JP2003169607A - 魚介類の飼育方法及び飼料 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 養殖魚介類の飼育方法及び飼料であり、安全
な物質で魚介類の免疫活性を向上させることで、養殖魚
介類の生産性の向上と環境保全、養殖される魚介類の食
品としての安全性の向上を達成すること。 【解決手段】 酵母を自己消化法や蛋白質分解酵素を含
んだ酵素剤処理で分解して得られる、水溶性成分及び水
不溶性成分を乾燥重量で３０：７０から８０：２０の比
率で含む酵母分解組成物を飼料に添加して魚介類に給与
することで、間歇投与することなく魚介類の免疫活性を
向上させることができる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、養殖魚介類の免疫
活性を向上させ、養殖の生産性と養殖した魚介類の食品
としての安全性を向上させる魚介類の飼育方法及び魚介
類の飼育に用いる飼料に関する。

【０００２】

【従来の技術】魚介類の養殖は、経済的に確立して以
来、生産量と対象魚種は、引き続き増加傾向にあり、さ
らに一層生産性と食品としての安全性の向上が求められ
るようになっている。とりわけ、高密度の飼育や水質の
汚染による病気発生への対策が重要となっており、病気
予防には、ビタミン、各種免疫賦活剤または生菌剤など
の投与が、病気の治療には抗生物質、抗菌剤などの投与
が行われてきた。しかし、抗生物質や抗菌剤などの薬剤
の多用は、耐性菌の発生はもとより、水質を始めとする
環境の汚染と生産物への残留が食品としての安全性の面
で危惧される。

【０００３】そこで、抗生物質や抗菌剤などの病気治療
用の薬剤の使用はできるだけ限定することが求められ、
病気に罹らないようにするか、罹患しても被害が抑えら
れるようにする新たな対策が近年盛んに試みられるよう
になっている。具体的には、人間に使用される健康食品
である、キトサン、生菌剤、ポリフェノール、ニンニ
ク、漢方、グルタチオン、オリゴ糖、多糖類などの投与
が例示される。また、酵母由来の成分を投与する方法と
して、自己消化などによる分解後の水溶性成分である酵
母エキスを投与する方法（特開平７−１８４５９５）、
酵母を出発原料として、数回のアルカリ抽出処理及び数
回の酸抽出処理を行って不溶性酵母成分を回収すること
により得られる純度の高いグルカンなどを投与する方法
（特開平４−２５３７０３）などが例示できる。これら
の酵母由来の成分の中には、免疫活性の向上効果をうた
ったものもある。しかし、実際の製品のカタログや文献
には、免疫活性を維持するために、これらの酵母由来の
成分を１週間ごとに間歇投与するように求めるものもあ
る。このため業界では、通常、間歇投与が実施されてお
り、日常的に給与する飼料に添加して用いることができ
ず、必ずしも使い易い状況とはいえず、さらに効果の明
確な物質が求められていた。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】そこで、本発明は、食
品のような安全なものから、魚介類の免疫活性を向上さ
せる物質を見出し、使用することにより、魚介類の養殖
における生産性の向上と環境保全、養殖される魚介類の
食品としての安全性の向上を達成することを目的とす
る。

【０００５】

【課題を解決するための手段】上記課題を達成するため
に、本発明者らは、安全で、かつ魚介類の免疫機能を向
上させる物質を見出すために、種々の物質をスクリーニ
ングした。その結果、酵母を自己消化法や蛋白質分解酵
素を含んだ酵素剤処理で分解して得られる組成物であっ
て、水溶性成分及び水不溶性成分を含む酵母分解組成
物、特に前記水溶性成分と水不溶性成分の両成分を適度
の比率で、具体的には乾燥重量で３０：７０から８０：
２０の比率で含んでいる酵母分解組成物が、魚介類に対
して優れた免疫賦活効果を示すこと、即ち従来から用い
られている酵母エキスのような水溶性成分のみを投与し
たり、酵母細胞壁に由来する不溶性のグルカン類のみを
投与するより、より優れた免疫賦活効果が達成できるこ
とを見出した。また、酵母の分解に使用する酵素剤を選
択することにより、さらに優れた効果を示すことを見出
した。

