JP2006525027A - 分子スイッチを含むオリゴヌクレオチド - Google Patents
分子スイッチを含むオリゴヌクレオチド Download PDFInfo
- Publication number
- JP2006525027A JP2006525027A JP2006514197A JP2006514197A JP2006525027A JP 2006525027 A JP2006525027 A JP 2006525027A JP 2006514197 A JP2006514197 A JP 2006514197A JP 2006514197 A JP2006514197 A JP 2006514197A JP 2006525027 A JP2006525027 A JP 2006525027A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- oligonucleotide
- nucleic acid
- switch
- domain
- target
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6813—Hybridisation assays
- C12Q1/6834—Enzymatic or biochemical coupling of nucleic acids to a solid phase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6813—Hybridisation assays
- C12Q1/6816—Hybridisation assays characterised by the detection means
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6813—Hybridisation assays
- C12Q1/6816—Hybridisation assays characterised by the detection means
- C12Q1/6818—Hybridisation assays characterised by the detection means involving interaction of two or more labels, e.g. resonant energy transfer
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6813—Hybridisation assays
- C12Q1/6827—Hybridisation assays for detection of mutation or polymorphism
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6844—Nucleic acid amplification reactions
- C12Q1/6858—Allele-specific amplification
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
本発明は、マッチした標的またはミスマッチした標的を同定するために使用されるオリゴヌクレオチドに関する。本発明はさらに、研究試薬および臨床診断薬のためにこれらのオリゴヌクレオチドを使用する方法に関する。
本発明の背景の以下の考察は、本発明を理解する際の読者を助けるためにのみ提供され、本発明の先行技術を記載も、構成もしないことが認められる。
本発明は、核酸のハイブリダイゼーションまたは非ハイブリダイゼーションの検出を改善するための組成物および方法を提供する。特に、「分子スイッチ」領域を含むオリゴヌクレオチドが、ハイブリダイゼーションプローブまたはプライマーとして使用するために提供される。この分子スイッチ領域は、「開いた」(非ハイブリダイズされた)位置または「閉じた」(ハイブリダイズされた)位置であり得るが、一方、概してオリゴヌクレオチドは、標的配列に対して部分的にハイブリダイズされたままである(図1概略図参照)。開いた位置において、分子スイッチは、オリゴヌクレオチドと標的配列との間の「ミスマッチ」(すなわち、少なくとも1つの非ハイブリダイゼーション塩基対)の存在を検出するために使用され得る。閉じた位置において、分子スイッチは、オリゴヌクレオチドと標的配列との間の「マッチ」(または、相補的な核酸配列)を検出するために使用され得る。特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、標的核酸の位置に相補的である「アンカー」核酸領域を介して標的配列と会合したままである。さらなるこのような領域はまた、所望の場合、オリゴヌクレオチド内に提供され得る。この様式で、オリゴヌクレオチドの他の部分は、オリゴヌクレオチドと標的配列との間に形成されるハイブリッド二重鎖の2つの鎖の完全な「融解」または解離を引き起こすことなく「融解」し得る。あるいは、分子スイッチの設計は、オリゴヌクレオチド全体の不安定化を引き起こし得、解離パラメーター(例えば、融点(Tm))全体に影響し得る。
「分子スイッチ」を生成するための普遍的な塩基、天然の塩基またはそれらの類似体の使用を本明細書中に開示する。ここでこの「分子スイッチ」は、ハイブリダイゼーションプローブまたはプライマーのサブドメインを生成し、これは、ミスマッチの存在に対する感度を増強している。このようにして、このプローブまたはプライマーの「分子スイッチ」部分は、ハイブリダイズされる核酸標的から、プローブまたはプライマーの全体が解離することを必要とすることなく、「開放」または「閉鎖」し得る。本明細書中に示されるように、この「分子スイッチ」が、「開放」位置または「閉鎖」位置にあるスイッチに対して感応性の検出方法と組み合わせられる場合、標的配列の配列中の小さな変化を検出する能力が増幅される。本明細書中に示されるように、オリゴヌクレオチドに普遍的な塩基を含む分子スイッチの取り込みによって、単一ヌクレオチドほど小さい差異である核酸の相違を増幅する。実際に、本明細書中に提供される実施例に示されるように、4〜6個の普遍的な塩基および天然の塩基に結合する5〜8個の水素を含む例示的な「分子スイッチ」構築体の存在は、35℃の範囲を超えて単一のミスマッチを識別することが可能であった。それと比較して、全ての天然の塩基を含むオリゴヌクレオチドは、3℃〜5℃のみの効果を生じる。本明細書中に開示されるオリゴヌクレオチドは、非常に特異的であることが見い出された。「標的」によって、検出、定量、または増幅などされるべき核酸配列が意味され、この核酸配列は、増幅されるか、または増幅されず、そして一本鎖または二重鎖である、DNAもしくはRNAもしくはその類似体のいずれかからなる。
従って、上記オリゴヌクレオチドの種々の実施形態は、スイッチドメインの一部として「架橋ドメイン」を形成する普遍的なの非天然の塩基および/もしくは天然の塩基ならびに/または他の非天然の塩基および/もしくは天然の塩基を含み、そして種々の疾患を診断および処置するために試薬、プライマーおよびプローブとしてこのようなオリゴヌクレオチドを用いる方法を含む。この目的に用いられるように構築され得るオリゴヌクレオチドの実施形態は、米国特許出願09/931,732(2001年8月16日出願)、同09/932,129(2001年8月16日出願)、同09/136,080(1998年8月18日出願)、および同10/142,729(2002年5月8日出願)に見出され得る(これら全ては、その全体が本明細書中に参考として援用される)。
4−アセトアミド−4’−イソチオシアナトスチルベン−2,2’ジスルホン酸
アクリジンおよび誘導体:
アクリジン
アクリジンイソチオシアネート
Alexa Fluor(登録商標)350、Alexa Fluor(登録商標)488、Alexa Fluor(登録商標)546、Alexa Fluor(登録商標)555、Alexa Fluor(登録商標)568、Alexa Fluor(登録商標)594、Alexa Fluor(登録商標)647(Molecular Probes)
