JP2009515167A - がんの予測及び予後の検査方法、並びにがん治療のモニタリング - Google Patents
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Abstract
Description
(a)対照群に由来する試料中の総可溶性VEGF−R2タンパク質濃度を免疫学的に検出及び定量し、
(b)経時的に患者から採取した試料中の総可溶性VEGF−R2タンパク質濃度を免疫学的に検出及び定量し、
(c)従来の治療及び/またはマルチキナーゼ阻害剤(例えば、ソラフェニブ)による治療によって患者を治療するか否かを、患者の試料中の可溶性VEGF−R2タンパク質濃度に基づいて決定する、
各工程を有してなる。
便宜上、本明細書、実施例及び添付の特許請求の範囲で用いられる特定の用語及び語句の意味を以下に提供する。
可溶性VEGF−R2 ELISA法による分析のための適切な試料として、ヘパリン、クエン酸塩、またはEDTAで処理されたヒト血漿、およびヒト血清が挙げられる。可能性のある干渉因子の理由から、ヒトの血清と血漿の調製と測定には特別の配慮をしなければならない。いずれの凝集剤材料も、希釈前にマイクロ遠心分離して試料から除去しなければならない。検査されるべき血清または血漿試料の最初の濃度は、約12〜13%(試料希釈剤中の試料の1:8希釈)であるべきである。例えば、40μlの試料を、280μlの試料希釈剤で希釈し、100μlをマイクロプレート・ウェルに加えて差し支えない。
以下のELISAの手順をサンドイッチELISA法(Oncogene Science社(米国マサチューセッツ州ケンブリッジ)製)に使用し、ヒト血漿または血清中のヒト可溶性VEGF−R2を測定する。
0、150、1000、3000、5000、及び8000pg/mlの6種類の濃度の可溶性VEGF−R2標準(組換えヒト可溶性VEGF−R2)を用いて標準曲線を作成することにより、定量分析を行った。
ソラフェニブを用いて治療する前に、腎細胞癌が確認された患者から凍結した血漿試料を得た。
予備の試料を用いて、製造業者の指示に従い、可溶性VEGF−R2 ELISA(R&D Systems社 (米国ミネソタ州ミネアポリス) 製)を利用して可溶性VEGF−R2を測定した。繰り返し測定の平均値を、患者ごとに決定した。ソラフェニブで治療した患者群とプラセボで治療した患者群の両方について、3つの時点、すなわち、基準(治療前)、第1周期21日目、及び第3周期1日目における可溶性VEGF−R2の平均濃度を、表1に報告する。同一のデータを図1にも示す。ソラフェニブで治療された患者群の可溶性VEGF−R2濃度は、両時点において基準から非常に減少している(対応のある t-検定を用いてp<<0.01)が、プラセボで治療された患者群ではそれが起こっていない(p>0.05)ことを示している。
Claims (19)
- 患者の可溶性VEGF−R2経路に関連する疾患の状態をモニタリングし、及び/または、前記疾患を有する患者が治療にどのように応答しているかをモニタリングする方法であって、
経時的に採取された患者試料におけるVEGF−R2タンパク質濃度の逐次変化を免疫学的に検出及び定量する工程を含み、
経時的なVEGF−R2タンパク質濃度の上昇が疾患の進行もしくは前記治療に対する否定応答の指標となり、経時的な可溶性VEGF−R2タンパク質濃度の低下が疾患の寛解もしくは前記治療に対する肯定応答の指標となることを特徴とする方法。 - 前記治療が、マルチキナーゼ阻害剤、チロシンキナーゼ阻害剤、モノクローナル抗体、及びビスアリール尿素から選択されることを特徴とする請求項1記載の方法。
- 前記治療がVEGF経路を標的とする治療であることを特徴とする請求項1記載の方法。
- 前記VEGF経路を標的とする治療が、チロシンキナーゼ阻害剤であるイマチニブメシレートを用いた治療、またはビスアリール尿素であるソラフェニブを用いた治療であることを特徴とする請求項3記載の方法。
- 前記患者試料が、血液、血清、血漿、尿、唾液、精液、胸部滲出液、脳脊髄液、涙液、痰、粘液、リンパ液、細胞質ゾル、腹水、胸水、羊水、膀胱洗浄液、及び気管支肺胞洗浄液からなる群より選択されることを特徴とする請求項1記載の方法。
- 前記患者試料が血清または血漿であることを特徴とする請求項5記載の方法。
- 前記免疫学的検出及び定量が、サンドイッチELISA法または同等の測定法の形式の免疫測定法によることを特徴とする請求項1記載の方法。
