JP2003268004A - エイ軟骨由来コンドロイチン硫酸とその製造方法 - Google Patents
エイ軟骨由来コンドロイチン硫酸とその製造方法Info
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- JP2003268004A JP2003268004A JP2002070722A JP2002070722A JP2003268004A JP 2003268004 A JP2003268004 A JP 2003268004A JP 2002070722 A JP2002070722 A JP 2002070722A JP 2002070722 A JP2002070722 A JP 2002070722A JP 2003268004 A JP2003268004 A JP 2003268004A
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Abstract
(57)【要約】
【解決課題】 エイ類軟骨の高付加価値的な利用及び
新規生理活性物質の提供 【解決手段】 エイ類軟骨からコンドロイチン硫酸ま
たはムコ多糖タンパク複合体を取り出し、かかるコンド
ロイチン硫酸が特異な構造と生理活性作用を有すること
を見出した。
新規生理活性物質の提供 【解決手段】 エイ類軟骨からコンドロイチン硫酸ま
たはムコ多糖タンパク複合体を取り出し、かかるコンド
ロイチン硫酸が特異な構造と生理活性作用を有すること
を見出した。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、エイ類の軟骨を原
料として得られる新規なコンドロイチン硫酸、このコン
ドロイチン硫酸とタンパク質とを含むムコ多糖タンパク
複合体、これらの製造方法、及びその用途に関する。
料として得られる新規なコンドロイチン硫酸、このコン
ドロイチン硫酸とタンパク質とを含むムコ多糖タンパク
複合体、これらの製造方法、及びその用途に関する。
【０００２】
【従来の技術】板鰓魚類に属するエイ類の漁獲量は、農
林水産省の漁業・養殖業生産統計年報によれば全国合計
で４０００ｔを超え、その約半分は北海道近海で漁獲さ
れている。しかしながら、エイ類で食用として利用でき
るのは筋肉質が多い魚体のヒレ部分のみであるため、せ
いぜい体重の約３０％程度であり、その他の部位は軟骨
が多いため食用に適さず、これまで充分有効に利用され
てはいないのが現状である。
林水産省の漁業・養殖業生産統計年報によれば全国合計
で４０００ｔを超え、その約半分は北海道近海で漁獲さ
れている。しかしながら、エイ類で食用として利用でき
るのは筋肉質が多い魚体のヒレ部分のみであるため、せ
いぜい体重の約３０％程度であり、その他の部位は軟骨
が多いため食用に適さず、これまで充分有効に利用され
てはいないのが現状である。
【０００３】板鰓魚類の軟骨には、生理活性物質である
コンドロイチン硫酸(ムコ多糖類)が多量に含まれてお
り、板鰓魚類の一種であるサメ類の軟骨あるいはそれか
ら単離したコンドロイチン硫酸は、医薬品、食品添加
物、健康食品等として利用されている。また、魚類以外
にも鯨、牛、羊、豚、鳥などの軟骨からも各種コンドロ
イチン硫酸が抽出され、利用されている。
コンドロイチン硫酸(ムコ多糖類)が多量に含まれてお
り、板鰓魚類の一種であるサメ類の軟骨あるいはそれか
ら単離したコンドロイチン硫酸は、医薬品、食品添加
物、健康食品等として利用されている。また、魚類以外
にも鯨、牛、羊、豚、鳥などの軟骨からも各種コンドロ
イチン硫酸が抽出され、利用されている。
【０００４】これらのコンドロイチン硫酸はＤ-グルク
ロン酸と硫酸化されたＮ-アセチルガラクトサミンの二
糖繰り返し構造からなり、動物組織内ではタンパク質と
結合したプロテオグリカンとして存在し、細胞外マトリ
クスとして多くの生理活性作用を担っている。そのた
め、コンドロイチン硫酸の構造も動物種や存在部位によ
って異なると考えられ、実際にサメ軟骨中にはＣ６位一
硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルク
ロン酸からなる二糖単位（コンドロイチン硫酸Ｃ）、鯨
軟骨にはＣ４位一硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサ
ミンとＤ−グルクロン酸からなる二糖単位（コンドロイ
チン硫酸Ａ）、豚皮にはＣ４位一硫酸化Ｎ−アセチル−
Ｄ−ガラクトサミンとＤ−イズロン酸からなる二糖単位
（コンドロイチン硫酸Ｂ）など特異的な分布を示してい
る。
ロン酸と硫酸化されたＮ-アセチルガラクトサミンの二
糖繰り返し構造からなり、動物組織内ではタンパク質と
結合したプロテオグリカンとして存在し、細胞外マトリ
クスとして多くの生理活性作用を担っている。そのた
め、コンドロイチン硫酸の構造も動物種や存在部位によ
って異なると考えられ、実際にサメ軟骨中にはＣ６位一
硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルク
ロン酸からなる二糖単位（コンドロイチン硫酸Ｃ）、鯨
軟骨にはＣ４位一硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサ
ミンとＤ−グルクロン酸からなる二糖単位（コンドロイ
チン硫酸Ａ）、豚皮にはＣ４位一硫酸化Ｎ−アセチル−
Ｄ−ガラクトサミンとＤ−イズロン酸からなる二糖単位
（コンドロイチン硫酸Ｂ）など特異的な分布を示してい
る。
【０００５】サメ類と同じ板鰓魚類に属するエイ類には
多量の軟骨があり、この軟骨中にも生理活性物質のコン
ドロイチン硫酸が約５％程度含まれている。しかし、エ
イ類の軟骨は、非可食部の内臓等と共にせいぜい有機肥
料として利用される程度であって実質的には廃棄処理さ
れているのが実状であり、このコンドロイチン硫酸の組
成構造及びそれらの機能は明らかにされておらず、産業
上利用されていなかった。
多量の軟骨があり、この軟骨中にも生理活性物質のコン
ドロイチン硫酸が約５％程度含まれている。しかし、エ
イ類の軟骨は、非可食部の内臓等と共にせいぜい有機肥
料として利用される程度であって実質的には廃棄処理さ
れているのが実状であり、このコンドロイチン硫酸の組
成構造及びそれらの機能は明らかにされておらず、産業
上利用されていなかった。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】本発明の課題は、エイ
類の軟骨から抽出した新規コンドロイチン硫酸の組成構
造及びそれらの機能を明らかにし、その製造方法を示す
ことにより、廃棄物から低コストで大量に製造でき、様
々な用途に使用できる新規コンドロイチン硫酸とその製
造方法を提供することにある。
類の軟骨から抽出した新規コンドロイチン硫酸の組成構
造及びそれらの機能を明らかにし、その製造方法を示す
ことにより、廃棄物から低コストで大量に製造でき、様
々な用途に使用できる新規コンドロイチン硫酸とその製
造方法を提供することにある。
【０００７】
【課題を解決するための手段】本発明者は上記課題に鑑
みて鋭意検討した結果、エイ軟骨を粉砕し、酸、アルカ
リまたは酵素で処理し、得られた消化液を必要に応じて
中和脱塩処理した後、これをフィルタープレスなどで濾
過し清澄化処理後、乾燥固化または乾燥粉末化させるこ
とによって目的とするコンドロイチン硫酸が特異な組成
を有し、生理学的機能を有することを見出し、本発明を
完成するに至った。
みて鋭意検討した結果、エイ軟骨を粉砕し、酸、アルカ
リまたは酵素で処理し、得られた消化液を必要に応じて
中和脱塩処理した後、これをフィルタープレスなどで濾
過し清澄化処理後、乾燥固化または乾燥粉末化させるこ
とによって目的とするコンドロイチン硫酸が特異な組成
を有し、生理学的機能を有することを見出し、本発明を
完成するに至った。
【０００８】すなわち、本発明は、エイ類軟骨から得ら
れる新規構造及び機能を有する以下のコンドロイチン硫
酸、ムコ多糖タンパク複合体、これらの製造方法及びこ
れらを含む食品等を提供することにある。
れる新規構造及び機能を有する以下のコンドロイチン硫
酸、ムコ多糖タンパク複合体、これらの製造方法及びこ
れらを含む食品等を提供することにある。
【０００９】（１） Ｃ６位一硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ
−ガラクトサミンとＣ２位一硫酸化Ｄ−グルクロン酸か
らなる二糖単位を６０％以上含み、さらに、非硫酸化Ｎ
−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸か
らなる二糖単位、Ｃ４位またはＣ６位一硫酸化Ｎ−アセ
チル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸からなる
二糖単位、及びＣ４，Ｃ６位二硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ
−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸からなる二糖単位
を含むコンドロイチン硫酸。
−ガラクトサミンとＣ２位一硫酸化Ｄ−グルクロン酸か
らなる二糖単位を６０％以上含み、さらに、非硫酸化Ｎ
−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸か
らなる二糖単位、Ｃ４位またはＣ６位一硫酸化Ｎ−アセ
チル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸からなる
二糖単位、及びＣ４，Ｃ６位二硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ
−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸からなる二糖単位
を含むコンドロイチン硫酸。
【００１０】（２） Ｃ６位一硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ
−ガラクトサミンとＣ２位一硫酸化Ｄ−グルクロン酸か
らなる二糖単位（８０．２±１６．０）％、非硫酸化Ｎ
−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸か
らなる二糖単位（１０．０±３．０）％、Ｃ４位または
Ｃ６位一硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ
−グルクロン酸からなる二糖単位（２．１±０．７）
％、Ｃ４，Ｃ６位二硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクト
サミンとＤ−グルクロン酸からなる二糖単位（７．７±
２．３）％を含む前記１に記載のコンドロイチン硫酸。
−ガラクトサミンとＣ２位一硫酸化Ｄ−グルクロン酸か
らなる二糖単位（８０．２±１６．０）％、非硫酸化Ｎ
−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸か
らなる二糖単位（１０．０±３．０）％、Ｃ４位または
Ｃ６位一硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ
−グルクロン酸からなる二糖単位（２．１±０．７）
％、Ｃ４，Ｃ６位二硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクト
サミンとＤ−グルクロン酸からなる二糖単位（７．７±
２．３）％を含む前記１に記載のコンドロイチン硫酸。
【００１１】（３） 非硫酸化Ｎ―アセチル―Ｄ―ガラ
クトサミンを含む二糖単位、Ｃ４位またはＣ６位一硫酸
化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン
酸からなる二糖単位、Ｃ６位一硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ
−ガラクトサミンとＣ２位一硫酸化Ｄ−グルクロン酸か
らなる二糖単位、Ｃ４、Ｃ６位二硫酸化Ｎ―アセチル―
Ｄ―ガラクトサミンを含む二糖単位を含む二糖単位がラ
ンダムに連結した構造を有する前記１または２に記載の
コンドロイチン硫酸。 （４） エイ軟骨から得られる前記１乃至３のいずれか
に記載のコンドロイチン硫酸。
クトサミンを含む二糖単位、Ｃ４位またはＣ６位一硫酸
化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン
酸からなる二糖単位、Ｃ６位一硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ
−ガラクトサミンとＣ２位一硫酸化Ｄ−グルクロン酸か
らなる二糖単位、Ｃ４、Ｃ６位二硫酸化Ｎ―アセチル―
Ｄ―ガラクトサミンを含む二糖単位を含む二糖単位がラ
ンダムに連結した構造を有する前記１または２に記載の
コンドロイチン硫酸。 （４） エイ軟骨から得られる前記１乃至３のいずれか
に記載のコンドロイチン硫酸。
【００１２】（５） （Ａ）Ｃ６位一硫酸化Ｎ−アセチ
ル−Ｄ−ガラクトサミンとＣ２位一硫酸化Ｄ−グルクロ
ン酸からなる二糖単位を６０％以上含み、さらに、非硫
酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロ
ン酸からなる二糖単位、Ｃ４位またはＣ６位一硫酸化Ｎ
−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸か
らなる二糖単位、及びＣ４，Ｃ６位二硫酸化Ｎ−アセチ
ル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸からなる二
糖単位を含むコンドロイチン硫酸と（Ｂ）タンパク質と
を含むムコ多糖タンパク複合体。
ル−Ｄ−ガラクトサミンとＣ２位一硫酸化Ｄ−グルクロ
ン酸からなる二糖単位を６０％以上含み、さらに、非硫
酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロ
ン酸からなる二糖単位、Ｃ４位またはＣ６位一硫酸化Ｎ
−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸か
らなる二糖単位、及びＣ４，Ｃ６位二硫酸化Ｎ−アセチ
ル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸からなる二
糖単位を含むコンドロイチン硫酸と（Ｂ）タンパク質と
を含むムコ多糖タンパク複合体。
【００１３】（６） （Ａ）Ｃ６位一硫酸化Ｎ−アセチ
ル−Ｄ−ガラクトサミンとＣ２位一硫酸化Ｄ−グルクロ
ン酸からなる二糖単位（８０．２±１６．０）％、非硫
酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロ
ン酸からなる二糖単位（１０．０±３．０）％、Ｃ４位
またはＣ６位一硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミ
ンとＤ−グルクロン酸からなる二糖単位（２．１±０．
７）％、Ｃ４，Ｃ６位二硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラ
クトサミンとＤ−グルクロン酸からなる二糖単位（７．
７±２．３）％を含む前記１に記載のコンドロイチン硫
酸と（Ｂ）タンパク質とを含む前記５に記載のムコ多糖
タンパク複合体。 （７） エイ軟骨から得られる前記５または６に記載の
コンドロイチン硫酸を含むムコ多糖タンパク複合体。
ル−Ｄ−ガラクトサミンとＣ２位一硫酸化Ｄ−グルクロ
ン酸からなる二糖単位（８０．２±１６．０）％、非硫
酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロ
ン酸からなる二糖単位（１０．０±３．０）％、Ｃ４位
またはＣ６位一硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミ
ンとＤ−グルクロン酸からなる二糖単位（２．１±０．
７）％、Ｃ４，Ｃ６位二硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラ
クトサミンとＤ−グルクロン酸からなる二糖単位（７．
７±２．３）％を含む前記１に記載のコンドロイチン硫
酸と（Ｂ）タンパク質とを含む前記５に記載のムコ多糖
タンパク複合体。 （７） エイ軟骨から得られる前記５または６に記載の
コンドロイチン硫酸を含むムコ多糖タンパク複合体。
【００１４】（８） エイ軟骨を粉砕し、酸、アルカリ
または酵素で処理し、得られた消化液を乾燥粉末化させ
ることを特徴とする、Ｃ６位一硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ
−ガラクトサミンとＣ２位一硫酸化Ｄ−グルクロン酸か
らなる二糖単位を６０％以上含み、さらに、非硫酸化Ｎ
−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸か
らなる二糖単位、Ｃ４位またはＣ６位一硫酸化Ｎ−アセ
チル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸からなる
二糖単位、及びＣ４，Ｃ６位二硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ
−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸からなる二糖単位
を含むコンドロイチン硫酸の製造方法。
または酵素で処理し、得られた消化液を乾燥粉末化させ
ることを特徴とする、Ｃ６位一硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ
−ガラクトサミンとＣ２位一硫酸化Ｄ−グルクロン酸か
らなる二糖単位を６０％以上含み、さらに、非硫酸化Ｎ
−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸か
らなる二糖単位、Ｃ４位またはＣ６位一硫酸化Ｎ−アセ
チル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸からなる
二糖単位、及びＣ４，Ｃ６位二硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ
−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸からなる二糖単位
を含むコンドロイチン硫酸の製造方法。
【００１５】（９） エイ軟骨を粉砕し、酸、アルカリ
または酵素で処理し、得られた消化液を乾燥粉末化させ
ることを特徴とする、（Ａ）Ｃ６位一硫酸化Ｎ−アセチ
ル−Ｄ−ガラクトサミンとＣ２位一硫酸化Ｄ−グルクロ
ン酸からなる二糖単位を６０％以上含み、さらに、非硫
酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロ
ン酸からなる二糖単位、Ｃ４位またはＣ６位一硫酸化Ｎ
−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸か
らなる二糖単位、及びＣ４，Ｃ６位二硫酸化Ｎ−アセチ
ル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸からなる二
糖単位を含むコンドロイチン硫酸と（Ｂ）タンパク質と
を含むムコ多糖タンパク複合体の製造方法。
または酵素で処理し、得られた消化液を乾燥粉末化させ
ることを特徴とする、（Ａ）Ｃ６位一硫酸化Ｎ−アセチ
ル−Ｄ−ガラクトサミンとＣ２位一硫酸化Ｄ−グルクロ
ン酸からなる二糖単位を６０％以上含み、さらに、非硫
酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロ
ン酸からなる二糖単位、Ｃ４位またはＣ６位一硫酸化Ｎ
−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸か
らなる二糖単位、及びＣ４，Ｃ６位二硫酸化Ｎ−アセチ
ル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸からなる二
糖単位を含むコンドロイチン硫酸と（Ｂ）タンパク質と
を含むムコ多糖タンパク複合体の製造方法。
【００１６】（１０） Ｃ６位一硫酸化Ｎ−アセチル−
Ｄ−ガラクトサミンとＣ２位一硫酸化Ｄ−グルクロン酸
からなる二糖単位を６０％以上含み、さらに、非硫酸化
Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸
からなる二糖単位、Ｃ４位またはＣ６位一硫酸化Ｎ−ア
セチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸からな
る二糖単位、及びＣ４，Ｃ６位二硫酸化Ｎ−アセチル−
Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸からなる二糖単
位を含むコンドロイチン硫酸、または、前記コンドロイ
チン硫酸とタンパク質とを含むムコ多糖タンパク複合体
を含む医薬品、化粧品または食品。
Ｄ−ガラクトサミンとＣ２位一硫酸化Ｄ−グルクロン酸
からなる二糖単位を６０％以上含み、さらに、非硫酸化
Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸
からなる二糖単位、Ｃ４位またはＣ６位一硫酸化Ｎ−ア
セチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸からな
る二糖単位、及びＣ４，Ｃ６位二硫酸化Ｎ−アセチル−
Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸からなる二糖単
位を含むコンドロイチン硫酸、または、前記コンドロイ
チン硫酸とタンパク質とを含むムコ多糖タンパク複合体
を含む医薬品、化粧品または食品。
【００１７】（１１） Ｃ６位一硫酸化Ｎ−アセチル−
Ｄ−ガラクトサミンとＣ２位一硫酸化Ｄ−グルクロン酸
からなる二糖単位を６０％以上含み、さらに、非硫酸化
Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸
からなる二糖単位、Ｃ４位またはＣ６位一硫酸化Ｎ−ア
セチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸からな
る二糖単位、及びＣ４，Ｃ６位二硫酸化Ｎ−アセチル−
Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸からなる二糖単
位を含むコンドロイチン硫酸を有効成分として含み、抗
腫瘍作用、免疫附活作用及び皮膚コラーゲンの減少抑制
などの機能を有することを特徴とするコンドロイチン硫
酸含有医薬品、化粧品または食品。
Ｄ−ガラクトサミンとＣ２位一硫酸化Ｄ−グルクロン酸
からなる二糖単位を６０％以上含み、さらに、非硫酸化
Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸
からなる二糖単位、Ｃ４位またはＣ６位一硫酸化Ｎ−ア
セチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸からな
る二糖単位、及びＣ４，Ｃ６位二硫酸化Ｎ−アセチル−
Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸からなる二糖単
位を含むコンドロイチン硫酸を有効成分として含み、抗
腫瘍作用、免疫附活作用及び皮膚コラーゲンの減少抑制
などの機能を有することを特徴とするコンドロイチン硫
酸含有医薬品、化粧品または食品。
【００１８】
【発明の実施の形態】本発明のコンドロイチン硫酸は、
Ｃ６位一硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンとＣ
２位一硫酸化Ｄ−グルクロン酸からなる二糖単位を６０
％以上含み、さらに、非硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラ
クトサミンとＤ−グルクロン酸からなる二糖単位、Ｃ４
位またはＣ６位一硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサ
ミンとＤ−グルクロン酸からなる二糖単位、及びＣ４，
Ｃ６位二硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ
−グルクロン酸からなる二糖単位を含む。また、本発明
のムコ多糖タンパク複合体は、上記コンドロイチン硫酸
とタンパク質との複合体である。
Ｃ６位一硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンとＣ
２位一硫酸化Ｄ−グルクロン酸からなる二糖単位を６０
％以上含み、さらに、非硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラ
クトサミンとＤ−グルクロン酸からなる二糖単位、Ｃ４
位またはＣ６位一硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサ
ミンとＤ−グルクロン酸からなる二糖単位、及びＣ４，
Ｃ６位二硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ
−グルクロン酸からなる二糖単位を含む。また、本発明
のムコ多糖タンパク複合体は、上記コンドロイチン硫酸
とタンパク質との複合体である。
【００１９】本発明のコンドロイチン硫酸の主成分であ
るＣ６位一硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンと
Ｃ２位一硫酸化Ｄ−グルクロン酸からなる二糖単位は、
サメ軟骨から精製されたものが近年明らかとなった。サ
メ軟骨中のコンドロイチンは、Ｃ６位一硫酸化Ｎ−アセ
チル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸からなる
二糖単位で主として構成されるコンドロイチン（コンド
ロイチン硫酸Ｃ）であり、鯨軟骨にはＣ４位一硫酸化Ｎ
−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸か
らなる二糖単位、豚皮にはＣ４位一硫酸化Ｎ−アセチル
−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−イズロン酸からなる二糖単
位を多く含むコンドロイチン（それぞれ、コンドロイチ
ン硫酸Ａ、コンドロイチン硫酸Ｂ）がそれぞれ多く存在
していることが知られているが、Ｃ６位一硫酸化Ｎ−ア
セチル−Ｄ−ガラクトサミンとＣ２位一硫酸化Ｄ−グル
クロン酸からなる二糖単位を特異的に多く含み、かつコ
ンドロイチン硫酸を構成している二糖の存在比が後述の
割合のものは従来知られていない。
るＣ６位一硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンと
Ｃ２位一硫酸化Ｄ−グルクロン酸からなる二糖単位は、
サメ軟骨から精製されたものが近年明らかとなった。サ
メ軟骨中のコンドロイチンは、Ｃ６位一硫酸化Ｎ−アセ
チル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸からなる
二糖単位で主として構成されるコンドロイチン（コンド
ロイチン硫酸Ｃ）であり、鯨軟骨にはＣ４位一硫酸化Ｎ
−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸か
らなる二糖単位、豚皮にはＣ４位一硫酸化Ｎ−アセチル
−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−イズロン酸からなる二糖単
位を多く含むコンドロイチン（それぞれ、コンドロイチ
ン硫酸Ａ、コンドロイチン硫酸Ｂ）がそれぞれ多く存在
していることが知られているが、Ｃ６位一硫酸化Ｎ−ア
セチル−Ｄ−ガラクトサミンとＣ２位一硫酸化Ｄ−グル
クロン酸からなる二糖単位を特異的に多く含み、かつコ
ンドロイチン硫酸を構成している二糖の存在比が後述の
割合のものは従来知られていない。
【００２０】本発明のコンドロイチン硫酸及びムコ多糖
タンパク複合体は、好ましくはエイ類の軟骨から得るこ
とができる。エイ類の種類は特に限定されないが、例え
ば、ヒラタエイ、アカエイ、イトマキエイ、ツノカス
ベ、ソコガンギエイ、ガンギエイ、メガネカスベ、ドブ
カスベ、コモンカスベ等を用いることができる。原料と
なるエイ類の軟骨を分離回収する方法は、例えば特願20
01−124634に記載の方法等が挙げられる。
タンパク複合体は、好ましくはエイ類の軟骨から得るこ
とができる。エイ類の種類は特に限定されないが、例え
ば、ヒラタエイ、アカエイ、イトマキエイ、ツノカス
ベ、ソコガンギエイ、ガンギエイ、メガネカスベ、ドブ
カスベ、コモンカスベ等を用いることができる。原料と
なるエイ類の軟骨を分離回収する方法は、例えば特願20
01−124634に記載の方法等が挙げられる。
【００２１】魚体から分離された軟骨を細かく砕き、
酸、アルカリまたは酵素で処理する。軟骨の粉砕は抽出
溶媒が効果的に浸透する程度であればよい。例えば、ミ
ートチョッパー等を用いて１ｃｍ3以下に粉砕するのが
好ましい。酸処理は、ｐＨ１〜５の範囲が好ましい。ア
ルカリ処理は、ｐＨ１０〜１４の範囲が好ましい。酵素
はプロテアーゼ等の分解酵素を用いることができる。
酸、アルカリまたは酵素で処理する。軟骨の粉砕は抽出
溶媒が効果的に浸透する程度であればよい。例えば、ミ
ートチョッパー等を用いて１ｃｍ3以下に粉砕するのが
好ましい。酸処理は、ｐＨ１〜５の範囲が好ましい。ア
ルカリ処理は、ｐＨ１０〜１４の範囲が好ましい。酵素
はプロテアーゼ等の分解酵素を用いることができる。
【００２２】得られた処理物は、必要に応じて中和脱塩
処理し濾過して固形分を除いた後、乾燥固化または乾燥
粉末化させる。濾過は、例えば、フィルタープレス、ス
クリーンメッシュ、カートリッジフィルタ等を用い、清
澄な抽出液とする。濾過では取り除けない抽出液中のイ
オンは、抽出液に電圧を印加して行う脱塩処理、イオン
交換カラム等により取り除いてもよい。濾過後、乾燥固
化または乾燥粉末化させることによって目的とするコン
ドロイチン硫酸またはムコ多糖タンパク複合体を得る。
特に高純度のコンドロイチン硫酸を得るためには、酵素
消化によりタンパク質を分解し、エタノールによる沈
殿、イオン交換カラム処理、メンブレンフィルターによ
る濾過等を行なってアミノ酸や不要なアミノ糖を完全に
除けばよい。
処理し濾過して固形分を除いた後、乾燥固化または乾燥
粉末化させる。濾過は、例えば、フィルタープレス、ス
クリーンメッシュ、カートリッジフィルタ等を用い、清
澄な抽出液とする。濾過では取り除けない抽出液中のイ
オンは、抽出液に電圧を印加して行う脱塩処理、イオン
交換カラム等により取り除いてもよい。濾過後、乾燥固
化または乾燥粉末化させることによって目的とするコン
ドロイチン硫酸またはムコ多糖タンパク複合体を得る。
特に高純度のコンドロイチン硫酸を得るためには、酵素
消化によりタンパク質を分解し、エタノールによる沈
殿、イオン交換カラム処理、メンブレンフィルターによ
る濾過等を行なってアミノ酸や不要なアミノ糖を完全に
除けばよい。
【００２３】このようにして調製したコンドロイチン硫
酸は、典型的には、以下の組成を有する。 (a)Ｃ６位一硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミン
とＣ２位一硫酸化Ｄ−グルクロン酸からなる二糖単位：
８０．２±１６．０％， (b)非硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−
グルクロン酸からなる二糖単位：１０．０±３．０％， (c)Ｃ４位またはＣ６位一硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガ
ラクトサミンとＤ−グルクロン酸からなる二糖単位：
２．１±０．７％， (d)Ｃ４，Ｃ６位二硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクト
サミンとＤ−グルクロン酸からなる二糖単位：７．７±
２．３％。 ここで％は各構成単位のモル％である。
酸は、典型的には、以下の組成を有する。 (a)Ｃ６位一硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミン
とＣ２位一硫酸化Ｄ−グルクロン酸からなる二糖単位：
８０．２±１６．０％， (b)非硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−
グルクロン酸からなる二糖単位：１０．０±３．０％， (c)Ｃ４位またはＣ６位一硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガ
ラクトサミンとＤ−グルクロン酸からなる二糖単位：
２．１±０．７％， (d)Ｃ４，Ｃ６位二硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクト
サミンとＤ−グルクロン酸からなる二糖単位：７．７±
２．３％。 ここで％は各構成単位のモル％である。
【００２４】本発明者らは、さらにこの新規コンドロイ
チン硫酸またはこれを含むムコ多糖タンパク複合体は、
マウス大腸癌（Colon 26）及びマウス乳腺癌（Ca 755）
に対し抗腫瘍性を有し、免疫賦活による抗ＭＲＳＡ作
用、ビタミンＣ欠乏モルモットによる皮膚コラーゲン低
下抑制作用を有することを見出した。従って、本発明の
コンドロイチン硫酸及びこれを含むムコ多糖タンパク複
合体は、例えば高齢者や病弱者、体力が衰えた者などに
対しての免疫力増強剤としての機能を有し、また従来の
コンドロイチン硫酸と同様に、抗炎症剤、保湿剤、関節
潤滑剤、眼精疲労緩和剤、皮膚の代謝改善剤などきわめ
て多様な用途に活用可能なものであり、さらにその特異
な構造による新規機能は、医薬品、化粧品、食品、高分
子工業など広い範囲に応用できる。
チン硫酸またはこれを含むムコ多糖タンパク複合体は、
マウス大腸癌（Colon 26）及びマウス乳腺癌（Ca 755）
に対し抗腫瘍性を有し、免疫賦活による抗ＭＲＳＡ作
用、ビタミンＣ欠乏モルモットによる皮膚コラーゲン低
下抑制作用を有することを見出した。従って、本発明の
コンドロイチン硫酸及びこれを含むムコ多糖タンパク複
合体は、例えば高齢者や病弱者、体力が衰えた者などに
対しての免疫力増強剤としての機能を有し、また従来の
コンドロイチン硫酸と同様に、抗炎症剤、保湿剤、関節
潤滑剤、眼精疲労緩和剤、皮膚の代謝改善剤などきわめ
て多様な用途に活用可能なものであり、さらにその特異
な構造による新規機能は、医薬品、化粧品、食品、高分
子工業など広い範囲に応用できる。
【００２５】
【実施例】以下、実施例、試験例を挙げて説明するが、
本発明は以下の記載に限定されるものではない。
本発明は以下の記載に限定されるものではない。
【００２６】実施例１：エイ軟骨由来コンドロイチン硫
酸（ムコ多糖タンパク複合体）の製造 斜軸ニーダー（２００Ｌ容量）にエイ軟骨粉砕物１０６
ｋｇとプロテアーゼ２１０ｇを入れて５９℃で２時間攪
拌することにより酵素処理を行った。引き続き９０℃に
加熱し１５分間攪拌して酵素を失活させ、これに濾過助
剤５ｋｇを加え均質化後、フィルタープレスで加圧濾過
を行った。なお、使用した加圧濾過装置は、（株）マキ
ノ製Ｍ８−Ｓ形（濾過面積：0.27ｍ2、濾過容積：2.7
Ｌ、材質：SUS304）である。次に、得られた抽出液を９
０℃に加熱し１０分間加熱殺菌後、ディスク型スプレー
ドライヤー（（株）坂本技研製 DA220-10S）にて噴霧
乾燥させコンドロイチン硫酸（ムコ多糖タンパク複合体
を含む。）の白色粉末10.6ｋｇを得た。噴霧乾燥条件
は、微粒化方式：φ90ｍｍ回転ピン型ディスク、12,000
rpm、入口熱風温度：１８５℃、出口排風温度：９０
℃、乾燥室内圧：−１０ｍｍＨ2Ｏで行った。
酸（ムコ多糖タンパク複合体）の製造 斜軸ニーダー（２００Ｌ容量）にエイ軟骨粉砕物１０６
ｋｇとプロテアーゼ２１０ｇを入れて５９℃で２時間攪
拌することにより酵素処理を行った。引き続き９０℃に
加熱し１５分間攪拌して酵素を失活させ、これに濾過助
剤５ｋｇを加え均質化後、フィルタープレスで加圧濾過
を行った。なお、使用した加圧濾過装置は、（株）マキ
ノ製Ｍ８−Ｓ形（濾過面積：0.27ｍ2、濾過容積：2.7
Ｌ、材質：SUS304）である。次に、得られた抽出液を９
０℃に加熱し１０分間加熱殺菌後、ディスク型スプレー
ドライヤー（（株）坂本技研製 DA220-10S）にて噴霧
乾燥させコンドロイチン硫酸（ムコ多糖タンパク複合体
を含む。）の白色粉末10.6ｋｇを得た。噴霧乾燥条件
は、微粒化方式：φ90ｍｍ回転ピン型ディスク、12,000
rpm、入口熱風温度：１８５℃、出口排風温度：９０
℃、乾燥室内圧：−１０ｍｍＨ2Ｏで行った。
【００２７】実施例２：エイ軟骨由来コンドロイチン硫
酸の精製及びその構造解析 精製コンドロイチン硫酸を、以下の手順により得て構造
解析に供した。 １．脱脂 1) ５０ｇのエイ軟骨乾燥粉砕品を１０００ｍｌのビー
カーに入れ、アセトン５００ｍｌを加え１０分間撹拌し
た。 2） ５分間放置し上澄み液を捨てた。 3） 1)〜2）の操作を更に３回繰り返した。 4） 残った沈殿物を減圧デシケータにて乾燥させた。
酸の精製及びその構造解析 精製コンドロイチン硫酸を、以下の手順により得て構造
解析に供した。 １．脱脂 1) ５０ｇのエイ軟骨乾燥粉砕品を１０００ｍｌのビー
カーに入れ、アセトン５００ｍｌを加え１０分間撹拌し
た。 2） ５分間放置し上澄み液を捨てた。 3） 1)〜2）の操作を更に３回繰り返した。 4） 残った沈殿物を減圧デシケータにて乾燥させた。
【００２８】２．アルカリ処理
1） 脱脂済みエイ軟骨粉44.5ｇを0.2 Ｍ ＮaＯＨ ８０
０ｍｌに溶解させた。 2） ３７℃の湯浴の中で３時間撹拌した。 3） 酢酸でpＨ７に中和した。 ３．蛋白分解酸素処理 1） 0.2 Ｍ Tris-HCI緩衝液（ｐＨ7.8）１００ｍｌを
加えた。 2） 酢酸カルシウムを終濃度0.02Ｍになるように加え
た。 3） 防腐のためメタノールを５０ｍｌ加えた。 4） 蛋白分解酸素（アクチナーゼE 科研製薬）を５０
０ｍｇ加えた。 5） ３７℃の湯浴の中で４８時間ゆっくりと撹拌し
た。
０ｍｌに溶解させた。 2） ３７℃の湯浴の中で３時間撹拌した。 3） 酢酸でpＨ７に中和した。 ３．蛋白分解酸素処理 1） 0.2 Ｍ Tris-HCI緩衝液（ｐＨ7.8）１００ｍｌを
加えた。 2） 酢酸カルシウムを終濃度0.02Ｍになるように加え
た。 3） 防腐のためメタノールを５０ｍｌ加えた。 4） 蛋白分解酸素（アクチナーゼE 科研製薬）を５０
０ｍｇ加えた。 5） ３７℃の湯浴の中で４８時間ゆっくりと撹拌し
た。
【００２９】４．エタノール沈殿
1） 消化液を10,000rpm×３０分間、4℃にて遠心分離
した。 2） 上澄みを0.45μmメンブランフィルターを用いて吸
引瀘過した。 3） 上澄みに終濃度が0.05Ｍ になるように酢酸カルシ
ウムを加えた。 4） 酢酸でｐＨ4.5 に調整した。 5） ２倍のエタノールを滴下し、４℃のもと４８時間
放置した。
した。 2） 上澄みを0.45μmメンブランフィルターを用いて吸
引瀘過した。 3） 上澄みに終濃度が0.05Ｍ になるように酢酸カルシ
ウムを加えた。 4） 酢酸でｐＨ4.5 に調整した。 5） ２倍のエタノールを滴下し、４℃のもと４８時間
放置した。
【００３０】５．沈殿の洗浄・乾燥
1） エタノール液を7,000rpm×３０分間、４℃にて遠
心分離した。 2） 沈殿を回収し８０％エタノール３０００ｍｌを加
え、４℃にて１２時間ゆっくりと撹拌した。 3） 1,000rpm×３０分間、４℃にて遠心分離した。 4） 2)〜3)の操作を繰り返した。 5） 沈殿に１００％エタノール２０００ｍｌを加え、
４℃にて６時間ゆっくり撹拌した。 6） 1,000rpm×３０分間、４℃にて遠心分離した。 7） 沈殿を減圧デジゲータにて乾燥させ、粗コンドロ
イチン硫酸を得た。
心分離した。 2） 沈殿を回収し８０％エタノール３０００ｍｌを加
え、４℃にて１２時間ゆっくりと撹拌した。 3） 1,000rpm×３０分間、４℃にて遠心分離した。 4） 2)〜3)の操作を繰り返した。 5） 沈殿に１００％エタノール２０００ｍｌを加え、
４℃にて６時間ゆっくり撹拌した。 6） 1,000rpm×３０分間、４℃にて遠心分離した。 7） 沈殿を減圧デジゲータにて乾燥させ、粗コンドロ
イチン硫酸を得た。
【００３１】６．ＤＯＷＥＸ５０Ｗ×２陽イオン交換カ
ラムの調整 1） ＤＯＷＥＸ５０Ｗ×２陽イオン交換樹脂２００ｍ
ｌを、0.5 Ｎ ＨＣl中で２時間撹拌し、ミリキュー水に
て洗浄後、0.5 Ｍ ＮaＯＨ 中で２時間撹拌した。 2） 1)を3回繰り返し、交換樹脂をプロトン保持の形と
し、ミリキュー水にて洗浄した。 3） ５００ｍｌビーカーにカラムを入れ、バッチ式反
応漕とした。
ラムの調整 1） ＤＯＷＥＸ５０Ｗ×２陽イオン交換樹脂２００ｍ
ｌを、0.5 Ｎ ＨＣl中で２時間撹拌し、ミリキュー水に
て洗浄後、0.5 Ｍ ＮaＯＨ 中で２時間撹拌した。 2） 1)を3回繰り返し、交換樹脂をプロトン保持の形と
し、ミリキュー水にて洗浄した。 3） ５００ｍｌビーカーにカラムを入れ、バッチ式反
応漕とした。
【００３２】７．ＤＯＷＥＸ５０Ｗ×２陽イオン交換樹
脂処理 1） 得られた粗コンドロイチン硫酸をごく少量のミリ
キュー水に溶解させた。 2） バッチ式反応漕に１)で作製した試料を添加し、1.
5時間撹拌した。反応後溶液を回収し、さらに樹脂を８
００ｍｌのミリキュー水にて洗浄後、洗浄液も合わせて
回収した。 4） 回収液をすぐに1ＮＮaＯＨにてｐＨ７に中和し
た。 ８．精製 1） 中和液を脱イオン水中にて３日間透析(分子量カッ
トオフ：１０ｋＤ)した。 2） エバポレータにて適量に濃縮した。 3） 0.2μｍメンブランフィルターにより瀘過後、凍結
乾燥し精製コンドロイチン硫酸とした。
脂処理 1） 得られた粗コンドロイチン硫酸をごく少量のミリ
キュー水に溶解させた。 2） バッチ式反応漕に１)で作製した試料を添加し、1.
5時間撹拌した。反応後溶液を回収し、さらに樹脂を８
００ｍｌのミリキュー水にて洗浄後、洗浄液も合わせて
回収した。 4） 回収液をすぐに1ＮＮaＯＨにてｐＨ７に中和し
た。 ８．精製 1） 中和液を脱イオン水中にて３日間透析(分子量カッ
トオフ：１０ｋＤ)した。 2） エバポレータにて適量に濃縮した。 3） 0.2μｍメンブランフィルターにより瀘過後、凍結
乾燥し精製コンドロイチン硫酸とした。
【００３３】上記のようにして得た精製コンドロイチン
硫酸を構造解析に供した。なお、比較のため、表１に示
す通り、精製コンドロイチン硫酸（表１のLot.２）の他
に、実施例１で調製したムコ多糖タンパク複合体（Lot.
１）及び、由来の異なる３種類のコンドロイチン硫酸
（Lot.３〜５）を用意した。Lot.３は鮭鼻軟骨を原料と
した他はLot.２と同様に調製したものである。Lot.４及
び５は市販の生化学工業（株）製標品であり、Lot.４は
コンドロイチン硫酸Ａ、Lot.５はコンドロイチン硫酸Ｃ
である。
硫酸を構造解析に供した。なお、比較のため、表１に示
す通り、精製コンドロイチン硫酸（表１のLot.２）の他
に、実施例１で調製したムコ多糖タンパク複合体（Lot.
１）及び、由来の異なる３種類のコンドロイチン硫酸
（Lot.３〜５）を用意した。Lot.３は鮭鼻軟骨を原料と
した他はLot.２と同様に調製したものである。Lot.４及
び５は市販の生化学工業（株）製標品であり、Lot.４は
コンドロイチン硫酸Ａ、Lot.５はコンドロイチン硫酸Ｃ
である。
【００３４】
【表１】
【００３５】アミノ酸分析
各試料（Lot．1〜2）をそれぞれ所定量秤量し、2.4Ｎ-
ＨＣlを用いて約１００℃、６時間の条件により加水分
解を行った。これをアミノ酸分析装置（JLC-500V、日本
電子製）で定量した。分析結果を図１に示した。Lot.１
に観られるGly（グリシン）とHyPro（ヒドロキシプロリ
ン）、Pro（プロリン）はコラーゲンの存在を示してい
る。また精製処理が施されたLot.２ではＧａｌＮＨ2以
外のアミノ酸が観られないことから、エイ類軟骨由来コ
ンドロイチン硫酸を構成するアミノ糖はガラクトサミン
種のみであること、当実験の精製処理により他のアミノ
酸、アミノ糖を完全に除去できたとが確認できた。
ＨＣlを用いて約１００℃、６時間の条件により加水分
解を行った。これをアミノ酸分析装置（JLC-500V、日本
電子製）で定量した。分析結果を図１に示した。Lot.１
に観られるGly（グリシン）とHyPro（ヒドロキシプロリ
ン）、Pro（プロリン）はコラーゲンの存在を示してい
る。また精製処理が施されたLot.２ではＧａｌＮＨ2以
外のアミノ酸が観られないことから、エイ類軟骨由来コ
ンドロイチン硫酸を構成するアミノ糖はガラクトサミン
種のみであること、当実験の精製処理により他のアミノ
酸、アミノ糖を完全に除去できたとが確認できた。
【００３６】 1Ｈ-ＮＭＲ測定
各試料(Lot．１〜５)の４００ＭＨｚ 1Ｈ-ＮＭＲスペク
トルを測定した。測定結果を図２に示した。Lot １には
0.8〜2.5ｐｐｍ付近にタンパク由来のシグナルが確認で
きた。このタンパクは主にコラーゲンであると考えられ
る。Lot ２のエイ類軟骨由来コンドロイチン硫酸のスペ
クトルは、Lot ４及びLot ５のスペクトルよりも、Lot
３のサケ鼻軟骨由来コンドロイチン硫酸のスペクトルに
近いことが確認できた。このLot ２について詳細に見て
みると、硫酸基が結合していると思われるＮ−アセチル
ガラクトサミンの、４位のプロトンのシグナル(GalNAＣ
-4S)が4.8ｐｐｍ付近に確認できた。また面積強度は落
ちるが、同様に６位のプロトンのシグナル(GalNAＣ-6S)
が4.1ｐｐｍ付近に確認できた。
トルを測定した。測定結果を図２に示した。Lot １には
0.8〜2.5ｐｐｍ付近にタンパク由来のシグナルが確認で
きた。このタンパクは主にコラーゲンであると考えられ
る。Lot ２のエイ類軟骨由来コンドロイチン硫酸のスペ
クトルは、Lot ４及びLot ５のスペクトルよりも、Lot
３のサケ鼻軟骨由来コンドロイチン硫酸のスペクトルに
近いことが確認できた。このLot ２について詳細に見て
みると、硫酸基が結合していると思われるＮ−アセチル
ガラクトサミンの、４位のプロトンのシグナル(GalNAＣ
-4S)が4.8ｐｐｍ付近に確認できた。また面積強度は落
ちるが、同様に６位のプロトンのシグナル(GalNAＣ-6S)
が4.1ｐｐｍ付近に確認できた。
【００３７】二糖ＨＰＬＣ分析
1) コンドロイチン硫酸分解酵素(Chodroitinase ACII)
5unitを0.02Ｍ酢酸ナトリウム緩衝液(ｐＨ6.0)500μ
ｌに溶解した。 2) エイ類軟骨由来コンドロイチン硫酸（試料Lot.２）
を、0.02Ｍ酢酸ナトリウム緩衝液(ｐＨ6.0)500μｌに溶
解し、1)で調整したコンドロイチン硫酸分解酵素(Chodr
oitinase ACII)溶液を加え、３７℃で２４時間攪拌し
た。 3) これを10,000rpm×10分間遠心分離し、上澄を回収
して凍結乾燥した。 4) 得られた二糖オリゴマーのＨＰＬＣ分析を行い、得
られたクロマトグラムから、構成二糖の組成を算出し
た。構成不飽和二糖の組成比を表２に示した。 なお、
それぞれの構造式は以下の通りである。なお、ＨＰＬＣ
分析の条件は表３に示した。
5unitを0.02Ｍ酢酸ナトリウム緩衝液(ｐＨ6.0)500μ
ｌに溶解した。 2) エイ類軟骨由来コンドロイチン硫酸（試料Lot.２）
を、0.02Ｍ酢酸ナトリウム緩衝液(ｐＨ6.0)500μｌに溶
解し、1)で調整したコンドロイチン硫酸分解酵素(Chodr
oitinase ACII)溶液を加え、３７℃で２４時間攪拌し
た。 3) これを10,000rpm×10分間遠心分離し、上澄を回収
して凍結乾燥した。 4) 得られた二糖オリゴマーのＨＰＬＣ分析を行い、得
られたクロマトグラムから、構成二糖の組成を算出し
た。構成不飽和二糖の組成比を表２に示した。 なお、
それぞれの構造式は以下の通りである。なお、ＨＰＬＣ
分析の条件は表３に示した。
【００３８】
【化１】エイ類軟骨由来コンドロイチン硫酸構成二糖の
構造式
構造式
【００３９】
【表２】
【００４０】
【表３】
【００４１】エイ類軟骨由来コンドロイチン硫酸の構造
は、６位硫酸化Ｎ−アセチルガラクトサミンと２位硫酸
化グルクロン酸で構成される２糖繰り返し単位が、その
８０％以上を占める極めて特徴的な組成を持つことが明
らかとなった。前述の通り、サメ軟骨由来コンドロイチ
ン硫酸は主にコンドロイチン硫酸Ｃであるとされてお
り、本発明のコンドロイチン硫酸は、６位硫酸化Ｎ−ア
セチルガラクトサミンと２位硫酸化グルクロン酸で構成
される２糖繰り返し単位を特異的に多く含む特徴的な構
造を持つ。
は、６位硫酸化Ｎ−アセチルガラクトサミンと２位硫酸
化グルクロン酸で構成される２糖繰り返し単位が、その
８０％以上を占める極めて特徴的な組成を持つことが明
らかとなった。前述の通り、サメ軟骨由来コンドロイチ
ン硫酸は主にコンドロイチン硫酸Ｃであるとされてお
り、本発明のコンドロイチン硫酸は、６位硫酸化Ｎ−ア
セチルガラクトサミンと２位硫酸化グルクロン酸で構成
される２糖繰り返し単位を特異的に多く含む特徴的な構
造を持つ。
【００４２】実施例３：エイ軟骨由来コンドロイチン硫
酸の機能性 本発明のエイ類軟骨由来コンドロイチン硫酸あるいはム
コ多糖タンパク複合体（以下、ＫＣＳ）は、従来既知の
構造と比較して特異な構造を有している。従って、他の
コンドロイチン硫酸にはない新たな生理活性作用をもつ
可能性が考えられる。これを検討するため、実施例１で
調製したエイ軟骨由来コンドロイチン硫酸を含むムコ多
糖タンパク複合体を供試料として、動物試験によって機
能性評価を行った。
酸の機能性 本発明のエイ類軟骨由来コンドロイチン硫酸あるいはム
コ多糖タンパク複合体（以下、ＫＣＳ）は、従来既知の
構造と比較して特異な構造を有している。従って、他の
コンドロイチン硫酸にはない新たな生理活性作用をもつ
可能性が考えられる。これを検討するため、実施例１で
調製したエイ軟骨由来コンドロイチン硫酸を含むムコ多
糖タンパク複合体を供試料として、動物試験によって機
能性評価を行った。
【００４３】抗腫瘍性
４週齢のＢＤＦ1及びＣＤＦ1マウスに飼料に添加したＫ
ＣＳを４２日間連続で混餌投与した。２８日目に、腫瘍
細胞を１×１０6 cells/0.05ｍｌ/マウスの割合で移植
し（Ca 755はＢＤＦ1、Colon 26はＣＤＦ1）、移植後、
ＫＣＳの投与を継続した。ＫＣＳ投与終了翌日（４３日
目）、エーテル麻酔下にマウスを頚椎脱臼し、腫瘍を摘
出して湿重量を測定した。試験区は表４に示した。有意
差検定はDunnettの多重比較により行った。得られた結
果を図３及び図４に示した。マウス乳腺癌（Ca 755）に
ついてはＫＣＳ ６％以上、マウス大腸癌（Colon 26）
についてはＫＣＳ ３％以上の投与で対照群に比較して
統計学的に有意な抗腫瘍作用が認められた。
ＣＳを４２日間連続で混餌投与した。２８日目に、腫瘍
細胞を１×１０6 cells/0.05ｍｌ/マウスの割合で移植
し（Ca 755はＢＤＦ1、Colon 26はＣＤＦ1）、移植後、
ＫＣＳの投与を継続した。ＫＣＳ投与終了翌日（４３日
目）、エーテル麻酔下にマウスを頚椎脱臼し、腫瘍を摘
出して湿重量を測定した。試験区は表４に示した。有意
差検定はDunnettの多重比較により行った。得られた結
果を図３及び図４に示した。マウス乳腺癌（Ca 755）に
ついてはＫＣＳ ６％以上、マウス大腸癌（Colon 26）
についてはＫＣＳ ３％以上の投与で対照群に比較して
統計学的に有意な抗腫瘍作用が認められた。
【００４４】
【表４】
【００４５】抗ＭＲＳＡ（メチシリン耐性黄色ブドウ球
菌） ４週齢のｄｄＹ系雄性マウスに飼料に添加したＫＣＳを
４２日間連続で混餌投与した。２５日目よりマウスにシ
クロホスファミド（EX）を６ｍｇ/動物の割合で１日１
回３日間連続して腹腔内投与した。３日目のシクロホス
ファミドを投与した翌日に、ＭＲＳＡを１０7個/動物の
割合で静脈内投与することにより感染させた。ＭＲＳＡ
接種日より動物が死亡するまで観察を行い、生存日数を
算出した。ＫＣＳは、動物が死亡するまで１０日間を限
度に投与を継続した。試験区は表５に示した。有意差検
定はKaplan-Meierの生存分析検定を行った。得られた結
果を図５に示した。生存分析検定の結果では、各試験区
間で有意差は認められなかった。しかし、３日後の生存
率でみると、対照群では50％であったが、ＫＣＳ６％を
摂取させたマウスでは87.5％、ＫＣＳ ９％を摂取させ
たマウスでは１００％であり、若干の延命効果がみられ
た。
菌） ４週齢のｄｄＹ系雄性マウスに飼料に添加したＫＣＳを
４２日間連続で混餌投与した。２５日目よりマウスにシ
クロホスファミド（EX）を６ｍｇ/動物の割合で１日１
回３日間連続して腹腔内投与した。３日目のシクロホス
ファミドを投与した翌日に、ＭＲＳＡを１０7個/動物の
割合で静脈内投与することにより感染させた。ＭＲＳＡ
接種日より動物が死亡するまで観察を行い、生存日数を
算出した。ＫＣＳは、動物が死亡するまで１０日間を限
度に投与を継続した。試験区は表５に示した。有意差検
定はKaplan-Meierの生存分析検定を行った。得られた結
果を図５に示した。生存分析検定の結果では、各試験区
間で有意差は認められなかった。しかし、３日後の生存
率でみると、対照群では50％であったが、ＫＣＳ６％を
摂取させたマウスでは87.5％、ＫＣＳ ９％を摂取させ
たマウスでは１００％であり、若干の延命効果がみられ
た。
【００４６】
【表５】
【００４７】皮膚の保湿性
４週齢のモルモットを、無処置群は正常飼料、対照群は
ビタミンC欠乏飼料を与えた。ＫＣＳ群には、ビタミンC
欠乏飼料にＫＣＳを配合した飼料を与え、それぞれ２８
日間飼育した。２８日間飼育後、背部皮膚を剥離し、コ
ラーゲン含量を測定した。コラーゲン含量測定は、６０
℃で一晩乾燥した皮膚を粉砕し、６Ｍ塩酸中でヒーティ
ングブロック（ヤマト科学(株)、HF21）を用いて１１０
℃、２４時間加水分解した。これを試料として、クロラ
ミンＴ法によりヒドロキシプロリン（Hyp）含量を測定
した。試験区は表６に示した。有意差検定はDunnettの
多重比較により行った。得られた結果を図６に示した。
コラーゲンは、皮膚における主要な構成成分であり、真
皮中では単位乾燥重量当たり７０〜８０％含有される。
また、老化に伴ない皮膚コラーゲン含量の減少も知られ
ていることから、コラーゲンは皮膚の弾力を保ち、しわ
を防ぐなどの機能を有すると考えられている。モルモッ
トをビタミンC欠乏飼料で飼育した結果、皮膚中のコラ
ーゲン含量は約50％減少した。一方、ＫＣＳ ３％を摂
取させたモルモットでは、コラーゲン含量低下の抑制傾
向が認められた。
ビタミンC欠乏飼料を与えた。ＫＣＳ群には、ビタミンC
欠乏飼料にＫＣＳを配合した飼料を与え、それぞれ２８
日間飼育した。２８日間飼育後、背部皮膚を剥離し、コ
ラーゲン含量を測定した。コラーゲン含量測定は、６０
℃で一晩乾燥した皮膚を粉砕し、６Ｍ塩酸中でヒーティ
ングブロック（ヤマト科学(株)、HF21）を用いて１１０
℃、２４時間加水分解した。これを試料として、クロラ
ミンＴ法によりヒドロキシプロリン（Hyp）含量を測定
した。試験区は表６に示した。有意差検定はDunnettの
多重比較により行った。得られた結果を図６に示した。
コラーゲンは、皮膚における主要な構成成分であり、真
皮中では単位乾燥重量当たり７０〜８０％含有される。
また、老化に伴ない皮膚コラーゲン含量の減少も知られ
ていることから、コラーゲンは皮膚の弾力を保ち、しわ
を防ぐなどの機能を有すると考えられている。モルモッ
トをビタミンC欠乏飼料で飼育した結果、皮膚中のコラ
ーゲン含量は約50％減少した。一方、ＫＣＳ ３％を摂
取させたモルモットでは、コラーゲン含量低下の抑制傾
向が認められた。
【００４８】
【表６】
【００４９】
【発明の効果】本発明のコンドロイチン硫酸及びこれを
含むムコ多糖タンパク複合体は、例えば高齢者や病弱
者、体力が衰えた者などに対しての免疫力増強剤として
の機能を有し、また従来のコンドロイチン硫酸と同様
に、抗炎症剤、保湿剤、関節潤滑剤、眼精疲労緩和剤、
皮膚の代謝改善剤などきわめて多様な用途に活用可能な
ものであり、さらにその特異な構造による新規機能は、
医薬品、化粧品、食品、高分子工業など広い範囲に応用
できる可能性がある。
含むムコ多糖タンパク複合体は、例えば高齢者や病弱
者、体力が衰えた者などに対しての免疫力増強剤として
の機能を有し、また従来のコンドロイチン硫酸と同様
に、抗炎症剤、保湿剤、関節潤滑剤、眼精疲労緩和剤、
皮膚の代謝改善剤などきわめて多様な用途に活用可能な
ものであり、さらにその特異な構造による新規機能は、
医薬品、化粧品、食品、高分子工業など広い範囲に応用
できる可能性がある。
【図１】各試料に含まれるの種々アミノ酸の濃度割合を
示すグラフである。
示すグラフである。
【図２】各試料の400ＭＨZ 1Ｈ-ＮＭＲスペクトルチャ
ートである。
ートである。
【図３】ＫＣＳの乳腺癌Adenocarcinoma755に対する効
果（ＫＣＳ添加量と腫瘍湿重量との関係）を示すグラフ
である。
果（ＫＣＳ添加量と腫瘍湿重量との関係）を示すグラフ
である。
【図４】ＫＣＳの大腸癌Colon26に対する効果（ＫＣＳ
添加量と腫瘍湿重量との関係）を示すグラフである。
添加量と腫瘍湿重量との関係）を示すグラフである。
【図５】ＫＣＳのＭＲＳＡに対する効果（ＫＣＳ添加量
の異なる複数の例についてのＭＲＳＡ感染日数と生存動
物数との関係）を示すグラフである。
の異なる複数の例についてのＭＲＳＡ感染日数と生存動
物数との関係）を示すグラフである。
【図６】ＫＣＳの皮膚機能に対する効果（ＫＣＳ添加量
と皮膚コラーゲン含量との関係）を示すグラフである。
と皮膚コラーゲン含量との関係）を示すグラフである。
フロントページの続き
(51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考）
Ａ６１Ｋ 31/737 Ａ６１Ｋ 31/737 ４Ｈ０４５
Ａ６１Ｐ 3/00 Ａ６１Ｐ 3/00
17/00 17/00
17/16 17/16
19/02 19/02
27/00 27/00
29/00 29/00
31/04 31/04
35/00 35/00
37/04 37/04
Ｃ０７Ｋ 1/12 Ｃ０７Ｋ 1/12
14/46 14/46
Ｃ１２Ｐ 19/04 Ｃ１２Ｐ 19/04 Ｚ
21/06 21/06
(71)出願人 599038651
武田 忠明
北海道釧路市仲浜町４番25号 北海道立釧
路水産試験場内
(71)出願人 598067821
蓑嶋 裕典
北海道札幌市北区北19条西11丁目１番地
北海道立工業試験場内
(71)出願人 597115794
鎌田 樹志
北海道札幌市北区北19条西11丁目１番地
北海道立工業試験場内
(71)出願人 501186003
松嶋 景一郎
北海道札幌市北区北十九条西11丁目１番地
北海道立工業試験場内
(72)発明者 宮本 宜之
北海道稚内市栄１丁目11番19号
(72)発明者 今村 琢磨
北海道釧路市仲浜町４番25号 北海道立釧
路水産試験場内
(72)発明者 麻生 真悟
北海道釧路市仲浜町４番25号 北海道立釧
路水産試験場内
(72)発明者 武田 忠明
北海道釧路市仲浜町４番25号 北海道立釧
路水産試験場内
(72)発明者 蓑嶋 裕典
北海道札幌市北区北19条西11丁目１番地
北海道立工業試験場内
(72)発明者 鎌田 樹志
北海道札幌市北区北19条西11丁目１番地
北海道立工業試験場内
(72)発明者 松嶋 景一郎
北海道札幌市北区北19条西11丁目１番地
北海道立工業試験場内
(72)発明者 惠良田 知樹
北海道札幌市北区北13条８丁目 北海道大
学大学院工学研究科分子化学専攻内
Ｆターム(参考） 4B018 LB10 MD17 MD20 MD22 MD31
MD33 MD74 ME05 ME14 MF11
MF12 MF14
4B064 AF04 AF11 AF17 AF22 CB06
DA01 DA10
4C083 AD341 AD342 CC02 EE07
EE12 EE13
4C086 AA01 AA02 AA03 AA04 EA26
NA14 ZA33 ZA89 ZA96 ZB09
ZB11 ZB26 ZB35 ZC21
4C090 AA01 AA04 AA07 AA09 AA10
BA66 BA91 BB84 BC28 CA01
CA19 CA32 CA33 CA42 DA09
DA23 DA26 DA27
4H045 AA10 AA20 AA30 BA53 CA52
EA01 FA70
Claims (11)
- 【請求項１】 Ｃ６位一硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラ
クトサミンとＣ２位一硫酸化Ｄ−グルクロン酸からなる
二糖単位を６０％以上含み、さらに、非硫酸化Ｎ−アセ
チル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸からなる
二糖単位、Ｃ４位またはＣ６位一硫酸化Ｎ−アセチル−
Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸からなる二糖単
位、及びＣ４，Ｃ６位二硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラ
クトサミンとＤ−グルクロン酸からなる二糖単位を含む
コンドロイチン硫酸。 - 【請求項２】 Ｃ６位一硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラ
クトサミンとＣ２位一硫酸化Ｄ−グルクロン酸からなる
二糖単位（８０．２±１６．０）％、非硫酸化Ｎ−アセ
チル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸からなる
二糖単位（１０．０±３．０）％、Ｃ４位またはＣ６位
一硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グル
クロン酸からなる二糖単位（２．１±０．７）％、Ｃ
４，Ｃ６位二硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミン
とＤ−グルクロン酸からなる二糖単位（７．７±２．
３）％を含む請求項１に記載のコンドロイチン硫酸。 - 【請求項３】 非硫酸化Ｎ―アセチル―Ｄ―ガラクトサ
ミンを含む二糖単位、Ｃ４位またはＣ６位一硫酸化Ｎ−
アセチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸から
なる二糖単位、Ｃ６位一硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラ
クトサミンとＣ２位一硫酸化Ｄ−グルクロン酸からなる
二糖単位、Ｃ４、Ｃ６位二硫酸化Ｎ―アセチル―Ｄ―ガ
ラクトサミンを含む二糖単位を含む二糖単位がランダム
に連結した構造を有する請求項１または２に記載のコン
ドロイチン硫酸。 - 【請求項４】 エイ軟骨から得られる請求項１乃至３の
いずれかに記載のコンドロイチン硫酸。 - 【請求項５】 （Ａ）Ｃ６位一硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ
−ガラクトサミンとＣ２位一硫酸化Ｄ−グルクロン酸か
らなる二糖単位を６０％以上含み、さらに、非硫酸化Ｎ
−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸か
らなる二糖単位、Ｃ４位またはＣ６位一硫酸化Ｎ−アセ
チル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸からなる
二糖単位、及びＣ４，Ｃ６位二硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ
−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸からなる二糖単位
を含むコンドロイチン硫酸と（Ｂ）タンパク質とを含む
ムコ多糖タンパク複合体。 - 【請求項６】 （Ａ）Ｃ６位一硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ
−ガラクトサミンとＣ２位一硫酸化Ｄ−グルクロン酸か
らなる二糖単位（８０．２±１６．０）％、非硫酸化Ｎ
−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸か
らなる二糖単位（１０．０±３．０）％、Ｃ４位または
Ｃ６位一硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ
−グルクロン酸からなる二糖単位（２．１±０．７）
％、Ｃ４，Ｃ６位二硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクト
サミンとＤ−グルクロン酸からなる二糖単位（７．７±
２．３）％を含む請求項１に記載のコンドロイチン硫酸
と（Ｂ）タンパク質とを含む請求項５に記載のムコ多糖
タンパク複合体。 - 【請求項７】 エイ軟骨から得られる請求項５または６
に記載のコンドロイチン硫酸を含むムコ多糖タンパク複
合体。 - 【請求項８】 エイ軟骨を粉砕し、酸、アルカリまたは
酵素で処理し、得られた消化液を乾燥粉末化させること
を特徴とする、Ｃ６位一硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラ
クトサミンとＣ２位一硫酸化Ｄ−グルクロン酸からなる
二糖単位を６０％以上含み、さらに、非硫酸化Ｎ−アセ
チル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸からなる
二糖単位、Ｃ４位またはＣ６位一硫酸化Ｎ−アセチル−
Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸からなる二糖単
位、及びＣ４，Ｃ６位二硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラ
クトサミンとＤ−グルクロン酸からなる二糖単位を含む
コンドロイチン硫酸の製造方法。 - 【請求項９】 エイ軟骨を粉砕し、酸、アルカリまたは
酵素で処理し、得られた消化液を乾燥粉末化させること
を特徴とする、（Ａ）Ｃ６位一硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ
−ガラクトサミンとＣ２位一硫酸化Ｄ−グルクロン酸か
らなる二糖単位を６０％以上含み、さらに、非硫酸化Ｎ
−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸か
らなる二糖単位、Ｃ４位またはＣ６位一硫酸化Ｎ−アセ
チル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸からなる
二糖単位、及びＣ４，Ｃ６位二硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ
−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸からなる二糖単位
を含むコンドロイチン硫酸と（Ｂ）タンパク質とを含む
ムコ多糖タンパク複合体の製造方法。 - 【請求項１０】 Ｃ６位一硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガ
ラクトサミンとＣ２位一硫酸化Ｄ−グルクロン酸からな
る二糖単位を６０％以上含み、さらに、非硫酸化Ｎ−ア
セチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸からな
る二糖単位、Ｃ４位またはＣ６位一硫酸化Ｎ−アセチル
−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸からなる二糖
単位、及びＣ４，Ｃ６位二硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガ
ラクトサミンとＤ−グルクロン酸からなる二糖単位を含
むコンドロイチン硫酸、または、前記コンドロイチン硫
酸とタンパク質とを含むムコ多糖タンパク複合体を含む
医薬品、化粧品または食品。 - 【請求項１１】 Ｃ６位一硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガ
ラクトサミンとＣ２位一硫酸化Ｄ−グルクロン酸からな
る二糖単位を６０％以上含み、さらに、非硫酸化Ｎ−ア
セチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸からな
る二糖単位、Ｃ４位またはＣ６位一硫酸化Ｎ−アセチル
−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸からなる二糖
単位、及びＣ４，Ｃ６位二硫酸化Ｎ−アセチル−Ｄ−ガ
ラクトサミンとＤ−グルクロン酸からなる二糖単位を含
むコンドロイチン硫酸を有効成分として含み、抗腫瘍作
用、免疫附活作用及び皮膚コラーゲンの減少抑制などの
機能を有することを特徴とするコンドロイチン硫酸含有
医薬品、化粧品または食品。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2002070722A JP2003268004A (ja) | 2002-03-14 | 2002-03-14 | エイ軟骨由来コンドロイチン硫酸とその製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2002070722A JP2003268004A (ja) | 2002-03-14 | 2002-03-14 | エイ軟骨由来コンドロイチン硫酸とその製造方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2003268004A true JP2003268004A (ja) | 2003-09-25 |
Family
ID=29201217
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2002070722A Pending JP2003268004A (ja) | 2002-03-14 | 2002-03-14 | エイ軟骨由来コンドロイチン硫酸とその製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2003268004A (ja) |
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2004039994A1 (ja) * | 2002-11-01 | 2004-05-13 | Nippon Barrier Free Co., Ltd. | コンドロイチン硫酸Na，コンドロイチン硫酸含有物及びそれらの製造方法 |
| JP2006016336A (ja) * | 2004-07-01 | 2006-01-19 | Shiibaion:Kk | Ｉｌ−１２産生誘導活性を有するマクロファージ活性化剤 |
| JP2006182933A (ja) * | 2004-12-28 | 2006-07-13 | Nippon Barrier Free:Kk | ムコ多糖類粉末の製造方法 |
| JP2006225485A (ja) * | 2005-02-16 | 2006-08-31 | Hiroshima Univ | コンドロイチンの製造方法 |
| JP2007063400A (ja) * | 2005-08-31 | 2007-03-15 | Chiba Univ | アオヤギ由来のコンドロイチン硫酸 |
| WO2007094248A1 (ja) * | 2006-02-14 | 2007-08-23 | Kushiro Industrial Technology Center | プロテオグリカンの製造方法 |
| JP2013199639A (ja) * | 2012-02-21 | 2013-10-03 | Hokkaido Research Organization | コンドロイチン硫酸オリゴ糖を製造する方法 |
| JP2016029150A (ja) * | 2014-07-16 | 2016-03-03 | 地方独立行政法人青森県産業技術センター | 高保水性プロテオグリカン、化粧料および高保水性プロテオグリカンの製造法 |
| WO2016159296A1 (ja) * | 2015-03-31 | 2016-10-06 | 生化学工業株式会社 | グリコサミノグリカンの硫酸化方法 |
-
2002
- 2002-03-14 JP JP2002070722A patent/JP2003268004A/ja active Pending
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| JP4719878B2 (ja) * | 2005-08-31 | 2011-07-06 | 国立大学法人 千葉大学 | アオヤギ由来のコンドロイチン硫酸 |
| JP2007063400A (ja) * | 2005-08-31 | 2007-03-15 | Chiba Univ | アオヤギ由来のコンドロイチン硫酸 |
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| US8153769B2 (en) | 2006-02-14 | 2012-04-10 | Kushiro Industrial Technology Center | Process for producing proteoglycan |
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| WO2016159296A1 (ja) * | 2015-03-31 | 2016-10-06 | 生化学工業株式会社 | グリコサミノグリカンの硫酸化方法 |
| JP6063103B1 (ja) * | 2015-03-31 | 2017-01-18 | 生化学工業株式会社 | グリコサミノグリカンの硫酸化方法 |
| JP2017048404A (ja) * | 2015-03-31 | 2017-03-09 | 生化学工業株式会社 | グリコサミノグリカンの硫酸化方法 |
| EP3279220A4 (en) * | 2015-03-31 | 2018-12-19 | Seikagaku Corporation | Method for sulfating glycosaminoglycan |
| US10259889B2 (en) | 2015-03-31 | 2019-04-16 | Seikagaku Corporation | Method for sulfating glycosaminoglycan |
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