JP2012052985A - 蛍光強度補正方法及び蛍光強度算出装置 - Google Patents
蛍光強度補正方法及び蛍光強度算出装置 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2012052985A JP2012052985A JP2010197495A JP2010197495A JP2012052985A JP 2012052985 A JP2012052985 A JP 2012052985A JP 2010197495 A JP2010197495 A JP 2010197495A JP 2010197495 A JP2010197495 A JP 2010197495A JP 2012052985 A JP2012052985 A JP 2012052985A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- fluorescence intensity
- fluorescent dye
- fluorescence
- autofluorescence
- spectrum
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 62
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 title claims abstract description 44
- 238000012937 correction Methods 0.000 title claims abstract description 43
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 claims abstract description 110
- 238000005259 measurement Methods 0.000 claims abstract description 42
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 claims abstract description 42
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 37
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 claims description 58
- 238000010186 staining Methods 0.000 claims description 18
- 239000010419 fine particle Substances 0.000 claims description 11
- 230000001678 irradiating effect Effects 0.000 claims description 9
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 claims description 2
- 239000003086 colorant Substances 0.000 abstract 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 24
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 16
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 10
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 7
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 6
- 108010004729 Phycoerythrin Proteins 0.000 description 5
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 5
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002861 polymer material Substances 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- BZTDTCNHAFUJOG-UHFFFAOYSA-N 6-carboxyfluorescein Chemical compound C12=CC=C(O)C=C2OC2=CC(O)=CC=C2C11OC(=O)C2=CC=C(C(=O)O)C=C21 BZTDTCNHAFUJOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OZLGRUXZXMRXGP-UHFFFAOYSA-N Fluo-3 Chemical compound CC1=CC=C(N(CC(O)=O)CC(O)=O)C(OCCOC=2C(=CC=C(C=2)C2=C3C=C(Cl)C(=O)C=C3OC3=CC(O)=C(Cl)C=C32)N(CC(O)=O)CC(O)=O)=C1 OZLGRUXZXMRXGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052770 Uranium Inorganic materials 0.000 description 2
- 108010004469 allophycocyanin Proteins 0.000 description 2
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 2
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 238000009499 grossing Methods 0.000 description 2
- 229920000592 inorganic polymer Polymers 0.000 description 2
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 description 2
- 229920000620 organic polymer Polymers 0.000 description 2
- XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M propidium iodide Chemical compound [I-].[I-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CCC[N+](C)(CC)CC)=C1C1=CC=CC=C1 XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- MPLHNVLQVRSVEE-UHFFFAOYSA-N texas red Chemical compound [O-]S(=O)(=O)C1=CC(S(Cl)(=O)=O)=CC=C1C(C1=CC=2CCCN3CCCC(C=23)=C1O1)=C2C1=C(CCC1)C3=[N+]1CCCC3=C2 MPLHNVLQVRSVEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052721 tungsten Inorganic materials 0.000 description 2
