JP2010516690A - フェナジン化合物、ならびに自己免疫疾患および炎症性疾患におけるフェナジン化合物の使用 - Google Patents
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Abstract
Description
Josefino B. Tunac.
(関連出願への相互参照)
本出願は、2007年1月16日に出願された、米国仮特許出願第60/885,164号の利益および上記仮特許出願からの利益を主張し、上記仮特許出願はその全体を本明細書中で参考として参考として援用される。
本発明は、新規な水溶性フェナジン化合物、ならびに自己免疫疾患および炎症性疾患の治療におけるそれらの使用に関する。
関節炎(ギリシア語の関節から)は、免疫系が攻撃し、体の関節を悪化させ始める場合に引き起こされる慢性多因子疾患である。関節リウマチ(RA)は滑膜の慢性炎症によって特徴付けられ、石灰化関節周囲炎、腸疾患に基づく関節炎、慢性、痛風性および手骨関節炎、臀部および膝骨関節炎、親指、ジャクー、若年性骨関節炎、少関節炎、多発性関節炎、ならびに末梢、乾癬性、リウマチ様および敗血症性関節炎を含めた多くの形態として現れる。RAは、ヒト白血球抗原(HLA)クラスII分子に結合した疾患誘発ペプチドの複合体による、CD4陽性T細胞上のT細胞受容体の分子認識によって生じる免疫応答によって引き起こされる。
したがって、単独または他の薬物と組み合わせて使用し、関節炎、特に、RAの進行および症状を抑制することができる新規な薬物に対する必要性が存在する。特定の新規なフェナジン化合物は自己免疫疾患を患っている対象において回復を促進することが今や見出された。したがって、新規なフェナジン化合物は、関節炎、RA、および他の自己免疫疾患の治療および予防に有用である。
I 定義
特に明記しない限り、明細書および特許請求の範囲を含めて本出願において使用される下記の用語は、下記に提示する定義を有する。明細書および添付の特許請求において使用されているように、単数形「a」、「an」および「the」は、内容が明らかに他の場合を指示しない限り複数の指示対象を含むことに留意しなくてはならない。標準的化学用語の定義は、CareyおよびSundberg(1992年)「Advanced Organic Chemistry第3版」、第AおよびB巻、Plenum Press、New Yorkを含めた参照文献に見出すことができる。本発明の実施において、別段の指示がない限り、当分野の技術の範囲内の質量分析、タンパク質化学、生化学、組換えDNA技術および薬理学の従来の方法を用いる。
(1)無機酸(塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸など)と形成される酸付加塩;あるいは有機酸(酢酸、プロピオン酸、ヘキサン酸、シクロペンタンプロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、乳酸、マロン酸、コハク酸、リンゴ酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、3−(4−ヒドロキシベンゾイル)安息香酸、ケイ皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、1,2−エタンジスルホン酸、2−ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、2−ナフタレンスルホン酸、4−メチルビシクロ−[2.2.2]オクト−2−エン−1−カルボン酸、グルコヘプトン酸、4,4’−メチレンビス−(3−ヒドロキシ−2−エン−1−カルボン酸)、3−フェニルプロピオン酸、トリメチル酢酸、第三級のブチル酢酸、ラウリル硫酸、グルコン酸、グルタミン酸、ヒドロキシナフトエ酸、サリチル酸、ステアリン酸、ムコン酸など)と形成される酸付加塩。