【０００６】即ち、本発明の第１は、酵母を分解した水
溶性成分及び水不溶性成分を含む酵母分解組成物を投与
することにより免疫活性を向上させることを特徴とする
魚介類の飼育方法である。また、本発明の第２は、前記
酵母分解組成物を含んだ魚介類用の飼料である。

【０００７】本発明における酵母の分解方法は、自己消
化法又は蛋白質分解酵素を含む酵素剤処理のいずれでも
よく、両者を併用してもよい。本発明で用いる酵母分解
組成物中の水溶性成分と水不溶性成分との比率は、乾燥
重量で３０：７０から８０：２０の範囲が好ましい。前
記酵母分解組成物中の水溶性成分と水不溶性成分との比
率は、酵母を分解した後、必要に応じて水溶性成分を分
離除去することによって前記の範囲に調整してもよい。
前記酵素剤処理に用いる酵素剤としては、グルカナーゼ
活性総量が原料酵母乾燥重量１ｇあたり２０ｕｎｉｔ以
下であることが好ましい。

【０００８】前記酵母分解組成物の投与量としては、魚
介体重１ｋｇあたり０．０１〜１．０ｇ／日とすること
が好ましい。

【０００９】本発明によれば、養殖魚介類の免疫活性を
向上させることができる。また、従来の免疫賦活剤の場
合には、通常７日間毎の間歇投与が必要なことが多い
が、本発明によると、酵母分解組成物は間歇投与するこ
となく持続的に免疫効果が得られ、日常的に給与する飼
料に添加しておくことができ、給餌の煩雑さを省くこと
ができる。

【００１０】

【発明の実施の形態】本発明で対象とする魚介類とは、
魚類、甲殻類など、養殖される全ての魚介類が対象とな
る。魚類としては、例えばタイ、ブリ、アユ、フグ、ウ
ナギ等の養殖されている食用の魚類が挙げられ、海産
魚、淡水魚の別を問わない。さらに、食用の養殖魚のみ
でなく、金魚、熱帯魚など鑑賞用の養殖魚も対象とする
ことができる。また、甲殻類としてはクルマエビなどが
挙げられる。対象となる魚介の大きさは、孵化直後か
ら、稚魚、成魚の段階までの全ての段階の魚介であり、
成長の段階を問わない。

【００１１】本発明で用いられる酵母としては、例え
ば、トルラ酵母、パン酵母、ビール酵母、清酒酵母、赤
色酵母と称せられる、キャンディダ属、サッカロマイセ
ス属、クルイベロマイセス属、ファフィア属などに属す
る酵母が挙げられる。上記酵母の培養条件は特に制限は
無く、通常の培養条件で用いたものが使用可能である。
さらに、市販のパン酵母、例えば商品名「カネカレッド
イースト」（鐘淵化学工業(株)製）、商品名「オリエン
タルイースト」（オリエンタル酵母(株)製）、商品名
「ダイヤイースト」（協和醗酵工業(株)製）などを用い
ることもできる。又、乾燥した酵母でも、乾燥していな
い酵母でも使用可能である。