- NAWXUBYGYWOOIX-SFHVURJKSA-N (2s)-2-[[4-[2-(2,4-diaminoquinazolin-6-yl)ethyl]benzoyl]amino]-4-methylidenepentanedioic acid Chemical compound C1=CC2=NC(N)=NC(N)=C2C=C1CCC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CC(=C)C(O)=O)C(O)=O)C=C1 NAWXUBYGYWOOIX-SFHVURJKSA-N 0.000 description 1
- CHADEQDQBURGHL-UHFFFAOYSA-N (6'-acetyloxy-3-oxospiro[2-benzofuran-1,9'-xanthene]-3'-yl) acetate Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(OC(C)=O)C=C1OC1=CC(OC(=O)C)=CC=C21 CHADEQDQBURGHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CHRJZRDFSQHIFI-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.C=CC1=CC=CC=C1C=C CHRJZRDFSQHIFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PRDFBSVERLRRMY-UHFFFAOYSA-N 2'-(4-ethoxyphenyl)-5-(4-methylpiperazin-1-yl)-2,5'-bibenzimidazole Chemical compound C1=CC(OCC)=CC=C1C1=NC2=CC=C(C=3NC4=CC(=CC=C4N=3)N3CCN(C)CC3)C=C2N1 PRDFBSVERLRRMY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 4',6-Diamino-2-phenylindol Chemical compound C1=CC(C(=N)N)=CC=C1C1=CC2=CC=C(C(N)=N)C=C2N1 FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010000239 Aequorin Proteins 0.000 description 1
- 238000012935 Averaging Methods 0.000 description 1
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 108091005461 Nucleic proteins Proteins 0.000 description 1
- 229930187135 Olivomycin Natural products 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- -1 Rhodamine 101 isothiocyanate Chemical class 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 241000723873 Tobacco mosaic virus Species 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- CAWBRCOBJNWRLK-UHFFFAOYSA-N acetyloxymethyl 2-[4-[bis[2-(acetyloxymethoxy)-2-oxoethyl]amino]-3-[2-[2-[bis[2-(acetyloxymethoxy)-2-oxoethyl]amino]-5-methylphenoxy]ethoxy]phenyl]-1h-indole-6-carboxylate Chemical compound CC(=O)OCOC(=O)CN(CC(=O)OCOC(C)=O)C1=CC=C(C)C=C1OCCOC1=CC(C=2NC3=CC(=CC=C3C=2)C(=O)OCOC(C)=O)=CC=C1N(CC(=O)OCOC(C)=O)CC(=O)OCOC(C)=O CAWBRCOBJNWRLK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NTECHUXHORNEGZ-UHFFFAOYSA-N acetyloxymethyl 3',6'-bis(acetyloxymethoxy)-2',7'-bis[3-(acetyloxymethoxy)-3-oxopropyl]-3-oxospiro[2-benzofuran-1,9'-xanthene]-5-carboxylate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(C(=O)OCOC(C)=O)=CC=C2C21C1=CC(CCC(=O)OCOC(C)=O)=C(OCOC(C)=O)C=C1OC1=C2C=C(CCC(=O)OCOC(=O)C)C(OCOC(C)=O)=C1 NTECHUXHORNEGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DPKHZNPWBDQZCN-UHFFFAOYSA-N acridine orange free base Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC2=NC3=CC(N(C)C)=CC=C3C=C21 DPKHZNPWBDQZCN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- DZBUGLKDJFMEHC-UHFFFAOYSA-N benzoquinolinylidene Natural products C1=CC=CC2=CC3=CC=CC=C3N=C21 DZBUGLKDJFMEHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- ZYVSOIYQKUDENJ-WKSBCEQHSA-N chromomycin A3 Chemical compound O([C@@H]1C[C@@H](O[C@H](C)[C@@H]1OC(C)=O)OC=1C=C2C=C3C[C@H]([C@@H](C(=O)C3=C(O)C2=C(O)C=1C)O[C@@H]1O[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2O[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]3O[C@@H](C)[C@H](OC(C)=O)[C@@](C)(O)C3)C2)C1)[C@H](OC)C(=O)[C@@H](O)[C@@H](C)O)[C@@H]1C[C@@H](O)[C@@H](OC)[C@@H](C)O1 ZYVSOIYQKUDENJ-WKSBCEQHSA-N 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- CFCUWKMKBJTWLW-UHFFFAOYSA-N deoliosyl-3C-alpha-L-digitoxosyl-MTM Natural products CC=1C(O)=C2C(O)=C3C(=O)C(OC4OC(C)C(O)C(OC5OC(C)C(O)C(OC6OC(C)C(O)C(C)(O)C6)C5)C4)C(C(OC)C(=O)C(O)C(C)O)CC3=CC2=CC=1OC(OC(C)C1O)CC1OC1CC(O)C(O)C(C)O1 CFCUWKMKBJTWLW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 1
- ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N ethidium bromide Chemical compound [Br-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CC)=C1C1=CC=CC=C1 ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005542 ethidium bromide Drugs 0.000 description 1
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002189 fluorescence spectrum Methods 0.000 description 1
- YFHXZQPUBCBNIP-UHFFFAOYSA-N fura-2 Chemical compound CC1=CC=C(N(CC(O)=O)CC(O)=O)C(OCCOC=2C(=CC=3OC(=CC=3C=2)C=2OC(=CN=2)C(O)=O)N(CC(O)=O)CC(O)=O)=C1 YFHXZQPUBCBNIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VPSRLGDRGCKUTK-UHFFFAOYSA-N fura-2-acetoxymethyl ester Chemical compound CC(=O)OCOC(=O)CN(CC(=O)OCOC(C)=O)C1=CC=C(C)C=C1OCCOC(C(=C1)N(CC(=O)OCOC(C)=O)CC(=O)OCOC(C)=O)=CC2=C1OC(C=1OC(=CN=1)C(=O)OCOC(C)=O)=C2 VPSRLGDRGCKUTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007863 gel particle Substances 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- PNDZEEPOYCVIIY-UHFFFAOYSA-N indo-1 Chemical compound CC1=CC=C(N(CC(O)=O)CC(O)=O)C(OCCOC=2C(=CC=C(C=2)C=2N=C3[CH]C(=CC=C3C=2)C(O)=O)N(CC(O)=O)CC(O)=O)=C1 PNDZEEPOYCVIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 1
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 1
- 239000000696 magnetic material Substances 0.000 description 1
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 1
- CFCUWKMKBJTWLW-BKHRDMLASA-N mithramycin Chemical compound O([C@@H]1C[C@@H](O[C@H](C)[C@H]1O)OC=1C=C2C=C3C[C@H]([C@@H](C(=O)C3=C(O)C2=C(O)C=1C)O[C@@H]1O[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2O[C@H](C)[C@H](O)[C@H](O[C@@H]3O[C@H](C)[C@@H](O)[C@@](C)(O)C3)C2)C1)[C@H](OC)C(=O)[C@@H](O)[C@@H](C)O)[C@H]1C[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)O1 CFCUWKMKBJTWLW-BKHRDMLASA-N 0.000 description 1
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- CZDBNBLGZNWKMC-MWQNXGTOSA-N olivomycin Chemical compound O([C@@H]1C[C@@H](O[C@H](C)[C@@H]1O)OC=1C=C2C=C3C[C@H]([C@@H](C(=O)C3=C(O)C2=C(O)C=1)O[C@H]1O[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](OC2O[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](O)C2)C1)[C@H](OC)C(=O)[C@@H](O)[C@@H](C)O)[C@H]1C[C@H](O)[C@H](OC)[C@H](C)O1 CZDBNBLGZNWKMC-MWQNXGTOSA-N 0.000 description 1
- 229950005848 olivomycin Drugs 0.000 description 1
- INAAIJLSXJJHOZ-UHFFFAOYSA-N pibenzimol Chemical compound C1CN(C)CCN1C1=CC=C(N=C(N2)C=3C=C4NC(=NC4=CC=3)C=3C=CC(O)=CC=3)C2=C1 INAAIJLSXJJHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003171 plicamycin Drugs 0.000 description 1
- 229920003229 poly(methyl methacrylate) Polymers 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000004926 polymethyl methacrylate Substances 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- INCIMLINXXICKS-UHFFFAOYSA-M pyronin Y Chemical compound [Cl-].C1=CC(=[N+](C)C)C=C2OC3=CC(N(C)C)=CC=C3C=C21 INCIMLINXXICKS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- TUFFYSFVSYUHPA-UHFFFAOYSA-M rhodamine 123 Chemical compound [Cl-].COC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C(C=CC(N)=C2)C2=[O+]C2=C1C=CC(N)=C2 TUFFYSFVSYUHPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- ACOJCCLIDPZYJC-UHFFFAOYSA-M thiazole orange Chemical compound CC1=CC=C(S([O-])(=O)=O)C=C1.C1=CC=C2C(C=C3N(C4=CC=CC=C4S3)C)=CC=[N+](C)C2=C1 ACOJCCLIDPZYJC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229910052720 vanadium Inorganic materials 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
- G01N15/10—Investigating individual particles
- G01N15/14—Optical investigation techniques, e.g. flow cytometry
- G01N15/1429—Signal processing
