JP2005179206A

JP2005179206A - 口腔用組成物

Info

Publication number: JP2005179206A
Application number: JP2003419376A
Authority: JP
Inventors: Mari Kikawa; 真理木川; Shinsuke Kataoka; 伸介片岡
Original assignee: Lion Corp
Current assignee: Lion Corp
Priority date: 2003-12-17
Filing date: 2003-12-17
Publication date: 2005-07-07

Abstract

【解決手段】松樹皮、ローズバッツ、ライチ種子から選ばれる少なくとも１種の植物の抽出物を含有することを特徴とする口腔用組成物。
【効果】本発明の口腔用組成物は、優れたプロテアーゼ阻害活性を有し、炎症改善及び組織破壊抑制効果の高い松樹皮、ローズバッツ、ライチ種子の抽出物を含有することから、歯周病の予防、改善に有用である。
【選択図】なし

Description

本発明は、松樹皮、ローズバッツ、ライチ種子から選ばれる少なくとも１種の植物の抽出物を、病原菌や免疫細胞が放出するプロテアーゼを阻害することができるプロテアーゼ阻害剤として含有する口腔用組成物に関する。

従来、歯周病の予防及び治療には殺菌剤や抗生物質が利用されてきたが、その有効性は満足のいくものではなく、またそれらの多用による耐性菌の出現が問題視されている。従って、殺菌剤や抗生物質によらない歯周病の予防及び治療剤が望まれている。

歯周病は、局所における細菌感染とそれに対する生体の免疫防御反応の結果引き起こされる、歯周組織の破壊と歯槽骨の吸収を伴う慢性炎症疾患である。この炎症反応に深く関与するのは、病原菌や免疫細胞が放出する様々なプロテアーゼである。主要な病原菌であるポルフィロモナス・ジンジバリスが産生するシステインプロテアーゼ（アルジンジパイン）や歯肉線維芽細胞や白血球、単球から産生されるマトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ−１、ＭＭＰ−２、ＭＭＰ−３、ＭＭＰ−９）、セリンプロテアーゼ（エラスターゼ、カテプシンＧ）、システインプロテアーゼ（カテプシンＢ、Ｄ、Ｌ）は歯周病の発現や歯周組織の破壊に深く関与すると言われている。

従って、上記プロテアーゼの活性を阻害することは、歯周病の予防及び改善に有効であると考えられる。これまでに、プロテアーゼ阻害剤含有の口腔用組成物としては、キノン、三環式ジテルペン、五環式トリテルペンならびにそれらの成分を含有するローズマリー、シラカバエキス等の植物エキス（特許文献１：特開平１１−１３９９４７号公報）、ブドウ種子エキス（特許文献２：特開２００２−２９９５３号公報）が報告されている。しかし、これらはマトリックスメタロプロテアーゼの阻害剤であり、歯周病の発現や歯周組織の破壊に関与する他のプロテアーゼをも阻害するものではない。

また、口腔用プロテアーゼ阻害剤としては、シンナミックアルデヒド、シトラール、ｎ−ヘキサノールヘリオトロピン、インドール、ｎ−オクタナール、ｎ−ノナナール、ｎ−デカナール、ｎ−ドデカナール、γ−メチルインドール（特許文献３：特開２００２−３３６９号公報）、トマト抽出物、アセンヤク抽出物、キラヤ樹皮抽出物、モルホリン、パプリカ色素、モンモリロナイト、クロロゲン酸等（特許文献４：特開２００２−３３５３号公報）があるが、その効果はプロテアーゼに起因する口臭防止であり、歯周病の予防及び改善を訴求したものではない。

