FI113368B - Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten 2-(karboksi tai karbamidi)-4-sulfonyyli-(kromeenien tai tiokromeenien valmistamiseksi - Google Patents

Description

112368

Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten 2-(karboksi tai karbamidi)-4-sulfonyyli-(kromeenien tai tiokromeenien valmistamiseksi

Esillä oleva keksintö koskee heterosyklisiä bent-5 seenisulfonyyli-imiinijohdannaisia ja niiden käyttöä interleukiini-l:n (IL-1) toiminnan inhibiittoreina. Tällaiset inhibiittorit ovat käyttökelpoisia tässä esitettyjen erilaisten tautitilojen käsittelyssä, joista tässä mainittakoon nivelreuma, keskushermoston pesäkekovet-10 tumatauti, diabetes mellitus, valtimon haurauskovetus-tauti, septinen sokki ja keuhkojen sidekudostuminen. PCT-patenttihakemuksessa WO-A-9215565 kuvataan yhdisteitä, jotka ovat N-metyyli-D-aspartaatin (NMDA) antagonisteja, ja joiden perusrakenne on 2-(karboksi tai karbamidi)-15 4-sulfonyyli-iminokinoliini. Hakijan keksinnössä esitettyjen yhdisteiden perusrakenne ei ole kinoliini vaan kromeeni tai tiokromeeni.

Menetelmässä IL-1:n toiminnan estämiseksi annetaan potilaalle, joka on tämän käsittelyn tarpeessa, tehokas 20 määrä yhdistettä, jonka kaava on:

: 7 II I -4-Z

25 • · · • 1 · :έ /.y\AA/'

v : Y A

0 :· 30 • · · »

f : Kaava I

. jossa * · · I,,’ A on NH, O tai S; » i » 1 » · 113368 2

Qi on -OR tai -NR1R2, jossa R, Ri ja R2 ovat toisistaan riippumatta vetyjä tai Ci-6-alkyyliryhmiä, jotka ovat muodoltaan suora- tai haaraketjuisia tai syklisiä, jolloin syklisen muodon tapauksessa alkyyli on C3-6~syklo-5 alkyyli; Z tarkoittaa 1-3 susbtituenttia valittuna toisistaan riippumatta seuraavista: halogeeni, Ci-4-alkyyli ja Ci-4-alkoksi; Y tarkoittaa 1-3 susbtituenttia valittuna toi-10 sistaan riippumatta seuraavista: Ci-4-alkyyli, Ci-4-alkoksi ja halogeeni.

Keksinnön yhteenveto

Esillä olevan keksinnön mukaisella menetelmällä valmistetut yhdisteet ovat uusia heterosyklisiä bentseeni-15 sulfonyyli-imiinijohdannaisia. Nämä uudet yhdisteet ovat käyttökelpoisia IL-l:n toiminnan inhibiittoreita. Nämä uudet kaavan II mukaiset yhdisteet sisältyvät kaavaan I. Esillä olevan keksinnön kohteena on menetelmä uusien heterosyklisten bentseenisulfonyyli-imiinij ohdannaisten 20 valmistamiseksi, joiden kaava on: . ...

• · • · • ♦ · ··♦ 30 Kaava II ^ jossa • · · .* . A' on O tai S; • » · Q2 on -OR3 tai -NR1R2, jossa Ri, R2 ja R3 ovat *“·’ toisistaan riippumatta Ci-6-alkyyliryhmiä, jotka ovat 35 muodoltaan suora- tai haaraketjuisia tai syklisiä, joi- 113368 3 loin syklisen muodon tapauksessa alkyyli on C3-6~syk-loalkyyli; Y tarkoittaa 1-3 susbtituenttia valittuna toisistaan riippumatta seuraavista: vety ja halogeeni.

5 Nämä tässä mainitut yhdisteet ovat aktiivisia IL-l:n toiminnan inhibiittoreita. Kaavan I mukaisten yhdisteiden tulisi katsoa kuuluvan minkä tahansa menetelmää, käyttöä tai koostumusta koskevien patenttivaatimusten suo-japiiriin.

10 Keksinnön yksityiskohtainen kuvaus Tässä patenttihakemuksessa käytettynä: a) ilmaisu "halogeeni" tarkoittaa fluoriatomia, klooriatomia, bromiatomia tai jodiatomia; b) ilmaisu "Ci-4-alkyyli" tarkoittaa suora- tai 15 haaraketjuista alkyyliryhmää, joka sisältää 1 - 4 hiiliatomia, c) ilmaisu "Ci-6-alkyyli" tarkoittaa syklistä, suora- tai haaraketjuista alkyyliryhmää, joka sisältää 1-6 hiiliatomia, kuten metyyliä, etyyliä, n-propyyliä, isopro- 20 pyyliä, n-butyyliä, isobutyyliä, n-pentyyliä, syklopentyy- liä, n-heksyyliä, sykloheksyyliä jne.; . d) ilmaisu "Ci-4-alkoksi" tarkoittaa suora- tai haaraket juista alkoksiryhmää, joka sisältää 1 - 4 *. hiiliatomia, kuten metoksia, etoksia, n-propoksia, • » » .' 25 isopropoksia, n-butoksia, isobutoksia jne.; * * » * e) Ilmaisu "sen farmaseuttisesti hyväksyttävät "··* suolat" tarkoittaa joko happoadditiosuoloja tai ‘ emäsadditiosuoloja.

Ilmaisun "farmaseuttisesti hyväksyttävät happo-j* 30 additiosuolat" on tarkoitettu koskevan kaavan I mukaisten emäsyhdisteiden tai niiden välituotteiden mitä tahansa myrkytöntä orgaanista tai epäorgaanista happoadditiosuo-laa. Valaisevia esimerkkejä epäorgaanisista hapoista, jotka muodostavat sopivia suoloja, ovat kloorivetyhappo, bro-35 mivetyhappo, rikkihappo ja fosforihappo, ja happamet me- 113368 4 tallisuolat, kuten natriummonovetyortofosfaatti ja kalium-vetysulfaatti. Valaisevia esimerkkejä orgaanisista hapoista, jotka muodostavat sopivia suoloja, ovat mono-, di- ja trikarboksyylihapot. Valaisevia esimerkkejä tällaisista 5 hapoista ovat etikkahappo, glykolihappo, maitohappo, palo-rypälehappo, malonihappo, meripihkahappo, glutaarihappo, fumaarihappo, omenahappo, viinihappo, sitruunahappo, as-korbiinihappo, maleiinihappo, hydroksimaleiinihappo, bent-soehappo, hydroksibentsoehappo, fenyylietikkahappo, kane-10 lihappo, salisyylihappo, 2-fenoksibentsoehappo, p-toluee-nisulfonihappo ja sulfonihapot, kuten metaanisulfonihappo ja 2-hydroksietaanisulfonihappo. Tällaiset suolat esiintyvät joko hydratoituina tai olennaisesti vedettömässä muodossa. Yleensä näiden yhdisteiden happoadditiosuolat 15 ovat veteen ja erilaisiin hydrofiilisiin orgaanisiin liuottimiin liukenevia ja niiden sulamispisteet verrattuna vapaiden emästen sulamispisteisiin ovat tavallisesti korkeammat .

Ilmaisun "farmaseuttisesti hyväksyttävät emäsaddi-20 tiosuolat" on tarkoitettu koskevan kaavan I mukaisten yhdisteiden tai niiden eri välituotteiden mitä tahansa myr-. kytöntä orgaanista tai epäorgaanista emäsadditiosuolaa.

