CN1814782A - 利用酶工程技术从鱼鳞中提取小分子胶原蛋白的方法 - Google Patents

Abstract

利用酶工程技术从鱼鳞中提取小分子胶原蛋白的方法。包括采用鱼鳞作为本发明主要原料。并利用生物酶切技术从鱼鳞中提取小分子鱼鳞胶原蛋白。所述小分子鱼鳞胶原蛋白的制取，须经过对鱼鳞的筛选清洗、晾干、粉碎过筛，配水搅，利用蛋白酶酶解、灭酶、过滤。将得到的滤液经浓缩、干燥后，即获得小分子鱼鳞胶原蛋白。

Description

利用酶工程技术从鱼鳞中提取小分子胶原蛋白的方法

(一)技术领域：本发明涉及一种鱼鳞深加工技术，尤其是一种以鱼鳞为原料，利用酶工程技术生产小分子胶原蛋白的工艺。

(二)背景技术：

鱼鳞是鱼真皮层的变形物，于鱼鳞的药用价值，在古医书《开宝本草》、《会约医镜》、《医林篡要》、《本草纲目》、《纲目拾遗》等书中也对鱼鳞的医用价值进行了论述，指出：鳞其性味甘、咸、平。功能主治：养血、散血、止血；治吐血、再生障碍贫血、崩漏带下、淤滞腹痛、痔漏；治疗疮、无名肿毒、乳腺炎、烫火伤、补肾固精；治血友病、白血病、产后血晕等。

鱼鳞中的主要成分是胶原蛋白。胶原蛋白是一种重要的功能性蛋白质，它与细胞增生、分化、运动、免疫、关节润滑、伤口愈合等密切相关。现代研究表明，胶原蛋白具有增加蛋白质营养、预防骨质疏松、抗氧化、延缓衰老、美容、降血压等功能。目前生产的胶原蛋白制品的原料主要来源是从猪、牛等陆生哺乳动物的皮、骨和肌腱。近年来随着全球生态环境恶化导致疯牛病、口蹄疫等流行病的发生，使得从陆生动物皮、骨中提取胶原蛋白的危险性增大，而以鱼鳞作为原料提取胶原蛋白则安全的多。

基于以上特点，鱼鳞胶原蛋白可以广泛应用于食品、保健品、化妆品、日用化工、生物合成等行业，由于胶原蛋白还具有良好的生物相容性和弱的抗原性，胶原蛋白在医药方面也有广泛的用途。

鱼鳞胶原在日本、美国、挪威等国家从上世纪90年代就得到广泛的研究，进入21世纪以后国内关于鱼鳞中提取胶原蛋白的研究也多了起来，但是无论在国内还是国外，他们生产鱼鳞胶原都需要用到大量的酸碱处理，而酸、碱处理一般存在以下问题：生产周期长、采用大量的酸、碱处理，污染严重、生产工艺复杂、设备投资大、占地面积大、氨基酸损失和破坏严重、得到的鱼鳞胶原分子量大，不利于人体吸收等缺点。而利用酶工程技术从鱼鳞中提取胶原蛋白则可以完全克服这些缺点。目前国内外利用鱼鳞生产小分子胶原蛋白而不需要利用酸碱处理的工艺技术尚未见报道。

(三)发明内容

本发明的目的是提供一种无需酸碱处理，直接利用生物酶切技术从鱼鳞中提取胶原蛋白，对鱼鳞进行深加工的工艺。

本发明的目的可以通过如下措施来实施。

一种利用酶工程技术从鱼鳞中提取胶原蛋白的方法：

1.将洗净晾干的鱼鳞通过粉碎机粉碎，过80～200目标准筛，得到鱼鳞粉；

2.将鱼鳞粉按其重量的6～20倍加水搅拌均匀，得到混悬液；

3.将上述混悬物送进反应罐，升温至35℃～70℃，用10％的碱液调节pH为6～10，按鱼鳞粉重量的0.5％～5％加入蛋白酶进行酶解，酶解时间为3～12小时，酶解完毕，将得到的酶解液升温至90℃，保持10分钟，使酶失活；

