JP2008546755A

JP2008546755A - 撮像用１８ｆ又は１１ｃ標識アルキルチオフェニルグアニジン

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Publication number: JP2008546755A
Application number: JP2008517597A
Authority: JP
Inventors: ロビンズ，エドワード・ジョージ; アースタッド，エリック
Original assignee: Hammersmith Imanet Ltd
Current assignee: Hammersmith Imanet Ltd
Priority date: 2005-06-23
Filing date: 2006-06-23
Publication date: 2008-12-25
Anticipated expiration: 2026-06-23
Also published as: KR101409549B1; IL187750A; NO339982B1; KR20080016873A; NZ563812A; MX2007015437A; PL1896400T3; EP1896400A1; RU2420516C2; JP5015919B2; GB0512770D0; AU2006260666B2; RU2007146237A; IL187750A0; US8058311B2; AU2006260666A1; CN103351317A; ES2435077T3; WO2006136846A1; NO20076402L

Abstract

本発明は、以下の式（Ｉ）の化合物又はその塩もしくは溶媒和化合物を提供する。かかる化合物は中枢神経系受容体の撮像に使用することができる。
【化１】
式中、Ｒ¹は水素又はＣ_1-4アルキルであり、Ｒ²及びＲ⁴は、Ｒ²及びＲ⁴の少なくとも一方が［¹¹Ｃ］−Ｃ_1-4アルキル又は［¹⁸Ｆ］−Ｃ_1-4フルオロアルキルであることを条件として、各々独立にＣ_1-4アルキル、［¹¹Ｃ］−Ｃ_1-4アルキル及び［¹⁸Ｆ］−Ｃ_1-4フルオロアルキルから選択され、Ｒ³はハロである。
【選択図】なし

Description

本発明は医用撮像分野、特に陽電子放射線断層撮影（ＰＥＴ）に関するものであり、中枢神経系（ＣＮＳ）受容体の撮像のための化合物及び方法を提供する。

Ｎ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸（ＮＭＤＡ）受容体はグルタミン酸作動性受容体の主要なサブタイプの一つであり、長期抑圧、長期増強及び発達期神経可塑性に中心的な役割を果たしていることが広く認められている。ＮＭＤＡ受容体の過剰活性化又は長期刺激に少なくとも部分的に起因するＮＭＤＡ誘発興奮毒性は、脳卒中、頭部又は脊髄外傷、てんかん、アルツハイマー病及びハンチントン病のような多くの中枢神経系（ＣＮＳ）疾患で見いだされている。ＰＥＴを用いたインビボでのＮＭＤＡ受容体イオンチャネル部位の研究のための放射性リガンドの候補として数多くの化合物が検討されている。しかし、かかる化合物の大半には、血液脳関門の通過性に乏しい又は非特異的結合が高いという問題があった。

国際公開第９４／２７５９１号には、ある種の置換グアニジン及びそれらの治療のための用途が記載されている。国際公開第２００４／００７４４０号には、放射性標識グアニジン誘導体並びにそれらの中枢神経系（ＣＮＳ）受容体の撮像のための用途が記載されており、これらの誘導体は、合成後に複雑な高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）精製を必要とし、しかも、約４５分もの比較的長い調製時間を要するにもかかわらず低乃至中程度の収率しか得られないことが判明している。したがって、全収率、調製時間及び精製の簡単さに関して改善された標識化学が必要とされている。さらに、走査時間を延ばし、かかるトレーサの有効性を高めるため、ＮＭＤＡ受容体用の追加の放射性リガンドが必要とされている。
国際公開第９４／２７５９１号パンフレット国際公開第２００４／００７４４０号パンフレット

そこで、本発明の一態様では、次の式（Ｉ）の化合物又はその塩もしくは溶媒和化合物を提供する。

式中、Ｒ¹は水素又はＣ_1-4アルキルであり、Ｒ²及びＲ⁴は、Ｒ²及びＲ⁴の少なくとも一方が［¹¹Ｃ］−Ｃ_1-4アルキル又は［¹⁸Ｆ］−Ｃ_1-4フルオロアルキルであることを条件として、各々独立にＣ_1-4アルキル、［¹¹Ｃ］−Ｃ_1-4アルキル及び［¹⁸Ｆ］−Ｃ_1-4フルオロアルキルから選択され、Ｒ³はハロである
Ｒ¹は好ましくは水素又はメチルであり、さらに好ましくはメチルである。

Ｒ²及びＲ⁴の一方は好ましくは−¹¹ＣＨ₃、−¹¹ＣＨ₂ＣＨ₃、−¹¹ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₃、−ＣＨ₂ ¹⁸Ｆ、−ＣＨ₂ＣＨ₂ ¹⁸Ｆ又は−ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₂ ¹⁸Ｆであり、さらに好ましくは−¹¹ＣＨ₃又は−ＣＨ₂ ¹⁸Ｆであり、もう一方のＲ²又はＲ⁴基は好ましくはメチルである。

Ｒ³は好ましくは−ＳＲ²基に対してパラ位でフェニル環に結合していて、好ましい態様ではＲ³はクロロである。

−ＳＲ⁴基は、好ましくはグアニジン橋に対してメタ位でフェニル環に結合している。

したがって、本発明の好ましい態様では、次の式（Ｉａ）の化合物又はその塩もしくは溶媒和化合物を提供する。

式中、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³及びＲ⁴は式（Ｉ）の化合物について定義した通りである。

式（Ｉ）の最も好ましい化合物としては、
Ｎ−（２−クロロ−５−［¹⁸Ｆ］フルオロメチルチオ）−フェニル−Ｎ′−（３−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジン、
Ｎ−（２−クロロ−５−（２−［¹⁸Ｆ］フルオロエチルチオ））−フェニル−Ｎ′−（３−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジン、
Ｎ−（２−クロロ−５−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−（３−［¹⁸Ｆ］フルオロメチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジン、
Ｎ−（２−クロロ−５−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−（３−（２−［¹⁸Ｆ］フルオロエチルチオ））−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジン、
Ｎ−（２−クロロ−５−［¹¹Ｃ］メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−（３−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジン、
Ｎ−（２−クロロ−５−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−（３−［¹¹Ｃ］メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジン、
Ｎ−（２−クロロ−５−［¹¹Ｃ］エチルチオ）−フェニル−Ｎ′−（３−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジン、及び
Ｎ−（２−クロロ−５−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−（３−［¹¹Ｃ］エチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジン
又はこれらの塩もしくは溶媒和化合物が挙げられる。

本発明の好適な塩としては、生理学的に許容される酸付加塩、例えば塩酸、臭化水素酸、リン酸、メタリン酸、硝酸及び硫酸などの鉱酸から誘導される塩、並びに酒石酸、トリフルオロ酢酸、クエン酸、リンゴ酸、乳酸、フマル酸、安息香酸、グリコール酸、グルコン酸、コハク酸、メタンスルホン酸及びｐ−トルエンスルホン酸などの有機酸から誘導される塩が挙げられる。

以下で例証する通り、式（Ｉ）及び（Ｉａ）の化合物はＮＭＤＡ受容体の放射性リガンドとしての用途を有する。したがって、本発明の別の態様では、ＰＥＴのようなインビボ診断又は撮像法に用いるための上述の式（Ｉ）又は（Ｉａ）の化合物又はその塩もしくは溶媒和化合物を提供する。好適には、上述の式（Ｉ）又は（Ｉａ）の化合物は、健常者におけるＮＭＤＡ受容体の撮像に用いることができる。

