JP2002538780A - ヌクレオシド類似体の立体選択的合成 - Google Patents
ヌクレオシド類似体の立体選択的合成Info
- Publication number
- JP2002538780A JP2002538780A JP2000598654A JP2000598654A JP2002538780A JP 2002538780 A JP2002538780 A JP 2002538780A JP 2000598654 A JP2000598654 A JP 2000598654A JP 2000598654 A JP2000598654 A JP 2000598654A JP 2002538780 A JP2002538780 A JP 2002538780A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- group
- anomer
- enzyme
- mixture
- anomeric
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P41/00—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture
- C12P41/003—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by ester formation, lactone formation or the inverse reactions
- C12P41/005—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by ester formation, lactone formation or the inverse reactions by esterification of carboxylic acid groups in the enantiomers or the inverse reaction
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【課題】 立体化学的に純粋なヌクレオシド類似体及びその前駆体の新規合成法を提供する。
【解決手段】 立体化学的に純粋なジオキソラン・ヌクレオシド類似体を製造する方法を提供する。本方法は、次式Ａ又は次式Ｂ：
【化１】
〔式中、Ｗはベンジル基又はベンゾイル基を表し、Ｒ1 は炭素原子数１ないし６のアルキル基及び炭素原子数６ないし１５のアリール基からなる群から選択される〕により表されるアノマー混合物からβ−アノマー及びα−アノマーを分離するために加水分解酵素を使用することを含む。
Description
【０００１】発明の属する分野 本発明は総合的にはヌクレオシド類似化合物及びそれ等の前駆体の合成法の新
規な方法、及びより特別には、立体選択的にジオキソラン・ヌクレオシド類似体
又はその前駆体を生成するのに特異的な酵素を使用して、ヌクレオシド類似体を
製造する方法に関する。
規な方法、及びより特別には、立体選択的にジオキソラン・ヌクレオシド類似体
又はその前駆体を生成するのに特異的な酵素を使用して、ヌクレオシド類似体を
製造する方法に関する。
【０００２】発明の背景 医薬品用化合物（薬剤）の薬理活性は主に生物学的基質（薬剤標的）、例えば
タンパク質（レセプター及び酵素類）、核酸類（ＤＮＡ及びＲＮＡ）及び生体膜
（リン脂質及び糖脂質）との相互作用に依存する。これ等全ての薬剤標的は、三
次元空間での多種類の配列のただ一つの形態で薬剤に特異的に結合することが出
来る複雑な三次元構造を持っている。薬剤標的のこの三次元構造が、ある意味で
は可能性があるどんな薬剤が標的の空洞に、如何なる親和性で結合するかを決定
する。
タンパク質（レセプター及び酵素類）、核酸類（ＤＮＡ及びＲＮＡ）及び生体膜
（リン脂質及び糖脂質）との相互作用に依存する。これ等全ての薬剤標的は、三
次元空間での多種類の配列のただ一つの形態で薬剤に特異的に結合することが出
来る複雑な三次元構造を持っている。薬剤標的のこの三次元構造が、ある意味で
は可能性があるどんな薬剤が標的の空洞に、如何なる親和性で結合するかを決定
する。
【０００３】 不斉分子の中での原子の空間配置をキラリティーと言う。キラリティーはその
結果立体異性体を創生する。立体異性体は全く同一の化学的組成及び分子結合性
（即ち同一構成）を持つが、しかし空間的に原子の配置が異なる（即ち異なった
立体配置）化合物である。立体異性体は各々の分子中でのキラル中心の数及びキ
ラル中心の空間的配置により分類されている。
結果立体異性体を創生する。立体異性体は全く同一の化学的組成及び分子結合性
（即ち同一構成）を持つが、しかし空間的に原子の配置が異なる（即ち異なった
立体配置）化合物である。立体異性体は各々の分子中でのキラル中心の数及びキ
ラル中心の空間的配置により分類されている。
【０００４】 有機分子のキラル中心は、４個の異なった置換基を結合し、そして通常は四面
体型配置をしている炭素原子を含有している。キラル中心の他の型は、その配置
において残る４個の結合位置に連絡されている２個の異なった置換基を持つ硬性
なＣ＝Ｃ結合に沿い配向しているキラル面である。
体型配置をしている炭素原子を含有している。キラル中心の他の型は、その配置
において残る４個の結合位置に連絡されている２個の異なった置換基を持つ硬性
なＣ＝Ｃ結合に沿い配向しているキラル面である。
【０００５】 本特許出願の目的である分子のキラルティーと言うのは、キラル結合では無く
て、キラル原子により創生されるキラルティーを指す。下記の記載は、炭素原子
の４個の異なった結合部位の各々に、４個の異なった置換基が結合している１個
以上のキラル炭素の所で創生されるキラルティーに限定する。
て、キラル原子により創生されるキラルティーを指す。下記の記載は、炭素原子
の４個の異なった結合部位の各々に、４個の異なった置換基が結合している１個
以上のキラル炭素の所で創生されるキラルティーに限定する。
【０００６】 １分子が１個のキラル炭素を持つ時、お互いに鏡像である２個の立体異性体が
ある。この一対の異性体を鏡像異性体又は鏡像異性体対と言う。２個のキラル炭
素原子が存在する時、４個の立体異性体及び２対の鏡像又は鏡像異性体が存在す
る。他の立体異性体の鏡像では無い立体異性体がジアステレオ異性体である。
ある。この一対の異性体を鏡像異性体又は鏡像異性体対と言う。２個のキラル炭
素原子が存在する時、４個の立体異性体及び２対の鏡像又は鏡像異性体が存在す
る。他の立体異性体の鏡像では無い立体異性体がジアステレオ異性体である。
【０００７】 立体異性体識別の一つの型は、環式糖又は環式糖の類似化合物に関係する。環
式糖は、立体異性配置に依存して特定のアノマーと考える事が出来る。
式糖は、立体異性配置に依存して特定のアノマーと考える事が出来る。
【０００８】 「アノマー」と言う用語は、環式糖又はその類似化合物又は誘導体が４又は５
環式化合物中に２個のキラル中心を持つ空間的配置を意味する。アノマー名称は
環により定義される理論的水平面に関して２個のキラル中心の相関的配置を定義
している。キラル中心は典型的に環の外側に２個の置換基を持っている。一つの
置換基は水素原子である。他の置換基は、例えばヒドロキシル基、メトキシル基
、プリン又はピリミジン塩基、カルボキシル基その他の大きな基である。
環式化合物中に２個のキラル中心を持つ空間的配置を意味する。アノマー名称は
環により定義される理論的水平面に関して２個のキラル中心の相関的配置を定義
している。キラル中心は典型的に環の外側に２個の置換基を持っている。一つの
置換基は水素原子である。他の置換基は、例えばヒドロキシル基、メトキシル基
、プリン又はピリミジン塩基、カルボキシル基その他の大きな基である。
【０００９】 各々のキラル中心上で２個の大きな成分が環の水平面の同じ側にある時、これ
等をβ―アノマー（シス異性体）と定義する。２個の大きな成分が、環の水平面
を境にして反対側にある時、これ等をα―アノマー（トランス異性体）と定義す
る。アノマーはジアステレオ異性体の一つの型である。
等をβ―アノマー（シス異性体）と定義する。２個の大きな成分が、環の水平面
を境にして反対側にある時、これ等をα―アノマー（トランス異性体）と定義す
る。アノマーはジアステレオ異性体の一つの型である。
【００１０】 キラリティーが生物学的活性又は毒性に影響を及ぼす可能性があるので、薬剤
開発の観点から、各異性体の生理学的作用を評価する事は重要である。片方の立
体異性体が、他方に比較してかなり高い活性を持つ場合が大変多い。他の状況で
は、非活性の異性体が、より高い活性を持つ形の活性を抑制する可能性がある。
ある場合には、より好ましく無い立体異性体も同じような活性を示すが、しかし
望ましい立体異性体に比較して毒性が高い場合がある。これ等の各々の場合にお
いて、単一の最も好ましい立体異性体が高い純度で投与されると、薬剤の治療効
果を増大する事が出来る。
開発の観点から、各異性体の生理学的作用を評価する事は重要である。片方の立
体異性体が、他方に比較してかなり高い活性を持つ場合が大変多い。他の状況で
は、非活性の異性体が、より高い活性を持つ形の活性を抑制する可能性がある。
ある場合には、より好ましく無い立体異性体も同じような活性を示すが、しかし
望ましい立体異性体に比較して毒性が高い場合がある。これ等の各々の場合にお
いて、単一の最も好ましい立体異性体が高い純度で投与されると、薬剤の治療効
果を増大する事が出来る。
【００１１】 薬剤市場での現代の趨勢は、単一の立体異性体の薬剤の大きな使用を反映して
いる。単一立体異性体の薬剤の販売は随分増加している。１９９５年には、単一
立体異性体の薬剤の販売は、世界的にみて６１０億ドルに達している。２０００
年には世界中の年間販売額が９００億ドルに達すると予想されている。
いる。単一立体異性体の薬剤の販売は随分増加している。１９９５年には、単一
立体異性体の薬剤の販売は、世界的にみて６１０億ドルに達している。２０００
年には世界中の年間販売額が９００億ドルに達すると予想されている。
【００１２】 薬理学的作用物質の重要な一種は、３’−オキサ置換２’，３’−ジデオキシ
ヌクレオシド類似体（”ジオキソラン・ヌクレオシド類似体”）に関係する。こ
れ等の化合物は、ジオキソラン環の炭素２及び４（それぞれＣ２及びＣ４）に対
応する２個のキラル中心がある。それ故、各々の化合物はジオキソラン環に関し
て両方の置換基の位置に依存して４個の異なった立体異性体として存在する事が
出来る。
ヌクレオシド類似体（”ジオキソラン・ヌクレオシド類似体”）に関係する。こ
れ等の化合物は、ジオキソラン環の炭素２及び４（それぞれＣ２及びＣ４）に対
応する２個のキラル中心がある。それ故、各々の化合物はジオキソラン環に関し
て両方の置換基の位置に依存して４個の異なった立体異性体として存在する事が
出来る。
【００１３】 ジオキソラン・ヌクレオシド類似化合物の立体異性体は、図上に定義されてい
るように文字Ｂがプリン又はピリミジン塩基、或いはプリン又はピリミジン塩基
の類似体又は誘導体である下記の次式により代表される。
るように文字Ｂがプリン又はピリミジン塩基、或いはプリン又はピリミジン塩基
の類似体又は誘導体である下記の次式により代表される。
【化４】
【００１４】 整合性の目的で、メチルオキシル部分又は塩基部分が他の置換基により置き換