5−(2’−アミノエチル)アミノナフタレン−1−スルホン酸(EDANS)
4−アミノ−N−[3−ビニルスルホニル)フェニル]ナフタリミド−3,5ジスルホン酸塩(ルシファーイエロー VS)
N−(4−アニリノ−1−ナフチル)マレイミド
アントラニルアミド
Black Hole QuencherTM(BHQTM)色素(biosearch Technologies)
BODIPY(登録商標)R−6G、BODIPY(登録商標)530/550、BODIPY(登録商標)FL
ブリリアントイエロー
クマリンおよび誘導体:
クマリン
7−アミノ−4−メチルクマリン(AMC、Coumarin 120)
7−アミノ−4−トリフルオロメチルクマリン(couluarin)(Coumarin 151)
Cy2(登録商標)、Cy3(登録商標)、Cy3.5(登録商標)、Cy5(登録商標)、Cy5.5(登録商標)
シアノシン
4’,6−ジアミニジノ−2−フェニルインドール(DAPI)
5’,5”−ジブロモピロガロール−スルホンフタレイン(ブロモピロガロールレッド)
7−ジエチルアミノ−3−(4’−イソチオシアナトフェニル)−4−メチルクマリン
ジエチレントリアミンペンタアセテート
4,4’−ジイソチオシアナトジヒドロ−スチルベン−2,2’−ジスルホン酸
4,4’−ジイソチオシアナトスチルベン−2,2’−ジスルホン酸
5−[ジメチルアミノ]ナフタレン−1−塩化スルホニル(DNS、塩化ダンシル)
4−(4’−ジメチルアミノフェニルアゾ)安息香酸(DABCYL)
4−ジメチルアミノフェニルアゾフェニル−4’−イソチオシアネート(DABITC)
EclipseTM(Epoch Biosciences Inc.)
エオジンおよび誘導体:
エオジン
エオジンイソチオシアネート
エリトロシンおよび誘導体:
エリトロシン B
エリトロシンイソチオシアネート
エチジウム
フルオレセインおよび誘導体:
5−カルボキシフルオレセイン(FAM)
5−(4,6−ジクロロトリアジン−2−イル)アミノフルオロセイン(DTAF)
2’,7’−ジメトキシ−4’5’−ジクロロ−6−カルボキシフルオロセイン(JOE)
フルオロセイン
フルオロセインイソチオシアネート(FITC)
ヘキサクロロ−6−カルボキシフルオロセイン(HEX)
QFITC(XRITC)
テトラクロロフルオレセイン(TET)
フルオレスカミン
IR144
IR1446
マラカイトグリーンイソチオシアネート
4−メチルウンベリフェロン
オルトクレゾールフタレイン
ニトロチロシン
パラロザニリン
フェノールレッド
B−フィコエリトリン、R−フィコエリトリン
o−フタルジアルデヒド
Oregon Green(登録商標)
ヨウ化プロピジウム
ピレンおよび誘導体:
ピレン
ピレンブチレート
スクシニミジル 1−ピレンブチレート
QSY(登録商標)7、QSY(登録商標)9、QSY(登録商標)21、QSY(登録商標)35(Molecular Probes)
Reactive Red 4(Cibacron(登録商標)ブリリアントレッド 3B−A)
ローダミンおよび誘導体:
6−カルボキシ−X−ローダミン(ROX)
6−カルボキシローダミン(R6G)
リサミンローダミンB塩化スルホニル
ローダミン(Rhod)
ローダミンB
ローダミン123
ローダミングリーン
ローダミンXイソチオシアネート
スルホローダミンB
スルホローダミン101
スルホローダミン101の塩化スルホニル誘導体(Texas Red)
N,N,N’,N’−テトラメチル−6−カルボキシローダミン(TAMRA)
テトラメチルローダミン
テトラメチルローダミンイソシアネート(TRITC)
リボフラビン
ロゾリン酸(rosolic acid)
テルビウムキレート誘導体。
本明細書に記載のオリゴヌクレオチドはSNPの検出を含む多くの有用性を有し、このような有用性としては、他の診断用プロセス、発現解析、アレイ技術、配列決定、ハイブリダイゼーションおよび従来のオリゴヌクレオチドを使用する他の技術における応用が挙げられるが、これらに限定されない。本明細書に記載のオリゴヌクレオチドは、従来のオリゴヌクレオチドが使用される、当業者に公知のほとんどの方法において使用され得る。
上記プローブのスイッチドメインが、単一のミスマッチの影響によって制御されて「開き」得るか、または「閉じ」得るかどうかを決定するために、紫外線融解曲線測定を実施した。
50mM KCL
10mM Tris−HCl,pH7.5
2.5% スクロース
2.5mM MgCl2。
実施例1に記載されるプローブのアニーリングおよび融解を再試験したが、UVではなく、蛍光により測定した。完全なマッチの存在を、ミスマッチ一本鎖標的と比較した。
この実施例を、上記プローブ配列が、X11プローブ配列およびX14プローブ配列であり、そして上記標的配列が、AntH63DWtLong(マッチ)およびAntH63DMuLong(ミスマッチ)であったことを除いて、実施例2と同じ条件下で実施した。この実施例の目的は、さらにより長いスイッチ配列の効果を試験することであった。この実施例は、上記プローブのスイッチ部分をさらに長くすることが、マッチ標的とミスマッチ標的との間のTmのより良好な分離を与えるが、同時に、ずっとより低い温度(20℃)での識別は、X14プローブの場合、減少するかまたは全て失うことを実証した。従って、スイッチを含むプローブの融解温度特性は、そのスイッチ部分をさらに長くすることにより、さらに減少されて、所望される使用条件に適合され得る。図6は、これらのプローブのスイッチ部分が長くされた場合の、融解温度特性に対する効果を明確に示す。
ヘモクロマトーシス遺伝子標的H63Dを標的とした二重標識プローブの性能を、以下の標準的なPCRアッセイにおいて評価した。この実験において、分子スイッチを含む二重標識プローブを評価した。上記二重標識は、ブラックホールクエンチャー1(BHQ1)および蛍光標識FAMであった。上記二重標識に加えて、末端5’チオホスフェート、末端5’−アルキルチオホスフェートまたは末端5’チオホスフェートと一緒に、5’末端の3つのホスホチオエート結合を組み込むこと、および3つの2’−OMe含有ヌクレオチドを組み込むことにより、上記オリゴヌクレオチドの5’部分に、5’エンドヌクレアーゼ活性に対する耐性を与えた。
プローブのヌクレアーゼ安定性の試験として、PCRアッセイ後融解を実施して、プローブが、PCR増幅の間に分解されたかどうかを決定した。実施例3におけるものと同一のPCR反応を実施し、そして生じたプローブ標的相互作用を、融解温度に関して分析した。上記プローブX3WtH63D(配列番号3)を、野生型ヒトゲノムDNAに対して使用した。
スイッチ部分を含むプローブの有用性をさらに試験するために、共通の標的配列に対してそれらのスイッチ部分でオーバーラップしたプローブを、それらが、非常に広い温度範囲にわたって、ミスマッチ識別をさらに増強する能力について試験した。緩衝液およびアッセイ条件は、最終プローブ濃度および最終標的濃度が、2μM X9(配列番号9)、3μM HFEr91Wt(配列番号21)またはHFEr91Mu(配列番号22)であり、そしてX16(配列番号16)が存在しないかまたは6μM X16であるかのいずれかであったことを除いて、実施例2に記載されているものと同じであった。この実施例において、X16プローブは、そのスイッチ部分とX9プローブのスイッチ部分とにおいて重複するように設計されており、このとき、それらは、共通の配列に両方がハイブリダイズしていた。コンセプトは、上記X16プローブ(非標識)および上記X9プローブ(標識)の競合するスイッチ部分を設計し、それにより、それらが、標的中の共通配列のハイブリダイゼーションに対して競合することである。このコンセプトの例示のためには、図8を参照のこと。さらに、上記X9は、そのスイッチ部分においてHFEr91Wt(野生型)標的に対して完全に相補的であるように設計され、他方、上記X16プローブのスイッチ部分は、HFEr91Mu(ミスマッチ)標的に対して相補的である。この「闘争する」スイッチアプローチにおいて、上記X16プローブは、上記X9プローブのスイッチ部分をさらに置換してそのミスマッチ標的から離し、他方、それは、野生型標的による効力をほとんど有さない(なぜなら、それは、ミスマッチを有するからである)。図9は、このアプローチの利点を明確に示す。なぜなら、上記X16プローブの存在下、ミスマッチ標的と比較したマッチ標的に対する上記X9プローブの識別は、約4倍上昇し、そして、約30℃の温度範囲にわたって、非常に良好なミスマッチ識別を示すからである。
