JP2007119436A - 肝疾患治療用又は予防用の血中滞留型多相エマルション製剤及びその製造方法 - Google Patents
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Abstract
【課題】代謝・消失速度が非常に速く、重篤な副作用の危険も大きい生理活性物質の薬効向上を図るため、生体への安全性が高い乳化型キャリア（運搬体）を使って標的細胞組織部位にターゲッティングできる新しい製剤を開発する。
【解決手段】本発明の肝実質細胞を標的とするキャリアには、１）５０〜３００ｎｍの粒径、２）細網内皮系（RES）回避、３）レセプターと特異的に結合する分子鎖（ターゲッティングリガンド）を利用したターゲッティングの三位一体となる機能が必要である。１）については画期的なS/OサスペンションとS/O/Wエマルションの調製技術を見出したことにより、２）は乳化製剤に適した自己配向型RES回避誘導物質を探索し、その導入技術を開発したことにより、３）は乳化製剤に適した自己配向型肝実質細胞指向性物質を探索し、その導入技術を開発したことにより解決する。
【選択図】図１
【解決手段】本発明の肝実質細胞を標的とするキャリアには、１）５０〜３００ｎｍの粒径、２）細網内皮系（RES）回避、３）レセプターと特異的に結合する分子鎖（ターゲッティングリガンド）を利用したターゲッティングの三位一体となる機能が必要である。１）については画期的なS/OサスペンションとS/O/Wエマルションの調製技術を見出したことにより、２）は乳化製剤に適した自己配向型RES回避誘導物質を探索し、その導入技術を開発したことにより、３）は乳化製剤に適した自己配向型肝実質細胞指向性物質を探索し、その導入技術を開発したことにより解決する。
【選択図】図１
Description
本発明は、肝疾患治療用又は予防用の血中滞留型多相エマルション製剤及びその製造方法に関する。特に、細網内皮系を効率的に回避しながら肝実質細胞に特異的に生理活性物質を送達し得る機能性乳化製剤に関する。
極めて低濃度で生体の様々な生理現象に影響を与える生理活性物質は、有力な薬物として多種多様なものが探索され、医薬品として製品化に至っているものが多い。例えば、インターフェロン、インスリン、各種の抗癌剤等が挙げられる。また、その大きな生理活性効果が注目され、製品化が進められている新たな生理活性物質も少なくない。ところが、これらには体内投与後の代謝・消失速度が速いという共通の欠点がある。これを補うために投与量を増加すると、重篤な副作用に見舞われることもある。例えば、肝細胞増殖因子（Hepatocyto Growth Factor、HGF）を単独で投与しても数分で血中から消失するため、医薬品として利用することが困難とされている。その血中クリアランスには肝臓が主に関わっていることが既に知られており，細網内皮系（RES）に取り込まれて瞬時に分解される。また、肝臓治療のために注射剤として単独で患者に投与した場合、半減期が短いことから肝臓での効果を得るためには頻回投与あるいは持続投与が必要になり、それだけ患者の苦痛等の治療上の負担が大きくなることが予想される。このため、血中滞留性を向上させ、肝実質細胞に特異的かつ持続的に効果をもたらす製剤の開発が必要とされている。
生理活性物質は、そのほとんどが水溶性であり、これらを薬物として応用するためには、単独で投与する方法に代わり何らかのドラッグデリバリーシステム（薬物送達システム、以下、DDS）のキャリア（運搬体）を利用する手法が考えられる。ここでDDSキャリアは、代謝・消失が起こりにくく、生理活性物質を目的組織へ送達し、その後に放出する機能を有することが必要である。具体的には、脂質二分子膜リポソーム、高分子粒子、脂質粒子等の既存DDSキャリアを利用する方法、あるいは分子複合体にして副作用低減を目指す手法等が盛んに検討されている。しかし、次のような問題から、個々の生理活性物質に適合したDDSキャリアを開発するだけで膨大な時間と経費を費やしているのが現状である。
共通する手順で多種類の生理活性物質を封入することができ、体内に送達する有効なキャリアが存在しない。ある生理活性物質をキャリア化したい場合、既存DDSキャリアであるリポソーム、高分子粒子、脂質粒子又は分子複合体のそれぞれについてキャリア化の可能性を検討し、適合する製法を開発しなければならない。すなわち、既存DDSキャリアは封入や送達等の自由度が小さい。
また、既存DDSキャリアは、材質的に抗原となる可能性が高く、安全性確保に多大な労力が必要である。
さらに、貴重な生理活性物質では、DDSキャリア製造段階で効率よく封入し、生理活性物質のロスを小さくすることが必須である。しかし、リポソーム、高分子粒子、脂質粒子等では、これを実現することは非常に難しい。
加えて、生理活性物質の送達場所等を考慮してDDSキャリアに細網内皮系（RES）回避機能又はターゲッティング機能を賦与する必要がある。しかし、既存DDSキャリアや分子複合体では、これらの機能賦与が構造や特性を抜本的に変化させることにつながり、製法の自由度が極めて乏しくなる。
上述したような既存DDSキャリアや分子複合体の欠点を克服する新たなDDSキャリアとして多相エマルションが挙げられる。例えば、多相エマルションの代表であるW/O/Wエマルションでは、生理活性物質の水溶液を油相に分散する１次乳化によってW/Oエマルションを調製し、このエマルションを外水相に分散する２次乳化によって生理活性物質水溶液が油滴に封入されたW/O/Wエマルションを調製することができる。ここでは、１）生理活性物質の種類にかかわらず同じ手順で生理活性物質水溶液を油滴に封入することが可能であり、２）既存DDSキャリアや分子複合体に比べて封入の自由度が大きい。また、３）油相は生体に安全な油脂が主成分であり、抗原性や毒性の問題を回避できる。さらに、２段階乳化の手順は、油滴を微細化しない場合には、４）生理活性物質を効率よく封入できるため生理活性物質のロスを小さくできる。
しかし、上記１）〜４）のような特徴がありながらW/O/Wエマルションは薬物のDDSキャリアとしてこれまでほとんど現実的な検討が行われていない。これは、次に示す幾つかの重大な問題が存在するためである。
１．滴径がサブミクロンのW/O/Wエマルションを効率よく調製する技術が存在しない。
２．O/Wエマルションを機械的に微細化する技術はあるが、これをW/O/Wエマルション生成に使用するとW/O/W構造が破壊される。また、こうした機械的な微細化技術では極めて高い剪断力を作用させる場合が一般的であるが、高い剪断によって生理活性物質が変質するか、発生する熱によっても変質が起こりやすい。
３．W/O/Wエマルションは液滴合一と封入物質放出の２点で安定性に乏しく、数ヶ月の長期保存に耐えられない。
４．また、これまでのエマルション製剤では、RES回避機能や肝実質細胞指向性を賦与する技術も確立されていない。
特開２００３−２６７８９１号公報
特開２００１−１３１０５６号公報
特開平１０−７５８７号公報
従って、本発明の主な目的は、血中滞留性に優れ，肝実質細胞指向性を持つ多相エマルション製剤を提供することにある。
本発明者らは、上記の問題点を鑑みて鋭意研究を重ねた結果、特定の生理活性物質を封入した微細な油滴を外水相に分散させてなる多相エマルションが上記目的を達成できることを見出し、本発明を完成するに至った。
すなわち、本発明は、下記の肝疾患治療用又は予防用の血中滞留型多相エマルション製剤及びその製造方法に係る。
１． 油剤及び油性乳化剤を含む油相中に生理活性物質が封入されてなる油滴が外水相に分散している多相エマルションであって、
（１）前記生理活性物質が、水への溶解度が１μｍｏｌ／Ｌ以上であり、かつ、油水分配係数が０.００１以下であり、
（２）前記生理活性物質が、油滴中０.０１〜２５重量％の範囲で封入されている、ことを特徴とする、肝疾患治療用又は予防用の血中滞留型多相エマルション製剤。
２． 下記１）〜４）の特徴を有する物質ａ；
１）水酸基を有する分子鎖をもつ、
２）油相への溶解度が１μｍｏｌ／Ｌ以上である、
３）油水分配係数が１０００以上である、
４）油相中において前記水酸基を有する分子鎖を外水相に向けて自己配向する、
がさらに油相中に含まれる、前記項１に記載の多相エマルション製剤。
３． 前記物質ａが、コレステロールＰＥＧ（polyoxyethanyl-cholesteryl sebacate）、ジステアリン酸フォスファチジルエタノールアミンポリエチレングリコール（ＤＳＰＥ−ＰＥＧ）、モノステアリン酸ポリエチレングリコール、モノオレイン酸ポリエチレングリコール、モノステアリン酸エチレングリコール、ジラウリン酸ポリエチレングリコール、ジステアリン酸ポリエチレングリコール、ジオレイン酸ポリエチレングリコール、ステアリン酸ジエチレングリコール、ポリオキシエチレンＰＯＥ（３）ヒマシ油、ポリオキシエチレンＰＯＥ（５）硬化ヒマシ油及びＰＣＡ(ピロリドンカルボン酸)イソステアリン酸テアリン酸ＰＥＧ−４０水添ヒマシ油の少なくとも１種である、前記項２に記載の多相エマルション製剤。
４． 前記物質ａが、油相中において前記分子鎖を外水相に向けて配向している、前記項２又は３に記載の多相エマルション製剤。
５． 下記１）〜４）の特徴を有する物質ｂ；
１）肝実質細胞表面上のレセプターと特異的に結合する分子鎖を有する、
２）油相への溶解度が１μｍｏｌ／Ｌ以上である、
３）油水分配係数が１０００以上である、
４）油相中において前記分子鎖を外水相に向けて自己配向する、
がさらに油相中に含まれる、前記項１〜４のいずかに記載の多相エマルション製剤。
６． 前記物質ｂが、下記の少なくとも１種；
