JP2006515004A - インドリルマレイミド誘導体 - Google Patents

Abstract

Ｔリンパ球および／またはＰＫＣ、またはＧＳＫ−３βを介する障害または疾患の処置または予防に有用な、式（Ｉ）
【化１】

で示される化合物を提供する。

Description

発明の詳細な説明

本発明は、インドリルマレイミド誘導体、それらの製造法およびそれらを含む医薬組成物に関する。

より具体的には、本発明は、式Ｉ

［式中、
Ｒ_ａは、Ｈ；Ｃ_１−４アルキル；またはＯＨ、ＮＨ_２、ＮＨＣ_１−４アルキルまたはＮ（ジ−Ｃ_１−４アルキル）_２により置換されたＣ_１−４アルキルであり；
Ｒ_ｂは、Ｈ；ハロゲン；Ｃ_１−６アルキル；またはＣ_１−６アルコキシであり、そして、
Ｒは、式（ａ）または（ｂ）

〔式中、
Ｒ_１およびＲ_３はそれぞれ、ヘテロ環基であるか；または式（α）
−Ｘ−Ｒ_ｃ−Ｙ （α）
｛式中、Ｘは、直接結合、Ｏ、ＳまたはＮＲ_１１であり、ここでＲ_１１は、ＨまたはＣ_１−４アルキルであり、
Ｒ_ｃは、Ｃ_１−４アルキレンであるか、または１個のＣＨ_２をＣＲ_ｘＲ_ｙにより置換されているＣ_１−４アルキレンであり、ここでＲ_ｘおよびＲ_ｙのうち１個はＨであり、他はＣＨ_３であるか、Ｒ_ｘおよびＲ_ｙはそれぞれ、ＣＨ_３であるか、またはＲ_ｘおよびＲ_ｙは、一緒になって−ＣＨ_２−ＣＨ_２−を形成しており、
Ｙは、末端の炭素原子と結合し、そしてＯＨ、−ＮＲ_１２Ｒ_１３から選択され、ここでＲ_１２およびＲ_１３は、それぞれ独立してＨ、Ｃ_３−６シクロアルキル、Ｃ_３−６シクロアルキル−Ｃ_１−４アルキル、アリール、アリール−Ｃ_１−４アルキル、ヘテロアリール−Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_２−６アルケニル、または要すれば、ＯＨ、ハロゲン、Ｃ_１−４アルコキシまたは−ＮＲ_１４Ｒ_１５で末端の炭素原子を置換されていてよいＣ_１−４アルキルであり、ここでＲ_１４およびＲ_１５は、それぞれ独立してＨ、Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_３−６シクロアルキル、Ｃ_３−６シクロアルキル−Ｃ_１−４アルキル、アリール−Ｃ_１−４アルキルであり、またはＲ_１２およびＲ_１３は、それが結合する窒素原子と一緒にヘテロ環基を形成する｝
で示される基であり；そして、
Ｒ_２およびＲ_４は、それぞれ独立してＨ；ハロゲン；Ｃ_１−４アルキル；Ｃ_１−４アルコキシ；ＣＦ_３；ニトリル；ニトロまたはアミノである〕
で示される基である］
で示される化合物を提供する。

アルキルまたは、例えば、アルコキシの任意のアルキル部分は、直鎖または分岐であり得る。ハロゲンは、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩであり得、好ましくはＦまたはＣｌである。任意のアリールは、フェニルまたはナフチルであり得、好ましくはフェニルである。ヘテロアリールは、Ｎ、ＯおよびＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を含む５員から８員の芳香族環、例えばピリジルまたはピリミジルであり得る。

Ｒ_１またはＲ_３で示されるヘテロ環基とは、好ましくはＮ、ＯおよびＳから選択され、要すれば置換されていて良い、１個または２個のヘテロ原子を含む３員から８員、好ましくは５員から８員の飽和、不飽和または芳香族ヘテロ環を意味する。

Ｙで示されるヘテロ環基とは、ヘテロ原子として窒素、および、要すれば、好ましくはＮ、ＯおよびＳから選択され、要すれば置換されていて良い第二のヘテロ原子を含む、３員から８員、好ましくは５員から８員の飽和、不飽和または芳香族ヘテロ環を意味する。

Ｒ_１、Ｒ_３またはＹの適当な例としては、例えば、ピリジル、例えば３−または４−ピリジル、ピペリジル、例えばピペリジン−１−イル、３−または４−ピペリジル、ホモピペリジル、ピペラジニル、ホモピペラジニル、イミダゾリル、イミダゾリジニル、ピロリル、ピロリジニルまたはモルホリン−４−イルが含まれ、要すれば、例えば一置換または複数置換されていて良い。ヘテロ環基が置換されている場合、それは、１個またはそれ以上の環炭素原子、および／または存すれば環窒素原子にあってよい。環炭素原子の置換基の例としては、例えばＣ_１−４アルキル、例えばＣＨ_３；、要すればさらにＣ_１−４アルキルにより置換されていてよいＣ_３−６シクロアルキル、例えばシクロプロピル；

［式中、ｐは、１、２または３、好ましくは１である］；
ＣＦ_３；ハロゲン；ＮＨ_２；−ＣＨ_２−ＮＲ_１６Ｒ_１７（ここでＲ_１６およびＲ_１７は、それぞれ独立にＨ、Ｃ_１−４アルキルであるか、またはＲ_１６およびＲ_１７は、それらが結合する窒素原子と一緒にヘテロ環基またはヘテロアリールを形成している）；−ＣＨ_２−ＯＨ；−ＣＨ_２−Ｏ−Ｃ_１−４アルキル；−ＣＨ_２−ハロゲン；または−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ハロゲンが含まれる。環窒素原子の置換基の例としては、例えば、Ｃ_１−６アルキル；アシル、例えばＲ’_Ｘ−ＣＯ（ここで、Ｒ’_Ｘは、Ｈ、Ｃ_１−６アルキルまたはフェニルであり、要すればＣ_１−４アルキル、Ｃ_１−４アルコキシまたはアミノ、例えばホルミルにより置換されていて良い）；Ｃ_３−６シクロアルキル；Ｃ_３−６シクロアルキル−Ｃ_１−４アルキル；フェニル；フェニル−Ｃ_１−４アルキル、例えばベンジル；ヘテロ環基、例えば上記のような、例えば１個または２個の窒素原子を含む芳香族ヘテロ環基；または式（β）
−Ｒ_１８−Ｙ’ （β）
［式中、Ｒ_１８は、Ｏを挿入されたＣ_１−４アルキレンまたはＣ_２−４アルキレンであり、Ｙ’は、ＯＨ、ＮＨ_２、ＮＨ（Ｃ_１−４アルキル）またはＮ（Ｃ_１−４アルキル）_２である］
で示される基がある。Ｏを挿入されたＣ_２−４アルキレンとは、例えば−ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−であり得る。

環窒素における置換基がヘテロ環基である場合、それは、好ましくはＮ、ＯおよびＳから選択される１個または２個のヘテロ原子を含む５員または６員の飽和、不飽和または芳香族ヘテロ環であり得る。例としては、例えば３−または４−ピリジル、ピペリジル、例えばピペリジン−１−イル、３−または４−ピペリジル、ホモピペリジル、ピペラジニル、ホモピペラジニル、ピリミジニル、モルホリン−４−イル、イミダゾリル、イミダゾリジニル、ピロリルまたはピロリジニルが含まれる。

Ｒ_１、Ｒ_３またはＹで示されるヘテロ環基のさらなる例としては、例えば、式（γ）

［式中、
環Ｄは、５員、６員または７員の飽和、不飽和または芳香族環であり；
Ｘ_ｂは、−Ｎ＝、−Ｃ＝または−ＣＨ−であり；
Ｘ_ｃは、−Ｎ＝、−ＮＲ_ｆ−、−ＣＲ_ｆ’＝または−ＣＨＲ_ｆ’−であり、ここでＲ_ｆは、環窒素原子について上記の置換基であり、Ｒ_ｆ’は、環炭素原子について上記の置換基であり；
Ｃ_１およびＣ_２間の結合は、飽和であるか、または不飽和であり；
Ｃ_１およびＣ_２は、それぞれ独立して、要すれば、環炭素原子について上記のものから選択される１個または２個の置換基により置換されていて良い炭素原子であり；そして、
Ｃ_３およびＸ_ｂ間の線、およびＣ_１およびＸ_ｂ間の線はそれぞれ、５員、６員または７員の環Ｄを得るために必要な炭素原子数を示す］
で示される基が含まれ、故に、Ｙが式（γ）の基である場合、Ｘ_ｂおよびＸ_ｃのうち少なくとも１個が−Ｎ＝である。

