JP2003334062A - 生菌剤 - Google Patents
生菌剤Info
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Abstract
生菌体は、食品、医薬品分野で幅広く利用されている。
しかし、通常胃の内部はｐＨ１〜２の強酸性であり、ま
た胃液中に存在する消化酵素の働きにより、生菌体は胃
の中で死滅、失活し効用を失ってしまう。本発明は、胃
液中での強酸性下、胃液中に含まれるプロテアーゼによ
り死滅、失活することなく腸内に到達し、そこでリパー
ゼにより油相が分解されて最内水相の生菌体を放出させ
ることを可能とする生菌剤を提供することを目的とす
る。 【解決手段】 ポリグリセリン縮合リシノレイン酸エス
テルを含有させることにより上記課題を解決する。
Description
合リシノレイン酸エステルを含有する生菌剤に関するも
のであり、さらに詳しくは生菌体を含有する水相と、ポ
リグリセリン縮合リシノレイン酸エステルを添加した油
相とを混合してＷ／Ｏ型エマルジョンを得、次いでこの
Ｗ／Ｏ型エマルジョンを、親水性乳化剤を添加してＷ／
Ｏ／Ｗ型エマルジョンとして水相に均一に分散させるこ
とにより胃液中での強酸性下、胃液中に含まれるプロテ
アーゼにより死滅、失活することなく安定化させ胃を通
過、腸まで到達させる方法に関するものであり、主に食
品、医薬品分野に利用できる。
用を及ぼす生菌体は、食品、医薬品分野で幅広く利用さ
れている。しかし、通常胃の内部はｐＨ１〜２の強酸性
であり、また胃液中に存在する消化酵素の働きにより、
生菌体は胃の中で死滅、失活し効用を失ってしまう。生
菌体が生体に対して効果を発揮するためには、未変性の
状態で胃を通過し、小腸または大腸まで到達させなけれ
ばならない。そこで生菌体に耐酸性を付与し、胃中で安
定化させ腸内で吸収させるべく様々な製剤化技術が検討
されている。従来の技術としてビフィズス菌の生菌体液
を最内水相とするＷ／Ｏ／Ｗ型エマルジョンの利用によ
り、最内水相のビフィズス菌を安定化させる方法（特開
昭６２−２２０１８６）やビフィズス菌の生菌体液を内
水相とするＷ／Ｏ型エマルジョンを作成し、このＷ／Ｏ
型エマルジョンを多価金属塩溶液に均一に分散し、分散
液と被膜形成溶液とを接触反応させてゲル状被膜を形成
させ最内水相を安定化させる方法（特開平１−２２８４
５６）があげられるがいずれの場合もＷ／Ｏ型エマルジ
ョン作成時は親油性乳化剤として、モノグリセリン脂肪
酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステルを使用して
おり、乳化界面の十分な物理的強度が得られず、乳化安
定性、耐酸性の点において問題があった。
液中での強酸性下、胃液中に含まれるプロテアーゼによ
り死滅、失活することなく腸内に到達し、そこでリパー
ゼにより油相が分解されて最内水相の生菌体を放出させ
ることを可能とするエマルジョン製剤を提供することに
ある。
的を達成するために鋭意研究した結果、本発明を完成し
た。すなわち、本発明ではまず、生菌体を含む水相を親
油性乳化剤であるポリグリセリン縮合リシノレイン酸エ
ステルを添加した油相に分散させてＷ／Ｏエマルジョン
を作成し、得られたＷ／Ｏ型エマルジョンを、親水性乳
化剤を添加した水相に均一に分散することによりＷ／Ｏ
／Ｗ型エマルジョンにすることにある。
は特に限定されるものではないが、Ｌａｃｔｏｃｏｃｃ
ｕｓ ｃｒｅｍｏｒｉｓ、Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌ
ａｃｔｉｓ、Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｄｉａｃｅｔｙ
ｌａｃｔｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒ
ｍｏｐｈｉｌｕｓ、 Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａ
ｅｃｉｕｍ、Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ ｃｅｒｅｖｉｓ
ｉａｅ、Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｃｒｅｍｏｒｉｓ、
Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ、
Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｌａｃｔｉｓ、 Ｌａｃ
ｔｏｂａｃｉｌｌｕｓｈｅｌｖｅｔｉｃｕｓ、Ｌａｃｔ
ｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｊｕｇｕｒｔｉ、Ｌａｃｔｏｂａ
ｃｉｌｌｕｓ ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ、Ｌａｃｔｏｂ
ａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌ
ｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍのような乳酸菌や、Ｂ．ｌｏ
ｎｇｕｍ、Ｂ．ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｉｓ、Ｂ．ｐｓｅ
ｕｄｏｃａｔｅｎｕｌａｔｕｍ、Ｂ．ｂｉｆｉｄｕｍ、
Ｂ．ｂｒｅｖｅ、Ｂ．ｉｎｆａｎｔｉｓ、Ｂ．ａｎｉｍ
ａｌｉｓのようなビフィズス菌、各種アルコール、食
酢、醤油、味噌、納豆、パン類等の発酵に利用されてい
る、カビ類、酵母類、キノコ類、バクテリオファージの
ような一般工業用微生物などが挙げられ、それらから選
ばれる１種又は２種以上の混合物であるが、社会的需要
の観点から乳酸菌又はビフィズス菌、若しくはこれらの
混合物が好適に用いられる。
を分散させる油脂としては特に限定するものではない
が、例えば米油、菜種油、パーム油、ヤシ油、紅花油、
乳脂、大豆油、コーン油、綿実油、ヒマワリ油、オリー
ブ油などが挙げられるが、綿実油、ヒマワリ油、オリー
ブ油などが好ましい。油脂の融点については特に限定さ
れるものではないが、５０℃以下で液状、好ましくは４
０℃以下で液状、更に好ましくは４０℃以下で液状且つ
２５℃以下で固化する油脂が好ましく、水素添加、エス
テル交換又は分画して得られた油脂やＭＣＴ（中鎖脂肪
酸トリグリセリド）等の合成油脂を用いても良い。
相からなるＷ／Ｏ乳化物の調製には、ポリグリセリン縮
合リシノレイン酸エステルが用いられる。このポリグリ
セリン縮合リシノレイン酸エステルは特に限定するもの
ではないが、Ｗ／Ｏ乳化力の点から、好ましくはポリグ
リセリンのグリセリン縮合度は２量体〜６量体、さらに
好ましくは４量体〜６量体であり、縮合リシノレイン酸
の縮合度は２〜８、好ましくは６〜８のものを使用する
と耐酸性に優れた安定なエマルジョンを得ることができ
る。使用するポリグリセリン縮合リシノレイン酸エステ
ルの添加量は特に限定するものではないが油脂に対して
０．５〜１０重量％、好ましくは０．５〜５重量％、さ
らに好ましくは０．５〜３重量％であることが望まし
い。
にあたっては油脂を５０〜８０℃、好ましくは６０〜８
０℃、さらに好ましくは７０〜８０℃に加温して液状に
したものにポリグリセリン縮合リシノレイン酸エステル
を加え均一分散後、３０〜３５℃に冷却し生菌体を含有
する水溶液を逐次添加、分散させＷ／Ｏ型エマルジョン
を作成する。Ｗ／Ｏエマルジョン作成時の温度について
は乳酸菌の耐熱性を考慮すると４５℃以下、好ましくは
３０〜４５℃、さらに好ましくは３０〜３５℃で行うの
が望ましい。Ｗ／Ｏ比については目的に応じて異なる
が、水相：油相＝９：１〜１：９程度の混合割合が適し
ている。このＷ／Ｏエマルジョン作成にはホモミキサー
等の攪拌機を用い、例えば乳酸菌液の場合では、内水相
の平均径が５〜５０μｍ、好ましくは５〜３０μｍ、さ
らに好ましくは５〜１０μｍ程度になるように行うのが
望ましい。攪拌が強すぎるか、又は攪拌時間が長すぎる
と内水相が微少水滴となり核水滴中の菌が損傷を受ける
ことになるので、必要最小限の攪拌条件を設定する必要
がある。３５℃でＴＫホモミキサー（特殊機化工業製）
を用いて行う場合は５０００ｒｐｍで５分程度でよい。
攪拌中の内水相の水滴は光学顕微鏡（倍率１００〜５０
０倍）で観察し、最も好ましい径になる条件を設定す
る。
Ｗ／Ｏエマルジョンを外水相に均一に分散させる際の条
件としては特に限定するものではないが、乳酸菌の耐熱
性を考慮すると４５℃以下、好ましくは３０〜４５℃、
さらに好ましくは３０〜３５℃で行うのが望ましい。上
記で得られたＷ／Ｏエマルジョンを３０〜３５℃に保温
し、直ちに親水性乳化剤を添加した水相（外水相）に混
入し、ホモミキサー等の攪拌機もしくはホモジナイザー
等の乳化機を用いて混合する。本発明で使用される親水
性乳化剤とは特に限定するものではないが、シュガーエ
ステル、レシチン、ポリグリセリン脂肪酸エステル等が
あげられ、好ましくは親水性乳化剤はあらかじめ水相に
添加しておくことが好ましく、Ｗ／Ｏエマルジョンをこ
のような外水相に均一に分散させる際には攪拌作用、若
しくは乳化作用を強くしすぎるとＷ／Ｏエマルジョンが
過度に破壊されて微細な滴になり菌体を滴内に封入する
ことができなくなるので留意する必要がある。従って最
内相に菌体を封入する場合、上記混合、均一分散に際し
ては、最内水相の平均径が５〜５０μｍ、好ましくは５
〜３０μｍ、さらに好ましくは５〜１０μｍ程度になる
ように行うのが望ましく、適度な攪拌又はホモジナイズ
の条件を設定すると良い。具体的に例示すれば３５℃で
ＴＫホモミキサーを用いて１００００ｒｐｍで１分程度
で調製できる。
場合には上記混合が終了後直ちに３０℃以下に冷却する
とＷ／Ｏ滴の安定したＷ／Ｏ／Ｗ型エマルジョンからな
る製品を得ることができる。なお、内水相中の生菌体を
外水相から有効に遮断するには、Ｗ／Ｏエマルジョンの
油相を固化状態に保持することが好ましく、そのためＷ
／Ｏ型エマルジョンと外水相を均一に混合した後一定温
度以下で固化する油脂を用いることが好ましいのである
が、通常Ｗ／Ｏ／Ｗ型エマルジョンの保存温度は３０℃
以下であることから、本発明では前述の通り、２５℃以
下で固化する油脂を使用することが好ましい。また、一
方Ｗ／Ｏ型エマルジョンの生成に関しての温度は生菌体
を死滅させない程度の温度であることが不可欠であるの
で、例えばビフィズス菌等は４０℃以上の温度では死滅
しやすいことを考慮すれば、上記エマルジョンに用いる
油脂は、前述した通り、２５℃以下で固化する油脂が好
ましい。なお、本発明のＷ／Ｏ／Ｗ型エマルジョン製剤
およびその調製技術は、食品、飲料および医薬品の分野
で利用できる。特に飲料や液状の食品の場合には、Ｗ／
Ｏ／Ｗ型エマルジョン製剤を別途調製しておいて製品中
に加えてもよいが、Ｗ／Ｏ型エマルジョンを直接飲料や
食品中に分散させたＷ／Ｏ／Ｗ型エマルジョン飲料また
は食品としてもよい。そのような形状の食品としては例
えば乳飲料、発酵乳、ヨーグルト飲料、ヨーグルト、栄
養補給飲料等が挙げられる。以下に実施例を示して本発
明とその効果を具体的に説明するが、本発明はこれに制
限されるものではない。
のに縮合リシノレイン酸ヘキサグリセリン（太陽化学製
サンソフト＃８１８ＴＹ）５ｇを加え、８０℃に加温
してホモミキサー（特殊機化工業製）で（３０００ｒｐ
ｍ、５分）十分に分散させ、その後３５℃まで冷却し
た。ビフィドバクテリウム・ロンガムＡＴＣＣ−１５７
０７をブリックスリバーブロス中で培養した生菌体液
（４．４×１０８個／ｇ）３００ｇを上記分散液に逐次
添加し、ホモミキサー（特殊機化工業製）で（５０００
ｒｐｍ、５分）乳化させＷ／Ｏエマルジョンを得た。次
いで、ペンタグリセリンモノステアリン酸エステル（太
陽化学製 サンソフトＡ−１８１Ｅ）１．５ｇを添加し
たドリンクヨーグルト１５００ｇに、３５℃の温度下で
上記Ｗ／Ｏエマルジョン５００ｇを添加しホモミキサー
（特殊機化工業製）で（１００００ｒｐｍ、１分）乳化
を行い、その後５℃に冷却、Ｗ／Ｏ／Ｗエマルジョンを
得た。
は実施例１と同様の調製法、すなわち、サフラワー油
（日清製油製）２００ｇに３５℃の温度下でビフィドバ
クテリウム・ロンガムＡＴＣＣ−１５７０７をブリック
スリバーブロス中で培養した生菌体液３００ｇを逐次添
加し、ホモミキサー（特殊機化工業製）で（５０００ｒ
ｐｍ、５分）混合、混合組成物を得た。次いで、ペンタ
グリセリンモノステアリン酸エステル（太陽化学製 サ
ンソフトＡ−１８１Ｅ）１．５ｇを添加したドリンクヨ
ーグルト１５００ｇに、３５℃の温度下で上記混合組成
物５００ｇを添加しホモミキサー（特殊機化工業製）で
（１００００ｒｐｍ、１分）混合を行い、その後５℃に
冷却、Ｗ／Ｏエマルジョンの存在しない混合組成物を得
た。
ステアリン酸ヘキサグリセリン（坂本薬品工業製）を使
用する以外は実施例１と同様の調製法、すなわち、サフ
ラワー油（日清製油製）２００ｇを加温溶解したものに
ペンタステアリン酸ヘキサグリセリン５ｇを加え、８０
℃に加温してホモミキサー（特殊機化工業製）で（３０
００ｒｐｍ、５分）十分に分散させ、その後３５℃まで
冷却した。ビフィドバクテリウム・ロンガムＡＴＣＣ−
１５７０７をブリックスリバーブロス中で培養した生菌
体液３００ｇを上記分散液に逐次添加し、ホモミキサー
（特殊機化工業製）で（５０００ｒｐｍ、５分）乳化さ
せＷ／Ｏエマルジョンを得た。次いで、ペンタグリセリ
ンモノステアリン酸エステル（太陽化学製 サンソフト
Ａ−１８１Ｅ）１．５ｇを添加したドリンクヨーグルト
１５００ｇに、３５℃の温度下で上記Ｗ／Ｏエマルジョ
ン５００ｇを添加しホモミキサー（特殊機化工業製）で
（１００００ｒｐｍ、１分）乳化を行い、その後５℃に
冷却、Ｗ／Ｏ／Ｗエマルジョンを得た。
２で得られたＷ／Ｏ／Ｗエマルジョン（ｐＨ４．２）及
び混合組成物（ｐＨ４．２）に塩酸を加えてｐＨ１．５
に調整しラボスターラー（アズワン製）で攪拌（２００
ｒｐｍ、２時間、３７℃）ビフィズス菌の生菌数を測定
した。結果を表１に示す。なお上記生菌数の測定は、全
国発酵乳・乳酸菌飲料協会の「発酵乳・乳酸菌飲料中の
ビフィズス菌の検出と菌数測定法」に基づいて行った。
れた本発明品は、比較例に比して生菌の生存率が高かっ
た。 試験例２ 実施例１及び比較例１、比較例２で得られたＷ／Ｏ／Ｗ
エマルジョン（ｐＨ４．２）及び混合組成物（ｐＨ４．
２）を第１０改正・日本薬局方、溶出試験法の試験液第
１液の人工胃液に添加しラボスターラー（アズワン製）
で攪拌（２００ｒｐｍ、２時間、３７℃）ビフィズス菌
の生菌数を測定した。結果を表２に示す。なお上記生菌
数の測定は、全国発酵乳・乳酸菌飲料協会の「発酵乳・
乳酸菌飲料中のビフィズス菌の検出と菌数測定法」に基
づいて行った。
れた本発明品は、比較例に比して生菌の生存率が高かっ
た。本発明の実施態様をあげれば以下の通りである。 （１） 生菌体を含有する水相と、親油性乳化剤を添加
した油脂とを混合してＷ／Ｏ型エマルジョンを生成し、
次いで得られたＷ／Ｏ型エマルジョンを、親水性乳化剤
を添加した水相に均一に分散させＷ／Ｏ／Ｗ型エマルジ
ョンにすることを特徴とする生菌体の安定化方法。 （２） 生菌体を含有する水相と、ポリグリセリン縮合
リシノレイン酸エステルを添加した油脂とを混合してＷ
／Ｏ型エマルジョンを生成し、次いで得られたＷ／Ｏ型
エマルジョンを、親水性乳化剤を添加した水相に均一に
分散させＷ／Ｏ／Ｗ型エマルジョンにすることを特徴と
する生菌体の安定化方法。 （３） 生菌体を含有する水相と、ポリグリセリンが４
量体から６量体であるポリグリセリン縮合リシノレイン
酸エステルを添加した油脂とを混合してＷ／Ｏ型エマル
ジョンを生成し、次いで得られたＷ／Ｏ型エマルジョン
を、親水性乳化剤を添加した水相に均一に分散させＷ／
Ｏ／Ｗ型エマルジョンにすることを特徴とする生菌体の
安定化方法。 （４） 生菌体を含有する水相と、縮合リシノレイン酸
の縮合度が６〜８であるポリグリセリン縮合リシノレイ
ン酸エステルを添加した油脂とを混合して生菌体を含有
するＷ／Ｏ型エマルジョンを生成し、次いで得られたＷ
／Ｏ型エマルジョンを、親水性乳化剤を添加した水相に
均一に分散させＷ／Ｏ／Ｗ型エマルジョンにすることを
特徴とする生菌体の安定化方法。 （５） 生菌体を含有する水相と、ポリグリセリンが４
量体から６量体であり、縮合リシノレイン酸の縮合度が
６〜８であるポリグリセリン縮合リシノレイン酸エステ
ルを添加した油脂とを混合してＷ／Ｏ型エマルジョンを
生成し、次いで得られたＷ／Ｏ型エマルジョンを、親水
性乳化剤を添加した水相に均一に分散させＷ／Ｏ／Ｗ型
エマルジョンにすることを特徴とする生菌体の安定化方
法。 （６） 生菌体を含有する水相と、ポリグリセリンが４
量体から６量体であり、縮合リシノレイン酸の縮合度が
６〜８であるポリグリセリン縮合リシノレイン酸エステ
ルを添加した油脂とを３０℃〜３５℃で混合してＷ／Ｏ
型エマルジョンを生成し、次いで得られたＷ／Ｏ型エマ
ルジョンを、親水性乳化剤を添加した水相に３０℃〜３
５℃で均一に分散させＷ／Ｏ／Ｗ型エマルジョンにする
ことを特徴とする生菌体の安定化方法。
ジョンの最内水相中に抱合させることにより胃液中での
強酸性下、胃液中に含まれるプロテアーゼにより死滅、
失活することなく安定化させ胃を通過、腸まで到達させ
ることができると推察され、主に食品、医薬品分野に利
用できる。
Claims (2)
- 【請求項１】 ポリグリセリン縮合リシノレイン酸エス
テルを含有する生菌剤。 - 【請求項２】 生菌体を含有する水相と、ポリグリセリ
ン縮合リシノレイン酸エステルを添加した油相とを混合
してＷ／Ｏ型エマルジョンを得、次いでこのＷ／Ｏ型エ
マルジョンを、親水性乳化剤を添加してＷ／Ｏ／Ｗ型エ
マルジョンとして水相に均一に分散させて得られる生菌
剤。
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|---|---|---|---|
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Country Status (1)
| Country | Link |
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Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2007060919A (ja) * | 2005-08-29 | 2007-03-15 | Taiyo Kagaku Co Ltd | 生菌剤 |
| JP2021194004A (ja) * | 2020-06-17 | 2021-12-27 | フード インダストリー リサーチ アンド ディベロップメント インスティテュート | 水中油中水型多相エマルションの製造方法 |
Families Citing this family (1)
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|---|---|---|---|---|
| WO2020196844A1 (ja) * | 2019-03-28 | 2020-10-01 | 森永乳業株式会社 | 耐熱性細菌組成物 |
-
2002
- 2002-05-17 JP JP2002142875A patent/JP4121306B2/ja not_active Expired - Fee Related
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|---|---|---|---|---|
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| JP4751143B2 (ja) * | 2005-08-29 | 2011-08-17 | 太陽化学株式会社 | 生菌剤 |
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| JP4121306B2 (ja) | 2008-07-23 |
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