）ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

（Ｓ）−４−（１−｛４’−［２−アミノ−３−（（Ｓ）−３−フルオロピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル］−３’−フルオロビフェニル−４−イルオキシ｝エチル）ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（実施例１６）のキラルＨＰＬＣによる分離により表題化合物を得た： Daicel chiral pack IA 250 ｘ 20 mm, MeCN：MeOH：THF：DEA, 50：50：3：0.1, 15mL/分, 285nm.

実施例４０：４−（（Ｓ）−１−｛４’−[（Ｓ）−２−アミノ−３−（（Ｓ）−３−フルオロピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル］−３’−フルオロビフェニル−４−イルオキシ｝エチル）ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル

（Ｓ）−４−(１−｛４’−［２−アミノ−３−（（Ｓ）−３−フルオロピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル］−３’−フルオロビフェニル−４−イルオキシ｝エチル）ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（実施例１６）のキラルＨＰＬＣによる分離により表題化合物を得た： Daicel chiral pack IA 250 ｘ 20 mm, MeCN：MeOH：THF：DEA, 50：50：3：0.1, 15mL/分, 285nm.

実施例４１：（Ｓ）−４−｛４’−［２−アミノ−３−（（Ｓ）−３−フルオロピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル］−３’−フルオロビフェニル−４−イルオキシ｝ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステルｐ−トルエンスルホン酸塩

（Ｓ）−４−｛４’−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（（Ｓ）−３−フルオロピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル］−３’−フルオロビフェニル−４−イルオキシ｝ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造６４、２０４ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）溶液にＴＦＡ（１ｍＬ）を加え、反応物を室温で１時間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（１００ｍＬ）を加えて反応をクエンチし、次いで有機相を分離し、ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥した（ＭｇＳＯ_４）。溶媒を減圧除去し、表題化合物を遊離アミンとして得た。残渣をＤＣＭに溶解し、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（１当量、５２ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ溶液を加えた。溶媒を減圧除去し、表題化合物をそのｐ−トルエンスルホン酸塩として得た：保持時間＝3.12分; m/z (ES⁺) = 516.3 [M + H]⁺.

以下の実施例は、実施例４１で説明される方法を用い、適当なｔｅｒｔ−ブチルカルバメート−保護アミンをＴＦＡで処理することにより、そのｐ−トルエンスルホン酸塩として製造された。

実施例４５：（Ｓ）−４−｛４’−［２−アミノ−３−（（Ｓ）−３−フルオロピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル］−３’−フルオロビフェニル−３−イルオキシメチル｝ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル塩酸塩

（Ｓ）−４−｛４’−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（（Ｓ）−３−フルオロピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル］−３’−フルオロビフェニル−３−イルオキシメチル｝ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造６６、３７ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）溶液にＴＦＡ（１ｍＬ）を加えた。反応物を室温で３０分間撹拌し、次いでＤＣＭ（１５０ｍＬ）で希釈した。飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（１５０ｍＬ）を加え、有機物を分離し、ブラインで洗浄し、乾燥した（ＭｇＳＯ_４）。溶媒を減圧除去し、表題化合物を遊離アミンとして得た。生成物をジエチルエーテル（１０ｍＬ）に溶解し、数滴のＨＣｌ溶液（４Ｍ／ジオキサン）で処理した。容器を傾けて溶媒を除去し、表題化合物を得た：保持時間＝2.95分; m/z (ES⁺) = 530.4 [M + H]⁺.

以下の実施例は、実施例４５で説明される方法と同様の方法を用い、適当なｔｅｒｔ−ブチルカルバメート−保護アミンをＴＦＡで処理することにより製造された。

実施例５２：（Ｓ）−４−（４−｛４−［２−アミノ−３−（（Ｓ）−３−フルオロピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル]−３−フルオロフェニル｝ピリジン−２−イルオキシメチル）ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル塩酸塩

実施例１７で説明される方法と類似の方法を用い、（Ｓ）−４−（４｛４−［２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（（Ｓ）−３−フルオロピロリジン−１−イル）−３−オキソプロピル]−３−フルオロフェニル｝ピリジン−２−イルオキシメチル）ピペリジン−１−カルボン酸イソプロピルエステル（製造１０６、１５０ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）から表題化合物を製造した：保持時間＝2.83分; m/z (ES⁺) = 531.4 [M + H]⁺.