式（Ｉ）又は（Ｉａ）の化合物或いはそれらの塩又は溶媒和化合物はＮＭＤＡ受容体のインビボでの撮像に有用であり、そのため、脳卒中、頭部又は脊髄外傷、てんかん、アルツハイマー病又はハンチントン病のようなＮＭＤＡ介在性疾患の診断に有用性をもつ。そこで、本発明は、ＮＭＤＡ介在性疾患のインビボ診断又は撮像用の放射性医薬品の製造における式（Ｉ）又は（Ｉａ）の化合物又はその塩もしくは溶媒和化合物の使用も提供する。

本発明は、また、式（Ｉ）又は（Ｉａ）の化合物又はその塩もしくは溶媒和化合物を投与することを含んでなる、被検体、好ましくはヒトにおけるＮＭＤＡ介在性疾患のインビボ診断又は撮像法も提供する。この方法は、脳卒中、頭部又は脊髄外傷、てんかん、アルツハイマー病又はハンチントン病のインビボ診断又は撮像に特に好適である。

式（Ｉ）又は（Ｉａ）の化合物或いはそれらの塩は、好ましくは、本発明の化合物と薬学的に許容される賦形剤とを含む放射性医薬製剤として投与される。「放射性医薬製剤」とは、本発明では、式（Ｉ）又は（Ｉａ）の化合物或いはそれらの塩を、ヒトへの投与に適した形態で含む製剤と定義される。投与は、好ましくは製剤を水溶液として注射することによって行われる。かかる製剤は、他の成分、例えば緩衝剤、薬学的に許容される可溶化剤（例えばシクロデキストリン又はＰｌｕｒｏｎｉｃ、Ｔｗｅｅｎもしくはリン脂質のような界面活性剤）、薬学的に許容される安定剤又は酸化防止剤（例えばアスコルビン酸、ゲンチジン酸又はｐ−アミノ安息香酸））を適宜含んでいてもよい。

式（Ｉ）又は（Ｉａ）の化合物或いはそれらの塩の用量は、投与する化合物の種類、患者の体重その他の医師に自明の変数によって左右される。一般に用量は０．１ｎｍｏｌ／ｋｇ〜５０ｎｍｏｌ／ｋｇの範囲であり、好ましくは１ｎｍｏｌ／ｋｇ〜５ｎｍｏｌ／ｋｇの範囲である。

式（Ｉ）又は（Ｉａ）の化合物又はその塩もしくは溶媒和化合物は、以下の式（ＩＩ）の化合物から、（ｉ）すべてのチオール保護基の除去、及び（ｉｉ）塩基存在下、適当な溶媒中での適当なアルキルハライド［¹¹Ｃ］−Ｃ_1-4アルキルＸ又は［¹⁸Ｆ］−Ｃ_1-4フルオロアルキル−Ｙ（式中、Ｘ及びＹは各々独立にハロ、好ましくはクロロ、ヨード又はブロモであるか、或いはアリール又はアルキルスルホネート、例えばトシレート、トリフレート又はメシレートのような他の適当な脱離基である。）との反応によって製造することができる。

式中、Ｒ²及びＲ⁴の一方は水素、又はベンジルのようなチオール保護基であって、もう一方が水素、Ｃ_1-4アルキル、又はベンジルのようなチオール保護基であり、Ｒ¹は水素又はＣ_1-4アルキルであり、Ｒ³はハロである。

このアルキルハライドとの反応は、好ましくは、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、アセトン、ジクロロメタン、クロロホルム、ジメチルスルホキシド、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、テトラヒドロフラン又はアセトニトリルのような適当な溶媒中で、塩基、好ましくは炭酸カリウム、水酸化カリウム又は水素化ナトリウムのような無機塩基、或いはトリアルキルアミン（例えばトリエチルアミンなど）、ジイソプロピルエチルアミン又はジメチルアミノピリジンのような有機塩基の存在下で実施される。

式（ＩＩ）の化合物は、式（Ｉ）のＰＥＴトレーサの製造のための中間体として有用であり、この化合物自体が本発明の一態様をなす。

本発明の別の態様では、以下の式（Ｉ）の化合物又はその塩もしくは溶媒和化合物の製造方法であって、以下の式（ＩＩ）の化合物の反応を（ｉ）すべてのチオール保護基の除去、及び（ｉｉ）塩基存在下、適当な溶媒中での適当なアルキルハライド［¹¹Ｃ］−Ｃ_1-4アルキルＸ又は［¹⁸Ｆ］−Ｃ_1-4フルオロアルキル−Ｙ（式中、Ｘ及びＹは各々独立にハロ、好ましくはクロロ、ヨード又はブロモ、或いはアリール又はアルキルスルホネート、例えばトシレート、トリフレート又はメシレートのような他の適当な脱離基である。）との反応によって行うことを含んでなる方法も提供する。

式（Ｉ）中、Ｒ¹は水素又はＣ_1-4アルキルであり、Ｒ²及びＲ⁴は、Ｒ²及びＲ⁴の少なくとも一方が［¹¹Ｃ］−Ｃ_1-4アルキル又は［¹⁸Ｆ］−Ｃ_1-4フルオロアルキルであることを条件として、各々独立にＣ_1-4アルキル、［¹¹Ｃ］−Ｃ_1-4アルキル及び［¹⁸Ｆ］−Ｃ_1-4フルオロアルキルから選択され、Ｒ³はハロである。

式（ＩＩ）中、Ｒ²及びＲ⁴の一方は水素、又はベンジルのようなチオール保護基であって、もう一方が水素、Ｃ_1-4アルキル、又はベンジルのようなチオール保護基であり、Ｒ¹は水素又はＣ_1-4アルキルであり、Ｒ³はハロである。

本発明のさらに別の態様では、上述の式（ＩＩ）の化合物を含んでなる、放射性医薬製剤製造用のキットを提供する。キットの使用に当たっては、上述の方法を用いて式（ＩＩ）の化合物を対応する式（Ｉ）の化合物へと転化させる。

Ｒ²が水素又はチオール保護基である式（ＩＩ）の化合物は、以下の式（ＩＩＩ）の化合物又はその塩から、以下の式（ＩＶ）の化合物との反応によって製造することができる。

式中、Ｒ³はハロであり、Ｐ¹は後述のチオール保護基である。

式中、Ｒ¹は水素又はＣ_1-4アルキルであり、Ｒ⁴は、所望の式（ＩＩ）の化合物について定義した通りである。式（ＩＩＩ）の化合物と式（ＩＶ）の化合物とのカップリングは、無溶媒で或いはクロロベンゼン、トルエン又はキシレンのような高沸点非プロトン性溶媒の存在下で実施できる。この反応は昇温下、例えば５０〜２００℃、好ましくは約１６０℃で実施できる。反応後、保護基Ｐ¹を以下で説明する通り除去すればよい。

チオール基による適当な保護及び脱保護の方法論に関しては、例えばＰｒｏｔｅｃｔｉｎｇＧｒｏｕｐｓｉｎＯｒｇａｎｉｃＳｙｎｔｈｅｓｉｓ（ＴｈｅｏｄｏｒａＷ．ＧｒｅｅｎｅａｎｄＰｅｔｅｒＧ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，ｐｕｂｌｉｓｈｅｄｂｙＪｏｈｎＷｉｌｅｙ＆ＳｏｎｓＩｎｃ．）を参照されたい。適当なチオール保護基としては、ベンジル又はｐ−メトキシベンジルのようなアリールアルキル基が挙げられるが、これらは、放射性標識段階を実施する前に、ＡｌＣｌ₃のようなルイス酸などの酸処理によって除去することができる。