Claims (23)
- オリゴヌクレオチドであって、以下:
(a)標的核酸の核酸残基の第一の配列に相補的な核酸領域および
(b)少なくとも1つの架橋ドメインおよび少なくとも1つの結合ドメインを含むスイッチドメインであり、ここで、該領域(a)が、該標的核酸の核酸残基の該第一の配列と安定な二重鎖を形成する条件下で、該スイッチドメインが、(i)該結合ドメインに相補的である該標的核酸の核酸残基の第二の配列と(ii)該結合ドメインに相補的ではない少なくとも1つの核酸残基を含む該標的核酸の核酸残基の第二の配列とを区別し得る、
を含む、オリゴヌクレオチド。 - 少なくとも1つの検出可能な標識をさらに含む、請求項1に記載のオリゴヌクレオチド。
- 請求項2に記載のオリゴヌクレオチドであって、ここで、前記検出可能な標識から検出されるシグナル量が、前記スイッチドメインのハイブリダイゼーション状態の決定因子である、オリゴヌクレオチド。
- 請求項2に記載のオリゴヌクレオチドであって、ここで、前記少なくとも1つの検出可能な標識が、蛍光標識である、オリゴヌクレオチド。
- クエンチャーをさらに含む、請求項4に記載のオリゴヌクレオチドであって、ここで、該クエンチャーおよび前記蛍光標識が、該蛍光標識から検出されるシグナル量を調節するために相互作用する、オリゴヌクレオチド。
- クエンチャーおよび第二の蛍光標識をさらに含む、請求項2に記載のオリゴヌクレオチドであって、ここで、該第二の蛍光標識から検出されるシグナル量が、前記領域(a)のハイブリダイゼーション状態の決定因子である、オリゴヌクレオチド。
- 請求項3に記載のオリゴヌクレオチドであって、ここで、前記スイッチドメインが前記標的核酸にハイブリダイズしない場合に前記少なくとも1つの検出可能な標識から検出されるシグナル量が、該スイッチドメインが該標的核酸にハイブリダイズする場合の前記少なくとも1つの検出可能な標識から検出されるシグナル量に比例して減少する、オリゴヌクレオチド。
- 請求項2に記載のオリゴヌクレオチドであって、ここで、前記少なくとも1つの検出可能な標識が、第一の蛍光標識および第二の蛍光標識であり、該第一の蛍光標識および該第二の蛍光標識が、前記スイッチドメインのハイブリダイゼーション状態に依存して、該第一の蛍光標識および/または該第二の蛍光標識から検出されるシグナル量を調節するために相互作用する、オリゴヌクレオチド。
- 請求項2に記載のオリゴヌクレオチドであって、ここで、前記少なくとも1つの検出可能な標識が、化学発光標識である、オリゴヌクレオチド。
- 請求項5に記載のオリゴヌクレオチドであって、ここで、前記化学発光標識が、アクリジニウムエステルである、オリゴヌクレオチド。
- 請求項2に記載のオリゴヌクレオチドであって、ここで、前記少なくとも1つの検出可能な標識が、単一の電子伝導体である、オリゴヌクレオチド。
- オリゴヌクレオチドであって、以下:
(a)二本鎖標的核酸の核酸残基の第一の配列に相補的な核酸領域、および
(b)少なくとも1つの架橋ドメインおよび少なくとも1つの結合ドメインを含むスイッチドメインであり、ここで、該領域(a)が該二本鎖標的核酸の核酸残基の該第一の配列と安定な三重鎖核酸を形成する条件下で、該スイッチドメインが、(i)該結合ドメインに相補的である該二本鎖標的核酸の核酸残基の第二の配列と(ii)該結合ドメインに相補的ではない少なくとも1つの核酸残基を含む該二本鎖標的核酸の核酸残基の第二の配列とを区別し得る、スイッチドメイン、
を含む、オリゴヌクレオチド。 - 請求項1に記載の少なくとも2つのオリゴヌクレオチドを含むタンデムオリゴヌクレオチドアセンブリー。
- 第一のオリゴヌクレオチドと会合する第一の検出可能な標識および第二のオリゴヌクレオチドと会合する第二の検出可能な標識さらに含む、請求項13に記載のタンデムオリゴヌクレオチドアセンブリーであって、ここで、該タンデムオリゴヌクレオチドアセンプリーが標的核酸にハイブリダイズする場合に該第一の検出可能な標識および/または該第二の検出可能な標識から検出されるシグナル量は、いずれかの該オリゴヌクレオチドが該標的核酸に個々にハイブリダイズする場合の検出される該第一の検出可能な標識および/または該第二の検出可能な標識から検出されるシグナル量に比例して変化する、オリゴヌクレオチド。
- 請求項14に記載のタンデムオリゴヌクレオチドアセンブリーであって、ここで、前記第一の検出可能な標識および前記第二の検出可能はともに、蛍光標識であり、さらに、前記第一のオリゴヌクレオチドおよび第二のオリゴヌクレオチドがともに前記標的核酸にハイブリダイズする場合に、前記第一の蛍光標識が、放射的にエネルギーを前記第二の蛍光標識に移す、タンデムオリゴヌクレオチドアセンブリー。
- 請求項13に記載のタンデムオリゴヌクレオチドアセンブリーであって、ここで、前記第一のオリゴヌクレオチドおよび前記第二のオリゴヌクレオチドの結合ドメインが、少なくとも部分的に前記標的核酸のオーバーラップ領域とハイブリダイズする、タンデムオリゴヌクレオチドアセンブリー。
- 請求項13に記載のタンデムオリゴヌクレオチドアセンブリーであって、ここで、前記第一のオリゴヌクレオチドが、固体支持体に付着される、タンデムオリゴヌクレオチドアセンブリー。
- 5’改変をさらに含む、請求項1に記載のオリゴヌクレオチドであって、ここで、該改変されたオリゴヌクレオチドが、5’ヌクレアーゼ活性を有する酵素による消化に対して耐性である、オリゴヌクレオチド。
- 請求項1に記載のオリゴヌクレオチドであって、ここで、前記領域(a)が、15〜150のヌクレオチド長である、オリゴヌクレオチド。
- 請求項1に記載のオリゴヌクレオチドであって、ここで、該オリゴヌクレオチドは、酵素反応におけるプライマーとしての使用に適切であり、前記スイッチドメインが、3’末端に位置付けられ、これによって、該オリゴヌクレオチドが、該スイッチドメインの結合ドメインが前記標的核酸に相補的でない場合には3’伸長を支持しないが、該スイッチドメインの結合ドメインが該標的核酸に相補的である場合には伸長を支持する、オリゴヌクレオチド。
- 請求項1に記載のオリゴヌクレオチドであって、ここで、該オリゴヌクレオチドが、電子伝導性の固体支持体に付着され、そして前記標的核酸へのハイブリダイゼーション量が、電流フロー量を制御する、オリゴヌクレオチド。
- サンプル中の、請求項1に記載のオリゴヌクレオチドの結合ドメインに相補的である標的配列の量を決定するための方法であって、該方法は、以下:ハイブリダイゼーションに適した条件下で請求項1に記載のオリゴヌクレオチドと該標的核酸を含むサンプルとを接触させる工程;およびスイッチドメインの結合ドメインに相補的である該サンプル中の該標的核酸配列の量の指標として該スイッチドメインのハイブリダイゼーション状態を決定する工程を包含する、方法。
- サンプル中の、請求項15に記載のタンデムオリゴヌクレオチドアセンブリーの第一のオリゴヌクレオチドの結合ドメインに相補的である標的配列の量および請求項15に記載のタンデムオリゴヌクレオチドアセンブリーの第二のオリゴヌクレオチドの結合ドメインに相補的である標的配列の量を決定するための方法であって、該方法は、以下:ハイブリダイゼーションに適した条件下で請求項15に記載のタンデムオリゴヌクレオチドアセンブリーと該標的核酸を含むサンプルとを接触させる工程;および第一の蛍光標識から第二の蛍光標識へのエネルギー移動を測定して各スイッチドメインのハイブリダイゼーション状態を決定する工程を包含する、方法。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US46751703P | 2003-05-01 | 2003-05-01 | |
