JP2005089437A - 点鼻腔洗浄組成物 - Google Patents

Abstract

【課題】花粉症などによるアレルギー性鼻炎の主症状であるクシャミ、鼻水、鼻詰まりを改善した点鼻腔洗浄組成物を提供すること。
【解決手段】鼻腔洗浄液に乳酸菌を加えたことで鼻腔内の状況を良好にし、アレルギー性鼻炎を改善することができ、副作用や刺激がないため日常的に使用することができる。
【選択図】なし

Description

本発明は、点鼻腔洗浄組成物及びその製造方法に関するものである。更に詳しくは、アレルギー性鼻炎の主症状であるクシャミ、鼻水、鼻詰まりの１つ以上の症状を副作用や刺激を生じず、改善する性質を付与した点鼻腔洗浄組成物及びその製造方法に関する。

近年、社会的問題になるほど、花粉症の増加やアトピー性皮膚炎の増加は著しいものがある。ある特定の原因物質（アレルギー抗原）を人が取り込んだ際、抗体が体の中で合成され、再びその抗原にさらされたときに症状が生じる。アレルギー反応は、その発症形態や関与する物質の違いからＩ型からＩＶ型に分類されている。花粉症などアレルギー性鼻炎等のアレルギーを発症する即時型アレルギーをＩ型アレルギーといいい、アレルギー抗原が侵入してくると、発症に強く関与する免疫グロブリンＩｇＥが生産され、このＩｇＥが肥満細胞の表面にあるレセプターと結合すると、細胞の表面で架橋構造を取り、その結果、炎症を引き起こすロイコトリエンやプロスタグランジンといった化合物が放出され、風邪をひいていないのに発作性再発性のクシャミ、鼻水、鼻詰まりが特徴で、症状が１年中あるいは季節的に発症する場合がある。原因となるアレルギー抗原は、日本ではハウスダスト（ダニ）が最も多く、次にスギ花粉、その他にブタクサ花粉、カビ（真菌）等がある。花粉症に関しては、粘膜表面に存在する水分により花粉から溶出したタンパク質や糖質等に起因するものであり、近年空中飛散花粉数の増加により患者数が急増している。そこで、アレルギー性鼻炎の症状を抑制する服用剤、点鼻剤や鼻腔洗浄液等が種々提案されている。

服用剤ではＩ型アレルギー性鼻炎には、抗ヒスタミン薬、消炎酵素薬、抗炎症薬等が使用されていることが開示されている（例えば、特許文献１参照。）しかし、このような抗ヒスタミン剤や抗アレルギー剤には副作用が認められる場合が多くあり、長期に渡って使用するには安全性が問題となる。又、乳酸菌を含む食品を摂取する事により、アレルギー性鼻炎を改善することも多数開示されている（例えば、特許文献２参照。）これらは、いずれも動物実験であり、まだ人での検証がなされず、商品化には至っていない。点鼻剤としては、粘膜に直接塗布し、アレルギー性鼻炎にポリフェノールと血管収縮剤を含有するものが開示されている（例えば、特許文献３参照。）しかし、これらの薬剤は刺激があるとともに、血管収縮剤は口渇等の副作用があり、長期間使用するには問題がある。又、鼻腔洗浄液は、体液に近い濃度にした生理的食塩水等に乳化剤を加えて作られた鼻腔洗浄スプレーで、液を霧状にして鼻腔についた花粉、雑菌、埃等のアレルギー抗原を洗い流す目的で使用されている（例えば、非特許文献１参照。）しかし、これらは単なる洗い流しのためアレルギーの低減効果はほとんどないものである。そこで、アレルギー性鼻炎の症状を抑制するために、洗浄効果を有する鼻腔洗浄組成物に加えて刺激や副作用がない点鼻組成物を合わせた点鼻腔洗浄組成物が切望されている。
特開平１０−１５８１９３ 特開平９−２９５９、特開平１０−１１４６６７、特開２０００−９５６９７ 特開２０００−３２７５７３ ロート製薬株式会社 健康＠ｎｉｆｔｙ

本発明は、アレルギー性鼻炎に対して、薬による副作用を生じず、化学物質により粘膜を刺激することなく、少量でクシャミ、鼻水、鼻詰りの改善に優れた効果を有する点鼻腔洗浄組成物を提供することを目的とする。又、本発明は、アレルギー性鼻炎の改善に優れた点鼻腔洗浄組成物の製造方法を提供することを目的とする。