好ましい式（γ）の基は、環Ｄが、１，４−ピペラジニル環を形成し、要すれば、記載のとおりＣ−および／またはＮ−置換されていて良いものである。

式（γ）の基の典型的な例としては、例えば３−または４−ピリジル；ピペリジン−１−イル；１−Ｎ−（Ｃ_１−４アルキル）−または−（ω−ヒドロキシ−Ｃ_１−４アルキル）−３−ピペリジル；モルホリン−４−イル；イミダゾリル；ピロリジニル；１−ピペラジニル；２−Ｃ_１−４アルキル−または−Ｃ_３−６シクロアルキル−１−ピペラジニル；３−Ｃ_１−４アルキル−または−Ｃ_３−６シクロアルキル−１−ピペラジニル；２，２−または３，５−または２，５−または２，６−ジ（Ｃ_１−４アルキル）−１−ピペラジニル；３，４，５−トリ−（Ｃ_１−４アルキル）−１−ピペラジニル；４−Ｎ−（Ｃ_１−４アルキル）−または−（ω−ヒドロキシ−Ｃ_１−４アルキル）−または−（ω−ジメチルアミノ−Ｃ_１−４アルキル）−１−ピペラジニル；４−Ｎ−ピリジン−４−イル−１−ピペラジニル；４−Ｎ−フェニル−または−Ｃ_３−６シクロアルキル−１−ピペラジニル；４−Ｎ−（Ｃ_１−４アルキル）−または−（ω−ヒドロキシ−Ｃ_１−４アルキル）−３−Ｃ_１−４アルキル−または−３，３−ジ（Ｃ_１−４アルキル）−１−ピペラジニル；４−Ｎ−（１−Ｃ_１−４アルキル−Ｃ_３−６シクロアルキル）−１−ピペラジニル；４−Ｎ−ホルミル−１−ピペラジニル；４−Ｎ−ピリミジン−２−イル−１−ピペラジニル；または４−Ｎ−Ｃ_１−４アルキル−１−ホモピペラジニルがある。

式（ｂ）の基にて、Ｒ_３は、好ましくは式（α）の基であり、ここでＸは直接結合であり、Ｒ_ｃは−ＣＨ_２−である。好ましくは、Ｙは−ＮＲ_１２Ｒ_１３である。好ましくは、Ｒ_１２およびＲ_１３はそれぞれ、それが結合する窒素原子と一緒にヘテロ環基を形成する以外の意義を有する。
Ｒ_ａが置換Ｃ_１−４アルキルである場合、置換基は、好ましくは末端の炭素原子に存する。

式Ｉの化合物にて、以下の、個別のまたは下位の組合せのいずれかの意義が好ましい：
１． Ｒ_ａは、Ｈ、メチル、エチルまたはイソプロピルであり；
２． Ｒ_ｂは、Ｈ、Ｃｌ、メチルまたはエチルであり；
３． Ｒ_１は、ヘテロ環基、例えばピペラジニルであり、要すれば、環窒素または環炭素にて置換されていて良く、例えば４−メチル−ピペラジン−１−イル、または４，７−ジアザ−スピロ［２．５］オクト−７−イルであるか；または式（α）の基であり、ここで、Ｘは直接結合であり、Ｒ_ｃはＣＨ_２であり、Ｙは−ＮＲ_１２Ｒ_１３であり、ここでＲ_１２およびＲ_１３は、それぞれ独立してＨ、Ｃ_３−６シクロアルキル−Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_２−６アルケニル、または要すれば、末端の炭素原子にてＯＨ、ハロゲンで置換されていてよいＣ_１−４アルキル、Ｃ_１−４アルコキシまたはＮＲ_１４Ｒ_１５、ここでＲ_１４およびＲ_１５は、それぞれ独立してＨまたはＣ_１−４アルキルであり；またはＲ_１２およびＲ_１３は、それが結合する窒素原子と一緒にヘテロ環基、例えばピペラジニルを形成し；または
４． Ｒ_２および／またはＲ_４は、Ｈ；ＣＨ_３；Ｃｌ、Ｆ；ＣＦ_３；ニトロまたはニトリルである。

式Ｉの化合物は、遊離型または塩形態、例えば、例えば有機酸または無機酸、例えば塩酸、酢酸またはトリフルオロ酢酸との付加塩で存在し得る。

式Ｉの化合物は、光学異性体、ラセミ体またはジアステレオマーの形態で存し得ることが認識されよう。例えば、ピペラジニル残基の３位にある置換基を担持する環炭素原子は、不斉炭素であり、Ｄ配置またはＬ配置をとり得る。本発明はすべてのエナンチオマーおよびその混合物を包含することが理解される。上記のような不斉炭素原子を示す出発物質に関しても、同様の見解が適用される。

本発明はまた、式Ｉの化合物を製造する方法を含み、それは、式ＩＩ

［式中、Ｒ_ａおよびＲ_ｂは上記に定義のとおりである］
で示される化合物と、式ＩＩＩ
Ｒ−ＣＨ_２−ＣＯ−ＮＨ_２ （ＩＩＩ）
［式中、Ｒは上記に定義のとおりである］
で示される化合物を反応させる工程を含み、
そして、必要であれば、適当な、遊離型で得られた式Ｉの結果化合物を塩形態に変換する工程またはその逆工程を含む。

前記方法は、例えばＷＯ０２／３８５６１またはＷＯ０３／０８２５９で開示のような、強塩基、例えばｔ−ＢｕＯＫの存在下に都合良く実行され得る。
式ＩＩおよびＩＩＩの化合物を、例えばＷＯ０２／３８５６１に開示のような公知の方法により製造することができる。

出発物質の製造について特に記載しない限り、前記化合物は、公知であるかまたは当技術分野にて公知または以下に記載の方法と類似の方法で製造され得る。
以下の実施例は、本発明の具体例である。
ＲＴ ＝ 室温
ＤＭＦ ＝ ジメチルホルムアミド
ＴＨＦ ＝ テトラヒドロフラン
ＦＣＣ ＝ フラッシュカラムクロマトグラフィー
ＴＬＣ ＝ 薄層クロマトグラフィー
ＤＢＵ ＝ １，８−ジアザビシクロ［５，４．０］ウンデク−７−エン
ＥｔＯＡｃ ＝ 酢酸エチル

実施例１：
３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−３−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル］−ピロール−２，５−ジオン

２−［６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−３−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル］−アセトアミド（６０ｍｇ、０．１３２ｍｍｏｌ）および（１Ｈ−インドール−３−イル）−オキソ−酢酸メチルエステル（４０ｍｇ、０．１９９ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦと２回共沸し、その後、無水ＴＨＦ（２ｍｌ）中に溶解する。１．０Ｍ ＫＯｔＢｕのＴＨＦ溶液（０．７３ｍｌ）を、室温で２分かけて滴下添加する。反応混合物を、１時間５０℃に温め、その後ＴＬＣ分析により、出発物質の完全な変換が示される。反応を水（５ｍｌ）の添加によりクエンチする。混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、飽和ＮＨ_４Ｃｌ水溶液で２回洗浄する。水層をＥｔＯＡｃで２回逆抽出する。合わせた有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、溶媒を蒸発させる。残渣をＦＣＣ（ＥｔＯＡｃ／ＡｃＯＨ／Ｈ_２Ｏ、８００：５５：４５〜７５０：８３：６８〜７００：１１０：９０〜６００：１５０：１５０）で精製し、その酢酸塩として表題化合物を得る。ＭｅＯＨ／トルエンで共沸後、産物をその酢酸−メタノール複合体として得る。
¹H NMR (DMSO, 400 MHz) δ 2.10 (s, 3H), 2.10−2.22 (m, 4H), 3.47−3.52 (m, 4H), 6.58 (d, J＝8.9 Hz, 1H), 6.73−6.76 (m, 1H), 7.02 (d, J＝10.0 Hz, 1H), 7.04−7.08 (m, 1H), 7.40 (d, J＝9.4 Hz, 1H), 7.84 (d, J＝10.0, 1H), 8.03 (s, 1H); ES−MS: 456.5 [M＋H]^＋.

出発物質として用いる２−［６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−３−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル］−アセトアミドを、以下のように製造することができる：
ａ） （６−クロロ−３−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル）−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルおよび（６−クロロ−５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル）−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
１，１，１，３，３，３−ヘキサメチル−ジシラザン（３３．４ｍｌ、１５４ｍｍｏｌ）をトルエン（１８０ｍｌ）に溶解する。溶液を、３サイクルの短い高真空により脱気し、その後アルゴンでパージングする。溶液を−７８℃に冷却後、ｎ−ＢｕＬｉ（１．６Ｍのヘキサン溶液９６ｍｌ、１５４ｍｍｏｌ）を、２０分間滴下添加する。懸濁液を、−７８℃で１５分間、および室温で１５分間撹拌し、その後、澄明な黄色溶液を得る。パラジウム（０）ジベンジリデンアセトン複合体（１．６９ｇ、１．８５ｍｍｏｌ）および（２’−ジシクロヘキシルホスファニル−ビフェニル−２−イル）−ジメチル−アミン（１．５３ｇ、３．８８ｍｍｏｌ）を、２つ目のフラスコ中アルゴン雰囲気下に置く。室温にて、リチウム・ヘキサメチルジシラジドのトルエン溶液を、パラジウム（０）複合体−リガンド混合物を含むフラスコにカニューレを通して入れ、室温で１０分間撹拌する。−１０℃に冷却後、酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１９．０ｍｌ、１４２ｍｍｏｌ）を、５分間滴下添加する。−１０℃で１０分間撹拌後、２，６−ジクロロ−３−トリフルオロメチル−ピリジン（１３．３ｇ、６１．５８ｍｍｏｌ）を一度に添加する。穏やかに加熱して、抽出物の添加後３分以内に反応混合物を２０℃に温める。その後、反応温度を、徐々に約５０℃まで上げる。１５分後、ＴＬＣ分析により、出発物質である２，６−ジクロロ−３−トリフルオロメチル−ピリジンの完全な消費が示される。反応を、水（１００ｍｌ）の添加によりクエンチし、１０分間撹拌する。ＥｔＯＡｃ（２５０ｍｌ）を加え、濁った懸濁液をセライトのパッドでろ過する。有機層を水で２回洗浄し（逆抽出）、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し濃縮する。ＦＣＣ（トルエン／ＥｔＯＡｃ、１００：０、９９：１、９８：２、９７：３、９６：４および８：２）により精製し、位置異性体である（６−クロロ−３−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル）−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルおよび（６−クロロ−５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル）−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの１：２．５混合物を１０．１５ｇ（５６％）得る。
（６−クロロ−３−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル）−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの分析データ：¹H NMR (CDCl₃, 400 MHz) δ 1.56 (s, 9H), 3.89 (s, 2H), 7.47 (d, J＝ 8.9 Hz, 1H), 8.04 (d, J＝8.9 Hz, 1H); ES−MS: 296.3 [M＋H]^＋.