１）プルラン誘導体、ガングリオシド誘導体、アシアロトランスフェリン誘導体、アシアロフェツイン誘導体、ラクトノラクトン誘導体及びラクトース誘導体ならびに
２）低比重リポ蛋白及び高比重リポ蛋白
である、前記項５に記載の多相エマルション製剤。
７． 前記物質ｂが、油相中において前記分子鎖を外水相に向けて配向している、前記項５又は６に記載の多相エマルション製剤。
８． 前記油滴の平均滴径が、１）動的散乱式粒度分布測定による値で５０〜５００ｎｍの範囲又は２）レーザー回折散乱式粒度分布測定による値で５００〜１０００ｎｍである、前記項１〜７のいずれかに記載の多相エマルション製剤。
９． 前記項１〜８のいずれかに記載の静注用多相エマルション製剤。
１０． 肝疾患治療用又は予防用の血中滞留型多相エマルション製剤を製造する方法であって、
（１）生理活性物質の水溶液を油相に分散させることによりＷ／Ｏエマルションを調製する第１工程、
（２）前記Ｗ／Ｏエマルション中の水分の全部又は一部を除くことによりＳ／Ｏサスペンションを調製する第２工程、
（３）前記Ｓ／Ｏサスペンションを外水相に分散させることによりＳ／Ｏ／Ｗ系多相エマルションを得る第３工程、
（４）前記Ｓ／Ｏ／Ｗ系多相エマルションを多孔質膜を用いて膜透過させることにより、前記油相の平均滴径が５０〜１０００ｎｍである多相エマルション製剤を得る第４工程
を含む、多相エマルション製剤の製造方法。
１１． 第２工程に先立って、請求項２又は３に記載の物質ａ又はその溶液をあらかじめ油相へ溶解又は分散させる工程をさらに含む、前記項１０に記載の製造方法。
１２． 第３工程及び／又は第４工程において、前記物質ａの水酸基を有する分子鎖を外水相に自己配向させる、前記項１１に記載の製造方法。
１３． 第２工程に先立って、前記項４又は５に記載の物質ｂ又はその溶液をあらかじめ油相へ溶解又は分散させる工程をさらに含む、前記項１０に記載の製造方法。
１４． 第３工程及び／又は第４工程において、前記物質ｂの当該分子鎖を外水相に自己配向させる、前記項１３に記載の製造方法。
１． 油剤及び油性乳化剤を含む油相中に生理活性物質が封入されてなる油滴が外水相に分散している多相エマルションであって、
（１）前記生理活性物質が、水への溶解度が１μｍｏｌ／Ｌ以上であり、かつ、油水分配係数が０.００１以下であり、
（２）前記生理活性物質が、油滴中０.０１〜２５重量％の範囲で封入されている、ことを特徴とする、肝疾患治療用又は予防用の血中滞留型多相エマルション製剤。
２． 下記１）〜４）の特徴を有する物質ａ；
１）水酸基を有する分子鎖をもつ、
２）油相への溶解度が１μｍｏｌ／Ｌ以上である、
３）油水分配係数が１０００以上である、
４）油相中において前記水酸基を有する分子鎖を外水相に向けて自己配向する、
がさらに油相中に含まれる、前記項１に記載の多相エマルション製剤。
３． 前記物質ａが、コレステロールＰＥＧ（polyoxyethanyl-cholesteryl sebacate）、ジステアリン酸フォスファチジルエタノールアミンポリエチレングリコール（ＤＳＰＥ−ＰＥＧ）、モノステアリン酸ポリエチレングリコール、モノオレイン酸ポリエチレングリコール、モノステアリン酸エチレングリコール、ジラウリン酸ポリエチレングリコール、ジステアリン酸ポリエチレングリコール、ジオレイン酸ポリエチレングリコール、ステアリン酸ジエチレングリコール、ポリオキシエチレンＰＯＥ（３）ヒマシ油、ポリオキシエチレンＰＯＥ（５）硬化ヒマシ油及びＰＣＡ(ピロリドンカルボン酸)イソステアリン酸テアリン酸ＰＥＧ−４０水添ヒマシ油の少なくとも１種である、前記項２に記載の多相エマルション製剤。
４． 前記物質ａが、油相中において前記分子鎖を外水相に向けて配向している、前記項２又は３に記載の多相エマルション製剤。
５． 下記１）〜４）の特徴を有する物質ｂ；
１）肝実質細胞表面上のレセプターと特異的に結合する分子鎖を有する、
２）油相への溶解度が１μｍｏｌ／Ｌ以上である、
３）油水分配係数が１０００以上である、
４）油相中において前記分子鎖を外水相に向けて自己配向する、
がさらに油相中に含まれる、前記項１〜４のいずかに記載の多相エマルション製剤。
６． 前記物質ｂが、下記の少なくとも１種；
１）プルラン誘導体、ガングリオシド誘導体、アシアロトランスフェリン誘導体、アシアロフェツイン誘導体、ラクトノラクトン誘導体及びラクトース誘導体ならびに
２）低比重リポ蛋白及び高比重リポ蛋白
である、前記項５に記載の多相エマルション製剤。
７． 前記物質ｂが、油相中において前記分子鎖を外水相に向けて配向している、前記項５又は６に記載の多相エマルション製剤。
８． 前記油滴の平均滴径が、１）動的散乱式粒度分布測定による値で５０〜５００ｎｍの範囲又は２）レーザー回折散乱式粒度分布測定による値で５００〜１０００ｎｍである、前記項１〜７のいずれかに記載の多相エマルション製剤。
９． 前記項１〜８のいずれかに記載の静注用多相エマルション製剤。
１０． 肝疾患治療用又は予防用の血中滞留型多相エマルション製剤を製造する方法であって、
（１）生理活性物質の水溶液を油相に分散させることによりＷ／Ｏエマルションを調製する第１工程、
（２）前記Ｗ／Ｏエマルション中の水分の全部又は一部を除くことによりＳ／Ｏサスペンションを調製する第２工程、
（３）前記Ｓ／Ｏサスペンションを外水相に分散させることによりＳ／Ｏ／Ｗ系多相エマルションを得る第３工程、
（４）前記Ｓ／Ｏ／Ｗ系多相エマルションを多孔質膜を用いて膜透過させることにより、前記油相の平均滴径が５０〜１０００ｎｍである多相エマルション製剤を得る第４工程
を含む、多相エマルション製剤の製造方法。
１１． 第２工程に先立って、請求項２又は３に記載の物質ａ又はその溶液をあらかじめ油相へ溶解又は分散させる工程をさらに含む、前記項１０に記載の製造方法。
１２． 第３工程及び／又は第４工程において、前記物質ａの水酸基を有する分子鎖を外水相に自己配向させる、前記項１１に記載の製造方法。
１３． 第２工程に先立って、前記項４又は５に記載の物質ｂ又はその溶液をあらかじめ油相へ溶解又は分散させる工程をさらに含む、前記項１０に記載の製造方法。
１４． 第３工程及び／又は第４工程において、前記物質ｂの当該分子鎖を外水相に自己配向させる、前記項１３に記載の製造方法。
なお、本明細書で用いる用語は、次のように定義する。
「多相エマルション」は、封入物質の存在状態が固相粒子（１３）であるS/O/W系エマルション（図２）あるいは水溶液状態の内水相液滴（１４）であるW/O/W系エマルション（図３）を示している。何故ならS/O/W系であっても固相に何らかの水は必ず付随することから、本明細書では両エマルションを区別せずに多相エマルションと一括した。
本明細書では積算体積分布の５０％径を「平均粒径」あるいは「平均滴径」とし、それぞれ個々の大きさを「粒径」あるいは「滴径」とする。
本明細書では、油滴に生理活性物質を閉じ込めることを「封入」と表記する。
本発明製剤の製造に使用される膜状多孔質体の「平均孔径」は、その相対累積細孔分布曲線において貫通細孔容積が全体の５０％を占めるときの孔径を示す。
本明細書におけるRES回避誘導物質及びターゲッティングリガンド援助物質は、油滴／外水相界面で「自己配向」する性質を有している。すなわち、油相に溶解したRES回避誘導物質成分及びターゲッティングリガンド援助物質成分のいずれも自己拡散によって界面に集まり、疎水基を油滴側、親水基を外水相側に向けて配向する。こうした特徴的な挙動を「自己配向」と記す。
本発明製剤の製法における「膜透過」技術とは、膜状多孔質体を利用した油滴の微細化技術（例えば、特開２００４−８８３７、特開２００２−２９２２６３、特開２００３−１０８０等）で例示される技術をいう。
「油水分配係数」は、対象となる物質が水に溶けやすいか、油に溶けやすいかを表す指標のことであり、油水分配係数＝［（油相への飽和溶解度）／（水相への飽和溶解度）］と規定される。絶対的には油相をｎ−オクタノールとするが、本明細書においては使用する種々の油相に対する飽和溶解度とする。
「ターゲッティングリガンド」とは、肝実質細胞表面のアシアロ糖タンパクレセプターと特異的に結合するガラクトース残基あるいは肝実質細胞表面にある他のレセプターと同様に結合する分子鎖（官能基）のことであり、これを持つ物質を本明細書では「ターゲッティングリガンド援助物質」と称する。
本発明の多相エマルション製剤は、さまざまな生理活性物質を封入・送達できる自由度の高いDDSキャリアである。本発明製剤は、安全性が高く、RES回避と肝実質細胞指向性が可能な範囲の滴径であり、特に平均粒径が３００ｎｍ以下に微細化したものでは、より高い血中滞留性を得ることができる。
とりわけ、本発明製剤では、RES回避誘導物質及び／又はターゲッティングリガンド援助物質を外水相／油滴界面に配向することにより、より優れた血中滞留性と持続的な肝実質細胞指向性を発揮することができる。
また、本発明の製造方法により、これらの機能を自在にコントロールしながらDDSキャリアを製造することもできる。
このように、本発明の多相エマルション製剤によれば、生理活性物質本来の生理活性機能を維持したまま血中滞留性を高めることができる。これにより、所望の生理活性物質を肝実質細胞に特異的に集積できることが期待される。その結果、本発明の多相エマルション製剤は、肝機能の改善及び亢進作用を必要とする場合、例えば急性肝炎、慢性肝炎、肝硬変、肝線維化症、肝臓ガン（ウイルス性肝癌の癌化も含む。）等の肝疾患の治療又は予防に期待できる。
１．多相エマルション製剤
本発明における肝疾患治療用又は予防用の血中滞留型多相エマルション製剤（本発明製剤）は、油剤及び油性乳化剤を含む油相中に生理活性物質が封入されてなる油滴が外水相に分散している多相エマルションであって、
