JP2010150237A - セラミド産生促進剤、並びに該セラミド産生促進剤を用いた医薬品組成物、皮膚外用剤、化粧料組成物、及び化粧料 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】本発明では、センキュウ抽出物を有効成分とするセラミド産生促進剤を提供する。該セラミド産生促進剤は、生体内のセラミド産生経路に直接作用してセラミド産生を促すため、従来の対処療法とは異なり、根本的に皮膚の保湿機構を改善することが可能である。また、その有効成分が天然由来成分であるため、安全性が高く、長期間、連続的な使用が可能である。そのため、皮膚外用剤等に用いる医薬品組成物や化粧料に用いる化粧料組成物に好適に用いることができる。
【選択図】図1
Description
本発明に係るセラミド産生促進剤に有効成分として用いることができるセンキュウ抽出物は、具体的に用いる部位および抽出方法など特に限定されないが、本発明においては、センキュウの根茎を80%以下のエタノールで抽出することにより得られた抽出物を用いることが好ましい。
この場合、セラミド産生促進効果を十分に発揮するためには、組成物中に組成物中にセンキュウ抽出物として0.01質量%以上10質量%(以下「%」で示す)以下含有させることが好ましい。
本発明に係るセラミド産生促進剤は、センキュウ抽出物を有効成分とする。本発明において、センキュウ抽出物とは、センキュウの根茎、茎、葉、花などを適当な溶媒で抽出して得られる抽出物を言い、通常、抽出した溶媒の濃厚溶液として使用する。また、該濃厚溶液を凍結乾燥させたものも、本発明に係るセラミド産生促進剤に用いることが可能である。
本発明に係るセラミド産生促進剤は、その優れたセラミド産生促進効果を利用して、医薬品組成物に好適に用いることができる。該医薬品組成物は、あらゆる剤型の医薬品に適用することができる。例えば、外用液剤、外用ゲル剤、クリーム剤、軟膏剤、スプレー剤、点鼻液剤、リニメント剤、ローション剤、ハップ剤、硬膏剤、噴霧剤、エアゾール剤、などの外用剤に適用することができる。
本発明に係るセラミド産生促進剤は、その優れたセラミド産生促進効果を利用して、化粧料組成物に好適に用いることができる。該化粧料組成物は、あらゆる形態の化粧料に適用することができる。例えば、ローション、乳液、クリーム、美容液などのスキンケア化粧料、ファンデーション、コンシーラー、化粧下地、口紅、頬紅、アイシャドウ、アイライナーなどのメイクアップ化粧料、日焼け止め化粧料などに適用することができる。
実験1では、センキュウ抽出物の調製を行った。
実験2では、センキュウ抽出物により、セラミドの前駆体であるグルコシルセラミドの量がどのように変化するかを検討した。
培地(HuMedia-KG2 Ca 0.03 mM (倉敷紡績株式会社製))を入れた6cmシャーレに、ヒト表皮角化細胞(NHEK細胞(normal human epidermal keratinocyte)from human neonatal foreskin)を播種し、6日間培養後に前記実験1と同様の方法で調整したセンキュウ抽出物(抽出溶媒:30%エタノール水溶液)を、乾燥固形分濃度として1.65%添加し、更に3日間培養後に前記センキュウ抽出物を、乾燥固形分濃度として1.65%再添加し、通常の増殖培地下でオーバーコンフルエント状態になるまで4日間培養した。培養後、PBS(−)で2回洗浄し、スクレーパーを用いて細胞を回収した。
脂質抽出は、Bligh & Dyer法を用いて行った。具体的には、前記で回収した細胞に、まず、メタノール2.5mL、クロロホルム1.25mL加え攪拌し、次に、クロロホルム1.25mL、水1.25mLを更に加え攪拌した。その後、遠心分離を行い、下層Iを取り分けた。
前記で回収した脂質について、公知の薄層クロマトグラフィー法を用いて脂質分離を行った。得られた各脂質のバンドを画像解析し、その強度を定量値とした。この際、定量評価には市販のグルコシルセラミド(Sigma Chemical社製)を用いた。
結果を図1に示す。図1に示す通り、コントロールを100%とした場合に比べ、センキュウ抽出物のグルコシルセラミド量は121.7%と、明らかにグルコシルセラミド量が増加することが分かった。この結果から、センキュウ抽出物は、セラミド産生促進作用を有することが推測できた。
実験3では、センキュウ抽出物を調整する際の抽出方法について検討を行った。
具体的には、30%エタノール水溶液を用いて抽出したセンキュウ抽出物、水を用いて抽出したセンキュウ抽出物、を用いた場合のグルコシルセラミド増加量の違いを確認した。
なお、センキュウ抽出物の調整は前記実験1と、培養、脂質抽出、グルコシルセラミドの定量、に関する各手順は前記実験2と同様であるため、ここでは説明を割愛する。
結果を図2に示す。図2に示す通り、コントロールを100%とした場合に比べ、30%エタノール水溶液を用いて抽出したセンキュウ抽出物のグルコシルセラミド量は123.1%、水を用いて抽出したセンキュウ抽出物のグルコシルセラミド量は145.1%と、明らかにグルコシルセラミド量が増加することが分かった。
実験4では、センキュウ抽出物が、セラミド産生促進作用を有することを確認した。