(2)親化合物中に存在する酸性プロトンが、金属イオン、例えば、アルカリ金属イオン、アルカリ土類イオン、もしくはアルミニウムイオンによって置換されているか;または有機塩基と配位結合した場合に形成される塩。許容される有機塩基には、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、トロメタミン、N−メチルグルカミンなどが挙げられる。許容される無機塩基には、水酸化アルミニウム、水酸化カルシウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウム、水酸化ナトリウムなどが挙げられる。薬学的に許容される塩への参照には、溶媒付加形態またはその結晶形、特に溶媒和物または多形体が挙げられることを理解すべきである。溶媒和物は、化学量論量または非化学量論量の溶媒を含有し、結晶化の過程で形成される場合が多い。水和物は、溶媒が水である場合に形成され、またはアルコラートは溶媒がアルコールである場合に形成される。多形体は、化合物の同一の元素組成の異なる結晶充填配置を含む。多形体は、異なるX線回折パターン、赤外スペクトル、融点、密度、硬度、結晶形状、光学的および電気的性質、安定性、ならびに溶解度を通常有する。再結晶溶媒、結晶速度、および保存温度などの様々な要因によって、単結晶形の優勢をもたらす場合がある。
本発明の化合物は、式Iの構造を有する化合物を含み、
X2およびX4は、独立に、O、S、NH、NR5またはCHR5(R5は、低級アルキルである場合がある)であるように選択され、
R1は、1〜10個の炭素原子を含有する低級アルキル、ハロ低級アルキル、低級アルケニル、低級アルキニル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルスルホニル、低級アルキルチオ、低級アルキルアミノ、アリールアルキル、置換アリールアルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロヘテロアルキル、置換シクロヘテロアルキル、ヘテロアリール、または置換ヘテロアリールからなる群から選択され、
R2、R3およびR4は、独立に、水素、低級アルキル、置換低級アルキル、アリール、置換アリール、アリールアルキル、置換アリールアルキル、シクロアルキル、シアノ、エーテル、ハロ、ヒドロキシ、ホスフェート、ホスホネート、スルフェート、スルホネート、またはスルホンアミドであるように選択され、ならびに
M+は、アルカリ金属イオン(ナトリウム、リチウム、およびカリウムなど)、アルカリ土類金属イオン(カルシウムおよびマグネシウムなど)、または薬学的に許容される塩を形成する任意の他の正に帯電している化学種である。
M+は、Na+、K+、または薬学的に許容される塩を形成する任意の他の正に帯電している化学種である。好ましくは、R1は、メチル、エチル、nプロピル、またはnブチルであり、さらに好ましくは、メチルである。したがって、フェナジン化合物は、好ましくは式IIIまたはIVの構造である。
一般に、フェナジン化合物は、カビ、藻類、およびバクテリアなどの種々の生物を使用して生合成することができる。生物中で、フェナジン化合物の生合成は、コリスミ酸の後でシキミ酸経路から分岐する。コリスミ酸由来の中間体の2つの分子は、対角線上に対称的な態様で一緒になり、塩基性フェナジン足場を形成する。次いで、連続して起こる修飾によって異なる生物活性を有する種々のフェナジンがもたらされる。したがって、本発明の一態様では、生物を選択するか、または生物が塩基性フェナジン足場を対象の特定化合物に修飾することができるように、公知の生物工学の方法およびプロトコルを使用して作製する。
本明細書に記載の方法は、1種または複数の薬学的に許容される賦形剤またはビヒクル、および任意選択で他の治療的および/または予防的成分と共に、上記の分子(分子は、好ましくは上記で詳細を説明した式I、II、II、またはIVである)を含む医薬組成物を使用する。このような賦形剤には、水、生理食塩水、グリセロール、ポリエチレングリコール、ヒアルロン酸、エタノールなどの液体が挙げられる。非液体配合物のための適切な賦形剤はまた、当業者に公知である。薬学的に許容される塩を、本発明の組成物において使用することができ、例えば、鉱酸塩(塩酸塩、臭化水素酸塩、リン酸塩、硫酸塩など)、および有機酸の塩(酢酸塩、プロピオン酸塩、マロン酸塩、安息香酸塩など)が挙げられる。薬学的に許容される賦形剤および塩の徹底的な議論は、Remington’s Pharmaceutical Sciences、第18版(Easton、Pennsylvania:Mack Publishing Company、1990年)において入手可能である。
