JP2005536740A - 血液細胞及びこれに類するものを分化するために光散乱を検出するための光ファイバ装置 - Google Patents
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Abstract
Description
図1を参照すると、本発明に従って、前方散乱/軸方向光損失検出器Dは、一般的に言って、(i)光ファイバ・ホルダ30、(ii)複数の離散的な光ファイバ束33−38(6束として図には示されているが、これより多くても少なくても良い)、及び(iii )同じ数の光検出器PD1−PD6、を含む。光検出器は従来の増倍型光電管、固体デバイスまたはこの2つの組み合わせとすることができる。各光ファイバ束は、少なくとも3本または4本の光ファイバを含むことが望ましく、ファイバ・ホルダ30内で配列されるパターン及びファイバの直径に応じて50本以上のファイバを含むことができる。各光ファイバは、使用中複数の内部反射を通じてファイバによって比較的離れた場所に伝送される放射エネルギーを集めるまたは受けるための位置に配置される集光端、及び集められ伝送された光を放出する、相対する光放出端を有する。図2を参照すると、バックプレートBPは、垂直配列に配列される適切なサイズの穴で6つの光ファイバ束33−38の光放出端を支持するのに役立つ。6つの光検出器PD1−PD6も、光ファイバのそれぞれの光放出端から放出される光を受ける位置にプレートBPによって支持される(図2で示される裏面)。光ファイバ束の個々のファイバが全て、おそらく長さを除いて、全ての点で同じであることが望ましい。長さは、空間の制約に応じて束によって多少の変動があってもよい。各ファイバは約500ミクロンの直径を持ち、かつ全てのファイバは共通の光学材料から作られることが望ましい。特に望ましいファイバは、Boston Optical Fiberが市販するSI Bare Fiberである。
光ファイバ・ホルダ30の前方光散乱集光コンポーネント31は、スリーブ60内において軸方向集光コンポーネント32の前方に配置される。コンポーネント32は、それぞれ4つの同心リングA、B、C及びD(図5Bに示される)を形成するように光ファイバ束33、34、37及び38のそれぞれの集光端を保持する機能を果たす。光ファイバ・ホルダの使用中、光ファイバ端の各リングは、照射ビームの光軸OAを中心とし、リングの直径、散乱源とファイバ端の間の軸方向の間隔及びファイバの直径によって決定される離散的角度範囲で前方散乱光を集める機能を果たす。上述の通り、ファイバ束33、34、37及び38の光放出端は、各光検出器が1つの束からのみ光を受け取るように光検出器PD1、PD2、PD5及びPD6に光学的に結合される。このように、各光検出器の出力は、各検出器が光学的に結合されるファイバの集光端が支持される位置によって決定される4つの異なる角度範囲のうちの1つの範囲内の前方散乱光の強さを反映する。
上述の通り、面62Sの穿孔の各リングは、光ファイバ束33、34、37及び38のうちの1つの光ファイバを支持する。従って、図5Bを参照すると、例えば、光ファイバ束33のファイバの本数が12本であれば、リングAの12の穿孔が、合計で12本の光ファイバを支持する。同様に、光ファイバ束38のファイバの本数が34本であれば、リングDの34の穿孔が、合計で34本のファイバを支持することができる。明らかにリングの直径が収納できる光ファイバの本数を決定する。前方光散乱が検出される公称角度は、穿孔のそれぞれの軸を通る中心線及び散乱源からのリングの軸方向の距離によって決定されるのと同様、各リングの直径によって決定される。散乱が検出される角度範囲は、各穿孔に1本のファイバがあると仮定して、各ファイバの直径によって決定される。本発明の特に望ましい実施態様に従えば、光ファイバ・リングA、B、C及びDの直径及び面62Sの曲率半径は、公称散乱角度が11°、16°、24°及び32°となるように選択される。角度の関数としての前方散乱の強さ(振幅)が白血球の主要な3つの部分母集団(すなわち、リンパ球L,単球M及び顆粒球G)についてグラフ化される図8を参照すると、望ましい角度約11°、16°及び24°が3つの曲線の比較的適切な変位を示し、従って、前方散乱角度のうち任意の2つが相互に関係付けてグラフ化される散布図においては、白血球の3つの部分母集団を容易に識別することができることが分かるだろう。面62Sの約6.2mmの曲率半径及び500ミクロンのファイバ直径は、望ましい公称角度を中心として約プラスマイナス2°の角度範囲をもたらす。