式（ＩＩＩ）の化合物と式（ＩＶ）の化合物からの式（ＩＩ）の化合物の合成を以下のスキーム１に示す。

式（ＩＩＩ）及び（ＩＶ）の化合物は、市販の出発材料から、スキーム１及び実施例に記載したのと同様の方法を用いて製造することができる。

Ｒ⁴が水素又はチオール保護基である式（ＩＩ）の化合物は、以下の式（Ｖ）の化合物から、以下の式（ＶＩ）との反応によって製造することができる。

式中、Ｒ¹は水素又はＣ_1-4アルキルであり、Ｐ²は上述のチオール保護基である。

式中、Ｒ³はハロであり、Ｒ²は所望の式（ＩＩ）の化合物について定義した通りである。式（Ｖ）の化合物と式（ＶＩ）の化合物のカップリングは、式（ＩＩＩ）の化合物と式（ＩＶ）の化合物とのカップリングについて説明したのと同様に実施できる。反応後に、Ｐ²を上述の通り除去すればよい。

この式（Ｖ）の化合物と式（ＶＩ）の化合物からの式（ＩＩ）の化合物の合成を以下のスキーム２に示す。

式（Ｖ）及び（ＶＩ）の化合物は、市販の出発材料から、スキーム２及び実施例に記載したのと同様の方法を用いて製造することができる。

以下の実施例によって本発明についてさらに説明するが、実施例では以下の略号を用いた。
ＨＰＬＣ：高速液体クロマトグラフィー
ＵＶ：紫外線
ＴＬＣ：薄層クロマトグラフィー
ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル
ＩＲ：赤外線
ｍｉｎ：分。

実施例１：Ｎ−（２−クロロ−５−フルオロメチルチオ）−フェニル−Ｎ′−（３−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジンの合成
実施例１（ｉ）：３−アミノ−４−クロロベンゼンチオールの合成

１０ｍｌ濃塩酸中の塩化スズ（ＩＩ）（１１．２６０ｇ、５９．４０ｍｍｏｌ）の冷却溶液（０℃）に、４−クロロ−３−ニトロ−ベンゼンスルホニルクロリド（１．６９０ｇ、６．６０ｍｍｏｌ）を数回に分けてゆっくりと添加した。得られた懸濁液を冷却したまま１５分間攪拌してから、混合物を１時間加熱還流した。混合物を室温に冷却した後、水（１００ｍｌ）で希釈し、ＮａＨＣＯ₃で慎重に中和した。水相をクロロホルム（４×５０ｍｌ）で抽出して有機相を分離し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥した。溶媒を減圧除去して、明黄色の固形物を得た。１：１クロロホルム／ヘキサンを移動相として用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーで、白色固体の３−アミノ−４−クロロベンゼンチオールを得た（０．６３２ｇ、６０％）。

¹ＨＮＭＲ δ（ＣＤＣｌ₃）７．０８（ｄ，１Ｈ，│Ｊ│＝８．５Ｈｚ，Ａｒ−Ｈ），６．６７（ｄ，１Ｈ，│Ｊ│＝２．０Ｈｚ，Ａｒ−Ｈ），６．５９（ｄｄ，１Ｈ，│Ｊ│＝８．５ａｎｄ２．０Ｈｚ，Ａｒ−Ｈ），４．０３（ｂｒｓ，２Ｈ，ＮＨ₂），３．３７（ｓ，１Ｈ，ＳＨ）。

実施例１（ｉｉ）：（５−ベンジルチオ−２−クロロ）−アニリン及び（５−ベンジルチオ−２−クロロ）−アニリンＨＣｌ塩の合成

無水テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）（１５ｍｌ）中の３−アミノ−４−クロロベンゼンチオール（０．６３０ｇ、３．９２ｍｍｏｌ）の冷却溶液（０℃）に、ｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中１．６Ｍ、２．４５ｍｌ、３．９２ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を迅速に攪拌した。この混合物に臭化ベンジル（０．４７ｍｌ、３．９２ｍｍｏｌ）をゆっくりと添加し、反応混合物を迅速に攪拌し、約１時間かけて室温に温めた。溶媒を減圧除去して粗生成物を得て、これを、１：１ジクロロメタン／ヘキサンを移動相として用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製した。明白色固体の（５−ベンジルチオ−２−クロロ）−アニリンを単離した（０．８０５ｇ、８２％）。

¹ＨＮＭＲ δ（ＣＤＣｌ₃）７．２６（ｍ，３Ｈ，フェニルＨ），７．２２（ｂｒｍ，２Ｈ，フェニルＨ），７．０９（ｄ，１Ｈ，│Ｊ│＝８．３Ｈｚ），６．６６（ｄ，１Ｈ，│Ｊ│＝１．９Ｈｚ），６．６１（ｄｄ，１Ｈ，│Ｊ│＝８．３ａｎｄ１．９Ｈｚ），４．０４（ｓ，２Ｈ，ＣＨ₂），４．０３（ｂｒｓ，２Ｈ，ＮＨ₂）。

無水ジエチルエーテル（１０ｍｌ）中の（５−ベンジルチオ−２−クロロ）−アニリン（０．８０５ｇ、３．２１ｍｍｏｌ）の冷却溶液（０℃）に、ジエチルエーテル（１Ｍ、５．０ｍｌ、５ｍｍｏｌ）中の無水塩酸の溶液をゆっくりと添加した。得られた沈殿を濾過して単離し、ジエチルエーテル（２×５ｍｌ）で洗浄し、減圧乾燥した。

白色固体の（５−ベンジルチオ−２−クロロ）−アニリンＨＣｌ塩がほぼ定量的な収率で得られた（０．８６５ｇ、９４％）。

実施例１（ｉｉｉ）：メチル−（３−メチルチオ−フェニル）−シアナミドの合成

無水ジエチルエーテル（１０ｍｌ）中の３−メチルチオ−アニリン（１．８５０ｇ、１３．３０ｍｍｏｌ）の冷却溶液（０℃）に、臭化シアノゲン（０．７０４ｇ、６．６５ｍｍｏｌ）のジエチルエーテル溶液（１０ｍｌ）を加えた。なお、臭化シアノゲンは毒性が非常に強いので注意を要する。得られた溶液を、室温で一晩攪拌した。得られた混合物を濾過して沈殿を除去し、ジエチルエーテル濾液を、１ＭのＨＣｌ（２０ｍｌ）及び食塩水（２０ｍｌ）で洗浄してから、溶媒を減圧除去して油状黄色残渣を得た。９５：５ジクロロメタン／酢酸エチルを用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーで粗生成物を精製して、ほぼ無色の油状物の（３−メチルチオ−フェニル）−シアナミドを得たが、これは放置すると結晶化した（０．５７０ｇ、５２％）。