PCT/US2004/013515 WO2004098386A2 (en) | 2003-05-01 | 2004-04-30 | Oligonucleotides comprising a molecular switch |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2006525027A true JP2006525027A (ja) | 2006-11-09 |
Family
ID=33435085
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2006514197A Pending JP2006525027A (ja) | 2003-05-01 | 2004-04-30 | 分子スイッチを含むオリゴヌクレオチド |
Country Status (6)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US8679789B2 (ja) |
EP (1) | EP1618215A4 (ja) |
JP (1) | JP2006525027A (ja) |
AU (1) | AU2004235747B2 (ja) |
CA (1) | CA2524572C (ja) |
WO (1) | WO2004098386A2 (ja) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2016098595A1 (ja) * | 2014-12-19 | 2016-06-23 | 栄研化学株式会社 | 一塩基多型検出用オリゴヌクレオチドプローブ及び一塩基多型検出方法 |
JP2018138041A (ja) * | 2011-05-04 | 2018-09-06 | バイオセプト インコーポレイティッド | 核酸配列変種を検出するための方法 |
Families Citing this family (60)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP1853732A2 (en) * | 2005-02-28 | 2007-11-14 | Gen-Probe Incorporated | Compositions and methods of detecting an analyte by using a nucleic acid hybridization switch probe |
US9957569B2 (en) * | 2005-09-12 | 2018-05-01 | The Regents Of The University Of Michigan | Recurrent gene fusions in prostate cancer |
JP5512125B2 (ja) | 2005-09-12 | 2014-06-04 | ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ ミシガン | 前立腺癌における再発性遺伝子融合 |
EP2013561B1 (en) * | 2006-03-31 | 2012-06-27 | Columbia University | Binary probes for fluorescent analysis of nucleic acids |
PL2017356T3 (pl) | 2006-06-06 | 2012-03-30 | Gen Probe Inc | Znakowane oligonukleotydy i ich zastosowanie w sposobach amplifikacji kwasu nukleinowego |
JP2008167739A (ja) * | 2006-06-14 | 2008-07-24 | National Institute Of Advanced Industrial & Technology | Rna干渉効果が高い修飾型二本鎖rna |
WO2008075871A1 (en) * | 2006-12-18 | 2008-06-26 | Panagene Inc. | Peptide nucleic acid oligomers comprising universal bases, preparation methods thereof, and kits, devices and methods for the analysis, detection or modulation of nucleic acids using the same |
US9303291B2 (en) * | 2007-07-06 | 2016-04-05 | The Regents Of The University Of Michigan | MIPOL1-ETV1 gene rearrangements |
EP3018216B1 (en) | 2007-07-06 | 2018-09-12 | The Regents Of The University Of Michigan | Recurrent gene fusions in prostate cancer |
EP2259787B1 (en) * | 2008-03-25 | 2015-12-23 | The Regents of the University of Michigan | Ikki inhibitor therapies and screening methods, and related ikki diagnostics |
EP2806037B1 (en) | 2008-05-13 | 2016-09-21 | Gen-Probe Incorporated | Inactivatable target capture oligomers for use in the selective hybridization and capture of target nucleic acid sequences |
EP2806054A1 (en) | 2008-05-28 | 2014-11-26 | Genomedx Biosciences Inc. | Systems and methods for expression-based discrimination of distinct clinical disease states in prostate cancer |
EP2331703A2 (en) * | 2008-09-12 | 2011-06-15 | Promega Corporation | Assessing expression of endogenous and exogenous genes |
WO2010081001A2 (en) | 2009-01-09 | 2010-07-15 | The Regents Of The University Of Michigan | Recurrent gene fusions in cancer |
US8409802B2 (en) | 2009-08-14 | 2013-04-02 | Roche Molecular Systems, Inc. | Format of probes to detect nucleic acid differences |
US9938582B2 (en) * | 2009-09-17 | 2018-04-10 | The Regents Of The University Of Michigan | Recurrent gene fusions in prostate cancer |