;y. Valaisevia esimerkkejä emäksistä, jotka muodostavat sopi- via suoloja, ovat alkalimetalli- tai maa-alkalimetallihyd-; ‘ 25 roksidit, kuten natrium-, kalium-, kalsium-, magnesium- *· / tai bariumhydroksidit; ammoniakki ja alifaattiset, alisyk- liset tai aromaattiset orgaaniset amiinit, kuten metyyli-'.· * amiini, dimetyyliamiini, trimetyyliamiini ja pikoliini.

Näiden yhdisteiden kanssa voidaan muodostaa joko yksi- tai :* 30 kaksiemäksisiä suoloja.

Kuten alan asiantuntijalle on selvää, kaavan I mu-.’ . kaiset yhdisteet, joissa A on NH, esiintyvät tautomeerei- na. Kaikkien kaavan I mukaisia yhdisteitä tai niiden ;·’ välituotteita koskevien viittausten tulisi katsoa koskevan :* ‘. j 35 113368 5 molempia tautomeereja. Näitä tautomeereja voidaan esittää seuraavilla kaavoilla: 5 N^SC\ HN^

10 Y

O O

Esimerkkejä esillä olevan keksinnön mukaisella menetelmällä valmistetuista yhdisteistä ovat: 15 5,7-dikloori-4-[bentseenisulfonyyli-imino]-4H-kro- meeni-2-karboksyylihappo, metyyliesteri; 4-[bentseenisulfonyyli-imino]-4H-tiokromeeni-2-karboksyylihappo, metyyliesteri; 4-[bentseenisulfonyyli-imino]-4H-kromeeni-2-20 karboksyylihappo, metyyliesteri;

Yleinen synteesimenetelmä sellaisten kaavan I mu-; kaisten yhdisteiden valmistamiseksi, joissa A on NH, on esitetty kaaviossa A. Koska kaavan II mukaiset yhdisteet • · sisältyvät kaavalla I esitettyihin, niin seuraavassa esi- ! ! 25 tetyllä yleisellä synteesimenetelmällä voidaan myös vai- • · » • » · ' / mistaa muutoin kaavan II mukaisia yhdisteitä, mutta joissa ’··“ A1 on NH. Kaaviossa A kaikki substituentit merkitsevät • < » V ‘ samaa kuin edellä, jollei muuta osoiteta, t » » 1 * 1 » · * · • · · * · 1 113368 6

Kaavio A

10 o o vaihe b N/soy^v \^vaihe o

f R Y (3) H

2 0 (Kaava I) q O

A = NH

Qi = -OR v ; ;’j valinnainen valinnainen vaihe d \vaihe e ; 25 v \ “ „ Ρ-ΛΧ, Wy“ O 0 0 (Kaava I) (Kaava I)

;’·,· A = NH A = NH

Qi = -NR-i^ = _OH

112268 7

Kaavion A vaiheessa a sopiva happokloridi, jonka kaava on (1) (analogisia yhdisteitä tunnetaan EP-patentti-hakemuksesta 303 387, P. Leeson, julk. 15.02.1989) saatetaan kosketuksiin sopivan alkoholin kanssa esterin (2) 5 muodostamiseksi.

Sopiva kaavan (1) mukainen happokloridi on sellainen, jossa Y on sama, joka halutaan lopulliseen kaavan I mukaiseen yhdisteeseen. Sopiva kaavan HOR mukainen alkoholi on sellainen, jolla saadaan kaavan I mukainen yhdiste, 10 jossa Qi on -OR, joka on sellainen, joka halutaan loppu tuotteeseen, tai jolla saadaan kaavan I mukaisessa lopputuotteessa haluttu Qi:n merkitys.

Esimerkiksi sopiva kaavan (1) mukainen happokloridi saatetaan kosketuksiin sopivan alkoholin kanssa.

15 Reaktio voidaan suorittaa sopivassa liuottimessa, kuten tetrahydrofuraanissa, dimetyyliformamidissa tai sopivaa alkoholia voidaan käyttää liuottimena. Edullisesti käytetään sopivaa alkoholia. Reaktio suoritetaan sopivan emäksen läsnä ollessa, kuten trietyyliamiinin, di-isopro-20 pyylietyyliamiinin, natriumkarbonaatin tai natriumvety- karbonaatin läsnä ollessa. Reaktioon kuluu aikaa 1-8 i ;'j tuntia. Tuote eristetään ja puhdistetaan alalla hyvin tunnetuin menetelmin, kuten haihduttamalla vakuumissa, ,·, ; uuttamalla, kromatografoimalla sopivan orgaanisen eluentin • * · ! ! 25 kanssa ja kiteyttämällä, jolloin saadaan kaavan (2) • f i ' ,* mukainen esteri.

• · · '···* Kaavion A vaiheessa b kaavan (2) mukainen esteri

• « B

V ' debentsyloidaan, jolloin saadaan kaavan (3) mukainen 1,4- dihydrokinol-4-oni.

» t<jj* 30 Esimerkiksi kaavan (2) mukainen yhdiste saatetaan kosketuksiin sopivan debentsylointiaineen, kuten trifluo- * » · . rietikkahapon kanssa lämpötilassa, joka on riittävä bent- » t t I,,* syyliryhmän poistamiseen ilman, että lähtöaine tai tuote ·;’ hajoaa. Edullinen lämpötila on 70 - 80 °C, kun debentsy- 35 lointiaineena on trifluorietikkahappo. Tuote eristetään ja 113368 8 puhdistetaan alalla hyvin tunnetuin menetelmin, kuten haihduttamalla vakuumissa, kromatografoimalla sopivan orgaanisen eluentin kanssa ja kiteyttämällä, jolloin saadaan kaavan (3) mukainen esteri.

5 Kaavion A vaiheessa c 1,4-dihydrokinol-4-oni saatetaan kosketuksiin sopivan bentseenisulfonyyli-isosya-naatin kanssa, jolloin saadaan kaavan I mukainen hetero-syklinen bentseenisulfonyyli-imiini, jossa A on NH.

Sopiva bentseenisulfonyyli-isosyanaatti on sello lainen, jossa Z on sama, joka halutaan kaavan I mukaiseen lopputuotteeseen, jossa A on NH.

Esimerkiksi kaavan (3) mukainen 1,4-dihydrokinol-4-oni saatetaan kosketuksiin sopivan bentseenisulfonyyli-isosyanaatin 1-2 mooliekvivalentin kanssa. Reaktio suo-15 ritetaan sopivassa liuottimessa, kuten asetonitriilissä tai propionitriilissä lämpötilassa 20 °C:n ja liuottimen palautusjäähdytyslämpötilan välillä. Tuote eristetään ja puhdistetaan alalla hyvin tunnetuin menetelmin, kuten haihduttamalla vakuumissa, kromatografoimalla sopivan or-20 gaanisen eluentin kanssa ja kiteyttämällä, jolloin saadaan kaavan I mukainen yhdiste, jossa A on NH.

. .·. Kaavion A valinnaisessa vaiheessa d sopiva kaavan I mukainen yhdiste saatetaan kosketuksiin sopivan amiinin * · kanssa, jolloin saadaan kaavan I mukainen yhdiste, jossa I * 25 Qi on -NR1R2 ja A on NH.

• · · *· ’· Sopiva kaavan I mukainen yhdiste on sellainen, • · · '···* jossa Qi on -OR, R on Ci-6-alkyyli, A on NH ja Y:n ja Z:n « · · * merkitys on sama, joka halutaan kaavan I mukaiseen loppu tuotteeseen. Käyttämällä sopivaa kaavan HNR1R2 mukaista ·;* 30 amiinia saadaan kaavan I mukainen yhdiste, jossa Qi on kaavan I mukaiseen lopputuotteeseen haluttu -NR1R2 ja A on NH.

