JP2004123753A - α−グリコシルヘスペリジンを含んでなる医薬組成物 - Google Patents

Abstract

【課題】　本発明は、水溶性の改善されたヘスペリジンを配合してなる医薬組成物を提供することを課題とする。
【解決手段】　ヘスペリジンを有効成分とするウィルス性疾患、細菌性疾患、外傷性疾患、免疫疾患、リューマチ、糖尿病も、循環器疾患、または悪性腫瘍のための予防剤又は治療剤において、ヘスペリジンとして、水溶性に優れ、生体内でヘスペリジンとＤ−グルコースとに加水分解される、ヘスペリジンにＤ−グルコース残基が等モル以上α結合しているα−グリコシル　ヘスペリジンを用いることにより前記課題を解決する。
【選択図】　なし

Description

　本発明は、新規α−グリコシル　ヘスペリジンと、その製造方法、並びに用途に関し、更に詳細には、ヘスペリジンにＤ−グルコース残基が等モル以上α結合しているα−グリコシル　ヘスペリジン、および、ヘスペリジンとα−グルコシル糖化合物とを含有する溶液に、糖転移酵素を作用させて、新規α−グリコシル　ヘスペリジンを生成せしめ、これを採取することを特徴とするα−グリコシル　ヘスペリジンの製造方法、並びに、この方法で得られるα−グリコシル　ヘスペリジンを含有せしめることを特徴とする飲料、加工食品などの飲食物、感受性疾患の予防剤、治療剤などの抗感受性疾患剤、美肌剤、色白剤などの化粧品など、各種組成物への用途に関する。

　ヘスペリジンは、次に示す化学構造を有し、毛細血管の強化、出血予防、血圧調整などの生理作用を持つビタミンＰとして、また、黄色色素として古くから知られ、食品、医薬品、化粧品などに利用されている。

　ビタミンＰは、生体内で、ビタミンＣの生理活性、例えば、生体結合組織の主成分であるコラーゲンの合成に必要なプロリンやリジンのヒドロキシル化反応に関与し、また、例えば、チトクロームＣのＦｅ^＋＋＋を還元してＦｅ^＋＋にするなどの酸化還元反応に関与し、更には、白血球増加による免疫増強作用に関与するなどの増強作用が知られており、生体の健康維持、増進に重要な役割をしている。

　ヘスペリジンの用途は、単に栄養素としてのビタミンＰ強化剤にとどまらず、その化学構造、生理作用から、単独で、または他のビタミンなどと併用して、例えば、黄色着色剤、酸化防止剤、安定剤、品質改良剤、紫外線吸収剤などとして飲食物などに、また、ウィルス性疾患、細菌性疾患、循環器疾患、悪性腫瘍など感受性疾患の予防剤、治療剤、すなわち抗感受性疾患剤に、更には、黄色着色剤、安定剤、酸化防止剤、紫外線吸収剤、メラニン生成抑制剤などとして美肌剤、色白剤などの化粧品にまで及び、その用途範囲は極めて広い。

　しかしながら、ヘスペリジンは水に難溶で、室温では５０Ｌの水にわずか１ｇ程度（約０．００２ｗ／ｖ％）しか溶けず、使用上困難を極めている。

　これを改善する方法としては、ヘスペリジンにジメチル硫酸を作用させ、ヘスペリジンをメチル誘導体にして、水溶性を増大する方法が知られている。

　しかしながら、この方法は、有機化学的手法により行われ、反応に有毒なジメチル硫酸を使用することから、得られる誘導体の精製に相当の困難が伴い、その無毒性、安全性の確保、経済性などの点で満足すべきものではなかった。また、得られるメチル誘導体が苦味を有している欠点もある。

　従来のヘスペリジン、またはその誘導体の欠点を解消し、水溶性に優れ、実質的に無味、無臭で、毒性の懸念もなく、加えて、生体内で生理活性を充分発揮しうるヘスペリジン誘導体の実現が強く望まれている。

　本発明は、上記欠点を解消するためのものであって、とりわけ、生化学的手法を利用して、新規ヘスペリジン誘導体を目指して鋭意研究した結果に基づくものである。

　その結果、ヘスペリジンとα−グルコシル糖化合物とを含有する溶液に、糖転移酵素を作用させることにより、水溶性に優れ、実質的に無味、無臭で、毒性の懸念もなく、生体内で容易に加水分解され、ヘスペリジン本来の生理活性を発揮する新規α−グリコシル　ヘスペリジンを生成することを見い出し、その製造方法、並びに飲食物、感受性疾患の予防剤、治療剤、化粧品など、各種組成物への用途を確立して、本発明を完成した。

　また、この糖転移反応により生成したα−グリコシル　ヘスペリジンを精製するに際しては、その反応溶液と多孔性合成吸着剤とを接触させ、その吸着性の違いを利用することにより、容易に精製できることも見い出し、本発明を完成した。

　従って、本発明のα−グリコシル　ヘスペリジンの製造方法は、従来技術の欠点を一挙に解消し、その工業化の実現を極めて容易にするものである。

　本文で述べたごとく、本発明の新規物質であるヘスペリジンにＤ−グルコース残基が等モル以上α結合しているα−グリコシル　ヘスペリジンは、水溶性に優れ、実質的に無味、無臭で、毒性の懸念もなく、生体内で容易にヘスペリジンとＤ−グルコースとに加水分解され、ヘスペリジン本来の生理活性を発揮する。

　また、このα−グリコシル　ヘスペリジンが、ヘスペリジンとα−グルコシル糖化合物とを含有する溶液に、糖転移酵素を作用させる生化学的手法により、容易に生成できることから、経済性に優れ、その工業実施も容易である。

　更に、ヘスペリジンの仕込濃度を高めて反応させることができ、α−グリコシル　ヘスペリジンの濃度を、容易に高濃度に生成しうることを見い出し、併せて、この反応液の精製に際して、反応液を多孔性合成吸着剤と接触させてα−グリコシル　ヘスペリジンを精製できることも見い出したことにより、α−グリコシル　ヘスペリジンの大量製造を、極めて容易にするものである。

　また、このようにして得られるα−グリコシル　ヘスペリジンは、水溶性良好、耐光性・安定性良好、充分な生理活性を発揮するなどの特徴を有しており、安全性の高い天然型のビタミンＰ強化剤としてばかりでなく、黄色着色剤、酸化防止剤、安定剤、品質改良剤、予防剤、治療剤、紫外線吸収剤、劣化防止剤などとして、飲食物、嗜好物、飼料、餌料、抗感受性疾患剤、美肌剤、色白剤などの化粧品、更には、プラスチック製品など、各種組成物への用途に有利に利用される。

