JP2005298505A

JP2005298505A - 高圧乳化技術を用いたダイオウ抽出物の経皮吸収促進方法及びこれを応用した美白用皮膚外用剤組成物

Info

Publication number: JP2005298505A
Application number: JP2005109541A
Authority: JP
Inventors: Ji Eun Park; ジウンパク; Byung-Young Kang; ビュンヨウンカン; Youn Juun Kim; ヨウンジューンキム; Han Kon Kim; ハンコンキム
Original assignee: Amorepacific Corp
Current assignee: Amorepacific Corp
Priority date: 2004-04-09
Filing date: 2005-04-06
Publication date: 2005-10-27
Also published as: KR20050099213A; KR100896697B1

Abstract

【課題】ダイオウ抽出物を高圧乳化技術を用いて微細な乳化粒子又はリポソーム内に含有させることによって経皮吸収を極大化した皮膚外用剤組成物を提供すること。
【解決手段】ダイオウ抽出物を含有する微細な乳化粒子又はリポソームを含有する皮膚美白用外用剤組成物

Description

本発明は、ダイオウ抽出物を高圧乳化技術を用いて微細な乳化粒子又はリポソーム内に含有させることによって経皮吸収を極大化した皮膚外用剤組成物に関する。さらに詳細には、レシチン等の皮膚親和性に優れた乳化剤と一緒に高圧乳化技術を用いて微細な乳化粒子又はリポソーム内に主要有効成分であるダイオウ抽出物を含有させる方法及びこれを製剤化することで経皮吸収率を著しく向上させるともにメラニン生合成抑制効果に優れた美白用皮膚外用剤組成物に関するものである。

人の皮膚色を決定する要因としては様々なものが考えられるが、例えば、メラニン色素を作るメラノサイト（melanocyte）の活動性、血管の分布、皮膚の厚さ及びカロチノイド（carotenoid）、ビリルビン（bilirubin）等の体内色素の有無などの要因が主に関与している。このうち、特に重要な要因として、人体内のメラノサイトでチロシナーゼ等の様々な酵素が作用して生成するメラニンという黒色色素が挙げられる。当該メラニン色素の形成には、遺伝的要因、ホルモン分泌、ストレス等の生理的要因及び紫外線照射等の環境的要因が考えられる。

上述した要因によるそばかすや色素沈着等のような皮膚色素沈着異常症状又は紫外線露出等によって発生する過度なメラニン色素沈着等を治療又は軽減するために、従来よりアスコルビン酸、コウジ酸、アルブチン、ハイドロキノン、グルタチオンもしくはこれらの誘導体、又はチロシナーゼ阻害活性を有する物質を化粧料や医薬品に配合して使用してきた。しかし、これらは、美白効果が十分に期待できないばかりか、化粧料に配合する際の剤型選択及び安全性の問題等によってその使用が制限されている。

そこで、皮膚の副作用を誘発せず皮膚美白効果を有する天産物原料についての研究が活発になされてきた。例えば、ダイオウ乾燥物からラポンチシンを抽出して美白効果を高めた組成物に関する発明（韓国特許出願第１０−２００２−８８０２５号）が開示されている。上記発明によれば、ダイオウ（大黄）抽出物中のラポンチシン（rhaponticin）という成分に、メラニン生合成抑制効果があるとされている。しかしながら、ラポンチシンは、経皮吸収率が低いため、皮膚外用剤組成物に配合しても顕著な効果が期待し難いという問題がある。

本発明者は、上述した問題点を解決するために、ダイオウ抽出物に期待される美白効能効果を発揮させ経皮吸収を促進させるための方法を鋭意研究した結果、ダイオウ抽出物を皮膚親和性乳化剤及び高圧乳化技術を用いて微細な乳化粒子又はリポソーム内に含有させることによって溶解度及び経皮吸収率が高められることを見出し、本発明を完成した。

すなわち、本発明の目的は、ダイオウ抽出物を高圧乳化技術を用いて微細な乳化粒子又はリポソーム内に含有させることによって経皮吸収を極大化した皮膚外用剤組成物を提供することにある。

上記目的を達成するために、本発明の皮膚美白用皮膚外用剤組成物は、有効性分としてダイオウ抽出物を高圧乳化技術を用いて含有させた微細な乳化粒子又はリポソームを含有することを特徴とする。

本発明の皮膚美白用皮膚外用剤組成物は、ダイオウ抽出物を、皮膚親和性乳化剤及び高圧乳化技術を用いて微細な乳化粒子又はリポソーム内に含有させることによって経皮吸収率を極大化した、皮膚美白効果に優れた皮膚美白用外用剤組成物を提供する。