火力乾燥したシュレンクフラスコに、窒素雰囲気中で、水素化ナトリウム（６０％鉱油溶液、０．１４ｇ、３．５ｍｍｏｌ）、３−メチルスルファニル−フェニル−シアナミド（０．４９３ｇ、３．００ｍｍｏｌ）及び無水ＴＨＦ（５ｍｌ）を仕込んだ。混合物を迅速に攪拌し、７０℃に約０．５時間加熱した。室温まで冷却したところで、ヨードメタン（０．３７ｍｌ、６．００ｍｍｏｌ）を滴下し、混合物を室温で一晩攪拌した。得られた無色透明の溶液を減圧濃縮してから、水（３０ｍｌ）及びジエチルエーテル（４０ｍｌ）を加えた。有機相を分離し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、ジエチルエーテル溶媒を減圧除去して粗残留物を得た。ジクロロメタンを移動相として用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーで標記化合物の薄黄色油状物を得た（０．３８８ｇ、７３％）。

¹ＨＮＭＲ δ（ＣＤＣｌ₃）７．２６（ｍ，１Ｈ，Ａｒ−Ｈ），６．９６（ｍ，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ），６．８１（ｍ，１Ｈ，Ａｒ−Ｈ），３．３１（ｓ，３Ｈ，ＮＣＨ₃），２．４８（ｓ，３Ｈ，ＳＣＨ₃）。

実施例１（ｉｖ）：Ｎ−（５−ベンジルチオ−２−クロロ）−フェニル−Ｎ′−（３−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジンＨＣｌ塩の合成

火力乾燥し、磁気攪拌子を入れた１０ｍｌ丸底フラスコに、メチル−（３−メチルチオ−フェニル）−シアナミド（０．１８５ｇ、１．０４ｍｍｏｌ）と（５−ベンジルチオ−２−クロロ）−アニリンＨＣｌ塩（０．２９７ｇ、１．０４ｍｍｏｌ）を加えた。フラスコを脱気し、窒素で３回充填してから、フラスコを窒素雰囲気中で密封し、１６０℃に３時間加熱した。室温まで冷却したところで、淡黄色の残留物を最低限の量のジクロロメタン（０．５〜１ｍｌ）に取り、ジクロロメタン中のメタノール溶液の０〜１０％勾配を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製した。溶媒を高真空下で減圧除去して、標記化合物のガラス状白色固体を得た（０．３５７ｇ、７４％）。

¹ＨＮＭＲ δ（ｄ₆−ＤＭＳＯ）９．７０（ｂｒｓ，１Ｈ，ＮＨ），８．０１（ｂｒｓ，１Ｈ，ＮＨ），７．３９−７．０８（ｍ，１１Ｈ，Ａｒ−Ｈ），７．０９（ｍ，１Ｈ，Ａｒ−Ｈ），４．２４（ｓ，２Ｈ，ＣＨ₂），３．３９（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ₃），２．４５（ｓ，３Ｈ，Ｓ−ＣＨ₃）。

実施例１（ｖ）：Ｎ−（２−クロロ−５−メルカプト）−フェニル−Ｎ′−（３−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジンＨＣｌ塩の合成

火力乾燥したシュレンクフラスコに、窒素雰囲気中で、塩化アルミニウム（０．２９３ｇ、２．２０ｍｍｏｌ）及び無水トルエン（５ｍｌ）を加えた。得られた懸濁液に、攪拌しながらＮ−（５−ベンジルチオ−２−クロロ）−フェニル−Ｎ′−（３−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジンＨＣｌ塩（０．２５０ｇ、０．５４ｍｍｏｌ）のトルエン溶液を加え、反応混合物を室温で２時間迅速に攪拌した。得られた混合物をメタノール（５ｍｌ）で希釈して、無色の均一溶液を得た。溶媒を減圧除去して、無色残留物を得て、これをジクロロメタン（３ｍｌ）に加えて濾過し、濾液を、ジクロロメタン中のメタノール溶液の０〜１０％の勾配を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製した。標記化合物のガラス状白色固体（０．１３０ｇ、６４％）を単離した。

Ｋ₂ＣＯ₃のアセトン溶液の存在下でＨＣｌ塩を加熱することによって遊離塩基の試料を製造し、ジクロロメタン中のメタノール溶液の０〜１０％の勾配を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製した。

¹ＨＮＭＲ δ（ＣＤＣｌ₃）７．２９（ｂｒｓ，１Ｈ，Ａｒ−Ｈ），７．２８（ｍ，１Ｈ，Ａｒ−Ｈ），７．１３（ｍ，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ），７．１１（ｄｍ，１Ｈ，Ａｒ−Ｈ），７．０６（ｄｄ，１Ｈ，Ａｒ−Ｈ），７．０１（ｄｍ，１Ｈ，Ａｒ−Ｈ），３．４８（ｂｒｓ，１Ｈ，ＳＨ），３．３６（ｓ，３Ｈ，ＮＣＨ₃），２．４９（ｓ，３Ｈ，ＳＣＨ₃）。

実施例１（ｖｉ）：Ｎ−（２−クロロ−５−フルオロメチルチオ）−フェニル−Ｎ′−（３−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジンの合成

火力乾燥したシュレンクフラスコに、窒素雰囲気中で、Ｎ−（２−クロロ−５−メルカプト）−フェニル−Ｎ′−（３−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジンＨＣｌ塩（０．０３７ｇ、０．１０ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．０２０ｇ、０．２０ｍｍｏｌ）及び無水ジクロロメタン（２〜３ｍｌ）を加え、氷浴で０℃に冷却した。フルオロブロモメタンガスを暗色反応混合物に３０秒間吹き込んでから、反応系を徐々に室温まで温めた。２時間後、得られた淡黄色溶液を、減圧濃縮し、粗残留物を得て、再度ジクロロメタン（１ｍｌ）に溶解して、ジクロロメタン中のメタノール溶液の０〜１０％の勾配を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製した。高真空で溶媒を減圧除去して、標記化合物の薄黄色油状物を得た（０．０２４ｇ、６８％）。

¹ＨＮＭＲ δ（ＣＤＣｌ₃）７．３２（ｍ，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ），７．２０（ｍ，１Ｈ，Ａｒ−Ｈ），７．１７（ｍ，１Ｈ，Ａｒ−Ｈ），７．１６−７．０６（ｍ，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ），７．０４（ｍ，１Ｈ，Ａｒ−Ｈ），５．７１（ｄ，２Ｈ，│Ｊ│＝５２．８Ｈｚ，ＣＨ₂Ｆ），３．４１（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ₃），２．５０（ｓ，３Ｈ，Ｓ−ＣＨ₃）。

実施例２：Ｎ−（２−クロロ−５−［ ¹⁸ Ｆ］フルオロメチルチオ）−フェニル−Ｎ′−（３−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジン
［¹⁸Ｆ］フルオロブロモメタンをハロアルキル化剤として使用し、無水アセトニトリルを溶媒として使用し、炭酸セシウムを塩基として使用した以外は、実施例１（ｖｉ）と同様の方法で標記化合物を製造した。生成物の同定は、実施例１（ｖｉ）で製造した標準試料とＮ−（２−クロロ−５−［¹⁸Ｆ］フルオロメチルチオ）−フェニル−Ｎ′−（３−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジンとのＨＰＬＣ共溶出によって確認した。