ｂ） （６−クロロ−３−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル）−酢酸エチルエステル
（６−クロロ−３−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル）−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルおよび（６−クロロ−５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル）−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの１：２．５混合物（半粗製物；１０．１５ｇ、３４．３３ｍｍｏｌ）を、０℃で前もってＨＣｌガスで飽和させたＥｔＯＨ（１００ｍｌ）に溶解する。溶液を９０℃に加熱する。９０℃で３０分後、ＴＬＣ分析により、出発物質の完全な変換が示される。溶媒を完全に蒸発させる。粗反応産物をＥｔＯＡｃに溶解し、濃ＮａＨＣＯ_３溶液で一回洗浄し、Ｈ_２Ｏで一回洗浄する（ＥｔＯＡｃで逆抽出）。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥し濃縮する。ＦＣＣ（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、１００：０、９７：３、９５：５、９：１、８５：１５、８：２から７：３）による入念な精製により、２つの位置異性体化合物である（６−クロロ−３−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル）−酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルおよび（６−クロロ−５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル）−酢酸エチルエステルを分離する。
（６−クロロ−３−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル）−酢酸エチルエステルの分析データ：¹H NMR (CDCl₃, 400 MHz) δ 1.28 (t, J＝6.7 Hz, 3H), 3.95 (s, 2H), 4.12 (q, J＝6.7 Hz, 2H), 7.32 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.85 (d, J＝8.9 Hz, 1H); ES−MS: 268.2 [M＋H]^＋.

ｃ） ［６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−３−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル］−酢酸エチルエステル
（６−クロロ−３−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル）−酢酸エチルエステル（７００ｍｇ、２．６２ｍｍｏｌ）、酢酸パラジウム（ＩＩ）（４７ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）およびｒａｃ−２，２’−ビス−ジフェニルホスファニル−［１，１’］ビナフタレン（６５ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）を、高真空下にて６０℃で１５分間乾燥したナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（２７７ｍｇ、２．８８ｍｍｏｌ）に加える。この混合物を、ジオキサン（９ｍｌ、高真空下で３回脱気し、アルゴンでパージした）に懸濁し、そしてＮ−メチルピペラジン（２８８ｍｇ、２．８８ｍｍｏｌ）を添加する。この懸濁液を含むフラスコを、前もって加熱した油浴（８５℃）中に浸す。８５℃で１５分後、ＴＬＣ分析により、出発物質の完全な消費が示される。反応混合物を室温に冷却し、濃ＮＨ_４Ｃｌ水溶液（１００ｍｌ）とＥｔＯＡｃ（１００ｍｌ）の混合物に撹拌しながら注ぐ。水層をＥｔＯＡｃで抽出する。その後、有機層を濃ＮＨ_４Ｃｌ溶液で１回洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し濃縮する。ＦＣＣ（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ、１００：０〜９８：２〜９７：３〜９６：４〜９５：５〜８：２）による精製により、表題化合物を得る。
¹H NMR (CDCl₃, 400 MHz) δ 1.30 (t, J＝7.8 Hz, 3H), 2.35 (s, 3H), 2.50−2.57 (m, 4H), 3.32−3.39 (m, 4H), 3.76 (s, 2H), 4.20 (q, J＝7.8 Hz, 2H), 6.90 (d, J＝8.9 Hz, 1H), 7.79 (d, ＝8.9 Hz, 1H); ES−MS: 332.5 [M＋H]^＋.

ｄ） ［６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−３−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル］−酢酸エチルエステル（４９３ｍｇ、１．４９ｍｍｏｌ）およびホルムアミド（２２４ｍｇ、４．９８ｍｍｏｌ）を、アルゴン雰囲気下にＤＭＦ（２．５ｍｌ）に溶解する。溶液を１０５℃まで加熱し、ＮａＯＭｅ（５．４ＭのＭｅＯＨ溶液０．２８ｍｌ、１．４９ｍｍｏｌ）を３０分間滴下添加する。１０５℃でさらに１０分後、ＴＬＣ分析により、出発物質の完全な消費が示される。反応混合物を室温まで冷却し、水で希釈し、ＣＨ_２Ｃｌ_２で抽出する。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥する。溶媒を除去し、高真空下で乾燥して粗産物を得、それをＦＣＣ（ＥｔＯＡｃ／ＡｃＯＨ／Ｈ_２Ｏ、７００：１１０．９０〜６５０：１３０：１２０〜６００：１５０：１５０〜５００：２００：２００）で精製し、その酢酸塩として表題化合物を得る。
¹H NMR (DMSO, 400 MHz) δ 2.20 (s , 3H), 2.34−2.38 (m, 4H), 3.55 (s, 2H), 3.55−3.58 (m, 4H), 6.78 (d, J＝10.6 Hz, 1H), 6.92 (br s, 1H), 7.32 (br s, 1H), 7.71 (d, J＝10.6 Hz, 1H); ES−MS: 303.5 [M＋H]^＋.

実施例１の方法に従い、ただし、適当な出発物質を用いて、式Ａ

［式中、Ｒ_ａ、Ｒ_ｂ、Ｒ_２およびＲ_５からＲ_７は、以下の表１に記載のとおりである］
で示される化合物を得ることができる。

実施例２９：
３−（５−クロロ−２−ジメチルアミノメチル−１Ｈ−インドール−４−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオン

２−（５−クロロ−２−ジメチルアミノメチル−１Ｈ−インドール−４−イル）−アセトアミド（５０ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）および（１Ｈ−インドール−３−イル）−オキソ−酢酸メチルエステル（５７ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）を、アルゴン雰囲気下で３ｍｌの無水ＴＨＦに溶解する。モレキュラー・シーブ（３Å、１００ｍｇ）を添加する。１．０Ｍ ＫＯｔＢｕのＴＨＦ溶液（０．５７ｍｌ）を、１分間かけて室温で滴下添加する。１時間後、ＴＬＣ分析により、出発物質の完全な消費が示される。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液で２回洗浄し、飽和ＮａＣｌ溶液で１回洗浄する。水層を、ＥｔＯＡｃで逆抽出する。合わせた有機層を、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、溶媒を蒸発し、定量的収率で粗４−（５−クロロ−２−ジメチルアミノメチル−１Ｈ−インドール−４−イル）−３−ヒドロキシ−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−２，５−ジオンを得る。この産物を、アルゴン雰囲気下で無水ＤＭＦ（４ｍｌ）に溶解し、ＤＢＵ（１４１μｌ、０．９４ｍｍｏｌ）を室温で添加する。その後、反応フラスコを、前もって１２０℃に加熱しておいた油浴中に１０分間浸す。ＴＬＣ分析により、出発物質の完全な消費が示される。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄する。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥し、溶媒を蒸発する。残渣を、ＦＣＣ（ＥｔＯＡｃ／ＡｃＯＨ／Ｈ_２Ｏ、７００：１１０：９０）により精製し、その酢酸塩として表題化合物を得る。
¹H NMR (DMSO, 400 MHz) δ 1.96 (s, 6H), 3.30−3.42 (m, 2H), 5.86 (s, 1H), 6.38 (d,J＝8.4 Hz, 1H), 6.51 (t, J＝8.4 Hz, 1H), 6.94 (t, J＝8.4 Hz, 1H), 7.29 (d, J＝9.0 Hz, 1H), 7.32 (d, 8.4 Hz, 1H), 7.39 (d, J＝9.0 Hz, 1H), 7.98 (s, 1H), 11.3 (s, 1H), 12.0 (br s, 2H); ES−MS: 419.1 [M＋H]^＋.