本発明の化合物の生物学的活性は以下のアッセイシステムにおいて試験されてもよい。

（ＧＰＲ１１９酵母レポーターアッセイ）
酵母レポーターアッセイ
酵母細胞ベースのレポーターアッセイは先に文献に記載されている（例えば、Miret J. J. et al, 2002, J. Biol. Chem., 277：6881-6887; Campbell R.M. et al, 1999, Bioorg. Med. Chem. Lett., 9：2413-2418; King K. et al, 1990, Science, 250：121-123); WO 99/14344; WO 00/12704; および US 6,100,042参照）。簡潔には、内因性酵母Ｇ−アルファ（ＧＰＡ１）を欠損させ、多様な技法を用いて構築したＧ−タンパク質キメラで置き換えるよう酵母細胞を操作したものである。さらに、内因性酵母ＧＰＣＲ、Ｓｔｅ３を欠損させ、最適な哺乳類ＧＰＣＲを異種発現させた。酵母において、フェロモンシグナリング伝達経路における要素が、これは真核細胞でも保存されているが（例えば、マイトジェン活性化プロテインキナーゼ経路）、Ｆｕｓ１の発現を駆動する。β-ガラクトシダーゼ（ＬａｃＺ）をＦｕｓ１プロモーター制御下に置くことにより、受容体の活性化が酵素の読み出しに繋がるシステムが構築されている。

Agatep et alにより記載された酢酸リチウム法の変法により、酵母細胞を形質転換した（Agatep, R. et al, 1998, Transformation of Saccharomyces cerevisiae by the lithium acetate/single-stranded carrier DNA/polyethylene glycol (LiAc/ss-DNA/PEG) protocol. Technical Tips Online, Trends Journals, Elsevier）。簡潔には、酵母細胞を酵母トリプトンプレート（ＹＴ）上で終夜成長させた。キャリアー一本鎖ＤＮＡ（１０μｇ）、２つのＦｕｓ１ｐ-ＬａｃＺレポータープラスミド各２μｇ（１つはＵＲＡ選択マーカー、１つはＴＲＰを有する）、酵母発現ベクター（２μｇの複製起点）に組み込んだＧＰＲ１１９（ヒトまたはマウスの受容体）２μｇおよび酢酸リチウム／ポリエチレングリコール／ＴＥバッファーをエッペンドルフチューブにピペットで入れた。受容体／受容体不含コントロールを含んだ酵母発現プラスミドはＬＥＵマーカーを有する。酵母細胞をこの混合物に接種し、反応を３０℃で６０分間進めた。酵母細胞に４２℃で１５分間熱ショックを与えた。次いで、細胞を洗浄し、選択用プレートに播種した。選択用プレートは、既定の合成酵母培地からＬＥＵ、ＵＲＡおよびＴＲＰ（ＳＤ−ＬＵＴ）を差し引いたものである。３０℃で２−３日間インキュベート後、選択用プレートに生えたコロニーをＬａｃＺアッセイで試験した。

β−ガラクトシダーゼの蛍光定量的酵素アッセイを行うために、ヒトまたはマウスＧＰＲ１１９受容体を保持する酵母細胞を液体ＳＤ−ＬＵＴ培地で不飽和濃度まで終夜成長させた（即ち、細胞はまだ分裂中であり、未だ静止期には達していなかった）。これらの細胞を新鮮な培地で最適なアッセイ濃度に希釈し、９０μＬの酵母細胞を９６−ウェルの黒色ポリスチレンプレート（Costar）に加えた。ＤＭＳＯに溶解し、１０％ＤＭＳＯで１０ｘ濃度に希釈した化合物をプレートに加え、プレートを３０℃に４時間置いた。４時間後、β−ガラクトシダーゼの基質を各ウェルに加えた。これらの実験において、フルオレセインを放出し、蛍光定量の読み出しを可能にする酵素の基質であるフルオレセインジ（β−Ｄ−ガラクトシダーゼ）（ＦＤＧ）を用いた。２０μＬ／ウェルの５００μＭ ＦＤＧ／２．５％ Ｔｒｉｔｏｎ １００を加えた（界面活性剤は細胞の透過性を維持するために必要である）。細胞と基質を６０分間インキュベート後、２０μＬ／ウェルの１Ｍ 炭酸ナトリウムを加えて反応を終了させ、蛍光シグナルを増強した。蛍光光度計を用いて４８５／５３５ｎｍでプレートを読み取った。