ＨＰＬＣ法
ＨＰＬＣ分析条件を試験したところ、前駆体であるＮ−（２−クロロ−５−チオ）フェニル−Ｎ′−３′−（メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジンと、参照標準であるＮ−（２−クロロ−５−フルオロメチルチオ）−フェニル−Ｎ′−（３−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジンとの最も効率的なクロマトグラフィー分離は以下の通りであった：５μ−ＬｕｎａＣ−１８（２）カラム（２５０×４．６ｍｍ）、ＭＰ５５／４５アセトニトリル／０．０１Ｍ（ＮＨ₄）₂ＨＰＯ₄、流速１ｍｌ／分、ＵＶ２５４ｎｍ。Ｎ−（２−クロロ−５−フルオロメチルチオ）−フェニル−Ｎ′−（３−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジンの保持時間が９．７０分であったのに対して、Ｎ−（２−クロロ−５−チオ）フェニル−Ｎ′−３′−（メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジン前駆体の保持時間は２０．０分であった。

実施例３：Ｎ−（２−クロロ−５−（２−フルオロ−エチルチオ））−フェニル−Ｎ′−（３−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジンの合成

火力乾燥し、磁気攪拌子を入れたシュレンクフラスコに、Ｎ−（２−クロロ−５−メルカプト）−フェニル−Ｎ′−（３−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジンＨＣｌ塩（０．０３０ｇ、０．０８ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（０．０２２ｇ、０．１６ｍｍｏｌ）、無水アセトン（２ｍｌ）を仕込んだ。アセトン（１ｍｌ）中の２−フルオロエチルトシレート（０．０１７ｇ、０．０８０ｍｍｏｌ）の溶液を上記混合物に加え、反応系を窒素雰囲気中で３日間加熱乾留した。室温まで冷却した後、溶媒を減圧除去し、残留物をジクロロメタン（１ｍｌ）に再度溶解した。ジクロロメタン中のメタノール溶液の０〜１０％の勾配を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、標記化合物の薄黄色油状物を得た（０．０２１ｇ、６８％）。

¹ＨＮＭＲ δ（ＣＤＣｌ₃）７．３０（ｍ，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ），７．１９（ｂｒｍ，１Ｈ，Ａｒ−Ｈ），７．１３（ｂｒｍ，３Ｈ，Ａｒ−Ｈ），６．９４（ｍ，１Ｈ，Ａｒ−Ｈ），４．５３（ｄｔ、２Ｈ，│Ｊ│＝６．６ａｎｄ４７．０Ｈｚ、ＣＨ₂Ｆ），３．４１（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ₃），３．１２（ｄｔ、２Ｈ，│Ｊ│＝６．６ａｎｄ２０．５Ｈｚ），２．５１（ｓ，３Ｈ，Ｓ−ＣＨ₃）。

実施例４：Ｎ−（２−クロロ−５−（２−［ ¹⁸ Ｆ］フルオロ−エチルチオ））−フェニル−Ｎ′−（３−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジンの合成
２−［¹⁸Ｆ］フルオロエチルトシレートをハロアルキル化剤として使用し、無水アセトニトリル／エタノールの１：２混合物を溶媒として使用し、炭酸セシウムを塩基として使用した以外は、実施例３と同様の方法で標記化合物を製造した。生成物の同定は、実施例３で製造した標準試料とＮ−（２−クロロ−５−［¹⁸Ｆ］フルオロメチルチオ）−フェニル−Ｎ′−（３−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジンのＨＰＬＣ共溶出によって確認した。

ＨＰＬＣ法
ＨＰＬＣ分析条件を試験したところ、前駆体であるＮ−（２−クロロ−５−チオ）フェニル−Ｎ′−３′−（メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジンと、参照標準であるＮ−（２−クロロ−５−（２−フルオロ−エチルチオ））−フェニル−Ｎ′−（３−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジンとの最も効率的なクロマトグラフィー分離は以下の通りであった：５μ−ＬｕｎａＣ−１８（２）カラム（２５０×４．６ｍｍ）、ＭＰ５５／４５アセトニトリル／０．０１Ｍ（ＮＨ₄）₂ＨＰＯ₄、流速１ｍｌ／分、ＵＶ２５４ｎｍ。Ｎ−（２−クロロ−５−フルオロエチルチオ）−フェニル−Ｎ′−（３−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジンの保持時間が９．４０分であったのに対して、Ｎ−（２−クロロ−５−チオ）フェニル−Ｎ′−３′−（メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジン前駆体の保持時間は２０．０分であった。

実施例５：Ｎ−（２−クロロ−５−（２−［ ¹¹ Ｃ］エチルチオ））−フェニル−Ｎ′−（３−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジンの合成
２−［¹¹Ｃ］ヨードエタンをハロアルキル化剤として使用した以外は、実施例６と同様の方法で標記化合物を製造した。

実施例６：Ｎ−（２−クロロ−５−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−（３−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジンの合成

磁気攪拌子を入れた丸底フラスコに、ナトリウムメトキシド（１．４ｍｇ、２６．６μｍｏｌ）、Ｎ−（２−クロロ−５−メルカプト）−フェニル−Ｎ′−（３−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジンＨＣｌ塩（５．０ｍｇ、１３．３μｍｏｌ）及び無水メタノール（１ｍｌ）を加えた。反応混合物を、窒素雰囲気中で５分間迅速に攪拌してから、混合物をさらにヨードメタン（１．８μｌ、３０μｍｏｌ）で処理した。室温で１５分間攪拌した後、溶媒を減圧除去し、残留物をＨＰＬＣで分析した。

実施例７：Ｎ−（２−クロロ−５−［ ¹¹ Ｃ］メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−（３−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジンの合成
［¹¹Ｃ］ヨードメタンをメチル化剤として使用した以外は、実施例６と同様の方法で標記化合物を製造した。

実施例８：Ｎ−（２−クロロ−５−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−（３−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジンの合成
実施例８（ｉ）：２−クロロ−５−（メチルチオ）アニリン塩酸塩の合成
ｔ−ブタノール（２０ｍＬ）中の２−クロロ−５−（メチルチオ）安息香酸（５ｇ、２４．６７ｍｍｏｌ）の溶液に、攪拌しながら、トリエチルアミン（５．２５ｍＬ、３７．８ｍｍｏｌ）を加えた。短時間攪拌した後、ジフェニルリン酸アジド（６ｍＬ、２７．６０ｍｍｏｌ）を、滴下した。反応混合物を徐々に加熱して、６時間加熱還流し、室温に冷却した。溶媒を減圧除去し、粗反応混合物をテトラヒドロフラン（１２．５ｍＬ）に溶解し、その後、１２．５ｍＬトリフルオロ酢酸（１：１）を加えた。反応混合物を６時間加熱還流し、室温に冷却後、溶媒を蒸発させた。反応混合物を、氷水浴で冷却しながら、ＮａＯＨ（２５％）で処理して、ｐＨを１２とした。生成物を酢酸エチル（４×２５ｍＬ）で繰返し抽出し、有機層を水（１０ｍＬ）で洗浄した。抽出物を一つにまとめ、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、減圧濃縮して、黄色油状物を得た。生成物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ₂、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ勾配）で精製し、回収した試料をエーテルに溶解し、ＨＣｌ／エーテル（１０ｍＬ、１Ｍ）で処理して白色結晶を得た。標記生成物は白色固体であった（３．７３ｇ、８７％収率）。融点：１８０−１８１℃、ＴＬＣ：ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（９：１）、Ｒ^f＝０．５１、ＭＳ（ＣＩ）ｍ／ｅ１７４（Ｍ＋１ｆｏｒＣ₇Ｈ₈ＣｌＮＳ）ａｎｄｍ／ｅ１９１（Ｍ＋ＮＨ₃）、¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ（ｐｐｍ）７．２−６．７（ｍ，３Ｈ，Ａｒ−Ｈ）、２．５（ｓ，３Ｈ，Ｓ−ＣＨ₃）。