【００１２】本発明で用いる酵母分解組成物とは、酵母
を自己消化法及び／又は蛋白分解酵素を含む酵素剤によ
り分解することにより得られる組成物であり、その典型
的な製造方法は特開平１１−３３２５１０に記載されて
いる。即ち、酵母分解組成物を得るための自己消化法と
しては、通常の酵母エキス製造に用いる方法でよく、例
えば原料酵母を水に菌体乾燥重量として約１０〜１５％
の濃度に懸濁させた後、６０〜６５℃にて５〜２０秒間
加熱処理を行い、次に食塩、酢酸エチルなどを添加し、
４０〜５０℃、ＰＨ５〜９にて１０〜２４時間保持させ
ることにより行うことができる。又、酵母に酵素剤を作
用させて酵母分解組成物を得る方法としては、通常の酵
母エキスを得る方法で良く、例えば、原料酵母を菌体乾
燥重量として３〜３０％の濃度となるように水に懸濁
し、ＰＨ、温度、添加量を使用する酵素剤の好適の範囲
にコントロールして分解反応をする。使用する酵素剤と
しては、エンドプロテアーゼ、エキソプロテアーゼなど
の蛋白質分解酵素や溶菌酵素が使用可能であり、市販品
としては、商品名「サモアーゼＰＣ」（大和化成(株)
製）、商品名「プロチンＡ」（大和化成(株)製）、商品
名「プロチンＡＹ−１０」（大和化成（株）製）、商品
名「ＹＬ−ＮＬ」（天野製薬(株)製）、商品名「ツニカ
ーゼＦｎ」（大和化成（株）製）、商品名「デナチーム
ＡＰ」（長瀬産業(株)製）などが例示できる。

【００１３】本発明で用いる酵母分解組成物は、上記の
ようにして分解後、分離工程を経ずに得たものでも、水
溶性成分を一定程度分離除去して得られらものでもよい
が、水溶性成分と水不溶性成分の比率が、乾燥重量当り
３０：７０から８０：２０の範囲であることが必要であ
る。それにより、分解によって得られる、次に述べるよ
うな酵母由来の成分が、効果的に魚介類の生体に影響を
与え、免疫活性を向上させることができる。

【００１４】前記酵母分解組成物の主要成分は、水不溶
性成分としては、細胞壁由来のβ−１，３グルカン及び
β−１，６グルカン、セルロース、前記グルカンの構成
糖であるグルコースとマンノースとの共重合物であるグ
ルコマンナン、前記グルカンと蛋白との複合物であるペ
プチドグルカン類、さらに不溶性の構成蛋白質が挙げら
れ、又、水溶性成分としては、アミノ酸、ペプタイド、
各種糖類、ビタミン類、核酸成分が挙げられ、これら以
外に脂質類も含有する。

【００１５】尚、本発明でいう水不溶性成分は、乾燥重
量５ｇの試料を水１００ｍｌに分散・溶解し、１０００
０Ｇで１０分間遠心分離し、沈降物を水１００ｍｌに分
散・溶解、１００００Ｇで１０分間遠心分離する操作を
２回繰り返して得られる沈降物の乾燥重量を水不溶性成
分の乾燥重量とした。又、水溶性成分は、試料乾燥重量
から前記水不溶性成分の乾燥重量を減じた値を水溶性成
分の乾燥重量とした。

【００１６】さらに、本発明で用いる好ましい酵母分解
組成物としては、酵素剤処理に使用する酵素剤のグルカ
ナーゼ活性総量が、原料酵母乾燥重量１ｇあたり２０ｕ
ｎｉｔ以下となるように酵母に酵素剤を作用させて得ら
れた酵母分解組成物である。グルカナーゼ活性総量が前
記の範囲の酵素剤で酵母を分解処理することで、魚介類
の免疫活性をより一層向上させることができる。前記酵
素剤のグルカナーゼ活性総量のより好ましい範囲は、原
料酵母乾燥重量１ｇあたり１０ｕｎｉｔ以下であり、さ
らに好ましくは５ｕｎｉｔ以下である。尚、本発明でい
うグルカナーゼ活性とは、酵素をサッカロマイセス・セ
レビシェ(Saccharomyces cerevisiae)ＩＦＯ ０３０９
の凍結乾燥菌体１ｍｇに３５℃で作用させたときに、反
応液の濁度（具体的には波長６６０ｎｍにおける吸光
度）を1分間あたり１％低下させる酵素量を１ｕｎｉｔ
として定義する。