このアッセイにおいて、実施例１から５２の全てが、蛍光シグナルをバックグランドシグナル（即ち、化合物不含１％ＤＭＳＯ存在下で得られたシグナル）の少なくとも〜１．５倍に増強する活性を示した。少なくとも５倍に増強する本発明の化合物が好ましいであろう。

ｃＡＭＰアッセイ
組み換えヒトＧＰＲ１１９を安定発現している細胞株を確立し、サイクリックＡＭＰ（ｃＡＭＰ）の細胞内レベルに対する本発明の化合物の影響の調査にこの細胞株を用いた。細胞の単層をリン酸緩衝生理食塩水で洗浄し、刺激バッファー（＋１％ ＤＭＳＯ）中の様々な濃度の化合物により３７℃で３０分間刺激した。次いで、細胞を溶解し、Perkin Elmer AlphaScreenTM (Amplified Luminescent Proximity Homogeneous Assay) cAMP キットを用いてｃＡＭＰ含量を決定した。バッファーおよびアッセイ条件は製造者のプロトコルに記載の通りである。

本発明の化合物により濃度依存的な細胞内ｃＡＭＰレベルが得られ、通常ＥＣ_５０は＜１０μＭであった。ｃＡＭＰアッセイにおいて１μＭ以下のＥＣ_５０を示す化合物が好ましいであろう。

ＤＰＰ−ＩＶアッセイ方法
ＤＰＰ−ＩＶ活性は、蛍光発生ペプチド基質であるＨ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−７−アミノ−４−メチルクマリン（ＧＰ−ＡＭＣ）の切断のモニターにより測定した（生成物である７−アミノ−４−メチルクマリンは励起３８０ｎｍ、発光４６０ｎｍにおける蛍光により定量化される）。アッセイは、９６−ウェルプレート（Ｂｌａｃｋ ＯｐｔｉＰｌａｔｅ−９６Ｆ）、総体積１００μＬ／ウェル（５０ｍＭ トリス、ｐＨ７．６、１００μＭ ＧＰ−ＡＭＣ、１０−２５μＵ 組み換えヒトＤＰＰ−ＩＶ、および１％ＤＭＳＯの最終濃度における様々な希釈の阻害剤からなる）において行った。３７℃で３０分間インキュベート後、プレートを蛍光光度計で読み取った。組み換えヒトＤＰＰ−ＩＶ（Ａｓｎ２９−Ｐｒｏ７６６残基）はＢｉｏＭｏｌから購入した。

実施例１から５２の全てが、このアッセイにおいて＜２０μＭのＩＣ_５０を有していた。式（Ｉａ）の化合物は通常＜２０μＭのＩＣ_５０を有していた。

（膵β細胞（ＨＩＴ−Ｔ１５）のインビトロモデルにおける本発明の化合物の抗糖尿病効果）
細胞培養
ＨＩＴ−Ｔ１５細胞（継代数６０）をＡＴＣＣから得、１０％ウシ胎児血清および３０ｎＭ亜セレン酸ナトリウムを含んだＲＰＭＩ１６４０培地中で培養した。全ての実験は、この細胞株が継代数８１回以上で性質が変わることを記載した文献に従い(Zhang HJ, Walseth TF, Robertson RP. Insulin secretion and cAMP metabolism in HIT cells. Reciprocal and serial passage-dependent relationships. Diabetes. 1989 Jan;38(1)：44-8)、７０回以下の継代数の細胞で行われた。