　従って、本発明によるα−グリコシル　ヘスペリジンの工業的製造法と、その用途の確立は、飲食品、化粧品、医薬品、プラスチック産業における工業的意義が極めて大きい。

　以下、本発明を、詳細に説明する。

　本発明に用いるヘスペリジンとしては、高度に精製されたヘスペリジンに限る必要はなく、ヘスペリジンと、例えば、シトロニン、ナリンジン、ルチンなどのフラボノイド配糖体との混合物、更には、ヘスペリジンを含有している各種植物由来の抽出物、ジュース、またはその部分精製物などが、適宜使用できる。

　植物組織としては、例えば、柑橘類の果実、果皮、未熟果などが、有利に利用できる。

　本発明に用いるα−グルコシル糖化合物としては、同時に用いる糖転移酵素によってヘスペリジンからα−グリコシル　ヘスペリジンを生成することのできるものであればよく、例えば、アミロース、デキストリン、シクロデキストリン、マルトオリゴ糖などの澱粉部分加水分解物、更には、液化澱粉、糊化澱粉などが、適宜選ばれる。

　従って、α−グリコシル　ヘスペリジンの生成を容易にするためには、糖転移酵素に好適なα−グルコシル糖化合物が選ばれる。

　例えば、糖転移酵素として、α−グルコシダーゼ（ＥＣ　３．２．１．２０）を用いる際には、マルトース、マルトトリオース、マルトテトラオースなどのマルトオリゴ糖、またはＤＥ約１０乃至７０の澱粉部分加水分解物などが好適であり、シクロマルトデキストリン　グルカノトランスフェラーゼ（ＥＣ　２．４．１．１９）を用いる際には、シクロデキストリンまたはＤＥ１以下の澱粉糊化物からＤＥ約６０の澱粉部分加水分解物などが好適であり、α−アミラーゼ（ＥＣ　３．２．１．１）を用いる際には、ＤＥ１以下の澱粉糊化物からＤＥ約３０のデキストリン、澱粉部分加水分解物などが、好適である。

　また、反応時のα−グルコシル糖化合物濃度は、ヘスペリジンに対して約０．５乃至５０倍の範囲が、好適である。

　反応時のヘスペリジン含有液は、ヘスペリジンをできるだけ高濃度に含有するものが望ましく、例えば、ヘスペリジンを、懸濁状で、または、高温で溶解させた、もしくはｐＨ７．０を越えるアルカリ側ｐＨで溶解させた溶液状で、ヘスペリジンを高濃度に含有する溶液が適しており、そのヘスペリジンの濃度は約０．００５ｗ／ｖ％以上の高濃度、望ましくは、約０．０１乃至１０．０ｗ／ｖ％含有している溶液を意味する。

　本発明に用いる糖転移酵素は、ヘスペリジンと、この酵素に好適な性質のα−グルコシル糖化合物とを、含有する溶液に作用させる時、ヘスペリジンを分解せずにα−グリコシル　ヘスペリジンを生成するものであればよい。

　例えば、α−グルコシダーゼは、ブタの肝臓、ソバの種子などの動、植物組織由来の酵素、または、ムコール（Ｍｕｃｏｒ）属、ペニシリウム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）属などに属するカビ、またはサッカロミセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）属などに属する酵母などの微生物を栄養培地で培養し得られる培養物由来の酵素が、シクロマルトデキストリン　グルカノトランスフェラーゼは、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属、クレブシーラ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ）属などに属する細菌培養物由来の酵素が、α−アミラーゼは、バチルス属などに属する細菌、または、アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）属などに属するカビ培養物由来の酵素などが、適宜選択できる。これらの糖転移酵素は、前記の条件を満足しさえすれば、必ずしも精製して使用する必要はなく、通常は、粗酵素で本発明の目的を達成することができる。

　必要ならば、公知の各種方法で精製して使用してもよい。また、市販の糖転移酵素を利用することもできる。使用酵素量と反応時間とは、密接な関係があり、通常は、経済性の点から約５乃至８０時間で反応を終了するように酵素量が選ばれる。また、固定化された糖転移酵素をバッチ式で繰り返し、反応に、または連続式で連続的反応に利用することも、適宜選択できる。

　本発明の反応方法は、ヘスペリジンの仕込濃度を高めた状態で、糖転移酵素を作用させるのが望ましい。例えば、ヘスペリジンを懸濁状で反応せしめる場合には、約０．１乃至２．０ｗ／ｖ％の懸濁状ヘスペリジンと適量のα−グルコシル糖化合物とを含有するヘスペリジン高含有液を、ｐＨ約４．５乃至６．５とし、糖転移酵素が作用しうるできるだけ高温、具体的には、約７０乃至９０℃に維持し、これに糖転移酵素を作用させると、ヘスペリジンがα−グリコシル　ヘスペリジンに変換するにつれて懸濁状ヘスペリジンが徐々に溶解し、同時に、α−グリコシル　ヘスペリジンが容易に高濃度に生成する。

　また、例えば、ヘスペリジンをｐＨ７．０を越えるアルカリ側で反応する場合には、ｐＨ約７．５乃至１０．０の水に約０．２乃至５．０ｗ／ｖ％のヘスペリジンを加熱溶解し、これに適量のα−グルコシル糖化合物を溶解して得られるヘスペリジン高含有液を、糖転移酵素の作用しうるできるだけ高ｐＨ、高温、具体的には、ｐＨ約７．５乃至１０．０、温度約５０乃至８０℃に維持し、これに糖転移酵素を作用させるとα−グリコシル　ヘスペリジンを容易に、高濃度に生成する。この際、アルカリ性溶液中のヘスペリジンは、分解を起しやすいので、これを防ぐため、できるだけ遮光、嫌気下に維持するのが望ましい。必要ならば、Ｌ−アスコルビン酸、エリソルビン酸などの酸化防止剤を共存させてもよい。

　更に、前記条件を組み合せる方法、例えば、約０．５乃至１０．０ｗ／ｖ％のヘスペリジンと適量のα−グルコシル糖化合物とを含有するヘスペリジン高含有液をｐＨ約７．５乃至１０．０、温度約５０乃至８０℃に維持し、これに糖転移酵素を作用させると、α−グリコシル　ヘスペリジンを容易に、高濃度に生成する。