えられた時にも同じ立体化学名が使用されている。
えられた時にも同じ立体化学名が使用されている。
【００１５】 上記式での各々のＣ２炭素は、メチルオキシ基をジオキソラン環に結合する環
の中の炭素原子である。Ｃ４炭素は、塩基（Ｂ）置換基をジオキソラン環に結合
している上記式の各々の中での炭素原子である。
の中の炭素原子である。Ｃ４炭素は、塩基（Ｂ）置換基をジオキソラン環に結合
している上記式の各々の中での炭素原子である。
【００１６】 上記式で代表される４個の立体異性体は、鏡像異性体２対に対応する。β―ア
ノマーは一対の鏡像異性体、即ちβ―Ｌ鏡像異性体及びβ―Ｄ鏡像異性体を表す
。α―アノマーは鏡像異性体の他の一対、即ちα―Ｌ鏡像異性体及びα―Ｄ鏡像
異性体を表す。
ノマーは一対の鏡像異性体、即ちβ―Ｌ鏡像異性体及びβ―Ｄ鏡像異性体を表す
。α―アノマーは鏡像異性体の他の一対、即ちα―Ｌ鏡像異性体及びα―Ｄ鏡像
異性体を表す。
【００１７】 上に図解したように、環が紙面の水平面に置かれた状態では、１位の酸素（Ｏ
３）が紙の最上部に位置し、２位の炭素（Ｃ２）が左側に位置する時に、Ｄ−体
の化合物は、メチルオキシ基が外側に向って付いている。これは又名称（２Ｒ）
で表される。Ｌ−体の形をしている化合物は、環が紙面の水平面に置かれた状態
では、１位の酸素（Ｏ３）が紙の最上部に位置し、２位の炭素（Ｃ２）が左側に
位置する時に、メチルオキシ基が内側に向って付いている。これは又名称（２Ｓ
）で表される。
３）が紙の最上部に位置し、２位の炭素（Ｃ２）が左側に位置する時に、Ｄ−体
の化合物は、メチルオキシ基が外側に向って付いている。これは又名称（２Ｒ）
で表される。Ｌ−体の形をしている化合物は、環が紙面の水平面に置かれた状態
では、１位の酸素（Ｏ３）が紙の最上部に位置し、２位の炭素（Ｃ２）が左側に
位置する時に、メチルオキシ基が内側に向って付いている。これは又名称（２Ｓ
）で表される。
【００１８】 色々な種類のジオキソラン・ヌクレオシド類似化合物が、抗ウイルス及び抗癌
活性を持つ事が判明している。例えば、９−（β―Ｄ−２―ヒドロキシメチルー
１、３−ジオキソランー４―イル）−２−アミノプリン（β―Ｄ−ＤＡＰＤ）及
びその代謝物である９−（β―Ｄ―２−ヒドロキシメチルー１，３−ジオキソラ
ンー４−イル）−グアニン（β―Ｄ−ＤＸＧ）が、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩ
Ｖ）及びＢ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）に対して、強力で特異的な活性を持つ事が
報告されている（Ｒａｊａｇｏｐａｌａｎ他、Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ｃｈｅｍ.
Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．、１９９６、７（２）、６５−７０頁参照）。同様に、１
−（β―Ｌ―２−ヒドロキシメチルー１，３−ジオキソランー４−イル）−チミ
ン（ジオキソラン−Ｔ）（Ｎｏｒｂｅｃｋ他、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔ
ｔ. 、１９８９年、３０、６２６３−６６頁参照）は、抗―ＨＩＶ及び抗―ＨＢ
Ｖ活性を持っている。１−（β―Ｌ―２−ヒドロキシメチルー１，３−ジオキソ
ランー４−イル）―シチジン（β―Ｌ―ＯｄｄＣ）（Ｂｅｄｎａｒｓｋｉ他、Ｂ
ｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ. Ｃｈｅｍ. Ｌｅｔｔ．、１９９４年、４、２６６７−７２
頁参照）は、ヒト前立腺並びに腎腫瘍に対する強力な抗癌活性を持っている事が
発見された（Ｋａｄｈｉｍ他、Ｃａｎ. Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．、５７（２１）
、４８０３−１０頁、１９９７年参照）。β―Ｌ―ＯｄｄＣは抗癌活性を持つ事
を示したＬ体の最初のヌクレオシド類似化合物である。ジオキソラン・ヌクレオ
シドの立体異性体は、通常は異なった生物学的活性及び毒性を示すので、純粋な
治療学的に活性のある異性体を得ることが非常に重要である。
活性を持つ事が判明している。例えば、９−（β―Ｄ−２―ヒドロキシメチルー
１、３−ジオキソランー４―イル）−２−アミノプリン（β―Ｄ−ＤＡＰＤ）及
びその代謝物である９−（β―Ｄ―２−ヒドロキシメチルー１，３−ジオキソラ
ンー４−イル）−グアニン（β―Ｄ−ＤＸＧ）が、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩ
Ｖ）及びＢ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）に対して、強力で特異的な活性を持つ事が
報告されている（Ｒａｊａｇｏｐａｌａｎ他、Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ｃｈｅｍ.
Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．、１９９６、７（２）、６５−７０頁参照）。同様に、１
−（β―Ｌ―２−ヒドロキシメチルー１，３−ジオキソランー４−イル）−チミ
ン（ジオキソラン−Ｔ）（Ｎｏｒｂｅｃｋ他、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔ
ｔ. 、１９８９年、３０、６２６３−６６頁参照）は、抗―ＨＩＶ及び抗―ＨＢ
Ｖ活性を持っている。１−（β―Ｌ―２−ヒドロキシメチルー１，３−ジオキソ
ランー４−イル）―シチジン（β―Ｌ―ＯｄｄＣ）（Ｂｅｄｎａｒｓｋｉ他、Ｂ
ｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ. Ｃｈｅｍ. Ｌｅｔｔ．、１９９４年、４、２６６７−７２
頁参照）は、ヒト前立腺並びに腎腫瘍に対する強力な抗癌活性を持っている事が
発見された（Ｋａｄｈｉｍ他、Ｃａｎ. Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．、５７（２１）
、４８０３−１０頁、１９９７年参照）。β―Ｌ―ＯｄｄＣは抗癌活性を持つ事
を示したＬ体の最初のヌクレオシド類似化合物である。ジオキソラン・ヌクレオ
シドの立体異性体は、通常は異なった生物学的活性及び毒性を示すので、純粋な
治療学的に活性のある異性体を得ることが非常に重要である。
【００１９】 キラル合成法は単一の立体異性体化合物を得る合成技術に関しては、ここ数年
間に向上している。しかしながら、もっと高い効率と純度で特定の立体異性体を
合成するのに広く使用出来る新規な合成方法を発見する現実的な必要性がある。
間に向上している。しかしながら、もっと高い効率と純度で特定の立体異性体を
合成するのに広く使用出来る新規な合成方法を発見する現実的な必要性がある。
【００２０】 例証すれば、長年にわたって当業者はジオキソラン化合物の鏡像異性体を分離
するのに酵素を使用する事が可能であった。しかしながら、当業界においては、
高効率で純度の高い立体化学的に純粋な最終製品を作製する為に酵素を使用して
、ある種のジオキソラン前駆体のアノマー混合物を分離する段階を使って、如何
にしてジオキソラン・ヌクレオシド類似化合物を合成すれば良いのかは知らなか
った。
するのに酵素を使用する事が可能であった。しかしながら、当業界においては、
高効率で純度の高い立体化学的に純粋な最終製品を作製する為に酵素を使用して
、ある種のジオキソラン前駆体のアノマー混合物を分離する段階を使って、如何
にしてジオキソラン・ヌクレオシド類似化合物を合成すれば良いのかは知らなか
った。
【００２１】 立体化学的に純粋なジオキソラン・ヌクレオシドは、それ等の旧知の抗ウイル
ス及び抗癌活性の為に重要な種類の化合物であるので、それ等の製造の為に、他
の安価で効率的な立体選択的方法の必要性が存在する。本発明はそれ及び他の必
要性を満足させる。
ス及び抗癌活性の為に重要な種類の化合物であるので、それ等の製造の為に、他
の安価で効率的な立体選択的方法の必要性が存在する。本発明はそれ及び他の必
要性を満足させる。
【００２２】発明の概要 本発明は、高度の立体純度、高効率及び高収率でジオキソラン・ヌクレオシド
類似化合物を製造する新規な方法を提供する。
類似化合物を製造する新規な方法を提供する。
【００２３】 特に、本発明は、次式Ａ又は次式Ｂ：
【化５】 で表されるアノマー混合物から、β−アノマー及びα−アノマーを分離する為に
ある種の加水分解酵素の使用をも含む高度の立体純度で、ジオキソラン・ヌクレ
オシド類似体を製造する方法を提供する。上記化学式で、Ｗはベンジル基又はベ
ンゾイル基を表し；Ｒ1 は炭素原子数１ないし６のアルキル基及び炭素原子数１
ないし１５のアリール基からなる群から選択される。
ある種の加水分解酵素の使用をも含む高度の立体純度で、ジオキソラン・ヌクレ
オシド類似体を製造する方法を提供する。上記化学式で、Ｗはベンジル基又はベ
ンゾイル基を表し；Ｒ1 は炭素原子数１ないし６のアルキル基及び炭素原子数１
ないし１５のアリール基からなる群から選択される。
【００２４】 方法は式Ａ及び式Ｂにより表される化合物の混合物を、コレステロール・エス
テラーゼ、加水分解酵素ＥＳＬ−００１−０２、馬肝臓エステラーゼ、牛膵臓蛋
白分解酵素、α―キモトリプシン、ステレプトマイセス カエスピトーシス（Ｓ
ｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｃａｅｓｐｉｔｏｓｉｓ）由来の蛋白分解酵素、バシ
ラス リッケンフォーミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）
由来のサブスチリシン（ｓｕｂｓｔｉｌｉｓｉｎ）、アスパラギラス オリザエ
（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕ ｏｒｙｚａｅ）由来の蛋白分解酵素、バシラス リッ
ケンフォーミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）由来の蛋白
分解酵素、ステレプトマイセス グリセウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇｒ
ｉｓｅｕｓ）由来の蛋白分解酵素、アスパラギラス メレウス（Ａｓｐｅｒｇｉ
ｌｌｕｓ ｍｅｌｌｅｕｓ）由来のアシラーゼ、バシラス サブチリス（Ｂａｃ
ｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）由来の蛋白分解酵素、加水分解酵素ＥＳＬ−０
０１−０５、ステレプトマイセス グリセウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇ
ｒｉｓｅｕｓ）由来のプロナーゼ蛋白分解酵素、ライゾパス アライザス（Ｒｈ
ｉｚｏｐｕｓ ａｒｒｈｉｚｕｓ）由来の脂肪分解酵素、シュードモナス（Ｐｓ
ｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属のタイプＢ種由来のリポ蛋白脂肪分解酵素、シュードモ