式I〜IVの化合物、または薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、もしくはエステルはまた、他の治療剤と組み合わせて投与することができる。例えば、式I〜IVの1種または複数の化合物、または薬学的に許容されるその塩、溶媒和物、もしくはエステルは、HMG CoAレダクターゼ阻害剤化合物、HMG CoAシンテターゼ阻害剤、スクアレン合成阻害剤、スクアレンエポキシダーゼ阻害剤、ステロール生合成阻害剤、ニコチン酸誘導体、胆汁酸捕捉剤、アシルCoA:コレステロールO−アシルトランスフェラーゼ阻害剤、コレステリルエステル転送タンパク質阻害剤、オメガ3脂肪酸を含有する魚油、植物スタノールおよび/または植物スタノールの脂肪酸エステル、抗酸化剤、PPARアゴニスト、FXR受容体モジュレーター、LXR受容体アゴニスト、リポタンパク質合成阻害剤、レニンアンギオテンシン阻害剤、ミクロソームトリグリセリド輸送タンパク質阻害剤、胆汁酸再吸収阻害剤、トリグリセリド合成阻害剤、スクアレンエポキシダーゼ阻害剤、低密度リポタンパク質受容体誘導剤または活性化剤、血小板凝集阻害剤、5−LOまたはFLAP阻害剤、ナイアシンまたはナイアシン受容体アゴニスト、5HT輸送体阻害剤、NE輸送体阻害剤、NPY1アンタゴニスト、NPY5アンタゴニスト、NPY2アゴニスト、NPY4アゴニスト、レプチン、レプチンアゴニスト/モジュレーター、レプチン誘導体、オピオイドアンタゴニスト、CNTF、CNTF誘導体、CNTFアゴニスト/モジュレーター、セロトニン再取込み阻害剤、GLP−1アゴニスト、PDE阻害剤、UCP活性化剤、リパーゼ阻害剤、脂肪酸輸送体阻害剤、ジカルボン酸輸送体阻害剤、グルコース輸送体阻害剤、リン酸輸送体阻害剤、抗糖尿病薬、降圧剤、抗異脂肪血症剤、アポリポタンパク質−B分泌/ミクロソームトリグリセリド転送タンパク質(apo−B/MTP)阻害剤、ドーパミンアゴニスト、アポA1ミラノコレステロール逆輸送阻害剤、脂肪酸結合タンパク質阻害剤(FABP)、および脂肪酸輸送体タンパク質阻害剤(FATP)などからなる群から選択される1種または複数のさらなる活性成分と共に投与することができる。他の態様では、さらなる活性剤には、これらだけに限定されないが、エストロゲン、IGF、オステオプロテグリン(OPG)、カルシトニン、ビスホスホネート、ビタミンD3もしくはその類似体、スタチン、アドロゲン、フッ化塩、ビタミン、ミネラル補給剤、栄養補給剤、およびこれらの組合せの場合がある。さらなる薬剤はまた、ゲンタマイシン、シプロフロキサシン、バンコマイシン、および/またはその他などの抗生物質である場合がある。このさらなる活性剤は、対象に、本発明の式I〜IVの化合物の投与の前、同時または後に投与することができる。それだけに限らないが、非ステロイド性抗炎症薬および副腎皮質ステロイド、ならびに抗ウイルス薬(それだけに限らないが、リビビリン、ビダラビン、アシクロビルおよびガンシクロビルが挙げられる)が挙げられる抗炎症薬もまた、本発明の組成物中に合わせることができる。
フェナジン誘導体合成のための微生物
本発明の化合物を、微生物、特にLysobacter antibioticus ATCC(r)9311(29479)からの下位分離物、および指定されたMC−4を使用して合成した。SD−38寒天プレート(表1)(0.3%カゼイン;0.25%醸造用酵母;0.13%CaCl2)発酵培地中で、Lysobacter antibioticus ATCC(r)9311(29479)を24時間振盪しながら増殖させることによってMC−4を単離した。
式IIIまたはIVの化合物を、制御条件下にてMC−4下位分離物の好気性発酵を使用して生成した。
寒天斜面(上記)からの微生物増殖の一部を使用して、5mlの種培地SCM(表2)を含有する18mm×150mmの種子管を播種した。
培養物の懸濁剤約1mlを含有する低温バイアルを使用して、300mlのTunair Ful−Baf振盪フラスコ中の100mlの種培地(SCM)を播種した。播種したフラスコを、16〜24時間振盪しながら28℃で約16〜24時間インキュベートした(180rpm旋回シェーカー、5cm行程)。
化合物の化学的単離
上記のように調製した発酵ブロス(80リットル)を、30Lの塩化メチレンを含有する貯蔵タンクに移し、断続的に撹拌した。化合物の抽出を一晩行った。混合物を分離させた後、下層の有機層を除去した。塩化メチレン抽出物をスラリーに濃縮し、次いで濾過助剤を加えた。
抗関節炎作用:コラーゲン誘導関節炎マウスモデル