従って、歯周病の発現や歯周組織の破壊に関与するプロテアーゼ阻害効果、炎症改善及び組織破壊抑制効果の点で全てを満足する口腔用組成物が得られていないのが現状である。

特開平１１−１３９９４７号公報特開２００２−２９９５３号公報特開２００２−３３６９号公報特開２００２−３３５３号公報

本発明は、上記事情に鑑みなされたもので、優れたプロテアーゼ阻害活性を有し、歯周病の予防、改善に有効な口腔用組成物を提供することを目的とする。

本発明者らは上記課題を解決するために、種々の物質についてプロテアーゼ活性阻害作用を検討した結果、松樹皮、ローズバッツ、ライチ種子の抽出物が優れたプロテアーゼ活性阻害効果を有することを見出し、更にこれを配合した口腔用組成物が優れた抗炎症効果を有することを見出し、本発明を完成した。

従って、本発明は、松樹皮、ローズバッツ、ライチ種子から選ばれる少なくとも１種の植物の抽出物を含有することを特徴とする口腔用組成物を提供する。

本発明の口腔用組成物は、優れたプロテアーゼ阻害活性を有し、炎症改善及び組織破壊抑制効果の高い松樹皮、ローズバッツ、ライチ種子の抽出物を含有することから、歯周病の予防、改善に有用である。

本発明の口腔用組成物には、上述したように、松樹皮、ローズバッツ、ライチ種子の各抽出物が配合される。

本発明に用いられる松樹皮抽出物は、ヨーロッパアカマツを原料とし、その樹皮を溶剤で抽出することにより得られ、オイゲニイン等のポリフェノールの一種であるプロアントシアニジンを多く含有する。
ローズバッツ抽出物は、バラの花弁又は花蕾を溶剤で抽出することにより得られ、ポリフェノールを多く含有する。
ライチ種子抽出物は、ライチの種子を溶剤で抽出することにより得られ、アントシアニン、フラボノイド等のポリフェノール類を含有する。
なお、抽出溶媒としては、例えば水、メタノール、エタノール等のアルコール類、酢酸エチルエステル等の低級アルキルエステル、炭化水素、その他公知の溶媒を挙げることができる。抽出方法は、通常用いられているような公知の方法を採用することができる。
これら抽出物は市販品を使用することができ、例えば後述する実施例に示すものを好適に使用し得る。

本発明の口腔用組成物に配合する、松樹皮、ローズバッツ、ライチ種子の抽出物の少なくとも１種の配合量は、プロテアーゼ阻害効果、炎症改善及び組織破壊抑制効果の点では対象組成物全体の０．０１〜５質量％が好ましく、より好ましくは０．１〜３質量％である。

本発明の口腔用組成物は、練歯磨等の歯磨類や、洗口剤、マウスウォッシュ、トローチ、チューインガム、義歯洗浄剤等の口腔清浄剤として調製、適用することができ、他の成分としては、口腔用組成物の種類に応じた適宣な成分が用いられる。例えば練歯磨の場合であれば、研磨剤、粘結剤、粘稠剤、甘味料、防腐剤、香料、各種有効成分などを水と混和し、常法に従って製造することができる。

ここで、研磨剤としては、シリカゲル、沈降シリカ、アルミノシリケート、ジルコノシリケート等のシリカ系研磨剤、第２リン酸カルシウム２水和物及び無水和物、ピロリン酸カルシウム、炭酸カルシウム、水酸化アルミニウム、アルミナ、炭酸マグネシウム、第３リン酸マグネシウム、ゼオライト、ケイ酸ジルコニウム、第３リン酸カルシウム、ハイドロキシアパタイト、第４リン酸カルシウム、合成樹脂系研磨剤等が挙げられる。これら研磨剤は１種又は２種以上配合し得る（配合量通常３〜９０質量％）。

