JP2005506093A - 抗体処置応答を評価するための方法および組成物 - Google Patents
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Abstract
Description
【0001】
本発明は、特定の治療的処置に対する被験者の応答を評価または査定するための方法および組成物に関する。より詳細には、本発明は、被験者の応答を決定する方法、または治療用抗体で処置される被験者の治療プロトコールを適合させる方法を提供する。本発明は、悪性腫瘍、特にリンパ腫の患者に使用することができ、また最高の応答者を選択しかつ/または低応答者向けに処置条件またはプロトコールを調整するのに適する。
【背景技術】
【0002】
序文
ヒトにおける様々な治療方針は、治療用抗体の使用を基本とする。これは、たとえば、標的細胞、特に罹患細胞、たとえばウイルス感染細胞、腫瘍細胞または同種異系免疫担当細胞を含む他の病原細胞を著減させるために開発された治療用抗体の使用を含む。一般に、このような抗体は、IgG種、一般にIgG1およびIgG3の、モノクローナル抗体である。こうした抗体は、様々な種または起源由来の機能ドメインまたは特異性を含む、組換え抗体およびヒト化抗体であってもよい。このような治療用抗体の具体例は、ネズミ可変領域に連結したヒトγ1およびκ定常領域で作られるキメラ抗−CD20 IgG1モノクローナル抗体である、リツキシマブ(マブテラ(Mabthera)(登録商標)、リツキサン(Rituxan)(登録商標))である1。数年間にわたって、リツキシマブは、Bリンパ増殖性悪性腫瘍、特に非ホジキンリンパ腫(NHL)に対する治療方針をかなり修正してきた。原型を保ったヒト化IgG1抗体の他の例としては、B細胞悪性腫瘍の処置に使用されるアレムツズマブ(alemtuzumab)(キャンパス1H(Campath-1H)(登録商標))、または乳癌の処置に使用されるトラスツズマブ(trastuzumab)(ハーセプチン(Herceptin)(登録商標))などがある。開発中の治療用抗体のさらなる例は、当該技術分野で開示されている。
【0003】
これらの抗体は、特に腫瘍を処置するためのヒト治療の、新規な効果的な方法を代表するが、常に強力な効果を示すとは限らず、それらの使用は、それらに対する対象の応答を評価することにより改良することができる。たとえば、単独のまたは化学療法と併用したリツキシマブは、低中悪性度NHL2 〜 8および高悪性度NHL6,9の両者の処置に有効なことが証明されていたが、低悪性度NHLの患者の30%〜50%は、リツキシマブに対する臨床応答を示さなかった4,5。リンパ腫細胞上でのCD20発現レベル2、処置時における高い腫瘍負担の存在6または低い血清リツキシマブ濃度2が、一部の患者でリツキシマブの効果が欠如している理由であることが示唆されてきた。しかし、処置不成功の実際の原因は、大部分は不明のままである。
【0004】
抗体処置に対する患者応答の評価を可能にする方法を利用できることにより、これらの製品の治療効力が大いに高められるであろう。しかし、このような治療用抗体の精確なインビボ(in vivo)作用様式は、明白に立証されていない。事実、インビトロ(in vitro)試験から、リツキシマブの様々な可能性のある作用様式(抗体依存性細胞介在性細胞傷害(ADCC)10,11、補体依存性細胞傷害10,12,13、アポトーシスにつながる直接情報伝達14,15等々)が示唆されるが、インビボにおけるこれらの標的細胞著減抗体の明白な作用は、ヒトで立証されていない。さらに、ADCCは細胞内病原体および腫瘍細胞の根絶における重要なエフェクター機構であるが、ADCCの役割は未だ議論の余地がある12,13。
【0005】
本発明は、ここで、治療用抗体に対する対象の治療的応答を査定するための新規な方法および組成物を提示する。本発明は、治療用抗体処置に対して最高の応答プロフィールを有する患者を選択する方法も提示する。本発明は、患者の応答を評価する事前工程を含む、治療用抗体で患者を処置する方法にも関する。本発明は、本発明を実施するのに適した組成物およびキットにも関する。本発明は、対象の応答を査定またはモニタリングするために、または抗体の作用様式を検証するために、臨床治験または実験環境でも使用することが可能である。
【0006】
本発明は、ある程度、対象の遺伝子型と、治療用抗体処置に応答するその能力との間の相関関係の証明に基づく。より具体的には、本発明は、FcγRIIIa受容体の遺伝子型が、治療用抗体処置に対する対象の応答と直接的な相関関係があることを示す。
【0007】
3種類のFcγR(FcγRI、FcγRIIおよびFcγRIII)およびそれらのサブクラスは、ヒトでは、全て染色体1の長腕上に位置する、8つの遺伝子によりコード化されている。これらの遺伝子の幾つかは、異なる受容体特性を有するアロタイプを生成する機能的対立遺伝子多型を示す。これらの多型は、自己免疫性疾患または感染症19 〜 2 lに対する罹病性を上昇させる遺伝因子として認定されてきた。これらの遺伝因子の1つは、アミノ酸158位にフェニルアラニン(F)またはバリン(V)のいずれかを有するFcγRIIIaをコード化する、FCGR3Aにおける遺伝子二型性である22,23。この残基は、IgG1−FcγRIII共結晶化によって最近証明された24通り、IgG1の下側のヒンジ領域と直接、相互に作用する。ヒトIgG1は、ホモ接合型FcγRIIIa−158F型またはヘテロ接合型ナチュラル・キラー細胞(NK)よりホモ接合型FcγRIIIa−158V型NKに、より強く結合することが明白に証明されている22,23。
【0008】
我々は、FCGR3A遺伝子型と、治療用抗体処置に対するインビボでの患者応答との間の、可能性がある相関関係の評価に着手した。我々の発明の根幹は、幾分は、上記遺伝子型と上記応答プロフィールとの間に非常に強い相関関係が存在し、158位にバリン残基が存在することは、高い応答率を示すという、予期せぬ発見に由来する。より具体的には、リツキシマブのみを受けており、応答率が非常に高い特殊な状況にある、以前に処置を受けていなかった濾胞性NHL患者で、FCGR3Aの遺伝子型特定を実施した5。FCGR2A−131H/Rは、FCGR3Aと共に染色体1q22上に共局在化し、マクロファージFcγRIIa受容体をコード化するので、対照として決定した。
【0009】
以前に処置を受けていなかった濾胞性非ホジキンリンパ腫のためにリツキシマブを受けていた患者47例で、FCGR3A−158V/F遺伝子型が決定された。2ヶ月(M2)および1年(M12)に、臨床応答および分子応答を評価した。陽性の分子応答は、末梢血および骨髄の両者におけるBCL2−JH遺伝子再構成の消失として定義された。FCGR3A−158Vホモ接合型患者は21%であったが、FCGR3A−158Fホモ接合型およびヘテロ接合型患者(FCGR3A−158Fキャリヤー)は、それぞれ34%および45%であった。M2およびM12における客観的応答率は、FCGR3A−158Vホモ接合型患者では100%および90%であったのに対して、FCGR3A−158Fキャリヤーでは65%(p=0.02)および51%(p=0.03)であった。M12で、ホモ接合型FCGR3A−158V患者の5/6に陽性の分子応答が確認されたのに対して、FCGR3A−158Fキャリヤーではその5/16であった(p=0.04)。さらに、ホモ接合型FCGR3A−158V遺伝子型は、臨床応答および分子応答と関連した単一パラメーターであることが多変量解析で立証され、また低率の疾患進行度とも関連していた(p=0.05)。
【0010】
発明の効果