　また、ヘスペリジンとして、例えば、約０．１乃至１．０規定のカセイソーダ水溶液、カセイカリ水溶液、炭酸ソーダ水溶液、水酸化カルシウム水、アンモニア水などの強アルカリ性水溶液に、約０．５乃至１０．０ｗ／ｖ％の高濃度に溶解させたものを用い、これに塩酸、硫酸などの酸性水溶液を加えて、酵素が作用し得るｐＨ、望ましくはｐＨ７．０を越えるｐＨに調整するとともに、α−グルコシル糖化合物を加え、直ちに、糖転移酵素を作用させることは、α−グリコシル　ヘスペリジンを容易に高濃度に生成させることができるので、極めて好都合である。

　この際、せっかく高濃度に溶解させたヘスペリジン溶液も、酸性水溶液でｐＨを調整するとヘスペリジンが析出を起し易いので、そのｐＨ調整前に、α−グルコシル糖化合物や少量のα−グリコシル　ヘスペリジンなどを共存させて、ヘスペリジンの析出を抑制しつつ糖転移反応を開始することも有利に実施できる。

　また、更に必要ならば、反応前のヘスペリジンの溶解度を高め、ヘスペリジンへの糖転移反応を容易にするために、ヘスペリジン高含有液に水と互いに溶解しうる有機溶媒、例えば、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、ｉｓｏ−プロパノール、ｎ−ブタノール、アセトール、アセトンなどの低級アルコール、低級ケトンなどを共存させることも、適宜選択できる。

　また、糖転移反応により生成せしめた比較的高分子のα−グリコシル　ヘスペリジンは、必要により、そのままで、または、多孔性合成吸着樹脂により精製した後、グルコアミラーゼ（ＥＣ　３．２．１．３）、またはβ−アミラーゼ（ＥＣ　３．２．１．２）などのアミラーゼによって部分加水分解し、α−グリコシル　ヘスペリジンのα−Ｄ−グルコシル基の数を低減させることができる。例えば、グルコアミラーゼを作用させる場合には、α−マルトシル　ヘスペリジン以上の高分子物を加水分解し、グルコースを生成するとともにα−グルコシル　ヘスペリジンを蓄積生成させることができ、また、β−アミラーゼを作用させる場合には、α−マルトトリオシル　ヘスペリジン以上の高分子物を加水分解し、マルトースを生成するとともに、主にα−グルコシル　ヘスペリジンとα−マルトシル　ヘスペリジンとの混合物を、蓄積生成させることができる。

　前述のようにしてα−グリコシル　ヘスペリジンを生成せしめた反応溶液は、そのままでα−グリコシル　ヘスペリジン製品にすることもできる。通常は、反応溶液を濾過、濃縮してシラップ状の、更には、乾燥、粉末化して粉末状のα−グリコシル　ヘスペリジン製品にする。

　本製品は、ビタミンＰ強化剤としてばかりでなく、安全性の高い天然型の黄色着色剤、酸化防止剤、安定剤、品質改良剤、予防剤、治療剤、紫外線吸収剤などとして、飲食物、嗜好物、飼料、餌料、抗感受性疾患剤、化粧品、プラスチック製品など、各種組成物への用途に、有利に利用できる。

　更に、精製されたα−グリコシル　ヘスペリジン製品を製造する場合には、多孔性合成吸着剤による吸着性の差を利用してα−グリコシル　ヘスペリジンとα−グルコシル糖化合物などの夾雑物とを分離して精製すればよい。

　本発明でいう多孔性合成樹脂とは、多孔性で広い吸着表面積を有し、かつ非イオン性のスチレン−ジビニルベンゼン重合体、フェノール−ホルマリン樹脂、アクリレート樹脂、メタアクリレート樹脂などの合成樹脂であり、例えば、市販されているＲｏｈｍ　＆　Ｈａａｓ社製造の商品名アンバーライトＸＡＤ−１、アンバーライトＸＡＤ−２、アンバーライトＸＡＤ−４、アンバーライトＸＡＤ−７、アンバーライトＸＡＤ−８、アンバーライトＸＡＤ−１１、アンバーライトＸＡＤ−１２、三菱化成工業株式会社製造の商品名ダイヤイオンＨＰ−１０、ダイヤイオンＨＰ−２０、ダイヤイオンＨＰ−３０、ダイヤイオンＨＰ−４０、ダイヤイオンＨＰ−５０、ＩＭＡＣＴＩ社製造の商品名イマクティＳｙｎ−４２、イマクティＳｙｎ−４４、イマクティＳｙｎ−４６などがある。

　本発明のα−グリコシル　ヘスペリジンを生成せしめた反応液の精製方法は、反応液を、例えば、多孔性合成吸着剤を充填したカラムに通液すると、α−グリコシル　ヘスペリジンおよび比較的少量の未反応ヘスペリジンが多孔性合成吸着剤に吸着するのに対し、多量に共存するα−グルコシル糖化合物、水溶性糖類は吸着されることなく、そのまま流出する。

　必要ならば、糖転移酵素の反応終了後、多孔性合成吸着剤に接触させるまでの間に、例えば、反応液を加熱して生じる不溶物を濾過して除去したり、ケイ酸アルミン酸マグネシウム、アルミン酸マグネシウムなどで処理して反応液中の蛋白性物質などを吸着除去したり、強酸性イオン交換樹脂（Ｈ型）、中塩基性または弱塩基性イオン交換樹脂（ＯＨ型）などで処理して脱塩するなどの精製方法を組み合せて、利用することも随意である。

　前述のようにして、多孔性合成吸着剤カラムに選択的に吸着したα−グリコシル　ヘスペリジンと比較的少量の未反応ヘスペリジンとは、希アルカリ、水などで洗浄した後、比較的少量の有機溶媒または有機溶媒と水との混合液、例えば、メタノール水、エタノール水などを通液すれば、まず、α−グリコシル　ヘスペリジンが溶出し、通液量を増すか有機溶媒濃度を高めるかすれば未反応ヘスペリジンが溶出してくる。

　このα−グリコシル　ヘスペリジン高含有溶出液を蒸溜処理して、まず有機溶媒を溜去した後、適当な濃度にまで濃縮すればα−グリコシル　ヘスペリジンを主成分とするシラップ状製品が得られる。更に、これを乾燥し粉末化することによって、α−グリコシル　ヘスペリジンを主成分とする粉末状製品が得られる。