出発物質として用いる２−（５−クロロ−２−ジメチルアミノメチル−１Ｈ−インドール−４−イル）−アセトアミドを、以下のように製造することができる：
ａ） ５−クロロ−２−メチル−４−ニトロ−１Ｈ−インドール
４−クロロ−３−ニトロアニリン（１０．０ｇ、５７．９ｍｍｏｌ）をＤＭＳＯ（１３０ｍｌ）中に溶解する。アセトン（８．５２ｍｌ、１１５．９ｍｍｏｌ）およびカリウムｔｅｒｔ−ブチレート（１３．０ｇ、１１５．９ｍｍｏｌ）を添加する。温度を、氷浴を用いて３０℃より低く維持する。室温で９０分後、ＴＬＣ分析により、出発物質の完全な消費が示される。反応混合物に水を注ぎ、２ＭのＨＣｌ水溶液で酸性化し、その後、ＥｔＯＡｃで抽出する。有機層を飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、濃縮する。ＦＣＣ（ＣＨ_２Ｃｌ_２）により精製し、わずかに褐色がかった固体を得、それは^１Ｈ−ＮＭＲ分析により、所望の表題化合物と対応する脱塩素化誘導体の約１：１混合物である。分取ＨＰＬＣによる入念な精製により、表題化合物を得る。
¹H NMR (DMSO, 400 MHz) δ2.50 (s, 3H), 6.40 (s, 1H), 7.26 (d, J＝9.0 Hz, 1H), 7.61 (d, J＝9.0 Hz, 1H), 11.8 (s, 1H); ES−MS: 209 [M−H]⁻.

ｂ） ５−クロロ−２−メチル−４−ニトロ−インドール−１−カルボン酸メチルエステル
５−クロロ−２−メチル−４−ニトロ−１Ｈ−インドール（１．６２ｇ、７．６９ｍｍｏｌ）を、アルゴン雰囲気下で無水ＤＭＦ（３０ｍｌ）に溶解する。ＮａＨ懸濁液（鉱油中６０％、３６９ｍｇ、９．２２ｍｍｏｌ）の添加後、混合物を、室温で１時間撹拌する。クロロギ酸メチル（０．７２ｍｌ、９．２２ｍｍｏｌ）を、１０分間でゆっくり添加し、反応混合物を室温で１時間撹拌し、黄色がかった懸濁液を形成する。ろ過および乾燥後、表題化合物を純粋な形態で得る。
¹H NMR (DMSO, 400 MHz) δ 2.53 (s, 3H), 4.06 (s, 3H), 6.71 (s, 1H), 7.57 (d, J＝ 9.0 Hz, 1H), 8.30 (d, J＝9.0 Hz, 1H); ES−MS: 268 [M＋H]^＋.

ｃ） ４−アミノ−５−クロロ−２−メチル−インドール−１−カルボン酸メチルエステル
５−クロロ−２−メチル−４−ニトロ−インドール−１−カルボン酸メチルエステル（２．１ｇ、７．８１ｍｍｏｌ）を、エタノール（４０ｍｌ）および氷酢酸（４０ｍｌ）に溶解する。鉄粉（１．７４ｇ、３１．２６ｍｍｏｌ、濃Ｈ_２ＳＯ_４で前もって活性化し、その後水で洗浄した）を添加し、反応混合物を９０分間８５℃に加熱する。反応混合物に水を注ぎ、３０分間室温で撹拌後、わずかに褐色がかった沈殿が形成され、それをろ取する。水で洗浄後、乾燥し、表題化合物を純粋な形態で得る。
¹H NMR (DMSO, 400 MHz, 120 ℃) δ 2.51 (s, 3H), 4.05 (s, 3H), 5.0−5.2 (br s, 2H), 6.66 (s, 1H), 7.05 (d, J＝9 Hz, 1H), 7.31 (d, J＝9 Hz, 1H); ES−MS: 238 [M＋H]^＋.

ｄ） ４−ブロモ−５−クロロ−２−メチル−インドール−１−カルボン酸メチルエステル
４−アミノ−５−クロロ−２−メチル−インドール−１−カルボン酸メチルエステル（２．０４ｇ、８．５４ｍｍｏｌ）を、４．８％のＨＢｒ水溶液（７５ｍｌ）に懸濁する。０℃に冷却後、亜硝酸ナトリウム（１．２３ｇ、１７．９４ｍｍｏｌ）の水溶液（３０ｍｌ）を、２０分間ゆっくり添加する。０℃で３０分後、臭化銅（Ｉ）（２５．１ｇ、１７５ｍｍｏｌ）の４８％ＨＢｒ／Ｈ_２Ｏ溶液（７５ｍｌ）をゆっくり添加し、その間温度を５℃より低く維持する。全て添加後、懸濁液を室温で２時間撹拌し、その後５分間８５℃で撹拌する。室温に冷却後、混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ（９５：５、８００ｍｌ）で抽出する。有機層を飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、濃縮する。ＦＣＣ（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、４：１）による精製で、表題化合物を得る。
¹H NMR (DMSO, 400 MHz) δ 2.61 (s, 3H), 4.03 (s, 3H), 6.56 (s, 3H), 7.46 (d, J＝9 Hz, 1H), 8.05 (d, J＝9 Hz, 1H); ES−MS: 303 [M＋H]^＋.

ｅ） ５−クロロ−４−エトキシカルボニルメチル−２−メチル−インドール−１−カルボン酸メチルエステル
４−ブロモ−５−クロロ−２−メチル−インドール−１−カルボン酸メチルエステル（１．９９ｇ、６．５７ｍｍｏｌ）およびトリブチルスタンナニル−酢酸エチルエステル（３．２２ｇ、８．５５ｍｍｏｌ）を、アルゴン雰囲気下で無水ＤＭＦ（５５ｍｌ）に溶解する。臭化亜鉛（ＩＩ）（１．９２ｇ、８．５５ｍｍｏｌ）およびジクロロビス（トリ−ｏ−トリルホスフィン）パラジウム（０）（１．０３ｇ、１．３１ｍｍｏｌ）を添加する。反応混合物を、１８時間８０℃に加熱する。ＴＬＣ分析により、出発物質の完全な消費が示される。反応混合物を室温に冷却し、飽和ＮＨ_４Ｃｌ水溶液に注ぐ。ＥｔＯＡｃ（３０ｍｌ）の添加後、混合物をセライトのパッドによりろ過する。有機層を飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、濃縮する。残渣をＦＣＣ（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、４：１）により精製し、未だ錫残渣の混入している所望の化合物を得る。混合物を、１Ｍ ＮａＯＨ／ＥｔＯＡｃの１：１混合物（全２００ｍｌ）に溶解し、室温で１８時間撹拌する。有機層を分け、濃ＮａＣｌ水溶液で１回洗浄し、その後Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥する。濃縮して固体残渣を得、それをＦＣＣ（ヘキサン／ＥｔＯａｃ、４：１）により精製して、未だわずかに混入物質のある所望の化合物を得る。さらなる自動化分取ＨＰＬＣシステム（Gilson HPLC、Xterra ５ミクロン、勾配１０％から１００％ＭｅＣＮ水溶液、３０分）での精製により、純粋な表題化合物を得る。
¹H NMR (DMSO, 400 MHz) δ 1.20 (t, J＝6.6 Hz, 3H), 2.59 (s, 3H), 4.01 (s, 2H), 4.03 (s, 3H), 4.11 (q, J＝6.6 Hz, 2H), 6.68 (s, 1H), 7.32 (d, J＝9 Hz, 1H), 7.96 (d, J＝9 Hz, 1H); ES−MS: 332.1 [M＋Na]^＋.

ｆ） ５−クロロ−４−エトキシカルボニルメチル−２−ホルミル−インドール−１−カルボン酸メチルエステル
５−クロロ−４−エトキシカルボニルメチル−２−メチル−インドール−１−カルボン酸メチルエステル（３９８ｍｇ、１．２８ｍｍｏｌ）を、アルゴン雰囲気下でジオキサン（１８ｍｌ）に溶解する。亜セレン酸（３３１ｍｇ、２．５６ｍｍｏｌ）を添加し、そして反応混合物を１８時間で１００℃に加熱する。ＴＬＣ分析により、出発物質の完全な消費が示される。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、水に注ぐ。有機層を、飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、濃縮する。固体の残渣を、ＦＣＣ（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、２：１）により精製し、表題化合物を得る。
¹H NMR (DMSO, 400 MHz) δ 1.20 (t, J＝6.6 Hz, 3H), 4.09 (s, 3H), 4.12 (q, J＝6.6 Hz, 2H), 4.19 (s, 2H), 7.64 (d, J＝10.8, 1H), 8.09 (d, J＝10.8, 1H), 10.32 (s, 1H); ES−MS: 346.1.1 [M＋Na]^＋.

ｇ） （５−クロロ−２−ジメチルアミノメチル−１Ｈ−インドール−４−イル）−酢酸エチルエステル
５−クロロ−４−エトキシカルボニルメチル−２−ホルミル−インドール−１−カルボン酸メチルエステル（３５０ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ）を、アルゴン雰囲気下で無水ＴＨＦ（１０ｍｌ）に溶解し、ジメチルアミン（２９０μｌの５．６Ｍ ＥｔＯＨ溶液、１．６２ｍｍｏｌ）を室温で添加する。反応混合物を室温で１８時間撹拌する。その後、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（８２ｍｇ、１．２９ｍｍｏｌ）の酢酸（３１０μｌ、５．４０ｍｍｏｌ）含有メタノール溶液（３ｍｌ）を、添加する。室温で３時間、撹拌し続ける。ＴＬＣ分析により、出発物質の完全な消費が示される。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、水に注ぐ。ｐＨを、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液の添加によりアルカリ性にする。水層をＥｔＯＡｃで抽出し、合わせた有機層を濃ＮａＣｌ水溶液で１回洗浄する。Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥後、溶媒を除去し、残渣をＦＣＣ（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＥｔＯＨ／ＮＨ_３水溶液、９０：９：１）で精製し、表題化合物を得る。
¹H NMR (DMSO, 400 MHz) δ 1.19 (t, J＝6.6 Hz, 3H), 2.20 (s, 6H), 3.55 (s, 2H), 3.97 (s, 2H), 4.11 (q, J＝6.6 Hz, 2H), 6.38 (s, 1H), 7.08 (d, J＝9.0 Hz, 1H), 7.26 (d, J＝9.0 Hz, 1H), 11.2 (br s, 1H); ES−MS: 293.2 [M＋H]⁻.