ナス セパシア（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｃｅｐａｃｉａ）由来の脂肪分解酵
素並びに細菌性蛋白分解酵素からなる群から選択される酵素による加水分解の段
階が関与する。この方法は立体選択的に主に一種類のアノマーを加水分解して、
上記式Ａ及び式ＢのＲ1 が水素原子と置きかえられている生成物を形成する。他
のアノマーは殆ど加水分解を受けない。この方法は又加水分解を受けていない出
発物質から、加水分解された生成物を分離する事からなる。
テラーゼ、加水分解酵素ＥＳＬ−００１−０２、馬肝臓エステラーゼ、牛膵臓蛋
白分解酵素、α―キモトリプシン、ステレプトマイセス カエスピトーシス（Ｓ
ｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｃａｅｓｐｉｔｏｓｉｓ）由来の蛋白分解酵素、バシ
ラス リッケンフォーミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）
由来のサブスチリシン（ｓｕｂｓｔｉｌｉｓｉｎ）、アスパラギラス オリザエ
（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕ ｏｒｙｚａｅ）由来の蛋白分解酵素、バシラス リッ
ケンフォーミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）由来の蛋白
分解酵素、ステレプトマイセス グリセウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇｒ
ｉｓｅｕｓ）由来の蛋白分解酵素、アスパラギラス メレウス（Ａｓｐｅｒｇｉ
ｌｌｕｓ ｍｅｌｌｅｕｓ）由来のアシラーゼ、バシラス サブチリス（Ｂａｃ
ｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）由来の蛋白分解酵素、加水分解酵素ＥＳＬ−０
０１−０５、ステレプトマイセス グリセウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇ
ｒｉｓｅｕｓ）由来のプロナーゼ蛋白分解酵素、ライゾパス アライザス（Ｒｈ
ｉｚｏｐｕｓ ａｒｒｈｉｚｕｓ）由来の脂肪分解酵素、シュードモナス（Ｐｓ
ｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属のタイプＢ種由来のリポ蛋白脂肪分解酵素、シュードモ
ナス セパシア（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｃｅｐａｃｉａ）由来の脂肪分解酵
素並びに細菌性蛋白分解酵素からなる群から選択される酵素による加水分解の段
階が関与する。この方法は立体選択的に主に一種類のアノマーを加水分解して、
上記式Ａ及び式ＢのＲ1 が水素原子と置きかえられている生成物を形成する。他
のアノマーは殆ど加水分解を受けない。この方法は又加水分解を受けていない出
発物質から、加水分解された生成物を分離する事からなる。
【００２５】 一つの態様の方法は、更にジオキソランのＣ４位の官能基（例えばＣＯＯＲ1 ）をプリニル基、ピリミジニル基、或いはその類似体又は誘導体で立体選択的に
置換して、高い立体純度を有するジオキソラン・ヌクレオシド類似化合物を製造
する段階を含んでいる。
置換して、高い立体純度を有するジオキソラン・ヌクレオシド類似化合物を製造
する段階を含んでいる。
【００２６】 本発明の一つの態様によると、加水分解する段階は、アノマー純度が少なくと
も８０％である出発物質を得る事になる。他の態様によると、加水分解する段階
は、アノマー純度が少なくとも９０％である出発物質を得る事になる。更に他の
態様では、加水分解する段階は、アノマー純度が少なくとも９５％である出発物
質を得る事になる。付加的な態様では、加水分解する段階は、アノマー純度が少
なくとも９８％である出発物質を得る事になる。
も８０％である出発物質を得る事になる。他の態様によると、加水分解する段階
は、アノマー純度が少なくとも９０％である出発物質を得る事になる。更に他の
態様では、加水分解する段階は、アノマー純度が少なくとも９５％である出発物
質を得る事になる。付加的な態様では、加水分解する段階は、アノマー純度が少
なくとも９８％である出発物質を得る事になる。
【００２７】 本発明の一つの態様によると、加水分解する段階は、アノマー純度が少なくと
も８０％である生成物を得る事になる。他の態様によると、加水分解する段階は
、アノマー純度が少なくとも９０％である生成物を得る事になる。更に他の態様
では、加水分解する段階は、アノマー純度が少なくとも９５％である生成物を得
る事になる。付加的な態様では、加水分解する段階は、アノマー純度が少なくと
も９８％である生成物を得る事になる。
も８０％である生成物を得る事になる。他の態様によると、加水分解する段階は
、アノマー純度が少なくとも９０％である生成物を得る事になる。更に他の態様
では、加水分解する段階は、アノマー純度が少なくとも９５％である生成物を得
る事になる。付加的な態様では、加水分解する段階は、アノマー純度が少なくと
も９８％である生成物を得る事になる。
【００２８】 本発明の一つに態様によると、式Ａおよび式ＢのＷはベンジル基であり、そし
て酵素はコレステロール・エステラーゼ、加水分解酵素ＥＳＬ−００１−０２、
馬肝臓エステラーゼ、牛膵臓蛋白分解酵素、α―キモトリプシン、ステレプトマ
イセス カエスピトーシス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｃａｅｓｐｉｔｏｓｉ
ｓ）由来の蛋白分解酵素、バシラス リッケンフォーミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ
ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）由来のサブスチリシン（ｓｕｂｓｔｉｌｉｓｉｎ
）からなる群から選択される。他の態様によると、酵素はα―キモトリプシンで
ある。更に他の態様によると、酵素は牛膵臓由来蛋白分解酵素である。
て酵素はコレステロール・エステラーゼ、加水分解酵素ＥＳＬ−００１−０２、
馬肝臓エステラーゼ、牛膵臓蛋白分解酵素、α―キモトリプシン、ステレプトマ
イセス カエスピトーシス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｃａｅｓｐｉｔｏｓｉ
ｓ）由来の蛋白分解酵素、バシラス リッケンフォーミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ
ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）由来のサブスチリシン（ｓｕｂｓｔｉｌｉｓｉｎ
）からなる群から選択される。他の態様によると、酵素はα―キモトリプシンで
ある。更に他の態様によると、酵素は牛膵臓由来蛋白分解酵素である。
【００２９】 本発明の一つの態様によると、式Ａ及び式ＢのＷはベンゾイル基であり、そし
て酵素はアスパラギラス オリザエ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕ ｏｒｙｚａｅ）由
来の蛋白分解酵素、バシラス リッケンフォーミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃ
ｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）由来の蛋白分解酵素、バシラス リッケンフォーミス（
Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）由来のサブチリシン、ステレ
プトマイセス グリセウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇｒｉｓｅｕｓ）由来
の蛋白分解酵素、アスパラギラス メレウス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｍｅｌ
ｌｅｕｓ）由来のアシラーゼ、バシラス サブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕ
ｂｔｉｌｉｓ）由来の蛋白分解酵素、加水分解酵素ＥＳＬ−００１−０５、ステ
レプトマイセス グリセウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇｒｉｓｅｕｓ）由
来のプロナーゼ蛋白分解酵素、ライゾパス アライザス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ ａ
ｒｒｈｉｚｕｓ）由来の脂肪分解酵素、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａ
ｓ）属のタイプＢ種由来のリポ蛋白脂肪分解酵素、細菌性蛋白分解酵素、シュー
ドモナス セパシア（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｃｅｐａｃｉａ）由来の脂肪分
解酵素からなる群から選択される。他の態様においては、酵素はアスパラギラス
オリザエ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕ ｏｒｙｚａｅ）蛋白分解酵素、バシラス
リッケンフォーミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）由来の
蛋白分解酵素、バシラス リッケンフォーミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅ
ｎｉｆｏｒｍｉｓ）由来のサブチリシン、ステレプトマイセス グリセウス（Ｓ
ｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇｒｉｓｅｕｓ）由来の蛋白分解酵素、ステレプトマ
イセス グリセウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇｒｉｓｅｕｓ）由来のプロ
ナーゼ蛋白分解酵素及びライゾパス アライザス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ ａｒｒｈ
ｉｚｕｓ）由来の脂肪分解酵素からなる群から選択される。更に他の態様におい
ては、酵素はアスパラギラス オリザエ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕ ｏｒｙｚａｅ
）及びバシラス リッケンフォーミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏ
ｒｍｉｓ）由来の蛋白分解酵素からなる群から選択される。
て酵素はアスパラギラス オリザエ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕ ｏｒｙｚａｅ）由
来の蛋白分解酵素、バシラス リッケンフォーミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃ
ｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）由来の蛋白分解酵素、バシラス リッケンフォーミス（
Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）由来のサブチリシン、ステレ
プトマイセス グリセウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇｒｉｓｅｕｓ）由来
の蛋白分解酵素、アスパラギラス メレウス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｍｅｌ
ｌｅｕｓ）由来のアシラーゼ、バシラス サブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕ
ｂｔｉｌｉｓ）由来の蛋白分解酵素、加水分解酵素ＥＳＬ−００１−０５、ステ
レプトマイセス グリセウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇｒｉｓｅｕｓ）由
来のプロナーゼ蛋白分解酵素、ライゾパス アライザス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ ａ
ｒｒｈｉｚｕｓ）由来の脂肪分解酵素、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａ
ｓ）属のタイプＢ種由来のリポ蛋白脂肪分解酵素、細菌性蛋白分解酵素、シュー
ドモナス セパシア（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｃｅｐａｃｉａ）由来の脂肪分
解酵素からなる群から選択される。他の態様においては、酵素はアスパラギラス
オリザエ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕ ｏｒｙｚａｅ）蛋白分解酵素、バシラス
リッケンフォーミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）由来の
蛋白分解酵素、バシラス リッケンフォーミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅ
ｎｉｆｏｒｍｉｓ）由来のサブチリシン、ステレプトマイセス グリセウス（Ｓ
ｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇｒｉｓｅｕｓ）由来の蛋白分解酵素、ステレプトマ
イセス グリセウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇｒｉｓｅｕｓ）由来のプロ
ナーゼ蛋白分解酵素及びライゾパス アライザス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ ａｒｒｈ
ｉｚｕｓ）由来の脂肪分解酵素からなる群から選択される。更に他の態様におい
ては、酵素はアスパラギラス オリザエ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕ ｏｒｙｚａｅ
）及びバシラス リッケンフォーミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏ
ｒｍｉｓ）由来の蛋白分解酵素からなる群から選択される。
【００３０】 一つの態様においては、β―アノマーは主生成物である。他の態様においては
、α―アノマーが主生成物である。更に他の態様においては、β―Ｌ―鏡像異性
体が主生成物である。付加的な態様においては、β―Ｄ―鏡像異性体が主生成物
である。更に他の態様においては、α―Ｌ―鏡像異性体が主生成物である。付加
的な態様においては、α―Ｄ―鏡像異性体が主生成物である。
、α―アノマーが主生成物である。更に他の態様においては、β―Ｌ―鏡像異性
体が主生成物である。付加的な態様においては、β―Ｄ―鏡像異性体が主生成物
である。更に他の態様においては、α―Ｌ―鏡像異性体が主生成物である。付加
的な態様においては、α―Ｄ―鏡像異性体が主生成物である。
【００３１】 一つの態様においては、発明は上記態様の一つによる式Ａ及び式Ｂで表される
アノマー混合物から、β―アノマー及びα―アノマーを分離する事によりジオキ
ソラン・ヌクレオシド類似体を立体選択的に製造する為の方法である。該方法は
更に、Ｃ４位の官能基（ＣＯＯＲ1 ）をプリニル基又はピリミジニル基、或いは
次式：
アノマー混合物から、β―アノマー及びα―アノマーを分離する事によりジオキ
ソラン・ヌクレオシド類似体を立体選択的に製造する為の方法である。該方法は
更に、Ｃ４位の官能基（ＣＯＯＲ1 ）をプリニル基又はピリミジニル基、或いは
次式：
【化６】 からなる群から選択されるその類似体又は誘導体の基で立体選択的に置換する段
階を含んでいる。
階を含んでいる。
【００３２】 この態様においては、Ｒ2 、Ｒ9 及びＲ11は独立して、水素原子、炭素原子数
１ないし６のアルキル基、炭素原子数１ないし６のアシル基及びＲ8 Ｃ（Ｏ）基
（式中Ｒ8 は水素原子又は炭素原子数１ないし６のアルキル基、を表す）からな
る群から選択される。付加的には、Ｒ3 、Ｒ4 及びＲ10は各々独立して水素原子
、炭素原子数１ないし６のアルキル基、臭素原子、塩素原子、弗素原子、沃素原
子及びＣＦ3 基からなる群から選択され；そしてＲ5 、Ｒ6 及びＲ7 は各々独立
して水素原子、臭素原子、塩素原子、弗素原子、沃素原子、アミノ基、ヒドロキ
シル基及び炭素原子数３ないし６のシクロアルキルアミノ基からなる群から選択
される。この方法でジオキソラン・ヌクレオシド類似体の立体化学的異性体の製
造が出来る。
１ないし６のアルキル基、炭素原子数１ないし６のアシル基及びＲ8 Ｃ（Ｏ）基
（式中Ｒ8 は水素原子又は炭素原子数１ないし６のアルキル基、を表す）からな
る群から選択される。付加的には、Ｒ3 、Ｒ4 及びＲ10は各々独立して水素原子
、炭素原子数１ないし６のアルキル基、臭素原子、塩素原子、弗素原子、沃素原
子及びＣＦ3 基からなる群から選択され；そしてＲ5 、Ｒ6 及びＲ7 は各々独立
して水素原子、臭素原子、塩素原子、弗素原子、沃素原子、アミノ基、ヒドロキ
シル基及び炭素原子数３ないし６のシクロアルキルアミノ基からなる群から選択
される。この方法でジオキソラン・ヌクレオシド類似体の立体化学的異性体の製
造が出来る。
【００３３】 一つの態様においては、該方法は更にＣ４位の官能基（ＣＯＯＲ1 ）をプリニ
ル基又はピリミジニル基又は次式：
ル基又はピリミジニル基又は次式：
【化７】 からなる群から選択されるその誘導体の基により立体選択的に置換する段階を含
んでいる。
んでいる。
【００３４】 この態様においては、Ｒ2 は水素原子、炭素原子数１ないし６のアルキル基、
炭素原子数１ないし６のアシル基及びＲ8 Ｃ（Ｏ）基（式中Ｒ8 は水素原子又は
炭素原子数１ないし６のアルキル基を表す）からなる群から選択される。付加的
に、Ｒ3 及びＲ4 は、各々独立して水素原子、炭素原子数１ないし６のアルキル
基、臭素原子、塩素原子、弗素原子、沃素原子及びＣＦ3 基からなる群から選択
され；そしてＲ5 、Ｒ6 及びＲ7 は各々独立して水素原子、臭素原子、塩素原子
、弗素原子、沃素原子、アミノ基、ヒドロキシル基及び炭素原子数３ないし６の
シクロアルキルアミノ基からなる群から選択される。この方法でジオキソラン・
ヌクレオシド類似体の立体化学的異性体の製造が出来る。
炭素原子数１ないし６のアシル基及びＲ8 Ｃ（Ｏ）基（式中Ｒ8 は水素原子又は
炭素原子数１ないし６のアルキル基を表す）からなる群から選択される。付加的
に、Ｒ3 及びＲ4 は、各々独立して水素原子、炭素原子数１ないし６のアルキル
基、臭素原子、塩素原子、弗素原子、沃素原子及びＣＦ3 基からなる群から選択
され；そしてＲ5 、Ｒ6 及びＲ7 は各々独立して水素原子、臭素原子、塩素原子
、弗素原子、沃素原子、アミノ基、ヒドロキシル基及び炭素原子数３ないし６の
シクロアルキルアミノ基からなる群から選択される。この方法でジオキソラン・
ヌクレオシド類似体の立体化学的異性体の製造が出来る。
【００３５】 他の態様においては、該方法は更にＣ４位の官能基（ＣＯＯＲ1 ）をピリミジ
ニル基又は次式：
ニル基又は次式：
【化８】 からなる群から選択されるその類似体又は誘導体により立体選択的に置換する段
階を含んでいる。
階を含んでいる。
【００３６】 この態様においては、Ｒ9 及びＲ11は独立して、水素原子、炭素原子数１ない
し６のアルキル基、炭素原子数１ないし６のアシル基及びＲ8 Ｃ（Ｏ）基から選
択される。付加的には、Ｒ10は水素原子、炭素原子数１ないし６のアルキル基、
臭素原子、塩素原子、弗素原子、沃素原子及びＣＦ3 基からなる群から選択され
る。この方法でジオキソラン・ヌクレオシド類似体の立体化学的異性体の製造が
出来る。
し６のアルキル基、炭素原子数１ないし６のアシル基及びＲ8 Ｃ（Ｏ）基から選
択される。付加的には、Ｒ10は水素原子、炭素原子数１ないし６のアルキル基、
臭素原子、塩素原子、弗素原子、沃素原子及びＣＦ3 基からなる群から選択され
る。この方法でジオキソラン・ヌクレオシド類似体の立体化学的異性体の製造が
出来る。
【００３７】 他の態様においては、上記態様の一つによる式Ａ及び式Ｂで表されるアノマー
混合物から、β―アノマー及びα―アノマーを分離する事によりジオキソラン・
ヌクレオシド類似体を立体選択的に製造することからなる方法であり、そして更
にＣ４位の官能基（ＣＯＯＲ1 ）を次式：
混合物から、β―アノマー及びα―アノマーを分離する事によりジオキソラン・
ヌクレオシド類似体を立体選択的に製造することからなる方法であり、そして更
にＣ４位の官能基（ＣＯＯＲ1 ）を次式：
【化９】 からなる群から選択される化合物の基で立体選択的に置換する事からなる。
【００３８】 本発明の他の態様においては、式Ａ又は式Ｂによる化合物を分離する事による
ジオキソラン・ヌクレオシド類似体を作る事からなる方法である。この態様によ
ると、該方法は立体選択的にＲ基を，プリニル基、ピリミジニル基、或いはその
類似体又は誘導体で置換して、第二混合物をアシル化してアシル化第二混合物を
生成する事を含んでいる。この態様は、又アシル化第二混合物をプリン又はピリ
ミジン塩基、或いはその類似体又は誘導体、及びルイス酸でグリコシル化して、
ジオキソラン・ヌクレオシド類似体を生成する段階も含んでいる。
ジオキソラン・ヌクレオシド類似体を作る事からなる方法である。この態様によ
ると、該方法は立体選択的にＲ基を，プリニル基、ピリミジニル基、或いはその
類似体又は誘導体で置換して、第二混合物をアシル化してアシル化第二混合物を
生成する事を含んでいる。この態様は、又アシル化第二混合物をプリン又はピリ
ミジン塩基、或いはその類似体又は誘導体、及びルイス酸でグリコシル化して、
ジオキソラン・ヌクレオシド類似体を生成する段階も含んでいる。
【００３９】 本発明は、高収率及び高効率をもたらすジオキソラン・ヌクレオシド類似体前
駆体のアノマー混合物からβ−及びα−アノマーを分離する高収率の方法が関与
している。一つの態様においては、この方法は廉価で高いアノマー純度を持つジ
オキソラン・ヌクレオシド類似体の製造に使用される。付加的に、本発明の他の
目的は、高いアノマー純度を持つ出発物質の合成に係る。
駆体のアノマー混合物からβ−及びα−アノマーを分離する高収率の方法が関与
している。一つの態様においては、この方法は廉価で高いアノマー純度を持つジ