US8383793B2 (en) | 2010-04-15 | 2013-02-26 | St. Jude Children's Research Hospital | Methods and compositions for the diagnosis and treatment of cancer resistant to anaplastic lymphoma kinase (ALK) kinase inhibitors |
CN103109187B (zh) | 2010-07-07 | 2015-03-25 | 密执安大学评议会 | 乳腺癌的诊断和治疗 |
US20150218639A1 (en) | 2014-01-17 | 2015-08-06 | Northwestern University | Biomarkers predictive of predisposition to depression and response to treatment |
US10093981B2 (en) | 2010-10-19 | 2018-10-09 | Northwestern University | Compositions and methods for identifying depressive disorders |
US10233501B2 (en) | 2010-10-19 | 2019-03-19 | Northwestern University | Biomarkers predictive of predisposition to depression and response to treatment |
US20150225792A1 (en) | 2014-01-17 | 2015-08-13 | Northwestern University | Compositions and methods for identifying depressive disorders |
KR20120042100A (ko) * | 2010-10-22 | 2012-05-03 | 주식회사 씨젠 | 이중표지 고정화 프로브를 이용한 고상에서의 타겟 핵산서열 검출 |
US8945556B2 (en) | 2010-11-19 | 2015-02-03 | The Regents Of The University Of Michigan | RAF gene fusions |
CN103403181B (zh) | 2010-11-19 | 2016-09-07 | 密执安大学评议会 | ncRNA及其用途 |
WO2012112558A1 (en) | 2011-02-14 | 2012-08-23 | The Regents Of The University Of Michigan | Compositions and methods for the treatment of obesity and related disorders |
US10208334B2 (en) * | 2011-04-12 | 2019-02-19 | Michael D. Okura | Systems, methods, and compositions for enhancing the specificity of nucleic acid hybridization |
CN103857803A (zh) | 2011-04-12 | 2014-06-11 | 迈克尔·大仓 | 利用杂交和增强解离的高精度基因组学分析平台的方法及装置 |
GB201116131D0 (en) * | 2011-09-19 | 2011-11-02 | Epistem Ltd | Probe |
EP2758547B1 (en) | 2011-09-21 | 2015-09-16 | Gen-Probe Incorporated | Methods for amplifying nucleic acid using tag-mediated displacement |
US9863004B2 (en) | 2011-11-04 | 2018-01-09 | Gen-Probe Incorporated | Molecular assay reagents and methods |
US10308980B2 (en) | 2011-11-04 | 2019-06-04 | Oslo Universitetssykehus Hf | Methods and biomarkers for analysis of colorectal cancer |
US20130189679A1 (en) | 2011-12-20 | 2013-07-25 | The Regents Of The University Of Michigan | Pseudogenes and uses thereof |
WO2013096838A2 (en) | 2011-12-22 | 2013-06-27 | Ibis Biosciences, Inc. | Systems and methods for isolating nucleic acids |
WO2013096799A1 (en) | 2011-12-22 | 2013-06-27 | Ibis Biosciences, Inc. | Systems and methods for isolating nucleic acids from cellular samples |
US9822417B2 (en) | 2012-01-09 | 2017-11-21 | Oslo Universitetssykehus Hf | Methods and biomarkers for analysis of colorectal cancer |
CN104220876A (zh) | 2012-02-21 | 2014-12-17 | 奥斯陆大学医院 | 用于宫颈癌的检测和预后的方法和生物标志物 |
US20150111758A1 (en) | 2012-03-06 | 2015-04-23 | Oslo Universitetssykehus Hf | Gene signatures associated with efficacy of postmastectomy radiotherapy in breast cancer |
EP2834370B1 (en) | 2012-04-03 | 2019-01-02 | The Regents Of The University Of Michigan | Biomarker associated with irritable bowel syndrome and crohn's disease |
WO2014005076A2 (en) | 2012-06-29 | 2014-01-03 | The Regents Of The University Of Michigan | Methods and biomarkers for detection of kidney disorders |
AU2013282319B2 (en) | 2012-06-29 | 2018-05-17 | Htg Molecular Diagnostics, Inc. | Nuclease protection methods for detection of nucleotide variants |
EP3435084B1 (en) | 2012-08-16 | 2023-02-22 | Decipher Biosciences, Inc. | Prostate cancer prognostics using biomarkers |
EP2971169A4 (en) | 2013-03-13 | 2016-10-26 | Abbott Molecular Inc | SYSTEMS AND METHODS FOR ISOLATING NUCLEIC ACIDS |
EP2971171A4 (en) | 2013-03-14 | 2016-11-02 | Abbott Molecular Inc | SYSTEMS AND METHODS FOR MULTIPLEX AMPLIFICATION SPECIFIC TO METHYLATION |