光ファイバ・ホルダ30の軸方向集光コンポーネント32は、(1)遠隔に位置する光検出器に伝送するために軸方向のビームを受け取るための位置に1つまたはそれ以上の光ファイバ束のそれぞれの集光端を支持するため、並びに(2)このビームが後方散乱検出器D’に向かって逆反射するのを防ぐために、作用する。逆反射を防がないと、後方散乱検出器において比較的低レベルの後方散乱信号の収集及び検出を妨害するだろう。ビーム・ライトの逆反射を防止するために、コンポーネント32は、伝送及び検出のためにビーム・ライトを集める前に、これが集めるビーム・ライトを拡散する機能を果たす。図4、6A及び6Bを参照すると、コンポーネント32は、前端に中央の円筒形開口64Aを有する円筒形ハウジング64を含む。プレート62のステム部62Aは、開口64Aに圧入され、それによってハウジング64の支持となる。ハウジング64の後部は反射面を有する円錐形内壁64Aを有する。壁64Aは部分的に光反射室65を形成する。ハウジング64から後方に伸びる円形フランジ64Cは、第二光ファイバ・ホルダとして役立つ軸プラグ66(図7A及び7Bにおいて示される)を支持する円筒形開口67を形成する。ハウジング64の小さい中央の開口70は、開口64Aと67の間を連絡する。軸プラグ66は、望ましくはE.I.Dupontの商標である登録商標Delrinで作られる、平面的な光拡散上面66Aを備える。穿孔H’の円形パターンがプラグ66に形成され、穿孔は、相互に、またプラグの中央縦軸に対して平行である。これらの穿孔は、図1及び2に示される光ファイバ束35または36のどちらかから、望ましくは円形パターンの周りに交互に、光ファイバを受けるのに適する。束35及び36の光ファイバは、そのそれぞれの集光端が光拡散面66Aと同一平面上になるように穿孔H’内に配置される。このように、図4に示される通り、ステム62Aに形成される中央穿孔CHを通り部材64の中央開口70を通る軸方向のビームBは、プラグ66の光拡散面66Aにぶつかる。従って、入射ビームはあらゆる方向に拡散し、拡散した光は、反射光の一部がプラグ66によって支持される光ファイバの集光端にぶつかるまで反射室65内で複数回反射する。軸方向のビーム・ライトはこのようにして集められ、PD3またはPD4に伝送される。(a)中央穿孔CHの比較的小さい直径(約1mm)、(b)中央穿孔CHの長さ(約12mm)及び(c)面66Aの光拡散効果、によって、前方散乱光及び後方散乱光の両方の検出の妨げとなるようなオプティカル・フローセル及び後方散乱検出器D’に向かって反射されるビーム・ライトは最小限に抑えられる。例えばビームBが多色性の場合(粒子の照射に2つの異なるレーザーが使用される場合のように)、2つの異なる波長で軸方向光損失を区別するために、1対の色吸収フィルタ40及び42が、それぞれ光ファイバ束35及び36の光放出端と光検出器PD3及びPD4の感光面との間に配置されることが望ましい。
さらに図1、9A及び9Bを参照すると、後方散乱検出器D’は、光ファイバ・ホルダ50、光ファイバ束54及び光検出器56を含む。光ファイバは、上述のものと同じものが望ましく、光検出器は従来の増倍型光電管(PMT)であることが望ましい。光ファイバ・ホルダ50は、黒色のプラスティックで作られることが望ましく、E.I.Du Pontの製品であるDerlinプラスティックで作られるのが最も望ましい。ホルダ50は、長さ全体に沿って伸びる中央孔71を有する比較的小さい中央管部160を含む。中央管部160は、その一端に円形ファイバ保持フランジ162を、また相対する端に拡大管部164を備える。望ましい実施態様に従えば、中央管部160は約2.5mmの長さ及び約1.5mmの外径を持つ。孔161の直径は約1.3mmであり、粒子照射ビームBが孔を通過した後粒子Pを照射できるようにビームBを通すのに充分な大きさである。拡大管部164は、約4.0mmの長さ、約3.3mmの外径及び約3.0mmの内径を有する。管部164の内径は、レンズ・ハウジング26の端の外面にぴったりとはまるのに適するので、レンズ・ハウジングは、光ファイバ・ホルダ50の全面的な支持となる。
Claims (20)
- ビームによって照射される小さい粒子からの光散乱を検出するための装置であって、
(a)放射線ビームが各粒子を照射するとき粒子を一度に1個ずつ通過させることができる細胞インテロゲーション・ゾーンを有する光学的に透明なフローセルであり、該フローセルが、被照射粒子から散乱する光が通ることができる光学的に透明な壁を有する、フローセルと、
(b)複数の細長い光ファイバであり、その各々がその集光端で光を受け取り、かつ前記光を複数の内部反射を通じて相反する光放出端に伝送するために作用し、前記光放出端で前記伝送された光が放出され、該光ファイバの各々が該光ファイバに縦に伸びる中央光軸を有する、光ファイバと、
(c)放出される光を受け取りかつこれを検出するために前記光ファイバのそれぞれの光放出端に隣接して配置される少なくとも1つの光検出器と、