以下、実施例及び試験例を参照しながら本発明をさらに詳細に説明する。
ダイオウ（大黄；Rheum undulatum LINNE）は、その根茎が使われる。この他にも錦紋ダイオウ（Rheum palmatum Linne）、鷄爪大黄（Rheum tanguticum Maximowicz）、国産ダイオウ（Rheum coreanum Nakai）、掌葉大黄（Rheum palmarum LINNE var. palmatum）又はそれらの種間雑種（Polygonaceae）等の根茎が使われる。

ダイオウの主要成分としては、エモジン（Emodin）、クリソパモル（Chrysophamol）、レーン（Rhein）、アロエエモジン（Aloe-emodin）、グルコガリン（Glucogallin）、ラポンチシン（Rhaponticin）等が挙げられる。特に、これらの成分は、坑菌作用、抗ウイルス作用、免疫複合体浄化促進作用、肝細胞障害抑制作用、ウサギ血清コレステロール正常化作用、利尿作用、細菌性コラーゲン分解酵素阻害作用、アンジオテンシン（angiotensin）変換酵素阻害作用等の薬理作用をすることが知られている。

本発明に使われるダイオウ抽出物は、乾燥ダイオウに水、水を含むエタノール、メタノール、ブタノール、エーテル、エチルアセテート、クロロホルム等の有機溶媒又は有機溶媒を加えて常温で一日間放置した後抽出する。

上記工程を２回繰り返して抽出液を得る。抽出液を濾過した後その濾過液を真空濃縮機で濃縮して１次乾燥物を得る。次に、上記乾燥物に水とエチルアセテートを加えて常温で２時間攪拌した後静置して層分離を行なう。層分離された後水層を除去し、エチルアセテートをさらに加える。上記工程を２回繰り返し、十分に洗浄して濾過した後、濾過物を真空オーブンで乾燥することにより、ラポンチシンを５０％以上含有するダイオウ抽出物が得られる。

本発明では、高圧乳化技術を適用して微細な乳化粒子又はリポソームを製造する際、その内部にダイオウ抽出物を微細な乳化粒子又はリポソーム総重量に対して０．０１〜１０重量％含有させる。ダイオウ抽出物を含有する微細な乳化粒子又はリポソームは、製法によっても異なるが、化粧料及び医薬組成物の総重量に対して０．０１〜２０重量％含有することが好ましい。

本発明の微細な乳化粒子は、その粒径が３０ｎｍ乃至１０００ｎｍ程度、好ましくは５０ｎｍ乃至３００ｎｍである。皮膚角質層の細胞間脂質の隙間は約５０ｎｍ内外であり、かつ、乳化粒子の乳化膜は柔軟性を有するため、本発明の乳化粒子は細胞間脂質への吸収、拡散が容易である。

また、本発明のリポソームは、その粒径が１０００ｎｍ以上で、一個又は多数個の脂質二重層膜から出来た小胞（vesicle）状となっており、脂質層は、皮膚膜と似た形態である。

上記高圧乳化技術によって製造された平均粒径５０ｎｍ乃至３００ｎｍの微細な乳化粒子は、皮膚との接触面積が大きいため、細胞間脂質への浸透及び拡散という２種類の経路を経て粒子内部のダイオウ抽出物の経皮吸収率を高めることができる。また、リポソームは、皮膚膜に似た脂質層が高い生体親和性を有することから、粒子内部のダイオウ抽出物の経皮吸収率を高めることができる。

一方、本発明の微細な乳化粒子及びリポソームは、レシチン又はレシチン誘導体及び補助乳化剤を含有しており、オイル成分が含有されると微細な乳化粒子が形成される。

本発明において用いられる乳化剤のレシチンは、乳化粒子総重量の０．５〜５重量％、好ましくは、２〜４重量％含有することが好ましい。レシチンの構成成分には、ホスファチジルコリン（phosphatidylcholine）、リゾホスファチジルコリン（lysophosphatidylcholine）、ホスファチジルエタノールアミン（phosphatidylethanolamine）等の不飽和コリン系、セリン系、エタノールアミン系化合物及びこれらの水素添加物形態が含まれる。

また、本発明において、レシチンとともに用いられる補助乳化剤としては、アニオン系、カチオン系、非イオン系又は陽性イオン系乳化剤が挙げられる。これらの乳化剤は、レシチンの含有量及び構成成分によって異なるが、レシチン含有量に対して０．１〜５倍、好ましくは、０．５〜２倍の比率である。