US9365581B2 (en) | 2013-05-02 | 2016-06-14 | The Regents Of The University Of Michigan | Deuterated amlexanox |
US9909181B2 (en) | 2013-12-13 | 2018-03-06 | Northwestern University | Biomarkers for post-traumatic stress states |
WO2015188178A1 (en) | 2014-06-06 | 2015-12-10 | The Regents Of The University Of Michigan | Compositions and methods for characterizing and diagnosing periodontal disease |
WO2016196478A1 (en) | 2015-06-01 | 2016-12-08 | St. Jude Children's Research Hospital | Methods and compositions for prognostications and/or clinical management of graft-versus-host disease and transplant rejection |
EP3407974A4 (en) | 2016-01-29 | 2019-08-28 | The Regents Of The University Of Michigan | ANALOGUES OF AMLEXANOX |
WO2018013509A1 (en) | 2016-07-11 | 2018-01-18 | Arizona Board Of Regents On Behalf Of The University Of Arizona | Compositions and methods for diagnosing and treating arrhythmias |
CN110506127B (zh) | 2016-08-24 | 2024-01-12 | 维拉科特Sd公司 | 基因组标签预测前列腺癌患者对术后放射疗法应答性的用途 |
WO2018127786A1 (en) | 2017-01-06 | 2018-07-12 | Oslo Universitetssykehus Hf | Compositions and methods for determining a treatment course of action |
AU2018210695A1 (en) | 2017-01-20 | 2019-08-08 | The University Of British Columbia | Molecular subtyping, prognosis, and treatment of bladder cancer |
WO2018165600A1 (en) | 2017-03-09 | 2018-09-13 | Genomedx Biosciences, Inc. | Subtyping prostate cancer to predict response to hormone therapy |
US11078542B2 (en) | 2017-05-12 | 2021-08-03 | Decipher Biosciences, Inc. | Genetic signatures to predict prostate cancer metastasis and identify tumor aggressiveness |
EP3714043A4 (en) | 2017-11-22 | 2021-08-11 | The Regents of The University of Michigan | COMPOSITIONS AND METHODS OF TREATMENT OF CANCER |
WO2019202536A1 (en) | 2018-04-18 | 2019-10-24 | St. Jude Children's Research Hospital | Genotyping assays to identify mutations in xaf1 |
WO2019213619A1 (en) | 2018-05-04 | 2019-11-07 | Abbott Laboratories | Hbv diagnostic, prognostic, and therapeutic methods and products |
WO2023021330A1 (en) | 2021-08-16 | 2023-02-23 | University Of Oslo | Compositions and methods for determining a treatment course of action |
WO2023086335A2 (en) * | 2021-11-12 | 2023-05-19 | Chan Zuckerberg Biohub, Inc. | Method for massively-parallel screening of aptamer switches |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2000011446A2 (en) * | 1998-08-21 | 2000-03-02 | University Of Virginia Patent Foundation | Signal generating oligonucleotide-based biosensor |
JP2000511434A (ja) * | 1996-06-06 | 2000-09-05 | ウィスコンシン アラムニ リサーチ ファンデーション | 人工的ミスマッチハイブリダイゼーション |
JP2001513623A (ja) * | 1996-07-16 | 2001-09-04 | インタージェン カンパニー | 分子エネルギー輸送標識を有する核酸増幅オリゴヌクレオチドおよびそれに基づく方法 |
JP2001519170A (ja) * | 1997-10-02 | 2001-10-23 | オアシス バイオサイエンスイズ インコーポレイティッド | 組合せアンチセンス・ライブラリー |
JP2002514909A (ja) * | 1996-09-24 | 2002-05-21 | ラピジーン,インコーポレイテッド | ハイブリダイゼーション特異性を増強するための組成物および方法 |
JP2002519073A (ja) * | 1998-07-02 | 2002-07-02 | ジェン−プローブ・インコーポレーテッド | 分子トーチ(torch) |
Family Cites Families (25)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US610A (en) * | 1838-02-15 | Improvement in fire-arms | ||
US3020097A (en) * | 1960-04-26 | 1962-02-06 | Bullard Co | Bearing gib |
US4683194A (en) * | 1984-05-29 | 1987-07-28 | Cetus Corporation | Method for detection of polymorphic restriction sites and nucleic acid sequences |
US4950613A (en) * | 1988-02-26 | 1990-08-21 | Gen-Probe Incorporated | Proteted chemiluminescent labels |