(d)前記光ファイバの支持される部分のそれぞれの光軸が前記インテロゲーション・ゾーン内で照射される粒子の外見上の位置に向かって集まるように各光ファイバのそれぞれの集光端付近の部分を支持するための光ファイバ・ホルダと、
を備える、装置。 - 前記光ファイバ・ホルダが、前記ファイバ部分を支持するために複数の穿孔が形成される凹面を有するファイバ保持プレートを備える、請求項1に記載の装置。
- 前記ファイバのそれぞれの集光端が前記凹面と実質的に同一平面上にある、請求項2に記載の装置。
- 前記支持されるファイバ部分が、前記支持されるファイバ部分のそれぞれの縦軸が前記光学的に透明な壁を通して見たときの被照射粒子の外見上の位置に集まるように前記光ファイバ・ホルダによって支持される、請求項1に記載の装置。
- 前記支持されるファイバ部分が、前記光ファイバ集光端が1つまたはそれ以上の円形または円弧パターンを形成するように前記凹面に配列されるように、前記光ファイバ・ホルダによって支持される、請求項2に記載の装置。
- 前記支持されるファイバ部分が、前記光ファイバ集光端が複数の同心円を形成するように前記凹面に配列されるように、前記光ファイバ・ホルダによって支持され、前記円の直径及び光散乱粒子からの円の間隔が、光散乱が検出される前方光散乱角度を決定する、請求項2に記載の装置。
- 追加の光ファイバが、光路を通過する粒子によって強さが変わる軸方向のビームを集める位置に前記光ファイバ・ホルダによって支持される、請求項1に記載の装置。
- 前記追加の光ファイバが、前記軸方向のビームの光路を中心とする円形パターンで支持される、請求項7に記載の装置。
- 前記追加の光ファイバの各々が中央の縦軸を有し、かつ該装置において、前記追加の光ファイバのそれぞれの集光端付近の部分が、前記軸が相互に実質的に平行に伸びるように支持される、請求項8に記載の装置。
- 前記ビームが多色性であり、かつ該装置において、前記追加の光ファイバの一部が、1つの光検出器に第一の波長の軸方向のビーム・ライトを伝送するために使用され、かつ前記追加の光ファイバの別の部分が、別の光検出器に第二の波長の軸方向のビーム・ライトを伝送するために使用される、請求項7に記載の装置。
- 前記光ファイバ・ホルダが、前記追加の光ファイバによって集められる前に前記軸方向のビーム・ライトを拡散するための光拡散面を含む、請求項7に記載の装置。
- 前記光ファイバ・ホルダが、拡散される軸方向のビーム・ライトを前記追加の光ファイバのそれぞれの集光端に向かって反射する位置に配置される反射室を形成する、請求項11に記載の装置。
- 前記光ファイバ・ホルダが前記光拡散面に軸方向のビーム・ライトを伝送する位置に配置される細長い穿孔を形成し、前記穿孔が、拡散される軸方向の光が前記フローセルに向かって戻るのを制限するような長さ及び直径を有する、請求項11に記載の装置。
- ビームによって照射される小さい粒子または細胞によって散乱する光を検出するための装置であって、
(a)複数の光検出器と、
(b)複数の光ファイバであり、各光ファイバが集光端を有し、かつ前記光検出器のうちの1つに近接して配置される光放出端を有する、複数の光ファイバと、
(c)1対の光ファイバ・ホルダであり、一方のホルダが、被照射細胞または粒子からの後方散乱光を受け取りかつこれを集めるための位置に前記光ファイバの一部のそれぞれの集光端を支持するのに役立ち、他方のホルダが、同じ被照射細胞または粒子からの前方散乱光を受け取りかつこれを集めるための位置に残りの光ファイバのそれぞれの集光端を支持するのに役立つ、光ファイバ・ホルダと、
を備える、装置。 - 前記光ファイバの各々が、前記光ファイバの前記集光端付近の部分が前記被照射粒子に向かって伸びるように支持される、請求項14に記載の装置。
- 前記光ファイバのそれぞれの集光端が1つまたはそれ以上の円形パターンを形成するように球状凹面に配列される、請求項15に記載の装置。
- 前記光ファイバのそれぞれの集光端が複数の同心円を形成するように前記球状凹面に配列され、各円の前記光ファイバが各光ファイバの直径、前記円のそれぞれの直径及び被照射粒子または細胞からの前記円の変位によって決定される角度範囲内で前記被照射粒子または細胞による散乱光を検出するのに適する、請求項16に記載の装置。
- 追加の光ファイバがビーム光路を通過する粒子によって強さが変わる軸方向のビーム・ライトを集めるために前記円の中心付近で支持される、請求項16に記載の装置。
- 前記追加の光ファイバが前記軸方向のビームの光路を中心とする円形パターンで支持される、請求項18に記載の装置。
- 前記追加の光ファイバの各々が中心縦軸を有し、かつ該装置において、前記追加の光ファイバのそれぞれの集光端付近の部分が、前記軸が相互に実質的に平行に伸びるように支持される、請求項8に記載の装置。
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