オキソラン・ヌクレオシド類似体の製造に使用される。付加的に、本発明の他の
目的は、高いアノマー純度を持つ出発物質の合成に係る。
【００４０】 本発明は、酵素、特に加水分解酵素の使用による主にβ―Ｌ―体であるジオキ
ソラン・ヌクレオシド類似体の製造の方法を付与する。本方法は全般的収率を改
善し、そして比較的に少ない段階を持つので、それ故に全般的な効率を改善する
。本方法は下記の段階が関与する。
ソラン・ヌクレオシド類似体の製造の方法を付与する。本方法は全般的収率を改
善し、そして比較的に少ない段階を持つので、それ故に全般的な効率を改善する
。本方法は下記の段階が関与する。
【００４１】 式Ａ又は式Ｂで表されるアノマーの混合物はここにスキーム１記載のようにし
て得られる。
て得られる。
【化１０】
【００４２】 上記式で、Ｗはベンジル基又はベンゾイル基を表し、そしてＲ1 は水素原子、
炭素原子数１ないし６のアルキル基及び炭素原子数６ないし１５のアリール基か
らなる群から選択される。混合物はコレステロール・エステラーゼ、加水分解酵
素ＥＳＬ−００１−０２、馬肝臓エステラーゼ、牛膵臓蛋白分解酵素、α―キモ
トリプシン、ステレプトマイセス カエスピトーシス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅ
ｓ ｃａｅｓｐｉｔｏｓｉｓ）由来の蛋白分解酵素、バシラス リッケンフォー
ミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）由来のサブスチリシン
（ｓｕｂｓｔｉｌｉｓｉｎ）、アスパラギラス オリザエ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌ
ｕ ｏｒｙｚａｅ）由来の蛋白分解酵素、バシラス リッケンフォーミス（Ｂａ
ｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）由来の蛋白分解酵素、ステレプト
マイセス グリセウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇｒｉｓｅｕｓ）由来の蛋
白分解酵素、アスパラギラス メレウス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｍｅｌｌｅ
ｕｓ）由来のアシラーゼ、バシラス サブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔ
ｉｌｉｓ）由来の蛋白分解酵素、加水分解酵素ＥＳＬ−００１−０５、ステレプ
トマイセス グリセウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇｒｉｓｅｕｓ）由来の
プロナーゼ蛋白分解酵素、ライゾパス アライザス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ ａｒｒ
ｈｉｚｕｓ）由来の脂肪分解酵素、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）
属のタイプＢ種由来のリポ蛋白脂肪分解酵素、シュードモナス セパシア（Ｐｓ
ｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｃｅｐａｃｉａ）由来の脂肪分解酵素並びに細菌性蛋白分
解酵素からなる群から選択される酵素により加水分解される。加水分解段階は、
式Ａ又は式Ｂのどちらかの混合物のα−アノマーを立体選択的に加水分解する。
結果は加水分解を受けなかったβ―アノマーが残る。α―アノマーはβ―アノマ
ーから容易に分離する事が出来る。もし式Ａの化合物のアノマー混合物が選択さ
れた場合は、結果は式Ｃ及び式Ｄの化合物の製造である。
炭素原子数１ないし６のアルキル基及び炭素原子数６ないし１５のアリール基か
らなる群から選択される。混合物はコレステロール・エステラーゼ、加水分解酵
素ＥＳＬ−００１−０２、馬肝臓エステラーゼ、牛膵臓蛋白分解酵素、α―キモ
トリプシン、ステレプトマイセス カエスピトーシス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅ
ｓ ｃａｅｓｐｉｔｏｓｉｓ）由来の蛋白分解酵素、バシラス リッケンフォー
ミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）由来のサブスチリシン
（ｓｕｂｓｔｉｌｉｓｉｎ）、アスパラギラス オリザエ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌ
ｕ ｏｒｙｚａｅ）由来の蛋白分解酵素、バシラス リッケンフォーミス（Ｂａ
ｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）由来の蛋白分解酵素、ステレプト
マイセス グリセウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇｒｉｓｅｕｓ）由来の蛋
白分解酵素、アスパラギラス メレウス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｍｅｌｌｅ
ｕｓ）由来のアシラーゼ、バシラス サブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔ
ｉｌｉｓ）由来の蛋白分解酵素、加水分解酵素ＥＳＬ−００１−０５、ステレプ
トマイセス グリセウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇｒｉｓｅｕｓ）由来の
プロナーゼ蛋白分解酵素、ライゾパス アライザス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ ａｒｒ
ｈｉｚｕｓ）由来の脂肪分解酵素、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）
属のタイプＢ種由来のリポ蛋白脂肪分解酵素、シュードモナス セパシア（Ｐｓ
ｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｃｅｐａｃｉａ）由来の脂肪分解酵素並びに細菌性蛋白分
解酵素からなる群から選択される酵素により加水分解される。加水分解段階は、
式Ａ又は式Ｂのどちらかの混合物のα−アノマーを立体選択的に加水分解する。
結果は加水分解を受けなかったβ―アノマーが残る。α―アノマーはβ―アノマ
ーから容易に分離する事が出来る。もし式Ａの化合物のアノマー混合物が選択さ
れた場合は、結果は式Ｃ及び式Ｄの化合物の製造である。
【化１１】
【００４３】 もし式Ｂの化合物のアノマー混合物が選択された場合は、結果は式Ｅ及び式Ｆ
の化合物の製造である。
の化合物の製造である。
【化１２】
【００４４】 混合物（Ｃ）／（Ｄ）又は（Ｅ）／（Ｆ）はその後、Ｒ1 基をアシル基と置換
する酸化的脱炭酸反応を受ける。そしてそれはルイス酸存在の下で、プリン又は
ピリミジン塩基、或いはその類似体又は誘導体でグリコシル化される。最終段階
は、混合物（Ｃ）／（Ｄ）ではβ―Ｌ体のジオキソラン・ヌクレオシド類似体、
及び混合物（Ｅ）／（Ｆ）ではβ―Ｄ体のジオキソラン・ヌクレオシド類似体を
製造する。
する酸化的脱炭酸反応を受ける。そしてそれはルイス酸存在の下で、プリン又は
ピリミジン塩基、或いはその類似体又は誘導体でグリコシル化される。最終段階
は、混合物（Ｃ）／（Ｄ）ではβ―Ｌ体のジオキソラン・ヌクレオシド類似体、
及び混合物（Ｅ）／（Ｆ）ではβ―Ｄ体のジオキソラン・ヌクレオシド類似体を
製造する。
【００４５】 最初に、以下の様な定義を参照として与える。特記しない限り、下記の定義は
本明細書全体に渡る意味を決めるであろう。
本明細書全体に渡る意味を決めるであろう。
【００４６】 「ヌクレオシド」と言うのは、五炭糖（ペントース）に連絡したプリン又はピ
リミジン塩基からなる如何なる化合物だと定義される。
リミジン塩基からなる如何なる化合物だと定義される。
【００４７】 「ジオキソラン・ヌクレオシド類似体」と言うのは、プリン又はピリミジン塩
基、或いはその類似体又は誘導体に結合しているとここに定義されているジオキ
ソラン環を含む何れかの化合物だと定義される。「ジオキソラン環」は、下記に
示したように環の１及び３位に酸素原子を持つ如何なる置換された又は置換され
ていない五単環である。
基、或いはその類似体又は誘導体に結合しているとここに定義されているジオキ
ソラン環を含む何れかの化合物だと定義される。「ジオキソラン環」は、下記に
示したように環の１及び３位に酸素原子を持つ如何なる置換された又は置換され
ていない五単環である。
【化１３】 「プリン又はピリミジン塩基」と言うのは、自然にあるプリン又はピリミジン
塩基のアデニン、グアニン、シトシン、チミン及ウラシルを定義する。プリン又
はピリミジンが基であるのが、各々プリン基又はピリミジン基である。
塩基のアデニン、グアニン、シトシン、チミン及ウラシルを定義する。プリン又
はピリミジンが基であるのが、各々プリン基又はピリミジン基である。
【００４８】 「アルキル基」と言うのは、置換された又は置換されていない、飽和した又は
不飽和の、直鎖状の、分岐鎖状の又は炭素環基だと定義され、直鎖状の、分岐鎖
状の又は炭素環基は、任意に１個以上のヘテロ原子（例えば酸素原子、窒素原子
又は硫黄原子）により中断される事が出来る。置換されたアルキル基は、ハロゲ
ン原子（弗素原子、塩素原子、臭素原子、沃素原子）、ヒドロキシル基、アミノ
基または炭素原子数６ないし２０のアリール基により置換される。
不飽和の、直鎖状の、分岐鎖状の又は炭素環基だと定義され、直鎖状の、分岐鎖
状の又は炭素環基は、任意に１個以上のヘテロ原子（例えば酸素原子、窒素原子
又は硫黄原子）により中断される事が出来る。置換されたアルキル基は、ハロゲ
ン原子（弗素原子、塩素原子、臭素原子、沃素原子）、ヒドロキシル基、アミノ
基または炭素原子数６ないし２０のアリール基により置換される。
【００４９】 「アリール基」と言うのは、任意に置換されるか又は１個のヘテロ原子（例え
ば酸素原子、窒素原子又は硫黄原子）により中断される事が出来て、及び少なく
とも１個のベンゼノイド型環（例えばフェニル基及びナフチル基）を含有してい
る炭素環基だと定義される。
ば酸素原子、窒素原子又は硫黄原子）により中断される事が出来て、及び少なく
とも１個のベンゼノイド型環（例えばフェニル基及びナフチル基）を含有してい
る炭素環基だと定義される。
【００５０】 「炭素環基」と言うのは、置換された又は置換されていない、飽和した又は不
飽和の、炭素原子数３ないし６のシクロアルキル基だと定義されていて、置換さ
れたシクロアルキル基は炭素原子数１ないし６のアルキル基、ハロゲン原子（例
えば弗素原子、塩素原子、臭素原子、沃素原子）、アミノ基、カルボニル基（例
えばＣＯＯＨ）、又は二酸化窒素により置換されている。
飽和の、炭素原子数３ないし６のシクロアルキル基だと定義されていて、置換さ
れたシクロアルキル基は炭素原子数１ないし６のアルキル基、ハロゲン原子（例
えば弗素原子、塩素原子、臭素原子、沃素原子）、アミノ基、カルボニル基（例
えばＣＯＯＨ）、又は二酸化窒素により置換されている。
【００５１】 プリン又はピリミジン塩基の「誘導体」と言うのは、下記の構造の一つで：
