JP2008096245A - 生体標本の処理方法及び解析方法 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】細胞または組織を含む生体標本上に多孔質体によって構成される薄膜を接触させ、該薄膜の非接触面側より、インクジェットで標本の特定の領域に試薬溶液を供給することにより、前記生体標本表面内の細胞レベルでの領域内に限定して前記試薬の供給、保持および反応生成を行う生体標本の試薬処理方法。さらに、生体標本の画像情報を読み取り位置情報を記録し、当該画像情報に合わせて特定の領域に上記試薬処理方法を行った後、顕微鏡観察または質量分析によって解析する、生体標本の解析方法。
【選択図】図1
Description
該薄膜の非接触面側にインクジェットで少なくとも1種類以上の試薬を含む溶液を吐出し、該溶液を該薄膜の細孔を通じて前記生体標本の特定の領域に供給する工程と、を有し、
前記多孔質体の細孔の径が前記生体標本に含まれる細胞の径より小さいことにより、細胞レベルで区別して試薬を供給することを可能とする、生体標本への試薬供給方法である。
さらに、前記試薬溶液を前記特定の領域に保持して反応生成を行う工程を有する、
細胞レベルで区別して試薬処理することを可能とする、生体標本の試薬処理方法である。
さらに、試薬処理した特定の領域を顕微鏡観察または質量分析によって解析する工程を有する、
細胞レベルでの標的物質の位置情報の解析を可能とする、生体標本の解析方法である。
[TOF−SIMSの測定条件]
装置 ION TOF社製TOF−SIMS 5
<一次イオン>
一次イオン:25kV,Bi3 +,9.6ps
一次イオンのパルス周波数:2.5kHz(400μs/shot)
一次イオンパルス幅:2ns
一次イオンビーム径:5μm
<二次イオン>
二次イオン検出モード:positive
測定領域:100×100μm
二次イオンimageのpixel数:128×128
積算回数:256
10 細孔中に分注された酵素溶液
11 病変細胞
12 正常細胞
13 酵素溶液インクジェット供給領域
14 多孔質体
15 生体試料
16 酵素による分解物の質量ピーク強度を示すシグナル
Claims (8)
- 細胞または組織を含む生体標本上に、多孔質体によって構成される薄膜を接触させる工程と、
該薄膜の非接触面側にインクジェットで少なくとも1種類以上の試薬を含む溶液を吐出し、該溶液を該薄膜の細孔を通じて前記生体標本の特定の領域に供給する工程と、を有し、
前記多孔質体の細孔の径が前記生体標本に含まれる細胞の径より小さいことにより、細胞レベルで区別して試薬を供給することを可能とする、生体標本への試薬供給方法。 - 前記薄膜を構成する多孔質体の細孔が、該薄膜を略垂直方向に貫通していること、を特徴とする請求項1に記載の生体標本への試薬供給方法。
- 前記薄膜を構成する多孔質体の細孔の径が、10nmから10μmの間であること、を特徴とする請求項1または2に記載の生体標本への試薬供給方法。
- 前記試薬の少なくとも1種が、前記生体標本に含まれる細胞または組織中の標的物質と、化学的もしくは生物学的に反応する化合物、及び/または特異的に結合する物質である、請求項1乃至3のいずれかに記載の生体標本への試薬供給方法。
- 前記標的物質と特異的に結合する物質の少なくとも1種が、ポリペプチドからなる生体物質、及び/または該生体物質と同様もしくは類似の結合能を有する類似化合物である、請求項4に記載の生体標本への試薬供給方法。
- 前記生体標本の画像情報を読み取り位置情報を記録する工程を更に有し、
前記画像情報に合わせて前記特定の領域にインクジェットで試薬を供給することを特徴とする請求項1乃至5のいずれかに記載の生体標本への試薬供給方法。 - 請求項1乃至6のいずれかに記載の方法により生体標本の特定の領域に試薬溶液を供給し、
さらに、前記試薬溶液を前記特定の領域に保持して反応生成を行う工程を有する、
細胞レベルで区別して試薬処理することを可能とする、生体標本の試薬処理方法。 - 請求項7に記載の試薬処理方法により生体標本の特定の領域を処理し、
さらに、試薬処理した特定の領域を顕微鏡観察または質量分析によって解析する工程を有する、
細胞レベルでの標的物質の位置情報の解析を可能とする、生体標本の解析方法。
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