FR2837384A1

FR2837384A1 - Utilisation d'un extrait de vanille pour la protection de la peau et son incorporation dans des preparations cosmetiques et/ou dermatologiques

Info

Publication number: FR2837384A1
Application number: FR0203649A
Authority: FR
Inventors: Sophie Leclere; Jean Francois Molina
Original assignee: Centre dEtudes de Physiologie dHygiene et de Cosmetologie CEP SAS
Current assignee: Centre dEtudes de Physiologie dHygiene et de Cosmetologie CEP SAS
Priority date: 2002-03-22
Filing date: 2002-03-22
Publication date: 2003-09-26
Anticipated expiration: 2022-03-22
Also published as: FR2837384B1

Abstract

L'invention se rapporte du domaine de la chimie organique et plus particulièrement à celui de la chimie thérapeutique. Elle concerne plus particulièrement des compositions dermatologiques et/ ou cosmétiques destinées à la protection de la peau contre les radiations solaires caractérisées en ce qu'elles renferment un extrait de Vanilla tahitensis ou un des principes actifs de l'extrait de Vanilla tahitensis en mélange ou en association avec un véhicule ou un excipient inerte, pharmacologiquement compatible. Elle concerne également des compositions dermatologiques et/ ou cosmétiques à base d'extrait de vanillier contre l'activation des polynucléaires neutrophiles par un agent mitogène. Utilisation des constituants de l'extrait de Vanilla et notamment de Vanilla tahitensis sous forme de préparations topiques pour la protection de la peau contre les radiations solaires ou contre la génération de radicaux libres hydroxyle ou superoxyde.

Description

et crayons, patchs, sprays.

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UTILISATION D'UN EXTRAIT DE VANILLE

POUR LA PROTECTION DE LA PEAU ET SON INCORPORATION DANS DES

PREPARATIONS COSMETIQUES ET/OU DERMATOLOGIQUES

La présente invention se rapporte au domaine de la chimie organique et plus particulièrement

au domaine de la chimie thérapeutique.

L'invention se rapporte plus précisément à la préparation et à l'utilisation d'un extrait végétal,

notamment pour la protection de la peau contre les radiations ultraviolettes.

Elle a spécifiquement pour objet l'utilisation d'un extrait de vanille en vue de protéger la peau

contre les radiations ultraviolettes solaires, sous forme de préparations topiques.

Le soleil est une source de plaisir recherchée pour ses bienfaits à tous les niveaux de 1 5 l'organisme: - Il est nocessaire à la peau pour lui permettre d'activer certains de ses mécanismes de défense (activation de la tyrosinase, enzyme responsable de la synthèse de mélanine, pigment protecteur naturel de la peau), - Il participe à la synthèse intracutanée des vitamines D indispensables à une bonne ossification, - Il peut dans certains cas aider à combattre des états dépressifs saisonniers, - I1 augmente l'épaisseur de la couche cornée de la peau en améliorant et en renforçant la barrière cutance qui protège des facteurs environnementaux (pollution, produits

chimiques, ultraviolets...).

Toutefois, le soleil s'avère étre aussi un ennemi redoutable pour la peau en cas d'exposition intense et/ou prolongée, en raison notamment des effets moléculaires des radiations

ultraviolettes qu'il émet.

I1 est connu de l'homme de l' art que le soleil émet des rayonnements d'énergi e très variables comme les rayons infrarouges, la lumière visible ou les ultraviolets. Parmi les ultraviolets, il convient de distinguer les WA et les WB qui pénètrent la peau, des WC qui sont arrêtés

par la couche d'ozone.

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L' absorption des ultraviolets par la peau, en l'occurrence les WA et WB ainsi que leurs effets cumulés et synergiques (réactions biochimiques en cascade), s'accompagnent de nombreuses répercussions tissulaires et modifications morphologiques: - Accélération du vieillissement cutanée induit (atrophie du derme, élastose solaire, apparition des rides), Lésions de 1'ADN cellulaire (mutations, codifications protéiques erronces, troubles de la réparation de 1'ADN...), - Apoptose cellulaire (apparition au niveau de l'épiderme de cellules dites de "coup de soleil" c'est-à-dire de kératinocytes en état de mort cellulaire), - Péroxydation des lipides des membranes cellulaires de l'épiderme et du derme (kératinocytes, fibroblastes, cellules de Langerhans) - Fragilisation de la micro vascularisation cutanée, - Trouble de la pigmentation (taches brunes, jannissement de la peau...),

- Survenue de mélanomes malins.