乳酸菌やその醗酵物を飲食することで、腸管粘膜を刺激し腸管免疫を賦活することが知られているが、本発明は鼻腔洗浄液に乳酸菌を加えることで、洗浄効果に加えて鼻腔粘膜を免疫学的に刺激し、アレルギー性鼻炎を改善する新たな手法を見出した。又、生きた乳酸菌は鼻腔内菌叢を変化させることを見出し、上記課題を有効に解決できるとの知見に基づいてなされたものである。すなわち、本発明は、塩化ナトリウム０．１〜１重量％、乳化剤０．１〜２重量％、乳酸菌及び水を含有する点鼻腔洗浄組成物を提供する。又、塩化ナトリウムと乳化剤を水に溶解し、例えば除菌若しくは殺菌により無菌化した溶液（洗浄組成物）を作成し、これに滅菌した洗浄液で洗浄した乳酸菌体を混合する点鼻腔洗浄組成物の製造法を提供する。本発明では、乳酸菌を配合した点鼻腔洗浄物の剤形は、ペースト状、液状又は使用時に水に溶解して使用する粉状と通常使用されている点鼻組成物又は鼻腔洗浄組成物と同様にすれば良い。

本発明に用いる塩化ナトリウムは生理食塩水の組成物として用い、鼻腔粘膜に対して刺激を少なくするとともに乳酸菌の生存性を高め、乳化作用を減じないために０．２〜１．０重量％とするが、好ましくは０．６〜０．９重量％である。塩化ナトリウム以外の生理食塩水組成塩を加えることもできる。本発明における乳化剤は公知の乳化剤でよく、蔗糖脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、プロピレングリコール脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリソルベート等でよく、鼻腔洗浄組成物に対して０．１〜２．０重量％使用する。特に親水基親油基バランス（ＨＬＢ）が６から２０のもがよい。好ましくはＨＬＢが１０から２０である。ＨＬＢが５以下の場合は、水に溶けにくく使用しづらい。

本発明における乳酸菌は、食品に利用されている菌及びその近縁であり、グラム陽性菌で、ペプチドグリカンを菌体表面に配している。使用される乳酸菌は、酪農乳酸菌といわれるラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属、ストレプトコッカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）属、ラクトコッカス（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ）属、ロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属、ペディオコッカス（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ）属、エンテロコッカス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ）属、ビフィドバクテリウム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属が好ましく、その他のカーノバクテリウム（Ｃａｒｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属、バゴコッカス（Ｖａｇｏｃｏｃｃｕｓ）属、テトラゲノコッカス（Ｔｅｔｒａｇｅｎｏｃｏｃｃｕｓ）属等の乳酸菌でも良い。これら乳酸菌は、理化学研究所又はアメリカン タイプ カルチャー コレクション（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ）で菌株が取得でき、具体例を示せば、乳酸桿菌ではラクトバチルス・アシドフィラス（Ｌ．ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）はＪＣＭ１１３２、ラクトバチルス・カゼイ（Ｌ．ｃａｓｅｉ）はＪＣＭ１１３４、ラクトバチルス・ラムノーサス（Ｌ．ｒｈａｍｎｏｓｕｓ）はＪＣＭ１１３６等の菌を用いることができる。乳酸球菌ではラクトコッカス・ラクティス（Ｌｔ．ｌａｃｔｉｓ）ＪＣＭ５８０５、ストレプトコッカス・サーモフィラス（Ｓｔ．ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）ＡＴＣＣ４４８５等の菌を用いることができる。ビフィズス菌ではビフィドバクテリウム・アドレセンティス（Ｂｉｆ．ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｉｓ）はＪＣＭ１２７５、ビフィドバクテリウム・ロンガム（Ｂｉｆ．ｌｏｎｇｕｍ）はＪＣＭ１２１７、ビフィドバクテリウム・インファンティス（Ｂｉｆ．ｉｎｆａｎｔｉｓ）はＪＣＭ１３０２等の菌を用いることができる。これらの乳酸菌は、乳酸菌自体は公知のものが使用できるが、点鼻腔洗浄組成物に対し、０．００１〜５０．０重量％の範囲が適切であるが、好ましくは０．０１〜２０．０重量％使用することが望ましい。乳酸菌が５０重量％を超えると粘性が強いものとなってしまう。乳酸菌は特に、培養基質のタンパク質を含有しない方が、アレルギー症状を有している人に対して悪化させる心配がなく好ましい。特に、乳酸菌自体が生菌である方が鼻腔内菌叢を変化させることができ好ましく、生きた乳酸菌をグラム当たり生菌１０^４〜１０^９個含むものがより好ましい。

