JP2009082138A5 - - Google Patents

Claims (15)

1. 組換えポリペプチドを産生する方法であって
   哺乳動物細胞株を培地中で３５℃〜３８℃の温度で培養してから、２９℃〜３６℃の第ニの温度にシフトさせ；
   培養培地にヘキサメチレン・ビスアセトアミド（ＨＭＢＡ）を添加する
   ことを含んでなり；
   ここにおいて、哺乳動物細胞株が、組換えポリペプチドを産生するように遺伝子操作されており、そして
   第一の温度から第二の温度へのシフトの後、数時間ないし数日後に、ＨＭＢＡが添加される、
   前記方法。
2. 酪酸の塩を、第一の温度から第二の温度へのシフトから、数時間ないし数日後に添加す、請求項１の方法。
3. 培地中の酪酸の塩の濃度が、０．１ｍＭ〜２ｍＭである、請求項２の方法
4. 培地中のＨＭＢＡの濃度が、０．１ミリモル〜２０ミリモルである、請求項１ないし３のいずれか１項の方法。
5. 培地中のＨＭＢＡの濃度が、０．５ミリモル〜１０ミリモルである、請求項４の方法。
6. 培地中のＨＭＢＡの濃度が、０．１ミリモル〜５ミリモルである、請求項４の方法。
7. 培地中に、キサンチン愉導体を、第一の温度から第二の温度へのシフトから、数時間ないし数日後に添加する、請求項１ないし６のいずれか１項の方法。
8. キサンチン誘導体がカフェインであり、そして、カフェインが０．０１ないし３．０ｍＭの濃度で添加される、請求項７の方法。
9. 培地が血清不含である、請求項１ないし８のいずれか１項の方法。
10. 細胞株が、ＣＨＯ細胞株あるいはハイブリドーマ細胞株である、請求項１ないし９のいずれか１項の方法。
11. 組換えポリペプチドが、ＲＡＮＫ：Ｆｃ、ＩＩ型インターロイキン−１受容体、ＴＮＦＲ：Ｆｃ、ＣＤ４０リガンド、ＴＲＡＩＬ、ｆｌｔ３リガンド、ＩＬ−４受容体、Ｇ−ＣＳＦ、エリスロポエチン、および抗体からなる群より選択される、請求項１ないし１０のいずれか１項の方法。
12. さらに、培地から組換えポリペプチドを回収することを含む、請求項１ないし１１のいずれか１項の方法。
13. ポリペプチドを産生する方法であって
    ポリペプチドを発現可能な哺乳動物細胞株を３５℃ないし３８℃の温度で培養し、そして、次いで
    血清不含の培地中、少なくとも５日間、２９℃ないし３６℃の温度で細胞を培養する、
    ことを含んでなり、
    ここにおいて、ＨＭＢＡ及び酪酸の塩を、０．５ないし１０ｍＭ ＨＭＢＡ及び０．１ないし２ｍＭ 酪酸塩の濃度で、温度シフトの後、数時間ないし数日後に添加する、
    前記方法。
14. ポリペプチドが、ＲＡＮＫ：Ｆｃ、ＩＩ型インターロイキン−１受容体、ＴＮＦＲ：Ｆｃ、ＣＤ４０リガンド、ＴＲＡＩＬ、ｆｌｔ３リガンド、ＩＬ−４受容体、Ｇ−ＣＳＦ、エリスロポエチン、および抗体からなる群より選択される、請求項１３の方法。
15. ポリペプチドを産生するように遺伝子操作されているＣＨＯ細胞株、及びＨＭＢＡを含んでなる血清不含の産生培地、を含んでなる細胞培養物であって、
    ここにおいて、培養物は、３５℃ないし３８℃の第一の温度で培養されており、そして、次いで、２９℃ないし３６℃の第二の温度にシフトして少なくとも５日間培養されている、並びに、
    、第一の温度から第二の温度へのシフトの後、数時間ないし数日後にＨＭＢＡが添加される、
    前記細胞培養物。