5 t ·

Esimerkiksi sopiva kaavan I mukainen yhdiste saatetaan kosketuksiin sopivan amiinin kanssa sopivassa 35 liuottimessa, kuten metanolissa, etanolissa, vedessä tai 112368 9 dioksaanissa. Reaktioastia voi olla tiiviisti suljettu, jotta estettäisiin haihtuvien amiinien karkaaminen reaktioastiasta. Reaktio suoritetaan lämpötilassa huoneenlämpötilan ja liuottimen palautusjäähdytyslämpötilan vä-5 Iillä. Tuote otetaan talteen alalla hyvin tunnetuin menetelmin, kuten uuttamalla, haihduttamalla vakuumissa, kro-matografoimalla sopivan orgaanisen eluentin kanssa ja kiteyttämällä.

Kaavion A valinnaisessa vaiheessa e sopiva kaavan 10 I mukainen yhdiste hydrolysoidaan, jolloin saadaan kaavan I mukainen yhdiste, jossa Qi on -OH ja A on NH.

Sopiva kaavan I mukainen yhdiste on sellainen, jossa Qi on -OR, R on Ci-6-alkyyli, A on NH ja Y:n ja Z:n merkitys on sama, joka halutaan kaavan I mukaiseen 15 lopputuotteeseen.

Esimerkiksi sopiva kaavan I mukainen yhdiste saatetaan kosketuksiin sopivan emäksen, kuten litium-hydroksidin tai natriumhydroksidin kanssa. Reaktio suoritetaan sopivassa liuottimessa, kuten vedessä, tetrahyd-20 rofuraanissa, metanolissa, vesi/tetrahydrofuraaniseok-sissa tai vesi/metanoliseoksissa. Tyypillisesti reaktant-. .·. teja sekoitetaan yhdessä 2 - 24 tuntia lämpötilassa «tl huoneenlämpötilan ja liuottimen palautus jäähdyt yslämpö- • ·

*. tilan välillä. Kaavan I mukainen yhdiste, jossa Qi on -OH

* t · • · · | * 25 ja A on NH, otetaan talteen reaktiovyöhykkeestä tekemällä • * · ’* '· se happameksi, sen jälkeen suodattamalla ja puhdistamalla • · · tuote kiteyttämällä alalla hyvin tunnetulla tavalla.

* * * V · Seuraavat esimerkit esittävät kaaviossa A kuvat tuja tyypillisiä synteesejä. On ymmärrettävä, että nämä ·:· 30 esimerkit on tarkoitettu pelkästään valaisemaan keksintöä ilman, että ne millään tavoin rajoittavat sen suojapiiriä. .* . Seuraavissa esimerkeissä käytettyinä seuraavilla termeillä ; ' on seuraavat merkitykset: g tarkoittaa grammoja, mg tar- ’··' koittaa milligrammoja, mmol tarkoittaa millimooleja, ml 35 tarkoittaa millilitroja, °" tarkoittaa celsiusasteita, Rf 113368 10 tarkoittaa retentiota, sp. tarkoittaa sulamispistettä, haj . tarkoittaa hajoamista, TLC tarkoittaa ohutkerroskro-matografiaa.

Esimerkki 1 5 Kaavio A, vaihe a: 5.7- dikloori-4-bentsyylioksikinoliini-2-karboksyy-lihappo, etyyliesteri 5.7- dikloori-4-bentsyylioksikinoliini-2-happokloridi (1,83 g, 5 mmol), trietyyliamiini (0,7 ml, 10 5,0 mmol) ja etanoli (0,58 ml, 10 mmol) sekoitetaan yhteen tetrahydrofuraanissa (25 ml) . Seosta sekoitetaan huoneenlämpötilassa. 18 tunnin kuluttua seos haihdutetaan vakuu-missa, saadaan jäännös. Jäännös kromatografoidaan silika-geelillä käyttäen eluointiin dikloorimetaania, jolloin 15 saadaan kiinteä aine. Se kiteytetään etyyliasetaat-ti/heksaaniseoksesta, jolloin saadaan otsikon yhdiste kiinteänä aineena: TLC Rf = 0,33 (silikageeli, dikloo- rimetaani) ; sp. 146 - 147 °C.

Alkuaineanalyysi kaavalle C19H15CI2NO3: 20 Laskettu: C 60,65, H 4,02, N 3,72 Saatu: C 60,35, H 4,17, N 3,65.

• Esimerkki 2 • j ·

Kaavio A, vaihe a: • · .·/; 5,7-dikloori-4-bentsyylioksikinoliini-2-karboksyy- 25 lihappo, butyyliesteri

* I I

• / 5, 7-dikloori-4-bentsyylioksikinoliini-2- • * » *··’.* happokloridi (1,83 g, 5 mmol), trietyyliamiini (0,7 ml, • < 1 · 5,0 mmol) ja butanoli (1,04 ml, 10 mmol) sekoitetaan yhteen tetrahydrofuraanissa (25 ml) . Seosta sekoitetaan t 30 huoneenlämpötilassa. 18 tunnin kuluttua seos haihdutetaan vakuumissa, saadaan jäännös. Jäännös kromatografoidaan I e » , silikageelilla käyttäen eluointiin dikloorimetaania, joi- ’ I f • * · !,,· loin saadaan kiinteä aine. Se kiteytetään etyyliase- taatti/heksaaniseoksesta, jolloin saadaan otsikon yhdiste ; 35 kiinteänä aineena: TLC Rf = 0,50 (silikageeli, 113368 11 dikloorimetaani); sp.130 - 132 °C.

Alkuaineanalyysi kaavalle C21H19CI2NO3:

Laskettu: C 62,39, H 4,74, N 3,46

Saatu: C 62,20, H 4,83, N 3,22.

5 Esimerkki 3

Kaavio A, vaihe b: 5.7- dikloorikinolin-4-oni-2-karboksyylihappo, etyyliesteri 5.7- dikloori-4-bentsyylioksikinoliini-2-karboksyy-10 lihappo, etyyliesteri (1,14 g, 3,0 mmol) trifluorietikka- happo (60 ml) sekoitetaan yhteen. Seosta kuumennetaan öl-jyhauteessa 80 °C:ssa. 4 tunnin kuluttua seos haihdutetaan vakuumissa. Jäännökseen lisätään heksaania ja seos haihdutetaan vakuumissa jäljellä olevan trifluorietikkahapon 15 poistamiseksi. Jäännöksenä saatu kiinteä aine kiteytetään asetonitriilistä, jolloin saadaan otsikon yhdiste kiinteänä aineena: TLC Rf = 0,33 (silikageeli, 2 % asetonia di-kloorimetaanissa); sp. 256 - 266 °C.

Alkuaineanalyysi kaavalle C12H19CI2NO3: 20 Laskettu: C 50,37, H 3,17, N 4,90

Saatu: C 50,39, H 3,31, N 4,92.

• Esimerkki 4 * * » ;· , Kaavio A, vaihe b: ,· : 5,7-dikloorikinolin-4-oni-2-karboksyylihappo, bu- ! ! 25 tyyliesteri ' ’ 5,7-dikloori-4-bentsyylioksikinoliini-2-karboksyy- lihappo, butyyliesteri (1,35 g, 3,3 mmol) ja trifluori- v ' etikkahappo (65 ml) sekoitetaan yhteen. Seosta kuumen netaan öljyhauteessa 75 °C:ssa. 3 tunnin kuluttua seos J 30 haihdutetaan vakuumissa. Jäännökseen lisätään dikloorime- taania ja seos haihdutetaan vakuumissa jäljellä olevan trifluorietikkahapon poistamiseksi. Jäännöksenä saatu kiinteä aine kiteytetään asetonitriilistä, jolloin saadaan otsikon yhdiste kiinteänä aineena; sp. 191 - 193 °C.