- 前記サンドイッチELISA法または同等の測定法が、可溶性VEGF−R2タンパク質と選択的に結合する、1つ以上の抗体の使用を含むことを特徴とする請求項7記載の方法。
- 疾患を有する人間の患者のための治療選択方法であって、
(a)対照群のそれぞれから採取された対照試料中の可溶性VEGF−R2タンパク質の平均濃度を免疫学的に検出及び定量し、
(b)経時的に患者から採取した同等の患者試料中の可溶性VEGF−R2タンパク質濃度における逐次変化を免疫学的に検出及び定量し、
(c)患者試料中のVEGFタンパク質濃度を対照試料中の可溶性VEGF−R2タンパク質の平均濃度と比較する、
各工程を含み、
患者試料中の可溶性VEGF−R2タンパク質濃度と対照試料中の可溶性VEGF−R2タンパク質の平均濃度との差異及び患者試料中の可溶性VEGF−R2タンパク質濃度の逐次変化に基づいて、従来の治療及び/またはVEGF経路を標的とする治療を患者に用いるか否かが決定されることを特徴とする方法。 - 前記患者試料が治療に応答しないがん患者のものであることを特徴とする請求項9記載の方法。
- 患者のVEGF経路に関連する疾患を検出するための検査方法であって、
(a)対照群のそれぞれから採取した対照試料中の可溶性VEGF−R2タンパク質の平均濃度を免疫学的に検出及び定量し、
(b)経時的に患者から採取した患者試料中の可溶性VEGF−R2タンパク質の逐次変化を免疫学的に検出及び定量し、
(c)患者試料中の可溶性VEGF−R2タンパク質濃度を対照試料中の可溶性VEGF−R2タンパク質の平均濃度と比較する、
各工程を含み、
対照試料中の可溶性VEGF−R2タンパク質の平均濃度よりも患者試料中の可溶性VEGF−R2タンパク質濃度が高い場合、VEGF経路の活性化、及び患者における疾患の存在の指標となることを特徴とする方法。 - 前記免疫学的検出及び定量の工程(a)及び(b)が、サンドイッチELISA法または同等の測定法の形式の免疫測定法によることを特徴とする請求項11記載の方法。
- 前記疾患の予後の検査法であって、前記患者試料中の前記可溶性VEGF−R2タンパク質濃度が前記患者の予後の良好または不良の指標となることを特徴とする請求項1、9、または11記載の方法。
- 前記予後が、反応速度(RR)、完全寛解(CR)、部分寛解(PR)、安定疾患(SD)、増殖抑制期間(TTP)、無増悪生存率(PFS)、全生存(OS)、及び、完全寛解(CR)、部分寛解(PR)、及び安定疾患(SD)からなる群より選択される臨床転帰であることを特徴とする請求項13記載の方法。
- 前記疾患が、前癌/腫瘍性疾患であることを特徴とする請求項1、9、または11記載の方法。
- 活性化されたPDGF経路に関連する前記前癌/腫瘍性疾患が、転移性髄芽腫、消化管間質腫瘍、隆起性皮膚線維肉腫、結腸直腸癌、大腸癌、肺癌、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、慢性骨髄増殖性疾患、急性骨髄性白血病、甲状腺癌、すい臓癌、膀胱癌、腎臓癌、黒色腫、乳癌、前立腺癌、卵巣癌、子宮頸癌、頭頚部癌、脳腫瘍、肝細胞癌、血液悪性腫瘍、及び前述の癌を引き起こす前癌からなる群より選択されることを特徴とする請求項15記載の方法。
- 患者試料中の1つ以上の他のタンパク質の濃度を検出する、もしくは検出及び定量するための免疫測定法の利用をさらに含むことを特徴とする請求項1、9、または11記載の方法。
- 前記他のタンパク質が、阻害剤、癌タンパク質、成長因子受容体、血管新生因子、転移タンパク質、腫瘍マーカー、及び腫瘍抑制物質からなる群より選択されることを特徴とする請求項17記載の方法。
- 前記阻害剤が、メタロプロテアーゼ−1(TIMP−1)の組織阻害剤であり、前記癌タンパクがHER−2/neu及びras p21からなる群より選択され、前記成長因子受容体が上皮細胞増殖因子受容体(EGFR)及び血小板由来増殖因子受容体α(PDGFR−α)からなる群より選択され、前記血管新生因子が血管内皮増殖因子(VEGF)であり、前記転移タンパク質がウロキナーゼ型プラスミノゲン活性化因子(uPA)であり、前記腫瘍マーカーが癌胎児性抗原(CEA)であり、前記腫瘍抑制タンパク質がp53であることを特徴とする請求項18記載の方法。
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