JP2005118013A

JP2005118013A - マルチウェルプレート

Info

Publication number: JP2005118013A
Application number: JP2003359534A
Authority: JP
Inventors: Akiko Nishimura; 昭子西村; Masaya Kimura; 正弥木村; Takafumi Kajitani; 隆文梶谷
Original assignee: KAJIKKUSU TRADING KK; Research Organization of Information and Systems
Current assignee: KAJIKKUSU TRADING KK; Research Organization of Information and Systems
Priority date: 2003-10-20
Filing date: 2003-10-20
Publication date: 2005-05-12
Anticipated expiration: 2023-10-20
Also published as: JP4461267B2

Abstract

【課題】微生物や動物細胞の運搬に使用される薄型マルチウェルプレートを提供する。
【解決手段】本発明のマルチウェルプレートは、耐水性を有する基材シート、複数の透孔を有し基材シートに貼着されたスペーサーシート、スペーサーシートの透孔を介して基材シートに貼着された吸水性素材、及びスペーサーシートを覆うカバーシートからなる。各吸水性素材に、微生物などを保持することにより、簡便且つ安全に多くの微生物などを運搬することができ、更に薄型であるので嵩張らないという特長を有する。
【選択図】なし

Description

本発明はマルチウェルプレートに関する。より詳細には、微生物（菌体）、ファージ、ＤＮＡ、細胞などの運搬、保管などに有用な薄型マルチウェルプレートに関する。

従来から、新薬開発のソースとして微生物の産生する物質が用いられており、そのような有用産物を産生する微生物の探索が行われている。
また、昨今の遺伝子組換技術の発展により、有用物質の遺伝子を導入した微生物（形質転換体）を培養することにより、有用産物の生産が行われるようになっている。
更に、食品工業では、従前より微生物を用いた発酵により種々の食品の製造が行われてきた。
このように、医薬、生化学、食品、化学などの分野では、微生物が重要な働きをしており、クローン化された有用微生物は貴重な資源であることから慎重に保管されている。このような微生物は、通常、穿刺培養法、冷凍法、凍結乾燥法などにより保存されている。
上記の微生物を保管している研究機関などが、他の研究機関の求めに応じて、当該微生物を供給する際に微生物の運搬が行われる。微生物の運搬は、通常、微生物培養液を濾紙にスポットし、包装用ラップで包んで運搬したり、アンプルに収納した状態で運搬されている。また、微生物の数が多い場合には、マイクロタイタープレートに培養液を分注し、ビニールシートでシールして運搬したり、寒天培地にスポット植菌して運搬している。
しかし、、濾紙に吸着させて運搬する方法では雑菌が混入し易いし、運搬する微生物の数が多い場合には濾紙の枚数が増えて非効率的である。また、マイクロタイタープレート、寒天培地又はアンプルで運搬する方法では、容器の破損の問題があると共に容器が破損した場合には微生物汚染の問題もある。更に、運搬物が嵩張ることも大きな問題点である。
なお、微生物用のマルチウェルプレートしては、特開２００１−２１８５７５号公報、特開２００２−１９９８７４号公報などに記載のプレートが知られている。
特開２００１−２１８５７５号公報特開２００２−１９９８７４号公報

解決しようとする問題点は、多数の微生物を簡便に且つ安全に運搬・保管しえる薄型マルチウェルプレートを提供することにある。

本発明のマルチウェルプレートは、(a)耐水性を有する基材シート、(b)複数の透孔を有し、基材シートに貼着されたスペーサーシート、(c)スペーサーシートの透孔を介して基材シートに貼着された吸水性素材、及び(d) ペーサーシート上を覆うカバーシートからなる。
上記のマルチウェルプレートは、全体の厚みが３ｍｍ以下、通常は１ｍｍ以下、素材の選択によっては０．５ｍｍ以下とすることができ、超薄型のマルチウェルプレートである。

本発明のマルチウェルプレートによれば、一枚のプレートで多数の微生物（又は動物細胞）を運搬することができるので極めて効率的であり、しかも運搬容器の破損による微生物の損失や微生物汚染の問題も解消でき、更に超薄型であるので嵩張らないという特長を有し、その上安価に製造できるという格別の効果を奏する。

