JP2010215607A - 骨粗鬆症予防・治療剤および破骨細胞分化抑制剤 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】クズ栽培において、収穫量が多く、かつ機能性成分(イソフラボン類等)を多く含有する木質化した当年生茎自体またはその抽出物を有効成分として含有することを特徴とする骨粗鬆症予防・治療剤および破骨細胞分化抑制剤、ならびにそれらを配合してなる医薬品または飲食品などを提供する。
【選択図】なし
Description
(1)クズ(Pueraria lobata)の木質化した当年生茎またはその抽出物を有効成分として含有することを特徴とする骨粗鬆症予防・治療剤;
(2)クズ(Pueraria lobata)の木質化した当年生茎またはその抽出物を有効成分として含有することを特徴とする破骨細胞分化抑制剤;
(3)前記木質化した当年生茎が落葉前後から翌年の発芽時期前までに採集されたものである(1)または(2)記載の剤;
(4)前記木質化した当年生茎が10月から翌年の4月に採集されたものである(1)〜(3)のいずれかに記載の剤;
(5)前記抽出物が抽出エキスあるいは粉末状物である(1)または(2)記載の剤;
(6)前記抽出物が、水、炭素数1〜4のアルコール類およびケトン類からなる群より選択される1種以上の抽出溶媒を用いて調製されることを特徴とする(1)、(2)または(5)記載の剤;
(7)前記抽出溶媒が、水、エタノール、または水とエタノールとの混合溶媒である(6)記載の剤;
(8)(1)〜(7)いずれかに記載の剤を配合してなる医薬品;
(9)(1)〜(7)いずれかに記載の剤を配合してなる飲食品;
などを提供する。
2006年7,9,11月および翌年1,4月に、2006年4月新芽発芽時期から1年以内に生育したクズ当年生茎を収穫した。なお、クズの栽培は、特願2007−25082号(平成19年9月27日)に示す栽培方法に従い圃場にて栽培した。これら収穫した当年生茎および対照の多年生茎を凍結乾燥した後、全量をワンダーブレンダーWB−1(大阪ケミカル株式会社製)にて30秒間破砕し粉末とした。各月当年生茎粉末1.0gおよび多年生茎粉末1.0gに、それぞれエタノール20mLを加えて、振盪器にて25℃で48時間振盪抽出をした後、抽出液を遠心器にて10分間遠心分離を行った。上清をデカントし、ミリポアフィルターでろ過した。ろ液を減圧下濃縮乾固し、得られた抽出物の各イソフラボン量は、高速液体クロマトグラフィー(HPLC)で測定した。
HPLCの分析条件:
カラム:Waters社SymmetryC18 3.5μm(2.1×150mm)
溶離液:A:0.1%ギ酸入アセトニトリル10%溶液
B:0.1%ギ酸入アセトニトリル35%溶液
カラム温度:40℃
流速:0.25ml/min
検出器:UV検出器
(1)試験方法
骨芽細胞様株化細胞であるUAMS−32細胞とマウス由来骨髄細胞の共存培養法を用いた。即ち、サンプルの破骨細胞分化抑制活性は破骨細胞(TRAP染色陽性)の形成した数をカウントして評価した。同時にMTT活性も測定しサンプルの細胞毒性の程度を測定した。
11月、1月当年生茎および多年生茎抽出物の破骨細胞分化抑制効果および細胞毒性の試験結果を図2に示す。図2から明らかなように、11月および1月当年生茎抽出物は、対照の多年生茎抽出物と同等の破骨細胞分化抑制作用を示した。
実施例1と同様に2007年4月頃の新芽から生育した当年生茎を8,9,10,11,12月、2008年1,2月に収穫し、実施例1と同様にして、各月当年生茎100g当たりの各イソフラボン量を算出した。結果を表3に示す。表3から明らかなように10月以降はイソフラボン総量が多く、特に12月および1月収穫の当年生茎は、多年生茎とほぼ同程度のイソフラボン総量を含有していることが判明した。
2008年2月に収穫した当年生茎を水洗し、自然乾燥後、細断機で平均長さ約1cmに細断したクズ茎50kgに温水を加えて抽出した。抽出液を減圧濃縮後スプレイドライすると黄褐色粉末として3.75kg得られた。得られた粉末を骨粗鬆症モデルマウスにおける試験用サンプルとした。
11週齢の雌性ddYマウスに卵巣摘出手術(OVX)を実施した群、ならびに偽手術(sham)を実施した群を、それぞれ1週間の予備飼育後、一般状態に異常がみられなかったマウスを選択し、OVXおよびshamそれぞれを2群に分け、計4群に分けた。
Claims (9)
- クズ(Pueraria lobata)の木質化した当年生茎またはその抽出物を有効成分として含有することを特徴とする骨粗鬆症予防・治療剤。
- クズ(Pueraria lobata)の木質化した当年生茎またはその抽出物を有効成分として含有することを特徴とする破骨細胞分化抑制剤。
- 前記木質化した当年生茎が落葉前後から翌年の発芽時期前までに採集されたものである請求項1または2記載の剤。
- 前記木質化した当年生茎が10月から翌年の4月に採集されたものである請求項1〜3いずれか1項記載の剤。
- 前記抽出物が抽出エキスあるいは粉末状物である請求項1または2記載の剤。
- 前記抽出物が、水、炭素数1〜4のアルコール類およびケトン類からなる群より選択される1種以上の抽出溶媒を用いて調製されることを特徴とする請求項1、2または5記載の剤。
- 前記抽出溶媒が、水、エタノール、または水とエタノールとの混合溶媒である請求項6記載の剤。
- 請求項1〜7いずれか1項記載の剤を配合してなる医薬品。
- 請求項1〜7いずれか1項記載の剤を配合してなる飲食品。
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