I1 existe divers types de radicaux libres, par exemple, l'anion superoxyde 02-, le radical hydroxyle OH., l'oxygène singulet, le peroxyde d'hydrogène H2O2, provenant soit de sources endogènes, répondant ou non à un stress (respiration mitochondriale, polynucléaires neutrophiles agressés...), soit de sources exogènes, apportés généralement par l'environnement. Tout comme la peau, les plantes sont également soumises aux rayonnements ultraviolets et

doivent se protoger. Pour cela, elles synthétisent des pigrnents naturels: les polyphénols.

Les polyphénols constituent une vaste famille moléculaire comprenant notamment les flavonoïdes, les tanins (acides phénoliques condensés), les acides phénoliques, les

anthocyanes dont les activités anti-radicalaires sont bien connues de l'homme de l'art.

Parmi les plantes riches en polyphénols les plus utilisées pour protéger la peau contre les radicaux libres, on connâît notamment les feuilles de thé vert (Camélia sinensis), les pépins de raisin (Vitis vinifera), les aiguilles de pin maritime (Pinus maritimus), les feuilles de cassissier

et les baies de cassis (Ribes nigrum).

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De manière surprenante, la Demanderesse poursuivant des recherches approfondies dans le domaine de l'extraction végétale et dans la valorisation de plantes généralement utilisées pour leur histoire et leur symbolisme, a montré qu'un extrait d'au moins une espèce de vanillier, permettait de protéger efficacement la peau contre les radicaux libres et renforçait par conséquent l'action des filtres solaires, physiques ou chimiques, généralement utilisés. Le Vanillier est une plante qui appartient à la famille des orchidacées. C'est une liane vivace grimpante pouvant atteindre de 15 à 20 mètres de hauteur. On distingue différentes espèces de vanillier, notamment la Vanilla fragrans ou planifolia originaire de l'Ile de la Réunlon, la Vanilla pompona originaire des Antilles et la Vanilla tahitensis, originaire de Tahiti

(Polynésie française) qui proviendrait d'un croisement entre les espèces fragrans et pompona.

Parmi les 119 espèces de Vanille recensées à ce jour, seule une quinzaine est aromatique. Une des particularités du genre Vanilla est qu'elle est la seule orchidée à fructifier. Son fruit est une gousse d'un vert brillant quelques mois après la fécondation et prend une teinte vert pâle 8

à 9 mois plus tard. Il est sans odeur et renferme 3 loges et un grand nombre de graines noires.

Une fois fécondée, l'inflorescence porte un certain nombre de fruits: c'est le "balai". Le fruit est constitué d'une capsule, la gousse, renfermant 3 loges et un grand nombre de graines noirâtres. Les fruits verts ont une longueur variant de 10 à 20 cm et une largeur s'étalant de 1 à

1,5 cm. La gousse est fixée sur le "balai" par un "crochet".

Une des particularités de Vanilla tabitensis par rapport à ses congénères se situe au niveau de

son mûrissement.

Alors que les autres espèces de vanille doivent être absolument récoltées avant maturité, au risque sinon de voir leurs gousses éclatées, Vanilla tahitensis est récoltée sans dommage

aucun, à maturité, sur pied.

La conséquence est immédiate: les gousses de vanille pompona et planifolia doivent subir un échaudage, c'est-à-dire un trempage dans de l'eau à 60 C pendant 3 minutes, pour être

amenées à maturité.

Une fois récoltées, les gousses sont mises à l'obscurité pendant 5 j ours et deviennent

uniformément brunes.