【００１７】使用する酵素剤のグルカナーゼ活性総量を
原料酵母乾燥重量１ｇあたり２０ｕｎｉｔ以下にするた
めには、使用する各酵素のグルカナーゼ活性を予め測定
して使用する酵素全体のグルカナーゼ活性を調整しても
よいし、また使用する酵素全体のグルカナーゼ活性をま
とめて測定して調整してもよい。但し、自己消化法との
組み合わせでは、使用する酵素剤のグルカナーゼ活性の
コントロールが困難な場合がある。従って、酵素剤処理
による酵母の分解の実施態様としては、酵素剤処理によ
る分解を単独で行うことが好ましい。

【００１８】さらに、酵母中の核酸成分をヌクレアー
ゼ、デアミナーゼ処理をして、イノシン酸、グアニル酸
を酵母分解組成物中に生成させることにより、嗜好性の
向上が達成されるが、本発明の目的には必須ではない。

【００１９】酵母を分解したのちは、必要に応じて水溶
性成分を分離除去して、酵母分解組成物中の水溶性成分
と水不溶性成分との比率が乾燥重量で３０：７０から８
０：２０の範囲となるように調整する。水溶性成分を分
離除去する方法としては、遠心分離、ろ過、静置分離な
ど、通常の方法を採用することができる。こうして得ら
れた酵母分解組成物は、常法により濃縮して、さらに水
分を除去してペースト状にするか、公知の乾燥法で乾燥
粉末状にすることにより、使用に供する。

【００２０】本発明による魚介類の飼育方法の好ましい
実施の態様としては、上記酵母分解組成物の投与量が、
一日に魚介体重１ｋｇあたり０．０１〜１．０ｇとなる
ように投与することである。投与量がこれより少なくて
は、所定の効果が得られず、これより多いと経済性など
の点で生産性向上の目的が達成出来ない。酵母分解組成
物は、単独で魚介類に投与してもよいし、飼料に混合し
て投与してもよい。飼料に混合する場合は、例えば飼料
に対して０．１重量％添加するなどして、魚介が上記の
量を摂取するようにすればよい。投与の方法は、あらか
じめ飼料へ規定量の酵母分解組成物を配合して、例えば
ペレット状などに成型乾燥したものを通常の給餌作業と
同様に行えばよい。投与の期間は、１日から飼育期間全
体を通じて可能であり、間歇投与は必要でない。

【００２１】

【実施例】以下、実施例を挙げて本発明をより詳細に説
明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるもので
はない。

【００２２】（実施例１）原料酵母としてサッカロミセ
ス属に属するパン酵母（商品名「カネカレッドイース
ト」鐘淵化学工業(株)社製）３００ｋｇ（乾燥菌体重量
として１００ｋｇ）を水７００Ｌに懸濁して９０℃で６
０分の加熱処理を行って、菌体内の酵素を失活させた。
５０℃に冷却後、ＮａＯＨでＰＨを６．３に調整し、プ
ロテアーゼ（商品名「プロチンＡＹ−１０」大和化成
(株)製）を酵母乾燥菌体重量に対し０．５％、細胞壁溶
解酵素（商品名「ツニカーゼＦｎ」大和化成(株)製）を
酵母乾燥菌体重量に対し０．５％添加し、５０℃で２４
時間攪拌しながら反応させた。その後、９５℃で３０分
間加熱して酵素を失活させ、濃縮後、スプレー乾燥し、
酵母分解組成物の試料１を得た。得られた組成物の重量
は、９５ｋｇであった。このとき、使用した酵素剤のグ
ルカナーゼ活性総量は、原料酵母乾燥重量１ｇあたり２
２．０ｕｎｉｔであった。また、試料１中の水不溶性成
分は３３重量％（乾燥重量）であった。

