JP2010204086A - 細胞処理液の製造方法、細胞核dna量測定方法及びその測定に用いるキット - Google Patents
細胞処理液の製造方法、細胞核dna量測定方法及びその測定に用いるキット Download PDFInfo
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Abstract
【解決手段】細胞懸濁液に、界面活性剤、RNA除去液及び蛍光染色色素をほぼ同時に添加し、所定時間反応させる染色工程と、前記染色工程により染色された細胞懸濁液をフローサイトメータを用いて細胞核DNA量測定を行う分析工程と、を含むことを特徴とする。
【選択図】図1
Description
Claims (7)
- フローサイトメータによる細胞核DNA量測定に供する細胞懸濁液を生成するために、
界面活性剤による裸核化、RNA除去液及び蛍光染色の工程前の細胞懸濁液を添加する細胞処理液の製造方法の製造方法であって、
界面活性剤、RNA除去液及び蛍光染色色素を混和することにより製造することを特徴とする細胞処理液の製造方法。 - 界面活性剤として0.5mlの0.2%Triton X-100/リン酸緩衝液、RNA除去液として1mlの0.1%RNase/リン酸緩衝液、蛍光染色色素として2mlの100μg/ml Propidium lodide、/リン酸緩衝液の比により細胞処理液の製造を行うことを特徴とする請求項1に記載の細胞処理液の製造方法。
- フローサイトメータによる細胞核DNA量測定に供する細胞懸濁液を生成するために、
界面活性剤による裸核化、RNA除去液及び蛍光染色の工程前の細胞懸濁液を添加する細胞処理液の製造方法の製造方法であって、
界面活性剤、RNA除去液及び蛍光染色色素を凍結乾燥することにより製造することを特徴とする細胞処理液の製造方法。 - 細胞懸濁液に、界面活性剤、RNA除去液及び蛍光染色色素をほぼ同時に添加し、所定時間反応させる染色工程と、
前記染色工程により染色された細胞懸濁液をフローサイトメータを用いて細胞核DNA量測定を行う分析工程と、
を含むことを特徴とする細胞核DNA量測定方法。 - 緩衝液に組織を投入して所定回転数で所定時間をかけて組織破砕を行う機械的破砕による細胞単離工程と、
機械的破砕による細胞単離工程において得られた細胞懸濁液を所定メッシュ径のメッシュにより濾過する濾過工程と、
細胞懸濁液に、界面活性剤、RNA除去液及び蛍光染色色素をほぼ同時に添加し、所定時間反応させる染色工程と、
前記染色工程により染色された細胞懸濁液をフローサイトメータを用いて細胞核DNA量測定を行う分析工程と、
を含むことを特徴とする細胞核DNA量測定方法。 - 少なくとも組織、界面活性剤、RNA除去液及び蛍光染色色素を混合する混合工程と、
前記混合工程により得られた液体をノズルにより吸引・吐出を繰り返し行うピペッティング工程と、
前記ピペッティング工程により得られた液体を濾過する濾過工程と、
前記濾過工程により得られた細胞懸濁液をフローサイトメータを用いて細胞核DNA量測定を行う分析工程と、
を含むことを特徴とする細胞核DNA量測定方法。 - 請求項1乃至3のいずれか1項に記載の細胞処理液を含むことを特徴とするフローサイトメータを用いて染色体分析することにより細胞核DNA量測定を行う方法に用いるキット。
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