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Ensuite, les gousses sont mises à sécher 2 heures par jour au soleil polynésien puis sont enfermées le reste de la journée dans un linge traditionnel nommé "faraoti". Deux mois au moins sont nécessaires pour obtenir les gousses noires à l'aspect flétri que l'on connâît. C'est durant cette période de séchage que la vanille acquiert son arôme reconnaissable entre tous, sans doute à cause de phénomènes enzymatiques. La vanille de Tahiti a un arôme particulier lié à sa phytochimie différant légèrement de celle de Vanilla planifolia. L'héliotropine, molécule très odorante et capiteuse, ne se retrouve en effet que dans Vanilla tahitensis et luis confère un parfum très fruité. On a l'habitude de dire d'un point de vue gastronomique que le goût délicat, suave et anisé avec une pointe de réglisse

de la vanille de Tahiti constitue le "summum vanilléen".

Selon la bibliographie, la Vanille de Tahiti (Vanilla tahitensis) renferme principalement: - des polyphénols et dérivés polyphénoliques: l'héliotropine, la vanilline, l'alcool anisique, l'acide anisique, l'acide parahydroxybeuzoïque, - des sucres, - des matières grasses, - des minéraux Sur le plan aromatique, Vanilla tahitensis présente plusieurs particularités phytochimiques qui la différencient des vanilles d'autres origines et dont résulte son arôme si particulier.: - L'héliotropine, molécule odorante également appelée piperonal, très usitée en

parfumerie, n'est présente que dans l'espèce tahitensis.

- La vanilline, présente en forte proportion dans Vanilla planifolia, est en quantité

beaucoup plus faible dans Vanilla tahitensis.

- L'alcool et l'acide anisique, retrouvés en quantité importante dans la vanille de Tahiti,

ne se retrouvent dans aucune autre vanille étudiée à ce jour.

- L'acide para-hydroxybenzoique agent conservateur, se retrouve dans des proportions relativement importantes en moyenne 20 fois plus que dans les autres origines, alors

que l'acide vanillique se situe à des valeurs 4 fois plus faibles.

s 2837384 On connaissant déjà l'utilisation du Vanillier du Brésil (Vanilla planiformemia) dans le

domaine cosmétique en tant que protecteur cellulaire.

En outre, un photo-protecteur spécifique, le sunactyl, contient entre autres plantes, du

Vanillier du Brésil à côté d'Ayapana, de Bouleau et de Pois.

En outre, les extraits de vanille, quelque en soit l'espèce, sont utilisés en cosmétologie et/ou dermatologie pour parfumer ou participer à l'aromatisation des préparations, en raison de leurs caractéristiques aromatiques (vanille, vanilline, doux, onctueux, suave, fruité, fleuri, caramélé, épicé, boisé), par exemple de préparations cosmétiques ou pour étre incorporée, par exemple,

dans des produits d'hygiène (shampooings, gels douches).

Le parfum vanille ou des extraits de vanille sont également très utilisés dans des produits

solaires sans qu'aucune revendication en terme d'efficacité ne soit rapportée à la vanille.

I1 se trouve maintenant que la Demanderesse a mis l'accent sur la présence dans les gousses de Vanilla tahitensis, de polyphénols et de dérivés proches (vanilline, acide vanillique, anisaldehyde, alcool anisique, acide parahydroxybenzoïque...) et a montré pour la première fois que les parties de vanillier et notamment la gousse de vanille extraite en milieu liquide selon des méthodes connues de l'homme de l'art, présentait une efficacité cosmétique,

notamment en permettant de protéger la peau et les phanères couke les radicaux libres.

L'espèce Vanilla tahitensis se distingue des espèces planifolia et pompona par la présence de polyphénols que l'on ne retrouve pas chez ses congénères, et aussi par sa plus faible teneur en vanilline et en acide vanillique. De ce fait, les extraits de Vanilla tahitensis présentent des

caractéristiques et des propriétés sensiblement différentes de celles des autres espèces.

L'invention a donc pour objet de nouvelles compositions dermatologiques et/ou cosmétiques destinces à la protection de la peau contre les radiations solaires, caractérisées en ce qu'elles renferment un extrait de Vanilla tahitensis ou un des principes actifs de l'extrait de Vanilla tahitensis en mélange ou en association avec un véhicule ou un excipient inerte

pharmacologiquement compatible.