【００２３】なお、参考として試料１中のβ−グルカン
量を、以下に示す方法で測定した。すなわち、アミラー
ゼで、試料中の炭水化物を可溶化し、８０％エタノール
で多糖類を沈澱させ、水溶性の単糖、オリゴ糖を分離除
去した後、得られた沈澱を塩酸で加水分解しグルコース
を比色法で定量した。定量されたグルコース量の９０％
をβ−グルカン量とした。試料１の水不溶性成分の比
率、β−グルカン量の測定結果を表１に示す。また、β
−１，３／１，６−グルカンを主成分とする市販の免疫
賦活剤（商品名「マクロガード」ＢＩＯＴＥＣ−ＭＡＣ
ＫＺＹＭＡＬ社（ノルウェー）製）についての水不溶性
成分及びβ−グルカン量の測定結果を表１に併せて示
す。

【００２４】

【表１】

【００２５】試験に用いた飼料の配合率を表２に示す。
対照区として小麦粉・魚粉を主体とした飼料を設定し
た。試験区としては、上記試料1を０．１重量％添加し
て試験飼料を調製した（試料１）。また、比較例として
比較1では従来から免疫賦活剤として使用されている宮
入菌体末（商品名「ミヤリサン」日本化薬（株）製）を
試料１と同じく０．１重量％添加した。比較２ではβ−
１，３／１，６−グルカンを主成分とする免疫賦活剤
（商品名「マクロガード」ＢＩＯＴＥＣ−ＭＡＣＫＺＹ
ＭＡＬ社（ノルウェー）製）を０．０５重量％添加し
た。

【００２６】

【表２】

【００２７】ブリ当歳魚を用いて、試験飼料投与の試験
を次のように実施した。すなわち、飼育試験は１月中旬
から４月中旬までの９０日間とした。供試魚は平均魚体
重約１．０ｋｇのブリ当歳魚を用い、２トン円形水槽に
各区２５尾ずつ収容した。給餌は１日１回飽食量を週６
日給餌した（試料１は、１日に魚体重１ｋｇあたり０．
０１ｇ）。飼育期間中の平均水温は１７．２±０．９
（最低水温１６．０℃、最高水温１９．４℃）℃であっ
た。

【００２８】飼育開始時から２週間後、４週間後、６週
間後及び１２週間後に各区より５尾をサンプリングし、
心臓から採血して個体別に血漿リゾチーム活性、白血球
の貪食能（貪食率および貪食指数）の測定を行い、免疫
賦活効果を調べた。なお、血漿リゾチーム活性、白血球
の貪食能の測定は次の手順にて行った。

【００２９】リゾチーム活性の測定は、松山らの方法
（Matsuyama, H. Remy E. P. Mangindaan and T. Yano:
Protective effect of schizophyllan and sclerogluc
an against Streptococcus sp. Infection in yellowta
il(Seriola quinqueradiata).Aquaculture, 101, 197-2
03 (1992).）を改良して行った。簡単に述べると、９６
穴マイクロプレートに０．０６６Ｍリン酸緩衝液（ＰＨ
＝６．２）に懸濁させたMicrococcus lysodeikticussと
分離した血漿を加え、マイクロプレートリーダーを用い
て波長４５０ｎｍにおける吸光度を測定した。リゾチー
ム活性は、下式（１）に示すように、１分間に吸光度が
０．００１減少する状態を１ｕｎｉｔとして表した。

【００３０】 ｕｎｉｔ＝ decrease in absorbance of 0.001/min・・・（１）

【００３１】白血球分離に用いる血液はリゾチーム活性
に用いた血液と同じものを使用した。採取した血液をあ
らかじめガラス遠心管に準備したＨＩＳＴＯＰＡＱＵＥ
−１０７７（Ｓｉｇｍａ社製）に重層し、４００Ｇ、３
０分遠心し、形成された白濁層を取り出した後、洗浄し
て実験に供した。

【００３２】白血球の貪食能は、貪食率及び貪食指数を
測定した。即ち、分離した白血球をチェンバースライド
に１ウェル当たりの細胞が１×１０⁶個となるように添
加し、２時間、２０℃で培養した。培養後、残った細胞
懸濁液を除去し、洗浄した後、オプソニン化したラテッ
クスビーズを添加して、２時間、２０℃で培養した。ラ
テックスビーズ懸濁液を除去し、洗浄した後、定法に従
いメイ・グリュンワルド・ギザム（May-Grunwald Giems
a）染色を施して光学顕微鏡で観察した。貪食率及び貪
食指数は以下の式（２）、（３）を用いて算出した。