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N2021/6417—Spectrofluorimetric devices
- G01N2021/6421—Measuring at two or more wavelengths
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/6428—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes"
- G01N2021/6439—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes" with indicators, stains, dyes, tags, labels, marks
- G01N2021/6441—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes" with indicators, stains, dyes, tags, labels, marks with two or more labels
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Signal Processing (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
Abstract
【解決手段】蛍光波長帯域の重複する複数の蛍光色素により多重標識された微小粒子に光を照射し、励起された蛍光色素から発生する蛍光を受光波長帯域の異なる光検出器で受光する測定手順と、各光検出器の検出値を補正演算して各蛍光色素からの蛍光強度を算出する際に、算出される蛍光強度値に所定の制約条件を設けて補正演算を行う算出手順と、を含む蛍光強度補正方法を提供する。
【選択図】なし
Description
前記算出手順は、各光検出器の検出値を収集して得られる測定スペクトルを、各蛍光色素を個別に標識した微小粒子で得られる単染色スペクトル及び蛍光色素を標識していない微小粒子で得られる自家蛍光スペクトルの線形和により近似することによって各蛍光色素からの蛍光強度及び自家蛍光強度を算出する手順とできる。微小粒子の自家蛍光成分を含めて演算を行うことにより、サブポピュレーション毎に異なる自家蛍光成分を厳密に演算して、サブポピュレーション間の自家蛍光強度のばらつきに起因する測定誤差を解消できる。
前記制約条件としては、算出される各蛍光色素からの蛍光強度及び自家蛍光強度が所定の最小値、例えば0、以上であるという条件を設定する。この制約条件を設けて補正演算を行うことにより、蛍光色素からの蛍光強度が負値として算出されることに起因する測定誤差や二次元相関図(サイトグラム)上のポピュレーション減少の問題を解決できる。前記制約条件としては、さらに必要に応じて、算出される蛍光強度及び自家蛍光強度が所定の最大値以下であるという条件を加えてもよい。
単染色スペクトル及び自家蛍光スペクトルの線形和による測定スペクトルの近似は最小二乗法を用いて行うことができ、具体的には、下記式で示される評価関数が最小値となるパラメータak(k=1〜M)を求めることにより、各蛍光色素からの蛍光強度及び自家蛍光強度を算出できる。
生体関連微小粒子には、各種細胞を構成する染色体、リポソーム、ミトコンドリア、オルガネラ(細胞小器官)などが含まれる。細胞には、動物細胞(血球系細胞など)および植物細胞が含まれる。微生物には、大腸菌などの細菌類、タバコモザイクウイルスなどのウイルス類、イースト菌などの菌類などが含まれる。さらに、生体関連微小粒子には、核酸やタンパク質、これらの複合体などの生体関連高分子も包含され得るものとする。また、工業用粒子は、例えば有機もしくは無機高分子材料、金属などであってもよい。有機高分子材料には、ポリスチレン、スチレン・ジビニルベンゼン、ポリメチルメタクリレートなどが含まれる。無機高分子材料には、ガラス、シリカ、磁性体材料などが含まれる。金属には、金コロイド、アルミなどが含まれる。これら微小粒子の形状は、一般には球形であるのが普通であるが、非球形であってもよく、また大きさや質量なども特に限定されない。
1.蛍光強度補正方法
(1)測定手順
(2)算出手順
(2−1)フィッティング演算
(2−1−1)近似曲線
(2−1−2)制約条件
(2−1−3)自家蛍光
(2−2)akの算出方法
(2−2−1)線形最小二乗法
(2−2−2)正規方程式
(2−2−3)特異値分解
2.蛍光強度算出装置
本発明に係る蛍光強度補正方法は、以下の2つの手順を含む。
測定手順:蛍光波長帯域の重複する複数の蛍光色素により多重標識された微小粒子に光を照射し、励起された蛍光色素から発生する蛍光を受光波長帯域の異なる光検出器で受光する手順。
算出手順:各光検出器の検出値を補正演算して各蛍光色素からの蛍光強度を算出する際に、算出される蛍光強度値に所定の制約条件を設けて補正演算を行う手順。
まず、測定対象とする微小粒子を複数の蛍光色素を用いて多重標識する。微小粒子の蛍光色素標識は従来公知の手法によって行うことができる。例えば測定対象を細胞とする場合には、細胞表面分子に対する蛍光標識抗体と細胞とを混合し、細胞表面分子に抗体を結合させる。蛍光標識抗体は、抗体に直接蛍光色素を結合させたものであってよく、ビオチン標識した抗体にアビジンを結合した蛍光色素をアビジン・ビオチン反応によって結合させたものであってもよい。また、抗体は、モノクローナル抗体又はポリクローナル抗体であってよい。
算出手順においては、測定手順で取得された各光検出器の検出値を補正演算して各蛍光色素からの蛍光強度を算出する。この際、本発明に係る蛍光強度補正方法では、算出される蛍光強度が所定の最小値以上であるという制約条件下で補正演算を行う。
(2−1−1)近似曲線
フィッティング演算では、測定スペクトルを単染色スペクトルの線形和により近似することにより、各蛍光色素からの真の蛍光強度を算出する。この際、単染色スペクトルに自家蛍光スペクトルも加えて、これらの線形和による近似を行ってもよい。「測定スペクトル」とは、蛍光波長帯域の重複する複数の蛍光色素により多重標識された微小粒子に光を照射することによって励起された蛍光色素から発生する蛍光を受光波長帯域の異なる光検出器で受光し、各光検出器から検出値を収集して得られるものである。また、「単染色スペクトル」とは、各蛍光色素の蛍光波長分布であり、各蛍光色素を個別に標識した微小粒子に光を照射することによって励起された蛍光色素から発生する蛍光を光検出器で受光し、検出値を収集して得られるものである。さらに、「自家蛍光スペクトル」とは、微小粒子そのものが発する蛍光の波長分布であり、蛍光色素を標識していない微小粒子に光を照射することによって微小粒子から発生する蛍光を光検出器で受光し、検出値を収集して得られるものである。上記の測定スペクトルのスペクトル成分には、自家蛍光スペクトルが含まれ得る。
測定スペクトルのスペクトル成分には、自家蛍光スペクトルが含まれ得る。従って、測定スペクトルの線形和による近似は、単染色スペクトルに加えて自家蛍光スペクトルも加えて行ってもよい。自家蛍光スペクトルは、測定の都度に蛍光色素を標識していないサンプルを調製して取得してもよく、あるいは予め記憶された標準スペクトルを利用してもよい。微小粒子の自家蛍光に起因した検出値を含めて演算を行う場合、上記式(1)において、基底関数XM(x1)の定義に、蛍光色素の単染色スペクトルを表す曲線に加えて、自家蛍光スペクトルを表す曲線を含める。自家蛍光スペクトルは、微小粒子のサブポピュレーション毎に異なる可能性があるため、サンプルに複数のサブポピュレーションが含まれる場合には、サブポピュレーション毎に設定した複数の基底関数XM(x)を用いる。