以下、図面に基づいて、本発明をより詳細に説明する。
本発明の一実施例を図１及び２に示す。図１は本発明のマルチウェルプレートの平面概略図であり、図２は図１のＡ−Ａ線端面概念図である。図１及び図２において、１は基材シート、２はスペーサーシート、３は透孔、４は吸水性素材、５はカバーシートである。
なお、図１及び図２は、本発明の一例として９６ウェルのマルチウェルプレートを示しているが、ウェルの数は９６に限定されるものではなく、所望に応じて適宜な数でよく、例えば６，１２、２４、４８、３８４などが例示される。
また、本明細書において、シートはフィルムを含む概念である。

図１及び図２において、基材シート１は耐水性を有する材料、好ましくはプラスチック素材からなり、例えばＰＥＴ（ポリエチレンテレフタレート）、シリコーン、ＰＥ（ポリエチレン）、ＰＰ（ポリプロピレン）、ＰＳ（ポリスチレン）などが例示される。
基材シート１の厚さは特に限定されず、スペーサーシート２などを保持できる強度を有すればよく、通常５０〜１００μｍ程度のシートが用いられる。

基材シート１の上面には接着剤が塗布されており、係る接着剤層（図示は省略）を介してスペーサーシート２が貼着されている。スペーサーシート２には、透孔３が一列８個で１２列形成されており、合計９６個の透孔３が設けられている。
透孔３の形状は円筒形にされ、径としては通常直径５ｍｍ程度とされるがこの径に限定されるものではない。透孔３は通常円筒形とされるが、係る形状に特定されず、断面が矩形の孔であってもよい。なお、前述のように、係る透孔３はウェルを形成するものであって、その数は９６個に限定されるものではない。
スペーサーシート２の材質は特に限定されないが、通常耐水性を有するプラスチック素材が用いられ、例えばＰＥＴ（ポリエチレンテレフタレート）、シリコーン、ＰＥ（ポリエチレン）、ＰＰ（ポリプロピレン）、ＰＳ（ポリスチレン）などが例示される。スペーサーシート２の厚さは特に限定されず、通常３００〜４００μｍ程度のシートが用いられる。

基材シート１に貼着されたスペーサーシート２の透孔３内には、吸水性素材４が基材シート１に貼着されている。吸水性素材４は、微生物含有液を滲み込ませ、微生物を保持できる材質であれば特に限定されないが、繊維状素材が好ましく、例えば濾紙、不織布、フエルトなどが例示される。
吸水性素材４の形状は、透孔３に適合するような形状であればよく、前述のように透孔３が直径５ｍｍとされる場合には、吸水性素材４は直径３ｍｍ程度に調製される。吸水性素材４は透孔３内に収納され、吸水性素材４の上端が透孔３と略同じ高さ又はやや突出する程度に調製される。

吸水性素材４を収納したスペーサーシート２は、その上面をカバーシート５で被覆する。カバーシート５の材質・厚みは特に限定されないが、通常、自己粘着性を有するプラスチックシートが好ましく、厚さ１００μｍ程度とされる。

上記のようにカバーシート５で被覆された本発明のマルチウェルプレートは、密封可能の容器（例えば、ポリ袋、ポリ容器等）に収容し、密封するの好ましい。容器としては、ポリ袋が簡便で好ましい。

以下、本発明のマルチウェルプレートの使用方法を説明する。
上記のように、カバーシート５で被覆され、密封容器に収容されたマルチウェルプレートは、慣用の滅菌手段（例えば、電子線滅菌、ガンマー線滅菌、高圧蒸気滅菌等）で滅菌する。この滅菌状態で、使用者に供給される。
使用者は、クリーンルームで容器を開封し、本発明のマルチウェルプレートを取り出し、取り出した後、カバーシート５を剥離する。
次いで、上面が開放されたスペーサーシート２の透孔３内の吸水性素材４に微生物含有液を滴下し、滲み込ませて微生物（菌株）を保持する。微生物含有液は、通常、定常期まで培養・保存されている微生物を慣用の媒体（例えば、生理食塩水等）に分散させた液が用いられる。微生物含有液の滴下量は適宜選択することができるが、通常１０μｌ程度とされる。