したがって、本発明は、FCGR3A遺伝子型と、治療用抗体に対する臨床応答および分子応答との間の関連を、初めて立証するものである。したがって、本発明は、患者の応答をモニター、評価または選択するために使用することができる第1の独特のマーカーを提供する。したがって、本発明は、悪性腫瘍、ウイルス感染症または病的細胞が対象に存在することに関連した他の疾患、特に非ホジキンリンパ腫の患者の管理に、新しい薬理遺伝学的方法を導入する。
【0011】
本発明の目的は、対象のFCGR3A遺伝子型および/または上記被験者のFcγRIIIa受容体に多型が存在することをインビトロで決定することを含む、治療用抗体処置に対する被験者の応答を査定する方法にある。より具体的には、本方法は、上記対象のFCGR3A158遺伝子型をインビトロで決定することを含む。
【0012】
本発明のさらなる目的は、被験者のFCGR3A遺伝子型および/または上記対象のFcγRIIIa受容体に多型が存在することをインビトロで決定することを含む、治療用抗体処置に対する患者を選択する方法である。より具体的には、本方法は、上記被験者のFCGR3A158遺伝子型をインビトロで決定することを含む。
【0013】
本発明のもう1つの目的は、被験者のFCGR3A遺伝子型および/または上記被験者のFcγRIIIa受容体に多型が存在することをインビトロで決定することを含む、被験者における治療用抗体処置の効力または処置条件またはプロトコールを改良する方法である。より具体的には、本方法は、上記被験者のFCGR3A158遺伝子型をインビトロで決定することを含む。
【0014】
より具体的には、被験者のFCGR3A158遺伝子型をインビトロで決定することは、FcγRIIIa受容体の158位のアミノ酸残基(またはFCGR3A遺伝子の対応するコドン)を決定することを含み、158位のバリンが上記処置に対するより良い応答を示し、158位のフェニルアラニンが上記処置に対する低い応答を示す。
【0015】
本発明の中で、用語「治療用抗体または抗体」は、より具体的には、患者において、標的細胞を著減させる役目を果たす抗体を示す。このような標的細胞の具体例には、アレルギー、自己免疫疾患、同種異系反応等々に関与する腫瘍細胞、ウイルス感染細胞、同種異系細胞、病理学的免疫担当細胞(たとえば、Bリンパ球、Tリンパ球、抗原提示細胞等々)、または健康な細胞(たとえば、抗血管形成治療方針における内皮細胞)さえも含まれる。本発明の脈絡の中で最も好ましい標的細胞は、腫瘍細胞およびウイルス感染細胞である。治療用抗体は、たとえば、特に抗体依存性細胞介在性細胞傷害(ADCC)により、細胞障害作用または細胞融解を仲介することが可能である。ADCCは、IgG感作抗原をFcγR担持細胞障害性細胞に連結し、細胞活性化機構を始動させる機能を有する、IgGのFc部分(FcγR)に対する白血球受容体を必要とする。この作用機序は、ヒトでは、インビボで立証されていないが、このような標的細胞除去治療用抗体の効力の説明となる。治療用抗体は、ポリクローナルによってもよく、好ましくは、モノクローナルによってもよい。治療用抗体は、ハイブリドーマ、または所望の可変領域および定常領域を発現するように操作された組換え細胞により産生することが可能である。抗体は、一本鎖抗体であってもよく、または抗原特異性および下側のヒンジ領域を保持する他の抗体誘導体またはその変異体であってもよい。これらは、多機能抗体、組換え抗体、ScFv、人化抗体、またはそれらの変異体であってもよい。治療用抗体は、表面抗原、たとえば、膜抗原に特異的である。最も好ましい治療用抗体は、腫瘍抗原(たとえば、腫瘍細胞に特異的に発現される分子)、たとえば、CD20、CD52、ErbB2(またはHER2/Neu)、CD33、CD22、CD25、MUC−1、CEA、KDR、aVβ3等々、特にリンパ腫抗原(たとえば、CD20)に特異的である。治療用抗体は、好ましくはIgG1またはIgG3であり、より好ましくはIgG1である。
【0016】
本発明の治療用抗体の代表例は、リツキシマブ、アレムツズマブ(alemtuzumab)およびトラスツズマブ(trastuzumab)である。このような抗体は、ヒト対象での使用に関して認可された臨床プロトコールに従って使用することができる。治療用抗体のさらなる具体例としては、たとえば、下表に記載の通り、エプラツズマブ(epratuzumab))、バシリキシマブ、ダシリツマブ、セツキシマブ、ラベツズマブ(labetuzumab)、セビルマブ(sevirumab)、ツブリマブ(tuvurimab)、パリビズマブ(palivizumab)、インフリキシマブ、オマリズマブ、エファリズマブ、ナタリズマブ(natalizumab)、クレノリキシマブ等々が挙げられる:
【0017】
【表1】
【0018】
本発明の脈絡の中で、対象または患者は、哺乳動物対象または患者、より好ましくはヒト対象または患者を含む。
【0019】
本発明によれば、用語FCGR3A遺伝子は、対象における、FcγRIIIaポリペプチドをコードする核酸分子を指す。この用語は、特に、ゲノムDNA、cDNA、RNA(プレ−rRNA、メッセンジャーRNA等々)等々、またはそれらの配列の全部または一部を含む合成核酸を含む。合成核酸は、RNAから調製され、たとえば1つ以上のイントロン、または1つ以上の突然変異を含む部分として、FCGR3AゲノムDNAの配列の少なくとも一部を含む、cDNAを含む。最も好ましくは、用語FCGR3A遺伝子は、ゲノムDNA、cDNAまたはmRNA、一般に、ゲノムDNAまたはmRNAを指す。FCGR3A遺伝子は、好ましくは、ヒトFCGRIIIa遺伝子または核酸である、すなわち、ヒトFcγRIIIaポリペプチドの配列を有するFcγRIIIaポリペプチドの全部または一部をコードする核酸の配列を含む。このような核酸は、既知の技術により単離または調製することができる。たとえば、このような核酸は、ハイブリダイゼーション技術で、遺伝子ライブラリーまたは遺伝子バンクから単離することが可能である。また、このような核酸は、遺伝学的または化学的に合成することもできる。ヒトFCGRIIIa遺伝子の遺伝子編成を図2に示す。ヒトFcγRIIIaのアミノ酸配列は、図3に示す。アミノ酸158位は、成熟タンパク質の残基1から番号が付けられている。アミノ酸158位は、シグナルペプチドを有するプレタンパク質の残基176に対応する。野生型FCGR3A遺伝子の配列を、図4に示す(部分配列については、ジーンバンク(Genbank)寄託番号AL590385またはNM_000569を参照されたい)。
【0020】
本発明の脈絡の中で、一部または部分は、少なくとも3ヌクレオチド(たとえば、コドン)、好ましくは少なくとも9ヌクレオチド、さらにより好ましくは少なくとも15ヌクレオチドを意味し、1000ヌクレオチドも含むことができる。このような部分は、当該技術分野で周知の技術、たとえば、酵素的および/または化学的切断、化学合成またはそれらの組合せによって得ることができる。明確にするために、アミノ酸158位をコード化するFCGR3A遺伝子の一部の配列を以下に示す:
【0021】
【表2】
【0022】
上述の通り、本発明は、上記対象のFCGR3A158遺伝子型をインビトロで決定する方法を含む。これは、より詳細には、FcγRIIIaポリペプチドの158位に存在する(またはコード化される)アミノ酸残基の性質を決定することを含む。
【0023】
上記対象におけるFCGR3A遺伝子または対応するポリペプチドの遺伝子型特定は、コーディング核酸分子またはコード化されたポリペプチドの分析を含む、様々な技術で達成することが可能である。分析は、配列決定、移動、電気泳動、免疫技術、増幅、特異的消化またはハイブリダイゼーション等々を含んでも良い。
【0024】
ある特定の実施形態において、FcγRIIIa受容体の158位のアミノ酸残基の決定は、FCGR3A受容体遺伝子またはRNAまたはアミノ酸残基158をコード化するヌクレオチドを含むその一部を配列決定する工程を含む。