【化１４】 式中、１個以上のピリミジンのＨは、当業者には旧知の置換基により置換されて
いる。上記式で、破線で示されている結合は任意でありそして環原子の原子価を
完成するのに該結合が必要な時にのみ存在する。単結合により環に結合している
置喚基には、これ等に制限されないけれど、弗素原子、塩素原子、臭素原子、沃
素原子のようなハロゲン原子；低級アルキルのようなアルキル基；アリール基；
シアノカルバモイル基；第一級、第二級及び第三級アミノ基を含むアミノ基；及
びヒドロキシル基を含む。二重結合により炭素環原子に結合している置換基は、
これ等に制限されないけれど、環の中でカルボニル基を形成する＝Ｏを含む。環
が芳香族の場合には、置換基の幾つかは互変異性体を形成するかも知れないと思
われている。ここでの定義はこのような互変異性体を含むべきである。
いる。上記式で、破線で示されている結合は任意でありそして環原子の原子価を
完成するのに該結合が必要な時にのみ存在する。単結合により環に結合している
置喚基には、これ等に制限されないけれど、弗素原子、塩素原子、臭素原子、沃
素原子のようなハロゲン原子；低級アルキルのようなアルキル基；アリール基；
シアノカルバモイル基；第一級、第二級及び第三級アミノ基を含むアミノ基；及
びヒドロキシル基を含む。二重結合により炭素環原子に結合している置換基は、
これ等に制限されないけれど、環の中でカルボニル基を形成する＝Ｏを含む。環
が芳香族の場合には、置換基の幾つかは互変異性体を形成するかも知れないと思
われている。ここでの定義はこのような互変異性体を含むべきである。
【００５２】 プリン又はピリミジン塩基の「類似体」と言うのは、環構造の１個以上の炭素
原子を窒素原子で置換することにより更に変性されているプリン又はピリミジン
塩基の何れかの誘導体を意味する。
原子を窒素原子で置換することにより更に変性されているプリン又はピリミジン
塩基の何れかの誘導体を意味する。
【００５３】 「立体選択的酵素」と言うのは、一方の特異な立体異性体を他方の立体異性体
に比較して立体選択的に作る反応において触媒として関与する酵素であると定義
する。
に比較して立体選択的に作る反応において触媒として関与する酵素であると定義
する。
【００５４】 「アノマー純度」と言うのは、混合物中に存在する化合物の全てのアノマーの
総合量で、化合物の特別なアノマーの量を割り１００％により掛けた数字である
と定義する。
総合量で、化合物の特別なアノマーの量を割り１００％により掛けた数字である
と定義する。
【００５５】 「アルコキシ基」は、アルキル基が酸素原子を通して隣接する原子に共有的に
結合（例えばメトキシ基及びエトキシ基）しているアルキル基であると定義する
。
結合（例えばメトキシ基及びエトキシ基）しているアルキル基であると定義する
。
【００５６】 「アルコキシカルボニル基」と言うのは、カルボニル基の隣接する基に結合し
ているアルコキシ基であると定義する。
ているアルコキシ基であると定義する。
【００５７】 「アシル基」と言うのは、カルボン酸から誘導され、置換され（ハロゲン原子
、炭素原子数６ないし２０のアリール基又は炭素原子数１ないし６のアルキル基
により）又は−ＯＨ基の代替により置換されていない基であると定義する。関係
する酸の様に、アシル基は置換され（ハロゲン原子、炭素原子数１ないし６のア
ルコキシアルキル基、ニトロ基又はＯ2 により）又は置換されていない脂肪族又
は芳香族基で、そして分子の他の構造が如何であれ、官能基の特性は原則的に同
一である（即ちアセチル基、プロピオニル基、イソブタノイル基、ピバロイル基
、ヘキサノイル基、トリフルオロアセチル基、クロロアセチル基及びシクロヘキ
サノイル基）基である。
、炭素原子数６ないし２０のアリール基又は炭素原子数１ないし６のアルキル基
により）又は−ＯＨ基の代替により置換されていない基であると定義する。関係
する酸の様に、アシル基は置換され（ハロゲン原子、炭素原子数１ないし６のア
ルコキシアルキル基、ニトロ基又はＯ2 により）又は置換されていない脂肪族又
は芳香族基で、そして分子の他の構造が如何であれ、官能基の特性は原則的に同
一である（即ちアセチル基、プロピオニル基、イソブタノイル基、ピバロイル基
、ヘキサノイル基、トリフルオロアセチル基、クロロアセチル基及びシクロヘキ
サノイル基）基である。
【００５８】 「アルコキシアルキル基」と言うのは、アルキル基により隣接する基に結合し
ているアルコキシ基（例えばメトキシメチル基）であると定義する。
ているアルコキシ基（例えばメトキシメチル基）であると定義する。
【００５９】 「アシルオキシ基」と言うのは、酸素原子により隣接する基に結合しているア
シル基であると定義する。
シル基であると定義する。
【００６０】 「オキソ基」と言うのは、炭素原子に結合された＝Ｏ置換基であると定義する
。
。
【００６１】 上記した様に、本発明の一つの態様は、次式Ａ又はＢ：
【化１５】 （式中、Ｗはベンジル基又はベンゾイル基を表し、そしてＲ1 は炭素原子数１な
いし６のアルキル基及び炭素原子数６ないし１５のアリール基からなる群から選
択される）で表されるアノマー混合物からβ−アノマーとα−アノマーとを分離
する方法である。
いし６のアルキル基及び炭素原子数６ないし１５のアリール基からなる群から選
択される）で表されるアノマー混合物からβ−アノマーとα−アノマーとを分離
する方法である。
【００６２】 一つの態様においては、該方法は立体選択的に、式Ａ及び式ＢのＲ1 が水素原
子により置換されている生成物を形成するα―アノマーを主に加水分解する。該
方法は又加水分解を受けなかった出発物質から加水分解された生成物を分離する
事をも含む。
子により置換されている生成物を形成するα―アノマーを主に加水分解する。該
方法は又加水分解を受けなかった出発物質から加水分解された生成物を分離する
事をも含む。
【００６３】 β―Ｌジオキソラン・ヌクレオシド類似体の合成方法は、出発物質の製造から
始まる。スキーム１は式Ａ又はＢを含む混合物の製造を記載している。
始まる。スキーム１は式Ａ又はＢを含む混合物の製造を記載している。
【化１６】
【００６４】 式１Ａで表されるオキシアセトアルデヒド基（式中ベンジル基又はベンゾイル
基を表す）は大体同一モルの比率で、１、３−ジオキソランー４―（４Ｒ）カル
ボン酸―２，２−ジメチルーメチルエステル（式１Ｂ）と反応させる。式１Ｂの
ジオキソランはＣ４炭素にキラル中心を持っている。反応はトルエン溶媒中で起
る。混合物を５８℃まで加熱する。触媒、ＰＴＳＡ、を添加する。混合物を６４
ないし６７℃の温度まで加熱する。７０ｋＰａに減圧され、そして反応を４０分
間継続する。その後僅少の溶媒を高減圧により除去する。触媒を溶離液としてへ
キサン：エチルアセテートを１：１の比率で使用して濾過除去する。一つの態様
においては、好ましいフィルターはシリカゲルのパッドである。
基を表す）は大体同一モルの比率で、１、３−ジオキソランー４―（４Ｒ）カル
ボン酸―２，２−ジメチルーメチルエステル（式１Ｂ）と反応させる。式１Ｂの
ジオキソランはＣ４炭素にキラル中心を持っている。反応はトルエン溶媒中で起
る。混合物を５８℃まで加熱する。触媒、ＰＴＳＡ、を添加する。混合物を６４
ないし６７℃の温度まで加熱する。７０ｋＰａに減圧され、そして反応を４０分
間継続する。その後僅少の溶媒を高減圧により除去する。触媒を溶離液としてへ
キサン：エチルアセテートを１：１の比率で使用して濾過除去する。一つの態様
においては、好ましいフィルターはシリカゲルのパッドである。
【００６５】 得られた生成物は、式１Ｃ及び１Ｄの化合物の比が各々２：１（１Ｃ：１Ｄ）
である混合物を含む粗製油である。
である混合物を含む粗製油である。
【００６６】 反応条件は立体異性体の純度を最大限にする為に調節する事が出来る事は、当
業者が高く評価する所である。本発明の一つに態様においては、式１Ａの化合物
と式１Ｂの化合物との反応は、出発物質の約１．０重量％ないし１０．０重量％
の間の量での触媒の存在下で行われる。他の態様においては、触媒の量は出発物
質の約２．５重量％と約５．５重量％の間である。更に他の態様においては、触
媒の量は約３．０重量％と約５．０重量％の間である。更に他の態様においては
、触媒の量は約３．５重量％と約５．５重量％の間である。他の態様においては
、触媒の量は約２．５重量％と約７．５重量％の間である。他の態様においては
、触媒の量は約５．０重量％である。
業者が高く評価する所である。本発明の一つに態様においては、式１Ａの化合物
と式１Ｂの化合物との反応は、出発物質の約１．０重量％ないし１０．０重量％
の間の量での触媒の存在下で行われる。他の態様においては、触媒の量は出発物
質の約２．５重量％と約５．５重量％の間である。更に他の態様においては、触
媒の量は約３．０重量％と約５．０重量％の間である。更に他の態様においては
、触媒の量は約３．５重量％と約５．５重量％の間である。他の態様においては
、触媒の量は約２．５重量％と約７．５重量％の間である。他の態様においては
、触媒の量は約５．０重量％である。
【００６７】 本発明の態様においては、式１Ａの化合物と式１Ｂの化合物との反応は、約４
０℃から約８０℃の温度範囲で実施される。本発明の他の態様においては、温度
は約５０℃から約７５℃の範囲である。更に他の態様においては、温度は約６０
℃から約７０℃の範囲である。付加的な態様においては、温度は約６５℃から７
９℃の範囲である。
０℃から約８０℃の温度範囲で実施される。本発明の他の態様においては、温度
は約５０℃から約７５℃の範囲である。更に他の態様においては、温度は約６０
℃から約７０℃の範囲である。付加的な態様においては、温度は約６５℃から７
９℃の範囲である。
【００６８】 本発明の態様においては、式１Ａの化合物と式１Ｂの化合物の間の反応時間は
、約３０分間から約２時間の範囲の期間に対応する。更に他の態様においては、
期間は約３０分間から約１時間の範囲である。更に他の態様においては、期間は
約３０分間から約５０分間の範囲である。
、約３０分間から約２時間の範囲の期間に対応する。更に他の態様においては、
期間は約３０分間から約１時間の範囲である。更に他の態様においては、期間は
約３０分間から約５０分間の範囲である。
【００６９】 Ｃ４炭素がキラルである事は、当業者が高く評価する所である。この炭素は反
応に関与していないので、キラルティーはこの炭素では保存される。出発物質に
は（４Ｓ）又は（４Ｒ）立体化学を持つ物を選択出来る。
応に関与していないので、キラルティーはこの炭素では保存される。出発物質に
は（４Ｓ）又は（４Ｒ）立体化学を持つ物を選択出来る。
【００７０】 一つの態様においては、結果的に出来あがった生成物は、α―Ｌ体よりもβ―
Ｌ体が優先されるアノマー混合物が好ましい。この様な結果を得る為には、式１
Ｂ（４Ｓ）で表される出発物質が選択されそして下記に提示される。
Ｌ体が優先されるアノマー混合物が好ましい。この様な結果を得る為には、式１
Ｂ（４Ｓ）で表される出発物質が選択されそして下記に提示される。
【化１７】
【００７１】 反応は上記に記載した原理により進行する。一つの態様においては、結果的に
得られた生成物は、５５％よりも高く、好ましくは６０％及び更に好ましくは６
５％でα―Ｌアノマーに比してβ―Ｌアノマーのアノマー純度を持っているであ
ろう。
得られた生成物は、５５％よりも高く、好ましくは６０％及び更に好ましくは６