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Elle a encore pour objet l'utilisation des constituants de l'extrait de Vanilla tahitensis et notamment des polyphénols et dérivés proches, sous forme de préparations topiques pour la

protection de la peau contre les radiations solaires.

Elle a également pour objet de nouvelles compositions dermatologiques ou/ou cosmétiques contenant un extrait de Vanilla comme agent antiradicalaire vis-à-vis des polynucléaires neutrophiles activés et notamment agressés par un agent mitogène. Les extraits de Vanilla intervi ennent p our protéger la p eau contre la lib ération de radicaux sup eroxyde en particulier

dans des formulations anti-age ou bien pour prévenir l'apparition des cellules "coup de soleil".

Par milieu liquide, on entend au sens de l'invention, l'extraction de gousses de vanille ou tout autre partie du Vanillier au moyen d'un solvant et de préférence un solvant liquide. Le choix du solvant et les conditions d'extraction, en particulier la température et la durce d'extraction

peuvent varier largement en fonction de la nature de la partie de la plante.

Comme solvant, on choisira préférentiellement selon l'invention, l'eau, le propylène glycol, un mélange eau/propylène glycol selon un ratio compris entre 20/80 et 80/20 respectivement en eau et propylène glycol; un diester dicaprate/dicaprylate de propylène glycol, le 1,3-butylène glycol, le glycérol ou l'éthanol, ou des huiles végétales, en association ou non avec de l'eau

selon un ratio compris entre 10/90 et 90/10 respectivement en eau et en autres solvants.

L'invention concerne également un procédé de production d'extraits de Vanilla et notamment d'extraits de Vanilla tahitensis qui consiste à broyer ou à réduire en morceaux des parties de Vanilla en milieu liquide, à procéder à un épuisement et/ou à une macération dans un solvant liquide, à filtrer le liquide d'extraction pour séparer les parties végétales, que l'on épuise à nouveau une ou plusieurs fois, à réunir les phases organiques puis à aj outer un agent conservateur au milieu, puis à incorporer cet extractum à un véhicule ou à un milieu solide approprié pour la réalisation d'une forme topique choisie parmi les lotions, les crèmes, les laits, les pommades, les gels, les émulsions eau dans l'huile ou huile dans l'eau, les poudres,

les préparations en aérosols.

La température d'extraction sera comprise entre 10 et 100 C; prétérentiellement de SO à C selon l'invention et cette extraction pourra être précédée ou suivie par une étape de

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macération à une température comprise entre 4 et 40 C et, de préférence à température

ambiante, selon l'invention.

Le temps d'extraction sera compris enke 30 minutes et 24 heures, et de préférence enke 2 et 4 heures. D'anke part, la matière première pourra être épuisée c'est-à-dire ré-extraite plusieurs fois selon les différentes conditions de températures et de temps décrits ci-dessus jusqu'à

récupération complète des molécules actives.

La proportion plante/solvant sera variable en fonction des différents paramèkes indiqués ci dessus. On pourra metke en _uvre de 1 à 20 % de plante qsp 100 % avec le solvant, et de

prétérence de 5 à 15 % selon l'invention.

L'agent conservateur peut eke tout agent bactéricide ou bactériostatique connu, adéquat, bien toléré tel que des parabens (méthyl paraben, butyl paraben, propyl paraben), de l'acide sorbique, des sels d'ammonium quaternaire tels que le chlorure de beuzalkonium ou le

bromure de cétyl pyridinium, des amidines comme l'hexamidine ou des biguanides.

L'excipient ou le véhicule utile pour la préparation des compositions cosmétiques et/ou dermatologiques comprend un agent dispersant et/ou un agent liant, et/ou un agent émulsionnant, et/ou un agent qui améliore le toucher et/ou un agent huileux, et/ou un agent colorant végétal, animal ou synthétique, et/ou un agent odoriférant, et/ou un agent

épaississant, et/ou un agent gélifiant, et/ou un agent tampon.

Les concentrations en extraits de vanille peuvent s'échelonner entre 1 et 10 % en poids et de préférence de 2 à 4 % en poids. Lorsqu'on utilise une fraction plus concentrée en principes actifs la teneur en ceux-ci dans les compositions sera fonction de la concentration en

polyphénols et dérivés proches.