上記本発明の補助乳化剤は、具体的には、高級脂肪酸石鹸、アルキル硫酸エステル塩、ポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸塩、アルキルエーテル燐酸エステル塩、N-アシルアミノ酸塩等のアニオン系乳化剤、塩化アルキルトリメチルアンモニウム、塩化ジアルキルジメチルアンモニウム、塩化ベンザルコニウム等のカチオン系乳化剤、アルキルジメチルアミノ酢酸ベタイン、アルキルアミドジメチルアミノ酢酸ベタイン、２−アルキル−Ｎ−カルボキシ−Ｎ−ハイドロキシイミダゾリウムベタイン等の両性乳化剤、及びポリオキシエチレン型重合体、多価アルコールオキサイド／プロピレンオキサイドブロック共重合体等のアニオン系乳化剤等を含む。

本発明において、微細な乳化粒子形成のために用いられる油としては、ジメチコーン（Dimethicone）及びサイクルロメチコンのようなシリコン類、カプリル（Caprylic）／カプリトリグリセロイドのようなトリグリセロイド類、オクタン酸セチル（cetyl octanoate）のようなエステル類、水添化ポリデセンのような炭化水素類等がある。

また、本発明において用いられる高圧乳化技術は、高圧乳化機を用いてプレ乳化（pre-emulsion）液に６００〜１０００ｂａｒの圧力を加えてダイオウ抽出物を含有する微細な乳化粒子又はリポソームを製造する技術である。

本発明によるダイオウ抽出物を含む皮膚美白・皮膚外用剤組成物は、皮膚美白用化粧料又は医薬組成物で、その剤型は特に限定されない。例えば、柔軟化粧水、収斂化粧水、栄養化粧水、栄養クリーム、マッサージクリーム、エッセンス、アイクリーム、アイエッセンス、クレンジングクリーム、クレンジングフォーム、クレンジングウォーター、パック、パウダー、ボディーローション、ボディークリーム、ボディーオイル、ボディーエッセンス、メーキャップベース、ファンデーション、ボディー洗浄剤などの化粧料及びローション、軟膏、ゲル、クリーム、パッチ又は噴霧剤形態の医薬組成物として製剤化できる。

以下、実施例及び試験例を参照しながら本発明をさらに詳細に説明するが、本発明は、これらによって限定されるものではない。

＜製作例１＞
ダイオウ抽出物製作
乾燥ダイオウ１ｋｇに９５％以上メタノール４Ｌを加えて常温で一日間放置して抽出する。前記工程を２回繰り返して抽出液を得た。得られた抽出液を濾過した後、真空濃縮機で濃縮して乾燥物４００ｇを得た。

上記乾燥物４００ｇに水１Ｌとエチルアセテート２Ｌを加えて常温で２時間攪拌した後静置して層分離した。層分離の後、境界層又はエチルアセテート層に生成する結晶化物のみを得るために、水層を除去し、さらにエチルアセテートを２Ｌ加えた。上記工程を２回繰り返し、十分洗浄して濾過した後濾過物を真空オーブンで乾燥してラポンチシンが５０％以上含有されたダイオウ抽出物約３０ｇを得た。

＜実施例１＞
水添レシチン４ｇ、ＰＥＧ−５ナタネ（rapeseed）ステロール４ｇ、ポリエチルグリコール５ｇ、ポリエチレングリコール５ｇ及びペンチレングリコール５ｇと、エタノール１０ｇに溶解したダイオウ抽出物１ｇを７０〜７５℃まで加熱して完全に溶解した後、予め加熱して置いた水相部分（蒸溜水６０．９５ｇ、グリセリン５ｇ、ＥＤＴＡ０．０５ｇ）と混合して、汎用ホモミキサーで３分間、３．０００〜６、００００ｒｐｍでプレ乳化した後、高圧乳化機を用いて８００ｂａｒ／３ｃｙｃｌｅｓで乳化を行った。なお上記成分において、ＰＥＧ−５ナタネステロールは乳化安定度を高めるための補助乳化剤として加えた。

＜実施例２＞
レシチン４ｇ、水添レシチン４ｇ、ポリエチレングリコール５ｇ、ペンチレングリコール５ｇ及びアルコール１０ｇに溶解したダイオウ抽出物１ｇを７０〜７５℃まで加熱して完全に溶解した後、予め加熱して置いた水相部分（蒸溜水６５．９５ｇ、グリセリン５ｇ、ＥＤＴＡ０．０５ｇ）と混合して汎用ホモミキサーで３分間、３．０００〜６、００００ｒｐｍでプレ乳化した後、高圧乳化機を用いて８００ｂａｒ／３ｃｙｃｌｅｓで乳化を行った。上記成分において、水添レシチンはエマルジョンの安定度に優れるが経皮吸収の面で、不飽和レシチンに比べて皮膚親和度が低いため、２種類のレシチンを混合して用いた。