マウスにおけるII型コラーゲン誘導関節炎(CIA)は、関節リウマチと共通のいくつかの病理的、免疫的および遺伝的特徴を有する関節炎の一般に認められている実験モデルである。この疾患は、マウスの感受性系統を関節軟骨の主要な成分であるII型コラーゲンで免疫化することによって誘導される。免疫化した動物の大部分で進行性の炎症性関節炎が発症し、臨床的に紅斑および浮腫(冒された足の幅が典型的には100%増大する)によって特徴付けられる。関節のゆがみおよび脊椎炎への疾患の悪化について評価するために、臨床上のスコアリングインデックスが開発されてきた。冒された関節の組織変化は、滑膜炎、パンヌス形成、ならびに軟骨および骨のびらんを示し、これもまたインデックスによって表すことができる。免疫学の実験室の知見には、II型コラーゲンに対する高い抗体レベルおよび高γグロブリン血症が含まれる。
1群、100μlの無菌の生理食塩水ビヒクル、腹腔内(i.p.)注入を週3回。
2群、式IIIの化合物を含有する100μlの無菌の生理食塩水、40mg/kgの腹腔内注入を週3回。
3群、100μgのEnbrelを含有する100μlの無菌の生理食塩水、腹腔内注入を週3回。
4群、式IIIの化合物を含有する100μlの無菌の生理食塩水、40mg/kgの胃管栄養法を週5回。
5群、プレドニゾロンを含有する100μlの無菌の生理食塩水、10mg/kgの胃管栄養法を週5回。
試験の開始前、引き続いて関節炎の発症時および試験の完了時に全てのマウスを前採血した。血清を分離し、−80℃で保存した。ELISAアッセイを行って、抗II型コラーゲン抗体レベルおよび総免疫グロブリンレベルを決定した。
抗コラーゲン抗体レベル
ELISAプレート(Nunc−Immuno plates、Denmark)を、5μgのII型コラーゲンを含有する100μlのコーティング緩衝液(0.4Mのリン酸緩衝液、ph7.6)で4℃にて一晩コーティングした。0.05%Tween20(Sigma、St.Louis、MO)を含有するPBSでプレートを3度洗浄し、非特異的結合を、5%脱脂乳を含有するPBSによって4℃で一晩ブロックした。5%の乳/PBS中で1/100に希釈したマウス血清を各ウェルに加え、4℃で一晩インキュベートした。引き続いて、0.05%Tween−20を含有するPBS中でプレートを6度洗浄し、アルカリホスファターゼ結合ヤギ抗マウスIg(Southern Biotechnology Associates、Birmingham、AL)と共に37℃で1時間インキュベートした。プレートを再び6度洗浄し、クロマトゲン基質としてリン酸p−ニトロフェニル(Sigma、St.Louis、MO)を使用して40分間暗闇で増殖させた。このように得られた光学濃度を、UV max分光光度計(Molecular Devices、CA)を使用することによって405nmで測定した。陰性の前採血対照血清および標準的なマウス抗CII抗血清を各プレート上で滴定し、アッセイの均一性を確保した。抗体結合を、OD405ユニット−ブランクとして表した。
ELISAアッセイを使用して血清Igレベルを評価した。Dynatech Immulon I96ウェルELISAプレートを、PBS中の1/250希釈度のウサギ抗マウスIgG(Axell)で一晩4℃にてコーティングした。0.05%Tweenを含有するPBSでプレートを3度洗浄し、PBS中のさらなる5%BSAでブロックした。PBS/BSA中で1/400に希釈した血清試料を3連で分注し、1/500〜1/256,000のマウスIg参照血清(Miles)の倍加希釈倍率によって参照曲線を作成した。プレートを室温で一晩インキュベートし、PBS/Tweenで3度洗浄した。アルカリホスファターゼが結合したヤギ抗IgG100μl(Fisher−Biotek)(乳/PBS/Tween中1:500希釈)を加え、37℃で1時間インキュベーションを続けた。PBS/Tweenで3度洗浄した後、ジエチロールアミン緩衝液中の100μlのリン酸p−ニトロフェニル溶液(PNPP錠剤、Sigma)を各ウェルに加え、20分間暗闇で反応を続けさせた。光分光計(Molecular Devices)を使用して405nmでプレートを読み取り、SOFTmax分析ソフトウェアパッケージを使用してデータを分析した。参照血清に由来する検量線を使用して、回帰分析によって試験試料中のIgレベルを計算した。
