JP2009508914A - バニラプラニフォリア抽出物及びその抽出工程、並びにそれを含有する化粧用組成物、若しくは皮膚科用組成物 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】バニラプラニフォリア抽出物は1種類の脂溶性画分からなる。この画分は、気相クロマトグラフィーによって分離した全成分の合計に対する相対パーセントで、不飽和モノカルボニル化合物0.5〜10%、不飽和ジカルボニル化合物20〜80%、及び不飽和ピラノン1〜40%を含むことが好ましい。
Description
(1)アルコール抽出法バニラプラニフォリアの種子鞘0.5kgをナイフミル(RETSCH社製)で粉砕し、還流装置を備える5Lのガラス製反応容器に入れる。上記反応容器に96.3%エタノール2.5Lを加え、1時間加熱する。その後、一晩冷浸する。翌朝、内容物を濾過し、反応容器を空にする。抽出物を含む溶媒は保管しておく。上記粉砕したバニラ種子鞘を再び96.3%エタノール2.5Lと共にガラス製反応容器に入れ、約80℃で4時間加熱還流する。内容物を濾過し、反応容器を空にする。得られた2つの濾液を混ぜ合わせる。その後、真空下で、溶媒を回転蒸発器によって蒸発させる。このようにして、0.155kgのバニラプラニフォリアのオレオレジンが得られる。収率:31%
(1)実施例1の要領で得られたバニラプラニフォリア抽出物100mgを、1N塩酸メタノール溶液2ml中で可溶化する。上記溶液を撹拌後、80℃で10分間湯煎する。ヘプタン2mlで液液抽出した後、クロマトグラフィーに導入することにより、エステル化した試料を得る。クロマトグラフィーの条件は以下の通りである。気相クロマトグラフィー(Agilent 6890)250℃のインジェクター(スプリット又はスプリットレス)調製した試料0.5μLをスプリット比1:100で導入長さ30m、内径0.25mm、膜厚0.25μmの、100%ポリジメチルシロキサンをコーティングしたキャピラリーカラム(Agilent DB−1)で分離キャリアガス:ヘリウム1ml/分カラムオーブンの初期温度:700℃温度勾配70℃〜250℃(2℃/分)、等温線250℃60分間合計時間:150分検出:炎イオン化検出器(補助ガス:窒素)
(1)ケラチノサイト培養物の調製本手順は、生物活性に関するすべての検査において共通である。新生児包皮由来のケラチノサイト(Clonetics社、San Diego、USA)を6ウェルプレートに播種し、ケラチノサイト増殖用培地(Clonetics社製KBM)、特に、組換えヒトEGF、インスリン、ヒドロコルチゾン、ウシ下垂体抽出物、ゲンタマイシン、アンフォテリシンBを添加した改変培地で培養した。37℃の空気炉で24時間培養した後、凝集した細胞をPBS(Gibco社)で洗浄し、500μg/ml、10μg/ml、1μg/ml、0.1μg/mlの各濃度で検査対象を含む専用の基本培地(Clonetics社製KBM)で24時間インキュベートした。抽出物の細胞毒性を検査後、活性を評価した。すべての検査において、すべての濃度について必ずしも検査していない。
mRNAは、試薬Trizol(Invitrogen社)を製造者の推奨に従って用い、分離した。逆転写は、遺伝子キットAmp RNA PCR(Applied Biosystems社)を製造者の推奨に従って用い、行った。
細胞培養に際しての活性化された増殖因子TGF−β1の濃度について、イムノアッセイキットQuantikine(登録商標)(No.DB100、R&D Systems)を用い、ELISA法で定量的評価を行った。ケラチノサイトの培養条件及び検査対象の試料は、実施例3と同一である。結果を以下の表4に示す。
検査原理検査する物質を、活性化されたMMPと共にインキュベートする。各MMPに特異の蛍光性酵素基質を添加することにより、酵素活性を制御する。
エマルションAセテアリルアルコール+セテアリルグルコシド:4.00%ベヘネス−25:2.00%バニラプラニフォリアの脂溶性画分*:1.00%カンゾウ抽出物:0.10%皮膚軟化剤:35.00%酢酸トコフェロール:0.50%ジメチコン:2.00%EDTA:0.05%グリセリン:5.00%ゲル化剤:2.00%pH調整剤:十分量保存料:十分量水:合計が100.00%となる十分量*実施例1の方法で調製
Claims (14)
- 1種類の脂溶性画分で構成されているバニラプラニフォリア抽出物。
- 前記脂溶性画分が、気相クロマトグラフィーで分離した全成分の合計に対する相対パーセントで表した場合に、不飽和モノカルボニル化合物0.5〜10%、不飽和ジカルボニル化合物20〜80%、不飽和ピラノン1〜40%を含む請求項1に記載の抽出物。
- 前記脂溶性画分が、気相クロマトグラフィーで分離した全成分の合計に対する相対パーセントで表した場合に、不飽和モノカルボニル化合物1〜5%、不飽和ジカルボニル化合物35〜65%、不飽和ピラノン3〜25%を含む請求項1又は2に記載の抽出物。
- ペンタコセン−16−オン−2、ヘプタコセン−18−オン−2、及びノナコセン−20−オン−2から選択される不飽和モノカルボニル化合物を含む請求項1乃至3のいずれか記載の抽出物。
- ペンタコセン−16−ジオン−2,4、ヘプタコセン−18−ジオン−2,4、ノナコセン−20−ジオン−2,4、及びヘントリアコンテン−22−ジオン−2,4から選択される不飽和ジカルボニル化合物を含む請求項1乃至4のいずれか記載の抽出物。
- ノナデセニル−2 ジヒドロ−2,3 メチル−6 ピラノン−4、ヘンイコセニル−2 ジヒドロ−2,3 メチル−6 ピラノン−4、及びトリコセニル−2 ジヒドロ−2,3 メチル−6 ピラノン−4から選択される不飽和ピラノンを含む請求項1乃至5のいずれか記載の抽出物。
- 前記画分が、気相クロマトグラフィーで分離した全成分の合計に対する相対パーセントで表した場合に、飽和又は不飽和脂肪酸5〜50%を更に含む請求項1乃至6のいずれか記載の抽出物。
- コレステロール、カンペステロール、スチグマステロール、及びβ−シトステロールから選択されるステロール化合物を含む請求項1乃至7のいずれか記載の抽出物。
- 少なくとも1種類の溶媒を用いてバニラプラニフォリア粉砕物からの抽出を行い、その脂溶性画分を回収する工程により、場合によっては更に前記脂溶性画分を分子蒸留することにより油性蒸留液を得るという手順で得られるバニラプラニフォリア抽出物。
- 老化、老化に関連する生理学的機序、又は該生理学的機序に類似した症状、による皮膚の衰えの予防用及び/又は治療用の化粧用組成物又は皮膚科用組成物における多官能性活性物質としての、請求項1乃至9のいずれか記載のバニラプラニフォリア抽出物の使用。
- 化粧用組成物における、皮膚の衰えの改善剤及び/又は美白剤及び/又は皮膚の微小循環の改善材及び/又は表皮再生剤及び/又はエモリエント剤としての、請求項1乃至9のいずれか記載のバニラプラニフォリア抽出物の使用。
- 請求項1乃至9のいずれか記載のバニラプラニフォリア抽出物の、皮膚脱色用組成物の調製における使用。
- 請求項1乃至9のいずれか記載のバニラプラニフォリア抽出物と、化粧料又は医薬品に使用できる賦形剤と、を含む化粧用又は皮膚科用組成物。
- 局所用である請求項13に記載の化粧用又は皮膚科用組成物。
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