; 35 113368 12

Esimerkki 5

Kaavio A, vaihe c: 5.7- dikloori-4-[bentseenisulfonyyli-imino]-1,4-di-hydrokinoliini-2-karboksyylihappo, etyyliesteri 5 5,7-dikloorikinolin-4-oni-2-karboksyylihappo, etyyliesteri (0,59 g, 2,1 mmol) ja bentseenisulfonyyli-isosyanaatti (0,56 ml, 4,2 mmol) sekoitetaan yhteen aseto-nitriilissä (10 ml) . Seosta kuumennetaan palautusjäähdyttäen inertissä kaasukehäsasä. 16 tunnin kuluttua seokseen 10 lisätään metanolia (5 ml). Seos haihdutetaan vakuumissa. Jäännös kromatografoidaan silikageelillä käyttäen eluoin-tiin 2 % asetonia dikloorimetaanissa. Kiteyttämällä aseto-nitriilistä saadaan otsikon yhdiste kiinteänä aineena: TLC Rf = 0,31 (silikageeli, 2 % asetonia dikloorimetaanissa); 15 sp. 184 - 185 °C.

Alkuaineanalyysi kaavalle C18H14CI2N2O4S:

Laskettu: C 50,83, H 3,32, N 6,59 Saatu: C 51,04, H 3,33, N 6,56.

Esimerkki 6 20 Kaavio A, vaihe c: 5.7- dikloori-4-[bentseenisulfonyyli-imino]-1,4-di-. ,hydrokinoliini-2-karboksyylihappo, butyyliesteri ;· · 5,7-dikloorikinolin-4-oni-2-karboksyylihappo, bu- ’. \ tyyliesteri (1,00 g, 3,2 mmol) ja bentseenisulfonyyli-iso- ) ; 25 syanaatti (0,85 ml, 6,3 mmol) sekoitetaan yhteen asetonit- ’* '· rillissä (15 ml) . Seosta kuumennetaan palautusjäähdyttäen inertissä kaasukehäsasä. 16 tunnin kuluttua seokseen lisä-ν’ * tään metanolia (5 ml). Seos haihdutetaan vakuumissa. Jäännös kromatografoidaan silikageelillä käyttäen eluointiin 30 2 % asetonia dikloorimetaanissa. Kiteyttämällä etyyliase- taatti/heksaaniseoksesta saadaan otsikon yhdiste kiinteänä , aineena: TLC Rf = 0,38 (silikageeli, 2 % asetonia • dikloorimetaanissa); sp. 94 - 95 °C.

113368 13

Alkuaineanalyysi kaavalle C20H18CI2N2O4S:

Laskettu: C 52,98, H 4,00, N 6,18 Saatu: C 53,27, H 3,95, N 6,12.

Esimerkki 7 5 Kaavio A, valinnainen vaihe d: 5.7- dikloori-4-[bentseenisulfonyyli-imino]-1,4-di-hydrokinoliini-2-karboksyylihappo-N-metyyliamidi 5.7- dikloori-4-[bentseenisulfonyyli-imino]-1,4-di-hydrokinoliini-2-karboksyylihappo, metyyliesteri (1,0 g, 10 2,4 iranol) ja 40-%:inen metyyliamiinin vesiliuos (25 ml) sekoitetaan yhteen dioksaanissa (50 ml). Reaktioastia suljetaan ja seosta sekoitetaan 18 tuntia. Seos haihdutetaan vakuumissa, saadaan keltainen öljy. Öljy liuotetaan veteen (15 ml) ja liuokseen lisätään 1 M HCl-liuosta (15 ml). 15 15 minuutin sekoittamisen jälkeen kiinteä aine suodatetaan. Kiinteä aine pestään 1 M HCl-liuoksella ja vedellä. Kiteyttämällä asetonitriili/vesiseoksesta saadaan otsikon yhdiste kiinteänä aineena, sp. 196 - 197 °C. Alkuaineanalyysi kaavalle C17H13CI2N3O3S.H2O: 20 Laskettu: C 47,68, H 3,53, N 9,81 Saatu: C 47,55, H 3,42, N 9,78.

. ·. Yleinen synteesimenetelmä sellaisten kaavan I mu- kaisten yhdisteiden valmistamiseksi, joissa A on O tai S, \ on esitetty kaaviossa B. Koska kaavan II mukaiset yhdis- ) ; 25 teet sisältyvät kaavalla I esitettyihin, niin seuraavassa '· · esitetyllä yleisellä synteesimenetelmällä voidaan myös • * * *>L* valmistaa sellaisia kaavan II mukaisia yhdisteitä, joissa V : A' on 0 tai S. Kaaviossa B kaikki substituentit merkit sevät samaa kuin edellä, jollei muuta osoiteta.

• t 113368 14

Kaavio B

5 0 °

rrS rrS

10 (4) (5) A on O tai S O q vaihe b 15 rx y^x __ ^ γ/^\_ζ nainen

y^1 *Vaihe C

„ ScA-aA^-«Ni

(Kaava I) q (Kaava X) Q

: ; ; A on O tai S A on O tai S

: * valinnainen : vaihe d ’A; 25 ^

\: : --Z

30 γΧΧ\/0Η

Y A

; (Kaava I)

* A on O tai S

113368 15

Kaavion B vaiheessa a sopiva happo, jonka kaava on (4), jossa A on 0 tai S (tunnettu analogisesti julkaisusta Chromenes, Chroraanones, and Chromones, toim. G. P. Ellis, John Wiley & Sons 1977) saatetaan kosketuksiin sopivan 5 alkoholin kanssa esterin (5) muodostamiseksi.

Sopiva kaavan (4) mukainen happo on sellainen, jossa A on 0 tai S ja Y on sama, joka halutaan kaavan I mukaiseen lopputuotteeseen. Sopiva kaavan HOR mukainen alkoholi on sellainen, jolla saadaan kaavan I mukainen yh-10 diste, jossa Qi on sellainen -OR, joka halutaan saada kaavan I mukaiseen lopputuotteeseen tai sellainen, jolla saadaan kaavan I lopputuotteeseen haluttu Q.

Esimerkiksi sopiva kaavan (4) mukainen happo saatetaan kosketuksiin sopivan alkoholin kanssa hapon, 15 kuten rikkihapon läsnä ollessa. Liuottimena käytetään sopivaa alkoholia. Reaktio suoritetaan lämpötilassa huoneenlämpötilan ja alkoholin palautusjäähdytyslämpötilan välillä. Tuote otetaan talteen alalla hyvin tunnetuin menetelmin, kuten uuttamalla, haihduttamalla vakuumissa, 20 kromatografoimalla sopivan orgaanisen eluentin kanssa ja kiteyttämällä, jolloin saadaan kaavan (5) mukainen esteri.

. Kaavion B vaiheessa b kaavan (5) mukainen yhdiste saatetaan kosketuksiin sopivan bentseenisulfonyyli-isosya- . naatin kanssa, jolloin saadaan kaavan I mukainen hetero- .* \ 25 syklinen bentseenisulfonyyli-imiini, jossa A on O tai S.

• · Sopiva bentseenisulfonyyli-isosyanaatti on sei- • < · '•h* lainen, jossa Z on sama, joka halutaan kaavan I mukaiseen V * lopputuotteeseen, jossa A on O tai S.