また、界面活性剤としては、ラウリル硫酸ナトリウム、ミリスチル硫酸ナトリウム等のアルキル基の炭素数が８〜１８である高級アルキル硫酸エステルの水溶性塩、ラウリルモノグリセライドスルフォン酸ナトリウム、ココナッツモノグリセライドスルフォン酸ナトリウム等の脂肪酸基の炭素数が１０〜１８である高級脂肪酸モノグリセライドスルフォン酸の水溶性塩、オレフィンスルフォン酸、パラフィンスルフォン酸、その他のアニオン界面活性剤、ステアリルモノグリセライド、ショ糖モノ及びジラウレート等の脂肪酸基の炭素数が１２〜１８であるショ糖脂肪酸エステル、ラクトース脂肪酸エステル、ラクチトール脂肪酸エステル、マルチトール脂肪酸エステル、ステアリン酸モノグリセライド、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、エチレングリコール約６０モルが付加したソルビタンモノステアレート縮合物、エチレンオキサイドとプロピレンオキサイドの重合物及びポリオキシエチレンポリオキシプロピレンモノラウリルエステル等の誘導体といったノニオン界面活性剤、ベタイン型、アミノ酸型等の両性界面活性剤などの界面活性剤が用いられる（通常配合量０．０１〜７質量％）。

粘結剤としては、カラゲナン、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルヒドロキシエチルセルロースナトリウムなどのセルロース誘導体、アルギン酸ナトリウムなどのアルカリ金属アルギネート、アルギン酸プロピレングリコールエステル、キサンタンガム、トラガカントガム、カラヤガム、アラビアガムなどのガム類、ポリビニルアルコール、ポリアクリル酸ナトリウム、カルボキシビニルポリマー、ポリビニルピロリドンなどの合成粘結剤、ゲル化性シリカ、ゲル化性アルミニウムシリカ、ビーガム、ラポナイトなどの無機粘結剤等の１種又は２種以上が配合し得る（配合量通常０．５〜１０質量％）。

粘稠剤としては、ソルビット、グリセリン、エチレングリコール、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、キシリット、マルチット、ラクチット等の１種又は２種以上を配合し得る（配合量通常１〜５０質量％）。

更に、甘味剤としては、サッカリンナトリウム、ステビオサイド、ネオヘスペリジルジヒドロカルコン、グリチルリチン、ペリラルチン、タウマチン、アスパラチルフェニルアラニンメチルエステル、ｐ−メトキシシンナミックアルデヒド、サイクラミン酸ナトリウム等、防腐剤としては、ｐ−ヒドロキシメチルベンゾイックアシッド、ｐ−ヒドロキシエチルベンゾイックアシッド、ｐ−ヒドロキシプロピルベンゾイックアシッド、ｐ−ヒドロキシブチルベンゾイックアシッド、安息香酸ナトリウム、低級脂肪酸モノグリセライド等、香料としては、ウインターグリーン油、スペアミント油、ペパーミント油、サッサフラス油、丁字油、ユーカリ油等が配合し得る。また、ゼラチン、ペプトン、アルブミン、増白剤、シリコーン、色素、その他成分を配合し得る。更にまた、イプシロンアミノカプロン酸、トラネキサム酸、デキストラナーゼ、プロテアーゼ、ムタナーゼ、リゾチーム、溶菌酵素、リテックエンザイム等の酵素、モノフルオロリン酸ナトリウム、モノフルオロリン酸カリウムなどのアルカリ金属モノフルオロホスフェート、フッ化ナトリウム、フッ化アンモニウム等のフッ化物、クロルヘキシジン塩類、ジヒドロコレステロール、グリチルレチン塩類、グリチルレチン酸、カロペプタイド、ビタミン類、歯垢防止剤、抗菌剤、硝酸カリウムなどの知覚過敏症鈍麻剤等の有効成分を１種又は２種以上配合し得る。

以下、試験例及び実施例により本発明を更に詳細に説明するが、本発明は下記の試験例及び実施例に制限されるものではない。なお、下記の例で％は特にことわらない限り、質量％を示す。また、試験例及び実施例で用いた松樹皮、ローズバッツ、ライチ種子の抽出物及びローズマリーエキスは以下のものを使用した。