　この有機溶媒によるα−グリコシル　ヘスペリジンおよび未反応ヘスペリジンの溶出操作は、同時に、多孔性合成吸着剤の再生操作にもなるので、この多孔性合成吸着剤の繰り返し使用を可能にする。

　また、本発明の多孔性合成吸着剤による精製は、α−グルコシル糖化合物、水溶性糖類だけでなく、水溶性の塩類などの夾雑物も同時に除去できる特長を有している。このようにして得られるα−グリコシル　ヘスペリジンは、次の特長を有している。

（１）ヘスペリジンと比較してα−グリコシル　ヘスペリジンは、水溶性が極めて大きい。また、α−グリコシル　ヘスペリジンは、ヘスペリジン含有水溶液からのヘスペリジンの析出を抑制し、該溶液の白濁を防止する。このことから、α−グリコシル　ヘスペリジンは、柑橘類果汁に含まれるヘスペリジンの析出を抑制し、白濁を防止することのできる安定剤として有利に利用できる。
（２）ヘスペリジンと比較してα−グリコシル　ヘスペリジンは、耐光性、安定性が大きい。
（３）α−グリコシル　ヘスペリジンは、体内の酵素によりヘスペリジンとグルコースとに加水分解され、ヘスペリジン本来の生理活性（ビタミンＰ）を示す。ま、α−グリコシル　ヘスペリジンは、チアミン、リボフラビン、ビタミンＣ、ビタミンＥなど他のビタミンや酸化防止剤の場合とは違って、実質的に無味、無臭であって、変色、褐変、異臭発生の懸念もなく安心して利用でき、α−グリコシル　ヘスペリジンを、ビタミンや酸化防止剤の１種または２種以上と併用することも好都合である。また、ビタミンＣとの併用により、それらの持つ生理活性を増強させることができる。
（４）α−グルコシル糖化合物を含有する製品の場合には、α−グリコシル　ヘスペリジンの効果を発揮するのみならず、α−グルコシル糖化合物が賦形、増量効や、甘味効果を発揮することができ、また、α−グルコシル糖化合物を除去した精製製品の場合には、ほとんど賦形、増量することなくα−グリコシル　ヘスペリジンの効果を発揮することができ、また、実質的に無味、無臭なので自由に調味、調香することができる。

　これらの特長から、α−グリコシル　ヘスペリジンは安全性の高い天然型のビタミンＰ強化剤としてばかりでなく、黄色着色剤、酸化防止剤、安定剤、品質改良剤、ウィルス性疾患、細菌性疾患、循環器疾患、悪性腫瘍など感受性疾患の予防剤、治療剤、紫外線吸収剤などとして、飲食物、嗜好物、飼料、餌料、抗感受性疾患剤、美肌剤、色白剤などの化粧品、更には、プラスチック製品など、各種組成物への用途に有利に利用することができる。

　またα−グリコシル　ヘスペリジンは、酸味、塩から味、渋味、旨味、苦味などの呈味を有する各種物質ともよく調和し、耐酸性、耐熱性も大きいので、普通一般の飲食物、嗜好物、例えば、調味料、和菓子、洋菓子、氷菓、飲料、スプレッド、ペースト、漬物、ビン缶詰、畜肉加工品、魚肉・水産加工品、乳・卵加工品、野菜加工品、果実加工品、穀類加工品など、広い範囲に利用することができる。また、家畜、家禽、蜜蜂、蚕、魚などの飼育動物のための飼料、餌料などにビタミンＰ強化剤、嗜好性向上などの目的で配合して利用することも、好都合である。　

　その他、タバコ、トローチ、肝油ドロップ、複合ビタミン剤、口中清涼剤、口中香錠、うがい薬、経管栄養剤、内服薬、注射剤、練歯みがき、口紅、リップクリーム、日焼け止めなど各種固状、ペースト状、液状の嗜好物、感受性疾患の予防剤、治療剤、すなわち、抗感受性疾患剤、美肌剤、色白剤などの化粧品などに配合して利用することも、有利に実施でき、更には、紫外線吸収剤、劣化防止剤などとして、プラスチック製品などに配合して利用することも、有利に実施できる。

　また、本発明でいう感受性疾患とは、α−グリコシル　ヘスペリジンによって予防され若しくは治療される疾患であり、それが、例えば、ウィルス性疾患、細菌性疾患、外傷性疾患、免疫性疾患、リューマチ、糖尿病、循環器疾患、悪性腫瘍などであってもよい。α−グリコシル　ヘスペリジンの感受性疾患予防剤、治療剤は、その目的に応じてその形状を自由に選択できる。例えば、噴霧剤、点眼剤、点鼻剤、うがい剤、注射剤などの液剤、軟膏、はっぷ剤、クリームのようなペースト剤、粉剤、顆粒、カプセル剤、錠剤などの固剤などである。製剤に当たっては、必要に応じて、他の成分、例えば、治療剤、生理活性物質、抗生物質、補助剤、増量剤、安定剤、着色剤、着香剤などの１種また２種以上と併用することも、随意である。

　投与量は、含量、投与経路、投与頻度などによって、適宜調節することができる。通常、α−グリコシル　ヘスペリジンとして、成人１日当り、約０．００１乃至１０．０グラムの範囲が好適である。

　また、化粧品の場合も、大体、前述の予防剤、治療剤に準じて、利用することができる。

　α−グリコシル　ヘスペリジンを利用する方法としては、それら各種組成物の製品が、完成するまでの工程で、例えば、混和、混捏、溶解、浸漬、浸透、散布、塗布、噴霧、注入など、公知の方法が、適宜選ばれる。

　以下、本発明のα−グリコシル　ヘスペリジンの一例を実験で説明する。

（実験１）
＜α−グリコシル　ヘスペリジンの調製＞
（１）糖転移反応
　ヘスペリジン１重量部およびデキストリン（ＤＥ２０）６重量部に水５，０００重量部を加えて加熱、溶解し、これにバチルス・ステアロサーモフィルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）由来のシクロマルトデキストリン　グルカノトランスフェラーゼ（株式会社林原生物化学研究所販売）をデキストリングラム当り２０単位加え、ｐＨ６．０、７０℃に維持して１８時間反応させ、ヘスペリジンの約７０％をα−グリコシル　ヘスペリジンに転換し、その後、加熱失活させ、α−グリコシル　ヘスペリジンとともに未反応ヘスペリジンを含有する反応液を得た。