【0025】
他の特定の実施形態において、FcγRIIIa受容体の158位のアミノ酸残基決定は、FCGR3A受容体遺伝子またはRNAまたはアミノ酸残基158をコード化するヌクレオチドを含むその一部を増幅する工程を含む。増幅は、たとえば、従来の方法およびプライマーを使用して、単純PCR、RT−PCRまたはネステッドPCRのようなポリメラーゼ連鎖反応(PCR)で、実施することが可能である。
【0026】
この点に関して、本発明で使用するための増幅プライマーは、より好ましくは、約50未満のヌクレオチド、さらにより好ましくは、30未満のヌクレオチド、一般に約25未満または20未満のヌクレオチドを含む。また、好ましいプライマーは、特異性を確実にするために、通常は少なくとも5ヌクレオチド、好ましくは少なくとも8ヌクレオチドを含む。プライマーの配列は、FCGR3A遺伝子の配列に基づいて、好ましくは、それと共に完全な補足性を与えるように調製することができる。放射能、蛍光、酵素的、化学的等々の既知の技術を使用して、プローブを標識することが可能である。この標識は、たとえばホスファー32(Phosphor 32)、ビオチン(16-dUTP)、ジゴキシゲニン(11-dUTP)を使用することができる。当然のことながら、本発明は、特定の検出または標識技術に束縛または限定されるものではない。以下に開示する通り、プライマーは、増幅された核酸に対立遺伝子特異的制限部位を導入するための、制限部位をさらに含むことができる。
【0027】
このような増幅プライマーの具体例は、たとえば、配列番号1〜4である。
【0028】
当然のことながら、当業者は、他のプライマー、たとえば増幅工程で使用するためのFCGR3A遺伝子の断片、および特に順方向配列および逆方向配列を含む1対のプライマーであって、FCGR3A遺伝子のある領域とハイブリダイズし、コドン158を含むFCGR3A遺伝子の少なくとも一部の増幅を可能にする上記対の上記プライマーをデザインすることができる。好ましい実施形態において、各対のプライマーは、コドン158と相補的であり、コドン158と重複し、かつ158V(gtt)と158F(ttt)との間の判別を可能にする、少なくとも1つのプライマーを含む。当業者は、周知の一般知識および明細書に記載の指針に基づいて、増幅条件も調節することができる。
【0029】
ある特定の実施形態において、本発明の方法は、このように、細胞または生物学的サンプル中の、特異的オリゴヌクレオチドプライマーを使用したFCGR3a mRNAまたはgDNAの一部のPCR増幅であって、上記部分がコドン158を含むPCR増幅と、たとえば、電気泳動、特に変性剤ゲル濃度勾配電気泳動(Denaturing Gel Gradient Electrophoresis(DGGE))によるPCR産物の直接または間接的分析とを含む。
【0030】
他の特定の実施形態において、FcγRIIIa受容体の158位のアミノ酸残基の決定は、対立遺伝子特異的制限酵素消化の工程を含む。これは、ある特定の対立遺伝子(たとえば、158V対立遺伝子)のコード配列を切断し、他の対立遺伝子(たとえば、158F対立遺伝子、またはその逆)を切断しない制限酵素を使用することにより実施できる。このような対立遺伝子特異的制限酵素部位が配列中に天然に存在しない場合、このような部位を配列中に含む対立遺伝子特異的増幅プライマーを用いて核酸を増幅することにより、人工的にその中に導入することができる。増幅時の、対立遺伝子の存在の決定は、たとえば、電気泳動で、消化産物を分析することにより実行することが可能である。この技術は、選択された対立遺伝子に関して、ホモ接合型またはヘテロ接合型である対象の判別を可能にする。
【0031】
対立遺伝子特異的増幅プライマーの例としては、たとえば、配列番号3などが挙げられる。配列番号3は、Nlam部位の第1の3ヌクレオチドを導入する。(5′−CATG−3′)。Gの後ろで切断が起きる。このプライマーは、増幅産物の電気泳動分析を容易にするために、プライマーを伸長する、FCGR3Aとハイブリダイズしない11塩基と、制限部位をもたらすヌクレオチド31(A)を除き、FCGR3Aにハイブリダイズする21塩基とを含む。
【0032】
さらなる特定の実施形態において、FcγRIIIa受容体の158位のアミノ酸残基の決定は、FCGR3A受容体遺伝子またはRNAまたはアミノ酸残基158をコード化するヌクレオチドを含むその一部と、遺伝子型バリンまたはフェニルアラニンに特異的な核酸プローブとのハイブリダイゼーション工程、およびハイブリッドの有無の決定を含む。
【0033】
当然のことながら、上記の方法は、単独または様々な組合せのいずれでも使用することができる。さらに、FCGR3A158遺伝子型を決定するための、当業者に周知の他の技術、たとえば増幅(たとえばPCR)、特異的プライマー、特異的プローブ、移動等々を使用する方法、一般的な定量的RT−PCR、LCR(リガーゼ連鎖反応)、TMA(転写介在増幅)、PCE(酵素増幅イムノアッセイ)およびbDNA(分岐DNAシグナル増幅)アッセイを使用することが可能である。
【0034】
本発明の好ましい実施形態において、FcγRIIIa受容体の158位のアミノ酸残基の決定は、以下を含む:
−生体サンプルからゲノムDNAを得ること、
−FcγRIIIa受容体遺伝子、またはアミノ酸残基158をコード化するヌクレオチドを含むその一部を増幅すること、および
−上記FcγRIIIa受容体遺伝子の158位のアミノ酸残基を決定すること。
【0035】
増幅は、上述の特異的プライマーを使用して、ネステッド(nested)PCRを含むPCRのような特定の技術で遂行することができる。最も好ましい実施形態において、158位のアミノ酸残基の決定は、対立遺伝子特異的制限酵素消化により実施される。その場合、本方法は以下を含む。
−生体サンプルからゲノムDNAを得ること、
−FcγRIIIa受容体遺伝子、またはアミノ酸残基158をコード化するヌクレオチドを含むその一部を増幅すること、
−対立遺伝子特異的制限部位を導入すること、
−上記制限部位に特異的な酵素で核酸を消化すること、および
−消化産物を分析すること、すなわち、電気泳動で、消化産物の存在は対立遺伝子の存在を示す分析。
【0036】
他の特定の実施形態において、遺伝子型は以下を含む方法で決定される:インビトロまたはエキソビボ(ex vivo)での、細胞または生物学的サンプルまたは流体からの総(またはメッセンジャー)RNA抽出、場合によりcDNA合成、FCGR3A−特異的オリゴヌクレオチドプライマーによる(PCR)増幅、およびPCR産物の分析。
【0037】
本発明の方法は、FcγRIIIa受容体ポリペプチド、またはアミノ酸残基158を含むその一部を配列決定することによって、またはFcγRIIIaポリペプチドの各対立遺伝子に特異的な試薬を使用することによって、FcγRIIIa受容体の158位のアミノ酸残基を直接決定することも含んでもよい。これは、イムノアッセイ(ELISA、EIA、RIA等々)を含む、当業者に周知の適当な技術で決定することができる。これは、FcγRIIIa 158ポリペプチドに特異的な親和性試薬、より好ましくは抗体またはその断片または誘導体を使用して、成すことができる。ある特定の実施形態において、FcγRIIIa 158ポリペプチドは、FcγRIIIa 158VとFcγRIIIa 158Fとを判別する抗FcγRIIIa 158抗体(またはその断片)で、より好ましくはモノクローナル抗体で、検出される。抗体(または親和性試薬)は、任意の適当な方法(放射能、蛍光、酵素的、化学的等々)で標識することが可能である。あるいは、たとえば、抗FcγRIIIa 158抗体に結合する、標識された、第2の試薬(たとえば、抗体)を使用して、FcγRIIIa 158抗体免疫複合体を明らかに(かつ/または定量化)してもよい。