［試験例１］
ポルフィロモナス・ジンジバリス由来システインプロテアーゼ（アルジンジパイン）に対する阻害活性の測定
９６穴プレート（ＦＡＬＣＯＮ製、ＭＩＣＲＯＴＥＳＴ^TM）に０．０５ｍｇ／ｍＬアルジンジパイン１０μＬ、３７５μｍｏｌ／Ｌ塩化カルシウム及び５６０μｍｏｌ／Ｌシステインを含む１２．５ｍｍｏｌ／Ｌリン酸２水素ナトリウム溶液で希釈した松樹皮、ローズバッツ、ライチ種子の抽出物、ローズマリー抽出物各７０μＬ、３７５μｍｏｌ／Ｌ塩化カルシウム及び５６０μｍｏｌ／Ｌシステインを含む１２．５ｍｍｏｌ／Ｌリン酸２水素ナトリウム溶液で希釈した基質（ペプチド研究所、Ｚ−Ａｒｇ−ＭＣＡ）７０μＬを混合し、３７℃で３０分間反応させた後、蛍光分光光度計（大日本製薬社製、ＦｌｕｏｒｏｓｋａｎＡｓｃｅｎｔ）を用い、波長３８０ｎｍで励起した４６０ｎｍの蛍光波長の蛍光強度を測定した。その結果から算出した松樹皮、ローズバッツ、ライチ種子の抽出物のアルジンジパイン阻害活性（５０％阻害活性）を表２に示す。松樹皮、ローズバッツ、ライチ種子の抽出物は強いアルジンジパイン阻害活性を有することが確認された。

［試験例２］
生体由来システインプロテアーゼ（カテプシンＢ）に対する阻害活性の測定
９６穴プレート（ＦＡＬＣＯＮ製、ＭＩＣＲＯＴＥＳＴ^TM）に０．０５ｍｇ／ｍＬカテプシンＢ１０μＬ、３７５μｍｏｌ／Ｌ塩化カルシウム及び５６０μｍｏｌ／Ｌシステインを含む１２．５ｍｍｏｌ／Ｌリン酸２水素ナトリウム溶液で希釈した松樹皮、ローズバッツ、ライチ種子の抽出物、ローズマリー抽出物各７０μＬ、３７５μｍｏｌ／Ｌ塩化カルシウム及び５６０μｍｏｌ／Ｌシステインを含む１２．５ｍｍｏｌ／Ｌリン酸２水素ナトリウム溶液で希釈した基質（ペプチド研究所、Ｚ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−ＭＣＡ）７０μＬを混合し、３７℃で３０分間反応させた後、蛍光分光光度計（大日本製薬社製、ＦｌｕｏｒｏｓｋａｎＡｓｃｅｎｔ）を用い、波長３８０ｎｍで励起した４６０ｎｍの蛍光波長の蛍光強度を測定した。その結果から算出した松樹皮、ローズバッツ、ライチ種子の抽出物のカテプシンＢ阻害活性（５０％阻害活性）を表２に示す。松樹皮、ローズバッツ、ライチ種子の抽出物は強いカテプシンＢ阻害活性を有することが確認された。

［試験例３］
生体由来セリンプロテアーゼ（エラスターゼ）に対する阻害活性の測定
９６穴プレート（ＦＡＬＣＯＮ製、ＭＩＣＲＯＴＥＳＴ^TM）に０．０５ｍｇ／ｍＬエラスターゼ１０μＬ、１００μｍｏｌ／Ｌシステイン、１５０μｍｏｌ／Ｌ塩化ナトリウム及び０．１％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００を含む５０ｍｍｏｌ／ＬＭＥＳ溶液で希釈した松樹皮、ローズバッツ、ライチ種子の抽出物、ローズマリー抽出物各７０μＬ、１００μｍｏｌ／Ｌシステイン、１５０μｍｏｌ／Ｌ塩化ナトリウム及び０．１％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００を含む５０ｍｍｏｌ／ＬＭＥＳ溶液で希釈した基質（ペプチド研究所、Ｓｕｃ（Ｏｍｅ）−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−ＭＣＡ）７０μＬを混合し、３７℃で６０分間反応させた後、蛍光分光光度計（大日本製薬社製、ＦｌｕｏｒｏｓｋａｎＡｓｃｅｎｔ）を用い、波長３８０ｎｍで励起した４６０ｎｍの蛍光波長の蛍光強度を測定した。その結果から算出した松樹皮、ローズバッツ、ライチ種子の抽出物のエラスターゼ阻害活性（５０％阻害活性）を表２に示す。松樹皮、ローズバッツ、ライチ種子の抽出物は強いエラスターゼ阻害活性を有することが確認された。