本発明の点鼻腔洗浄組成物を製造するには、まず、塩化ナトリウム及び乳化剤を水に溶解し、必要ならばＨＬＢが６から２０の乳化剤を用いた後、除菌若しくは熱滅菌により無菌化した洗浄組成物と、乳酸菌を３０〜４５℃で培養した後、加熱等で滅菌した生理食塩水を用いて洗浄し、遠心分離して無菌的に集めた菌体、又はこれを乾燥させた菌体を混合して、本発明の点鼻腔洗浄組成物を得ることができる。このうち、混合する乳酸菌が０．００１〜５０．０重量％含まれていることが好ましく、乳酸菌の培養基質としては、獣乳、豆乳、合成培地でもよい。合成培地は糖類（グルコース、スクロース等）、血清、酵母エキス、肉エキス、肝臓エキス、ビタミン類、ペプトン、ファイトン、アミノ酸、塩類等で作ることができる。乳酸桿菌はＭＲＳ液体培地等、乳酸球菌はＭ１７液体培地等を基本とした組成物で好気培養を行なえばよく、ビフィドバクテリウム属はＧＡＭブイヨン液体培地等を基本にした組成物で嫌気培養を行なえばよい。乳酸菌は滅菌生理食塩水若しくは緩衝液等の洗浄液で洗浄を繰り返し、培養基質のタンパク部分を１ｐｐｍ以下にすることが望ましいが、乳酸菌体の採取は、例えば次のようにおこなうことができる。培地原料を７５〜１３０℃にて殺菌し、冷却後、予め乳酸菌の前培養して調整した菌を添加する。スターターの添加量は培地に対して０．１〜５％とすることができる。好気性又は嫌気性の条件下で醗酵温度は３０〜４５℃、培養時間は３〜７２時間の範囲でおこなうことができる。発酵した培養物をそのまま使用しても良いし、又は発酵物を遠心分離や限外膜等の装置により菌体を集めた後、無菌のリン酸緩衝液や生理食塩水で必要に応じた回数にて洗浄し、培養基質由来のタンパク質を１ｐｐｍ以下にした後、濃縮しても良いし、これを噴霧乾燥や凍結乾燥することによりスラリー状や粉末にして保存し、これを製造時又は使用時に洗浄組成物に溶かして使用すればよい。本発明の点鼻腔洗浄剤はアレルギー性鼻炎の低減効果を発揮させるためには、乳酸菌の乾燥菌体量中の生菌数がグラム当たり生菌１０^４〜１０^９個を含むことが好ましい。

本発明の鼻腔洗浄剤の使用量は、患者の年齢、症状により適宜調節できるが、噴霧にて洗浄する場合は１回当たり約１〜２ｍｌの液体を数回霧状に噴霧するか、又は綿棒に浸し拭き取り洗浄する場合は１回当たり約０．５〜１．０ｍｌとする。好ましくは１日３〜５回洗浄することにより、本発明の効果を得ることができる。

上述のようにして得られる点鼻腔洗浄組成物は、鼻腔を洗浄するとともに鼻腔粘膜を免疫学的に直接刺激し、又、鼻腔内菌叢を変化させることで、鼻腔の状況を良好にし、クシャミ、鼻水、鼻詰まりのアレルギー性鼻炎を改善する効果を有し、薬の副作用や化学物質の刺激のない点鼻腔洗浄剤を提供することができる。

次に実施例により本発明を説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。尚、以下の実施例における部及び％は特に規定しない限り重量基準である。

Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｉ ＭＲＳ合成培地（Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｋｋｉｎｓｏｎ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｎｙ）を調整し、この１０００ｍｌを１２０℃１５分間滅菌した後、ラクトバチルス・ラムノーサス（ＡＴＣＣ５３１０３株）を予め同培地で前培養したものを１０ｍｌ接種し、３７℃１６時間培養した。この際の乳酸菌数は４．２×１０^８個／ｍｌであった。この培養液１０００ｍｌを３，０００ｒｐｍで１０分間遠心分離して上澄部を捨て菌体を残し、１２０℃、１５分間で滅菌した０．８５％の生理食塩水で洗浄し、再び遠心分離し上澄み液を除去する。この操作を４度以上繰り返し、培養基質のタンパク質を１ｐｐｍ以下とした乳酸菌体を得た。これを凍結乾燥させて、３．６×１０^１０／ｇの乳酸菌の粉末を得た。又、塩化ナトリウム（和光純薬（株））８．５部、蔗糖脂肪酸エステル（三菱化学（株）製リョートーシュガーエステルＳ−１５７０）１０部を水９８１．５部に溶解させ洗浄組成物１０００ｍｌを作成した。この洗浄組成物９０ｇに先の乳酸菌粉末１０ｇを加えて混合し、試験組成物（Ａ）を作成した。

Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｉ ＭＲＳ合成培地（Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｋｋｉｎｓｏｎ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｎｙ製）を調整し、この１０００ｍｌを１２０℃１５分間滅菌した後、ラクトバチルス・アシドフィラス（ＪＣＭ１１３２株）、ラクトバチルス・カゼイ（ＪＣＭ１１３４株）を予め同培地で前培養したものを１０ｍｌずつ接種し、３７℃１６時間培養した。この際の乳酸菌数は６．２×１０^８個／ｍｌであった。実施例１と同様な操作で、培養基質のタンパク質が１ｐｐｍ以下とした乳酸菌体を得た。これを凍結乾燥させ、２．８×１０^１０／ｇの乳酸菌の粉末を得た。又、塩化ナトリウム（和光純薬（株））６部、ポリグリセリン脂肪酸エステル（太陽化学（株）製サンソフトＡ−１２１Ｅ）５部を水９８９部に溶解させ洗浄組成物１０００ｍｌを作成した。洗浄組成物９９．９ｇに乳酸菌粉末０．１ｇを加えて試験組成物（Ｂ）を作成した。

実施例１の試験組成物（Ａ）を綿棒に浸し、５４歳の男性の両鼻腔を拭い取るように塗布した。拭い取る前と２４時間後に生理食塩水に浸された綿棒（日本ベクトン・ディキンソン（株）製ラスパーチェック）にて両鼻腔を拭き取り、これを生理食塩水中でもみ出し培養した。ブドウ球菌はベアード−パッカー（Ｂａｉｒｄ−Ｐａｒｋｅｒ Ａｇａｒ Ｂａｓｅ）検出培地（Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｋｋｉｎｓｏｎ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｎｙ製）、乳酸菌はＢＣＰ培地（栄研化学（株））、総菌数は普通寒天培地（栄研化学（株））で培養して菌数を確認し、その他の菌の割合は総菌数からブドウ球菌と乳酸菌を減じたものである。この結果は表１に示したように、試験組成物（Ａ）で鼻腔内を拭い取りるように塗布した結果、２４時間後の鼻腔内の乳酸菌が増加し、ブドウ球菌が減少したことで、鼻腔内の菌叢が変化したことが実証された。

花粉症にて、クシャミを１０回以上し、鼻水を呈して１日に「鼻をかむ」回数が１０回以上で、鼻詰まりしているアレルギー性鼻炎の５名の男性（１９〜６０歳）のボランティアは実施例１の試験組成物（Ａ）を綿棒に浸し、１週間、朝昼晩３回、鼻腔を拭い取った。クシャミの回数の抑制効果を表２に示し、鼻をかむ回数の抑制の効果を表３に示したが、評価方法は次の基準で集計した。非常に効果あり（７１〜１００％減少）、効果あり（３１〜７０％減少）、効果なし（０±３０％減少又は増加）、悪化（３１〜７０％増加）非常に悪化（７１〜１００％増加）を基準とした。クシャミ回数の抑制効果は表２に示したように、１名に非常に効果があり、４名に効果があり、対象者全員に効果がみられた。又、鼻をかむ回数の抑制効果は表３に示したが、１名に非常に効果があり、４名に効果があり、対象者全員に効果がみられた。鼻詰まりに関しては評価が困難であり自己申告して頂き、全員が改善されたと回答があった。また、試験期間中には問題となる訴えは全くなかった。