＜比較例１＞
水添レシチン４ｇ、ＰＥＧ−５ナタネステロール４ｇ、ジメチコーン５ｇ、ポリエチレングリコール５ｇ及びペンチレングリコール５ｇと、エタノール１０ｇを７０〜７５℃まで加熱して完全に溶解した後、予め加熱して置いた水相部分（蒸溜水６１．９５ｇ、グリセリン５、ＥＤＴＡ０．０５ｇ）と混合して汎用ホモミキサーで３分間かけて３．０００〜６、００００ｒｐｍでプレ乳化した後、高圧乳化機を用いて８００ｂａｒ／３ｃｙｃｌｅｓで乳化を行った。なお上記成分において、ＰＥＧ−５ナタネステロールは乳化安定度を高めるための補助乳化剤として加えた。

＜比較例２＞
レシチン４ｇ、水添レシチン４ｇ、ポリエチレングリコール５ｇ、ペンチレングリコール５ｇ及びアルコール１０ｇを７０〜７５℃まで加熱して完全に溶解した後、予め加熱して置いた水相部分（蒸溜水６６．９５ｇ、グリセリン５ｇ、ＥＤＴＡ０．０５ｇ）と混合して汎用ホモミキサーで３分間かけて３．０００〜６、００００ｒｐｍでプレ乳化した後、高圧乳化機を用いて８００ｂａｒ／３ｃｙｃｌｅｓで乳化を行った。上記成分において、水添レシチンはエマルジョンの安定度に優れるが経皮吸収の面で不飽和レシチンに比べて皮膚親和が低いため、２種類のレシチンを混合して用いた。

＜試験例１＞
経皮吸収量測定
経皮吸収は、モルモット皮膚を対象とし、フランツ透過セルを用いて測定した。

試験直前、モルモットの腹部皮膚を採取して平方１ｃｍ^２の面積を切断した後、これを透過鏡の直径が０．９ｃｍである透過セルに装置し、クランプを固定した。皮膚の一方の片面（donor容器）は、製作例１を溶媒（アルコール：ブチレングリコール７：３）に１％溶解したサンプルと、実施例１、２の微細な乳化粒子及びリポソーム剤型０．２ｇを塗布した。また、他方の片面（receptor容器）は、精製水とエタノールを４：１の重量比で混合した溶媒と接触するようにした。試験時の温度は、実際の皮膚温度である３２℃を保持した。試験開始後、一定時間間隔に溶媒の一部を採取した後、ＨＰＬＣを用いて皮膚に吸収されたＳＤＧとＳＥＣＯの量を測定して塗布濃度当たり経皮吸収量（μｇ／ｃｍ^２／重量％）で表した。その結果を下記表１に示す。

＜ＨＰＬＣ分析条件＞
-Ｃｏｌｕｍｎ：Ｃ１８（ＯＤＳ）
-ＳｏｌｖｅｎｔＦｌｏｗ：１ｍｌ／ｍｉｎ
-ＤｅｔｅｃｔｉｏｎＵＶ：２８０ｎｍ
-Ｓａｍｐｌｅｔｅｓｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ：５ｍｇ／ｍｌ
-Ｓａｍｐｌｅｉｎｊｅｃｔｉｏｎａｍｏｕｎｔ：１０μｇ
-Ｅｌｕｅｎｔ：ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ/１０ｍＭＨ_３Ｐ０_４＝３０／７０

上記表１から明らかなように、ダイオウ抽出物をナノ乳化技術を用いて適用すると、経皮吸収量が少なくとも９〜１０倍高くなることが分かる。

＜試験例２＞
マウス色素細胞を用いたメラニン生成抑制効果測定
Ｃ５７ＢＬ／６マウス由来のマウス色素細胞（Ｍｅｌ−Ａｂｃｅｌｌ）をDulbeccos modified Eagles media（ＤＭＥＭ）に１０％右胎盤血清、１００ｎＭ１２−０−テトラデカノイルホルボール−１３−エステル[12-0-tetradecanoyl-phorbol-13-acetate]、１ＮＭコレラ毒素（cholera toxin）を加えて培地で３７℃、５％ＣＯ_２の条件で培養した。培養されたＭｅｌ−Ａｂ細胞を０．２５％トリプシン−ＥＤＴＡで剥がして、２４−ウェルプレートに１０^５細胞／ウェル（ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ）の濃度で細胞を培養し、さらに二日目から３日連続１０ｐｐｍの試験物質（コウジ酸、製作例１、実施例１及び実施例２）を加えて培養した。