ｈ） （５−クロロ−２−ジメチルアミノメチル−１Ｈ−インドール−４−イル）−酢酸エチルエステル（１８７ｍｇ、０．６３ｍｍｏｌ）およびホルムアミド（８４μｌ、２．１２ｍｍｏｌ）を、アルゴン雰囲気下で無水ＤＭＦ（１．５ｍｌ）に溶解する。溶液を１０５℃まで加熱し、ＮａＯＭｅ（５．４Ｍ ＭｅＯＨ溶液１１８μｌ、０．６３ｍｍｏｌ）を１０分間滴下添加する。１０５℃で１時間後、ＴＬＣ分析により、出発物質の完全な消費が示される。反応混合物を室温まで冷却し、水で希釈し、１ＭのＮａＨＳＯ_４水溶液の添加によりｐＨ値を７に合わせる。混合物を濃縮し、固体の残渣をＦＣＣ（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＥｔＯＨ／ＮＨ_３水溶液、７０：２７：３）により精製し、表題化合物を得る。
ES−MS: 266.7 [M＋H]^＋.

実施例２９の方法に従い、ただし、適当な出発物質を用いて、式Ｂ

［式中、Ｒ_ａ、Ｒ_ｂおよびＲ_４は、表２に記載のとおりである］
で示される化合物を製造することができる。

実施例２９の方法に従い、ただし、適当な出発物質を用いて、式Ｃ

［式中、Ｒ_ａ、Ｒ_ｂ、Ｒ_４、Ｒ_８およびＲ_９は、表３に記載のとおりである］
で示される化合物を製造することができる。

遊離型または薬学的に許容される塩形態の式Ｉの化合物は、様々な生理学的特性、例えば、インビトロ試験およびインビボ試験で示されるような、例えば、プロテインキナーゼＣ（ＰＫＣ）、例えば、α、β、δ、ε、ηまたはθなどのＰＫＣイソフォームの活性の阻害、例えば、Ｔ細胞のサイトカイン、例えばＩＬ−２に対する増殖性応答の阻害をすることによる、Ｔ細胞またはサイトカイン、例えばＩＬ−２生産の阻害による、Ｔ細胞活性化および増殖の阻害を示し、故に、治療に適応される。

Ａ． インビトロ
１． プロテインキナーゼＣ検定
式Ｉの化合物を、公開された方法（D. Geiges et al. Biochem. Pharmacol. 1997;53:865−875）により、異なるＰＫＣイソフォームに対するそれらの活性について試験する。前記検定を、Ｓｉｇｍａｃｏｔｅ（Sigma SL-2）で前もってシリコン処理した９６ウェルのポリプロピレン製マイクロタイタープレート（Costar 3794）中で行う。反応混合物（５０μｌ）には、１０μｌの関連ＰＫＣアイソザイムと一緒に、２５μｌの試験化合物ならびに、２０ｍＭ Ｔｒｉｓ緩衝液、ｐＨ７．４＋０．１％ＢＳＡ中、２００μｇ／ｍｌの硫酸プロタミン、１０ｍＭ Ｍｇ（ＮＯ_３）_２、１０μＭ ＡＴＰ（Boehringer 519987）および３７５０Ｂｑ ^３３Ｐ−ＡＴＰ（Hartmann Analytic SFC301、１１０ＴＢｑ／ｍｍｏｌ）を含む１５μｌの混合溶液が含まれる。マイクロタイタープレート振とうインキュベーター（Biolabo Scientific Instruments）中にて３２℃で１５分間、インキュベーションを行う。反応を、１０μｌの０．５Ｍ Ｎａ_２ＥＤＴＡ、ｐＨ７．４の添加により停止する。５０μｌの混合物を、予め湿らせたリン酸セルロース・ペーパー（Whatmann 3698-915）上に、軽い圧力下でピペッティングする。取り込まれていないＡＴＰを、１００μｌの２回蒸留した水で洗い流す。前記ペーパーを、１５分間０．５％Ｈ_３ＰＯ_４中２回洗浄し、次にＥｔＯＨで５分間洗浄する。その後、前記ペーパーを乾燥し、omnifilter（Packard 6005219）に置き、１０μｌ／ウェルのＭｉｃｒｏｓｃｉｎｔ−Ｏ（Packard 6013611）と重ね合わせ、その後Ｔｏｐｃｏｕｎｔ放射活性測定器（Packard）で測定する。ＩＣ_５０測定を、上記の方法に従い、１−１０００μＭの範囲の濃度でのインヒビターの段階希釈でインキュベートすることにより定期的に行う。ＩＣ_５０値を、Ｓ字状曲線フィットによりグラフから測定する。

２． プロテインキナーゼＣθ検定
ヒト組換えＰＫＣθを、上記の検定条件下で用いる。本検定にて、式Ｉの化合物は、ＩＣ_５０ ＜１μＭでＰＫＣθを阻害する。例えば、実施例１の化合物は、５．４ｎＭのＩＣ_５０でＰＫＣθを阻害し、実施例１０の化合物は５．８ｎＭのＩＣ_５０で、そして実施例４１の化合物は、ＰＫＣθを９．３ｎＭのＩＣ_５０で阻害する。

３． プロテインキナーゼＣα検定
ヒト組換えＰＫＣαを、Oxford Biomedical Researchから入手し、上記セクションＡ．１に記載のような検定条件下で用いる。本検定にて、式Ｉの化合物は、ＩＣ_５０ ＜１μＭでＰＫＣαを阻害する。本検定にて、実施例１の化合物は、２．９ｎＭのＩＣ_５０でＰＫＣαを阻害し、実施例３９の化合物は、６．３ｎＭのＩＣ_５０でＰＫＣαを阻害し、そして実施例４１の化合物は、７．５ｎＭのＩＣ_５０でＰＫＣαを阻害する。

４． プロテインキナーゼＣβ１検定
ヒト組換えＰＫＣβ１を、Oxford Biomedical Researchから入手し、上記セクションＡ．１に記載のような検定条件下で用いる。本検定にて、式Ｉの化合物は、ＩＣ_５０ ＜１μＭでＰＫＣβ１を阻害する。例えば、実施例１の化合物は、５．９ｎＭのＩＣ_５０えＰＫＣβ１を阻害し、実施例３９の化合物は、１３．２ｎＭのＩＣ_５０でＰＫＣβ１を阻害し、そして実施例４１の化合物は、１４．９ｎＭのＩＣ_５０でＰＫＣβ１を阻害する。

５． プロテインキナーゼＣδ検定
ヒト組換えＰＫＣδを、Oxford Biomedical Researchから入手し、上記セクションＡ．１に記載のような検定条件下で用いる。本検定にて、式Ｉの化合物は、ＩＣ_５０ ＜１μＭでＰＫＣδを阻害する。例えば、実施例１の化合物は、２１．０ｎＭのＩＣ_５０でＰＫＣδを阻害し、そして実施例４１の化合物は、２９．５ｎＭのＩＣ_５０でＰＫＣδを阻害する。

６． プロテインキナーゼＣε検定
ヒト組換えＰＫＣεを、Oxford Biomedical Researchから入手し、上記セクションＡ．１に記載のような検定条件下で用いる。本検定にて、式Ｉの化合物は、ＩＣ_５０ ＜１μＭでＰＫＣεを阻害する。例えば、実施例１の化合物は、１４．７ｎＭのＩＣ_５０でＰＫＣδを阻害し、そして７．６ｎＭのＩＣ_５０でＰＫＣδを阻害する。

７． プロテインキナーゼＣη検定
ヒト組換えＰＫＣηを、ＰａｎＶｅｒａから入手し、上記セクションＡ．１に記載のような検定条件下で用いる。本検定にて、式Ｉの化合物は、ＩＣ_５０ ＜１μＭでＰＫＣηを阻害する。例えば、実施例１の化合物は、１５．３ｎＭのＩＣ_５０でＰＫＣηを阻害し、実施例４１の化合物は、１５．０ｎＭのＩＣ_５０でＰＫＣηを阻害する。