Les exemples et les préparations suivants illuskent l'invention sans toutefois la limiter. Dans les exemples et les préparations, les proportions indiquées sont des pourcentages en volume/volume.

EXEMPLE 1

-

Les gousses de vanille sont coupées grossièrement.

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Une première extraction est réalisée dans les conditions suivantes:

On met en _uvre, 10 % de plante qsp 100 % avec un mélange propylène glycol/eau 70/30.

La plante est extraite une première fois 4 heures à 90 C. Le milieu d'extraction est filtré selon les techniques connues et la plante est récupérce pour être extraite à nouveau dans les mêmes conditions.

Les deux phases sont rassemblées pour 8tre analysées.

EXEMPLE 2

Les gousses de vanille sont coupées grossièrement.

1 0 Une macération est effectuce dans un premier temps dans les conditions suivantes: On met en _uvre 10 % de plante qsp 100 % avec du diester de dicaprate/dicaprylate de

propylène glycol en présence de BHT.

On effectue une macération de 18 heures puis, une extraction de 2 heures à 90 C.

Le milieu d'extraction est ensuite filtré selon les techniques connues.

Les extraits de Vanilla obtenus selon le procédé de l'exemple 1 ou de l'exemple 2 sont caractérisés par analyse en chromatographie sur couche mince en utilisant comme éluant un

mélange hexane-acétate d'éthyle-acide acétique 65/35/05.

L'extrait de Vanilla indique la présence de taches correspondant à l'acide p-hydroxy benzoïque, à la vanilline et à l'acide Vanillique. La teneur en polyphénols déterminée par la méthode de Folin-Cioccalteu modifiée indique une teneur exprimée en acide gallique,

supérieure ou égale à 1,0 g/1.

EXEMPLE 3

Mesure de l ' ac tivité anti -radic alaire d'un extrait de V anil la tahiten si s vi s - à-vi s de s radic aux

hydroxyle (modèle biochimique).

Résumé des conditions expérimentales La méthode de mesure de l'activité anti-radicalaire a été adaptée de la méthode décrite par Y. Kato et coll. (Réf.: "Oxidative Fragmentation of Collagen and Prolyl Peptide by Cu(II) /H2O2", Y.KATO, K. UCHIDA, S.KAWAKISHI, J. of Biol. Chem. 267 (33)23646

23651, (1992).

La génération de radicaux libres OHé par le système H2O2/CuSO4 entrâîne la dégradation du 2-désoxyribose. Cette dégradation est mesurée à un instant t (t=30 minutes), à l'aide d'acide

thiobarbiturique, révélateur du désoxyribose dégradé.

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La variation de la couleur du milieu réactionnel est mesurée par spectrophotométrie à 532 nm.

Les essais sont effectués en triplicata. En l'absence de tout piégeur des radicaux libres, la réaction H2O2 /CuS04 constitue le témoin et correspond à la quantité maximale (unité arbitraire 100 %) de radicaux OH. présents dans le milieu réactionnel. L'indice Iso correspondant à la concentration d'extrait de Vanilla tahitensis ou de molécule de référence (catéchine) qu'il est nécessaire d'introduire pour piéger 50 % des radicaux hydroxyle OH., est mesuré. L'indice Iso est représentatif du degré de protection apporté par l'extrait de Vanilla

tahitensis vis-à-vis des radicaux hydroxyle.

1 0 Résultats

I50 (%)

Extrait de Vanilla tahitensis 1,2 1 o-2 % Référence: catéchine 3. 104 % Ces résultats démontrent que l'extrait de Vanilla tahitensis constitue un bon capteur des radicaux libres OHé et ceci renforce la certitude que la vanille en général, ou un extrait de

vanille, plus précisément, peuvent être dotés d'une efficacité cosmétique.

EXEMPLE 4

Mesure de l'activité anti-radicalaire d'un extrait de Vanilla tahitensis vis-à-vis des radicaux

superoxyde (modèle enzymatique).