終末血清サイトカインを、市販のキット(R&D Systems、MN)を使用してアッセイした。手短に言えば、ELISAプレートをモノクローナル抗IL−1、抗IL−6、または抗TNF□でコーティングした。プレートを、0.05%Tween20(Sigma、St.Louis、MO)を含有するPBSで3度洗浄した。次いで、PBS中の血清希釈物1:200(50μl)を加え、4℃で一晩インキュベートした。引き続いて、0.05%Tween−20を含有するPBS中でプレートを6度洗浄し、ビオチン化二次抗体と共に37℃で1時間インキュベートした。プレートを6度洗浄し、ストレプトアビジン−APKを加え、室温で40分間インキュベートした。次いで、プレートを6度洗浄し、クロマトゲン基質としてリン酸p−ニトロフェニル(Sigma、St.Louis、MO)を使用して暗闇で40分間増殖させた。UV max分光光度計(Molecular Devices、CA)を使用することによって、このように得られた光学濃度を405nmで測定した。メーカーによって提供された検量線に対する回帰分析によってサイトカインレベルを決定した。
屠殺して脾臓およびリンパ節を取り出し、Con AおよびLPSに対するマイトジェン応答、およびII型コラーゲンに対する抗原増殖反応を、標準的な技術を使用して決定した。リンパ節および脾臓を回収し、1mlの細胞懸濁液(2.5×106/ml)を、12ウェル組織培養プレート(Costar、Corning、NY)中にて完全RPMI−1640培地中で様々な刺激剤と共に培養した。細胞を、マイトジェンまたは抗原の存在下5%CO2雰囲気中37℃にて3日間インキュベートした。20□lのMTT(ミトコンドリア内酵素基質)溶液(5mg/ml;Sigma、St Louis、MO)を、ウェル毎に加えた。6時間後、培養上清を廃棄し、200□lの10%SDS溶液を各ウェルに加えた。37℃での一晩のインキュベーション後、マイクロプレート光分光計(Molecular Devices、CA)を使用して590nmでの光学濃度を読み取った。各細胞試料について抗原刺激に関して、細胞増殖の基準を提供する平均値およびOD値を記録した。抗原特異的応答は、(OD590[刺激された培養物]−OD590[自発的増殖培養物])/OD590[自発的増殖培養物]として表した。
コラーゲン誘導関節炎の臨床的知見
関与する足の数(図1)および全体の関節炎スコア(図2)に基づく疾患の進行についてマウスを評価した。この試験において、対照(生理食塩水処置)動物と比較した場合、大部分の化合物について有意な作用が観察された。
実験の前、疾患の発症時(投与の開始)、および研究の終わりにおける、マウスにおける抗CII抗体レベルのレベルを図3に示す。どのマウスも、II型コラーゲンの注射の前は検出可能なレベルの抗CII抗体を示さず、全てのマウスは、免疫化後に強い抗体応答を起こした。薬物療法の開始時に、5つの群全ての間の抗体価に有意差はなく、抗CII応答における同等性を示した。
前採血、発症および終末血液試料においてアッセイした総血清Igレベルを図4に示す。予想どおりに、コラーゲン関節炎の誘導は、総血清Igレベルの著しい上昇を伴った。生理食塩水処置マウスにおいて、血清Igは上昇し続け、試験の終わりに非常に高いレベルでアッセイされた。しかし、これらの力価は、実験において個々のマウスの間で非常に可変性であった。
終末採血血清中のIL−1β、IL−6、およびTNF□のレベルは、全般的に低レベルとなり、治療に起因する変動は示さなかった。アッセイした全てのサイトカインについての標準は、一貫した感受性の曲線を生じ、これはアッセイが正確であったことを示す。しかし、従前のデータは、炎症性サイトカインは、これらのレベルが変化する場合があるが、コラーゲン関節炎において典型的には上昇することを示してきた。さらなる研究によって、式IIIの化合物が特異的炎症性サイトカインの調節によって抗関節炎作用を及ぼしているかを確立する必要があるであろう。
分裂促進因子であるコンカナバリンAおよびLPSに対するリンパ節細胞の応答、ならびにII型コラーゲンに対する抗原反応を図5に示す。
式IIIの化合物の抗高脂血活性
85匹の約8〜10週齢の雄性Syrian Goldenハムスター(FiB系統、BioBreeders、Fitchburg MA)を、実験処置の開始前に、敷きわらを有する個々のつり下げたポリスチレンケージに1週間順応させ、次いで25重量%のカゼイン、20重量%の水添ヤシ油、2重量%のサフラワー油、および0.15重量%のコレステロールを含有する半精製した高コレステロール食(HCD)を2週間与えた(表1)。次いで、一晩の絶食(16時間)の後にハムスターを採血し(0週)、総コレステロール、HDL−C、非HDL−C、およびトリグリセリドの血漿濃度を決定し、同様の開始時血漿HDL−Cレベルを有する17群(n=5/群)に分け、14日間1日1回式IIの化合物またはビヒクルを投与した。