ｃＡＭＰアッセイ
ＨＩＴ−Ｔ１５細胞を標準的な培養用培地を用い、９６ウェルプレートに１００，０００細胞／０．１ｍＬ／ウェルで播種し、２４時間培養し、培地を廃棄した。細胞を室温で１５分間、１００μｌの刺激バッファー（ハンクス平衡塩類溶液、５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、０．５ｍＭ ＩＢＭＸ、０．１％ ＢＳＡ、ｐＨ７．４）でインキュベートした。これを廃棄し、０．５％ＤＭＳＯ存在下の０．００１、０．００３、０．０１、０．０３、０．１、０．３、１、３、１０、３０μＭの範囲の刺激バッファー中の化合物希釈物で置き換えた。細胞を室温で３０分間インキュベートした。次いで、７５μＬの溶解バッファー（５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、０．３％ Ｔｗｅｅｎ−２０、０．１％ ＢＳＡ、ｐＨ７．４）を各ウェルに加え、プレートを９００ｒｐｍで２０分間振盪した。微粒子状物質を３０００ｒｐｍ、５分間の遠心により除去し、次いでサンプルを３８４−ウェルプレートに２つの複製で移し、Perkin Elmer AlphaScreen cAMP assayキットの説明書に従って次に進んだ。簡単には、８μＬのサンプル、５μＬのアクセプタービーズ混合物および１２μＬの検出混合物を含む２５μＬの反応液を、最終的な反応成分の濃度がキットの説明書の指示と同じになるようにセットアップした。反応液を室温で１５０分間インキュベートし、プレートをPackard Fusion装置で読み取った。ｃＡＭＰの測定値を既知のｃＡＭＰ量の標準曲線（０．０１、０．０３、０．１、０．３、１、３、１０、３０、１００、３００、１０００ｎＭ）と比較し、読み取った値をｃＡＭＰ量の絶対値に変換した。データはＸＬｆｉｔ ３ソフトウェアで解析した。

代表的な本発明の化合物は、ｃＡＭＰを１０μＭ以下のＥＣ_５０において増加させることが示された。ｃＡＭＰアッセイにおいて１μＭ以下のＥＣ_５０を示す化合物が好ましいであろう。

インスリン分泌アッセイ
ＨＩＴ−Ｔ１５細胞を標準的な培養用培地で１２−ウェルプレートに１０^６細胞／１ｍｌ／ウェルで播種し、３日間培養し、培地を廃棄した。細胞を補足クレブス・リンガーバッファー（ＫＲＢ）（１１９ｍＭ ＮａＣｌ、４．７４ｍＭ ＫＣｌ、２．５４ｍＭ ＣａＣｌ_２、１．１９ｍＭ ＭｇＳＯ_４、１．１９ｍＭ ＫＨ_２ＰＯ_４、２５ｍＭ ＮａＨＣＯ_３、１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．４、０．１％ウシ血清アルブミン）で２回洗浄した。細胞を１ｍｌ ＫＲＢで３７℃において３０分間インキュベートし、バッファーを廃棄した。これに次いで、ＫＲＢで３０分間２回目のインキュベートを行い、これを回収し、各ウェルにおけるインスリンの基底分泌レベルの測定に用いた。次いで、１ｍｌ ＫＲＢ中の化合物希釈物（０、０．１、０．３、１、３、１０μＭ）を２つの複製ウェルに加え、５．６ｍＭ グルコースを添加した。３７℃で３０分間インキュベート後、インスリンレベルを測定するためにサンプルを採取した。インスリンの測定は、ＭｅｒｃｏｄｉａラットインスリンＥＬＩＳＡキットを用い、製造者の指示に従い、既知のインスリン濃度の標準曲線を用いて行った。各ウェルについて、インスリンレベルは、グルコースの非存在下におけるインキュベーション前から基底分泌レベルを差し引いて補正した。データはＸＬｆｉｔ ３ソフトウェアを用いて解析した。

本発明の化合物は１０μＭ以下のＥＣ_５０においてインスリン分泌を増加させることが望ましい。

経口グルコース負荷試験
本発明の化合物が経口グルコース（Ｇｌｃ）耐性に及ぼす影響は、オスＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットを用いて評価することができる。ラットはＧｌｃ投与の１６時間前から絶食させ、試験中も絶食状態を維持した。試験中、ラットは水を自由に摂取することができた。Ｇｌｃ負荷投与の６０分前に動物の尾に切り口を入れ、次いで血液（１滴）をＧｌｃ基底レベルの測定用に採取した。次いで、ラットの体重を量り、試験化合物またはベヒクル（２０％ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン水溶液)を経口投与し、４５分後にさらに血液サンプルを採取し、Ｇｌｃ負荷（２ｇ ｋｇ^−１、経口）を行った。血液サンプルは、Ｇｌｃ投与後、尾の切り口から５、１５、３０、６０、１２０および１８０分後に採取した。血中グルコースレベルは、採取直後に市販のグルコース計（OneTouch（登録商標） UltraTM、Lifescanから購入）を用いて測定した。本発明の化合物は、好ましくは≦１００ｍｇ ｋｇ^−１の投与量においてＧｌｃ変動を統計学的に有意に減少させる。