Résumé des conditions expérimentales La production d'ions superoxyde 02-. est générce par un système enzymatique xanthine oxydase/hypoxanthine et mesurée en fonction du temps par spectrophotométrie (réduction du

cytochrome C oxydé en cytochrome C réduit) à 550 nm.

Cette cinétique permet de déterminer la vitesse d'apparition du cytochrome C réduit (grâce à la mesure de la pente obtenue). En l'absence de tout inhibiteur, la réaction enzymatique hypoxanthine/xanthine oxydase constitue le témoin et correspond à la quantité maximale

(unité arbitraire 100 /0) de radicaux superoxyde O2-. présents dans le milieu réactionnel.

2837384

L'indice Iso correspondant à la concentration d'extrait de Vanilla tahitensis ou de molécule de référence (acide gallique) qu'il est nécessaire d'introduire pour piéger 50 % des radicaux superoxyde O2-. est mesuré. L'indice I50 est représentatif du dogré de protection apporté par

l'extrait de Vanilla tahitensis vis-à-vis des radicaux superoxyde.

s Résultats Iso (%) Extrait de Vanilla tahitensis 0,6 % Rétérence: catéchine 2,87.10-3 % Ces résultats démontrent que l'extrait de Vanilla tahitensis constitue un bon capteur des radicaux libres O2-..Ils renforcent la certitude que la vanille en général ou un extrait de

vanille, plus précisément, sont bien dotés d'une efficacité cosmétique.

EXEMPLE 5

Mesure de l'activité anti-radicalaire d'un extrait de Vanilla tahitensis sur un modèle de

polynucléaires neutrophiles, agressés par du phorbol myristate acétate.

Résumé des conditions expérimentales Les polynucléaires neutrophiles (PNN) sont connus pour générer des radicaux libres O2-. à la suite d'une agression. Sur cette base, des PNN (isolés à partir de sang circulant) sont incubés pendant 15 minutes à 37 C avec un extrait de Vanilla tahitensis ou avec la SOD (0,03 U/mL), (superoxyde dismutase), substance de référence. Les PNN sont ensuite stimulés par du PMA (Phorbol Myristate Acétate) pendant 30 minutes à 37 C, afin de déclencher la libération de

radicaux superoxyde.

La réaction est stoppée dans la glace, les cultures sont centrifugées afin d'en recueillir le surnageant auquel sera ajouté du cytochrome oxydé qui au contact des ions superoxyde va se

transformer en cytochrome C réduit.

L'évaluation du pouvoir anti-radicalaire de l'exkait de Vanilla tahitensis ou de la substance de

référence s'effectue par le dosage spectrophotométrique du cytochrome C réduit, à 550 nm.

Les résultats sont exprimés en pourcentage de protection vis-à-vis des radicaux superoxyde.

l' 2837384 Résultats SOD EXTRAlT VANILLA TAHITENSIS

PRODUIT TEMOIN

0.03 U/mL 0,05 % 0,1 % 0,5 %

415 328 266 266

DO SSOnm O

416 298 268 260

Moyenne 416 313 267 263 % Cytochrome C réuit 100 % O % 75 % 64 o/o 63 % % de Protection O % 100 % 25 % 36 % 37 % Ces résultats montrent que l'extrait de Vanilla tabitensis présente une activité anti-radicalaire superoxyde qui en fait un actif favorisant la protection de la peau contre les rayonnements ultraviolets. Cette expérience permet d'illustrer pour la première fois "in vitro" le fait que la vanille en général, ou un extrait de vanille, plus précisément, peuvent être dotés d'une

efficacité cosmétique.

EXEMPLE 6

Mesure de l'activité anti-radicalaire d'un extrait de Vanilla tahitensis sur un modèle de cellules

lymphodes de Jurkat stressces par une irradiation WA et WB.

Résumé des conditions expérimentales Les cellules lymphodes de Jurkat constituent un modèle traditionnellement utilisé en cosmétologie et en pharmacologie pour évaluer l'activité anti-radicalaire de molécules chimiques. Le dosage des ions O2-. générés par l'irradiation WA et WB est réalisé par cytométrie de flux, méthodologie qui mesure la fluorescence de cellules individuelles sur un

grand nombre de cellules (10 000 cellules analysces par échantillon).