（２）精製
　（１）の方法で得た反応液を濾過し、濾液を多孔性合成吸着剤、商品名ダイヤイオンＨＰ−１０（三菱化成工業株式会社販売）を充填したカラムにＳＶ２で通液した。このカラムを水で洗浄した後、５０ｖ／ｖ％エタノールを通液し、この溶出液を濃縮して溶媒を溜去し、粉末化して淡黄色のα−グリコシル　ヘスペリジン標品［Ｉ］を原料のヘスペリジン重量に対して約１３０％の収率で得た。

（３）アミラーゼによる加水分解
　（２）の方法で得たα−グリコシル　ヘスペリジン標品［Ｉ］を水に１ｗ／ｖ％に溶解し、これにグルコアミラーゼ（ＥＣ　３．２．１．３、生化学工業株式会社販売）を該標品グラム当り１００単位加え、ｐＨ５．０、５５℃に維持して５時間反応させた。反応液を加熱して酵素を失活させ、濾過し、濾液を多孔性合成吸着剤、商品名ダイヤイオンＨＰ−１０（三菱化成工業株式会社販売）のカラムにＳＶ２で通液した。その結果、溶液中のα−グリコシル　ヘスペリジンと未反応ヘスペリジンとが多孔性合成吸着剤に吸着し、グルコース、塩類などは吸着することなく流出した。次いで、カラムを水で通液、洗浄した後、エタノール水溶液濃度を段階的に高めながら通液し、α−グリコシル　ヘスペリジン画分を採取し、減圧濃縮し、粉末化して、淡黄色のα−グリコシル　ヘスペリジン標品［ＩＩ］を固形物当り原料のヘスペリジン重量に対して約７０％の収率で得た。

　また、グルコアミラーゼに代えて、β−アミラーゼ（ＥＣ　３．２．１．２、生化学工業株式会社販売）を用いて、前述の方法に準じて、α−グリコシル　ヘスペリジン標品［Ｉ］を加水分解し、精製、濃縮、粉末化して、淡黄色のα−グリコシル　ヘスペリジン標品［ＩＩＩ］を原料のヘスペリジン重量に対して約７０％の収率で得た。

（実験２）
＜α−グリコシル　ヘスペリジンの理化学的性質＞
（１）水溶性の向上
　実験１（１）の方法で糖転移反応し調製したα−グリコシル　ヘスペリジン含反応液と、この方法で用いる酵素を予め加熱失活させて実験１（１）の方法に準じて処理した対照液とを、４℃の冷室に２日間放置したところ、対照液では、ヘスペリジンが析出して白濁したのに対し、α−グリコシル　ヘスペリジン含有反応液は透明のままであった。

　従って、糖転移反応により生成したα−グリコシル　ヘスペリジンは、水溶性が著しく向上している。換言すれば、α−グリコシル　ヘスペリジンは、水溶液中に共存する未反応ヘスペリジンの析出を抑制し、該溶液の白濁を防止している。

（２）溶剤に対する溶解性
　α−グリコシル　ヘスペリジン標品は、水、０．１規定カセイソーダ、０．１定塩酸に易溶、メタノール、エタノールに微溶、エーテル、ベンゼン、クロロホルムに不溶。

（３）　紫外線吸収スペクトル
　α−グリコシル　ヘスペリジン標品を０．１規定カセイソーダ溶液に溶解して紫外線吸収スペクトルを調べたところ、標品［Ｉ］、標品［ＩＩ］および標品［ＩＩＩ］のいずれも、ヘスペリジンの場合と同じ２８６ｎｍ付近に吸収極大を有していた。

（４）　赤外線吸収スペクトル
　ＫＢｒ錠剤法によって、α−グリコシル　ヘスペリジン標品の赤外線吸収スペトルを調べた。α−グリコシル　ヘスペリジン標品［Ｉ］の結果を第１図に、標品［ＩＩ］の結果を第２図に示す。

（５）加水分解に対する安定性
（ａ）α−グリコシル　ヘスペリジン標品は、ブタの肝臓由来のα−グルコシダーゼ（ＥＣ　３．２．１．２０）により加水分解され、ヘスペリジンとＤ−グルコスとを生成する。
（ｂ）β−グルコシダーゼによっては加水分解されない。

（６）薄層クロマトグラフィー
　　（ａ）分析方法
　　　　プレート；メルク社製、
　　　　　　　　　商品名キーゼルゲル６０Ｆ_２５４
　　　　展開溶媒；ｎ−ブタノール：酢酸：水＝４：２：１
　　　　発色剤　；１ｗ／ｗ％硫酸第二セリウム１０ｗ／ｗ％硫酸水溶液
　　（ｂ）分析結果
　　　　α−グリコシル　ヘスペリジン標品を分析したところ、標品［Ｉ］の場合には、Ｒｆ０．６９のヘスペリジンのスポット以外に、新たに、Ｒｆ０．４８、０．３４、０．２２、０．１６、０．１０、０．０４および原点にスポットが認められ、標品［ＩＩ］の場合には、Ｒｆ０．４８のスポットが認められ、標品［ＩＩＩ］の場合には、Ｒｆ０．４８、０．３４のスポットが認められた。

　以上の理化学的性質から、標品［Ｉ］、標品［ＩＩ］および標品［ＩＩＩ］に含まれるＲｆ０．４８を示す物質は、ヘスペリジン１モルにＤ−グルコース残基が１モルα結合したα−グルコシル　ヘスペリジン（別名、ヘスペリジンモノグルコサイド）と判断され、標品［Ｉ］および標品［ＩＩＩ］に含まれるＲｆ０．３４を示す物質は、ヘスペリジン１モルにＤ−グルコースが２モルα結合したα−ジグルコシル　ヘスペリジン（別名、ヘスペリジンジグルコサイド）と判断され、同様に、標品［Ｉ］に含まれるＲｆ０．２２以下の複数のスポットを示す物質は、ヘスペリジン１モルにＤ−グルコース残基が３モル以上α結合したα−オリゴグルコシル　ヘスペリジンであると判断される。

　このように、本願発明のα−グリコシル　ヘスペリジンは、ヘスペリジンにＤ−グルコース残基が等モル以上α結合した水溶性良好な新規ヘスペリジン糖誘導体であって、生体内に摂取されると、α−グルコシダーゼによって容易に加水分解され、ヘスペリジン本来の生理活性を発揮する。