血漿リポタンパク質コレステロールおよびトリグリセリド測定
0日目、8日目、および15日目に16時間絶食させたハムスターからヘパリン添加管に後眼窩洞を介して血液を回収した。1500×gで室温にて10分間遠心分離後血漿を回収し、血漿総コレステロールおよびトリグリセリド濃度を酵素的に測定した。血漿LDLコレステロール(超低密度、中密度、および低密度リポタンパク質コレステロールの組合せ)を、タングストリン酸試薬で沈殿させ、HDLコレステロールを上清中で測定した。LDLコレステロールの濃度を、血漿TCおよびHDLコレステロールの差異として計算した。疾病対策センターおよび国立心臓/血液/肺研究所(Atlanta、GA)の脂質標準化プログラムに参加することによって、血漿TCおよびHDLコレステロールの測定のために使用される手順の正確性および明確性を維持した。使用した全ての試薬は、Sigma−Aldrich(St.Louis、MO)から供給された。各試料(Roche Pharmaceuticals、Basel、Switzerland)のために10μlの血漿を使用して、Cobas Mira Plus(登録商標)(Cobas Mira Plus(登録商標)は、Roche Diagnostic Systems、Inc.の登録商標である)臨床化学自動分析装置を使用して全てのアッセイを行った。
式IIIの化合物の抗高脂血症プロファイル
0日目に、類似の血漿非HDLコレステロールおよび総コレステロール濃度および体重に基づいて、全ての群を分別した。処置の8日目に、0.9mg/kg、1.8mg/kg、および3.6mg/kgの濃度で投与された式IIIの化合物は、ビヒクル対照と比較して各々−27%、−17%、および−21%の血漿総コレステロールの変化、ビヒクル対照と比較して各々−36%、−24%、および−26%の血漿非HDL−Cの変化、ビヒクル対照と比較して各々−2%、7%、および−4%の血漿HDL−Cの変化、ならびにビヒクル対照と比較して各々−37%、−14%、および−20%の血漿トリグリセリドの変化をもたらした。したがって、本発明の化合物は、患者の脂質プロファイルの減少に有用である。
錠剤の調製
式IIIの化合物(10.0g)をラクトース(85.5g)、ヒドロキシプロピルセルロースHPC−SL(2.0g)、ヒドロキシプロピルセルロースL−HPC、LH−22(2.0g)および精製水(9.0g)と混合し、このように得られた混合物を造粒、乾燥および粒度配合にかけ、このようにして得られた顆粒をステアリン酸マグネシウム(0.5g)と混合し、錠剤作製を行い、それによって錠剤毎に10mgの式IIIの化合物を含有する錠剤を得る。
対象への投与
実施例5において調製した錠剤を、対象に0時に提供する。1週間に亘り24時間毎に1つの錠剤を提供する。3回目の錠剤投与の後に、対象を神経変性事象にさらす。処置された対象は、処置されていない対象と比較してより重篤でない神経障害の症状を示す。
Claims (19)
- R1がメチルである、請求項1に記載の化合物。
- M+がNa+である、請求項1に記載の化合物。
- 対象を治療するための、請求項1に記載の化合物、またはその塩もしくは溶媒和物と、薬学的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物。
- 自己免疫疾患が関節炎である、請求項5に記載の方法。
- 関節炎が関節リウマチまたは骨関節炎である、請求項6に記載の方法。
- 前記化合物が毎日投与される、請求項5に記載の方法。
- 前記対象がヒトである、請求項5に記載の方法。
- R1がメチルである、請求項10に記載の化合物。
- M+がNa+である、請求項10に記載の方法。
- Lysobacter antibioticusが、ATCC(r)アクセッション番号9311(29479)を有するMC−4である、請求項10に記載の化合物。
- 式II
M+は、Na+またはK+である)の化合物の調製方法であって、
寒天培地(ACM)中、好適なpHおよび温度下でLysobacter antibioticusを増殖させるステップと、