本発明の化合物が経口グルコース（Ｇｌｃ）耐性に及ぼす影響はまた、オスＣ５７Ｂｌ／６またはオスｏｂ／ｏｂマウスを用いて評価することができる。マウスをＧｌｃ投与５時間前に絶食させ、実験中も絶食状態を維持した。実験中、マウスは水を自由に摂取することができた。Ｇｌｃ負荷投与の４５分前に動物の尾に切り口を入れ、血液（２０μＬ）を基底Ｇｌｃレベルの測定用に採取した。次いで、マウスの体重を量り、試験化合物またはベヒクル（２０％ ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン水溶液または２５％ Ｇｅｌｕｃｉｒｅ ４４／１４）を経口投与し、３０分後、さらに血液サンプルを（２０μＬ）採取し、Ｇｌｃ負荷（２−５ｇ ｋｇ^−１、経口）を行った。次いで、血液サンプル（２０μＬ）をＧｌｃ投与後２５、５０、８０、１２０、および１８０分後に採取した。Ｇｌｃレベル測定用の２０μＬの血液サンプルは、尾の切り口から使い捨てマイクロピペと（Dade Diagnostics Inc.、プエルトリコ）に取り、４８０μＬの溶血試薬を加えた。次いで、９６−ウェルアッセイプレート中で、希釈した溶血血液の複製２０μＬアリコートに１８０μＬのトリンダーグルコース試薬（Trinders glucose reagent）(シグマ酵素的（トリンダー）比色法）を加えた。混合後、サンプルを室温で３０分間維持し、Ｇｌｃスタンダード（シグマ グルコース／尿素窒素複合スタンダードセット）に対して読み取った。本発明の化合物は、好ましくは≦１００ｍｇ ｋｇ^−１の投与量においてＧｌｃ変動を統計学的に有意に減少させる。

Claims (20)

1. 式（Ｉ）：
   

   

   ［式中、
   ｐは１または２であり；
   ｐが２のとき、ＺはＣＨＲ^１またはＮＲ^２であり；
   およびｐが１のとき、Ｚは−Ｎ−ＣＨ_２−Ｐｈ（ここでＰｈはＣ_１−４アルキル、Ｃ_１−４ハロアルキルおよびハロから独立して選択される１または２個の基で適宜置換されていてもよい）であり；
   Ｒ^１は−Ｎ（ＣＨ_３）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ_２−４アルキルまたは−Ｎ（ＣＨ_３）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ_３−６シクロアルキル（ここで、シクロアルキルはＣ_１−４アルキルで適宜置換されていてもよい）であり；
   Ｒ^２は−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ_２−４アルキル、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ_３−６シクロアルキル（ここで、シクロアルキルはＣ_１−４アルキルで適宜置換されていてもよい）、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ_２−４アルキル、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ_３−６シクロアルキル（ここで、シクロアルキルはＣ_１−４アルキルで適宜置換されていてもよい）であるか、あるいはＲ^２は：
   

   

   （ここで、Ｔはそれに属す−Ｎ＝Ｃ−と共に、Ｎ、ＯおよびＳから選択される最大２個のヘテロ原子をさらに適宜含んでいてもよい５または６員のヘテロアリール環を形成する）であり；
   Ｔがそれに属す−Ｎ＝Ｃ−と共に５員のヘテロアリール環を形成するとき、Ｒ^６はＣ_１−４アルキルで適宜置換されていてもよいＣ_２−４アルキルまたはＣ_３−６シクロアルキルであり、Ｔがそれに属す−Ｎ＝Ｃ−と共に６員のヘテロアリール環を形成するとき、Ｒ^６はＣ_２−４アルキル、フルオロまたはクロロであり；
   Ｑは−Ｏ−、−Ｏ−ＣＲ^８Ｈ−または−ＣＲ^８Ｈ−Ｏ−であり；
   Ｘはフェニル、またはＮ、ＯおよびＳから選択される１つもしくはそれ以上のヘテロ原子を含む５から６員のヘテロアリール基であり；ただし、Ｑが−Ｏ−ＣＲ^８Ｈ−のとき、Ｘは６員のヘテロアリール基ではなく；
   Ｙは結合、−ＣＨ_２−または−ＣＨＭｅ−であり；
   Ｒ^３およびＲ^３ａは独立して水素、フルオロまたはクロロから選択されるか、またはＲ^７がシアノのとき、Ｒ^３はメチルでもよく；ただし、Ｙが結合であり、Ｒ^３およびＲ^３ａがＹ基のオルト位にあるとき、それらは共に水素であり；
   Ｒ^４は水素であるか、あるいはＹが−ＣＨ_２−または−ＣＨＭｅ−のとき、Ｒ^４はフェニル環の＊位に−ＣＨ_２−結合して縮合６員含窒ヘテロ環を形成してもよく；
   Ｒ^５は１つまたはそれ以上のフルオロ、クロロ、シアノまたはメチル基で適宜置換されていてもよいベンジルであるか、あるいはＲ^５は：
   