５％でα―Ｌアノマーに比してβ―Ｌアノマーのアノマー純度を持っているであ
ろう。
【００７２】 一つの態様において、本発明は下記スキーム２に従ってα−アノマーからβ−
アノマーを分離する方法である：
アノマーを分離する方法である：
【化１８】
【００７３】 一つの態様において、式２Ａ又は式２Ｂにより表されるように、アノマー混合
物が得られる。式２Ａ又は式２Ｂにより表される混合物は、上記又は従来技術で
既知の何れかの方法に基づく反応に従って得ることができる。
物が得られる。式２Ａ又は式２Ｂにより表される混合物は、上記又は従来技術で
既知の何れかの方法に基づく反応に従って得ることができる。
【００７４】 前記反応は、下記のように行われる：式２Ａ及び式２Ｂにより表される物質の
一部を反応容器内に秤量して入れる。小規模な反応のためには、式２Ａ及び式２
Ｂの前記混合物約０．００１ｍｍｏｌを、ＢＥＳ緩衝剤の５ｍｍｏｌ溶液約４６
ｍＬに添加する（基質中で約２ｍＭの最終濃度とするため）。予備的な規模の反
応のためには、前記混合物約０．８ｍｍｏｌを、緩衝剤約１０ｍＬに添カロする（ 基質中で約８０ｍＭの最終濃度とするため）。前記緩衝剤のｐＨは、一つの態様
において、７．０ないし７．５、好ましくは７．２であるべきである。
一部を反応容器内に秤量して入れる。小規模な反応のためには、式２Ａ及び式２
Ｂの前記混合物約０．００１ｍｍｏｌを、ＢＥＳ緩衝剤の５ｍｍｏｌ溶液約４６
ｍＬに添加する（基質中で約２ｍＭの最終濃度とするため）。予備的な規模の反
応のためには、前記混合物約０．８ｍｍｏｌを、緩衝剤約１０ｍＬに添カロする（ 基質中で約８０ｍＭの最終濃度とするため）。前記緩衝剤のｐＨは、一つの態様
において、７．０ないし７．５、好ましくは７．２であるべきである。
【００７５】 前記酵素は、コレステロール・エステラーゼ、加水分解酵素ＥＳＬ−００１−
０２、馬肝臓エステラーゼ、牛膵臓蛋白分解酵素、α−キモトリプシン、ステレ
プトマイセス カエスピトーシス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｃａｅｓｐｉｔ
ｏｓｉｓ）由来の蛋白分解酵素、バシラス リッケンフォーミス（Ｂａｃｉｌｌ
ｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）由来のサブスチリシン（ｓｕｂｓｔｉｌｉ
ｓｉｎ）、アスパラギラス オリザエ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕ ｏｒｙｚａｅ）
由来の蛋白分解酵素、バシラス リッケンフォーミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉ
ｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）由来の蛋白分解酵素、ステレプトマイセス グリセウ
ス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇｒｉｓｅｕｓ）由来の蛋白分解酵素、アスパ
ラギラス メレウス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｍｅｌｌｅｕｓ）由来のアシラ
ーゼ、バシラス サブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）由来の蛋
白分解酵素、加水分解酵素ＥＳＬ−００１−０５、ステレプトマイセス グリセ
ウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇｒｉｓｅｕｓ）由来のプロナーゼ蛋白分解
酵素、ライゾパス アライザス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ ａｒｒｈｉｚｕｓ）由来の
脂肪分解酵素、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属のタイプＢ種由来
のリポ蛋白脂肪分解酵素、シュードモナス セパシア（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ
ｃｅｐａｃｉａ）由来の脂肪分解酵素並びに細菌性蛋白分解酵素からなる群か
ら選択される。
０２、馬肝臓エステラーゼ、牛膵臓蛋白分解酵素、α−キモトリプシン、ステレ
プトマイセス カエスピトーシス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｃａｅｓｐｉｔ
ｏｓｉｓ）由来の蛋白分解酵素、バシラス リッケンフォーミス（Ｂａｃｉｌｌ
ｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）由来のサブスチリシン（ｓｕｂｓｔｉｌｉ
ｓｉｎ）、アスパラギラス オリザエ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕ ｏｒｙｚａｅ）
由来の蛋白分解酵素、バシラス リッケンフォーミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉ
ｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）由来の蛋白分解酵素、ステレプトマイセス グリセウ
ス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇｒｉｓｅｕｓ）由来の蛋白分解酵素、アスパ
ラギラス メレウス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｍｅｌｌｅｕｓ）由来のアシラ
ーゼ、バシラス サブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）由来の蛋
白分解酵素、加水分解酵素ＥＳＬ−００１−０５、ステレプトマイセス グリセ
ウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇｒｉｓｅｕｓ）由来のプロナーゼ蛋白分解
酵素、ライゾパス アライザス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ ａｒｒｈｉｚｕｓ）由来の
脂肪分解酵素、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属のタイプＢ種由来
のリポ蛋白脂肪分解酵素、シュードモナス セパシア（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ
ｃｅｐａｃｉａ）由来の脂肪分解酵素並びに細菌性蛋白分解酵素からなる群か
ら選択される。
【００７６】 前記酵素の市販の供給源は、当業者に容易に利用可能である。特に、前記物質
の幾つかは、下記の供給源から得ることかできる：牛コレステロール・エステラ
ーゼは、ゲンザイム（Ｇｅｎｚｙｍｅ）社（ケンブリッジ，マサチューセッツ）
から購入した；加水分解酵素ＥＳＬ−００１−０２は、ディヴァーサ（Ｄｉｖｅ
ｒｓａ）社（サンジエゴ，カリホルニア）から購入した；馬肝臓エステラーゼ及
びバシラス リッケンフォーミス由来のサブスチリシンは、フルカ・ヒェミー（
Ｆｌｕｋａ Ｃｈｅｍｉｅ）社（オークヴィル，オンタリオ）から購入した；牛
膵臓蛋白分解酵素タイプ１、α−キモトリプシン、ステレプトマイセス カエス
ピトーシスは、シグマ−アルドリッチ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）社（オー
クヴィル，オンタリオ）から購入した。
の幾つかは、下記の供給源から得ることかできる：牛コレステロール・エステラ
ーゼは、ゲンザイム（Ｇｅｎｚｙｍｅ）社（ケンブリッジ，マサチューセッツ）
から購入した；加水分解酵素ＥＳＬ−００１−０２は、ディヴァーサ（Ｄｉｖｅ
ｒｓａ）社（サンジエゴ，カリホルニア）から購入した；馬肝臓エステラーゼ及
びバシラス リッケンフォーミス由来のサブスチリシンは、フルカ・ヒェミー（
Ｆｌｕｋａ Ｃｈｅｍｉｅ）社（オークヴィル，オンタリオ）から購入した；牛
膵臓蛋白分解酵素タイプ１、α−キモトリプシン、ステレプトマイセス カエス
ピトーシスは、シグマ−アルドリッチ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）社（オー
クヴィル，オンタリオ）から購入した。
【００７７】 別の態様において、前記酵素は、アスパラギラス オリザエ（Ａｓｐｅｒｇｉ
ｌｌｕ ｏｒｙｚａｅ）由来の蛋白分解酵素、バシラス リッケンフォーミス（
Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）由来の蛋白分解酵素、バシラ
ス リッケンフォーミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）由
来のサブチリシン、ステレブトマイセス グリセウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅ
ｓ ｇｒｉｓｅｕｓ）由来の蛋白分解酵素、アスパラギラス メレウス（Ａｓｐ
ｅｒｇｉｌｌｕｓ ｍｅｌｌｅｕｓ）由来のアシラーゼ、バシラス サブチリス
（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）由来の蛋白分解酵素、加水分解酵素Ｅ
ＳＬ−００１−０５、ステしプトマイセス グリセウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃ
ｅｓ ｇｒｉｓｅｕｓ）由来のプロナーゼ蛋白分解酵素、ライゾパス アライザ
ス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ ａｒｒｈｉｚｕｓ）由来の脂肪分解酵素、シュードモナ
ス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属のタイプＢ種由来のリボ蛋白脂肪分解酵素、細
菌性蛋白分解酵素、シュードモナス セパシア（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｃｅ
ｐａｃｉａ）由来の脂肪分解酵素からなる群から選択される。スキームｌの式１
Ａで表される化合物により表されるオキシアセトアルデヒドがベンゾイルオキシ
アセトアルデヒドであるべく選択される場合には、前記態様に従って、前記酵素
の一つを選択することか好ましい。
ｌｌｕ ｏｒｙｚａｅ）由来の蛋白分解酵素、バシラス リッケンフォーミス（
Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）由来の蛋白分解酵素、バシラ
ス リッケンフォーミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）由
来のサブチリシン、ステレブトマイセス グリセウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅ
ｓ ｇｒｉｓｅｕｓ）由来の蛋白分解酵素、アスパラギラス メレウス（Ａｓｐ
ｅｒｇｉｌｌｕｓ ｍｅｌｌｅｕｓ）由来のアシラーゼ、バシラス サブチリス
（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）由来の蛋白分解酵素、加水分解酵素Ｅ