（実験３）
＜急性毒性＞
　７周令のｄｄ系マウスを使用して、実験１（２）の方法で調製したα−グリコシル　スペリジン標品［Ｉ］を経口投与して、急性毒性テストをしたところ、体重１ｋｇ当たり、５ｇまで死亡例は見られなかった。従って、本物質の毒性は極めて低い。なお、実験１（３）の方法で調製したα−グリコシル　ヘスペリジン標品［ＩＩ］を用いて同様に本テストを行ったところ、前述と同様の結果が得られ、毒性が極めて低いことが、判明した。

　以下、本発明の実施例として、α−グリコシル　ヘスペリジンの製造例を実施例Ａで、α−グリコシル　ヘスペリジンの各種組成物への用途例を実施例Ｂで述べる。

（実施例Ａ−１）
＜α−グリコシル　ヘスペリジン＞
　ヘスペリジン１重量部を１規定カセイソーダ溶液４重量部で溶解し、これに０．０１規塩酸溶液を加えて中和するとともにデキストリン（ＤＥ１０）４重量部を加え、直ちにバチルス・ステアロサーモフィルス由来のシクロマルトデキストリン　グルカノトランスフェラーゼ（株式会社林原生物化学研究所販売）をデキストリングラム当り２０単位加え、ｐＨ６．０、７５℃に維持して、攪拌しつつ２４時間反応させた。反応液を薄層クロマトグラフィーで分析したところ、ヘスペリジンの約７０％が、α−グルコシル　ヘスペリジン、α−ジグルコシル　ヘスペリジン、α−トリグルコシルヘスペリジン、α−テトラグルコシル　ヘスペリジン、α−ペンタグルコシル　ヘスペリジンなどのα−グリコシル　ヘスペリジンに転換していた。反応液を加熱して酵素を失活させ、濾過し、濾液を、常法に従って、イオン交換樹脂（Ｈ型およびＯＨ型）で脱塩精製し、濃縮して、シラップ状のα−グルコシル糖化合物を含有するα−グリコシル　ヘスペリジン製品を、固形物当り原料重量に対して約９０％の収率で得た。

　本品は、ビタミンＰ強化剤としてばかりでなく、安全性の高い天然型の黄色着色剤、酸化防止剤、安定剤、品質改良剤、予防剤、治療剤、紫外線吸収剤などとして、飲食物、嗜好物、飼料、餌料、抗感受性疾患剤、化粧品、プラスチック製品など、各種組成物への用途に有利に利用できる。

（実施例Ａ−２）
＜α−グルコシル　ヘスペリジン＞
　実施例Ａ−１の方法に準じて調製したシラップ状のα−グルコシル糖化合物を有するα−グリコシル　ヘスペリジン製品１重量部を水４重量部に溶解し、これにグルコアミラーゼ（ＥＣ　３．２．１．３、生化学工業株式会社販売）をα−グリコシル　ヘスペリジン製品固形物グラム当り１００単位加え、５０℃、５時間反応させた。反応液を薄層クロマトグラフィーで分析したところ、α−グリコシル　ヘスペリジンは、α−グルコシル　ヘスペリジンに転換していた。

　反応液を加熱して酵素を失活させ、濾過し、濾液を多孔性合成吸着剤、商品名ダイヤイオンＨＰ−１０（三菱化成工業株式会社販売）のカラムにＳＶ２で通液した。その結果、溶液中のα−グルコシル　ヘスペリジンと未反応ヘスペリジンとが多孔性合成吸着剤に吸着し、グルコース、塩類などは吸着することなく流出した。次いで、カラムを水で通液、洗浄した後、エタノール水溶液濃度を段階的に高めながら通液し、α−グルコシル　ヘスペリジン画分を採取し、減圧濃縮し、粉末化して、粉末状のα−グルコシル　ヘスペリジンを固形物当り原料のヘスペリジン重量に対して約６０％の収率で得た。

　α−グルコシル　ヘスペリジンを酸で加水分解したところ、ヘスペリジン１モルに対し、Ｌ−ラムノース１モル、Ｄ−グルコース２モルを生成し、また、α−グルコシル　ヘスペリジンに、ブタの肝臓から抽出し部分精製したα−グルコシダーゼを作用させると、ヘスペリジンとＤ−グルコースとに加水分解されることが判明した。

　本α−グルコシル　ヘスペリジンは、高度に精製された水溶性の高いビタミンＰ強化剤として、また、黄色着色剤、酸化防止剤、安定剤、品質改良剤、予防剤、治療剤、紫外線吸収剤などとして、飲食物、嗜好物、抗感受性疾患剤、化粧品など、各種組成物への用途に、有利に利用できる。

（実施例Ａ−３）
＜α−グリコシル　ヘスペリジン＞
　ヘスペリジン１重量部を水５００重量部にｐＨ９．５で加熱溶解し、別にデキストリン（ＤＥ８）１０重量部を水１０重量部に加熱溶解し、次いで、これら溶液を混合し、これにシクロマルトデキストリン　グルカノトランスフェラーゼを、デキストリングラム当り３０単位加え、ｐＨ８．２、６５℃に維持して、攪拌しつつ４０時間反応させた。反応液を薄層クロマトグラフィーで分析したところ、ヘスペリジンの約８０％がα−グリコシル　ヘスペリジンに転換していた。反応液を加熱して酵素を失活させた後、濾過し、濾液を多孔性合成吸着剤、商品名アンバーライトＸＡＤ−７（Ｒｏｈｍ　＆　Ｈａａｓ社製造）のカラムにＳＶ１．５で通液した。

　その結果、溶液中のα−グリコシル　ヘスペリジンと未反応ヘスペリジンとが多孔性合成吸着剤に吸着し、デキストリン、オリゴ糖、塩類などは吸着することなく流出した。このカラムを水で通液、洗浄した後、５０ｖ／ｖ％メタノールを通液して、α−グリコシル　ヘスペリジンおよびヘスペリジンを溶出し、これを濃縮し、粉末化して、粉末状α−グリコシル　ヘスペリジン製品を原料のヘスペリジン重量に対して約１２０％の収率で得た。

　本品は、水溶性の高いビタミンＰ強化剤としてばかりでなく、安全性の高い天然型の黄色着色剤、酸化防止剤、安定剤、品質改良剤、予防剤、治療剤、紫外線吸収剤などとして、飲食物、嗜好物、飼料、餌料、抗感受性疾患剤、化粧品、プラスチック製品など、各種組成物への用途に有利に利用できる。