【００３３】 貪食率（％）＝（ビーズを有した貪食細胞数÷計測された貪食細胞数）×１０ ０・・・（２） 貪食指数＝（ビーズを有した貪食細胞数÷計測された貪食細胞数）×（摂取さ れたビーズ数÷計測された貪食細胞数）×１００・・・（３）

【００３４】上記免疫賦活効果の測定結果のうち、リゾ
チーム活性の測定結果を図１に、白血球の貪食率の測定
結果を図２に、さらに白血球の貪食指数を図３にそれぞ
れ示す。

【００３５】図１〜３から、水溶性成分及び水不溶性成
分を含む試料１の酵母分解組成物を投与した場合は、従
来のβ−グルカンを多く含む酵母由来組成物（比較２）
以上の免疫賦活効果を有することが確認できる。

【００３６】（実施例２）使用する酵素を、プロテアー
ゼ（商品名「ＹＬ−ＮＬ」天野製薬(株)製）酵母乾燥重
量当り０．２％、及びプロテアーゼ（商品名「プロチン
ＡＹ−１０」大和化成(株)製）酵母乾燥重量当り０．５
％とした以外は、実施例１と同様に酵素剤処理により酵
母の分解反応を行った。酵素剤処理後、遠心分離して水
溶性成分を一部除去し、残りの部分を乾燥させ、酵母分
解組成物の試料２を得た。得られた組成物の重量は、４
５ｋｇであった。試料２中の水不溶性成分の含有量は６
３重量％であった。なお、試料２中のβ−グルカン量
は、１６．５重量％であった。また、このとき、使用し
た酵素剤のグルカナーゼ活性総量は、酵母乾燥重量１ｇ
あたり１．１ｕｎｉｔであった。

【００３７】試験に用いた飼料の配合率を表３に示す。
対照区として小麦粉・魚粉を主体とした飼料を設定し
た。試験区としては、上記試料２の添加率を０．１重量
％、０．５重量％、１．０重量％と変え、それに対応し
て試料中のその他成分（色素、強肝剤、賦形剤など）の
うち賦形剤の量を調整して全部で１００重量％となるよ
うにして、試験飼料を調製した。

【００３８】

【表３】

【００３９】ブリ当歳魚を用いて、試験飼料投与の試験
を次のように実施した。すなわち、飼育期間は１０月中
旬から１１月中旬までの３６日間とした。供試魚は平均
魚体重約４２０ｇのブリ当歳魚を用い、１．５トン楕円
形ＦＲＰ水槽に各区２５〜２７尾収容した。給餌は１日
１回飽食量を週６日間給与した（試料２は、１日に魚体
重１ｋｇあたり０．０２ｇ、０．１０ｇ又は０．２１
ｇ）。飼育期間中の平均水温は２３．５±０．７℃であ
った。

【００４０】飼育開始時、飼育開始２週間後及び４週間
後に各区より５尾をサンプリングし、心臓から採血して
個体別に血漿リゾチーム活性、白血球の貪食能（貪食率
および貪食指数）の測定を行い、免疫賦活効果を調べ
た。飼育試験開始時における血漿リゾチーム活性、飼育
開始２週間後における血漿リゾチーム活性、白血球の貪
食率および貪食指数、さらに飼育開始４週間後における
それらの測定値を表４に示した。なお、各免疫能の測定
方法は実施例１に準じて行った。

【００４１】

【表４】

【００４２】表４の結果から、酵母を所定のグルカナー
ゼ活性の酵素剤で分解した、水溶性成分と不溶性成分と
を含む酵母分解組成物は、顕著な免疫賦活効果があるこ
とが分かる。