   

   （ここで、
   ｒは１または２であり、ｍは０、１または２であり；
   ＷはＣＨ_２であるか、あるいはｒが２のとき、ＷはＳでもよく；
   ＷがＣＨ_２のとき、Ｒ^７はフルオロまたはシアノであり、ＷがＳのとき、Ｒ^７はシアノである）であり；
   Ｒ^８は水素またはメチルである］
   の化合物、またはその医薬的に許容される塩。
2. 式（Ｉａ）：
   

   

   で定義される立体化学を有する請求項１に記載の化合物、またはその医薬的に許容される塩。
3. ｐが２である請求項１または２に記載の化合物、またはその医薬的に許容される塩。
4. ＺがＮＲ^２である請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物、またはその医薬的に許容される塩。
5. Ｒ^２が−Ｃ（Ｏ）ＯＲ^４である請求項４に記載の化合物、またはその医薬的に許容される塩。
6. Ｒ^２が：
   

   

   （ここで、Ｔがそれに属す−Ｎ＝Ｃ−共に形成する５または６員のヘテロアリール環はオキサジアゾールおよびピリミジンから選択される）
   である請求項４に記載の化合物、またはその医薬的に許容される塩。
7. Ｘがメタ位もしくはパラ位結合フェニルまたは１つもしくは２つの窒素原子を含むメタ位もしくはパラ位結合６員ヘテロ芳香環である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物、またはその医薬的に許容される塩。
8. Ｘがパラ位結合フェニルまたは１つもしくはそれ以上の窒素原子を含むパラ位結合６員ヘテロ芳香環である請求項６に記載の化合物、またはその医薬的に許容される塩。
9. Ｘがフェニルまたはピリジルである請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物、またはその医薬的に許容される塩。
10. Ｒ^３がフルオロである請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物、またはその医薬的に許容される塩。
11. Ｒ^４が水素である請求項１〜１０のいずれか一項に記載の化合物、またはその医薬的に許容される塩。
12. Ｒ^５が：
    

    

    である、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の化合物、またはその医薬的に許容される塩。
13. ｒが２である請求項１２に記載の化合物、またはその医薬的に許容される塩。
14. ＷがＣＨ_２である請求項１２に記載の化合物、またはその医薬的に許容される塩。
15. 遊離塩基として実施例１から５２のいずれか１つに定義される化合物、またはその医薬的に許容される塩。
16. 請求項１から１５のいずれか一項に記載の化合物またはその医薬的に許容される塩、および医薬的に許容される担体を含む医薬組成物。
17. ＧＰＲ１１９が関与する病態または疾患の治療方法であって、治療上有効量の請求項１から１５のいずれか一項に記載の化合物またはその医薬的に許容される塩を治療が必要な対象に投与する段階を特徴とする方法。
18. ＧＰＲ１１９またはＤＰＰ−ＩＶが関与する病態または疾患の治療方法であって、治療上有効量の請求項１から１５のいずれか一項に記載の化合物またはその医薬的に許容される塩を治療が必要な対象に投与する段階を特徴とする方法。
19. ２型糖尿病の治療方法であって、治療上有効量の請求項１から１５のいずれか一項に記載の化合物またはその医薬的に許容される塩を治療が必要な対象に投与する段階を特徴とする方法。
20. 肥満、メタボリックシンドローム（シンドロームＸ）、耐糖能障害、高脂血症、高トリグリセライド血症、高コレステロール血症、低ＨＤＬレベルまたは高血圧の治療方法であって、治療上有効量の請求項１から１５のいずれか一項に記載の化合物またはその医薬的に許容される塩を治療が必要な患者に投与する段階を特徴とする方法。