Esimerkiksi kaavan (5) mukainen yhdiste saatetaan 30 kosketuksiin sopivan bentseenisulf onyyli-isosyanaatin kanssa. Reaktio suoritetaan sopivassa liuottimessa, kuten , asetonitriilissä tai propionitriilissä lämpötilassa huo- neenlämpötilan ja liuottimen palautusjäähduytyslämpötilan ·;’ välillä. Tuote otetaan talteen alalla hyvin tunnetuin me- 35 netelmin, kuten haihduttamalla vakuumissa, kromatograf oi- 113368 16 maila sopivan orgaanisen eluentin kanssa ja kiteyttämällä, jolloin saadaan kaavan I mukainen yhdiste, jossa A on 0 tai S.

Kaavion B valinnaisessa vaiheessa c sopiva kaavan 5 I mukainen yhdiste saatetaan kosketuksiin sopivan amiinin kanssa, jolloin saadaan kaavan I mukainen yhdiste, jossa Qi on -NR1R2 ja A on 0 tai S.

Sopiva kaavan I mukainen yhdiste on sellainen, jossa Qi on -OR, R on Ci-6-alkyyli, A on 0 tai S ja Y:n ja 10 Z:n merkitys on sama, joka halutaan kaavan I mukaiseen lopputuotteeseen. Käyttämällä sopivaa kaavan HNR1R2 mukaista amiinia saadaan kaavan I mukainen yhdiste, jossa Qi on kaavan I mukaiseen lopputuotteeseen haluttu -NR1R2 ja A on 0 tai S.

15 Esimerkiksi sopiva kaavan I mukainen yhdiste saatetaan kosketuksiin sopivan amiinin kanssa sopivassa liuottimessa, kuten metanolissa, etanolissa, vedessä tai dioksaanissa. Reaktioastia voi olla tiiviisti suljettu, jotta estettäisiin haihtuvien amiinien karkaaminen reak-20 tioastiasta. Reaktio suoritetaan lämpötilassa huoneenlämpötilan ja liuottimen palautusjäähdytyslämpötilan vä-. .·. Iillä. Tuote otetaan talteen alalla hyvin tunnetuin menetelmin, kuten uuttamalla, haihduttamalla vakuumissa, \ kromatografoimalla sopivan orgaanisen eluentin kanssa ja • · · ; * 25 kiteyttämällä.

• · · *· Kaavion B valinnaisessa vaiheessa d sopiva kaavan • « · I mukainen yhdiste hydrolysoidaan, jolloin saadaan kaavan V · I mukainen yhdiste, jossa Qi on -OH ja A on O tai S.

Sopiva kaavan I mukainen yhdiste on sellainen, _;· 30 jossa Qi on -OR, R on Ci-6-alkyyli, A on O tai S ja Y:n ja Z:n merkitys on sama, joka halutaan kaavan I mukaiseen , lopputuotteeseen.

» · ; ’· Esimerkiksi sopiva kaavan I mukainen yhdiste ···' saatetaan kosketuksiin sopivan emäksen, kuten litiumhyd- 35 roksidin tai natriumhydroksidin kanssa. Tyypillisesti 113368 17 reaktantteja sekoitetaan yhdessä 2-24 tuntia lämpötilassa huoneenlämpötilan ja liuottimen palautusjäähdy-tyslämpötilan välillä. Kaavan I mukainen happo, jossa A on 0 tai S, otetaan talteen reaktiovyöhykkeestä tekemällä se 5 happameksi, sen jälkeen suodattamalla ja puhdistamalla tuote kiteyttämällä alalla hyvin tunnetulla tavalla.

Seuraavat esimerkit esittävät kaaviossa B kuvattuja tyypillisiä synteesejä. On ymmärrettävä, että nämä esimerkit on tarkoitettu pelkästään valaisemaan keksintöä 10 ilman, että ne millään tavoin rajoittavat sen suojapiiriä. Seuraavissa esimerkeissä käytettyinä seuraavilla termeillä on seuraavat merkitykset: g tarkoittaa grammoja, mmol tarkoittaa millimooleja, ml tarkoittaa millilitroja, °C tarkoittaa celsiusasteita, sp. tarkoittaa sulamimspistettä.

15 Esimerkki 8

Kaavio B, vaihe a:

Kromoni-2-karboksyylihappo, metyyliesteri

Kromoni-2-karboksyylihappo (2,0 g, 10,5 mmol) ja metanoli (25 ml) sekoitetaan yhteen. Siihen lisätään rik-20 kihappoa (2,5 ml) ja seosta kuumennetaan palautusjäähdyttäen. 2 tunnin kuluttua reaktioseos kaadetaan jääveteen ja . .·. suodatetaan. Suodatuskakku pestään vedellä ja kylmällä • I t laimealla NaHC03-vesiliuoksella. Kromatografoimalla sili-kageelillä käyttäen eluointiin tetrahydrofuraania saadaan ; ; 25 haihdutusjäännös. Se kiteytetään metanolista, jolloin saa- ’· daan otsikon yhdiste kiinteänä aineena, sp. 120 - 122 °C.

I i I

'•h* Esimerkki 9 *.·’ * Kaavio B, vaihe b: 4-[bentseenisulfonyyli-imino]-4H-kromeeni-2-·;· 30 karboksyylihappo, metyylies teri ;***; Kromoni-2-karboksyylihappometyyliesteri (0,341 g, 1,66 mmol) ja bentseenisulfonyyli-isosyanaatti (0,365 g, • · 1,88 mmol) sekoitetaan yhteen asetonitriilissä (5,0 ml) ja *...' seosta kuumennetaan palautus jäähdyttäen. 24 tunnin kulut- ’· · 35 tua reaktioseokseen lisätään metanolia (1 ml) . Seos kon- 18 112368 sentroidaan vakuumissa ja jäännöstä hierretään heksaanis-sa. Seos suodatetaan, saadaan tahna. Tahna kiteytetään metanolista, jolloin saadaan kiinteä aine. Kiteyttämällä uudelleen metanolista saadaan otsikon yhdiste kiinteänä 5 aineena, sp. 144 - 146 °C.

Interleukiini-1 (IL—1) koostuu kahdesta polypepti-distä, joista käytetään nimitetyksiä IL-Ια ja IL-Ιβ ja jotka kuuluvat sytokiinien luokkaan, joka sisältää myös kasvain-nekroositekijä an (TNFa) ja IL-6:n. Näiden syto-10 kiinien biologiset ominaisuudet ovat osittain päällekkäisiä ja niihin sisältyy kyky stimuloida T- ja B-lymfosyyt-tejä ja vaikuttaa sellaisten proteiinien ilmentymiseen, joita esiintyy monissa immunologisissa ja tulehduksellisissa reaktioissa.

15 IL-l:n toimintaa estävien aineiden esto voi tapahtua useilla eri mekanismeilla, joita ovat: IL-l:n tuot tamisen estäminen inhiboimalla IL-l:n ilmentymistä, synteesiä tai vapautumista; antagonismi IL-l-reseptorissa; IL-l:n indusoiman IL-l:n tuottamisen laajentumisen estämi-20 nen; tai IL-l:n indusoiman muiden sytokiinien tuottamisen estäminen; jne.

. On tunnettua esimerkiksi, että epiteelisolut tuot- tavat IL-l:tä ja että se stimuloi sidekudoskasvainten uu-\ '. diskasvua ja proteolyyttisten entsyymien (esim. kollage- * ) 25 naasi) ja prostaglandiinien vapautumista tulehdusproses- • * ♦ '· [· seissa, esim. nivelreumassa. Katso: Durom, S. K.; Schmidt, • · » **! J. A.; Oppenheim, J. J. ; Interleukin 1: an Immunological * · » V* Perspective, Ann. Rev. Immunol. 3, 263 - 287 (1985);

Otterness, I. G.; Bliven, M. L.; Downs, J. T.; Natoli, E.