【0038】
上記の方法は、被験者の生体サンプル中のFCGR3A158遺伝子型特定に基づく。生体サンプルは、FCGR3A遺伝子または対応するポリペプチドを含む任意のサンプル、特に血液、骨髄、リンパ節または流体、特に血液またはFCGR3A158遺伝子またはポリペプチドを含む尿であってもよい。さらに、FCGR3A158遺伝子は一般に上述の細胞、組織または流体の中に存在するため、本発明の方法は通常、遺伝子またはポリペプチドを検出または分析に使用できるように処理したサンプルを使用する。処理は、従来の固定技術、細胞融解(機械的または化学的または物理的)、または、たとえば、免疫組織学または生物学で使用される他の従来の方法を含んでもよい。
【0039】
本方法は、抗腫瘍治療用抗体処置に対する対象の応答を決定するのに特に適する。この点に関して、ある特定の実施形態において、対象は腫瘍を有し、治療用抗体処置は腫瘍負担の減少を目標とし、特に腫瘍細胞の著減を目標とする。より好ましくは、腫瘍はリンパ腫、たとえば、より好ましくはBリンパ腫、特にNHLである。上述の通り、抗体は好ましくはIgG1またはIgG3、特に抗CD20 IgG1またはIgG3であり、さらに好ましくはヒト化抗体、たとえば、リツキシマブである。
【0040】
本発明は、二重特異性抗体にも関し、上記二重特異性抗体がCD16および腫瘍抗原、たとえば、CD20抗原を特異的に結合することを特徴とする。本発明は、このような二重特異性抗体および薬学的に許容し得る賦形剤またはアジュバントを含む医薬組成物も包含する。
【0041】
本発明のさらなる態様および利点は、本願を説明するものとみなすべきであり、本願をの範囲を限定するものとみなしてはならない、以下の実施例で開示する。
【実施例】
【0042】
材料および方法
患者および処置
臨床治験デザイン、適格基準およびエンドポイント査定は、既報の通りである5。簡単に記載すると、REAL分類26による、以前に処置を受けていない濾胞性CD20陽性NHLを有していた場合、患者は、本試験に含めるのに適格であった。患者は、Ann−Arbor分類による、ステージII〜IVの疾患および少なくとも1つの測定可能な疾患部位を呈することが必要であった。全ての患者が、GELF基準27による低い腫瘍負担を有することが必要であった。合計4回の、用量375mg/m2のリツキシマブ(フランスのヌイイにあるロシュ(Roche,Neuilly,France))を静脈内注入で投与した(1、8、15、22日)。注入および有害事象の管理は、既報の通りである5。試験プロトコールは倫理委員会に承認され、全ての患者がインフォームドコンセントを与えた。
【0043】
モニタリングおよびエンドポイント
ベースライン評価は、臨床検査、胸部X線、胸部、腹部および骨盤のコンピューター断層撮影(CT)、および片側の骨髄生検を含んでいた。含まれた患者の全CTスキャンを再吟味した、独立した放射線医師団が、応答を査定した。一次効力エンドポイントは、客観的応答率、すなわち、国際専門委員会が最近提唱した基準による、完全寛解(CR)、未確認のCR(CRu)または部分的応答(PR)のいずれかを達成している患者の比率であった28。臨床応答は、50日および78日に評価した。最大の応答のみを考慮に入れ、その査定時点をM2と名づけた。1年(M12)における進行について、全患者を評価した。M2に骨髄浸潤が消失し、かつM12に、骨髄にリンパ腫細胞が再発したCRまたはCRuの患者を、「進行性」と考え;M2に骨髄生検陰性であり、かつM12に生検陽性であったPRの患者を、PR状態であると考えた。診断時に得たリンパ節、および診断時、M2およびM12の、末梢血および骨髄の両者に対して、BCL2−JH遺伝子再構成の分子分析を、前述5の通りに、PCRにより実施した。
【0044】
FCGR3A−158V/F遺伝子型特定
臨床治験に含まれた患者50例のうち1例を、組織学的再吟味後に除外し、他の2例について、DNAを入手できなかった。したがって、患者47例を、FCGR3A遺伝子型分析に使用できた。全サンプルを同一試験室で分析し、交差汚染を回避するための予防措置を含む標準手順を使用して、DNAを抽出した。DNAを、末梢血(n=43)、骨髄(n=3)またはリンパ節(n=1)から単離した。Koeneら22による記載通りに、ネステッドPCRに続いて対立遺伝子特異的制限酵素消化を用いて、FCGR3A−158V/F多型の遺伝子型特定を実施した。簡単に記載すると、2種のFCGR3A特異的プライマー(5′−ATATTTACAGAATGGCACAGG−3′、配列番号1;5′−GACTTGGTACCCAGGTTGAA−3′、配列番号2)(フランスのLesUlisにあるユーロバイオ(Eurobio, Les Ulis, France))を使用して、多型部位を含む1.2kbの断片を増幅した。製造会社の推奨通り、ゲノムDNA 1.25μg、各プライマー200ng、200μmol/Lの各dNTP(リトアニアのビリニュスにあるMBI・ファーメンタス(MBI Fermentas, Vilnius,Lithuania))および1UのTaq DNAポリメラーゼ(フランスのシャルボニエールにあるプロメガ(Promega,Charbonniere,France))を用いて、PCRアッセイを実施した。この第1のPCRは、95℃にて10分、次いで35サイクル(それぞれ、95℃ 1分間、57℃ 1.5分間、72℃ 1.5分間の3工程からなる)および完全な伸張を達成するための72℃にて8分で構成されていた。第2のPCRは、94bpの断片を増幅し、FCGR3A−158V対立遺伝子のみにNlaIII制限部位を作るプライマー(5′−ATCAGATTCGATCCTACTTCTGCAGGGGGCAT−3′、配列番号3;5′ACGTGCTGAGCTTGAGTGATGGTGATGTTCAC−3′、配列番号4)(ユーロバイオ(Eurobio))を使用した。このネステッドPCRは、増幅されたDNA 1μl、各プライマー150ng、200mol/Lの各dNTPおよび1UのTaq DNAポリメラーゼで実施した。第1のサイクルは、95℃にて5分、次いで35サイクル(それぞれ、95℃ 1分間、64℃ 1分間、72℃ 1分間の3工程からなる)および完全な伸張を達成するための72℃にて9.5分で構成されていた。次いで、増幅されたDNA(10μl)を、10UのNlaIII(イギリスのヒッチンにあるニュー・イングランド・バイオラブズ(New England Biolabs,Hitchin,England))で、37℃にて12時間消化し、8%ポリアクリルアミドゲルによる電気泳動で分離した。臭化エチジウムで染色した後、DNAバンドをUV光で可視化した。ホモ接合型FCGR3A−158F患者の場合、唯一の未消化バンド(94bp)が見られた。ヘテロ接合型患者では3つのバンド(94bp、61bpおよび33bp)が見られたが、ホモ接合型FCGR3A−158V患者では、2つの消化されたバンド(61bpおよび33bp)が得られただけであった。
【0045】
FCGR2A−131H/R遺伝子型特定