（実施例Ａ−４）
＜α−グリコシル　ヘスペリジン＞
（１）α−グルコシダーゼ標品の調製
　マルトース４ｗ／ｖ％、リン酸１カリウム０．１ｗ／ｖ％、硝酸アンモニウム０．１ｗ／ｖ％、硫酸マグネシウム０．０５ｗ／ｖ％、塩化カリウム０．０５ｗ／ｖ％、ポリペプトン０．２ｗ／ｖ％、炭酸カルシウム１ｗ／ｖ％（別に、乾熱滅菌して、植菌時には無菌的に添加する。）および水からなる液体培地５００重量部に、ムコール・ジャバニカス（Ｍｕｃｏｒ　ｊａｖａｎｉｃｕｓ）ＩＦＯ　４５７０を温度３０℃で、４４時間振盪培養した。培養終了後、菌糸体を採取し、その湿菌糸体４８重量部に対し、０．５Ｍ酢酸緩衝液（ｐＨ５．３）に溶解した４Ｍ尿素液５００重量部を加え、３０℃で４０時間静置した後、遠心分離した。この上清を流水中で一夜透析した後、硫安０．９飽和とし、４℃で一夜放置して生成した塩析物を濾取し、０．０１Ｍ酢酸緩衝液（ｐＨ５．３）５０重量部に懸濁溶解した後、遠心分離して上清を採取し、α−グルコシダーゼ標品とした。

（２）α−グリコシル　ヘスペリジンの調製
　ヘスペリジン５重量部を０．５規定カセイソーダ溶液１００重量部に加熱溶解し、これに０．０１規定塩酸溶液を加えてｐＨ９．５にするとともに、デキストリン（ＤＥ３０）２０重量部を加え、直ちに（１）の方法で調製したα−グルコシダーゼ標品１０重量部を加え、ｐＨ８．５に維持して攪拌しつつ５５℃で４０時間反応させた。反応液を薄層ペーパークロマトグラフィーで分析したところ、ヘスペリジンの約０％がα−グリコシル　ヘスペリジンに転換していた。反応液を実施例３と同様に精製し、濃縮、粉末化して粉末状α−グリコシル　ヘスペリジン製品を原料のヘスペリジン重量に対して約１１０％の収率で得た。

　本品は、実施例Ａ−３の場合と同様に、水溶性の高いビタミンＰ強化剤としてばかりでなく、安全性の高い天然型の黄色着色剤、酸化防止剤、安定剤、品質改良剤、予防剤、治療剤、紫外線吸収剤などとして、各種組成物への用途に利用できる。

（実施例Ｂ−１）
＜ハードキャンディー＞
　還元麦芽糖水飴（林原商事株式会社販売、登録商標マビット）１，５００重量部を加熱、減圧下で水分約２％以下になるまで濃縮し、これにクエン酸１５重量部および実施例Ａ−３の方法で得た粉末状α−グリコシル　ヘスペリジン１重量部および少量のレモン香料を混和し、次いで常法に従って、成形、包装してハードキャンディーを得た。

　本品は、ビタミンＰを強化した黄色のレモンキャンディーであって、低う蝕性、低カロリーである。

（実施例Ｂ−２）
＜フキの水煮＞
　フキを皮むきし、適当な長さに切断して、薄い食塩水に数時間浸し、これを実施例Ａ−１の方法で得たシラップ状α−グリコシル　ヘスペリジンと青色１号とを配合して調製した緑色着色料を含有する液で煮込んで、緑色の鮮かなフキの水煮を得た。

　本品は、各種和風料理の材料として色どりを添えるとともに、食物繊維としての生理効果をも発揮する。

（実施例Ｂ−３）
＜求肥＞
　モチ種澱粉１重量部に水１．２重量部を混合し、加熱糊化しつつ、これに砂糖１．５重量、結晶性β−マルトース（林原株式会社製造、登録商標サンマルト）０．７重量部、水飴０．３重量部および実施例Ａ−１の方法で得たシラップ状α−グリコシル　ヘスペリジン０．２重量部を混和し、以後、常法に従って、成形、包装して求肥を製造した。

　本品は、風味、口当りとも良好な求肥で、きびだんご風の和菓子である。

（実施例Ｂ−４）
＜混合甘味料＞
　はちみつ１００重量部、異性化糖５０重量部、黒砂糖２重量部および実施例Ａ−４の方法で得た粉末状α−グリコシル　ヘスペリジン１重量部を混合して混合甘味料を得た。

　本品はビタミンＰを強化した甘味料で健康食品として好適である。

（実施例Ｂ−５）
＜サンドクリーム＞
　結晶性α−マルトース（林原株式会社製造、登録商標ファイントース）１，２００重量部、ショートニング１，０００重量部、実施例Ａ−３の方法で得た粉末状α−グリコシル　ヘスペリジン１０重量部、レシチン１重量部、レモンオイル１重量部、バニラオイル１重量部を常法により混和してサンドクリームを製造した。

　本品は、ビタミンＰ強化、黄色着色したサンドクリームで、口当り、溶け具合、風味とも良好である。

（実施例Ｂ−６）
＜錠剤＞
　アスコルビン酸２０重量部に結晶性β−マルトース１３重量部、コーンスターチ４重量部および実施例Ａ−２の方法で得た粉末状α−グルコシル　ヘスペリジン３重量部を均一に混合した後、直径１２ｍｍ、２０Ｒ杵を用いて、打錠し錠剤を得た。

　本品は、アスコルビン酸とα−グルコシル　ヘスペリジンとの複合ビタミン剤でアスコルビン酸の安定性もよく、飲み易い錠剤である。

（実施例Ｂ−７）
＜カプセル剤＞
　酢酸カルシウム・一水塩１０重量部、Ｌ−乳酸マグネシウム・三水塩５０重量部、マルトース５７重量部、実施例Ａ−２の方法で得たα−グルコシル　ヘスペリジン２０重量部及びエイコサペンタエン酸２０％含有γ−シクロデキストリン包接化合物１２重量部を均一に混合し、顆粒成形機にかけて顆粒とした後、常法に従って、ゼラチンカプセルに封入して、一カプセル１５０ｍｇ入のカプセル剤を製造した。

　本品は、血中コレステロール低下剤、免疫賦活剤、美肌剤などとして、感受性疾患の予防剤、治療剤、健康増進用食品などとして有利に利用できる。

（実施例Ｂ−８）
＜軟膏＞
　酢酸ナトリウム・三水塩１重量部、ＤＬ−乳酸カルシウム４重量部をグリセリン１０重部と均一に混合し、この混合物を、ワセリン５０重量部、木ロウ１０重量部、ラノリン１０重量部、ゴマ油１４．５重量部、実施例Ａ−４の方法で得たα−グリコシル　ヘスペリジン１重量部及びハッカ油０．５重量部の混合物に加え、更に均一に混和して軟膏を製造した。

　本品は、日焼け止め、美肌剤、色白剤などとして、更には外傷、火傷の治癒促進剤などとして、有利に利用できる。

（実施例Ｂ−９）
＜注射剤＞
　実施例Ａ−２の方法で得たα−グルコシル　ヘスペリジンを水に溶解し、常法にって、精製濾過してパイロゲンフリーとし、この溶液を２０ｍＬ容アンプルにα−グルコシル　ヘスペリジンが５０ｍｇになるように分注し、これを減圧乾燥し、封入して注射剤を製造した。

　本注射剤は、単体で、または、他のビタミン、ミネラルなどと混合して筋肉内又は静脈内に投与できる。また、本品は、低温貯蔵の必要もなく、使用に際しての生理食塩水などへの溶解性は極めて良好である。

（実施例Ｂ−１０）
＜注射剤＞
　塩化ナトリウム６重量部、塩化カリウム０．３重量部、塩化カルシウム０．２重量部、乳ナトリウム３．１重量部、マルトース４５重量部及び実施例Ａ−２の方法で得たα−グルコシル　ヘスペリジン１重量部を水１，０００重量部に溶解し、常法に従って、精製濾過してパイロゲンフリーとし、この溶液を滅菌したプラスチック容器に２５０ｍＬずつ充填して、注射剤を製造した。

　本品は、ビタミンＰ補給としてだけでなく、カロリー補給、ミネラル補給のための注射剤で、病中、病後の治療促進、回復促進などに有利に利用できる。

（実施例Ｂ−１１）
＜経管栄養剤＞
　結晶性α−マルトース２０重量部、グリシン１．１重量部、グルタミン酸ナトリウム０．１重量部、食塩１．２重量部、クエン酸１重量部、乳酸カルシウム０．４重量部、炭酸マグネシウム０．１重量部、実施例Ａ−３の方法で得たα−グリコシル　ヘスペリジン０．１重量部、チアミン０．０１重量部及びリボフラビン０．０１重量部からなる配合物を調製する。この配合物２４ｇずつをラミネートアルミ製小袋に充填し、ヒートシールして経管栄養剤を調製した。

　本経管栄養剤は、一袋を約３００乃至５００ｍＬの水に溶解し、経管方法により鼻腔、胃、腸などへの経口的又は非経口的栄養補給液としても有利に利用できる。

（実施例Ｂ−１２）
＜浴用剤＞
　ＤＬ−乳酸ナトリウム２１重量部、ピルビン酸ナリトウム８重量部、実施例Ａ−１の方法で得たα−グリコシル　ヘスペリジン５重量部及びエタノール４０重量部を、精製水２６重量部及び着色料、香料の適量と混合し、浴用剤を製造した。

　本品は、美肌剤、色白剤として好適であり、入浴用の湯に１００乃至１０，０００倍に希釈て利用すればよい。本品は、入浴用の湯の場合と同様に、洗顔用水、化粧水などに希釈して利用することも、有利に実施できる。

（実施例Ｂ−１３）
＜乳液＞
　ポリオキシエチレンベヘニルエーテル０．５重量部、テトラオレイン酸ポリオキシエチレンソルビトール１重量部、親油型モノステアリン酸グリセリン１重量部、ピルビン酸０．５重量部、ベヘニルアルコール０．５重量部、アボガド油１重量部、実施例Ａ−３の方法で得たα−グリコシル　ヘスペリジン１重量部、ビタミンＥ及び防腐剤の適量を、常法に従って加熱溶解し、これにＬ−乳酸ナトリウム１重量部、１，３−ブチレングリコール５重量部、カルボキシビニルポニマー０．１重量部及び精製水８５．３重量部を加え、ホモゲナイザーにかけ乳化し、更に香料の適量を加えて攪拌混合し、乳液を製造した。

　本品は、日焼け止め、美肌剤、色白剤などとして、有利に利用できる。

（実施例Ｂ−１４）
＜クリーム＞
　モノステアリン酸ポリオキシエチレングリコール２重量部、自己乳化型モノステアリン酸グリセリン５重量部、実施例Ａ−２の方法で得たα−グルコシル　ヘスペリジン２重量部、流動パラフィン１重量部、トリオクタン酸グリセリル１０重量部及び防腐剤の適量を、常法に従って加熱溶解し、これにＬ−乳酸２重量部、１，３−ブチレングリコール５重量部及び精製水６６重量部を加え、ホモゲナイザーにかけ乳化し、更に香料の適量を加えて攪拌混合しクリームを製造した。

　本品は、日焼け止め、美肌剤、色白剤などとして有利に利用できる。

本発明の一例として、α−グリコシル　ヘスペリジン標品［Ｉ］の赤外線吸収スペクトルである。

本発明の一例として、α−グリコシル　ヘスペリジン標品［ＩＩ］の赤外線吸収スペクトルである。

Claims (5)

1. ヘスペリジンを有効成分とするウィルス性疾患、細菌性疾患、外傷性疾患、免疫疾患、リューマチ、糖尿病も、循環器疾患、又は悪性腫瘍のための予防剤又は治療剤において、ヘスペリジンとして、水溶性に優れ、生体内でヘスペリジンとＤ−グルコースとに加水分解される、ヘスペリジンにＤ−グルコース残基が等モル以上α結合しているα−グリコシル　ヘスペリジンを用いたことを特徴とする予防剤又は治療剤。
2. 更に、チアミンを含有することを特徴とする請求項１に記載の予防剤又は治療剤。
3. 更に、リボフラビンを含有することを特徴とする請求項１又は２に記載の予防剤又は治療剤。
4. 複合ビタミン剤の形態にある請求項１、２又は３に記載の予防剤又は治療剤。
5. ヘスペリジンにＤ−グルコース残基が等モル以上α結合しているα−グリコシル　ヘスペリジンを、ヘスペリジンを含有する水溶液に共存させることを特徴とするヘスペリジンの析出抑制方法。

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