実施例８（ｉｉ）：３−（ベンジルチオ）アニリンの合成
水（４ｍｌ）中の水酸化ナトリウム（２．１ｇ、５２．５ｍｍｏｌ）溶液を氷浴で冷却しながら攪拌し、これに、エタノール（２０ｍｌ）中の３−アミノチオフェノール（４．８ｇ、３８．４ｍｍｏｌ）の溶液を滴下し、その後、エタノール（５ｍｌ）中の塩化ベンジル（５ｇ、３９．５ｍｍｏｌ）溶液を加えた。添加後、反応混合物を室温で４時間攪拌して、白色沈殿を有する褐色溶液を得た。濾過で沈殿を除去した後、濾液を濃縮して、残留物をジクロロメタン（４０ｍｌ）に加えた。このジクロロメタン溶液を、水酸化ナトリウム水溶液で３回（０．５Ｍ、３×４０ｍｌ）、水で１回（４０ｍｌ）洗浄した。ＭｇＳＯ₄で乾燥し、濾過した後、ジクロロメタン溶液を減圧濃縮し、粗生成物である濃黄色の油状物を得た。この粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ₂、ヘキサン／ＣＨ₂Ｃｌ₂、０−１００％）でさらに精製して３−（ベンジルチオ）アニリン（６．７７ｇ、８２％）の薄黄色油状物を得たが、これを室温で放置すると固化して白色固体となった。薄層クロマトグラフィー：ジクロロメタン、Ｒ^f＝０．３７、¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ（ｐｐｍ）６．６−７．４（ｍ，９Ｈ，Ａｒ−Ｈ）、４．１５（ｓ，２Ｈ，Ｓ−ＣＨ₂）。

実施例８（ｉｉｉ）：３−（ベンジルチオ）フェニルシアナミドの合成
無水ジエチルエーテル（１０ｍｌ）中の臭化シアノゲン（１．４２ｇ、１３．４ｍｍｏｌ）の溶液を、無水ジエチルエーテル（２５ｍｌ）中の３−（ベンジルチオ）アニリン（４．６ｇ、２１．４ｍｍｏｌ）の溶液に０〜４℃で攪拌しながらゆっくりと添加した。添加後、反応混合物を室温で１２時間攪拌したところ、白色沈殿を有する褐色溶液を得た。沈殿を濾別し、濾液をＨＣｌ水溶液（１Ｍ、３×４０ｍｌ）で洗浄し、さらに食塩水（４０ｍｌ）で洗浄した。エーテル溶液をＭｇＳＯ₄で乾燥し、濾過し、減圧濃縮して、黄色油状粗生成物を得た。この粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ₂、ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＥｔＯＡｃ、０〜２０％）でさらに精製して３−（ベンジルチオ）フェニルシアナミド（２．８２ｇ、収率５５％）の白色固体を得た。ＴＬＣ：ジクロロメタン／ＥｔＯＡｃ（９３：７）、Ｒ^f＝０．６４、¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ（ｐｐｍ）７．２−６．７（ｍ，９Ｈ，Ａｒ−Ｈ）、４．１２（ｓ，２Ｈ，Ｓ−ＣＨ₂）．ＩＲ（ＫＢｒ）：３１７８ｃｍ^-1（第二級Ｎ−Ｈ）、３０２３−３０８５ｃｍ^-1（Ｃ−Ｈ芳香族伸縮）、２２２７ｃｍ^-1（ＣＮ）。

実施例８（ｉｖ）：３−（ベンジルチオ）フェニル−Ｎ−メチルシアナミドの合成
アセトニトリル（８ｍＬ）中の３−（ベンジルチオ）フェニルシアナミド（０．８０ｇ、３．３３ｍｍｏｌ）の溶液に、ジイソプロピルエチルアミン（０．６５ｇ、５．０ｍｍｏｌ）を加え、その後、ヨウ化メチル（０．９４ｇ、６．６６ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、８０〜８５℃で、３時間還流させた。溶媒の除去後、残留物をジクロロメタン（４０ｍｌ）に加え、有機溶液を水（４０ｍｌ）で洗浄した。ＭｇＳＯ₄で乾燥、濾過後に、ジクロロメタン溶液を減圧濃縮して、粗生成物の黄色油状物を得た。この粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ₂、ヘキサン／ＣＨ₂Ｃｌ₂、５０％〜１００％）で精製して、３−（ベンジルチオ）フェニル−Ｎ−メチルシアナミドの薄黄色油状物を得た（０．６７、収率８０％）。ＣＨ₂Ｃｌ₂、Ｒ^f＝０．４５、¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ（ｐｐｍ）７．３−６．８（ｍ，９Ｈ，Ａｒ−Ｈ）、４．０６（ｓ，Ｓ−ＣＨ₂、２Ｈ）、３．５７（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ₃）。

実施例８（ｖ）：Ｎ−（２−クロロ−５−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−３′−（ベンジルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジンの合成
水冷却器を装着した２５ｍｌフラスコを乾燥し、このフラスコに、３−（ベンジルチオ）フェニル−Ｎ−メチルシアナミド（０．６５ｇ、２．５６ｍｍｏｌ）、２−クロロ−５−（メチルチオ）アニリン塩酸塩（０．５４ｇ、２．５６ｍｍｏｌ）及び１ｍｌのクロロベンゼンを加えた。次に、フラスコに窒素ガスを吹き込み、攪拌しながら１５０℃に３時間加熱した。反応混合物を室温に冷却した。減圧下でクロロベンゼンを除去すると、粗生成物である粘稠なガラス状油が残った。この粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ₂、ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨ、０−２０％）で精製して、グアニジン塩酸塩（０．９ｇ、収率８５％）を固形分として得た。薄層クロマトグラフィー：ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨ（９：１）、Ｒ^f＝０．３４、¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ（ｐｐｍ）６．８−７．３（ｍ，１２Ｈ，Ａｒ−Ｈ）、４．０６（ｓ，Ｓ−ＣＨ₂、２Ｈ）、３．５７（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ₃）、２．３５（ｓ，３Ｈ，Ｓ−ＣＨ₃）。

実施例８（ｖｉ）：Ｎ−（２−クロロ−５−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−３′−チオフェニル−Ｎ′−メチルグアニジンの合成
乾燥した２５ｍｌフラスコに、窒素保護下で、三塩化アルミニウム（１２５ｍｇ、０．９４ｍｍｏｌ）を加え、次に、トルエン（２ｍｌ）中のＮ−（２−クロロ−５−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−３′−（ベンジルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジン（１００ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）の溶液を滴下した。混合物を、窒素雰囲気中で、室温で一晩攪拌した。反応を酢酸（０．５ｍｌ）で奪活し、減圧濃縮して、粗生成物の粘稠油を得た。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ₂、ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨ、０−２０％）で精製して、標記生成物（７０ｍｇ、収率９６％）のガラス状固形物を得た。ＴＬＣ：ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨ（９：１）、Ｒ^f＝０．１４、¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ（ｐｐｍ）６．８−７．３（ｍ，７Ｈ，Ａｒ−Ｈ）、３．３５（ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ₃）、２．４（ｓ，３Ｈ，Ｓ−ＣＨ₃）。