4.将酶解液过滤得到上清夜和滤渣；

5.将上清液浓缩、干燥得到理想的小分子鱼鳞胶原蛋白。

本发明的附图是利用蛋白酶从鱼鳞中提取小分子胶原蛋白的工艺流程图。

从附图中可以清楚的了解到利用本发明工艺提取小分子鱼鳞胶原蛋白的全过程。

所述蛋白酶为：胰蛋白酶、胃蛋白酶、碱性蛋白酶、菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、复合蛋白酶中的一种或几种。

本发明相对传统生产工艺有如下优点：

1.采用本发明所述工艺避开了传统生产工艺所需要的酸碱处理，有效解决了传统工艺中酸碱所带来的环境污染，鱼鳞胶原蛋白中氨基酸及生理活性成分被破坏的缺点。

2.采用本发明所述工艺生产的胶原蛋白经过蛋白酶的切割，含有各种片段的小分子量胶原蛋白，不但利于人体吸收利用，而且其中含有很多具有抗氧化、延缓衰老、降血压等生理功能的生物活性肽，为开发各种功能产品提供新资源。

3.本发明的技术生产工艺简单，生产周期短。成本低廉，产品安全，无毒付作用，可以广泛的应用于食品、保健品、化妆品和医药领域。

(四)具体实施方式

以下用实例来进一步说明所提供的技术方案实施的全过程：

实施例一：

准确称取洗净、晾干的鱼鳞1千克，送进粉碎机中粉碎，并过100目标准筛，将过筛后的鱼鳞粉加入8千克蒸馏水，搅拌均匀，至鱼鳞粉成混悬液状态。将混悬液升温至35℃～70℃，在自然pH状态下加入10克中性蛋白酶进行酶解，酶解时间为5小时，酶解完毕，升温到90℃保持10分钟使酶失活，然后将酶解液过滤得到上清液和滤渣，上清液经浓缩、干燥得到小分子鱼鳞胶原蛋白。

实施例二：

准确称取洗净、晾干的鱼鳞2千克，送进粉碎机中粉碎，并过120目标准筛，将过筛后的鱼鳞粉加入20千克蒸馏水，搅拌均匀，至鱼鳞粉成混悬液状态。将混悬液升温至35℃～70℃，用10％的碱液调节pH＝8.0，加入10克碱性蛋白酶进行酶解，酶解时间为8小时，酶解完毕，升温到90℃保持10分钟使酶失活，然后将酶解液过滤得到上清液和滤渣，上清液经浓缩、干燥得到小分子鱼鳞胶原蛋白。

实施例三：

准确称取洗净、晾干的鱼鳞5千克，送进粉碎机中粉碎，并过120目标准筛，将过筛后的鱼鳞粉加入50千克蒸馏水，搅拌均匀，至鱼鳞粉成混悬液状态。将混悬液升温至35℃～70℃，用10％的碱液调节pH＝7.5，同时加入10克碱性蛋白酶和10克木瓜蛋白酶进行酶解，酶解时间为4小时，酶解完毕，升温到90℃保持10分钟使酶失活，然后将酶解液过滤得到上清液和滤渣，上清液经浓缩、干燥得到小分子鱼鳞胶原蛋白。

Claims (4)

1. 一种利用酶工程技术从鱼鳞中提取小分子鱼鳞胶原蛋白的方法，其特征在于包括：

   (1)采用洗净晾干的鱼鳞作为制取小分子鱼鳞胶原蛋白的原料，将鱼鳞粉碎、过80～200目以上标准筛，按鱼鳞重量加进6～20倍的水，搅拌均匀；
2. (2)按鱼鳞份数重量的0.5％～5％加入蛋白酶，在35～70℃进行酶解3～12小时，将得到的酶解液升温至90℃，恒温灭酶；
3. (3)将酶解液过滤所得到的上清液经浓缩、干燥、得到小分子鱼鳞胶原蛋白粉末。
4. (4)如权利要求1所述的一种利用酶工程技术从鱼鳞中提取小分子胶原蛋白的方法，其特征在于所述鱼鳞胶原蛋白可以作为添加剂广泛用于食品、保健品、化妆品。