（１）前記生理活性物質が、水への溶解度が１μｍｏｌ／Ｌ以上であり、かつ、油水分配係数が０.００１以下であり、
（２）前記生理活性物質が、油滴中０.０１〜２５重量％の範囲で封入されている、ことを特徴とする。
本発明における肝疾患治療用又は予防用の血中滞留型多相エマルション製剤（本発明製剤）は、油剤及び油性乳化剤を含む油相中に生理活性物質が封入されてなる油滴が外水相に分散している多相エマルションであって、
（１）前記生理活性物質が、水への溶解度が１μｍｏｌ／Ｌ以上であり、かつ、油水分配係数が０.００１以下であり、
（２）前記生理活性物質が、油滴中０.０１〜２５重量％の範囲で封入されている、ことを特徴とする。
生理活性物質としては、医学・薬学的に生理活性を有するものから適宜選択することができる。特に、肝疾患の治療又は予防に効果のある薬剤となり得る物質を好適に用いることができる。例えば、HGF、インターフェロン、インスリン、TNF-α、各種サイトカイン等が挙げられるが、これらに限定されるものではない。これらは、単独で封入してもよく、併用してもよい。中でも、HGFは、肝細胞に対する強力な増殖効果等の組織再生に対する多様な生理活性をもつ。また例えば、肝硬変においては、その繊維化抑制としてウイルス性肝癌前癌期での病態の食い止めが可能であると考えられる。
上記物質は、その全てが本発明製剤（DDSキャリア）に封入できるわけではなく、本発明所定の溶解度及び油水分配係数を有するものであることが必要である。すなわち、上記物質は、水への溶解度が１μｍｏｌ／Ｌ以上（好ましくは１〜１００００μｍｏｌ／Ｌ、より好ましくは１０〜２０００μｍｏｌ／Ｌ）であり、かつ、油水分配係数が０.００１以下（好ましくは０．０００１以下、より好ましくは０．００００１以下）であることが必要である。上記の数値範囲内の生理活性物質を用いることにより、優れた血中滞留性（生理活性物質が長時間にわたり血中に存在する性能）を得ることができる。油水分配係数は油相によって異なることから、使用する油相に適用できる生理活性物質を適宜選択すれば良い。
生理活性物質は、油滴中０.０１〜２５重量％（好ましくは０．０１〜１０重量％、より好ましくは０．１〜５重量％）の範囲で封入されている。上記濃度が低すぎる場合は、所望の効果を得ることが困難になる。また、上記濃度が高すぎる場合は、生理活性物質が析出するため、固相粒子を微細化して油滴に効率よく封入することが困難になる。
油剤としては、脂質等を適宜用いることができる。この脂質は実質的に水と混ざり合わない生理学的に許容される油性媒体であれば制限されない。特に、日本薬局方、食品添加物公定書等に記載された安全性の高いものを用いることが望ましい。具体的には、大豆油のほか、Ｘ線造影剤の一種であるヨウ素化ケシ油脂肪酸エステル等の油脂などを単独又は混合して用いることができる。
油剤の使用量は、生理活性物質の油滴中の濃度が上記範囲内になるように適宜設定すれば良い。
油性乳化剤は、生理活性物質を油滴に封入する上で最も重要な役割を果たす。油剤に溶解し、生理学的に許容されるものであれば特に限定はない。具体的には、グリセリンがテトラ、ヘキサ、デカ等のポリグリセリン縮合リシノレイン酸エステル、酸化エチレン付加モルが５、１０、２０，４０及び５０のポリオキシエチレン硬化ひまし油、ＨＬＢが４以下のショ糖エルカ酸エステルに代表されるショ糖脂肪酸エステル等が特に好適である。
油性乳化剤の含有量は限定的ではないが、油剤１００重量部に対して１〜５０重量部、特に５〜２５重量部とすることが望ましい。
本発明では、その他にも必要に応じて各種の添加剤を油相に配合することも可能である。例えば、溶解補助剤、保存安定剤、保護剤等の封入添加剤を用いることができる。特に、本発明では、RES回避誘導物質及びターゲティングリガンド援助物質の少なくとも１種を油相に配合することが望ましい。
RES回避誘導物質は、生理活性物質を肝実質細胞に特異的かつ持続的に送達する上で必要不可欠な細網内皮系を回避する機能をキャリアに発現させる物質である．特に、本発明では、下記１）〜４）の特徴を有する物質；
１）水酸基を有する分子鎖をもつ、
２）油相への溶解度が１μｍｏｌ／Ｌ以上である、
３）油水分配係数が１０００以上である、
４）油相中において前記水酸基を有する分子鎖を外水相に向けて自己配向する、
を用いることが望ましい。これにより、より優れたRES回避機能を発揮することができ、より効率的な肝実質細胞への送達が期待される。
１）水酸基を有する分子鎖をもつ、
２）油相への溶解度が１μｍｏｌ／Ｌ以上である、
３）油水分配係数が１０００以上である、
４）油相中において前記水酸基を有する分子鎖を外水相に向けて自己配向する、
を用いることが望ましい。これにより、より優れたRES回避機能を発揮することができ、より効率的な肝実質細胞への送達が期待される。
RES回避誘導物質としては、上記のような機能を有するものであれば限定的ではない。例えば、ポリエチレングリコール誘導体としてコレステロールＰＥＧ（polyoxyethanyl-cholesteryl sebacate）、ジステアリン酸フォスファチジルエタノールアミンポリエチレングリコール（ＤＳＰＥ−ＰＥＧ）、ポリエチレングリコール脂肪酸エステルのうちＨＬＢが６．０以下のものとしてモノステアリン酸ポリエチレングリコール、モノオレイン酸ポリエチレングリコール、モノステアリン酸エチレングリコール、ジラウリン酸ポリエチレングリコール、ジステアリン酸ポリエチレングリコール、ジオレイン酸ポリエチレングリコール、ステアリン酸ジエチレングリコールなど，ポリオキシエチレンヒマシ油・硬化ヒマシ油のうちＨＬＢが６．０以下のものとしてポリオキシエチレンＰＯＥ（３）ヒマシ油、ＰＯＥ（５）硬化ヒマシ油のほか、ＰＣＡ(ピロリドンカルボン酸)イソステアリン酸テアリン酸ＰＥＧ−４０水添ヒマシ油等を挙げることができる。これらの少なくとも１種から、用いる油相の種類に応じて上記１）〜４）を満たす物質を適宜選択して用いることができる。
RES回避誘導物質の含有量は、用いるRES回避誘導物質の種類、所望のRES回避特性等に応じて適宜設定できるが、通常は油相中０．００１〜１０重量％、特に０．１〜５重量％とすることが好ましい。
ターゲッティングリガンド援助物質は、肝実質細胞表面上のレセプターのリガンドとなり得る分子鎖（又は官能基）を有することにより、より効率的な肝実質細胞への送達を可能とするものである。特に、下記１）〜４）の特徴を有する物質；
１）肝実質細胞表面上のレセプターと特異的に結合する分子鎖を有する、
２）油相への溶解度が１μｍｏｌ／Ｌ以上である、
３）油水分配係数が１０００以上である、
４）油相中において前記分子鎖を外水相に向けて自己配向する、
を用いることが望ましい。これにより、良好な血中滞留性を維持しつつ、肝実質細胞への効率的な送達が可能となる。
１）肝実質細胞表面上のレセプターと特異的に結合する分子鎖を有する、
２）油相への溶解度が１μｍｏｌ／Ｌ以上である、
３）油水分配係数が１０００以上である、
４）油相中において前記分子鎖を外水相に向けて自己配向する、
を用いることが望ましい。これにより、良好な血中滞留性を維持しつつ、肝実質細胞への効率的な送達が可能となる。
ターゲッティングリガンド援助物質としては、低比重リポ蛋白（LDL）、高比重リポ蛋白（HDL）等のほか、プルラン誘導体、ガングリオシド誘導体、アシアロトランスフェリン誘導体、アシアロフェツイン誘導体、ラクトノラクトン誘導体、ラクトース誘導体等のの少なくとも１種から、用いる油相の種類に応じて上記１）〜４）を満たす物質を適宜選択して用いることができる。これらの誘導体は、エステル、修飾体等を含む。より具体的には、コレステロールプルラン、ショ糖エルカ酸エステル等を例示することができる。
ターゲッティングリガンド援助物質の含有量は、用いるターゲッティングリガンド援助物質の種類等に応じて適宜設定できるが、通常は油相中０．００１〜１０重量％、特に０．１〜１重量％とすることが好ましい。
水相は、注射用水，除菌された蒸留水，脱イオン水等を用いて構成することができる。水相の量、すなわち後述する外水相の量は，特に限定されないが、通常は油相１００重量部に対して４０〜１００，０００重量部、特に１００〜１０，０００重量部とすることが望ましい。
水相には、必要に応じて各種の添加剤を配合しても良い。例えば、水性乳化剤、浸透圧調整剤等を好適に用いることができる。
水性乳化剤は、生理学的に許容されるものであれば特に限定されず、本発明製剤の剤型等に応じて適宜選択し得る。例えば、注射剤であれば、酸化エチレン付加６０モルのポリオキシエチレン硬化ひまし油（例えば、日光ケミカルズ製HCO-６０等）、ポロクサマー１８８（例えば、三菱ウェルファーマ製エキソコルポール等）、リゾレシチン、胆汁酸等を用いることができる。経口製剤であれば、モノグリセリン脂肪酸エステル系、ジグリセリン脂肪酸エステル系、ポリグリセリン脂肪酸エステル系、ショ糖脂肪酸エステル系、ソルビタン系等の食品用乳化剤を加えることができる。塗布外用剤であれば、ポリオキシエチレン・ソルビタン系、ポリオキシエチレン・エーテル系、ポリオキシエチレン・アルコール系等化粧品用乳化剤等も加えることができる。
水性乳化剤の濃度は、用いる水性乳化剤の種類等に応じて適宜設定できるが、通常は水相中０．１〜２５重量％、特に０．５〜１０重量％とすることが好ましい。
浸透圧調整剤は、生理学的に許容されるものであれば限定的でない。この中でも、塩類又は糖類で浸透圧を調整する役割の物質は好適である。より具体的には、グルコース、ラクトース、スクロース等の糖類、食塩等の塩類，グリセリンなどが挙げられる。
