JP2005077338A - 光学的定量方法及び光学的定量装置 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】 局在化が可能な第1反応体と被検物を反応させて得られた結合物を、光標識した第2反応体と反応させ、得られた第1反応体−被検物−第2反応体結合物を、局在化させた後、局在化領域を含む所定の領域のみに光を導入し、標識に基づいて第1反応体−被検物−第2反応体結合物を定量することにより、被検物を定量する。
【選択図】 図1
Description
本発明の光学的定量方法は、被検物、並びに該被検物と特異的に結合する反応部及び該反応部を局在化手段により局在化させることが可能な局在化誘導部を有する第1反応体を含む液体試料中で、前記被検物と前記第1反応体とを反応させる工程;前記液体試料に、前記被検物と特異的に結合する反応部及び光作用成分を有する第2反応体を添加し、前記被検物と第1反応体の結合物(以下、「被検物−第1反応体結合物」という)とを反応させて、被検物−第1反応体結合物と前記第2反応体との結合物(以下、「第1反応体−被検物−第2反応体結合物」という)を得る工程;得られた第1反応体−被検物−第2反応体結合物を、前記局在化誘導部を誘導できる局在化手段により局在化させる工程;前記局在化工程で局在化させた領域を含む所定の領域のみに光を導入する工程;及び前記導入光を、前記所定領域内に存在する前記第2反応体の光作用成分に作用させることにより、前記被検物を定量する工程を含む。
本発明の光学的定量測定装置は、被検物、該被検物と特異的に結合する反応部及び該反応部を局在化手段により局在化させることが可能な局在化誘導部を有する第1反応体、前記被検物と特異的に結合する反応部及び光作用成分を有する第2反応体、並びにこれらの反応結合物を含む液体試料の収容部;該液体試料収容部から第1反応体の局在化誘導部に作用して、第1反応体及び第1反応体結合物を局在化させる局在化手段;前記局在化手段により局在化された第2反応体結合物の光作用成分に作用する光を発光する光源;前記光源からの光を、前記液体試料収容部の特定領域を含む所定の領域にだけ導入する光導入手段;前記第2反応体の光作用成分による作用をうけた光を検出する検出手段を備えている。
2,12 光導波路
3 入射光
7 磁場
9 円形コイル
10 局在化手段
13 光源
14,19 反射ミラー
15,15’ 検出器
16 レンズ
17 コンピュータ
20 フィルター
Claims (18)
- 被検物、並びに該被検物と特異的に結合する反応部及び該反応部を局在化手段により局在化させることが可能な局在化誘導部を有する第1反応体を含む液体試料中で、前記被検物と前記第1反応体とを反応させる工程;
前記液体試料に、前記被検物と特異的に結合する反応部及び光作用成分を有する第2反応体を添加し、前記被検物と第1反応体の結合物(以下、「被検物−第1反応体結合物」という)とを反応させて、被検物−第1反応体結合物と前記第2反応体との結合物(以下、「第1反応体−被検物−第2反応体結合物」という)を得る工程;
得られた第1反応体−被検物−第2反応体結合物を、前記局在化誘導部を誘導できる局在化手段により局在化させる工程;
前記局在化工程で局在化させた領域を含む所定の領域のみに光を導入する工程;及び
前記導入光を、前記所定領域内に存在する前記第2反応体の光作用成分に作用させることにより、前記被検物を定量する工程
を含む被検物の光学的定量方法。 - 被検物が特異的に結合した反応部及び該反応部を局在化手段により局在化させることが可能な局在化誘導部を有する第1反応体と、前記被検物と特異的に結合した反応部及び光作用成分を有する第2反応体との結合物(以下、「第1反応体−被検物−第2反応体結合物」という)を含む液体試料を準備する工程;
前記液体試料中の第1反応体−被検物−第2反応体結合物を、前記局在化誘導部を誘導できる局在化手段により局在化させる工程;
前記局在化工程で局在化させた領域を含む所定領域のみに光を導入する工程;及び
前記導入光を、前記所定の領域内に存在する前記第2反応体の光作用成分に作用させることにより、前記被検物を定量する工程
を含む被検物の光学的定量方法。 - 前記所定の領域に光を導入する工程が、前記局在化工程の前から行われる請求項1又は2に記載の定量方法。
- 前記被検物の定量は、前記局在化工程の前に前記所定の領域に光を導入することによって得られた第1シグナルと、前記局在化工程の後に前記所定の領域に光を導入することによって得られた第2シグナルとの差分を検出することにより行われる請求項3に記載の定量方法。
- 前記光は、近接場光である請求項1〜4のいずれかに記載の定量方法。
- 前記近接場光がエバネッセント光である請求項5に記載の定量方法。
- 前記局在化誘導部は、平均粒径100nm以下の磁性粒子である請求項1〜6のいずれかに記載の定量方法。
- 前記光作用成分は、前記光を受光して発光する発光物質、前記光を受光して散乱する光散乱物質、及び前記光を吸光する吸光物質からなる群より選ばれる1種である請求項1〜7のいずれかに記載の定量方法。
- 前記第1反応体及び第2反応体に用いられる反応部は、抗原、抗体、DNA、RNA、及びアプタマーからなる群より選ばれる1種である請求項1〜8のいずれかに記載の定量方法。
- 2種以上の被検物を定量する方法であって、
各被検物に対応する反応部を有する第1反応体を使用し、
各被検物に対応する反応部及び光作用成分を有する第2反応体を使用し、
各光作用成分から放出される光を検出することにより、各被検物を定量する請求項1〜9のいずれかに記載の定量方法。 - 被検物、該被検物と特異的に結合する反応部及び該反応部を局在化手段により局在化させることが可能な局在化誘導部を有する第1反応体、前記被検物と特異的に結合する反応部及び光作用成分を有する第2反応体、並びにこれらの反応結合物を含む液体試料の収容部;
該液体試料収容部から第1反応体の局在化誘導部に作用して、第1反応体及び第1反応体結合物を局在化させる局在化手段;
前記局在化手段により局在化された第2反応体結合物の光作用成分に作用する光を発光する光源;
前記光源からの光を、前記液体試料収容部の特定領域を含む所定の領域にだけ導入する光導入手段;
前記第2反応体の光作用成分による作用をうけた光を検出する検出手段
を備えた光学的定量装置。 - 前記局在化誘導部が磁性体であって、前記局在化手段が磁場である請求項11に記載の定量装置。
- 前記光導入手段は、近接場光を前記液体試料収容部にしみださせることができる光導波路である請求項11又は12に記載の定量装置。
- 前記近接場光がエバネッセント光である請求項13に記載の定量装置。
- 前記光作用成分が発光物質であって、前記検出手段が該発光物質からの光を受光する受光器である請求項11〜14のいずれかに記載の定量装置。
- 前記発光物質は蛍光物質である請求項15に記載の定量装置。
- 前記光作用成分が吸光物質であって、前記検出手段が前記光導入手段に入射した光源光の出射光を検出する検出装置である請求項11〜14のいずれかに記載の定量装置。
- 前記検出手段の検出結果に応じて、前記磁場発生手段による磁場の発生及び消失を制御する局在化制御手段を、さらに備えている請求項11〜17のいずれかに記載の定量装置。
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