比較例１

実施例４と全く同じ対象者に実施例４の試験期間の１週間前、塩化ナトリウム（和光純薬（株））０．８５部、蔗糖脂肪酸エステル（三菱化学（株）製リョートーシュガーエステルＳ−１５７０）１．０部を水９８．１５部に溶解させ１００グラムとしたものを比較組成物（ａ）として、実施例４と同様に１週間、朝昼晩３回鼻腔を拭い取った。クシャミ抑制の効果は表２に示したように、４名に効果がなく、１名が悪化した。鼻をかむ回数の抑制は表３に示したように、４名に効果がなく、１名が悪化した。鼻詰まりに関しては評価が困難であり、自己申告して頂き、全員が改善されなかったと回答があった。

比較例１と同時期に、花粉症にて、クシャミを１０回以上し、鼻水を呈して１日に「鼻をかむ」回数が１０回以上で、鼻詰まりしていたアレルギー性鼻炎の５名の女性（１９〜５７歳）のボランティアは実施例２の試験組成物（Ｂ）を噴霧器にて、１週間、朝昼晩３回、鼻腔に噴霧した。クシャミ回数の抑制効果を表２に示し、鼻をかむ回数の抑制効果を表３に示したが、評価方法は実施例４と同様な基準で集計した。クシャミ回数の抑制効果は表２に示したように、５名に効果があり、対象者全員に効果がみられた。また、鼻をかむ回数の抑制効果は表３に示したように、１名に非常に効果があり、４名に効果があり、対象者全員に効果がみられた。鼻詰まりに関しては評価が困難であり自己申告して頂き、全員が改善されたと回答があった。また、試験期間中には問題となる訴えは全くなかった。

比較例２

実施例５と全く同じ対象者に実施例５の試験期間の１週間前で実施例４と同時期に、塩化ナトリウム（和光純薬（株））０．６部、ポリグリセリン脂肪酸エステル（太陽化学（株）製サンソフトＡ−１２１Ｅ）０．５部を水９８．９部に溶解させ１００グラムとしたものを比較組成物（ｂ）として、実施例５と同様に１週間、朝昼晩３回鼻腔に噴霧した。クシャミ抑制の効果は表２に示したように、全員に効果がなかった。鼻をかむ回数の抑制の効果は表３に示したように、全員に効果がなかった。鼻詰まりに関しては評価が困難であり自己申告して頂き、全員が改善されなかったと回答があった。

以上の結果のごとく、Ａ、Ｂ両試験組成物はクシャミ、鼻水を抑制し、鼻詰まりに関しては全員軽減したとの申告があり、アレルギー性鼻炎の症状を抑制、軽減する効果が認められた。

塩化ナトリウム、乳化剤、乳酸菌と水を組成分とするもので、副作用や刺激がなく、アレルギー性の主症状であるクシャミ、鼻水、鼻詰まりを抑制する日常的に使用できる組成物。

Claims (7)

1. 塩化ナトリウム０．１〜１重量％、乳化剤０．１〜２重量％、乳酸菌及び水を含有することを特徴とする点鼻腔洗浄組成物。
2. 乳化剤がＨＬＢ６から２０である請求項１記載の点鼻腔洗浄組成物。
3. 乳酸菌が０．００１〜５０．０重量％である請求項１又は２記載の点鼻腔洗浄組成物。
4. 乳酸菌が培養基質タンパク質を含まない請求項１〜３項の何れか１項に記載の点鼻腔洗浄組成物。
5. 乳酸菌がグラム当たり生菌１０^４〜１０^９個を含む請求項１〜４項の何れか１項に記載の点鼻腔洗浄組成物。
6. 塩化ナトリウム及び乳化剤を水に溶解した後、無菌にしたものと、乳酸菌を培養後、無菌的に洗浄した菌体を混合することを特徴とする点鼻腔洗浄組成物の製造法。
7. 無菌的に洗浄した菌体が、培養基質タンパク質を含まない請求項６記載の製造方法。