８． ＣＤ２８共刺激検定
本検定は、Baumann GらのTransplant. Proc. 1992;24:43−8に記載のような、ルシフェラーゼ遺伝子により置換されているβ−ガラクトシダーゼ・レポーター遺伝子である、ヒトインターロイキン−２・プロモーター／レポーター遺伝子構築物で形質転換したＪｕｒｋａｔ細胞を用いて行う（de Wet J., et al., Mol. Cell Biol. 1987, 7(2), 725−737）。細胞を、固相結合抗体またはフォルボール・ミリスチン酸・酢酸（ＰＭＡ）およびＣａ^＋＋イオノホア・イオノマイシンで以下のように刺激する。抗体を介した刺激について、マイクロライトＴＭ１マイクロタイタープレート（Ｄｙｎａｔｅｃｈ）を、１ウェル当たり５５μｌのリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）中の３μｇ／ｍｌヤギ抗−マウスＩｇＧ Ｆｃ抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ）で室温にて３時間コーティングする。プレートを、ＰＢＳ（３００μｌ／ウェル）中２％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）と共に室温で２時間インキュベートすることにより抗体を除去した後、ブロッキングする。１ウェル当たり３００μｌのＰＢＳで３回洗浄後、５０μｌの２％ＢＳＡ／ＰＢＳ中、１０ｎｇ／ｍｌの抗Ｔ細胞受容体抗体（WT31, Becton ＆ Dickinson）および３００ｎｇ／ｍｌ抗ＣＤ２８抗体（１５Ｅ８）を、刺激抗体として添加し、４℃で一晩インキュベートする。

最後に、前記プレートを、１ウェル当たり３００μｌのＰＢＳで３回洗浄する。デュプリケイトの検定媒体（５０μＭ ２−メルカプトエタノール、１００単位／ｍｌ ペニシリンおよび１００μｇ／ｍｌ ストレプトマイシンを包含するＲＰＭＩ１６４０／１０％ウシ胎児血清（ＦＣＳ））中、試験化合物の７個の３倍連続希釈物を、分離プレート中に調製し、形質転換したＪｕｒｋａｔ細胞（クローンＫ２２２９０＿Ｈ２３）と混合し、５％ＣＯ_２中３７℃で３０分間インキュベートする。その後、１×１０^５細胞を包含する１００μｌの本混合物を、抗体でコートした検定プレートに移す。並行して、１００μｌを、４０ｎｇ／ｍｌ ＰＭＡおよび２μＭ イオノマイシンと共にインキュベートする。５％ＣＯ_２中３７℃で５．５時間インキュベート後、ルシフェラーゼのレベルを、バイオルミネッセンス測定器で測定する。プレートを、５００ｇで１０分間遠心し、上清を軽く叩いて（flicking）除去する。２５ｍＭ Ｔｒｉｓ−リン酸塩、ｐＨ７．８、２ｍＭ ＤＴＴ、２ｍＭ １．２−ジアミノシクロヘキサン−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ−テトラ酢酸、１０％（ｖ／ｖ）グリセロールおよび１％（ｖ／ｖ）トリトンＸ−１００を含む溶解緩衝液を、添加する（２０μｌ／ウェル）。プレートを、一定の振とう下に室温で１０分間インキュベートする。ルシフェラーゼ活性を、２０ｍＭ トリシン、１．０７ｍＭ（ＭｇＣＯ_３）_４Ｍｇ（ＯＨ）_２×５Ｈ_２Ｏ、２．６７ｍＭ ＭｇＳＯ_４、０．１ｍＭ ＥＤＴＡ、３３．３ｍＭ ＤＴＴ、２７０μＭ コエンザイムＡ、４７０μＭ ルシフェリン（Chemie Brunschwig AG）、５３０μＭ ＡＴＰ、ｐＨ７．８を包含するルシフェラーゼ反応緩衝液を１ウェル当たり５０μｌ自動的に添加後、バイオルミネッセンス・リーダー（Labsystem, Helsinki, Finland）で測定する。時間差は、０．５秒であり、全測定時間は、１秒または２秒である。低い対照値は、抗Ｔ細胞受容体刺激した細胞またはＰＭＡ刺激した細胞からの光の単位であり、高い対照値は、試験試料を含まない抗Ｔ細胞受容体／抗−ＣＤ２８−またはＰＭＡ／イオノマイシン−刺激した細胞からのものである。低い対照値を、すべての値から差し引く。試験化合物の存在で得られる阻害を、高い対照の阻害の割合として測定する。５０％阻害（ＩＣ_５０）を生じる試験化合物の濃度を、用量反応曲線から決定する。本方法にて、式Ｉの化合物は、ＩＣ_５０ ＜１μＭで抗Ｔ細胞受容体／抗ＣＤ２８およびＰＭＡ／イオノマイシン刺激したＪｕｒｋａｔ細胞を阻害する。
例えば、実施例１の化合物は１３．０ｎＭのＩＣ_５０を有し、実施例３９の化合物は、４６．７ｎＭのＩＣ_５０を有し、そして実施例４１の化合物は２８．３ｎＭのＩＣ_５０を有する。

９． 同種混合リンパ球反応（ＭＬＲ）
２方向(two-way)ＭＬＲを、標準的な方法（J. Immunol. Methods, 1973, 2, 279 and Meo T. et al., Immunological Methods, New York, Academic Press, 1979, 227−39）で行う。簡潔には、ＣＢＡマウスおよびＢＡＬＢ／ｃマウス由来の脾臓細胞（平底組織培養マイクロタイタープレート中１ウェルあたりそれぞれの系統由来の１．６×１０^５細胞、全３．２×１０^５）を、１０％ＦＣＳ、１００Ｕ／ｍｌペニシリン、１００μｇ／ｍｌストレプトマイシン（Gibco BRL, Basel, Switzerland）、５０μＭ ２−メルカプトエタノール（Fluka, Buchs, Switzerland）および連続希釈した化合物を含むＲＰＭＩ培地中でインキュベートする。試験化合物当たり７個の３倍の希釈工程をデュプリケイトで行う。インキュベーションの４日後、１μＣｉ ^３Ｈ−チミジンを添加する。さらに５時間インキュベーションした後、細胞を集め、取り込まれた^３Ｈ−チミジンを、標準的な方法により測定する。ＭＬＲのバックグラウンド値（低い対照）は、ＢＡＬＢ／ｃ細胞のみの増殖を示す。低い対照値を、すべての値から差し引く。試料なしの高い対照を、１００％増殖とする。試料による阻害割合を測定し、５０％阻害（ＩＣ_５０値）に必要な濃度を決定する。例えば、実施例１の化合物は、２８．８ｎＭのＩＣ_５０を有し、実施例３９の化合物は、２８５ｎＭのＩＣ_５０を有し、そして実施例４１の化合物は、３２．５ｎＭのＩＣ_５０を有する。

１０． ＧＳＫ−３βの阻害
ＧＳＫ−３β結合検定を、９６ウェルのポリプロピレンプレート中５０μｌの反応液にて行い、本反応液は各々２０ｍＭ 塩化マグネシウム、４０μＭ ＡＴＰ、２ｍＭ ＤＴＴ、８８．５μＭ ビオチン化およびリン酸化ＣＲＥＢ−ペプチド基質（ビオチン−ＫＲＲＥＩＬＳＲＲＰＳ（ＰＯ_４）ＹＲ−ＯＨ；Q. M. Wang et al., J. Biol. Chem. 269, 14566−14574, 1994）、［γ−^３３Ｐ］ＡＴＰ（１μＣｉ）および２μｌのＤＭＳＯ中試験化合物（様々な濃度）を含む。１５μｌのＧＳＫ−３β（様々な濃度）を添加し、混合物を、３０℃で１時間インキュベートする。２５μｌの混合物を１３０μｌの１．８５％リン酸を含むリン酸セルロースプレートに移し、反応を停止する。膜中の遊離した放射ヌクレオチドを、真空下１．８５％リン酸で洗い流す（５回）。最後の洗浄後、プレートをアダプタープレートに移し、５０μｌのシンチレーションカクテル（Microscint−20, Packard, カタログ番号20−133）をそれぞれのウェルに添加し、放射活性の量を上記の測定器で測定する。式Ｉの化合物は、本検定にて活性である。
例えば、実施例１の化合物は、１８ｎＭのＩＣ_５０を有し、そして実施例４１の化合物は、２５ｎＭのＩＣ_５０を有する。

Ｂ． インビボ
ラット心臓移植
次の系統の組合せを用いた：オスのＬｅｗｉｓ（ＲＴ^１ハプロタイプ）およびＢＮ（ＲＴ^１ハプロタイプ）。吸入イソフルオレンを用いて、動物を麻酔する。腹部下大静脈を介して供与側ラットをヘパリン処理ながら同時に大動脈から放血した後、開胸し、すばやく心臓を冷却する。大動脈を最初の分岐から遠位で結紮して分割し、腕頭動脈を、第一の分岐で分ける。左の肺動脈を結紮し、分割し、右側は分割するが開放したままにする。すべての他の血管を自由に切開し、結紮し、分割し、そして供与側心臓を氷冷食塩水中に移す。

受容側は、腎臓下の腹部大動脈と大静脈の解離および遮断を行うことにより調製する。移植片を、１０／０モノフィラメント縫合を用いて、供与側腕頭動脈と受容側大動脈、および供与側右肺動脈から受容側大静脈の間に端側吻合で移植する。クランプを除去し、移植片を後腹部(retroabdominally)につなぎ、腹腔内容物を温かい食塩水で洗浄し、そして動物を閉じ、そして加熱ランプ下に回復させる。腹壁を介した供与側心臓の鼓動を毎日触診することにより、移植片生着率を測定する。心臓の鼓動が停止した場合、完全に拒絶されたと見なされる。１〜３０ｍｇ／ｋｇ、１日２回の用量で経口的に投与される式Ｉの化合物で処置される動物にて、移植片生着率が増大される。