Sur cette base, des cellules lymphodes humaines sont mises à incuber à 37 C pendant 45 minutes en présence des produitsàl'essai(extraitde Vanilla tahitensisàO,11%,0,33%et 1 %, substance de rétérence BHA, ou Butylated hydroxyanisole à 50 M) et on ajoute après addition, une sonde dihydroéthidium, initialement non fluorescente sous forme oxydée qui s'incorpore dans les cellules lymphodes. Les cellules subissent alors une irradiation WA (2266 mJ/cm2) et WB (240 mJ/cm2) et sont incubées pendant 20 minutes à 37 C. L'effet anti-radicalaire des produits a l'essai est évalué par la mesure de la fluorescence en cytométrie

de flux.

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Résultats

BHA EXTRAIT VANILLA TAHITENSIS

PRODUIT TEMOIN

I1M 0,11 % 0,33 % 1 %

202.8 156.6 92.9 78.7 61.4

Intensité de

219.3 160.1 106.6 83.1 73.5

fluorescence

203.5 153.5 113.1 80.3 68.4

Moyenne 208.53 156.73 104.2 80.7 67.8 Ecart type 9.3 3.3 10.3 2.2 6.1

P <0.01 <0.01 <0.01 <0.01 <0.01

Taux relatifd'O2 100 % 75 % 50 % 39 % 32 % /O de Protection 0 % 25 % 50 % 61 % 68 % Ces résultats montrent que l'extrait de Vanilla et notamment de Vanilla tahitensis présente une forte activité anti-radicalaire superoxyde, supérieure à celle mesurée pour la substance de référence, dans les conditions expérimentales observées. Cette expérience permet de confirmer les résultats expérimentaux précédents et montre que l'extrait de Vanilla et notamment de Vanilla tahitensis est un principe actif antiradicalaire qu'il est désormais intéressant d'incorporer dans des formulations anti-age ou dans des formulations

spécifiquement adaptées au soin et à la protection solaire.

EXEMPLE 7

Evaluation "ex-vivo" de l'effcacité d'un extrait de Vanilla tahitensis sur l'apparition de cellules "coup de soleil", dans un modèle d'explant de peau humaine entière soumis à une

irradiation WB.

Résumé des conditions expérimentales Des disques de peau humaine entière réalisés à partir d'un fragment de peau humaine (recueilli après une opération de plastie abdominale chez une femme âgée de 46 ans) sont déposés dans des nacelles et pré-incubés avant irradiation pendant 24 heures à 37 C en présence:

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de l'extrait de Vanilla tahitensis à différentes concentrations allant de 0,3 % à 1 %, d'une association de molécules de référence (D-mannitol à 200 mM, catalase à 1600

UI/ml et SOD à 300 Wml).

Les disques sont ensuite placés dans des puits contenant le milieu de culture et irradiés par

une dose en WB d'1 J/cm2 puis incubés à 37 C pendant 24 heures.

Des témoins exposés et non exposés sont également préparés. Un contrôle positif est également réalisé en utilisant une crème commerciale SPF 20 appliquce, directement sur le

disque, par voie topique (1 à 2 mg de crème).

Les disques de peau sont ensuite traités par une solution de paraformaldéhyde à 4 % avant que soient réalisées des coupes histologiques (colorées à l'hémalun-éosine-safran). Les cellules "coup de soleil" (kératinocytes à l'état de mort cellulaire) sont observées au microscope et comptées sur 10 champs. Les cellules "coup de soleil" apparaissent plus foncées et surtout

présentent un décollement de la membrane cellulaire.

Résultats Le tableau suivant exprime le nombre de cellules "coup de soleil" sur 10 champs microscopiques et indique le pourcentage de protection assurée par l'extrait de Vanilla

tahitensis par rapport au témoin exposé.

PRODUIT TEMOlN EXTRAIT DE VA} ILLA TAHITENSIS

0.3% 1%

Nombre de champs 10 10 10 Total de sun burn cells 279 142 138 Total / Champ 27.9 14.2 13.8 Ecart-type 6.7 5.1 5.7 % Témoin 100 51 49 % de Protection 49 51 Ces résultats montrent que l'extrait de Vanilla tahitensis permet de prévenir efficacement l'apparition de cellules "coup de soleil" et de protéger la peau des dommages cellulaires

engendrés par les radicaux libres.

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EXEMPLE 8 - Exemples de compositions selon l'invention Composition 1: Crème de jour Phase A: Extrait de Vanilla tahitensis 2.00 % Cyclométhicone (and) dimethicone copolyol 6,00 % Cyclométhicone 3,00 % Glycérol 3,00 % Carbomère 0,40 % Conservateurs qsp Eau déminéralisée qsp 100 % Phase B: Stéarate de glycéryle 4,50 % Octyldodécanol 3,00 % Beurre de Shorea 2,00 % Erucate d'Oléyle 2,00 %

BHA 0,01 %

Cétyl phosphate de potassium 0,93 % Stéaratedemagnésium 0,75 % Composition 2: Gel Extrait de Vanilla tahitensis 2.00 % Paraoxybenzoate de méthyle sodé 0,20 % Cyclométhicone 5,00% Simulgen NS 4,00 % Conservateurs qsp Acide citrique 0,075 % Eau déminéralisée qsp 100 % Composition 3: Gel Extrait de Vanilla tahitensis 2.00 % Carbomère 0,30 % Parahydroxybenzoate de méthyle sodé 0,20 %

2837384 Triethanolamine qsp Eau déminéralisce qsp 100 % Composition 4: Lotion S

Extrait de Vanilla tahitensis 2.00 % Glycérol S,OO % Parahydroxybenzoate de méthyle sodé 0,20 % Alcool phtalaté 96.3 30,00 % Phénoxyéthanol O,SO % Acide citrique 0,098 % qsp 100 % Eau démneralsce

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Claims

REVENDICATIONS

1. Utilisation d'une composition cosmétique ou dermatologique, en une quantité efficace contenant un extrait d'au moins une espèce de Vanillier (famille des Orchidacces), pour protéger la peau contre les radicaux superoxyde. 2. Utilisation d'une composition cosmétique ou dermatologique, en une quantité efficace contenant un extrait d'une espèce de Vanillier (famille des Orchidacées), pour limiter

l'apparition de cellules "coup de soleil".

3. Utilisation selon la revendication 1 ou la revendication 2, caractérisée en ce que l'extrait

est un extrait de gousse, fruit de la plante.

4. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que l'extrait est un

extrait de Vanilla tahitensis.

5. Utilisation selon la revendication 4, pour protoger la peau contre les radicaux libres et les

rayonnements solaires.

206. Utilisation selon la revendication 3, caractérisée en ce que l'extrait est un extrait de

Vanilla fragans ou planifolia (synonyme).

7. Utilisation selon les revendications 1 à 3, caractérisée en ce que l'extrait est un extrait de

Vanilla pompona.

8. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 7, caractérisce en ce que dans la composition

cosmétique, ledit extrait est utilisé entre 0,01 % et 30 % du poids de la composition totale.

9. Utilisation d'une composition selon l'une des revendications 1 à 7, caractérisée en ce que

dans la composition dermatologique ledit extrait est utilisé à des doses comprises entre

0,01 /0 et 30 % du poids de la composition totale.

10. Composition cosmétique ou dermatologique, destinée à une application topique, caractérisce en ce qu'elle contient de 0,01 % à 30 % d'un extrait de Vanilla selon l'une des

revendications 1 à 8, à titre de principe actif, en présence d'un véhicule ou d'un excipient

cosmétiquement ou pharmaceutiquement acceptables.

11. Procédé de traitement cosmétique de la peau pour protéger contre les radicaux libres qui consiste à appliquer par voie topique une quantité efficace d'un extrait de Vanilla

tahitensis selon l'une des revendications 1 à 8 ou d'une composition dermatologique selon

la revendication 9.

12. Procédé d'obtention d'un exkait d'au moins une espèce de Vanillier qui consiste à broyer un fruit (gousse) de Vanilla tahitensis ou fragans (planifolia ou pompona), à épuiser le broyat avec un solvant liquide, à reprendre le résidu végétal, à le soumettre à une