【００４３】（実施例３）酵素剤処理による分解後、分
離工程を経ずに濃縮して、乾燥する以外は、実施例２と
同様な方法で処理をして、酵母分解組成物の試料３を得
た。得られた試料３の重量は９６ｋｇで、また水不溶性
成分の比率は３１重量％、β−グルカンの含有量は９．
４重量％であった。

【００４４】実施例１で用いたと同じ酵母分解組成物の
試料１及び上記酵母分解組成物の試料３を用いて免疫賦
活効果の確認試験を実施した。試験飼料は、市販のブリ
稚魚用飼料（商品名「ハマチＥＰ３０」日本配合飼料
（株）製）を対照とし、試料１および試料３をそれぞれ
飼料重量に対して０．５％を水に懸濁させて対照飼料に
混合攪拌し、充分に吸着させた。

【００４５】供試魚として平均魚重量約８０ｇのブリ稚
魚を用い、１．５トン円形水槽に各区４００尾ずつ収容
して６月下旬から７月上旬までの１４日間飼育した。魚
への給餌は、１日１回飽食量を週７日間給与した（試料
１、試料３の摂取量は、いずれも魚体重１ｋｇあたり
０．１５ｇであった）。飼育期間中の水温は平均２６．
０±０．６℃であった。

【００４６】試験開始時及び２週間後に各区より５尾を
サンプリングし、心臓から採血し、実施例１と同様にし
て個体別に血漿リゾチーム活性を測定し、免疫賦活効果
を比較確認した。その結果を表５に示す。

【００４７】

【表５】

【００４８】表５の結果から、水溶性成分及び水不溶性
成分を含む酵母分解組成物が、免疫賦活効果があり、さ
らにグルカナーゼ活性総量が乾燥酵母１ｇあたり２０ｕ
ｎｉｔを超える酵素剤を用いた処理により調製した試料
１に比べて、グルカナーゼ活性総量が乾燥酵母１ｇあた
り２０ｕｎｉｔ以下の酵素剤を用いた処理により調製し
た試料３の酵母分解組成物は、さらに免疫賦活効果が強
いことが確認できた。

【００４９】（実施例４）実施例２において、酵素剤処
理後、遠心分離して上澄の部分を濃縮後、乾燥させた、
水不溶性成分を含まない酵母分解成分を比較例３として
調製した。

【００５０】水不溶性成分を含まない酵母分解組成物の
サンプルとして上記比較例３、使用した酵素剤のグルカ
ナーゼ活性総量が酵母乾燥重量１ｇあたり２０ｕｎｉｔ
を超えた条件で調製された水溶性成分と水不溶性成分と
を含む酵母分解組成物である試料１、使用した酵素剤の
グルカナーゼ活性総量が酵母乾燥重量１ｇあたり２０ｕ
ｎｉｔ以下の条件で調製された水溶性成分及び水不溶性
成分を含む酵母分解組成物である試料３の３種類の酵母
分解組成物サンプルを用いて免疫賦活効果の確認試験を
実施した。

【００５１】試験飼料は、市販のブリ用ＥＰ飼料（商品
名「ハマチＥＰ１２０」日本配合飼料（株）製）を用い
た。この飼料に対して外割りで各サンプル０．５％重量
分を少量の水で懸濁して吸着させ、各試験区の飼料を調
製した。

【００５２】供試魚として平均魚体重約４００ｇのブリ
当歳魚を用い、２トン円形水槽に各区７０尾ずつ収容し
て、９月下旬から１０月下旬まで３６日間飼育した。魚
への給餌量は、１日１回、試験開始時の魚体重に対して
２．５％の重量とした（１日に魚体重１ｋｇあたり各サ
ンプル０．１２５ｇ）。飼育期間中の水温は平均２５．
１±０．７℃であった。

【００５３】試験開始時、３日後、７日後、１４日後の
リゾチーム活性、白血球の貪食率、白血球の貪食指数を
実施例１と同様にして測定した。その結果を表６及び図
４、図５、図６に示す。