浸透圧調整剤の濃度は、用いる浸透圧調整剤の種類等に応じて適宜設定できる。通常は生理食塩水の浸透圧Π0に対する浸透圧調整剤水溶液の浸透圧Πの比，すなわち浸透圧比Π／Π0が０．１〜１０、特に０．９〜１．１となるような濃度にすることが好ましい。
＜実施の形態＞
以下、本発明の多相エマルション製剤の実施の形態について、図示しながら説明する。
以下、本発明の多相エマルション製剤の実施の形態について、図示しながら説明する。
本発明製剤の概念図を図１に示す。図１では、生理活性物質（１）と封入添加剤（２）を含む油相（３）で取り囲んだ油滴（４）とともに、それらの分散媒である外水相（５）（白地部分）からなる。油相（３）は、油剤（６）、油性乳化剤（７）及び油相添加剤（８）で構成される。外水相（５）は、水性乳化剤（９）及び添加剤（１０）の水溶液である。
必要に応じて、細網内皮系を回避する機能（RES回避機能）を付与する場合は、RES回避誘導物質（１１）を添加することができる。この場合、RES回避誘導物質（１１）は、図１に示すように、水酸基を有する分子鎖が外水相側に向かい、疎水性の部分は外水相から遠ざかるように配向する。
さらに、必要に応じて、肝実質細胞への指向性を付与する場合は、ターゲッティングリガンド援助物質（１２）を添加することができる。この場合、ターゲッティングリガンド援助物質（１２）は、図１に示すように、肝実質細胞表面上のレセプターと特異的に結合する分子鎖が外水相側に向かい、疎水性の部分は外水相から遠ざかるように配向する。
生理活性物質（１）としては、医学・薬学的に生理活性を有するものであって、水への溶解度が１μｍｏｌ／Ｌ以上であり、かつ、油水分配係数が０.００１以下である物質を用いる。具体的には、HGF、インターフェロン、インスリン、TNF-α、各種サイトカイン等が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
生理活性物質には多種多様のものが存在する。しかし、これら全てがDDSキャリアに封入できるわけではなく、その適否を判断する上で非常に重要となるファクターが溶解度と油水分配係数である。例えば、HGFの分子量は、特開平３−２８５６９３号公報に記載されているBD２４株等を用いて製造した組換えヒト肝細胞増殖因子（以下、rh-HGF）の場合に約９万である。従って、表１に示すとおり、溶解度が１μmol/L以上である場合は、濃度０.０９ｇ／Ｌ（０.００９重量％）以上に相当する。ここで油滴の中には、０.０１重量％以上の生理活性物質が封入されることになる。
また、油水分配係数０.００１以下というのは、生理活性物質の水相溶解度に対して油相への溶解度が１／１０００以下であることを表している。生理活性物質を油滴に封入した多相エマルションの場合であっても油相への溶解度が１／１０００を超える場合は、生理活性物質が経時的に油相に溶けだし、次に油相から外水相へ溶ける傾向が生じる。これは生理活性物質の漏洩であり、DDSキャリアの機能不全につながる。このため、最低でも０.００１以下の油水分配係数が必要であり、望ましくは０.０００１以下、さらには無限小であることが望ましい。生理活性物質の多くは、大きな分子量を有するタンパク質やペプチドであることから、この条件に適合し得る。
封入添加剤（２）としては、生理学的に許容されるものであれば特に種類の限定はない。例えば、各種糖類や塩類で外水相よりも浸透圧が高くならない範囲のもの、溶解補助剤としてサリチル酸ナトリウムやマンニトール、グリセリン等、保存安定のために各種アミノ酸やポリエチレングリコール等、デキストラン等の多糖類、保護剤としてアルブミンやヘパリン等があげられる。
油剤（６）としては、脂質等を適宜用いることができる。前記のとおり、日本薬局方や食品添加物公定書等に記載された安全性の高いものを用いることが望ましい。具体的には、大豆油のほか、Ｘ線造影剤の一種であるヨウ素化ケシ油脂肪酸エステル等の油脂を単独又は混合して用いることができる。
油性乳化剤（７）は、生理活性物質を油相に封入する上で最も重要な役割を果たす。油剤に溶解し生理学的に許容されるものであれば特に限定はないが、具体的には、グリセリンがテトラ、ヘキサ、デカ等のポリグリセリン縮合リシノレイン酸エステル、酸化エチレン付加モルが５、１０、２０，４０及び５０のポリオキシエチレン硬化ひまし油、ＨＬＢが４以下のショ糖エルカ酸エステルに代表されるショ糖脂肪酸エステル等が特に好適である。これらは、市販品を用いることもできる。
油相添加剤（８）としては、例えばコレステロール、PEG脂質、レシチン等を適宜用いることができる。
水性乳化剤（９）は、生理学的に許容されるものであれば特に限定されず、前記のとおり、本発明製剤の剤型等に応じて公知又は市販のものを使用することができる。
水性添加剤（１０）は、生理学的に許容されるものであれば限定的でない。この中でも、塩類又は糖類で浸透圧を調整する役割の物質は好適である。より具体的には、グルコース、ラクトース、スクロース等の糖類、食塩等の塩類，グリセリンなどが挙げられる。
RES回避誘導物質（１１）としては、水酸基を有する分子鎖を持つ物質でありながら油相への溶解度が１μｍｏｌ／Ｌ以上かつ油水分配係数が１０００以上であり、さらに油相に存在しながら水酸基を有する分子鎖を外水相に向けて自己配向し、油滴／外水相界面に親水性の層を生じて細網内皮系を回避する機能を発現する物質を使用することができる。具体的には、ポリエチレングリコール誘導体としてコレステロールＰＥＧ（polyoxyethanyl-cholesteryl sebacate）、ジステアリン酸フォスファチジルエタノールアミンポリエチレングリコール（ＤＳＰＥ−ＰＥＧ）、ポリエチレングリコール脂肪酸エステルのうちＨＬＢが６．０以下のものとしてモノステアリン酸ポリエチレングリコール、モノオレイン酸ポリエチレングリコール、モノステアリン酸エチレングリコール、ジラウリン酸ポリエチレングリコール、ジステアリン酸ポリエチレングリコール、ジオレイン酸ポリエチレングリコール、ステアリン酸ジエチレングリコールなど，ポリオキシエチレンヒマシ油・硬化ヒマシ油のうちＨＬＢが６．０以下のものとしてポリオキシエチレンＰＯＥ（３）ヒマシ油、ＰＯＥ（５）硬化ヒマシ油など及びＰＣＡ(ピロリドンカルボン酸)磯ステアリン酸テアリン酸ＰＥＧ−４０水添ヒマシ油等が挙げられるが、これらに限定されるものではない。これらは、単独で封入してもよく、２種以上を併用してもよい。
ターゲッティングリガンド援助物質（１２）とは、肝実質細胞表面のアシアロ糖タンパクレセプターと特異的に結合するガラクトース残基を有する物質、あるいはその他のレセプターと同様に結合する分子鎖を有する物質でありながら、油相への溶解度が１μｍｏｌ／Ｌ以上かつ油水分配係数が１０００以上であり、さらに油相に存在しながらターゲッティングリガンドを外水相に向けて自己配向し、肝実質細胞への導入を援助する機能を発現する物質である。具体的には、プルラン誘導体、ガングリオシド誘導体、アシアロトランスフェリン誘導体、アシアロフェツイン誘導体、ラクトノラクトン誘導体及びラクトース誘導体ならびに低比重リポ蛋白及び高比重リポ蛋白等が挙げられる。より具体的には、コレステロールプルラン、ショ糖エルカ酸エステル等がある。これらは、単独で封入してもよく、併用してもよい。
生理活性物質を封入した油滴の平均滴径は、５０〜１０００ｎｍ、好ましくは５０〜３００ｎｍの範囲であることが望ましい。これは１）日本薬局方第１４改正注射剤の要件において、乳濁性注射剤の粒子の大きさは７μｍ以下で血管内可とされていること、２）大きな粒子は、マクロファージ等の細網内皮系を含む細胞性免疫系に補足されて瞬時に分解されること、３）３００ｎｍ以下の粒子は細網内皮系に補足されにくいという実験結果が得られていること、４）リポソーム等の実績、５）注射剤の滅菌条件として微生物・エンドトキシン除去のため０.２０〜０.４５μｍのフィルターでろ過しなくてはならないが、３００ｎｍ以下の粒子であればエマルションを破壊することなく、ろ過滅菌が可能である等の理由による。
本発明では、平均滴径は、レーザー回折散乱式粒度分布測定法及び動的散乱式粒度分布測定法による値を示す。これは、測定手法によって計測される滴径や滴径分布に差が生じる場合が多く、平均滴径の範囲で規定するためには測定手法も明確にする必要がある。そもそも５０〜３００ｎｍの油滴は、光学顕微鏡で観察しようとしても不可能であり，電子顕微鏡では真空乾燥による形態変化があり直接的な測定が困難である。一方、遠心沈降式、動的散乱式、静的散乱式、レーザー回折散乱式等の機器測定があるが、こうした機器にはそれぞれ特性があって同じ油滴であっても平均滴径が一致することは少ない。本発明では、平均滴径が数１０〜５００ｎｍの範囲は動的散乱式粒度分布測定法を用い、５００ｎｍ以上のものについては、現在最も広く利用されている装置であるレーザー回折散乱式粒度分布測定法を選択する。
本発明の製剤は、長期安定性に優れている。すなわち、特に室温下及び冷蔵保存で長期にわたり保存でき、安定性に優れている。このため、例えば室温（２０℃）で６ヶ月保管した場合でも平均滴径がほとんど変化しない。具体的には、平均滴径の変化が±１０％以内、特に±５％以内である。また、例えば室温（２０℃）で６ヶ月保管した場合でも生理活性物質の封入率もほとんど変化しない。具体的には、製剤調製直後の封入率を１００％とすると，６ヶ月保管した後でも封入率は９０〜１００％、特に９５〜１００％を維持することができる。
本発明製剤は、特にその優れた血中滞留性（長時間血中に存在する性質）により、ほ乳動物（特にヒト）の肝疾患治療用又は予防用製剤として有用である。すなわち、生理活性物質が、細網内皮系に取り込まれることなく、血中に長時間にわたり存在するので、それだけ肝実質細胞に送達できる確率が高まる。その結果、肝疾患（肝障害）をより効果的に（より少ない副作用で）治療又は予防することが可能となる。