実施例８（ｖｉｉ）：Ｎ−（２−クロロ−５−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−（３−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジンの合成
ＨＰＬＣ法
ＨＰＬＣ分析条件を試験したところ、前駆体であるＮ−（２−クロロ−５−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−３′−チオフェニル−Ｎ′−メチルグアニジン及びＮ−（２−クロロ−５−チオ）フェニル−Ｎ′−３′−（メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジンと、参照標準であるＮ−（２−クロロ−５−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−３′−（メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジンとの最も効率的なクロマトグラフィー分離は以下の通りであった：μ−ＢｏｎｄａｐａｋＣ−１８カラム（３００×７．８ｍｍ）、ＭＰ６０／４０アセトニトリル／０．０５Ｍ（ＮＨ₄）₂ＨＰＯ₄、流速２ｍｌ／分、ＵＶ２５４ｎｍ。Ｎ−（２−クロロ−５−メチルチオ）フェニル−Ｎ′−（３−メチルチオ）フェニル−Ｎ′−メチルグアニジンの保持時間が１１．８１分であったのに対して、３′−デスメチルチオ−及び５−デスメチルチオ前駆体の保持時間は、それぞれ、６．６５分及び６．０１分であった。

Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド又は無水エタノール（２５０〜３５０μｌ）中にＮ−（２−クロロ−５−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−３−チオフェニル−Ｎ′−メチルグアニジン（０．５〜０．８ｍｇ）及びカリウムブトキシド（０．５−１．０ｍｇ、前駆体に対して２〜４当量）を含む溶液に、ヨウ化メチル（０．３〜０．６ｍｇ、前駆体に対して１〜２当量）を加えた。得られた混合物を室温で５分間攪拌し、その後、１００μｌのＨＰＬＣ移動相（０．０５Ｍの（ＮＨ₄）₂ＨＰＯ₄）を加えて奪活した。反応混合物を分取し、分析用のＨＰＬＣカラムに注入した。ＨＰＬＣ分析で得られた結果から、溶媒として使用したのがＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドであっても、エタノールであっても、検討したすべての実験で標記の生成物が７５％を超える収率で精製されたこと、化学反応は十全かつ一貫して進行したこと、標記の生成物とそのデスメチルチオ前駆体との間の分離効率はホットケミストリーでの準調製用分離に十分であったことが判明した。

実施例９：Ｎ−（２−クロロ−５−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−（３−［ ¹¹ Ｃ］メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジンの合成
［¹¹Ｃ］ＣＯ₂を水素化リチウムアルミニウムを用いて還元し、その後、ヨウ化水素酸を用いてヨウ化し、蒸留することによって製造した［¹¹Ｃ］ヨウ化メチルを、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３００μｌ）中にＮ−（２−クロロ−５−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−３−チオフェニル−Ｎ′−メチルグアニジン（０．５ｍｇ）とカリウムブトキシド（０．８ｍｇ）を含む溶液が入ったバイアル瓶に入れた。標識のための化学反応を、室温で５分間実施し、反応混合物を、１００μｌのＨＰＬＣの移動相（０．０５Ｍ（ＮＨ₄）₂ＨＰＯ₄）を加えることによって奪活した。反応混合物から試料を分取し、放射活性ＨＰＬＣシステムに注入した。分析は、実施例８で使用したクロマトグラフィー条件と同じ条件を用いて実施した。保持時間１１．８１分で溶出した放射能ピークが標記生成物であることは、同一分析条件で非放射性参照標準との共溶出によって確認した。［¹¹Ｃ］ヨウ化メチルに基づく標記生成物の崩壊補正放射化学収率は９０％超であった。［¹¹Ｃ］ＣＯ₂から開始した放射合成の合計時間は、サイクロトロン照射終了後２０分以内であった。

生体実験例
Ｎ−（２−クロロ−５−（２−［ ¹⁸ Ｆ］フルオロ−エチルチオ））−フェニル−Ｎ′−（３−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジンの体内分布データ
材料及び方法
Ｎ−（２−クロロ−５−（２−［¹⁸Ｆ］フルオロ−エチルチオ））−フェニル−Ｎ′−（３−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジンは実施例４（合成製剤：０．９％ｗ／ｖ生理食塩水中約３％エタノール）にしたがって製造し、その放射化学純度は約９９％であり、注射時の比放射能は４〜１６ＧＢｑ／ｎｍｏｌであった。体内分布及び血液データは、成熟雄スプラーグドーリー（ＳＤ）ラット１１匹（体重２６〜３２９ｇ、平均±標準偏差＝３００±１８ｇ）から得た。Ｎ−（２−クロロ−５−（２−［¹⁸Ｆ］フルオロ−エチルチオ））−フェニル−Ｎ′−（３−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジンを、イソフルラン麻酔下で、各ラットの尾静脈に直接注射した。次に、各ラットを麻酔から覚ました。注射後所定の時点で、ラットを麻酔下で頸椎脱臼によって屠殺し、脳及び体組織試料を迅速に採取した。

体内分布
データは２回の合成標品を用いて得た。ラットに、尾静脈から直接静脈注射を行うことによって、平均約８６ＭＢｑ（実験１日目は８５．３ＭＢｑ、実験２日目は８７．３ＭＢｑ）、容積０．２０ｍｌ（合成製剤：約３％アルコール）を投与した。同時に注射したＮ−（２−クロロ−５−（２−［¹⁸Ｆ］フルオロ−エチルチオ））−フェニル−Ｎ′−（３−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジンの量は０．７〜２．９ｎｍｏｌ／ｋｇの範囲とした。方法の詳細並びに試料の処理及び計数方法については、Ｈｕｍｅｅｔａｌ．，Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．（１９９１）１８：３３９−３５１を参照されたい。データは注射放射能及び体重について以下の通り正規化した。

「取込単位」＝（ｃｐｍ／ｇ湿重量組織）・（注射ｃｐｍ／ｇ体重）^-1
結果
放射能濃度のデータも、表１（末梢組織）及び表２（脳）で照合してある。代謝実験は行わなかったので、全放射能のどの程度の割合が、親Ｎ−（２−クロロ−５−（２−［¹⁸Ｆ］））−フェニル−Ｎ′−（３−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジンに付随する標識を反映しているのかは不明である。なお、血液及び血漿試料は、死後に、心臓心室から採取した。

体内分布
データを表１にまとめて示す。試料として採取した組織のうち、骨格筋、皮膚及び精巣は初期含量が約０．４取込単位と少なく、この傾向は実験を通して続いた。骨は、初期取込み量が１．４と高かったが、９０分間の実験で約０．８に下がり、脱フッ素化の形跡はみられなかった。初期取込み量が高かったのは肺（約３０取込単位）で、この値は９０分で２取込単位まで急激に減少した。同様のプロファイルが腎臓及び心臓で観察された。ゆっくりとした放射能の低下は肝臓、脾臓及び腸でみられた。

表１
Ｎ−（２−クロロ−５−（２−［¹⁸Ｆ］フルオロ−エチルチオ））−フェニル−Ｎ′−（３−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジン静注後の経過時間の関数としての、ラットの末梢機関及び体液中の放射能分布。血液の容積に関しては未補正である。データの単位は「取込単位」である。組織は以下の番号で示す。１：骨、２：骨格筋、３：皮膚、４：尿、５：脂肪、６：精巣、７：小腸、８：小腸内容物、９：大腸、１０：大腸内容物、１１：脾臓、１２：肝臓、１３：腎臓、１４：胃、１５：肺、１６：心臓（心室）。比較ため、同じ試料時間での血漿データ（１７）も示す。