US6984487B1 (en) * | 1989-08-22 | 2006-01-10 | Hsc Research Development Corporation | Cystic fibrosis gene |
US5489677A (en) * | 1990-07-27 | 1996-02-06 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleoside linkages containing adjacent oxygen and nitrogen atoms |
US5541307A (en) * | 1990-07-27 | 1996-07-30 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Backbone modified oligonucleotide analogs and solid phase synthesis thereof |
US5223618A (en) * | 1990-08-13 | 1993-06-29 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 4'-desmethyl nucleoside analog compounds |
US5378825A (en) * | 1990-07-27 | 1995-01-03 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Backbone modified oligonucleotide analogs |
US5539082A (en) * | 1993-04-26 | 1996-07-23 | Nielsen; Peter E. | Peptide nucleic acids |
WO1992021694A1 (en) * | 1991-06-06 | 1992-12-10 | Baylor College Of Medicine | Molecular diagnosis of autosomal dominant charcot-marie-tooth disease |
US5925517A (en) | 1993-11-12 | 1999-07-20 | The Public Health Research Institute Of The City Of New York, Inc. | Detectably labeled dual conformation oligonucleotide probes, assays and kits |
US5538848A (en) * | 1994-11-16 | 1996-07-23 | Applied Biosystems Division, Perkin-Elmer Corp. | Method for detecting nucleic acid amplification using self-quenching fluorescence probe |
WO1996034983A1 (en) * | 1995-05-05 | 1996-11-07 | The Perkin-Elmer Corporation | Methods and reagents for combined pcr amplification and hybridization probing assay |
GB9602028D0 (en) * | 1996-02-01 | 1996-04-03 | Amersham Int Plc | Nucleoside analogues |
US6025130A (en) | 1996-04-04 | 2000-02-15 | Mercator Genetics, Inc. | Hereditary hemochromatosis gene |
EP0892808B1 (en) | 1996-04-12 | 2008-05-14 | PHRI Properties, Inc. | Detection probes, kits and assays |
US5866336A (en) * | 1996-07-16 | 1999-02-02 | Oncor, Inc. | Nucleic acid amplification oligonucleotides with molecular energy transfer labels and methods based thereon |
US6361940B1 (en) * | 1996-09-24 | 2002-03-26 | Qiagen Genomics, Inc. | Compositions and methods for enhancing hybridization and priming specificity |
US6261783B1 (en) * | 1997-12-15 | 2001-07-17 | Gilead Sciences, Inc. | Homogeneous detection of a target through nucleic acid ligand-ligand beacon interaction |
WO2000024941A1 (en) * | 1998-10-27 | 2000-05-04 | Clinical Micro Sensors, Inc. | Detection of target analytes using particles and electrodes |
WO2000028090A2 (en) * | 1998-11-12 | 2000-05-18 | Nyxis, Inc. | Diagnostic assay for cancer |
EP1430150B1 (en) * | 2001-09-24 | 2015-08-19 | One Lambda, Inc. | Diagnostic probe detection system |
US7198897B2 (en) | 2001-12-19 | 2007-04-03 | Brandeis University | Late-PCR |
US20040086879A1 (en) | 2001-12-20 | 2004-05-06 | Yingufu Li | Tripartite molecular beacons |
-
2004
- 2004-04-30 WO PCT/US2004/013515 patent/WO2004098386A2/en active Application Filing
- 2004-04-30 US US10/837,530 patent/US8679789B2/en active Active
- 2004-04-30 AU AU2004235747A patent/AU2004235747B2/en not_active Ceased
- 2004-04-30 CA CA2524572A patent/CA2524572C/en not_active Expired - Fee Related
- 2004-04-30 EP EP04751076A patent/EP1618215A4/en not_active Ceased
- 2004-04-30 JP JP2006514197A patent/JP2006525027A/ja active Pending
-
2014
- 2014-01-13 US US14/153,261 patent/US9243286B2/en not_active Expired - Lifetime
Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2000511434A (ja) * | 1996-06-06 | 2000-09-05 | ウィスコンシン アラムニ リサーチ ファンデーション | 人工的ミスマッチハイブリダイゼーション |
JP2001513623A (ja) * | 1996-07-16 | 2001-09-04 | インタージェン カンパニー | 分子エネルギー輸送標識を有する核酸増幅オリゴヌクレオチドおよびそれに基づく方法 |