この式(1)で示される近似曲線は、後述する線形最小二乗法を用いてakを求めることにより得られる。このakは、各蛍光色素の真の蛍光強度あるいは微小粒子の自家蛍光強度に同等であり、物理的に負値にはなり得ない値である。そこで、本発明に係る蛍光強度補正方法では、このakについて、所定の最小値以上であるという制約条件(下限値条件)を設けて補正演算を行う。制約条件の最小値は、具体的には、各蛍光色素の蛍光強度あるいは微小粒子の自家蛍光強度は負値になり得ないことから、0を用いることができる。さらに、最小値には、0よりも大きい値を用いてもよい。加えて、akについて、所定の最大値よりも小さいという第二の制約条件(上限値条件)をさらに設けて補正演算を行うこともできる。
(2−2−1)線形最小二乗法
以下に、akを求めるための具体的な手順を説明する。ここでは、測定スペクトルを単染色スペクトルのみの線形和により近似する場合を説明するが、この手順は、自家蛍光スペクトルも加えて近似する場合にも適用が可能である。まず、下記式(2)で示される評価関数(カイ二乗)を定義する。そして、この式(2)が最小値となるようなパラメータak(k=1〜M)を求める。
次に、下記式(3)の要素から構成されるN×M行例A(図2参照)と、長さNのベクトルb(下記式(4))を定義し、当てはめにより得たM個のパラメータa1〜aMを並べたベクトルをaとおく。
上記の正規方程式を用いた方法に替えて特異値分解により、M個のパラメータa1〜aMを並べたベクトルaを求めても良い。
本発明に係る蛍光強度算出装置は、従来のフローサイトメータ等と同様に流体系と光学系、分取系、データ処理系などから構成される。
Claims (7)
- 蛍光波長帯域の重複する複数の蛍光色素により多重標識された微小粒子に光を照射し、励起された蛍光色素から発生する蛍光を受光波長帯域の異なる光検出器で受光する測定手順と、
各光検出器の検出値を補正演算して各蛍光色素からの蛍光強度を算出する際に、算出される蛍光強度値に所定の制約条件を設けて補正演算を行う算出手順と、を含む蛍光強度補正方法。 - 前記算出手順において、各光検出器の検出値を収集して得られる測定スペクトルを、各蛍光色素を個別に標識した微小粒子で得られる単染色スペクトル及び蛍光色素を標識していない微小粒子で得られる自家蛍光スペクトルの線形和により近似することによって各蛍光色素からの蛍光強度及び自家蛍光強度を算出する請求項1記載の蛍光強度補正方法。
- 前記制約条件として、算出される各蛍光色素からの蛍光強度及び自家蛍光強度が所定の最小値以上であるという条件を設定する請求項1又は2記載の蛍光強度補正方法。
- 前記制約条件として、さらに、算出される各蛍光色素からの蛍光強度及び自家蛍光強度が所定の最大値以下であるという条件を設定する請求項3記載の蛍光強度補正方法。
- 前記算出手順において、単染色スペクトル及び自家蛍光スペクトルの線形和による測定スペクトルの近似を、最小二乗法を用いて行う請求項4記載の蛍光強度補正方法。
- 蛍光波長帯域の重複する複数の蛍光色素により多重標識された微小粒子に光を照射し、励起された蛍光色素から発生する蛍光を受光波長帯域の異なる光検出器で受光する測定手段と、
各光検出器の検出値を補正演算して各蛍光色素からの蛍光強度を算出する際に、算出される蛍光強度値に所定の制約条件を設けて補正演算を行う算出手段と、を含む蛍光強度算出装置。
Priority Applications (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2010197495A JP5601098B2 (ja) | 2010-09-03 | 2010-09-03 | 蛍光強度補正方法及び蛍光強度算出装置 |
EP16154105.7A EP3043168A1 (en) | 2010-09-03 | 2011-07-27 | Flow cytometer with fluorescence intensity compensation and corresponding method |
EP11175562A EP2426481A1 (en) | 2010-09-03 | 2011-07-27 | Fluorescence Intensity Compensation Method and Fluorescence Intensity Computing Apparatus |
US13/212,324 US8581210B2 (en) | 2010-09-03 | 2011-08-18 | Fluorescence intensity compensation method and fluorescence intensity computing apparatus |
CN201110249799.4A CN102435313B (zh) | 2010-09-03 | 2011-08-26 | 荧光强度补偿方法及荧光强度计算装置 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2010197495A JP5601098B2 (ja) | 2010-09-03 | 2010-09-03 | 蛍光強度補正方法及び蛍光強度算出装置 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2012052985A true JP2012052985A (ja) | 2012-03-15 |
JP5601098B2 JP5601098B2 (ja) | 2014-10-08 |
Family
ID=44674160
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2010197495A Active JP5601098B2 (ja) | 2010-09-03 | 2010-09-03 | 蛍光強度補正方法及び蛍光強度算出装置 |
Country Status (4)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US8581210B2 (ja) |
EP (2) | EP3043168A1 (ja) |
JP (1) | JP5601098B2 (ja) |
CN (1) | CN102435313B (ja) |
Cited By (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2014141878A1 (ja) | 2013-03-15 | 2014-09-18 | ソニー株式会社 | 微小粒子分析装置、微小粒子分析方法、プログラム及び微小粒子分析システム |
WO2017014196A1 (ja) * | 2015-07-17 | 2017-01-26 | コニカミノルタ株式会社 | 目的生体物質の解析方法および解析システム |
WO2017082242A1 (ja) * | 2015-11-10 | 2017-05-18 | 京都府公立大学法人 | 腫瘍部位の判別方法、腫瘍部位の判別装置 |
WO2018198586A1 (ja) * | 2017-04-24 | 2018-11-01 | ソニー株式会社 | 情報処理装置、微粒子分取システム、プログラム及び微粒子分取方法 |
WO2019031048A1 (ja) * | 2017-08-08 | 2019-02-14 | ソニー株式会社 | 情報処理装置、情報処理方法及びプログラム |
WO2019049442A1 (ja) * | 2017-09-08 | 2019-03-14 | ソニー株式会社 | 微小粒子測定装置、情報処理装置および情報処理方法 |
WO2020179586A1 (ja) * | 2019-03-04 | 2020-09-10 | ソニー株式会社 | 情報処理装置、及び顕微鏡システム |
JP2021028627A (ja) * | 2019-08-11 | 2021-02-25 | クレド ダイアグノスティックス バイオメディカル プライベート リミテッド | 分析システム及びその分析方法 |
JP2021038953A (ja) * | 2019-08-30 | 2021-03-11 | 一般財団法人電力中央研究所 | 物質検査装置、物質検査方法及び物質検査プログラム |