［試験例４］
生体由来マトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ−１）に対する阻害活性の測定
９６穴プレート（ＦＡＬＣＯＮ製、ＭＩＣＲＯＴＥＳＴ^TM）に０．４ｕ／ｍＬＭＭＰ−１１０μＬ、１５０μｍｏｌ／Ｌ塩化ナトリウム、１０ｍｍｏｌ／Ｌ塩化カルシウム及び０．０５％Ｂｒｉｊ３５を含む５０ｍｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ−ＨＣｌ溶液で希釈した松樹皮、ローズバッツ、ライチ種子の抽出物、ローズマリー抽出物各７０μＬ、１５０μｍｏｌ／Ｌ塩化ナトリウム、１０ｍｍｏｌ／Ｌ塩化カルシウム及び０．０５％Ｂｒｉｊ３５を含む５０ｍｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ−ＨＣｌ溶液で希釈した基質（ペプチド研究所、Ｍｃａ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｔｙｒ−Ａｌａ−Ｎｖａ−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ−Ｌｙｓ（ＤＮＰ）−ＮＨ₂）７０μＬを混合し、３７℃で２４時間反応させた後、蛍光分光光度計（大日本製薬社製、ＦｌｕｏｒｏｓｋａｎＡｓｃｅｎｔ）を用い、波長３２０ｎｍで励起した３９０ｎｍの蛍光波長の蛍光強度を測定した。その結果から算出した松樹皮、ローズバッツ、ライチ種子の抽出物のＭＭＰ−１阻害活性（５０％阻害活性）を表２に示す。松樹皮、ローズバッツ、ライチ種子の抽出物は強いＭＭＰ−１阻害活性を有することが確認された。

［試験例５］
モルモット皮膚炎症における効果
モルモット背部皮下に菌液（ポルフィロモナス・ジンジバリス３３２７７３×１０¹¹ｃｅｌｌｓ／ｍＬ）１００μＬを接種し、菌液接種の翌日より３％プロピレングリコール溶液で希釈した松樹皮、ローズバッツ、ライチ種子の抽出物、ローズマリー抽出物を１０日間投与した。接種部位の炎症の大きさを測定した後、組織を採取し、組織中のヒドロキシプロリン量を液体クロマトグラフ法にて測定した。その結果を表３に示す。松樹皮、ローズバッツ、ライチ種子の抽出物投与部位はコントロールと比較し炎症の大きさが小さくなっており、ヒドロキシプロリン量が多いことから、組織中のコラーゲン分解が抑制されていることがわかる。従って、松樹皮、ローズバッツ、ライチ種子の抽出物は炎症改善及び組織破壊抑制効果が高いことが明らかとなった。

以下、処方例を示す。
［実施例１］練歯磨
松樹皮抽出物０．０１％
フッ化ナトリウム０．１
無水ケイ酸２０
プロピレングリコール３
カルボキシメチルセルロースナトリウム（ＤＳ：１．０）０．５
カラギーナン１
７０％ソルビット液２５
サッカリンナトリウム０．１
ラウリル硫酸ナトリウム１
安息香酸ナトリウム０．５
香料１
精製水残
合計１００．０％