培地(HuMedia-KG2 Ca 0.03 mM (倉敷紡績株式会社製))を入れた10cmシャーレに、ヒト表皮角化細胞(NHEK細胞(normal human epidermal keratinocyte)from human neonatal foreskin)を播種し、5日間培養後に前記実験1と同様の方法で調整したセンキュウ抽出物(抽出溶媒:30%エタノール水溶液)を、乾燥固形分濃度として1.67%添加し、更に3日間培養後に前記センキュウ抽出物を、乾燥固形分濃度として1.67%再添加し、通常の増殖培地下でオーバーコンフルエント状態になるまで4日間培養した。培養後、PBS(−)で2回洗浄し、スクレーパーを用いて細胞を回収した。
前記で回収した細胞を、溶解バッファー(20 mM HEPES pH 7.4, 10 μg/ml protease inhibitor, 1 mM dithiothreitol, 1 mM EDTA, 1 mM sodium orthovanadate, 15 mM sodium fluoride, and 0.5 mM 4-deoxypyridoxine)に溶解し、C17-S1Pを内部標準として加えて、Bligh & Dyer法を用いて脂質を抽出した。
前記で抽出した脂質を、0.1%のTFAを含む20%アセトニトリルに溶解し、LC−MS/MSを用いて、セラミドをアシル鎖長ごとに定量した。
結果を以下の表1に示す。なお、下記表中のセラミド産生促進率は、セラミドIIの産生量を基に下記式により算出された値である。
実験5では、センキュウ抽出物を含有する化粧料の調整とその効果を検討した。
以下の製法により、化粧水1を調製した。
(製法)
A.下記成分(1)〜(7)を混合溶解した。
B.下記成分(8)〜(11)を混合溶解した。
C.AにBを加え混合し、実施例1に係る化粧水を得た。
調製した化粧水1は、べたつきもなく、みずみずしい肌感触を有し、保湿効果に優れ、変臭、変色、沈殿などもなく安定性も良好なものであった。
下記の製法により、乳液を調製した。
(製法)
A.下記成分(1)〜(10)を加熱溶解し、70℃に保った。
B.下記成分(11)〜(17)を加熱溶解し、70℃に保った。
C.AにBを加え乳化し、更に下記成分(18)を加え混合した。
D.Cを冷却し、下記成分(19)を加え混合し、実施例2に係る乳液を得た。
調製した乳液は、べたつきもなく、なめらかな肌感触を有し、皮膚水分保持効果に優れ、変臭、変色、分離などもなく安定性も良好なものであった。
以下の製法によりクリームを調製した。
(製法)
A.下記成分(1)〜(13)を加熱溶解し、70℃に保った。
B.下記成分(14)〜(19)を加熱溶解し、70℃に保った。
C.AにBを加え乳化し、更に下記成分(20)を加え混合した。
D.Cを冷却し、下記成分(21)を加え混合し、実施例3に係るクリームを得た。
調製したクリームは、べたつきもなく、なめらかでコクのある肌感触を有し、皮膚水分保持効果に優れ、変臭、変色などもなく安定性も良好なものであった。
下記の製法により、美容液を調製した。
(製法)
A.下記成分(1)〜(8)を混合溶解した。
B.下記成分(9)〜(18)を混合溶解した。
C.BにAを加え混合し、実施例4に係る美容液を得た。
調製した美容液は、べたつきもなく、マイルドでなめらかな肌感触を有し、保湿効果に優れ、変臭、変色、沈殿などもなく安定性も良好なものであった。
以下の製法により、パックを調製した。
(製法)
A.下記成分(1)〜(6)を加熱溶解した。
B.下記成分(7)〜(11)を混合溶解した。
C.Aを冷却後、Bを加え混合し、実施例5に係るパックを得た。
調製したパックは、肌に塗布すると適度な緊張感があり、パックを剥がしたあとはべたつきもなく、みずみずしいものであり、保湿効果に優れ、変臭、変色、分離などのなく安定性も良好なものであった。
以下の製法により、リキッドファンデーションを調製した。
(製法)
A.下記成分(1)〜(7)を加熱溶解した。
B.Aに下記成分(8)〜(11)を加え、均一に混合し、70℃に保った。
C.下記成分(12)〜(16)を加熱溶解し、70℃に保った。
D.CにBを加えて乳化した。
E.Dを冷却後、下記成分(17)を加え混合し、実施例6に係るリキッドファンデーション(O/W型)を得た。
調製したリキッドファンデーションは、伸びひろがりが良く、べたつきもなく、仕上がりも美しく、保湿効果に優れ、変臭、分離などもなく安定性も良好なものであった。
Claims (8)
- センキュウ抽出物を有効成分とするセラミド産生促進剤。
- 前記センキュウ抽出物は、センキュウの根茎をエタノールの割合が80質量%以下のエタノール水溶液で抽出することにより得られた抽出物である請求項1記載のセラミド産生促進剤。
- 請求項1又は2に記載のセラミド産生促進剤と、薬理学的に許容され得る添加剤と、を含有する医薬品組成物。
- 前記セラミド産生促進剤を、組成物中にセンキュウ抽出物として0.01質量%以上10質量%以下含有する請求項3記載の医薬品組成物。
- 請求項3又は4に記載の医薬品組成物を含有する皮膚外用剤。
- 請求項1又は2に記載のセラミド産生促進剤と、薬理学的に許容され得る添加剤と、を含有する化粧料組成物。
- 前記セラミド産生促進剤を、組成物中にセンキュウ抽出物として0.01質量%以上10質量%以下含有する請求項6記載の化粧料組成物。
- 請求項6又は7に記載の化粧料組成物を含有する化粧料。
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