【００５４】

【表６】

【００５５】表６及び図４〜６の結果から、水不溶性成
分を含まない比較例３に比べ、試料１及び試料３は免疫
賦活効果が高く、また試料１より試料３がさらに免疫賦
活効果が高いことが分かる。

【００５６】

【発明の効果】本発明によれば、酵母を分解した水溶性
成分と水不溶性成分とを含む組成物、さらには、前記水
溶性成分と水不溶性成分の比率を調整した組成物を魚介
類に投与することにより、魚介類の免疫活性を向上させ
ることができ、魚介類の養殖の生産性向上と、安全な生
産物の提供、さらに環境の汚染を削減することが可能と
なる。

【図面の簡単な説明】

【図１】 リゾチーム活性測定結果を示すグラフ。

【図２】 白血球貪食率測定結果を示すグラフ。

【図３】 白血球貪食活性測定結果を示すグラフ。

【図４】 リゾチーム活性測定結果を示すグラフ。

【図５】 白血球貪食率測定結果を示すグラフ。

【図６】 白血球貪食活性測定結果を示すグラフ。

フロントページの続き (72)発明者 四ツ橋 宏樹 高知県宿毛市自由ヶ丘11−15−301 (72)発明者 石田 明 愛媛県南宇和郡城辺町深浦220 (72)発明者 中原 良三 大阪府豊中市西緑丘３丁目22−８ (72)発明者 森田 浩治 兵庫県明石市松ヶ丘２丁目205 Ｆターム(参考） 2B005 GA01 GA02 GA04 GA06 KA04 MB02 2B150 AA07 AA08 AB03 AC24 BB03 DD11 DF09

Claims (8)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 酵母を自己消化法及び／又は蛋白質分解
   酵素を含む酵素剤処理により分解した後、分離工程を経
   ることなく得られる、水溶性成分及び水不溶性成分を含
   む酵母分解組成物を投与することを特徴とする魚介類の
   飼育方法。
2. 【請求項２】 酵母を蛋白質分解酵素を含む酵素剤処理
   により分解した後、水溶性成分を分離せず又は水溶性成
   分を分離除去することによって得られる、水溶性成分と
   水不溶性成分との比率が乾燥重量で３０：７０から８
   ０：２０の範囲である酵母分解組成物を投与することを
   特徴とする魚介類の飼育方法。
3. 【請求項３】 酵素剤処理に用いる酵素剤のグルカナー
   ゼ活性総量が原料酵母乾燥重量１ｇあたり２０ｕｎｉｔ
   以下である、請求項１又は２に記載の魚介類の飼育方
   法。
4. 【請求項４】 酵母分解組成物の投与量が、魚介体重１
   ｋｇあたり０．０１〜１．０ｇ／日であることを特徴と
   する請求項１、２又は３に記載の魚介類の飼育方法。
5. 【請求項５】 魚介類が魚類である請求項１〜４のいず
   れかに記載の魚介類の飼育方法。
6. 【請求項６】 酵母を自己消化法及び／又は蛋白質分解
   酵素を含む酵素剤処理により分解した後、分離工程を経
   ることなく得られる、水溶性成分及び水不溶性成分を含
   む酵母分解組成物を添加してなることを特徴とする魚介
   類の飼育に用いる飼料。
7. 【請求項７】 酵母を蛋白質分解酵素を含む酵素剤処理
   により分解した後、水溶性成分を分離せず又は水溶性成
   分を分離除去することによって得られる、水溶性成分と
   水不溶性成分との比率が乾燥重量で３０：７０から８
   ０：２０の範囲である酵母分解組成物を添加してなるこ
   とを特徴とする魚介類の飼育に用いる飼料。
8. 【請求項８】 酵素剤処理に用いる酵素剤のグルカナー
   ゼ活性総量が原料酵母乾燥重量１ｇあたり２０ｕｎｉｔ
   以下である、請求項６又は７に記載の魚介類の飼育に用
   いる飼料。