JP2021524579A (ja) * | 2018-05-21 | 2021-09-13 | サイテック バイオサイエンスィズ インコーポレイテッド | スピルオーバー再調整のためのフローサイトメーターデータの高速再補正 |
WO2021200411A1 (ja) * | 2020-03-31 | 2021-10-07 | ソニーグループ株式会社 | 情報処理装置、情報処理方法、プログラム及び光学測定システム |
JP2022119771A (ja) * | 2017-06-28 | 2022-08-17 | ヴェンタナ メディカル システムズ, インク. | システムレベル較正 |
Families Citing this family (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP5985140B2 (ja) | 2010-04-28 | 2016-09-06 | ソニー株式会社 | 蛍光強度補正方法、蛍光強度算出方法及び蛍光強度算出装置 |
ES2859398T3 (es) | 2013-03-15 | 2021-10-01 | Beckman Coulter Inc | Métodos para diseño de panel en citometría de flujo |
EP3117203B1 (en) * | 2014-03-14 | 2021-02-17 | Veritide Limited | Substance or contamination detection |
CN109722407B (zh) * | 2017-10-30 | 2021-07-16 | 北京林业大学 | 一种微藻冰温启动补偿生长的方法 |
JP7271092B2 (ja) * | 2018-05-25 | 2023-05-11 | シスメックス株式会社 | 試薬選択支援装置、細胞分析システム、試薬の選択の支援方法、コンピュータプログラム及び記憶媒体 |
CN109490176B (zh) * | 2018-11-30 | 2019-11-22 | 苏州深析智能科技有限公司 | 流式细胞检测数据处理方法、装置及分型方法、装置 |
JP2022516233A (ja) * | 2018-12-28 | 2022-02-25 | ベクトン・ディキンソン・アンド・カンパニー | サンプルの蛍光物質をスペクトル的に分解する方法及びシステム |
WO2020262215A1 (en) * | 2019-06-24 | 2020-12-30 | Sony Corporation | Particle analysis system having autofluorescence spectrum correction |
TWI726446B (zh) * | 2019-08-11 | 2021-05-01 | 新加坡商克雷多生物醫學私人有限公司 | 分析系統及其分析方法 |
JP2021081342A (ja) | 2019-11-20 | 2021-05-27 | ソニーグループ株式会社 | 情報処理システムおよび情報処理装置 |
EP4141419A4 (en) * | 2020-04-20 | 2023-09-27 | Sony Group Corporation | INFORMATION PROCESSING SYSTEM, INFORMATION PROCESSING METHOD, PROGRAM, INFORMATION PROCESSING APPARATUS AND CALCULATION APPARATUS |
CN112834472B (zh) * | 2021-01-05 | 2023-09-29 | 广州睿贝医学科技有限公司 | 多重荧光检测的光谱拆分方法、装置、设备、介质及系统 |
CN113376099B (zh) * | 2021-06-29 | 2022-12-13 | 安图实验仪器(郑州)有限公司 | 一种基于标准品的qpcr激发光强自动调整方法和系统 |
Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH06105190B2 (ja) * | 1988-03-31 | 1994-12-21 | 工業技術院長 | 信号解析装置 |
JP2004286515A (ja) * | 2003-03-20 | 2004-10-14 | Olympus Corp | 分光画像から複数の固有スペクトル成分の存在割合を求める方法 |
JP2005512051A (ja) * | 2001-11-30 | 2005-04-28 | エクソンモービル リサーチ アンド エンジニアリング カンパニー | 特定の分析データに一致するように計算された既知物質のブレンドとして未知物質を分析し、計算されたブレンドに基づいて未知物質の特性を予測する方法 |
JP2007097171A (ja) * | 2005-09-26 | 2007-04-12 | Toshiba Corp | 画像形成装置及び減色印刷方法 |
JP2009109218A (ja) * | 2007-10-26 | 2009-05-21 | Sony Corp | 微小粒子の光学的測定方法及び光学的測定装置 |
JP2009109197A (ja) * | 2007-10-26 | 2009-05-21 | Sony Corp | 微小粒子の測定方法 |
JP2010071662A (ja) * | 2008-09-16 | 2010-04-02 | Nikon Corp | スペクトル画像処理方法、スペクトル画像処理プログラム、及びスペクトルイメージングシステム |
Family Cites Families (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4667830A (en) * | 1981-06-15 | 1987-05-26 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Method and means for sorting individual particles into containers for culturing, cloning, analysis, or the like |
US5936731A (en) * | 1991-02-22 | 1999-08-10 | Applied Spectral Imaging Ltd. | Method for simultaneous detection of multiple fluorophores for in situ hybridization and chromosome painting |
US6115673A (en) * | 1997-08-14 | 2000-09-05 | Instrumentation Metrics, Inc. | Method and apparatus for generating basis sets for use in spectroscopic analysis |
JP2003083894A (ja) | 2001-09-14 | 2003-03-19 | Sumitomo Electric Ind Ltd | 蛍光値補正方法、蛍光値補正装置、蛍光値補正プログラム及び前記蛍光値補正プログラムを記録した記録媒体 |
US6897954B2 (en) * | 2002-12-20 | 2005-05-24 | Becton, Dickinson And Company | Instrument setup system for a fluorescence analyzer |
US7321791B2 (en) * | 2003-09-23 | 2008-01-22 | Cambridge Research And Instrumentation, Inc. | Spectral imaging of deep tissue |