JP2002514909A (ja) * | 1996-09-24 | 2002-05-21 | ラピジーン,インコーポレイテッド | ハイブリダイゼーション特異性を増強するための組成物および方法 |
JP2001519170A (ja) * | 1997-10-02 | 2001-10-23 | オアシス バイオサイエンスイズ インコーポレイティッド | 組合せアンチセンス・ライブラリー |
JP2002519073A (ja) * | 1998-07-02 | 2002-07-02 | ジェン−プローブ・インコーポレーテッド | 分子トーチ(torch) |
WO2000011446A2 (en) * | 1998-08-21 | 2000-03-02 | University Of Virginia Patent Foundation | Signal generating oligonucleotide-based biosensor |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2018138041A (ja) * | 2011-05-04 | 2018-09-06 | バイオセプト インコーポレイティッド | 核酸配列変種を検出するための方法 |
WO2016098595A1 (ja) * | 2014-12-19 | 2016-06-23 | 栄研化学株式会社 | 一塩基多型検出用オリゴヌクレオチドプローブ及び一塩基多型検出方法 |
JPWO2016098595A1 (ja) * | 2014-12-19 | 2017-07-06 | 栄研化学株式会社 | 一塩基多型検出用オリゴヌクレオチドプローブ及び一塩基多型検出方法 |
US11512343B2 (en) | 2014-12-19 | 2022-11-29 | Eiken Kagaku Kabushiki Kaisha | Oligonucleotide probe for detecting single nucleotide polymorphism, and method for detecting single nucleotide polymorphism |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP1618215A4 (en) | 2007-12-05 |
AU2004235747B2 (en) | 2009-05-28 |
CA2524572A1 (en) | 2004-11-18 |
AU2004235747A1 (en) | 2004-11-18 |
US20140193815A1 (en) | 2014-07-10 |
US20050042638A1 (en) | 2005-02-24 |
EP1618215A2 (en) | 2006-01-25 |
WO2004098386A2 (en) | 2004-11-18 |
US8679789B2 (en) | 2014-03-25 |
CA2524572C (en) | 2018-07-10 |
WO2004098386A3 (en) | 2005-05-12 |
US9243286B2 (en) | 2016-01-26 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US9243286B2 (en) | Methods of using oligonucleotides comprising a molecular switch | |
US11827923B2 (en) | Method of fluorescent detection of isothermal loop-mediated amplification (LAMP) of a target nucleic acid, oligonucleotides and kits thereof | |
JP3843215B2 (ja) | 高い特異性を有するプライマー、増幅法およびキット | |
AU2001242634B2 (en) | Hybridisation beacon and method of rapid sequence detection and discrimination | |
JP4440469B2 (ja) | 組み込まれたシグナリング系に使用するためのpcrプライマー・コンストラクト | |
US7998673B2 (en) | Hybridisation beacon and method of rapid sequence detection and discrimination | |
US20070059690A1 (en) | "Met/fret based method of target nucleic acid detection whereby the donor/acceptor moieties are on complementary strands" | |
US7504218B2 (en) | Key probe compositions and methods for polynucleotide detection | |
JP6178430B2 (ja) | Pto切断及び延長依存的非ハイブリダイゼーションアッセイによるターゲット核酸配列の検出 | |
JP2017523799A (ja) | 核酸アッセイにおける改善された融解識別と多重化のためのプローブ | |
AU2001242634A1 (en) | Hybridisation beacon and method of rapid sequence detection and discrimination | |
JP2000510337A (ja) | 核酸塩基配列の検出方法 | |
JP6876437B2 (ja) | 鎖侵入に基づくdna増幅法 | |
KR20200087723A (ko) | Egfr 돌연변이 검출을 위한 dna 중합효소 및 이를 포함하는 키트 | |
US11753679B2 (en) | Looped primer and loop-de-loop method for detecting target nucleic acid | |
Fenati et al. | Single nucleotide polymorphism discrimination with and without an ethidium bromide intercalator | |
KR102575618B1 (ko) | 가이드 프로브 및 클램핑 프로브를 이용한 표적핵산 증폭방법 및 이를 포함하는 표적핵산 증폭용 조성물 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20070329 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20091228 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20100315 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20110302 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20110509 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20110516 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20110812 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20110822 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20120502 |