移植片対宿主モデル
Ｗｉｓｔａｒ／Ｆラット由来の脾臓細胞（２×１０^７）を、（Ｗｉｓｔａｒ／Ｆ×Ｆｉｓｃｈｅｒ ３４４）Ｆ_１交配ラットの右後足フッドパッドに皮下注射する。左側フッドパッドは、処置しないままにする。前記動物を、４日間連続して試験化合物で処置する（０−３）。膝下リンパ節を７日目に除去し、そして２つの対応するリンパ節間の重量の相違を決定する。実験群のリンパ節の重量の相違と、試験化合物にて未処置のままの動物群由来の対応するリンパ節間の重量の相違を比較した結果を、リンパ節の拡張の阻害として表す（％で表す）。本検定にて、１日２回、３０または１０ｍｇ／ｋｇの値の用量でそれぞれ投与した場合、実施例１または１０の化合物で１００％阻害される。

故に、式Ｉの化合物は、Ｔリンパ球および／またはＰＫＣを介する疾患または障害、例えば、臓器または組織の同種または異種移植片の急性または慢性拒絶、移植片対宿主病、アテローム性動脈硬化症、血管閉塞などの血管外傷に起因する血管閉塞、再狭窄、肥満、Ｘ症候群、耐糖能異常、多嚢胞性卵巣症候群、高血圧、心不全、慢性閉塞性肺疾患、アルツハイマー疾患または筋萎縮性側索硬化症などのＣＮＳ障害、癌、ＡＩＤＳなどの感染症、敗血症または成人呼吸窮迫症候群、虚血／再かん流損傷、例えば心筋梗塞、卒中、腸虚血、腎不全または出血性ショック、または外傷性ショック、例えば外傷性脳損傷などの、処置および／または予防に有用である。

式Ｉの化合物はまた、Ｔ細胞を介する急性または慢性炎症性疾患もしくは障害、または自己免疫性疾患、例えばリウマチ性関節炎、変形性関節症、全身性エリテマトーデス、橋本甲状腺炎、多発性硬化症、重症筋無力症、Ｉ型またはＩＩ型糖尿病、およびそれらの合併症、喘息または炎症性肺損傷などの呼吸器疾患、炎症性肝臓損傷、炎症性糸球体損傷、免疫学的な障害または疾患を介する皮膚症状、炎症性および過増殖性皮膚疾患（乾癬、アトピー性皮膚炎、アレルギー性接触性皮膚炎、刺激性接触性皮膚炎、およびさらなる湿疹様皮膚炎、脂漏性皮膚炎など）、炎症性眼疾患、例えばシェーグレン症候群、角結膜炎またはブドウ膜炎、炎症性腸疾患、クローン病または潰瘍性大腸炎などの、処置および／または予防にも有用である。上記に使用に関して、必要量は、投与方法、特定の処置条件および所望の効果によりもちろん変化する。一般に、体重１ｋｇ当たり約０．１〜約１００ｍｇの日用量で、好結果が全身的に得られることが示される。大きな哺乳動物、例えばヒトにて望ましい日用量は、約０．５ｍｇから約２０００ｍｇの範囲で、例えば、１日に４回までの分割投与または遅延形態で都合良く投与される。

式Ｉの化合物を、慣用の経路、特に経腸的、例えば、例えば錠剤またはカプセルの形状で経口的に、または例えば注射可能溶液もしくは懸濁液の形態で非経腸的に、例えばローション、ゲル、軟膏またはクリームの形態または経鼻形態もしくは座剤で局所的に投与することができる。少なくとも１個の薬学的に許容される担体または希釈剤とともに遊離型または薬学的に許容される塩形態の式Ｉの化合物を包含する医薬組成物を、薬学的に許容される担体または希釈剤と混合することによる慣用の方法で製造することができる。経口投与のための単位投与形態には、例えば、約０．１ｍｇから約５００ｍｇの活性物質が含まれる。

局所投与とは、例えば皮膚に対してである。局所投与のさらなる形態とは、目に対してである。
式Ｉの化合物を、例えば上記のように、遊離型または薬学的に許容される塩形態で投与することができる。かかる塩は、慣用の方法で製造され得、そして遊離化合物と同程度の活性を示す。

上記本発明に従ってさらに、以下が提供される：
１．１ かかる処置を必要とする被験者における、例えば上記などの、Ｔリンパ球および／またはＰＫＣまたはＧＳＫ−３βを介する障害または疾患の予防または処置の方法であって、有効量の式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩を該被験者に投与することを含む方法；
１．２ かかる処置を必要とする被験者における、例えば上記などの、急性または慢性の移植拒絶、またはＴ細胞を介する炎症性または自己免疫性疾患の予防または処置の方法であって、有効量の式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩を該被験者に投与することを含む方法；

２． 例えば上記１．１および１．２に記載のような方法における、医薬としての使用のための、遊離型または薬学的に許容される塩形態の式Ｉの化合物。
３． 例えば、上記１．１および１．２に記載のような方法における使用のための、遊離型または薬学的に許容される塩形態の式Ｉの化合物を薬学的に許容される希釈剤またはその担体と一緒に含む医薬組成物。
４． 上記１．１および１．２に記載のような方法における使用を目的とした医薬組成物の製造に使用するための、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩。

式Ｉの化合物を、例えば同種または異種移植の急性または慢性拒絶、もしくは炎症性障害または自己免疫性障害の処置または予防のため、単独の活性成分として、または免疫調節レジメンにおける他の薬剤、または他の抗炎症性剤と共に投与することができる。例えば、それらを、シクロスポリン、またはアスコマイシ、またはそれらの免疫抑制性類似体もしくは誘導体、例えばシクロスポリンＡ、ＩＳＡ Ｔｘ２４７、ＦＫ−５０６、ＡＢＴ−２８１、ＡＳＭ ９８１；ｍＴＯＲインヒビター、例えばラパマイシン、４０−Ｏ−（２−ヒドロキシエチル）−ラパマイシン、ＣＣＩ７７９、ＡＢＴ５７８、またはラパログ、例えばＡＰ２３５７３、ＡＰ２３４６４、ＡＰ２３６７５、ＡＰ２３８４１、ＴＡＦＡ−９３、バイオリムス７またはバイオリムス９など；コルチコステロイド；シクロホスファミド；アザチオプリン；メトトレキセート；促進性リンパ球ホーミング特性を有するＥＤＧ受容体アゴニスト、例えばＦＴＹ ７２０またはその類似体；レフルノミドまたはその類似体；ミゾリビン；ミコフェノール酸；ミコフェノール酸モフェチル；１５−デオキシ・スペルグアリン（deoxyspergualine）またはその類似体；免疫抑制性モノクローナル抗体、例えば、白血球受容体、例えば、ＭＨＣ、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８、ＣＤ７、ＣＤ２５、ＣＤ２７、Ｂ７、ＣＤ４０、ＣＤ４５、ＣＤ５８、ＣＤ１３７、ＩＣＯＳ、ＣＤ１５０（ＳＬＡＭ）、ＯＸ４０、４−１ＢＢまたはそれらのリガンド、例えばＣＤ１５４に対するモノクローナル抗体；または他の免疫調節化合物、例えばＣＴＬＡ４の細胞外ドメインの少なくとも一部を有する組換え結合分子、またはその変異体、例えば非ＣＴＬＡ４タンパク質配列と連結したＣＴＬＡ４の細胞外ドメインの少なくとも一部またはその変異体、例えばＣＴＬＡ４Ｉｇ（例えば、ＡＴＣＣ ６８６２９に記載）またはその変異体、例えばＬＥＡ２９Ｙ、または他の接着分子インヒビター、例えばｍＡｂｓまたはＬＦＡ−１アンタゴニストを含む低分子量インヒビター、セレクチン・アンタゴニストおよびＶＬＡ−４アンタゴニストと組み合わせて使用することができる。