なお、本発明のマルチウェルプレートには複数の吸水性素材４が設けられているので、それぞれに異なった微生物（菌株）を保持することができる。即ち、添付図面の９６穴マルチウェルプレートであれば、９６種類の微生物を保持することができる。
かくして、各吸水性素材４に微生物を保持した後、カバーシート５でスペーサーシート２の上面を覆う。カバーシート５で覆うことにより、雑菌のコンタミネーションを防止すると共に孔相互間の混入を防ぐことができる。

カバーシート５で被覆した後、前述の容器（好ましくはポリ袋）に収納し、開口部を慣用の密封手段（例えば、ヒートシール、密封チャック等）で密封し、運搬に供する。
運搬された本発明のマルチウェルプレートは、受け取った使用者がクリーンルームで開封し、カバーシート５を剥離した後、慣用の固型培地上にレプリカすることにより、プレート上の全微生物を一度に培養することができる。

なお、上記の微生物については特に限定されず、例えば大腸菌、枯草菌、酵母などが例示される。また、当該微生物は、組換遺伝子を含む形質転換体であってもよく、更には組換遺伝子を有するファージが感染した微生物であってもよい。更に、凍結保存が可能な微生物においては、適当な凍結保護剤（例えば、ＤＭＳＯ等）を含む微生物含有液を、前記吸水性素材４に滴下し、以下は上記と同様に密封した後、凍結処理をしてもよい。係る態様によれば、凍結状態で微生物を保管することが可能になる。

本発明のマルチウェルプレートは、微生物の運搬に供される他、動物細胞の運搬にも利用可能である。動物細胞は通常足場依存性を有するが、前記の吸水性素材４が動物細胞の足場として機能する。従って、動物細胞含有液を、前記の吸水性素材４に滴下し、以下は上記と同様に密封することにより、動物細胞の運搬に供することができる。この際、当該動物細胞含有液に凍結保護剤を添加することにより、凍結状態で動物細胞を運搬し、また保存することも可能である。
動物細胞としては、慣用の株化細胞の他、組換遺伝子を含む動物細胞（形質転換体）であってもよい。係る形質転換体の調製に用いられる動物細胞としては、遺伝子組換技術で繁用される動物細胞、例えば、マウス線維芽細胞Ｃ１２７、チャイニーズハムスター卵巣細胞ＣＨＯ、サルＣＯＳ細胞などが例示される。

以下、実施例に基づいて、本発明をより詳細に説明するが、本発明はこの例に限定されるものではない。
実施例１
基材シートとしてＰＰ製シート（電気化学工業社製、85mm×145mm×80μm）を用い、その一面にシリコン系接着剤を均一に塗布した。
一方、スペーサーシートとしてＰＰ製シート（タキロン社製、85mm×145mm×350μm）を用い、それに直径約５ｍｍの透孔を、図１に示されるように一列８個で１２列の等間隔で設けた。このスペーサーシートを、上記の接着剤層の上に重ね合わせて貼着した。
次いで、市販濾紙（厚さ約350μm）を直径約３ｍｍの円形に裁断したものを用意し、この濾紙を上記の透孔に一枚ずつ加え、押圧することにより基材シートに貼着させた。
更に、スペーサーシートの上面を、ＰＥ製カバーシート（ＦＳＫ社製）で被覆した後、ポリ袋（220mm×95mm）に収容し、開口部をヒートシールした後、電子線滅菌して、本発明のマルチウェルプレートを調製した。

有用微生物や動物細胞の運搬・保存に広く利用することができる。

本発明のマルチウェルプレートの一例を示す平面概略図である。図１のＡ−Ａ線端面概念図である。

符号の説明

１基材シート
２スペーサーシート
３透孔
４吸水性素材
５カバーシート

Claims

(a)耐水性を有する基材シート、(b)複数の透孔を有し、基材シートに貼着されたスペーサーシート、(c)スペーサーシートの透孔を介して基材シートに貼着された吸水性素材、及び(d) スペーサーシート上を覆うカバーシートからなることを特徴とするマルチウェルプレート。
包装容器に密封収容されている請求項１記載のマルチウェルプレート。