［実施例２］練歯磨
ローズバッツ抽出物０．１％
フッ化ナトリウム０．１
アスコルビン酸リン酸エステル１
シリカゲル１８
プロピレングリコール３
キサンタンガム０．５
カラギーナン０．８
７０％ソルビット液２０
サッカリンナトリウム０．１
ラウリル硫酸ナトリウム１．２
パラオキシ安息香酸メチル０．５
パラオキシ安息香酸ブチル０．１
香料１．２
精製水残
合計１００．０％

［実施例３］練歯磨
松樹皮抽出物１．０％
ローズバッツ抽出物１．０
リン酸水素カルシウム無水和物２０．０
リン酸水素カルシウム２水和物２５．０
カルボキシメチルセルロースナトリウム（ＤＳ：１．０）０．３
カルボキシメチルセルロースナトリウム（ＤＳ：１．３）０．８
プロピレングリコール３
６０％ソルビット液２５
サッカリンナトリウム０．１
モノフルオロリン酸ナトリウム０．７
トラネキサム酸０．０５
ラウリル硫酸ナトリウム１
パラオキシ安息香酸メチル０．１
パラオキシ安息香酸ブチル０．１
香料１．２
精製水残
合計１００．０％

［実施例４］練歯磨
ライチ種子抽出物５％
水酸化アルミニウム４５
プロピレングリコール２．５
７０％ソルビット液２０
アルギン酸ナトリウム０．５
カラギーナン（Ｐタイプ）０．５
ミリスチル硫酸ナトリウム１．２
ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンブロックポリマー１．０
サッカリンナトリウム０．２
レオガードＭＧＰ０．０５
香料１．２
精製水残
合計１００．０％

［実施例５］練歯磨
ローズバッツ抽出物０．１％
モノフルオロリン酸ナトリウム０．７６
重質炭酸カルシウム３０
軽質炭酸カルシウム５
７０％ソルビット液４０
ポリエチレングリコール４０００４
ポリアクリル酸ナトリウム０．８
アルギン酸ナトリウム０．５
ラウリル硫酸ナトリウム１
安息香酸ナトリウム０．５
香料０．８
精製水残
合計１００．０％

［実施例６］液状歯磨
松樹皮抽出物０．５％
無水ケイ酸１８
キサンタンガム０．２
ポリアクリル酸ナトリウム０．１
７０％ソルビット液３５
８５％グリセリン２０
プロピレングリコール５
ポリオキシエチレン（２０）硬化ヒマシ油１
ショ糖パルミテート３
ステビアエキス０．１
セルコートＬ−２０００．０５
アスコルビン酸２−リン酸エステルナトリウム塩０．１
香料０．８
青色１号０．００１
黄色４号０．００１
精製水残
合計１００．０％

［実施例７］洗口液
松樹皮抽出物０．５％
ライチ抽出物０．５
プロピレングリコール５
グリセリン５
エタノール５
サッカリンナトリウム０．１
香料０．２
精製水残
合計１００．０％

［実施例８］洗口液
ライチ種子抽出物５％
エタノール１０
グリセリン５
ソルビット液５
マンニトール３
マルチトール３
ポリオキシエチレン（６０）硬化ヒマシ油１
ラウリル硫酸ナトリウム０．１
マーコート１０００．０２
香料０．３
精製水残
合計１００．０％

［実施例９］口腔用パスタ
松樹皮抽出物０．９％
セタノール２０
スクワラン５
ポリオキシエチレン（４０）硬化ヒマシ油０．１
ソルビタンモノオレイン酸エステル１
ラウリル硫酸ナトリウム０．２
グリチルレチン酸０．１
サッカリンナトリウム０．６
セルコートＬ２０００．１
クエン酸０．５
無水ケイ酸３
香料０．３
水酸化カリウム適量
精製水残
合計１００．０％

Claims

松樹皮、ローズバッツ、ライチ種子から選ばれる少なくとも１種の植物の抽出物を含有することを特徴とする口腔用組成物。