式Ｉの化合物はまた、抗増殖性薬剤、例えば化学療法薬、例えば、これに限定されるわけでないが、アロマターゼ・インヒビター、抗エストロゲン剤、トポイソメラーゼＩインヒビター、トポイソメラーゼＩＩインヒビター、微小管活性化剤、アルキル化剤、ヒストン脱アセチル化インヒビター、ファルネシルトランスフェラーゼ・インヒビター、ＣＯＸ−２インヒビター、ＭＭＰインヒビター、ｍＴＯＲインヒビター、抗新生物代謝拮抗剤、プラチン化合物、プロテインキナーゼ活性を減少する化合物およびさらなる抗−血管形成化合物、ゴナドレリン・アゴニスト、抗アンドロゲン、ベンガミド、ビスホスフォネート、抗増殖性抗体およびテモゾロマイドを含む癌の処置に用いられるものと共に、または糖尿病治療にて、抗糖尿病薬、インスリン分泌促進剤またはインスリン分泌エンハンサー、例えばスルホニル尿素、例えばトルブタミド、クロルプロパミド、トラザミド、アセトヘキサミド、４−クロロ−Ｎ−［（１−ピロリジニルアミノ）カルボニル］−ベンゼンスルホンアミド（グリコピラミド）、グリベンクラミド（グリブリド）、グリシラジド、１−ブチル−３−メタニリル尿素、カルブタミド、グリボヌリド、グリピザイド、グリキドン、グリソキセピド（glisoxepid）、グリブチアゾール、グリブゾール、グリヘキサミド、グリミジン、グリピナミド、フェンブタミドまたはトリルシクラミド、経口インスリン刺激物質誘導体、例えば短期作用インスリンエンハンサー、例えばメグリチニド、レパグリニド、フェニル酢酸誘導体、例えばナテグリニド、ＤＰＰ ＩＶインヒビター、例えば１−｛２−［（５−シアノピリジン−２−イル）アミノ］エチルアミノ｝アセチル−（２Ｓ）−シアノ−ピロリジンジヒドロクロライド、ＬＡＦ２３７、ＧＬＰ−１またはＧＬＰ−１アゴニスト類似体、またはインスリン・センシタイザー、例えばペルオキシソーム増殖因子活性化受容体γアゴニスト（ＰＰＡＲγ）、例えばグリタゾン、Ｎ−（２−ベンゾイルフェニル）−Ｌ−チロシン類似体などの非−グリタゾン型、例えばＧＩ−２６２５７０、またはオキソリジンジオン、例えばＪＴＴ５０１、２重ＰＰＡＲγ／ＰＰＡＲαアゴニスト、例えばＤＲＦ−５５４１５８、ＮＣ−２１００またはＮＮ−６２２、レチノイドＸ受容体アゴニストまたはレキシノイド、例えば２−［１−（３，５，５，８，８−ペンタメチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−２−ナフチル）−シクロプロピル］−ピリジン−５−カルボン酸、４−［（３，５，５，８，８−ペンタメチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−２−ナフチル）−２−カルボニル］−安息香酸、９−シスレチノイン酸またはその類似体、誘導体または薬学的に許容される塩と共に投与され得る。

上記本発明により、さらに以下の局面が提供される：
５． 治療的有効量のＧＳＫ−３β、ＰＫＣまたはＴ細胞活性化および増殖のインヒビター、例えば遊離型または薬学的に許容される塩形態の式Ｉの化合物と、第二の製剤物質を、例えば同時または連続的に共投与することを含む上記のような方法であって、該第二の製剤物質は、例えば上記のような免疫抑制剤、免疫調節剤、抗炎症性剤、抗増殖性剤または抗糖尿病薬である。

６． ａ）ＧＳＫ−３β、ＰＫＣのインヒビター、またはＴ−細胞活性化および増殖のインヒビター、例えば遊離型または薬学的に許容される塩形態の式Ｉの化合物、およびｂ）免疫抑制剤、免疫調節剤、抗炎症性剤、抗増殖性剤および抗糖尿病薬から選択される少なくとも１個の第二の物質、を含む治療的組合せ、例えば、キット。構成要素ａ）および構成要素ｂ）は、同時にまたは連続して用いられ得る。キットには、その投与のための取扱説明書が含まれ得る。

ＧＳＫ−３β、ＰＫＣのインヒビター、またはＴ細胞活性化および増殖のインヒビター、例えば式Ｉの化合物を、例えば上記に特定したような急性または慢性の移植拒絶、または炎症性障害または自己免疫性障害の予防または処置のため、他の免疫抑制剤／免疫調節剤、抗炎症性剤、抗増殖性剤または抗糖尿病治療剤と一緒に投与する場合、共投与した免疫抑制剤、免疫調節剤、抗炎症性剤、抗増殖性剤または抗糖尿病性化合物の投与量は、もちろん、用いた共薬剤の型、例えばステロイドまたはシクロスポリンのどちらか、用いた特定の薬剤、処置する状態などにより変化する。

Claims (10)

1. 式Ｉ
   

   

   ［式中、
   Ｒ_ａは、Ｈ；Ｃ_１−４アルキル；またはＯＨ、ＮＨ_２、ＮＨＣ_１−４アルキルまたはＮ（ジ−Ｃ_１−４アルキル）_２により置換されたＣ_１−４アルキルであり；
   Ｒ_ｂは、Ｈ；ハロゲン；Ｃ_１−６アルキル；またはＣ_１−６アルコキシであり、そして、
   Ｒは、式（ａ）または（ｂ）
   

   

   〔式中、
   Ｒ_１およびＲ_３はそれぞれ、ヘテロ環基であるか、または式α
   −Ｘ−Ｒ_ｃ−Ｙ （α）
   ｛式中、Ｘは、直接結合、Ｏ、ＳまたはＮＲ_１１であり、ここでＲ_１１は、ＨまたはＣ_１−４アルキルであり、
   Ｒ_ｃは、Ｃ_１−４アルキレンであるか、または１個のＣＨ_２をＣＲ_ｘＲ_ｙにより置換されているＣ_１−４アルキレンであり、ここでＲ_ｘおよびＲ_ｙのうち１個はＨであり、他はＣＨ_３であるか、Ｒ_ｘおよびＲ_ｙはそれぞれＣＨ_３であるか、またはＲ_ｘおよびＲ_ｙは、一緒になって−ＣＨ_２−ＣＨ_２−を形成しており、
   Ｙは、末端の炭素原子と結合し、そしてＯＨ、−ＮＲ_１２Ｒ_１３から選択され、ここでＲ_１２およびＲ_１３は、それぞれ独立してＨ、Ｃ_３−６シクロアルキル、Ｃ_３−６シクロアルキル−Ｃ_１−４アルキル、アリール、アリール−Ｃ_１−４アルキル、ヘテロアリール−Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_２−６アルケニル、または要すればＯＨ、ハロゲン、Ｃ_１−４アルコキシまたは−ＮＲ_１４Ｒ_１５で末端の炭素原子を置換されていてよいＣ_１−４アルキルであり、ここでＲ_１４およびＲ_１５は、それぞれ独立してＨ、Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_３−６シクロアルキル、Ｃ_３−６シクロアルキル−Ｃ_１−４アルキル、アリール−Ｃ_１−４アルキルであるか、またはＲ_１２およびＲ_１３は、それらが結合する窒素原子と一緒にヘテロ環基を形成する｝
   で示される基であり、そして、
   Ｒ_２およびＲ_４は、それぞれ独立してＨ；ハロゲン；Ｃ_１−４アルキル；Ｃ_１−４アルコキシ；ＣＦ_３；ニトリル；ニトロまたはアミノである〕
   で示される基である］
   で示される化合物、またはその塩。
2. Ｒ_ａが、Ｈ、メチル、エチルまたはイソプロピルである、請求項１記載の化合物、またはその塩。
3. Ｒ_ｂが、Ｈ、Ｃｌ、メチルまたはエチルである、請求項１または２記載の化合物、またはその塩。
4. Ｒ_１が、ヘテロ環基、例えばピペラジニルであり、要すれば、環窒素または環炭素を置換されていてよく、例えば、４−メチル−ピペラジン−１−イル、または４，７−ジアザ−スピロ［２．５］オクト−７−イルであるか；または式（α）の基であり、ここでＸが直接結合であり、Ｒ_ｃがＣＨ_２であり、Ｙが−ＮＲ_１２Ｒ_１３であり、ここでＲ_１２およびＲ_１３が、それぞれ独立してＨ、Ｃ_３−６シクロアルキル−Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_２−６アルケニル、または要すればＯＨ、ハロゲン、Ｃ_１−４アルコキシまたは−ＮＲ_１４Ｒ_１５により末端炭素原子を置換されていてよいＣ_１−４アルキルであり、ここでＲ_１４およびＲ_１５が、それぞれ独立してＨまたはＣ_１−４アルキルであるか；またはＲ_１２およびＲ_１３が、それが結合する窒素原子と一緒にヘテロ環基、例えばピペラジニルを形成する、請求項１〜３のいずれか一項記載の化合物、またはその塩。
5. Ｒ_２および／またはＲ_４が、Ｈ；Ｃｌ、Ｆ；ＣＦ_３；ニトリル；ニトロまたはアミノである、請求項１〜４のいずれか一項記載の化合物、またはその塩。
6. 式ＩＩ
   

   

   ［式中、Ｒ_ａおよびＲ_ｂは、請求項１に定義のとおりである］
   で示される化合物と、
   式ＩＩＩ
   Ｒ−ＣＨ_２−ＣＯ−ＮＨ_２ （ＩＩＩ）
   ［式中、Ｒは、請求項１に定義のとおりである］
   で示される化合物を反応させる工程を含み、
   必要であれば、適切に、遊離型で得られた式Ｉの結果化合物を塩形態に変換する工程、または逆工程を含む、請求項１記載の式Ｉの化合物を製造する方法。
7. 医薬品として用いるための、遊離型または薬学的に許容される塩形態の請求項１〜５のいずれか一項記載の式Ｉの化合物。
8. 遊離型または薬学的に許容される塩形態の請求項１〜５のいずれか一項記載の式Ｉの化合物を、薬学的に許容される希釈剤またはその担体と一緒に含む、医薬組成物。
9. Ｔリンパ球および／またはＰＫＣ、またはＧＳＫ−３βを介する障害または疾患の処置または予防における使用を目的とした医薬組成物の製造における使用のための、請求項１〜５のいずれか一項記載の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩。
10. Ｔリンパ球および／またはＰＫＣ、またはＧＳＫ−３βを介する障害または疾患の予防または処置を必要とする患者における予防法または処置法であって、該患者に有効量の請求項１〜５のいずれか一項記載の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む方法。