本発明製剤は、そのまま又は希釈剤、製剤用添加剤等とともに所定の剤型に調製して用いることができる。剤型は限定的でなく、公知の剤型に従えばよい。例えば、液剤、カプセル剤、注射剤、経口製剤、塗布外用剤として使用できる。特に、静脈への注入用（静注用）等として好適である。また例えば、非経口的投与に適する注射用アンプル剤、点滴剤等の形態の医薬組成物として調製することができる。上記非経口投与用製剤の形態の医薬組成物として血管内投与法によっても投与することができる。投与量及び投与方法は特に限定されず、所定量を単回又は連続的（あるいは断続的）に点滴投与することが可能である。投与量は、患者の年齢、性別、症状、及び体重等の種々の条件に応じて適宜調整することができる。
２．多相エマルション製剤の製造方法
前記１．の多相エマルション製剤の製造方法は限定されないが、例えば本発明の製造方法により好適に製造することができる。
前記１．の多相エマルション製剤の製造方法は限定されないが、例えば本発明の製造方法により好適に製造することができる。
すなわち、肝疾患の治療用又は予防用の多相エマルション製剤を製造する方法であって、
（１）生理活性物質の水溶液を油相に分散させることによりＷ／Ｏエマルションを調製する第１工程、
（２）前記Ｗ／Ｏエマルション中の水分の全部又は一部を除くことによりＳ／Ｏサスペンションを調製する第２工程、
（３）前記Ｓ／Ｏサスペンションを外水相に分散させることによりＳ／Ｏ／Ｗ系多相エマルションを得る第３工程、
（４）前記Ｓ／Ｏ／Ｗ系多相エマルションを多孔質膜を用いて膜透過させることにより、前記油相の平均滴径が５０〜１０００ｎｍである多相エマルション製剤を得る第４工程
を含む、多相エマルション型乳化製剤の製造方法を好適に採用することができる。
（１）生理活性物質の水溶液を油相に分散させることによりＷ／Ｏエマルションを調製する第１工程、
（２）前記Ｗ／Ｏエマルション中の水分の全部又は一部を除くことによりＳ／Ｏサスペンションを調製する第２工程、
（３）前記Ｓ／Ｏサスペンションを外水相に分散させることによりＳ／Ｏ／Ｗ系多相エマルションを得る第３工程、
（４）前記Ｓ／Ｏ／Ｗ系多相エマルションを多孔質膜を用いて膜透過させることにより、前記油相の平均滴径が５０〜１０００ｎｍである多相エマルション製剤を得る第４工程
を含む、多相エマルション型乳化製剤の製造方法を好適に採用することができる。
以下、各工程について説明する。なお、本発明の製造方法で用いる材料は、前記１．で説明したものと同じものを使用することができる。
＜第１工程＞
第１工程では、生理活性物質の水溶液を油相に分散させることによりＷ／Ｏエマルションを調製する。
第１工程では、生理活性物質の水溶液を油相に分散させることによりＷ／Ｏエマルションを調製する。
生理活性物質の水溶液の濃度は、通常は０．００１〜５重量％の範囲内において、用いる生理活性物質の種類等に応じて適宜設定することができる。
Ｗ／Ｏエマルションの調製方法は、公知のＷ／Ｏエマルションの調製方法に従って実施すれば良い。例えば、油相に上記水溶液を滴下した後、水相が所望の粒径になるまで攪拌する方法等を挙げることができる。
この場合、油相に予め各種の添加剤を配合することも可能である。例えば、溶解補助剤、保存安定剤、保護剤等の封入添加剤を用いることができる。特に、本発明では、RES回避誘導物質及びターゲッティングリガンド援助物質の少なくとも１種を油相に配合しておくことが望ましい。
＜第２工程＞
第２工程では、前記Ｗ／Ｏエマルション中の水分の全部又は一部を除くことによりＳ／Ｏサスペンションを調製する。
第２工程では、前記Ｗ／Ｏエマルション中の水分の全部又は一部を除くことによりＳ／Ｏサスペンションを調製する。
水分の除去は、公知の方法に従って行うことができる。例えば、Ｗ／Ｏエマルションをロータリーエバポレーター等の公知又は市販の装置で脱水処理すれば良い。
水分の除去量は、所望のＳ／Ｏサスペンションが得られる限り、完全に水分を除去する必要はない。通常は、得られたＳ／Ｏサスペンション中の水分含量が０〜０．５重量％，望ましくは０〜０．１重量％の範囲内になるように設定すれば良い。
＜第３工程＞
第３工程では、前記Ｓ／Ｏサスペンションを外水相に分散させることによりＳ／Ｏ／Ｗ系多相エマルションを得る。
第３工程では、前記Ｓ／Ｏサスペンションを外水相に分散させることによりＳ／Ｏ／Ｗ系多相エマルションを得る。
第３工程では、第４工程で微細なエマルションを調製するに先立って、予め粗エマルションを調製する。
Ｓ／Ｏサスペンションを外水相に分散させる方法としては特に制限されない。例えば、１）外水相となる水にＳ／Ｏサスペンションを添加混合する方法、２）多孔質膜を介して外水相となる水にＳ／Ｏサスペンションを圧入する方法等が挙げられる。これらは、いずれも公知の方法に従って実施することができる。
第３工程で得られる粗エマルションの油滴径は５００ｎｍ〜１００μｍ程度の範囲内で適宜調整すれば良い。
＜第４工程＞
第４工程では、前記Ｓ／Ｏ／Ｗ系多相エマルションを多孔質膜を用いて膜透過させることにより、前記油相の平均滴径が５０〜１０００ｎｍである多相エマルション製剤を得る。
第４工程では、前記Ｓ／Ｏ／Ｗ系多相エマルションを多孔質膜を用いて膜透過させることにより、前記油相の平均滴径が５０〜１０００ｎｍである多相エマルション製剤を得る。
第４工程では、第３工程で得られたＳ／Ｏ／Ｗ系多相エマルション（粗エマルション）を多孔質膜を介してその油滴を微細化する。これにより、肝疾患の治療又は予防に適した粒度をもつＳ／Ｏ／Ｗ系多相エマルション製剤を得ることができる。
第４工程においては、前記油滴の粒度として、平均滴径が５０〜１０００ｎｍ（好ましくは５０〜３００ｎｍ）のものを効率的に得ることができる。平均滴径は、用いる膜状多孔質体の平均孔径に応じて適宜制御することができる。
膜状多孔質体としては、均一な貫通孔を有するものであればよく、その細孔形状は円柱状であっても、角柱状であっても、あるいは他の形状であってもかまわない。また、細孔が膜面に対して垂直あるいは斜めに貫通したり、あるいは絡み合い構造でも粒子は生成する。特に、本発明では、細孔の水力学的直径及び有効長さが均一である膜状多孔質体を用いることが好ましい。また、膜状多孔質体の形状も限定されず、例えばパイプ状、平膜型等の多くの種類があり、構造的にも対称膜と非対称膜あるいは均質膜と不均質膜等に分けられるが、そうした形状や構造は本質的に本発明の効果に影響を与えないので、特に制限されない。膜状多孔質体の材質も、例えばガラス、セラミックス、シリコン、耐熱性高分子、金属等が挙げられ、接触角が９０°を超えて油相に濡れないものであれば、特に制限されない。
第４工程における膜透過は、１回又は必要により複数回実施すれば良い。また、孔径が異なる複数の多孔質膜を用い、徐々にエマルションの油滴を微細化することもできる。例えば、孔径が大きな多孔質膜から順に孔径の小さな多孔質膜に透過することにより微細化を行うことができる。
また、特にRES回避誘導物質又はターゲッティングリガンド援助物質を用いる場合は、少なくとも第４工程の段階において、これらの物質の所定の分子鎖が外水相に向かって自己配向する。この自己配向は、第３工程でなされていても良い。
以下、実施例により本発明をさらに具体的に説明する。ただし、本発明の範囲は、下記の実施例に限定されない。
実施例１
リコンビナントヒトインスリン（以下rhインスリンとする）を封入し、平均油滴径５０〜１０００ｎｍの多相エマルション製剤を調製した。
リコンビナントヒトインスリン（以下rhインスリンとする）を封入し、平均油滴径５０〜１０００ｎｍの多相エマルション製剤を調製した。
１．水溶性生理活性物質としてrhインスリン（Sigma社、リコンビナントヒトインスリン、分子量５８００）８０ｍｇを０.０１ｍｏｌ／Ｌの塩酸３ ｍｌに溶解し、０.１ｍｏｌ／Ｌの水酸化ナトリウムで中和、蒸留水で８ ｍｌとし、１．７ｍｍｏｌ／Ｌのインスリン水溶液とした。大豆油１２.８ ｍｌに３.２ｇのテトラグリセリン縮合リシノオレイン酸エステル（阪本薬品工業製、CR-３１０，以下ＰＧＣＲと記す）を加え、攪拌中にインスリン水溶液を滴下し、W/Oエマルションを調製した。このW/Oエマルションを４℃、１０００ｒｐｍで６６時間攪拌し、平均滴径３２５ｎｍの水滴で構成されるW/Oエマルションを得た。
２．上記W/Oエマルション２４ｍｌを３５℃に加温しながらロータリーエバポレーターで減圧−０.１ＭＰａ下６時間脱水し、１６ｍｌのS/Oサスペンションを得た。カールフィッシャー水分計（京都電子社製，MKA-３P）によってS/Oサスペンションの水分含量を測定したところ０.１４重量％であった。
３．１重量％ポリオキシエチレン硬化ひまし油（HCO-６０）、５重量％グルコースを含む外水相４９.５ｍｌに、上記S/Oサスペンション５.５ｍｌを滴下し、スターラーにて１５分攪拌しS/O/Wエマルションを得た。これを平均孔径１１.８μｍの多孔質ガラス膜（エス・ピー・ジーテクノ製）に膜透過して、平均油滴径８７８０ｎｍの粗エマルションを得た。液滴径の測定は、レーザー回折散乱式粒度分布測定装置（島津製作所製，SALD-２０００）により行った．
４．上記粗エマルションを、平均孔径３.１μｍの多孔質ガラス膜に１.５ＭＰａで高圧膜透過させ、平均油滴径１７３０ｎｍに微細化した。以下、多孔質ガラス膜の平均孔径を１.５μｍ、１.０μｍ、０.８μｍ、０.６μｍ、０.５μｍと徐々に小さくし，それぞれを適切な圧力で膜透過させて最終的に平均油滴径５５１ｎｍのS/O/Wエマルションを得た。
４．上記粗エマルションを、平均孔径３.１μｍの多孔質ガラス膜に１.５ＭＰａで高圧膜透過させ、平均油滴径１７３０ｎｍに微細化した。以下、多孔質ガラス膜の平均孔径を１.５μｍ、１.０μｍ、０.８μｍ、０.６μｍ、０.５μｍと徐々に小さくし，それぞれを適切な圧力で膜透過させて最終的に平均油滴径５５１ｎｍのS/O/Wエマルションを得た。
５．上記S/O/Wエマルション１５ｍｌを、６.２５重量％コール酸ナトリウム（和光純薬社製）を加えた外水相６０ｍｌと混合し、平均孔径０.４μｍの多孔質ガラス膜に４.５ＭＰａで膜透過させ、平均油滴径３０７．８ｎｍのエマルションを得た。これを平均孔径０.４μｍ、０.２μｍ、０.１μｍのポリカーボネート膜（Whatman社製、サイクロポアメンブレン）に順次透過させた。それぞれの透過時の圧力は、１.５〜４.５MPaで行った。０.４μｍを透過させたエマルションの平均油滴径は３００．９ｎｍ、０.２μｍでは２０９.１ｎｍ、０.１μｍでは１５３.２ｎｍであった。５００ｎｍよりも小さい粒子は、動的散乱式粒度分布測定装置（大塚電子社製，ELS-８００）を用いて測定した。
以上の方法によりrhインスリンを封入した平均油滴径が５０〜１０００ｎｍの範囲にある種々の多相エマルション製剤を調製することができた。
実施例２
rhインスリンを封入し、RES回避誘導物質を配向した平均油滴径５０〜１０００ｎｍの多相エマルション製剤を調製した。
rhインスリンを封入し、RES回避誘導物質を配向した平均油滴径５０〜１０００ｎｍの多相エマルション製剤を調製した。
１． 水溶性生理活性物質としてrhインスリン（Sigma社、酵母発現リコンビナントヒトインスリン）８０ｍｇを０．０１ｍｏｌ／Ｌの塩酸３ｍｌに溶解し、０．１ｍｏｌ／Ｌの水酸化ナトリウムで中和、蒸留水で８ｍｌとした。大豆油１２．８ｍｌに３．２ｇのPGCRを加え、攪拌中にインスリン水溶液を滴下し、W/Oエマルションを調製した。このW/Oエマルションを４℃、１２００ｒｐｍで６６時間攪拌し、平均滴径３２５ｎｍの水滴で構成されるW/Oエマルションを得た。
２． 上記W/Oエマルション２４ｍｌを３５℃に加温しながらロータリーエバポレーターで減圧−０.１MPa下６時間脱水し、１６ｍｌのS/Oサスペンションを得た。カールフィッシャー水分計によってS/Oサスペンションの水分含量を測定したところ０.１４重量％であった。
３． 得られたS/Oサスペンション６ ｍｌにモノオレイン酸ポリエチレングリコール（日光ケミカルズ社製、MYO-２、以下PEGと記す）６０ｍｇを添加し均一に攪拌した。
４． １重量％ポリオキシエチレン硬化ひまし油（HCO-６０）及び５重量％グルコースを含む外水相４９.５ｍｌに、上記S/Oサスペンション５.５ｍｌを滴下し、スターラーにて１５分攪拌しS/O/Wエマルションを得た。これを平均孔径１１.８μｍの多孔質ガラス膜で膜透過して平均油滴径８，３２０ｎｍの粗エマルション（１５）を得た。油滴径はレーザー回折散乱式粒度分布測定装置により測定した。その油滴径分布を図４に示す。
５． 上記粗エマルションを、平均孔径３．１μｍの多孔質ガラス膜に１.５MPaで膜透過させ、平均油滴径１，６９０ｎｍ（１６）に微細化した。以下、それぞれに適切な圧力で，平均孔径１.５μｍの多孔質ガラス膜を膜透過させたエマルション（１７）、次に１.０μｍを膜透過させたエマルション、０.８μｍを膜透過させたエマルション（１８）、０.６μｍを膜透過させたエマルション、最後に０.５μｍを膜透過させたエマルションと徐々に小さくし、最終的に平均油滴径５７６ｎｍの多相エマルションを得た。
６． 上記S/O/Wエマルション１５ｍｌを、６.２５重量％コール酸ナトリウム（和光純薬社製）を加えた外水相６０ｍｌと混合し、平均孔径０.４μｍの多孔質ガラス膜に圧力４.５ＭＰａで膜透過させ、平均油滴径３４６．５ｎｍのエマルションを得た。これを平均孔径０.４μｍ、０.２μｍ、０.１μｍのポリカーボネート膜（Whatman社製、サイクロポアメンブレン）に順次膜透過させた。それぞれの透過時の圧力は、１.５〜４.５ＭＰａで行った。０.４μｍを透過させたエマルションの平均油滴径は２８６．０ｎｍ（１９）、０.２μｍでは１９３.３ｎｍ（２０）、０.１μｍでは１４９.４ｎｍであった。
７． ポリカーボネート膜を膜透過させた上記S/O/Wエマルションを、平均孔径０.１μｍ、０.０２μｍの陽極酸化皮膜（Whatman社製、アノディスクメンブレン）に、２.０〜５.０ＭＰａの圧力で膜透過させた。得られたS/O/Wエマルションの平均油滴径は、０.１μｍでは１３５.７ｎｍ、０.０２μｍでは７４ｎｍであった。
こうしてrhインスリンを封入し、RES回避誘導物質を配向した平均油滴径５０〜１０００ｎｍの多相エマルション製剤を調製することができた。
実施例３
実施例１及び２のS/O/W型エマルション（rhインスリン封入DDSキャリア）のうち、平均油滴径が５５０ｎｍ前後と２００ｎｍ前後及びコントロールであるrhインスリン水溶液をラットに静脈内投与し、経時的に血液を採取して血中のrhインスリン濃度を比較した。血中インスリン濃度はIMｘアナライザー（アボットジャパン製、全自動酵素免疫測定装置）を用いて測定した。表２及び図５のように、コントロール（２１）及び平均油滴径５５０ｎｍの多相エマルション製剤では速やかに血中からインスリンが消失した．これはPEGが配向した製剤（PEG＋：PEGが含まれているもの）（２２）および配向していない製剤（PEG−：PEGが含まれていないもの）（２３）のいずれも消失が早かった．一方，平均油滴径２００ｎｍの多相エマルション製剤は、PEG配向製剤PEG＋（２４）および配向していない製剤PEG−（２５）のいずれも長時間血中でインスリンが検出され、血中滞留性が著しく向上したことが確認された。特に、平均油滴径２００ｎｍの多相エマルション製剤では、３時間にわたり血中の初期濃度を実質的に維持できることがわかる。
実施例１及び２のS/O/W型エマルション（rhインスリン封入DDSキャリア）のうち、平均油滴径が５５０ｎｍ前後と２００ｎｍ前後及びコントロールであるrhインスリン水溶液をラットに静脈内投与し、経時的に血液を採取して血中のrhインスリン濃度を比較した。血中インスリン濃度はIMｘアナライザー（アボットジャパン製、全自動酵素免疫測定装置）を用いて測定した。表２及び図５のように、コントロール（２１）及び平均油滴径５５０ｎｍの多相エマルション製剤では速やかに血中からインスリンが消失した．これはPEGが配向した製剤（PEG＋：PEGが含まれているもの）（２２）および配向していない製剤（PEG−：PEGが含まれていないもの）（２３）のいずれも消失が早かった．一方，平均油滴径２００ｎｍの多相エマルション製剤は、PEG配向製剤PEG＋（２４）および配向していない製剤PEG−（２５）のいずれも長時間血中でインスリンが検出され、血中滞留性が著しく向上したことが確認された。特に、平均油滴径２００ｎｍの多相エマルション製剤では、３時間にわたり血中の初期濃度を実質的に維持できることがわかる。
実施例４
rhインスリンを封入し、RES回避誘導物質及びターゲッティングリガンド援助物質を配向した多相エマルション製剤を下記の方法で調製し，その物性を調べた。
rhインスリンを封入し、RES回避誘導物質及びターゲッティングリガンド援助物質を配向した多相エマルション製剤を下記の方法で調製し，その物性を調べた。
１． 水溶性生理活性物質としてrhインスリン（Sigma社、大腸菌発現リコンビナントヒトインスリン）２５０ｍｇを０.０１ｍｏｌ／Ｌの塩酸１５ｍｌに溶解し、０.１ｍｏｌ／Ｌの水酸化ナトリウムで中和、蒸留水で２０ｍｌとした。大豆油２０ｍｌに５.０ｇのPGCRを加え、攪拌中にインスリン水溶液１９ｍｌを滴下し、W/Oエマルションを調製した。このW/Oエマルションを４℃、１，６００ｒｐｍで２０時間攪拌し、平均滴径４３１ｎｍの水滴粒子であるW/Oエマルションを得た。
２． 上記W/Oエマルション４４ｍｌを３５℃に加温しながらロータリーエバポレーターで-０.１ＭＰａで７．５時間減圧脱水し、２５ｍｌのrhインスリンS/Oサスペンションを得た。水分含量は０.０４重量％であった。
３． コレステロールプルラン（日本油脂社製、PUREBRIGHT CP-１００T、以下CHPと記す）１００ｍｇを蒸留水２０ｍｌに超音波分散し，これをPGCR６.０ｇを添加した大豆油２４ｍｌに加えて攪拌することによりW/Oエマルションを調製した。このW/Oエマルションを室温下１，６００ｒｐｍで４４時間攪拌し、平均滴径８０４ｎｍの水滴粒子で構成されるW/Oエマルション（以下，CHP-W/Oエマルション）を得た。
４． 上記CHP-W/Oエマルション５０ｍｌを３５℃に加温しながらロータリーエバポレーターで-０.１ＭＰａで６．５時間減圧脱水し、３０ｍｌのCHP-S/Oサスペンションを得た。水分含量は０.０３重量％であった。
５． 得られたrhインスリンS/Oサスペンション１５ ｍｌに、CHP-S/Oサスペンション１５ｍｌ、モノオレイン酸ポリエチレングリコール（日光ケミカルズ社製、MYO-２）３００ｍｇを添加し、均一に攪拌した。
６． １重量％ポリオキシエチレン硬化ひまし油（HCO-６０）、５重量％グルコースを含む外水相７５ｍｌに、上記混合S/Oサスペンション２５ｍｌを滴下し、スターラーにて３０分攪拌しS/O/Wエマルションを得た。これをシリンジに採取して平均孔径１１.８μｍの多孔質ガラス膜に透過し、平均油滴径６１００ｎｍの粗エマルションを得た。
７． 上記粗エマルションを、平均孔径３.１μｍの多孔質ガラス膜に１.５ＭＰａで膜透過させ、平均油滴径２１３０ｎｍに微細化した。以下、多孔質ガラス膜の平均孔径を１.８μｍ、１.５μｍ、１.０μｍ、０.９μｍ、０.８μｍ、０.７μｍ、０.６μｍ、０.５μｍと徐々に小さくし、それぞれに適切な圧力で膜透過させ、最終的に５４８ｎｍの平均油滴径のエマルションを得た。このエマルションを電気泳動法によるζ電位測定装置（大塚電子社製、ELS-８００）にてζ電位を測定したところ、−５.４２ｍＶであった。
以上の方法により得られた平均油滴径が１０００ｎｍ以下の多相エマルション製剤は安定性が高く，６ヶ月後でも油滴径や封入率は変化しなかった．
実施例５
rhインスリンを封入し、RES回避誘導物質及びターゲッティングリガンド援助物質を配向した多相エマルション型DDSキャリアの製造方法を以下に示す．
１． 実施例４のインスリンS/Oサスペンション、CHP-S/Oサスペンション、PEGを調製例３と同じ比率で混合した。
実施例５
rhインスリンを封入し、RES回避誘導物質及びターゲッティングリガンド援助物質を配向した多相エマルション型DDSキャリアの製造方法を以下に示す．
１． 実施例４のインスリンS/Oサスペンション、CHP-S/Oサスペンション、PEGを調製例３と同じ比率で混合した。
２． １重量％ポリオキシエチレン硬化ひまし油（HCO-６０）、５重量％グルコース、０.５重量％コール酸ナトリウム（和光純薬工業製）を含む外水相７５ｍｌに、上記混合S/Oサスペンション１５ｍｌを滴下（Ｓ／Ｏ滴の体積１６．７容積％）し、ホモミキサーにて１６，０００ｒｐｍで１分攪拌し、平均油滴径４１００ｎｍの粗エマルションを得た。
３．この粗エマルションを、平均孔径３.１μｍの多孔質ガラス膜に１.５ＭＰａで膜透過させ、平均油滴径１６１０ｎｍに微細化した。以下、多孔質ガラス膜の平均孔径を１.５μｍ、１.０μｍ、０.８μｍ、と徐々に小さくし、それぞれに適切な圧力で膜透過させ、平均油滴径７０６ｎｍのS/O/Wエマルションを得た。
４． 上記S/O/Wエマルションを、平均孔径０.７μｍ、０.６μｍ、０.５μｍの多孔質ガラス膜に３.５〜４．８ＭＰａで順次膜透過させ、平均油滴径５６５ｎｍのS/O/Wエマルションを得た。
５． 上記S/O/Wエマルション１０ｍｌに５重量％コール酸ナトリウムを添加した外水相７０ｍｌを加え、スターラーで攪拌混合した。これを、平均孔径０.４μｍ、０.２μｍのポリカーボネート膜（Whatman社製、サイクロポアメンブレン）に透過圧力１.５〜４.５ＭＰａで順次膜透過させた。最終的に、平均油滴径２２４ｎｍのS/O/Wエマルションを得た。このエマルションのζ電位は−７.２７ｍＶであった。
以上の方法により得られた平均油滴径が１０００ｎｍ以下の多相エマルション製剤は安定性が高く，６ヶ月後でも油滴径や封入率は変化しなかった。
実施例６
rhインスリンを封入し、RES回避誘導物質及びターゲッティングリガンド援助物質を配向した多相エマルション型DDSキャリアの特徴的な製造条件を以下に示す．
すなわち，実施例５の３で調製したS/O/Wエマルション１０ｍｌを、０.５重量％コール酸ナトリウムを加えた外水相７０ｍｌと混合して希釈（Ｓ／Ｏ滴の体積２容積％）した。これを平均孔径０.７μｍ、０.６μｍ、０.５μｍ、０.４μｍの多孔質ガラス膜に３.５〜４．８ＭＰａで順次膜透過させた。０.５μｍで膜透過したS/O/Wエマルションの平均油滴径は５４２ｎｍ，０.４μｍで膜透過したS/O/Wエマルションの平均油滴径は５４１ｎｍであり，実施例５の結果と比較すると，Ｓ／Ｏ滴の体積が小さくなっても平均油滴径は小さくならず，多孔質ガラス膜を使用する場合は平均孔径０.５〜０.４μｍが限界であることが判明した。
rhインスリンを封入し、RES回避誘導物質及びターゲッティングリガンド援助物質を配向した多相エマルション型DDSキャリアの特徴的な製造条件を以下に示す．
すなわち，実施例５の３で調製したS/O/Wエマルション１０ｍｌを、０.５重量％コール酸ナトリウムを加えた外水相７０ｍｌと混合して希釈（Ｓ／Ｏ滴の体積２容積％）した。これを平均孔径０.７μｍ、０.６μｍ、０.５μｍ、０.４μｍの多孔質ガラス膜に３.５〜４．８ＭＰａで順次膜透過させた。０.５μｍで膜透過したS/O/Wエマルションの平均油滴径は５４２ｎｍ，０.４μｍで膜透過したS/O/Wエマルションの平均油滴径は５４１ｎｍであり，実施例５の結果と比較すると，Ｓ／Ｏ滴の体積が小さくなっても平均油滴径は小さくならず，多孔質ガラス膜を使用する場合は平均孔径０.５〜０.４μｍが限界であることが判明した。
本発明の実施例では、肝硬変治療を目的とした肝実質細胞ＨＧＦ封入乳化製剤について説明したが、本発明は、インターフェロン、インターロイキン等といった体内安定性が低く血中半減期の短い多くの生理活性物質の問題点を、物質のPEGylation（PEG化）といった合成工程を経ずに解決することが可能である。また、全身投与では副作用が重篤なTNF-α等では、体内安定性を維持しつつ局所投与が可能となり、創薬化が困難であったこうした生理活性物質がもつ問題課題を解決する手段となり得る。
１ 生理活性物質
２ 封入添加剤
３ 油相
４ 油滴
５ 外水相
６ 油剤
７ 油性乳化剤
８ 油相添加剤
９ 水性乳化剤
１０ 水性添加剤
１１ RES回避誘導物質
１２ ターゲッティングリガンド援助物質
１３ 固相粒子
１４ 内水相液滴
１５ 平均油滴径８３２０ｎｍのエマルション
１６ 平均油滴径１６９０ｎｍのエマルション
１７ 平均孔径１.５μｍの多孔質ガラス膜を透過したエマルションの油滴径分布
１８ 平均孔径０.８μｍの多孔質ガラス膜を透過したエマルションの油滴径分布
１９ 平均孔径０.４μｍのポリカーボネート膜を透過したエマルションの油滴径分布
２０ 平均孔径０.２μｍのポリカーボネート膜を透過したエマルションの油滴径分布
２１ コントロールの血中インスリン濃度経時変化
２２ 平均油滴径５００ｎｍ PEG+ 製剤の血中インスリン濃度経時変化
２３ 平均油滴径５５０ｎｍ PEG- 製剤の血中インスリン濃度経時変化
２４ 平均油滴径２００ｎｍ PEG+ 製剤の血中インスリン濃度経時変化
２５ 平均油滴径２００ｎｍ PEG- 製剤の血中インスリン濃度経時変化
２ 封入添加剤
３ 油相
４ 油滴
５ 外水相
６ 油剤
７ 油性乳化剤
８ 油相添加剤
９ 水性乳化剤
１０ 水性添加剤
１１ RES回避誘導物質
１２ ターゲッティングリガンド援助物質
１３ 固相粒子
１４ 内水相液滴
１５ 平均油滴径８３２０ｎｍのエマルション
１６ 平均油滴径１６９０ｎｍのエマルション
１７ 平均孔径１.５μｍの多孔質ガラス膜を透過したエマルションの油滴径分布
１８ 平均孔径０.８μｍの多孔質ガラス膜を透過したエマルションの油滴径分布
１９ 平均孔径０.４μｍのポリカーボネート膜を透過したエマルションの油滴径分布
２０ 平均孔径０.２μｍのポリカーボネート膜を透過したエマルションの油滴径分布
２１ コントロールの血中インスリン濃度経時変化
２２ 平均油滴径５００ｎｍ PEG+ 製剤の血中インスリン濃度経時変化
２３ 平均油滴径５５０ｎｍ PEG- 製剤の血中インスリン濃度経時変化
２４ 平均油滴径２００ｎｍ PEG+ 製剤の血中インスリン濃度経時変化
２５ 平均油滴径２００ｎｍ PEG- 製剤の血中インスリン濃度経時変化
Claims (14)
- 油剤及び油性乳化剤を含む油相中に生理活性物質が封入されてなる油滴が外水相に分散している多相エマルションであって、
（１）前記生理活性物質が、水への溶解度が１μｍｏｌ／Ｌ以上であり、かつ、油水分配係数が０.００１以下であり、
（２）前記生理活性物質が、油滴中０.０１〜２５重量％の範囲で封入されている、ことを特徴とする、肝疾患治療用又は予防用の血中滞留型多相エマルション製剤。 - 下記１）〜４）の特徴を有する物質ａ；
１）水酸基を有する分子鎖をもつ、
２）油相への溶解度が１μｍｏｌ／Ｌ以上である、
３）油水分配係数が１０００以上である、
４）油相中において前記水酸基を有する分子鎖を外水相に向けて自己配向する、
がさらに油相中に含まれる、請求項１に記載の多相エマルション製剤。 - 前記物質ａが、コレステロールＰＥＧ（polyoxyethanyl-cholesteryl sebacate）、ジステアリン酸フォスファチジルエタノールアミンポリエチレングリコール（ＤＳＰＥ−ＰＥＧ）、モノステアリン酸ポリエチレングリコール、モノオレイン酸ポリエチレングリコール、モノステアリン酸エチレングリコール、ジラウリン酸ポリエチレングリコール、ジステアリン酸ポリエチレングリコール、ジオレイン酸ポリエチレングリコール、ステアリン酸ジエチレングリコール、ポリオキシエチレンＰＯＥ（３）ヒマシ油、ポリオキシエチレンＰＯＥ（５）硬化ヒマシ油及びＰＣＡ(ピロリドンカルボン酸)イソステアリン酸テアリン酸ＰＥＧ−４０水添ヒマシ油の少なくとも１種である、請求項２に記載の多相エマルション製剤。
- 前記物質ａが、油相中において前記分子鎖を外水相に向けて配向している、請求項２又は３に記載の多相エマルション製剤。
- 下記１）〜４）の特徴を有する物質ｂ；
１）肝実質細胞表面上のレセプターと特異的に結合する分子鎖を有する、
２）油相への溶解度が１μｍｏｌ／Ｌ以上である、
３）油水分配係数が１０００以上である、
４）油相中において前記分子鎖を外水相に向けて自己配向する、
がさらに油相中に含まれる、請求項１〜４のいずかに記載の多相エマルション製剤。 - 前記物質ｂが、下記の少なくとも１種；
１）プルラン誘導体、ガングリオシド誘導体、アシアロトランスフェリン誘導体、アシアロフェツイン誘導体、ラクトノラクトン誘導体及びラクトース誘導体ならびに
２）低比重リポ蛋白及び高比重リポ蛋白
である、請求項５に記載の多相エマルション製剤。 - 前記物質ｂが、油相中において前記分子鎖を外水相に向けて配向している、請求項５又は６に記載の多相エマルション製剤。
- 前記油滴の平均滴径が、１）動的散乱式粒度分布測定による値で５０〜５００ｎｍの範囲又は２）レーザー回折散乱式粒度分布測定による値で５００〜１０００ｎｍである、請求項１〜７のいずれかに記載の多相エマルション製剤。
- 請求項１〜８のいずれかに記載の静注用多相エマルション製剤。
- 肝疾患治療用又は予防用の血中滞留型多相エマルション製剤を製造する方法であって、
（１）生理活性物質の水溶液を油相に分散させることによりＷ／Ｏエマルションを調製する第１工程、
（２）前記Ｗ／Ｏエマルション中の水分の全部又は一部を除くことによりＳ／Ｏサスペンションを調製する第２工程、
（３）前記Ｓ／Ｏサスペンションを外水相に分散させることによりＳ／Ｏ／Ｗ系多相エマルションを得る第３工程、
（４）前記Ｓ／Ｏ／Ｗ系多相エマルションを多孔質膜を用いて膜透過させることにより、前記油相の平均滴径が５０〜１０００ｎｍである多相エマルション製剤を得る第４工程
を含む、多相エマルション製剤の製造方法。 - 第２工程に先立って、請求項２又は３に記載の物質ａ又はその溶液をあらかじめ油相へ溶解又は分散させる工程をさらに含む、請求項１０に記載の製造方法。
- 第３工程及び／又は第４工程において、前記物質ａの水酸基を有する分子鎖を外水相に自己配向させる、請求項１１に記載の製造方法。
- 第２工程に先立って、請求項４又は５に記載の物質ｂ又はその溶液をあらかじめ油相へ溶解又は分散させる工程をさらに含む、請求項１０に記載の製造方法。
- 第３工程及び／又は第４工程において、前記物質ｂの当該分子鎖を外水相に自己配向させる、請求項１３に記載の製造方法。
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Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2010013836A1 (ja) * | 2008-07-29 | 2010-02-04 | ナノキャリア株式会社 | 薬物内包アクティブターゲット型高分子ミセル、医薬組成物 |
| WO2011004552A1 (ja) * | 2009-07-09 | 2011-01-13 | 国立大学法人九州大学 | 水溶性薬物キャリア及びその製造方法 |
| JP2011020963A (ja) * | 2009-07-16 | 2011-02-03 | Miyazakiken Sangyo Shien Zaidan | 油性外用製剤及びその製造方法 |
| JP2014088453A (ja) * | 2008-05-15 | 2014-05-15 | Cocokara Fine Next Co Ltd | 異なる物性の薬物の一剤形化 |
| EP2218446A4 (en) * | 2007-11-07 | 2014-07-30 | Kaneka Corp | METHOD OF PRODUCING MICROCAPSULES USING SOLID FAT |
| JP2016084298A (ja) * | 2014-10-24 | 2016-05-19 | エス・ピー・ジーテクノ株式会社 | 血管注射用乳化物及びその製造方法並びにその製造に用いるデバイス |
| JP2018127453A (ja) * | 2017-02-10 | 2018-08-16 | 株式会社ツツミプランニング | 水溶性分子複合体、水溶性分子複合体含有油剤、及び分散液 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0797333A (ja) * | 1993-08-04 | 1995-04-11 | Takeda Chem Ind Ltd | 超分子構造型集合体 |
| JPH107587A (ja) * | 1996-06-24 | 1998-01-13 | Hirohito Tsubouchi | 肝細胞増殖因子含有乳化製剤及びその製造方法 |
| JPH10203962A (ja) * | 1997-01-27 | 1998-08-04 | Miyazaki Pref Gov | 薬物徐放性乳化製剤及びその製造方法 |
| JP2002371016A (ja) * | 2001-04-10 | 2002-12-26 | Yasuhiko Tabata | インターフェロン−高分子複合体及びその医薬用途 |
| JP2004008837A (ja) * | 2002-06-03 | 2004-01-15 | Miyazaki Prefecture | Ｓ／ｏサスペンション及びｓ／ｏ／ｗエマルション並びにそれらの製造方法 |
-
2005
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Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0797333A (ja) * | 1993-08-04 | 1995-04-11 | Takeda Chem Ind Ltd | 超分子構造型集合体 |
| JPH107587A (ja) * | 1996-06-24 | 1998-01-13 | Hirohito Tsubouchi | 肝細胞増殖因子含有乳化製剤及びその製造方法 |
| JPH10203962A (ja) * | 1997-01-27 | 1998-08-04 | Miyazaki Pref Gov | 薬物徐放性乳化製剤及びその製造方法 |
| JP2002371016A (ja) * | 2001-04-10 | 2002-12-26 | Yasuhiko Tabata | インターフェロン−高分子複合体及びその医薬用途 |
| JP2004008837A (ja) * | 2002-06-03 | 2004-01-15 | Miyazaki Prefecture | Ｓ／ｏサスペンション及びｓ／ｏ／ｗエマルション並びにそれらの製造方法 |
Cited By (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP2218446A4 (en) * | 2007-11-07 | 2014-07-30 | Kaneka Corp | METHOD OF PRODUCING MICROCAPSULES USING SOLID FAT |
| JP2014088453A (ja) * | 2008-05-15 | 2014-05-15 | Cocokara Fine Next Co Ltd | 異なる物性の薬物の一剤形化 |
| JP4538666B2 (ja) * | 2008-07-29 | 2010-09-08 | ナノキャリア株式会社 | 薬物内包アクティブターゲット型高分子ミセル、医薬組成物 |
| US8741339B2 (en) | 2008-07-29 | 2014-06-03 | Nonocarrier Co., Ltd. | Active targeting polymer micelle encapsulating drug, and pharmaceutical composition |
| AU2009277456B2 (en) * | 2008-07-29 | 2011-05-26 | Nanocarrier Co., Ltd. | Active targeting type polymeric micelle carrying drug enclosed therein and medicinal composition |
| JPWO2010013836A1 (ja) * | 2008-07-29 | 2012-01-12 | ナノキャリア株式会社 | 薬物内包アクティブターゲット型高分子ミセル、医薬組成物 |
| WO2010013836A1 (ja) * | 2008-07-29 | 2010-02-04 | ナノキャリア株式会社 | 薬物内包アクティブターゲット型高分子ミセル、医薬組成物 |
| US8568745B2 (en) | 2009-07-09 | 2013-10-29 | Kyushu University, National University Corporation | Water-soluble drug carrier and process for producing the same |
| WO2011004552A1 (ja) * | 2009-07-09 | 2011-01-13 | 国立大学法人九州大学 | 水溶性薬物キャリア及びその製造方法 |
| JP5618307B2 (ja) * | 2009-07-09 | 2014-11-05 | 国立大学法人九州大学 | 水溶性薬物キャリア及びその製造方法 |
| JP2011020963A (ja) * | 2009-07-16 | 2011-02-03 | Miyazakiken Sangyo Shien Zaidan | 油性外用製剤及びその製造方法 |
| JP2016084298A (ja) * | 2014-10-24 | 2016-05-19 | エス・ピー・ジーテクノ株式会社 | 血管注射用乳化物及びその製造方法並びにその製造に用いるデバイス |
| JP2018127453A (ja) * | 2017-02-10 | 2018-08-16 | 株式会社ツツミプランニング | 水溶性分子複合体、水溶性分子複合体含有油剤、及び分散液 |
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| Publication number | Publication date |
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