本発明のダイオウ抽出物の微細な乳化粒子又はリポソームのメラニン生成抑制効果を比較するためにコウジ酸を対照として使用した。

次に、培養液を除去して、ＰＢＳで洗浄した後、１Ｎ水酸化ナトリウムで細胞を溶解して４００ｎｍで吸光度を測定した後、下記数式に基づきメラニン生成抑制率を求めてその結果を表２に示した（Dooleyの方法）。

上記表２から明らかなように、本発明によるダイオウ抽出物は、高圧乳化技術を適用する前に比較して、より一層顕著なメラニン生成抑制率を示すことが分かる。

＜剤型例１〜２及び比較剤型例１〜３＞
下記表３の組成に基づき剤型例１〜２及び比較剤型例１〜３を栄養化粧水として調製した。

＜試験例３＞
ヒト皮膚に対する美白効果試験
健康な１２名の男性を対象とし、被検者の上膊部位に直径１．５ｃｍの穴が開いた不透明テープを貼付した後、各被検者の最小紅斑量（Minimal Erythema Dose）の１．５〜２倍程度の紫外線（ＵＶＢ）を照射して皮膚の黒化を促した。

照射後、試験物質で上記剤型例１〜２及び比較剤型例１〜３を塗布し、一部分には何も塗らずに１０週間にわたってその状態を観察した。１週間単位に皮膚の色合いを色差計ＣＲ２００２（日本、ミノルタ社）で測定した。塗布開始時点と完了時点での皮膚色の差（△Ｌ＊）を下記数式により求めて、これを下記表４に表した。美白効果は、試料塗布部位と対照群部位の△Ｌ＊とを比較して評価しており、△Ｌ＊値が２の場合は、沈着した色素の美白化が顕著で、１．５以上の場合は、美白効果があると判定した。

上記表２及び表４から明らかなように、ダイオウ抽出物には、メラニン生合成抑制効果及び美白効果を有することが分かる。また、高圧乳化技術を用いてダイオウ抽出物を微細な乳化粒子又はリポソーム化した場合、その効果がより顕著であることが分かる。さらに、ナノ乳化技術を用いてダイオウ抽出物を製剤に適用すると、美白効果が一層顕著に現れることが分かる。

下記の組成で通常の方法にしたがい皮膚外用剤用の剤型例３〜７を製造した。
[剤型例３]

[剤型例４]

[剤型例５]

[剤型例６]

[剤型例７]

Claims

有効性分としてダイオウ抽出物を含有する微細な乳化粒子又はリポソームを含有することを特徴とする皮膚美白用外用剤組成物。
前記微細な乳化粒子又はリポソームを組成物総重量に対して０．０１〜２０重量％含有することを特徴とする請求項１に記載の皮膚美白用外用剤組成物。
前記微細な乳化粒子又はリポソームは、レシチン又はレシチン誘導体及び補助乳化剤を含有することを特徴とする請求項１に記載の皮膚美白用外用剤組成物。
前記レシチンの構成成分は、ホスファチジルコリン、リゾホスファチジルコリン又はホスファチジルエタノールアミンからなる不飽和コリン系化合物、セリン系化合物、エタノールアミン系化合物及びこれらの水素添加物からなる群から選択されることを特徴とする請求項３に記載の皮膚美白用外用剤組成物。
前記レシチンは、乳化粒子総重量に対して０．５〜５重量％含有することを特徴とする請求項３に記載の皮膚美白用外用剤組成物。
前記補助乳化剤は、アニオン系、カチオン系、非イオン系又は陽性イオン系乳化剤として前記レシチン含有量対比０．１〜５倍の割合で用いることを特徴とする請求項３に記載の皮膚美白用外用剤組成物。
前記外用剤組成物は、柔軟化粧水、収斂化粧水、栄養化粧水、栄養クリーム、マッサージクリーム、エッセンス、アイクリーム、アイエッセンス、クレンジングクリーム、クレンジングフォーム、クレンジングウォーター、パック、パウダー、ボディーローション、ボディークリーム、ボディーオイル、ボディーエッセンス、メーキャップベース、ファンデーション、ボディー洗浄剤、及びローション、軟膏、ゲル、クリーム、パッチ又は噴霧剤形態の医薬組成物から選択されることを特徴とする請求項１乃至６のいずれか１項に記載の皮膚美白用外用剤組成物。