US7127372B2 (en) * | 2005-02-24 | 2006-10-24 | Itt Manufacturing Enterprises, Inc. | Retro-regression residual remediation for spectral/signal identification |
US7587078B2 (en) * | 2005-05-02 | 2009-09-08 | Cytyc Corporation | Automated image analysis |
US8244021B2 (en) * | 2006-12-20 | 2012-08-14 | Ventana Medical Systems, Inc. | Quantitative, multispectral image analysis of tissue specimens stained with quantum dots |
CN100593389C (zh) * | 2007-07-10 | 2010-03-10 | 清华大学 | 一种连续动态采集式小动物诱发荧光分子成像系统 |
US8263407B2 (en) * | 2007-10-24 | 2012-09-11 | Los Alamos National Security, Llc | Method for non-contact particle manipulation and control of particle spacing along an axis |
JP2010197495A (ja) | 2009-02-23 | 2010-09-09 | Ricoh Co Ltd | 投射光学系及び画像表示装置 |
-
2010
- 2010-09-03 JP JP2010197495A patent/JP5601098B2/ja active Active
-
2011
- 2011-07-27 EP EP16154105.7A patent/EP3043168A1/en not_active Ceased
- 2011-07-27 EP EP11175562A patent/EP2426481A1/en not_active Ceased
- 2011-08-18 US US13/212,324 patent/US8581210B2/en active Active
- 2011-08-26 CN CN201110249799.4A patent/CN102435313B/zh active Active
Patent Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH06105190B2 (ja) * | 1988-03-31 | 1994-12-21 | 工業技術院長 | 信号解析装置 |
JP2005512051A (ja) * | 2001-11-30 | 2005-04-28 | エクソンモービル リサーチ アンド エンジニアリング カンパニー | 特定の分析データに一致するように計算された既知物質のブレンドとして未知物質を分析し、計算されたブレンドに基づいて未知物質の特性を予測する方法 |
JP2004286515A (ja) * | 2003-03-20 | 2004-10-14 | Olympus Corp | 分光画像から複数の固有スペクトル成分の存在割合を求める方法 |
JP2007097171A (ja) * | 2005-09-26 | 2007-04-12 | Toshiba Corp | 画像形成装置及び減色印刷方法 |
JP2009109218A (ja) * | 2007-10-26 | 2009-05-21 | Sony Corp | 微小粒子の光学的測定方法及び光学的測定装置 |
JP2009109197A (ja) * | 2007-10-26 | 2009-05-21 | Sony Corp | 微小粒子の測定方法 |
JP2010071662A (ja) * | 2008-09-16 | 2010-04-02 | Nikon Corp | スペクトル画像処理方法、スペクトル画像処理プログラム、及びスペクトルイメージングシステム |
Cited By (30)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2014141878A1 (ja) | 2013-03-15 | 2014-09-18 | ソニー株式会社 | 微小粒子分析装置、微小粒子分析方法、プログラム及び微小粒子分析システム |
JPWO2014141878A1 (ja) * | 2013-03-15 | 2017-02-16 | ソニー株式会社 | 微小粒子分析装置、微小粒子分析方法、プログラム及び微小粒子分析システム |
US10732090B2 (en) | 2013-03-15 | 2020-08-04 | Sony Corporation | Fine particle analyzing apparatus, fine particle analyzing method, program, and fine particle analyzing system |
WO2017014196A1 (ja) * | 2015-07-17 | 2017-01-26 | コニカミノルタ株式会社 | 目的生体物質の解析方法および解析システム |
JPWO2017014196A1 (ja) * | 2015-07-17 | 2018-04-26 | コニカミノルタ株式会社 | 目的生体物質の解析方法および解析システム |
WO2017082242A1 (ja) * | 2015-11-10 | 2017-05-18 | 京都府公立大学法人 | 腫瘍部位の判別方法、腫瘍部位の判別装置 |
JP2017090250A (ja) * | 2015-11-10 | 2017-05-25 | 京都府公立大学法人 | 腫瘍部位の判別方法、腫瘍部位の判別装置 |
JP7375853B2 (ja) | 2017-04-24 | 2023-11-08 | ソニーグループ株式会社 | 情報処理方法、分取システム、分取方法、情報処理装置及びプログラム |
US11137338B2 (en) | 2017-04-24 | 2021-10-05 | Sony Corporation | Information processing apparatus, particle sorting system, program, and particle sorting method |
CN110691964A (zh) * | 2017-04-24 | 2020-01-14 | 索尼公司 | 信息处理设备、粒子分选系统、程序和粒子分选方法 |
JPWO2018198586A1 (ja) * | 2017-04-24 | 2020-02-27 | ソニー株式会社 | 情報処理装置、微粒子分取システム、プログラム及び微粒子分取方法 |
WO2018198586A1 (ja) * | 2017-04-24 | 2018-11-01 | ソニー株式会社 | 情報処理装置、微粒子分取システム、プログラム及び微粒子分取方法 |
CN110691964B (zh) * | 2017-04-24 | 2023-08-22 | 索尼公司 | 信息处理设备、粒子分选系统、程序和粒子分选方法 |
JP2022106836A (ja) * | 2017-04-24 | 2022-07-20 | ソニーグループ株式会社 | 情報処理方法、分取システム、分取方法、情報処理装置及びプログラム |
JP7067551B2 (ja) | 2017-04-24 | 2022-05-16 | ソニーグループ株式会社 | 微粒子分取システム |
JP7368539B2 (ja) | 2017-06-28 | 2023-10-24 | ヴェンタナ メディカル システムズ, インク. | システムレベル較正 |