脳内分布
データを表２にまとめて示す。いずれの組織も、放射性リガンド静注２分後に約４取込単位という比較的高い初期取込み量を示した。活性はその後次第に低減し、放射性リガンド静注９０分後に約０．４取込単位となった。小脳に比して弱い信号が海馬及び皮質で得られ、最初の４０分間で約０．８から１．３に上昇し、その後９０分までに１まで減少した。

Ｎ−（２−クロロ−５−（２−［¹⁸Ｆ］フルオロ−エチルチオ））−フェニル−Ｎ′−（３−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジンの末梢からのクリアランスは、腎臓から尿の経路並びに腸の経路で進行した。ラット脳は、Ｎ−（２−クロロ−５−（２−［¹⁸Ｆ］フルオロ−エチルチオ））−フェニル−Ｎ′−（３−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジンの静注後の最も早い試料採取時点（２分）で、高い取込みを示した。示差的な不均一性の検出は受容体が生理的に「閉鎖」又は休止状態にあったため困難であった。小脳の保持率は約６０分後に最低となったが、小脳の放射能と比較してデータを表示したところ、弱い信号が海馬（ＮＭＤＡ受容体密度が高いことが知られている領域。Ｂｏｗｅｒｙｅｔａｌ．，（１９８８）Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．９３：９４４−９５４参照）でみられた。

表２
Ｎ−（２−クロロ−５−（２−［１８Ｆ］フルオロ−エチルチオ））−フェニル−Ｎ′−（３−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジン静注後の経過時間の関数としての、ラットの脳組織中の放射能分布。データの単位は「取込単位」である。アステリスク（*）は、各時間点でのラット２〜３匹の平均値であることを示す。ｎ＝３については、平均±標準偏差を示す。他の値は、いずれも各時間点についてラット１匹を使用したものである。組織は以下の番号で示す。１：嗅脳、２：嗅内皮質、３：視床下部、４：視床、５：前頭前野、６：線条体、７：体性感覚皮質、８：海馬、９：後頭皮質、１０：下丘、１１：上丘、１２：橋延髄体、１３小脳。この表でも、血液のデータ（１８）との比較のため、血漿データ（１７）も示す。

Claims

次の式（Ｉ）の化合物又はその塩もしくは溶媒和化合物。

式中、Ｒ¹は水素又はＣ_1-4アルキルであり、Ｒ²及びＲ⁴は、Ｒ²及びＲ⁴の少なくとも一方が［¹¹Ｃ］−Ｃ_1-4アルキル又は［¹⁸Ｆ］−Ｃ_1-4フルオロアルキルであることを条件として、各々独立にＣ_1-4アルキル、［¹¹Ｃ］−Ｃ_1-4アルキル及び［¹⁸Ｆ］−Ｃ_1-4フルオロアルキルから選択され、Ｒ³はハロである。
次の式（Ｉａ）である、請求項１記載の化合物又はその塩もしくは溶媒和化合物。

式中、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³及びＲ⁴は請求項１で定義した通りである。
Ｎ−（２−クロロ−５−［¹⁸Ｆ］フルオロメチルチオ）−フェニル−Ｎ′−（３−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジン、Ｎ−（２−クロロ−５−（２−［¹⁸Ｆ］フルオロエチルチオ））−フェニル−Ｎ′−（３−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジン、Ｎ−（２−クロロ−５−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−（３−［¹⁸Ｆ］フルオロメチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジン、Ｎ−（２−クロロ−５−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−（３−（２−［¹⁸Ｆ］フルオロエチルチオ））−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジン、Ｎ−（２−クロロ−５−［¹¹Ｃ］メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−（３−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジン、Ｎ−（２−クロロ−５−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−（３−［¹¹Ｃ］メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジン、Ｎ−（２−クロロ−５−［¹¹Ｃ］エチルチオ）−フェニル−Ｎ′−（３−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジン及びＮ−（２−クロロ−５−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−（３−［¹¹Ｃ］エチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジンから選択される請求項１又は請求項２記載の化合物又はその塩もしくは溶媒和化合物。
ＰＥＴのようなインビボ診断又は撮像法に用いるための請求項１乃至請求項３のいずれか１項記載の化合物。
ＮＭＤＡ介在性疾患のインビボ診断又は撮像用の放射性医薬品の製造における請求項１乃至請求項３のいずれか１項記載の化合物の使用。
請求項１乃至請求項３のいずれか１項記載の化合物と薬学的に許容される賦形剤とを含んでなる放射性医薬製剤。
請求項１乃至請求項３のいずれか１項記載の化合物を投与することを含んでなる、被検体、好ましくはヒトにおけるＮＭＤＡ介在性疾患のインビボ診断又は撮像方法。
次の式（ＩＩ）の化合物又はその塩。

式中、Ｒ²及びＲ⁴の一方は水素、又はベンジルのようなチオール保護基であって、もう一方が水素、Ｃ_1-4アルキル、又はベンジルのようなチオール保護基であり、Ｒ¹は水素又はＣ_1-4アルキルであり、Ｒ³はハロである。
Ｎ−（５−ベンジルチオ−２−クロロ）−フェニル−Ｎ′−（３−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジン、Ｎ−（２−クロロ−５−メルカプト）−フェニル−Ｎ′−（３−メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジン、Ｎ−（２−クロロ−５−（メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−３′−（ベンジルチオ）−フェニル−Ｎ′−メチルグアニジン及びＮ−（２−クロロ−５−（メチルチオ）−フェニル−Ｎ′−３′−チオフェニル−Ｎ′−メチルグアニジンから選択される請求項８記載の式（ＩＩ）の化合物又はその塩。
以下の式（Ｉ）の化合物又はその塩もしくは溶媒和化合物の製造方法であって、以下の式（ＩＩ）の化合物の反応を（ｉ）すべてのチオール保護基の除去、及び（ｉｉ）塩基存在下、適当な溶媒中での適当なアルキルハライド［¹¹Ｃ］−Ｃ_1-4アルキルＸ又は［¹⁸Ｆ］−Ｃ_1-4フルオロアルキル−Ｙ（式中、Ｘ及びＹは各々独立にハロ、好ましくはクロロ、ヨード又はブロモ、或いはアリール又はアルキルスルホネート、例えばトシレート、トリフレート又はメシレートのような他の適当な脱離基である。）との反応によって行うことを含んでなる方法。

式（Ｉ）中、Ｒ¹は水素又はＣ_1-4アルキルであり、Ｒ²及びＲ⁴は、Ｒ²及びＲ⁴の少なくとも一方が［¹¹Ｃ］−Ｃ_1-4アルキル又は［¹⁸Ｆ］−Ｃ_1-4フルオロアルキルであることを条件として、各々独立にＣ_1-4アルキル、［¹¹Ｃ］−Ｃ_1-4アルキル及び［¹⁸Ｆ］−Ｃ_1-4フルオロアルキルから選択され、Ｒ³はハロである。

式（ＩＩ）中、Ｒ²及びＲ⁴の一方は水素、又はベンジルのようなチオール保護基であって、もう一方が水素、Ｃ_1-4アルキル、又はベンジルのようなチオール保護基であり、Ｒ¹は水素又はＣ_1-4アルキルであり、Ｒ³はハロである。
請求項８又は請求項９記載の式（ＩＩ）の化合物を含んでなる、放射性医薬製剤製造用のキット。