産生培地(CPM)にLysobacter antibioticusを播種し、好適なpHおよび温度下で連続撹拌および通気しながら培養して、中間化合物を生成するステップと、
有機溶媒を使用することによって前記中間化合物をCPMから抽出するステップと、
前記有機溶媒を蒸発させて粗中間体を得るステップと、
水性M+HO−を粗中間体の有機溶液に加えるステップと、
遠心分離によって前記化合物を回収するステップとを含む方法。 - ACMが、0.3%のカゼイン(v/v)、0.25%の醸造用酵母(v/v)、0.13%のCaCl2(v/v)、および1.5%の寒天(v/v)を含む、請求項14に記載の方法。
- 前記細菌が15〜37℃の温度範囲で増殖する、請求項14に記載の方法。
- 前記細菌が4〜9のpH範囲で増殖する、請求項14に記載の方法。
- 培養時間が約24〜200時間である、請求項14に記載の方法。
- 前記有機溶媒が、ベンゼン、ヘキサン、酢酸エチル、アセトン、アセトニトリル、クロロホルム、およびジクロロメタンからなる群から選択される、請求項14に記載の方法。
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GB1272057A (en) * | 1969-09-26 | 1972-04-26 | Hoffmann La Roche | Phenazine derivatives and a process for the manufacture thereof |
US3681331A (en) * | 1970-04-02 | 1972-08-01 | Hoffmann La Roche | 1-hydroxy-6-amino alkoxy-phenazine 5,10-dioxides |
US3929790A (en) * | 1969-04-22 | 1975-12-30 | Hoffmann La Roche | Alkylation of iodinin |
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US5637591A (en) * | 1995-06-02 | 1997-06-10 | Fuji Immunopharmaceuticals Corp. | Antimicrobial and anticollagenase activity of phenazine-5, 10-dioxide and derivatives |
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US3929790A (en) * | 1969-04-22 | 1975-12-30 | Hoffmann La Roche | Alkylation of iodinin |
GB1272057A (en) * | 1969-09-26 | 1972-04-26 | Hoffmann La Roche | Phenazine derivatives and a process for the manufacture thereof |
US3681331A (en) * | 1970-04-02 | 1972-08-01 | Hoffmann La Roche | 1-hydroxy-6-amino alkoxy-phenazine 5,10-dioxides |
US4024142A (en) * | 1975-07-16 | 1977-05-17 | Eli Lilly And Company | Quinoxaline derivatives as immune regulants |
US4064127A (en) * | 1975-07-16 | 1977-12-20 | Eli Lilly And Company | Trifluoromethyl dibenzo[a,c]phenazines as immune regulants |
US5637591A (en) * | 1995-06-02 | 1997-06-10 | Fuji Immunopharmaceuticals Corp. | Antimicrobial and anticollagenase activity of phenazine-5, 10-dioxide and derivatives |
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