JP2022119771A (ja) * | 2017-06-28 | 2022-08-17 | ヴェンタナ メディカル システムズ, インク. | システムレベル較正 |
WO2019031048A1 (ja) * | 2017-08-08 | 2019-02-14 | ソニー株式会社 | 情報処理装置、情報処理方法及びプログラム |
US11561161B2 (en) | 2017-08-08 | 2023-01-24 | Sony Corporation | Information processing apparatus, information processing method, and program |
US11480513B2 (en) | 2017-09-08 | 2022-10-25 | Sony Corporation | Fine particle measurement apparatus, information processing apparatus, and information processing method |
JPWO2019049442A1 (ja) * | 2017-09-08 | 2020-08-20 | ソニー株式会社 | 微小粒子測定装置、情報処理装置および情報処理方法 |
WO2019049442A1 (ja) * | 2017-09-08 | 2019-03-14 | ソニー株式会社 | 微小粒子測定装置、情報処理装置および情報処理方法 |
JP2021524579A (ja) * | 2018-05-21 | 2021-09-13 | サイテック バイオサイエンスィズ インコーポレイテッド | スピルオーバー再調整のためのフローサイトメーターデータの高速再補正 |
WO2020179586A1 (ja) * | 2019-03-04 | 2020-09-10 | ソニー株式会社 | 情報処理装置、及び顕微鏡システム |
US11761895B2 (en) | 2019-03-04 | 2023-09-19 | Sony Group Corporation | Information processing apparatus and microscope system |
JP2021028627A (ja) * | 2019-08-11 | 2021-02-25 | クレド ダイアグノスティックス バイオメディカル プライベート リミテッド | 分析システム及びその分析方法 |
JP7213844B2 (ja) | 2019-08-11 | 2023-01-27 | クレド ダイアグノスティックス バイオメディカル プライベート リミテッド | 分析システム及びその分析方法 |
JP2021038953A (ja) * | 2019-08-30 | 2021-03-11 | 一般財団法人電力中央研究所 | 物質検査装置、物質検査方法及び物質検査プログラム |
JP7262345B2 (ja) | 2019-08-30 | 2023-04-21 | 一般財団法人電力中央研究所 | 物質検査装置、物質検査方法及び物質検査プログラム |
WO2021200411A1 (ja) * | 2020-03-31 | 2021-10-07 | ソニーグループ株式会社 | 情報処理装置、情報処理方法、プログラム及び光学測定システム |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP5601098B2 (ja) | 2014-10-08 |
EP3043168A1 (en) | 2016-07-13 |
EP2426481A1 (en) | 2012-03-07 |
CN102435313A (zh) | 2012-05-02 |
US8581210B2 (en) | 2013-11-12 |
US20120056103A1 (en) | 2012-03-08 |
CN102435313B (zh) | 2015-10-28 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP5601098B2 (ja) | 蛍光強度補正方法及び蛍光強度算出装置 | |
JP5985140B2 (ja) | 蛍光強度補正方法、蛍光強度算出方法及び蛍光強度算出装置 | |
JP5540952B2 (ja) | 蛍光強度補正方法及び蛍光強度算出装置 | |
JP5494351B2 (ja) | 蛍光強度補正方法、蛍光強度算出方法及び蛍光強度算出装置並びに蛍光強度補正プログラム | |
JP6954406B2 (ja) | 粒子測定システム及び粒子測定方法 | |
US6556296B1 (en) | Method for characterizing samples by determination of a function of at least one specific property of particles in a sample | |
EP1019687B1 (en) | A method for characterizing samples by determination of a function of at least one specific physical property of particles of said sample | |
JP6699102B2 (ja) | 微小粒子測定装置及び情報処理方法 | |
JP2021063664A (ja) | 情報処理装置、粒子測定装置、情報処理方法、粒子測定方法、及びコンピュータプログラム | |
WO2022080034A1 (ja) | 情報処理装置、粒子解析装置、粒子分取装置及び情報処理方法 | |
JP7010293B2 (ja) | 情報処理装置、情報処理方法及びプログラム | |
WO2021153192A1 (ja) | 情報処理装置、粒子分析装置、情報処理方法、及びプログラム | |
EP4083606A1 (en) | Information processing device, particle measurement device, particle measurement system, particle sorting device, particle sorting system, information processing method, and information processing program |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20130708 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20131227 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20140114 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20140310 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20140507 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20140722 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20140804 |
|
R151 | Written notification of patent or utility model registration |
Ref document number: 5601098 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R151 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |