JP2009148275A - 特定保健用食品 - Google Patents
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Abstract
【構成】 骨由来の特定のコラ−ゲンを用いることで、骨強化の健康食品等の飲食物・医薬品に、基底膜の主成分であるタイプIVコラ−ゲンを用いることで、癌の予防、改善の健康食品等の飲食物・医薬品とする。
Description
更に骨由来コラ−ゲン(これを含む生体成分)及び又はタイプIコラ−ゲン及び又はタイプIIIコラ−ゲン(これらを含む生体成分)より成る骨粗鬆症予防及び改善治療剤又は健康食品等の飮食物に関する。
しかし実際には、関節疾患患者に、関節成分のコンドロイチン硫酸やタイプIIコラ−ゲン(特に断らない限りコラ−ゲンとゼラチンは同義に用いる)を直接摂取するか又はこれらを主に含む生体成分や抽出ス−プとして摂取しているのみであり、治療改善に有効量が摂取されているか不明である。
又、従来の癌治療、特に固形癌の治療は、化学療法やホルモン療法などの全身的な方法と、手術や放射線療法などの局所療法が行われている。しかし、癌は治らないという諦観から、いずれも延命などの緩やかな治療を目指すようにようになっている。実際、転移し易い癌、例えば肝細胞癌は、脈管内に浸潤する傾向が強く、特に門脈へ浸潤する傾向が強く、治療に苦慮している。この場合、局所的な治療(肝臓動脈塞栓術、経皮的エタノ−ル注入療法・マイクロ波凝固療法・ラジオ波焼灼療法)では、対処困難である。又、化学療法は、いずれの薬剤の単独投与でも有効率が10%程度と低く、副作用も強く、有効な治療方法とは言えない。
更に本発明の目的は、新しいバイオ利用の抗癌剤で特に増殖性や転移性の強い癌を抑制する抗癌剤の開発にある。
又、近年多く見られる骨粗鬆症では、骨由来物や生体由来の有効物質の投与が望まれるが、実際の治療や予防には、カルシュウムや骨粉が適用されそれ以外ではビタミンK、D群が適用されているにすぎず、めぼしい生体由来の有効成分がない。この現状を打破すべく発明者は鋭意研究し、特定のコラ−ゲンを特定量用いて解決することを見出だした。
一方、癌細胞は活動が活発になると基底膜を破壊して拡大するが、有効な生体由来の薬剤はなかった。又、従来、癌疾患の治療剤は、長期投与では副作用が強いという欠点があった。長期の治療で副作用がなく安心して投与できる癌疾患の治療薬が望まれていた。本発明は有効物質として基底膜の主成分であるタイプIVコラ−ゲン及びその抗体を利用して、癌の転移と増殖を抑制することにある。
抗癌剤とするコラ−ゲンの種類は、各タイプの混合でも単独でも良いが単独では特にタイプIVコラ−ゲンが望ましい。抗癌剤とするコラ−ゲンの用いる部分はコラ−ゲン全体でも良く、又その部分を構成する分画やペプタイドでも良く、又、これらの混合物でも良い。通常、タイプIVコラ−ゲンは、NC1(C末端非螺旋部)、中央三本鎖螺旋部(内部に乱れ有り)、7S(N末端三本鎖螺旋部)の三領域に分けられ、更に、それぞれが、アルファ1から6まで分画されるが、抗癌剤とする時これらを単独又は組み合わせて使用して良く、望ましくは三本鎖螺旋部(中央及び又はN末端、以下三本鎖)を、更に望ましくは三本鎖のアルファ1及び又はアルファ2であり、そのペプタイドである。タイプIVコラ−ゲンの三本鎖は、由来臓器(胎盤、腎糸球体、眼レンズカプセル、各種組織基底膜)、抽出条件及び精製条件で得られる分子量は異なるが、いずれでも良く、特に望ましくは、電気泳動した時、約180Kから約160Kに属するものや約30Kよりも、約50Kから約100Kに属するものである。
コラ−ゲンは、体蛋白の約30%を占めるので、健常者は、日常の食事で動物蛋白源としてコラ−ゲンを常時取り込んでいる。例えば、動物を生食(例えば生卵、ステ−キレア、馬刺、魚類の刺身、鮭頭軟骨の酢の物)し、又動物を加熱調理し、干物を食べ、抽出(例えば軟骨を含むス−プ類)して食することで生体内に取り込んでいる。コラ−ゲンは、菓子類(通称グミ)や健康食品としても広く利用され、安全に経口摂取できる。又、コラ−ゲンは、動物細胞の培養時に、足場として安全に細胞を増殖するのに用いられている。更に、変性コラ−ゲン(ゼラチン)が、ワクチン、内服薬や注射薬に、賦形剤、安定剤等として添加されている。
更に本発明に於いてコラ−ゲンは、変性、修飾、低分子化したものでも、ペプタイド合成機で製したものでもこれらを組み合わせたものでも良い。つまり変性させてゼラチンにしても良く、サクシニル化などの修飾をしたものでも、低分子化したものでも良い。
コラ−ゲンを生体から製するには、一般的には塩酸や酢酸等の酸抽出とペプシン等の酵素抽出があり、両者を組合わせても良い。更にDEAEカラムクロマトグラフィ−や分画分子量の透析で、微量ならHPLCで精製しても良い。
1)胎盤よりタイプIVコラ−ゲンを製する一例を示す。
以下、できる限り4Cで行う。ヒト胎盤を細裁断し洗浄(精製水−蛋白分解酵素阻害剤含有0.05Mトリス緩衝液pH7.5−精製水)−凍乾し粉砕−ペプシン含有0.5M酢酸(酢酸のみでも良い)で可溶化し遠心で上清を採取(沈殿は再可溶化、約5回繰り返す)−終濃度0.7M塩化ナトリウムを添加−遠心で上清を採取−終濃度1.2M塩化ナトリウム添加−遠心で沈殿採取−1M塩化ナトリウム含有0.05Mトリス緩衝液pH7.5に溶解透析−4.5M塩化ナトリウムを添加−遠心で沈殿採取−1.0M塩化ナトリウム含有0.05Mトリス緩衝液pH7.5に溶解透析−遠心で上清採取−4.5M塩化ナトリウム添加−沈殿(タイプIVコラ−ゲン)−カラムクロマトグラフィ−で精製。
なお公開特許公報(昭和62−53927)にも製する例がある。
2)胎盤よりタイプI及びIIIコラ−ゲンを製する一例を示す。
以下、できる限り4Cで行う。ヒト胎盤を細裁断−洗浄(蛋白分解酵素阻害剤含有PBS)と遠心で沈殿を採取(この操作を約6回繰り返す)−凍乾し粉砕−ペプシン含有0.5M酢酸(酢酸のみでも良い)で可溶化し遠心で上清を採取(沈殿は再可溶化、約5回繰り返す)−終濃度2M塩化ナトリウムを添加−遠心で沈殿を採取−0.05M酢酸に溶解−遠心で上清採取−終濃度1M塩化ナトリウムを添加−遠心で沈殿を採取−0.05M酢酸に溶解−透析し遠心分離−上清(タイプI)、沈殿(タイプIII)−更に透析し精製。
なお、真皮よりタイプI及びIIIコラ−ゲンを製する時、例えば、ウシ胎児、子ウシの真皮を用いる時は、皮膚の除毛、脂肪の除去を充分に行う。脱脂には、ジエチルエ−テルとエタノ−ルの混合液(1:1)を用いる。
マウスやラットのモノクロ−ナル抗体をヒトに投与した時、長期では中和抗体ができ効果が弱まるが、ヒト型ではこのような事が起きにくい。抗体としてのイムノグロブリンは、IgG1やG2aなどのIgGやIgM及び他の型でも,各型混合したものでも良く、更に小さくしたもの、例えばH鎖、L鎖、Fc、Fab、F(ab′)2、その他などでも抗原と反応性を持つ限り良い。
骨粗鬆症薬としての本発明のコラ−ゲンは、1日1〜30gが良く、好ましくは1日5〜15gが良い。
抗癌剤としての本発明のコラ−ゲン量は、1日0.001mg以上30g以下で、好ましくは1日0.01mg〜10gで、抗体量としては1日0.001mg以上30g以下で、好ましくは1日0.01mg〜10gである。数値は目安であり、疾患の重傷度、服用者の状態により増減されるべきで、これに限定されない。
例えば、抗癌剤としてタイプIVコラ−ゲンを用い、転移性肝癌に局所的な治療を行う時である。タイプIVコラ−ゲン0.01mg〜1gを単独又はこれを含む微粒子を肝臓動脈へカテ−テルから注入し血管造影で確認しながら塞栓を形成させることで、抗癌剤の転移と増殖を抑制する。
又主剤はコラ−ゲン単独や抗体単独でも、他の薬物と混合して内服薬、注射剤にしても良い。他の薬物は特に限定されず、通常医薬品として使用可能な薬物、例えば消化剤、整腸剤、抗潰瘍剤、抗生物質、ホルモン、酵素、ステロイド、内分泌系用薬、循環器系剤、抗リウマチ剤、抗炎症剤、鎮痛剤、解熱剤、抗アレルギ−剤、抗腫瘍剤、更にはインタ−フェロン、インタ−ロイキン、腫瘍壊死因子等のペプチド等をあげることができる。
更に、本発明の健康食品等の飲食物、内服溶液剤、注射剤において、このように製された溶液、もしくは懸濁液に等張化剤、緩衝剤以外の前記添加物を、溶解もしくは懸濁させてもよい。
このように製された溶液、もしくは懸濁液をミリポアフィルタ−等を用いて無菌化し、次いで瓶、バイアルもしくは、アンプルに充てんさせることにより本発明の健康食品液、内服液、注射剤を製することができる。又本発明の液においては製された瓶、バイアルもしくはアンプルを凍結乾燥し、用時溶解液とすることも可能である。
以下、本発明を更に実施例で説明するが本発明はこれらにより限定されるものではない。
癌細胞(HEPG2)の培養液にNC1、3本鎖及びその抗血清を加えて比較した。
結果は、3本鎖が最も癌細胞の増殖を抑制した。抗血清(ウサギ由来)も抑制効果があった。NC1(ウシ由来)も濃度を上げると抑制した。
*各6穴の平均細胞数
*培養条件 BMEM+10%FBS、5%CO2濃度、37C
コラ−ゲンの健常者への影響について確認した。健常者ボランテア2名が、豚骨由来コラ−ゲン(タイプIコラ−ゲン80%以上 コラ−ゲン技術研修会)約10%を含有する市販スポ−ツドリンク(大塚製薬)液を暖め、1日2回食後に約100ml(コラ−ゲン含量約10g)を1か月服用したが、使用中、使用直後も更に服薬休止1か月後も特段の自覚変化は見られなかった。
毎日の散歩を1時間以上行う骨粗鬆症患者3名が充分な同意の上で豚骨由来コラ−ゲン(タイプIコラ−ゲン80%以上 コラ−ゲン技術研修会)を市販スポ−ツドリンク(大塚製薬)液に暖めて溶解し内服した。内服量は、1日3回食後にコラ−ゲン各5gに相当する。
その結果、1名は最短1か月より骨密度が3%上昇し、2ヵ月後には8%の上昇であった。他の2名は変化が見られなかった。
骨折経験のある骨粗鬆症患者(70才、女子)が事前の充分な同意の上で、豚真皮由来コラ−ゲン(タイプI及びタイプIIIコラ−ゲン コラ−ゲン技術研修会)を毎日1回就寝前に、約10gをオレンジジュ−ス40ml(ビタミンC約10mg相当含有)に懸濁させて40日間内服した。その結果、骨密度が5%上昇した(DEXA法による測定誤差は2%以内)。
Claims (3)
- タイプIコラーゲンを主成分とする、
又は、骨由来コラーゲン及び/又はタイプIコラーゲン及び/又はタイプIIIコラーゲンよりなる,
又は、タイプIVコラーゲン及び/又はその分画やペプチドよりなる、特定保健用食品、医薬部外品、一般食品等を含む健康食品等の飲食物 - 請求項1の健康食品等の飲食物が骨粗鬆症予防及び改善治療剤である請求項1のタイプIコラーゲン及び/又はタイプIIIコラーゲン及び/又は骨由来コラーゲン
- 請求項1のタイプIコラーゲンを主成分とする、
又は、骨由来コラーゲン及び/又はタイプIコラーゲン及び/又はタイプIIIコラーゲンよりなる、特定保健用食品、医薬部外品、一般食品等を含む健康食品等の飲食物が、骨粗鬆症に有効とすることを明示又は暗示することを特徴とする請求項1の健康食品等の飲食物
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