( 30 J. ; Hanson, D. C.; Inhibition of Interleukin-1 Synthesis by Tenidap: a New Drug for Arthritis, Cytokine 3, 277 - , 283 (1991); ja Miyasaka, N.; Sato, K.; Goto, M.; Sasano, M.; Natsuyma, M.; Inoue, K. ; ja Nishioks, K. Augmented ·;·’ Interleukin-1 Production and HLA-DR Expression in the 35 Synovium of Rheumatoid Arthritis Patients, Arthritis and 113368 19

Rheumatism, 31, 480 - 486 (1988). Siten aineet, jotka inhiboivat IL-l:n toimintaa, olisivat käyttökelpopisia nivelreuman käsittelyssä.

On myös osoitettu, että IL-1 voi vaikuttaa 5 valtimon haurauskovetustaudin syntyy suoraan stimuloimalla sileiden lihasten solujen uudiskasvua tai epäsuorasti verihiutaleista johdetun kasvutekijän (PDGF) vaikutuksesta. Katso: Jackson, R. L. ja Ku, G., Interleukin-ΐβ, its Role in the Pathogenesis of Atherosclerosis and Agents 10 that Inhibit its Action, Current Drugs: Anti- atherosclerotic Agents, sivut B31-B42 (lokakuu 1991). Lisäksi tenidap - aine, jonka tiedetään estävän IL-l:n tuottamisen - alentaa seerumin kolesterolin kokonaistasoa, seerumin LDL-kolesterolia ja seerumin triglyseridejä 15 niveltulehdusta sairastavassa nisäkkäässä, jolle on annettu lääkkeeksi tenidapia. Katso US-patenttijulkaisu 5 122 534 (8.2.1991). Siten IL-l:n toimintaa inhiboivat aineet voivat myös olla hyödyllisiä valtimon haurauskovetustaudin ennaltaehkäisevässä käsittelyssä.

20 Lisäksi on oletettu, että haimasaarekkeisiin tun keutuvat makrofagit voivat näytellä osaa β-solujen hajoa-. misessa ja että makrogageista paikallisesti vapautuvat sytokiinit, varsinkin IL-1 voivat olla myrkyllisiä mole- » · kyylejä, jotka aiheuttavat β-solujen hajoamista insuliini- • 4 * \ | 25 riippuvaisessa sokeritaudissa (IDDM). Katso: Sandler, S., * » * • ]· Eizirik, D. , Svensson, C., Strandell, E., Welsh, M. ja

Il

Welch, N., Biochemical and Molecular Action of Interleukin V · 1 on Pancreatic β-Cells, Autoimmunity, ]JD, 241 - 253 (1991). Siten IL-l:n toimintaa estävät aineet saattavat (30 olla käyttökelpoisia myös sokeritaudin käsittelyssä.

:”*: On myös osoitettu, että lisääntyneen IL-l:n tuot- . tamisen ja keskushermoston pesäkekovettumataudin (MS) ),,* kliinisen etenemisen välillä on korrelaatio. On osoitettu, i että viljeltyjen veren yksitumaisten solujen tuottama IL-: 35 la:n määrä kasvaa merkittävästi potilailla, joilla on MS- 113368 20 tauti, jolloin potilaissa, joiden MS-taudissa on aktiivinen huononemisvaihe, IL-la:n tuottaminen lisääntyy eniten. Katso: Matsuda, M, Tsukada, N. Miyagi, K. ja Yanagisawa, N., Increased Interleukin-1 production by peripheral blood 5 mononuclear cells in patients with multiple sclerosis, Journal of the Neurological Sciences, 102, 100 - 104 (1991). Siten IL-l:n toimintaa inhiboivat aineet voivat olla käyttökelpoisia keskushermoston pesäkekovettumataudin hoidossa.

10 Tutkimuksissa on myös osoitettu, että IL-1- reseptorin antagonisteja voitaisiin mahdollisesti käyttää alkuvaiheessa olevan tai vakiintuneen keuhkofibroosin käsittelemiseen. Katso: Piguet, P., Vesin, C., Grau, G.,

Thompson, R., Interleukin-1 Receptor Anatagonist (IL-lra) 15 Prevents or Cures Pulmonary Fibrosis Elicited in Mice By Bleomysin or Silica, Cytokine 5, 57-61 (1993). Siten ai neet, jotka inhiboivat IL-l:n toimintaa saattavat myös olla käyttökelpoisia keuhkofibroosin käsittelyssä.

On myös ehdotettu, että IL-l-reseptorin antagonis-20 tit saattavat osaltaan vähentää septisestä sokista aiheutuvia kuolemantapauksia. Katso: Ohlsson, K., Björk, P., , ,·. Bergenfeldt, M., Hageman, R. ja Thompson, R., Interleukin- « · · ;*f.t 1 Receptor Antagonist Reduces Mortality from Endotoxin '. Shock, Nature 348, 550 - 552 (1990) . Siten aineet, jotka • ♦ · ; ; 25 inhiboivat IL-l:n toimintaa saattavat myös olla käyttökel- • # · '· · poisia septisen sokin käsittelyssä.

Kaavan I mukaiset yhdiseet inhiboivat IL-l:n toi-ν’ · mintaa. Eräs mekanismi IL-l:n toiminnan estämiseksi käsit tää IL-l:n tuottamisen estämisen. IL-l:n tuottamisen estä-;· 30 mistä testattiin käyttäen lipopolysakkaridilla (LPS) sti- muloituja makrofageja. IL-l:n indusoiman sytokiinien tuot- , tamisen estyminen testattiin mittaamalla TNFocn (kasvaimen * » * ’ nekroositekijä a) synteesin estyminen IL-l:n stimuloimista makrofageista. Näiden koemenetelmien järjestelyt on kuvat-: · · 35 tu seuraavassa.

» 113368 21

Ihmisen makrofagien endotoksiini-indusoima Inter-Ieukiini-1B:n vapautuminen

Tarkoitus Tämän kokeen tarkoituksena on määrittää koeyhdis-5 teiden konsentraatiot, jotka estävät ihmisen perifeerisen veren monosyyteistä johdettujen makrofagien endotoksiini-indusoiman interleukiini-ΐβ:n vapautumista.

Lähde

Ihmisen perifeerisen veren monosyyteistä johdettu-10 jen makrofagien lähde oli seuraava:

Terveistä vapaaehtoisista henkilöistä koottiin laskimoverta 10 mM natriumsitraattiliuokseen (2 ml steriiliä natriumsitraattia/40 ml verta). Yksitumaiset solut eristettiin Leucoprep-putkilla (Becton Dickenson, 15 tuote nro 2752 tai 2751), joita lingottiin 1 500 g:ssa 15 minuuttia. 3 x 106 yksitumaista solua sisältävät alik-vootit lisättiin 24 syvennystä käsittävien kudosviljel-mälevyjen syvennyksiin (Corning) RPMI-1640:ssä. 1 tunnin inkuboinnin jälkeen 37 °C:ssa kiinnittymättömät solut 20 huuhdottiin varovasti pois. Kiinnittyneisiin soluihin (makrofagit) lisättiin jälleen tuoretta RPMI-1640 . .’. viljelyväliainetta (1 ml/syvennys) .

Menetelmä • ·

Makrofagien yksikerrosviljelmiä esikäsiteltiin yh- • « · I I 25 disteillä 1 tunnin ajan ennen stimulointia endotoksiinilla • * * '· ]· (20 ng/ml, Salmonella typhimurium, re-mutantti firmasta » I | 'C·* Ribi Immuchem.). 95-%:iseen etanoliin tai DMS0:hon liuo- * · > V · tettujen yhdisteiden kokeet vaativat lisää yksikerrosvil- jelmien käsittelyjä vastaavasti määrillä 10 tai 2,5 μΐ ( ;:· 30 95-%:ista etanolia tai DMS0:ta. Viljelmien päällä olevat :*”· nesteet koottiin 24 tunnin kuluttua ja niiden IL-1B tes- , tattiin käyttäen kaupallista ELISA-koepakkausta (Cistron).