Liangら28に従って、PCRに続く対立遺伝子特異的制限酵素消化により、FCGR2A−131H/Rの遺伝子型特定を実施した。R対立遺伝子の場合には、BstUI制限部位を作るために、センスプライマー(5′−GGAAAATCCCAGAAATTCTCGC−3′、配列番号5)(ユーロバイオ(Eurobio))を修飾しておき、内部コントロールの役目をする第2のBstUI制限部位を担持するために、アンチセンスプライマー(5′−CAACAGCCTGACTACCTATTACGCGGG−3′、配列ID番号6)(ユーロバイオ(Eurobio))を修飾しておいた。PCR増幅は、ゲノムDNA 1.25μg、各プライマー170ng、200μmol/Lの各dNTP、0.5UのTaq DNAポリメラーゼ、および製造会社の緩衝液を用いて、50μl反応で実施した。第1のサイクルは、94℃にて3分に続いて35サイクル(それぞれ、94℃にて15秒間、55℃30秒間、72℃ 40秒間の3工程からなる)および伸張を完成するための72℃にて7分で構成されていた。次いで、増幅されたDNA(7μl)を、20UのBstUI(ニュー・イングランド・バイオラブズ(MewEnglandBiolabs))で、60℃にて12時間消化した。FCGR3A遺伝子型特定に関する記載の通りに、さらなる分析を実施した。FCGR2A−131Hおよび−131R対立遺伝子は、それぞれ337bpおよび316bpのDNA断片として、可視化された。
【0046】
統計解析
適切な場合、χ二乗検定またはフィッシャーの正確確率検定(Fisher's exact test)を使用して、異なる遺伝子型群の患者の、臨床上の特徴および生物学的特徴ならびに臨床応答および分子応答を比較した。診断時の性別、年齢、(>または≦60才)、冒された節外部位数(2または<2)、骨髄関与、BCL2−JH構成状態およびFCGR3A遺伝子型を含むロジスティック回帰分析を使用して、臨床応答および分子応答に影響する予後の独立変数を同定した。カプラン及びマイヤー(Kaplan and Meier)29の方法に従って無進行性生存率を算出し、処置開始から進行/再発または死亡までを測定した。ログランク(log-rank)検定を使用して、FCGR3A遺伝子型による無進行性生存率の比較を実施した。P<0.05を、統計学的に有意であると考えた。
【0047】
結果
臨床応答
FCGR3A−158V/F多型について試験した患者49例のうち10例(20%)および17例(35%)が、それぞれ、ホモ接合型FCGR3A−158Vおよびホモ接合型FCGR3A−158Fであり、22例(45%)がヘテロ接合型であった。診断時の、性別、病期、骨髄関与、冒された節外部位数または末梢血および骨髄におけるBCL2−JH再構成の存在に関して、3つのグループに差はなかった(表1)。ホモ接合型FCGR3A−158V患者を、FCGR3A−158Fキャリヤー(FCGR3A−158Fホモ接合型およびヘテロ接合型患者)と比較したとき、またはホモ接合型FCGR3A−158F患者を、FCGR3A−158Vキャリヤー(FCGR3A−158Vホモ接合型およびヘテロ接合型患者)と比較したとき、差は認められなかった。FCGR3A−158Vホモ接合型、FCGR3A−158Fホモ接合型およびヘテロ接合型患者の、M2における客観的応答率は、それぞれ100%(CR+CRu=40%)、70%(CR+CRu=29%)および64%(CR+CRu=18%)であった(P=0.09)。FCGR3A−158Vホモ接合型患者とFCGR3A−158Fキャリヤーとの間で、客観的応答率に有意差が認められ、この後者のグループの客観的応答率は67%(CR+CRu=23%)であった(相対危険度=1.5;95%CI、1.2〜1.9;P=0.03)(表2)。FCGR3A−158Fホモ接合型患者とFCGR3A−158Vキャリヤーとの間に、差は認められなかった。M12における、FCGR3A−158Vホモ接合型、FCGR3A−158Fホモ接合型およびヘテロ接合型患者の客観的応答率は、それぞれ、90%(CR+CRu=70%)、59%(CR+CRu=35%)および45%(CR+CRu=32%)であった(P=0.06)。処置後1年に、FCGR3A−158Vホモ接合型群とFCGR3A−158Fキャリヤーとの間で、客観的応答率に依然として差が存在し、この後者のグループでは、客観的応答率は51%(CR+CRu=33%)であった(相対危険度=1.7;95%CI、1.2〜2.5;P=0.03)。ロジスティック回帰分析から、ホモ接合型FCGR3A−158V遺伝子型は、M2(P=0.02)でもM12(P=0.01)でも、臨床応答に関する唯一の予測因子であることが分かった。3年における無進行性生存率(平均フォローアップ:35ヵ月;31−41)(図1)は、FCGR3A−158Vホモ接合型患者で56%であり、FCGR3A−158Fキャリヤー(ns)では35%であった。FCGR2A−131H/R多型に関して分析した患者45例のうち、9例(20%)および13例(29%)が、それぞれFCGR2A−131RおよびFCGR2A−131Hに関してホモ接合型であり、23(51%)例がヘテロ接合型であった。これらの3グループで、またはホモ接合型FCGR2A−131H患者とFCGR2A−131Rキャリヤーで、またはホモ接合型FCGR2A−131R患者とFCGR2A−131Hキャリヤーで、包含時の特徴またはリツキシマブ処置に対する臨床応答に、差はなかった(データ示さず)。
【0048】
分子応答
診断時に、患者30例(64%)で、BCL2−JH再構成が末梢血および骨髄の両者で検出されたため、さらなるフォローアップが可能になった。M2およびM12において、患者25例(FCGR3A−158Vホモ接合型患者6例およびFCGR3A−158Fキャリヤー19例)および患者23例(FCGR3A−158Vホモ接合型患者6例およびFCGR3A−158Fキャリヤー17例)を、末梢血および骨髄の両者におけるBCL2−JH再構成について分析した(表3)。M2において、FCGR3A−158Vホモ接合型患者の3/6、およびFCGR3A−158Fキャリヤー(ns)の5/19で、BCL2−JH再構成の浄化が確認された。対照的に、M12におけるBCL2−JH再構成浄化率は、FCGR3A−158Fキャリヤー(5/17)よりFCGR3A−158Vホモ接合型患者(5/6)で高かった(相対危険度=2.8;95%CI、1.2〜6.4;P=0.03)。FCGR3A−158Vホモ接合型遺伝子型は、M12における、BCL2−JH再構成浄化を示すより大きい確率と関連した唯一の因子である(P=0.04)ことが、ロジスティック回帰分析から分かった。M12において、末梢血および骨髄で、依然としてBCL2−JH再構成を呈していたこのホモ接合型FCGR3A−158V患者1例は、リツキシマブ処置の23ヵ月後にCRであった。対照的に、M2およびM12における分子応答は、FCGR2A−131H/R多型による影響を受けなかった(データ示さず)。
【0049】
考察
B細胞リンパ増殖性悪性腫瘍でリツキシマブの使用が増加しているため、処置不成功およびリツキシマブの作用様式について理解を深めることが必要である。この点に関して、我々は、明確な臨床上のおよび検査室的特徴を有する濾胞性NHL患者でFCGR3Aを遺伝子型特定し、リツキシマブのみを投与した5。特に、診断時およびフォローアップの間に、この試験に含まれた全ての患者が、低い腫瘍負担NHLおよびBCL2−JHatの分子分析を示した。この集団におけるFCGR3A対立遺伝子頻度は、一般的な白人集団のものに似ていた23,24。我々の結果から、FCGR3A遺伝子型と、リツキシマブに対する応答との間の関連が分かる。事実、集団の5分の1を占めるホモ接合型FCGR3A−158V患者は臨床応答を経験する確率が大きく、M2およびM12に、それぞれ、100%および90%の客観的応答率を示した。さらに、BCL2−JH再構成について分析を実施したFCGR3A−158Vホモ接合型患者6例中5例が、M12に分子応答を示したのに対して、FCGR3A−158Fキャリヤーでは17例中5例であった。FCGR3A−158Vホモ接合性は、臨床応答および分子応答と関連した唯一の因子であった。しかし、これらのより高い臨床応答および分子応答は、ホモ接合型FCGR3A−158V患者の無進行性生存率を有意に改善するためには、未だ不十分であった。
【0050】
これは、リツキシマブに対する臨床応答および分子応答の両者に関する、容易に査定できる遺伝学的予測因子の第1報である。しかし、遺伝学的関連では、FcγRIIIaを含むリツキシマブの作用様式が証明されてない。FCGR3A遺伝子型と、リツキシマブに対する応答との間で認められた関連は、連鎖不平衡にある別の遺伝子多型に起因するのかもしれない。FCGR3Aは、3つのFCGR2遺伝子およびFCGR3Bを含む染色体1の長腕上に位置する32ため、これらの多型は、3対立遺伝子FCGR3A−48L/H/R多型31のようにFCGR3Aそれ自体に位置することも、他のFcγR−コード化遺伝子に位置することもあり得る。FCGR2AとFCGR3Bとの間で連鎖不平衡が報告されている33。しかし、FCGR2A−131H/R多型はリツキシマブに対するより良好な応答と関連していなかったことにより、FCGR3Aに非常に近い遺伝子またはFCGR3Aそれ自体が、直接関与することが強く裏付けられる。
【0051】
幾つかのin vitro試験は、FCGR3A−158V/F多型の直接関与を支持して論じている。第1に、Koeneら23は、先に報告した、3つのFcγRIIIa−48L/H/Rアイソフォーム31間のIgG結合の差は、連結したFcγRIIIa−158V/F多型の結果であることを示し、幾つかのチームは、FCGR3A−158Vアロタイプに関して個々のホモ接合型に由来するNK細胞は、ヒト複合IgG1に対してより高いアフィニティを有し、IgG1感作標的に対して、より細胞障害性であることを証明した23,24,34。我々の今回の結果は、FCGR3A−158Vホモ接合型患者は、たぶん、そのキメラ・ヒトIgG1がFcγRIIIaにより良くインビボ結合するため、リツキシマブに対して、より良好な応答を示すことを実証するものである。第2に、NK細胞−およびマクロファージ介在ADCCは、インビトロ8,11,12ならびにネズミ・モデルのインビボにおいて17 〜 19抗CD20抗体により誘発される機構の1つであり、リツキシマブ介在アポトーシスは、FcγR発現細胞により増幅される15, l 6。全てのFcγRの中で、FcγRIIIaはNK細胞およびマクロファージに共有される唯一の受容体である。そこで我々は、FCGR3A−158V患者は、リンパ腫細胞に対してより良好なADCC活性を有するため、リツキシマブに対してより良好な応答を示すという仮説を立てた。FCGR3A−158Fキャリヤーの50%より多くが、それでもなおリツキシマブに対して臨床応答を示すという事実は、低いものの、それでも十分なADCC活性によって、または、より公算が高い、in vivoで機能する他の機構、たとえば、補体依存性細胞傷害、補体依存性細胞介在性細胞傷害1 l , l 3, l 4および/またはアポトーシス15, l 6によって、説明されるであろう。ADCCは、FCGR3A−158Vホモ接合型患者で特に有効なリツキシマブに対する応答における、補足的な機構と考えられる。
【0052】
FCGR3Aヘテロ接合型ドナー由来のNK細胞へのIgG1結合レベルを有する「遺伝子用量」効果は、FCGR3A−158VおよびFCGR3A−158Fホモ接合体23からのNK細胞で見られたものの中間にあることがインビトロ試験から示唆される。しかし、ヘテロ接合型患者の臨床応答は、FCGR3A−158Fホモ接合型患者のものに似ているようである。より大きい患者群で実施されるさらなる試験は、インビボ「遺伝子用量」効果に不利な結論を下さなければならないであろう。
【0053】
FcγRIIIaは、リツキシマブに対するより良好な応答と強く関連しているため、CD20抗原を標的とする新薬を開発する際に、考慮に入れる必要がある。たとえば、B細胞リンパ腫に罹ったFCGR3A−158F−キャリヤー患者を処置するために、遺伝子操作されたリツキシマブを使用できる可能性がある。事実、IgG1の下側のヒンジ領域の様々な残基を修飾することによって、Shieldsらは、最近、天然のIgG1より強力にFcγRIIIa−158Fに結合するIgG1突然変異体を得た34。
【0054】
総合すると、これらの結果から、患者FCGR3A遺伝子型の事前決定に基づいて、Bリンパ増殖性疾患に対する新たな治療方針を設定することが可能になる。この多型は、黒人および日本人を含む様々な民族集団で同一分布を有するため、このような方針は、世界的に応用することが可能である23,35,36。さらに、このような薬理遺伝学的方法は、B細胞悪性腫瘍の処置に使用される他の原型を保ったヒト化IgG1抗体、たとえば、キャンパス1H(Campath-lH)、または他の悪性腫瘍の処置に使用されるもの、たとえば、トラスツズマブ(trastuzumab)(ハーセプチン(Herceptin)(登録商標))にも応用することができる。さらに一般的には、この方法は、標的細胞を激減させるために開発された、他の原型を保った(ヒト化)治療用(lgG1)抗体に応用することが可能である。
【0055】
【表3】
【0056】
【表4】
【0057】
【表5】
【0058】
【表6】
【図面の簡単な説明】
【0059】
【図1】FcγR3a−158V/F遺伝子型による、リツキシマブ処置後の無進行性生存率の調整済カプラン−マイヤー推定量(p=0.05)を示す図である。
【図2】ヒトFCGR3A遺伝子の遺伝子編成を示す図である。
【図3】ヒトFcγRIIIa158F(配列番号7)のアミノ酸配列を示す図である。
【図4】ヒトFCGR3A158F(配列番号8)の核酸配列を示す図である。
Claims (19)
- 被験者のFCGR3A158遺伝子型をインビトロで決定することを含む治療用抗体処置に対する被験者の応答を査定する方法。
- 被験者のFCGR3A158遺伝子型をインビトロで決定することを含む治療用抗体処置に対する患者を選択する方法。
- 被験者のFCGR3A158遺伝子型をインビトロで決定することを含む被験者における治療用抗体処置の効力または処置条件もしくはプロトコールを改良する方法。
- FcγRIIIa受容体の158位のアミノ酸残基を決定することを含み、158位のバリンが、処置に対するより良好な応答を示し、158位のフェニルアラニンが、処置に対するより低い応答を示す、請求項1〜3のいずれか1項に記載の方法。
- FcγRIIIa受容体の158位のアミノ酸残基の決定が、FcγRIIIa受容体遺伝子もしくはRNAまたはアミノ酸残基158をコード化するヌクレオチドを含むそれらの一部を配列決定する工程を含む、請求項1〜4のいずれか1項に記載の方法。
- FcγRIIIa受容体の158位のアミノ酸残基の決定が、FcγRIIIa受容体遺伝子もしくはRNAまたはアミノ酸残基158をコード化するヌクレオチドを含むそれらの一部を増幅する工程を含む、請求項1〜5のいずれか1項に記載の方法。
- 増幅を、PCR、RT−PCRおよびネステッドPCRのようなポリメラーゼ連鎖反応(PCR)で実施する、請求項6に記載の方法。
- FcγRIIIa受容体の158位のアミノ酸残基の決定が、対立遺伝子特異的制限酵素消化の工程を含む、請求項1〜7のいずれか1項に記載の方法。
- FcγRIIIa受容体の158位のアミノ酸残基の決定が、FcγRIIIa受容体遺伝子もしくはRNAまたはアミノ酸残基158をコード化するヌクレオチドを含むそれらの一部と、遺伝子型バリンまたはフェニルアラニンに特異的な核酸プローブとのハイブリダイゼーション工程を含む、請求項1〜8のいずれか1項に記載の方法。
- FcγRIIIa受容体の158位のアミノ酸残基の決定が、
−生物学的サンプルからゲノムDNAを得ること、
−FcγRIIIa受容体遺伝子、またはアミノ酸残基158をコード化するヌクレオチドを含むその一部を増幅すること、及び
−前記FcγRIIIa受容体遺伝子の158位のアミノ酸残基を決定すること、
を含む、請求項1〜9のいずれか1項に記載の方法。 - FcγRIIIa受容体の158位のアミノ酸残基の決定が、
−生物学的サンプルからゲノムDNAを得ること、
−FcγRIIIa受容体遺伝子、またはアミノ酸残基158をコード化するヌクレオチドを含むその一部を増幅すること、
−対立遺伝子特異的制限部位を導入すること、
−前記制限部位に特異的な酵素で核酸を消化すること、及び
−消化産物を分析すること、すなわち、電気泳動で、消化産物の存在が対立遺伝子の存在を示すこと、
を含む、請求項1〜9のいずれか1項に記載の方法。 - FcγRIIIa受容体の158位のアミノ酸残基の決定が、インビトロまたはエキソビボでの、細胞または生物学的サンプルもしくは流体からの総(またはメッセンジャー)RNA抽出、場合によりcDNA合成、特異的FCGRIIIaオリゴヌクレオチドプライマーによる(PCR)増幅、およびPCR産物の分析を含む、請求項1〜9のいずれか1項に記載の方法。
- FcγRIIIa受容体の158位のアミノ酸残基の決定が、FcγRIIIa受容体ポリペプチドまたはアミノ酸残基158を含むその一部を配列決定する工程を含む、請求項1〜4のいずれか1項に記載の方法。
- 被験者がヒト被験者である、請求項1〜13のいずれか1項に記載の方法。
- 被験者が、腫瘍、ウイルス感染症、または同種もしくは病理学的免疫担当細胞と関連した疾患状態を有する、請求項14に記載の方法。
- 被験者が腫瘍を有し、治療用抗体処置が腫瘍負担の減少を目標とする、請求項15に記載の方法。
- 腫瘍がリンパ腫、特にNHLである、請求項16に記載の方法。
- 抗体がIgG1またはIgG3である、請求項1〜17のいずれか1項に記載の方法。
- 抗体が抗CD20抗体、特にリツキシマブである、請求項18に記載の方法。
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Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2009517339A (ja) * | 2005-11-01 | 2009-04-30 | ノバルティス アーゲー | 抗cd40抗体の使用 |
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---|---|---|---|---|
DE02782887T1 (de) * | 2001-10-19 | 2005-01-13 | Centre Hospitalier Regional et Universitair de Tours | Methoden und kompositionen, antikörper behandlung zu bewerten |
CA2494262A1 (en) * | 2002-07-31 | 2004-02-05 | University Of Southern California | Polymorphisms for predicting disease and treatment outcome |
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MY162179A (en) * | 2004-04-01 | 2017-05-31 | Elan Pharm Inc | Steroid sparing agents and methods of using same |
EP1732939A4 (en) * | 2004-04-07 | 2008-09-17 | Novartis Vaccines & Diagnostic | NUCLEIC ACID BIOLOGICAL TESTS FOR IDENTIFYING FC RECEPTOR POLYMORPHISMS |
WO2005118854A1 (en) * | 2004-06-01 | 2005-12-15 | Centre Hospitalier Regional Et Universitaire De Tours | Fcgr3a gebotype and methods for evaluating treatment response to non-depleting antibodies |
US20070190657A1 (en) * | 2004-06-15 | 2007-08-16 | Universite Francois Rabelais | Methods of assessing susceptibility to drug-induced thrombocytopenia |
US9109255B2 (en) * | 2004-06-18 | 2015-08-18 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Methods and compositions for determining responsiveness to antibody therapy |
AU2005267148A1 (en) * | 2004-07-01 | 2006-02-02 | University Of Southern California | Genetic markers for predicting disease and treatment outcome |
GB0510790D0 (en) * | 2005-05-26 | 2005-06-29 | Syngenta Crop Protection Ag | Anti-CD16 binding molecules |
CA2627891A1 (en) * | 2005-11-01 | 2007-05-10 | Novartis Ag | Uses of anti-cd40 antibodies |
EP1960549A4 (en) * | 2005-11-30 | 2010-01-13 | Univ Southern California | Fc-GAMMA POLYMORPHISMS FOR PREDICTING A DISEASE AND THE RESULTS OF TREATMENT |
US8592149B2 (en) * | 2006-04-27 | 2013-11-26 | Pikamab, Inc. | Methods and compositions for antibody therapy |
US20100092485A1 (en) | 2007-01-18 | 2010-04-15 | University Of Southern California | Genetic Markers for Predicting Responsiveness to Combination Therapy |
US20090142763A1 (en) * | 2007-08-22 | 2009-06-04 | Wyeth | Nested pcr-based method for specific genotyping of the fc gamma receptor iiia gene |
WO2010138725A1 (en) * | 2009-05-28 | 2010-12-02 | Amgen Inc. | Treatment of pancreatic cancer using a dr5 agonist in combination with gemcitabine |
EP2383572A1 (en) * | 2010-04-28 | 2011-11-02 | Assistance Publique Hôpitaux de Marseille | Cellular humoral activation test (CHAT) |
KR101938698B1 (ko) | 2012-07-23 | 2019-01-16 | 삼성전자주식회사 | Cbl의 항 c-met 항체 적용 대상 환자 선별을 위한 바이오마커로서의 용도 |
KR101938699B1 (ko) | 2012-07-23 | 2019-01-16 | 삼성전자주식회사 | Lrig1의 항 c―met 항체 적용 대상 환자 선별을 위한 용도 |
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US10226088B1 (en) * | 2017-03-30 | 2019-03-12 | Robert Russell | Pet waste disposable glove |
CN108330180A (zh) * | 2017-10-25 | 2018-07-27 | 广州和康医疗技术有限公司 | 一种对fcgr3a位点进行基因型检测的方法及试剂盒 |
CN108676875B (zh) * | 2018-04-10 | 2022-01-18 | 哈尔滨医科大学 | Cd20、fcgriia及fcgriiia基因在弥漫大b细胞淋巴瘤预后中的用途 |
US20220073878A1 (en) * | 2019-01-18 | 2022-03-10 | Acepodia Biotechnologies Ltd. | A novel cd16+ natural killer cell and a method of culturing cd16+ natural killer cell |
TW202146644A (zh) * | 2020-01-16 | 2021-12-16 | 育世博生物科技股份有限公司 | 一種新穎的cd16陽性自然殺手細胞及一種培養cd16陽性自然殺手細胞的方法 |
CN114277149B (zh) * | 2021-12-30 | 2023-09-22 | 苏州方科生物科技有限公司 | 一种检测cd16a基因多态性的试剂盒及其应用和使用方法 |
Family Cites Families (15)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4446314A (en) * | 1980-09-30 | 1984-05-01 | Cutter Laboratories, Inc. | Fractionation of heparin |
ES2262163T3 (es) | 1988-05-27 | 2006-11-16 | Applied Research Systems Ars Holding N.V. | Receptor iii de fc gamma humano. |
US5736137A (en) * | 1992-11-13 | 1998-04-07 | Idec Pharmaceuticals Corporation | Therapeutic application of chimeric and radiolabeled antibodies to human B lymphocyte restricted differentiation antigen for treatment of B cell lymphoma |
DE69433915T2 (de) * | 1993-05-14 | 2005-07-21 | Cancer Institute | MDC-Proteine und dafür kodierende DNS |
US5830652A (en) | 1994-08-30 | 1998-11-03 | New York Society For The Ruptured And Crippled Maintaining The Hospital For Special Surgery | Method for determining predisposition to severe forms of autoimmune disease by determining Fcy receptor allelic patterns |
US5866337A (en) * | 1995-03-24 | 1999-02-02 | The Trustees Of Columbia University In The City Of New York | Method to detect mutations in a nucleic acid using a hybridization-ligation procedure |
US6444789B1 (en) | 1995-05-03 | 2002-09-03 | Applied Research Systems Ars Holding N.V. | CD16-II variants |
WO1997046715A1 (en) | 1996-06-03 | 1997-12-11 | New York Society For The Ruptured And Crippled Maintaining The Hospital For Special Surgery | Fc receptor polymorphism |
ATE211740T1 (de) * | 1996-06-27 | 2002-01-15 | Pfizer | Substituierte indazolderivate |
US6676927B1 (en) | 1999-01-20 | 2004-01-13 | The Rockefeller University | Animal model and methods for its use in the selection of cytotoxic antibodies |
GB9919194D0 (en) * | 1999-08-14 | 1999-10-20 | Univ Leeds | Genetic marker for rheumatoid arthritis |
EP1130122A3 (en) * | 2000-02-17 | 2001-10-17 | AstraZeneca AB | Methods for the diagnosis of polymorphisms in the human EP1-R gene |
DE02782887T1 (de) | 2001-10-19 | 2005-01-13 | Centre Hospitalier Regional et Universitair de Tours | Methoden und kompositionen, antikörper behandlung zu bewerten |
US20070231813A1 (en) * | 2004-06-01 | 2007-10-04 | Centre Hospitalier Regional Et Universitaire De Tours | Fcgr3a Gebotype and Methods for Evaluating Treatment Response to Non-Depleting Antibodies |
US20070190657A1 (en) * | 2004-06-15 | 2007-08-16 | Universite Francois Rabelais | Methods of assessing susceptibility to drug-induced thrombocytopenia |
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Cited By (1)
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