Tulosten analysointi *y‘ Viljelyväliaineen päällä olevasta nesteestä las- 35 kettiin IL-lh-konsentraatio sarjasta tunnettuja konsen- 113368 22 traatioita kehitetyn standardikäyrän avulla. Yhdisteen teho ilmoitetaan ICso-arvoina (μΜ).

Tulokset:

Yhdiste IC50 5 5,7-dikloori-4-[bentseenisulfonyyli-imino]- 1.4- dihydrokinoliini-2-karboksyylihappo, metyyliesteri 6 μΜ 5.7- dikloori-4-[bentseenisulfonyyli-imino]-1, 4-dihydrokinoliini-2-karboksyylihappo, 10 etyyliesteri 2 μΜ 5.7- dikloori-4-[bentseenisulfonyyli-imino]- 1.4- dihydrokinoliini-2-karboksyylihappo, butyyliesteri 3 μΜ 5.7- dikloori-4-[bentseenisulfonyyli-imino]- 15 1,4-dihydrokinoliini-2-karboksyylihappo- N-metyyliamidi 3 μΜ 4-[bentseenisulfonyyli-imino]-4H-kromeeni-2-karboksyylihappo, metyyliesteri 3 μΜ

Interleukiini-1B:n indusoiman kasvain-nekroosite-20 kijä-cx:n vapautuminen ihmisen makrofagien vapauttamana

Tarkoitus , Tarkoituksena oli määrittää konsentraatiot, jotka » · estävät interleukiini-ΐβ: n (IL-1B) indusoimaa kasvain-nek- • · \ roositekijä-αη (TNFa) vapautumista ihmisen perifeerisen ; j 25 veren monosyyteistä johdettujen makrofagien vapauttamana.

'· Olisi ymmärrettävä, että tämä koe määrittää koeyhdisteiden ’d.‘ kyvyn mukauttaa eli estää IL-lB:n aktiivisuutta mittaamal- 1 la IL-lB:n indusoiman TNFa:n vapautumisen inhibitio.

Lähde: ihmisen perifeerisen veren monosyyteistä *;* 30 johdetut makrofagit

Terveistä vapaaehtoisista henkilöistä koottiin . , laskimoverta 10 mM natriumsitraattiliuokseen (2 ml sterii- ’ liä natriumsitraattia/40 ml verta) . Yksitumaiset solut t i eristettiin Leucoprep-putkilla (Becton Dickenson, tuote 35 nro 2752 tai 2751), joita lingottiin 1 500 g:ssa 15

• I

113368 23 minuuttia. 3 x 106 yksitumaista solua sisältävät alik-vootit lisättiin 24 syvennystä käsittävien kudosviljel-mälevyjen syvennyksiin (Corning) RPMI-1640:een. 1 tunnin inkuboinnin jälkeen 37 °C:ssa kiinnittymättömät solut 5 huuhdottiin varovasti pois. Kiinnittyneisiin soluihin (makrofagit) lisättiin jälleen tuoretta RPMI-1640 viljely-väliainetta (1 ml/syvennys).

Menetelmä

Makrofagien yksikerrosviljelmiä esikäsiteltiin yh-10 disteillä 1 tunnin ajan ennen stimulointia IL-15:lla (20 ng/ml, ihmisen rekombinantti IL-1B). 95-%:iseen etanoliin tai DMSO:hon liuotettujen yhdisteiden kokeet vaativat lisää yksikerrosviljelmien käsittelyjä vastaavasti määrillä 10 tai 2,5 μΐ 95-%:ista etanolia tai DMSO:ta. Viljelmien 15 päällä olevat nesteet koottiin 24 tunnin kuluttua ja niiden TNFa testattiin käyttäen kaupallista ELISA-koepakkaus-ta (Cistron).

Analyysitulokset

Viljelyväliaineen päällä olevasta nesteestä las- 20 kettiin TNFa:n konsentraatio sarjasta tunnettuja konsen-traatioita kehitetyn standardikäyrän avulla. Yhdisteen te-. ·’. ho ilmoitetaan ICso-arvoina (μΜ) .

Tulokset: • ·

St . Yhdiste IC50 ) ] 25 5,7-dikloori-4-[bentseenisulfonyyli-imino]- '· * 1,4-dihydrokinoliini-2-karboksyylihappo, '*·'’ metyyliesteri 3 μΜ V : 5,7-dikloori-4-[bentseenisulfonyyli-imino]- 1,4-dihydrokinoliini-2-karboksyylihappo, ;· 30 etyyliesteri 3 μΜ 5,7-dikloori-4-[bentseenisulfonyyli-imino]-' , 1,4-dihydrokinoliini-2-karboksyylihappo, butyyliesteri 5 μΜ t i 113368 24 5,7-dikloori-4-[bentseenisulfonyyli-imino]- 1,4-dihydrokinoliini-2-karboksyylihappo- N-metyyliamidi 4 μΜ 4-[bentseenisulfonyyli-imino]-4H-kromeeni-5 2-karboksyylihappo, metyyliesteri 2 μΜ

Esillä olevan keksinnön mukaisella menetelmällä valmistettuja yhdisteitä voidaan annostaa eri tavoin. Ne ovat tehokkaita suun kautta annostettuina. Yhdisteitä voidaan annostaa myös ruuansulatuskanavan ulkopuolisesta 10 (so. ihonalaisesti, suonensisäisesti, lihaksensisäisesti, vatsaontelonsisäisesti tai henkitorvensisäisesti).

Näiden terapeuttisten ominaisuuksien esille saamiseksi yhdisteitä on annettava lääkkeeksi sellainen määrä, joka riittää IL-l:n toiminnan inhiboimiseen. Annosalue, 15 jolla näiden yhdisteiden estovaikutusta saadaan, voi vaihdella laajalti riippuen kulloinkin käsiteltävästä sairaudesta, potilaan sairauden vakavuudesta, kulloinkin annostetusta yhdisteestä, annostustavasta ja potilaan muista perimmäisistä tautitiloista jne. Tyypillisesti yhdis-20 teillä saadaan terapeuttinen vaikutus annosalueella noin 0,1 mg/kg/päivä - noin 50 mg/kg/päivä mihin tahansa edellä . '. luetelluista sairauksista tai tautitiloista.

μ,·. Farmaseuttiset koostumukset voidaan valmistaa • · . käyttäen alalla tunnettuja menetelmiä. Tyypillisesti vai- • 1 · ! 1 25 kuttava määrä yhdistettä sekoitetaan farmaseuttisesti • 1 · 1 hyväksyttävän kantaja-aineen kanssa.

• f · ’·«·1 Suun kautta annettaviksi yhdisteet voidaan for- *.· 1 muloida kiinteiksi tai nestemäisiksi valmisteiksi, kuten kapseleiksi, pillereiksi, tableteiksi, pastilleiksi, su-30 latteiksi, jauheiksi, suspensioiksi tai emulsioiksi. Kiin-teät annosyksikkömuodot voivat olla tavallisia gelatiini-, tyyppisiä kapseleita, jotka sisältävät esimerkiksi pinta-

I I

aktiivisia aineita, luistoaineita ja inerttejä täyteainei-· ta, kuten laktoosia, sakkaroosia ja maissitärkkelystä, tai • : 35 113368 25 ne voivat olla hidastetusti aktiiviainetta vapauttavia valmisteita.

Erään toisen toteutusmuodon mukaan kaavan I mukaiset yhdisteet voidaan tabletoida tavanomaisten tabletoin-5 tiperusaineiden kanssa, joita ovat laktoosi, sakkaroosi ja maissitärkkelys yhdessä sideaineiden, kuten akaasiakumin, maissitärkkelyksen tai gelatiinin kanssa, hajoamista edistävien aineiden, kuten perunatärkkelyksen tai algiinihapon kanssa, ja voiteluaineiden, kuten steariinihapon tai mag-10 nesiumstearaatin kanssa. Nestemäiset koostumukset valmis tetaan liuottamalla aktiivinen aineosa vesipitoiseen tai vettä sisältämättömään farmaseuttisesti hyväksyttävään liuottimeen, joka voi sisältää myös alalla tunnettuja sus-pendointiaineita, makeutusaineita, makuaineita ja säilön-15 täaineita.

Ruuansulatuskanavan ulkopuoliseen lääkeantoon yhdisteet voidaan liuottaa fysiologisesti hyväksyttävään farmaseuttiseen kantaja-aineeseen ja annostaa joko liuoksena tai suspensiona. Valaisevia esimerkkejä sopivista 20 farmaseuttisista kantaja-aineista ovat vesi, suolaliuos, dekstroosiliuokset, fruktoosiliuokset, etanoli tai eläin-, .·. tai kasviöljyt tai synteettiset öljyt. Farmaseuttinen kan- • t · taja-aine voi myös sisältää alalla tunnettuja säilöntäai- » · \ neita, puskureita jne.

| * 25 Tässä patentthakemuksessa käytettynä: *· ’* a) "potilas" tarkoittaa lämminverisiä eläimiä, ku- ten esimerkiksi marsuja, hiiriä, rottia, kissoja, kaniine-V · ja, koiria apinoita, simpansseja ja ihmistä.

b) termi "käsitellä" viittaa yhdisteiden kykyyn ·;· 30 joko helpottaa, lievittää tai hidastaa potilaan sairauden etenemistä.

, ’ , c) termi "vaikuttava määrä" tarkoittaa määrää, : joka yhtenä ainoana annoksena tai usemapikertaisena annoksena annettuna potilaalle estää IL-l:n toiminnan.

: 35 113368 26 Tämän keksinnön mukaisella menetelmällä valmistettuja yhdisteitä voidaan myös annostaa paikallisesti. Tämä voidaan suorittaa yksinkertaisesti valmistamalla annostettavan yhdisteen liuos, edullisesti käyttäen 5 liuotinta, jonka tiedetään edistävän absorboitumista ihon lävitse, kuten etanolia tai dimetyylisulfoksidia (DMSO), ja muita lisäaineita tai ilman muita lisäaineita. Edullisesti paikallinen annostus suoritetaan käyttäen laastaria, joka on säiliö- ja huokoinen- kalvo -tyyppinen 10 tai kiinteä matriksivariaatio.

Joitakin sopivia transdermaalisia laitteita on kuvattu US-patenttijulkaisuissa 3 742 951, 3 797 494, 3 996 934 ja 4 031 894. Nämä laitteet sisältävät yleensä tukiosan, joka määrittelee sen yhden ulkopinnan, aktiivis-15 ta ainetta läpäisevän kiinnittävän kerroksen, joka määrittelee sen toisen ulkopinnan ja ainakin yhden säiliön, joka sisältää aktiivista aineosaa pantuna ulkopintojen väliin. Vaihtoehtoisesti aktiivinen aine voi sisältyä suureen määrään mikrokapseleita jakautuneina tasaisesti läpäisevään 20 kiinnittävään kerrokseen. Molemmissa tapauksissa aktiivista ainetta vapautuu jatkuvasti säiliöstä tai mikrokap-. ·. seleista kalvon lävitse aktiivista ainetta läpäisevään ; kiinnitysaineeseen, joka on kosketuksissa hoidon kohteen ihon tai limakalvon kanssa. Jos aktiivinen aine absorboi- * * · ; * 25 tuu ihon lävitse, niin säädetty ja etukäteen määrätty ak- • I · *· : tiivisen aineen määrä virtaa lääkkeen vastaanottajaan.

Mikrokapselien tapauksessa kapselointiane voi myös toimia *.’ · kalvona.

Eräässä toisessa transdermaalisesti esillä olevan 30 keksinnön mukaisia yhdisteitä annostelevassa laitteessa farmaseuttisesti aktiivinen yhdiste sisältyy matriksiin, . josta sitä vapautuu halutunasteisesti säädetyllä vakiono peudella. Tämä matriksi on läpäisevä ja vapauttaa yhdis-tettä diffundoimalla tai virtaamalla mikrohuokosten kaut-• ; 35 ta. Tällainen systeemi, jossa ei tarvita kalvoa, on kuvat- 113368 27 tu US-patenttijulkaisussa 3 921 636. Näissä systeemeissä mahdollisia ovat vähintään kaksi vapautusmistyyppiä. Dif-fundoimalla vapautuminen tapahtuu, kun matriksi ei ole huokoinen. Farmaseuttisesti vaikuttava yhdiste on liuen-5 neena matriksiin ja diffundoituu itse matriksin lävitse. Vapautuminen mikrohuokosten kautta tapahtuu, kun farmaseuttisesti vaikuttava yhdiste kulkee matriksin huokosten kautta nestefaasissa.

Vaikka keksintöä on kuvattu sen erityisten toteu-10 tusmuotojen yhteydessä, on ymmärrettävä, että siitä voidaan tehdä muita muunnoksia ja että tämän patenttihakemuksen katsotaan kattavan keksinnön kaikki sellaiset muunnelmat, käytöt tai sovellukset, jotka yleisesti noudattavat keksinnön periaatteita, ja että siihen katsotaan sisälty-15 vän sellaisia poikkeamia esillä olevan keksinnön selityksestä, jotka kuuluvat alan tunnettuun tai tavalliseen käytäntöön .

>

Claims (3)

112368 28

1. Menetelmä terapeuttisesti aktiivisen yhdisteen valmistamiseksi, jolla on kaava II /“yx, pdy o

15 Kaava II jossa A' on 0 tai S; Q2 on -0R3 tai -NRiR2, joissa Ri, R2 ja R3 ovat toi-20 sistaan riippumatta Ci-6-alkyyliryhmiä, jotka ovat muodoltaan suora- tai haaraketjuisia tai syklisiä, jolloin syk-, ·. lisen muodon tapauksessa alkyyli on C3-6-sykloalkyyli; .. . Y tarkoittaa 1 - 3 substituenttia valittuna I I · *. toisistaan riippumatta seuraavista: vety ja halogeeni, '1 25 tunnettu siitä, että yhdiste, jolla on kaava • * · :;i;: O 'τ’ J 0 : 35 i 113368 29 saatetaan kosketuksiin sopivan bentseenisulfonyyli-isosya-naatin kanssa kaavan II mukaisen yhdisteen saamiseksi, jossa Q2 on -OR3, ja haluttaessa saatetaan saatu yhdiste kosketuksiin kaavan HNR1R2 mukaisen amiinin kanssa kaavan 5 II mukaisen yhdisteen saamiseksi, jossa Q2 on -NR1R2.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 4-[bentseenisul-fonyyli-imino]-4H-kromeeni-2-karboksyylihapon metyyli- esteri .

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 4-[bentseenisul-fonyyli-imino]-4H-tiokromeeni-2-karboksyylihapon metyyli-esteri . 1 · • · · « * · • * · t t 1 * I » « · k • » ♦ * · t * · ( I 1 » I I > * 113368 30