ＳＬ−００１−０５、ステしプトマイセス グリセウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃ
ｅｓ ｇｒｉｓｅｕｓ）由来のプロナーゼ蛋白分解酵素、ライゾパス アライザ
ス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ ａｒｒｈｉｚｕｓ）由来の脂肪分解酵素、シュードモナ
ス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属のタイプＢ種由来のリボ蛋白脂肪分解酵素、細
菌性蛋白分解酵素、シュードモナス セパシア（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｃｅ
ｐａｃｉａ）由来の脂肪分解酵素からなる群から選択される。スキームｌの式１
Ａで表される化合物により表されるオキシアセトアルデヒドがベンゾイルオキシ
アセトアルデヒドであるべく選択される場合には、前記態様に従って、前記酵素
の一つを選択することか好ましい。
【００７８】 本発明の別の態様に従って、式１Ａで表される化合物により表されるオキシア
セトアルデヒドはベンゾイルオキシアセトアルデヒドである。前記態様に従って
、前記酵素は、アスパラギラス オリザエ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕ ｏｒｙｚａ
ｅ）由来の蛋白分解酵素、バシラス リッケンフォーミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ
ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）由来の蛋白分解酵素、バシラス リッケンフォー
ミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）由来のサブチリシン、
ステレプトマイセス グリセウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇｒｉｓｅｕｓ
）由来の蛋白分解酵素、及ひライゾパス アライザス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ ａｒ
ｒｈｉｚｕｓ）由来の脂肪分解酵素からなる群から選択される。また別の態様に
おいて、前記酵素は、アスパラギラス オリザエ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕ ｏｒ
ｙｚａｅ）由来の蛋白分解酵素及びバシラス リッケンフォーミス（Ｂａｃｉｌ
ｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）由来の蛋白分解酵素からなる群から選択
される。
セトアルデヒドはベンゾイルオキシアセトアルデヒドである。前記態様に従って
、前記酵素は、アスパラギラス オリザエ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕ ｏｒｙｚａ
ｅ）由来の蛋白分解酵素、バシラス リッケンフォーミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ
ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）由来の蛋白分解酵素、バシラス リッケンフォー
ミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）由来のサブチリシン、
ステレプトマイセス グリセウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇｒｉｓｅｕｓ
）由来の蛋白分解酵素、及ひライゾパス アライザス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ ａｒ
ｒｈｉｚｕｓ）由来の脂肪分解酵素からなる群から選択される。また別の態様に
おいて、前記酵素は、アスパラギラス オリザエ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕ ｏｒ
ｙｚａｅ）由来の蛋白分解酵素及びバシラス リッケンフォーミス（Ｂａｃｉｌ
ｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）由来の蛋白分解酵素からなる群から選択
される。
【００７９】 また別の態様において、前記酵素は、コレステロール・エステラーセ、加水分
解酵素ＥＳＬ−００１−０２，馬肝臓エステラーゼ、牛膵臓蛋白分解酵素、α−
キモトリプシン、ステレプトマイセス カエスピトーシス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙ
ｃｅｓ ｃａｅｓｐｉｔｏｓｉｓ）由来の蛋白分解酵素及びバシラス リッケン
フォーミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）由来のサブスチ
リシン（ｓｕｂｓｔｉｌｉｓｉｎ）からなる群から選択される。式１Ａで表され
る化合物により表されるオキシアセトアルデヒドがベンゾイルオキシアセトアル
デヒドである場合には、前記態様に従って、前記酵素の一つを選択することが好
ましい。
解酵素ＥＳＬ−００１−０２，馬肝臓エステラーゼ、牛膵臓蛋白分解酵素、α−
キモトリプシン、ステレプトマイセス カエスピトーシス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙ
ｃｅｓ ｃａｅｓｐｉｔｏｓｉｓ）由来の蛋白分解酵素及びバシラス リッケン
フォーミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）由来のサブスチ
リシン（ｓｕｂｓｔｉｌｉｓｉｎ）からなる群から選択される。式１Ａで表され
る化合物により表されるオキシアセトアルデヒドがベンゾイルオキシアセトアル
デヒドである場合には、前記態様に従って、前記酵素の一つを選択することが好
ましい。
【００８０】 選択された立体特異性酵素は、次いで、加水分解反応を開始するために添加さ
れる。酵素反応は、式２Ｂで表される化合物のα−アノマーのＲ1 基をＨで置換
して式２Ｃで表される化合物を形成することにより、α−アノマーを優先的に加
水分解する。添加される酵素の量は、当業者に既知の原理に従って決定され得る
。別の態様に従って、前記反応を開始させるために、約５００μＬが添加された
。加水分解の速度及び程度は、従来技術で既知の原理に従ってｐＨ−スタットに
より監視された。式２Ｂで表される化合物が加水分解されるとき、前記混合物の
ｐＨは低下する。それ故、ｐＨ−スタットにより監視されるｐＨ変化は、前記反
応の完結に対応する。
れる。酵素反応は、式２Ｂで表される化合物のα−アノマーのＲ1 基をＨで置換
して式２Ｃで表される化合物を形成することにより、α−アノマーを優先的に加
水分解する。添加される酵素の量は、当業者に既知の原理に従って決定され得る
。別の態様に従って、前記反応を開始させるために、約５００μＬが添加された
。加水分解の速度及び程度は、従来技術で既知の原理に従ってｐＨ−スタットに
より監視された。式２Ｂで表される化合物が加水分解されるとき、前記混合物の
ｐＨは低下する。それ故、ｐＨ−スタットにより監視されるｐＨ変化は、前記反
応の完結に対応する。
【００８１】 反応時間が最適な反応時間よりも長くなる場合には、β−アノマーは、最終生
成物のより低いアノマー純度を生ぜしめるように転換され得る。前記反応時間が
短すぎる場合には、残りの加水分解を受けない反応物のより低いアノマー純度を
生せしめるように、α−アノマーは最適量よりも少なく転換される。一つの態様
に従って、前記反応は４３％完結するまで進み得る。正確な完結の程度は、使用
される反応物、使用される酵素及び当業者に既知の別の原理に応じて変化し得る
ことが、当業者により認識されるであろう。
成物のより低いアノマー純度を生ぜしめるように転換され得る。前記反応時間が
短すぎる場合には、残りの加水分解を受けない反応物のより低いアノマー純度を
生せしめるように、α−アノマーは最適量よりも少なく転換される。一つの態様
に従って、前記反応は４３％完結するまで進み得る。正確な完結の程度は、使用
される反応物、使用される酵素及び当業者に既知の別の原理に応じて変化し得る
ことが、当業者により認識されるであろう。
【００８２】 記載の如く、エステル出発物質は、望ましい終点に達した場合、加水分解され
た酸生成物から分離される。エステル出発物質及び加水分解された生成物は、炭
酸水素ナトリウム溶液を用いて溶液のｐＨをｐＨ７．０よりも高めることにより
分離され、次いで酢酸エチルを用いて抽出される（例えば、３×２０ｍＬ）。加
水分解を受けない出発物質は酢酸エチル中に抽出され、そして加水分解された生
成物は水溶液中に塩の形態で残る。前記溶液のｐＨは、次いで、ｐＨ２に調整さ
れる。加水分解された生成物は酢酸エチルを用いて更に抽出される（例えば、３
×２０ｍＬ）。反応物及び生成物はＭｇＳＯ4 を用いて乾燥され、濾過され、そ
して真空中で濃縮される。
た酸生成物から分離される。エステル出発物質及び加水分解された生成物は、炭
酸水素ナトリウム溶液を用いて溶液のｐＨをｐＨ７．０よりも高めることにより
分離され、次いで酢酸エチルを用いて抽出される（例えば、３×２０ｍＬ）。加
水分解を受けない出発物質は酢酸エチル中に抽出され、そして加水分解された生
成物は水溶液中に塩の形態で残る。前記溶液のｐＨは、次いで、ｐＨ２に調整さ
れる。加水分解された生成物は酢酸エチルを用いて更に抽出される（例えば、３
×２０ｍＬ）。反応物及び生成物はＭｇＳＯ4 を用いて乾燥され、濾過され、そ
して真空中で濃縮される。
【００８３】 或いは又、加水分解を受けない反応物は、ＬｉＯＨと反応させ、次いで酸性に
するというような、従来技術で既知の手順により加水分解され得る。
するというような、従来技術で既知の手順により加水分解され得る。
【００８４】 酵素の選択性により、加水分解され且つ分離されたβ−アノマーのアノマー純
度はかなり高い。更に、加水分解を受けず且つ分離されたα−アノマーのアノマ
ー純度も又高い。一つの態様において、個々に分離されたα−アノマー及び／又
はβ−アノマーのアノマー純度は８０％よりも高い。別の態様において、個々に
分離されたα−アノマー及び／又はβ−アノマーのアノマー純度は９０％よりも
高い。別の態様において、個々に分離されたα−アノマー及び／又はβ−アノマ
ーのアノマー純度は９５％よりも高い。別の態様において、個々に分離されたα
−アノマー及び／又はβ−アノマーのアノマー純度は９８％よりも高い。
度はかなり高い。更に、加水分解を受けず且つ分離されたα−アノマーのアノマ
ー純度も又高い。一つの態様において、個々に分離されたα−アノマー及び／又
はβ−アノマーのアノマー純度は８０％よりも高い。別の態様において、個々に
分離されたα−アノマー及び／又はβ−アノマーのアノマー純度は９０％よりも
高い。別の態様において、個々に分離されたα−アノマー及び／又はβ−アノマ
ーのアノマー純度は９５％よりも高い。別の態様において、個々に分離されたα
−アノマー及び／又はβ−アノマーのアノマー純度は９８％よりも高い。
【００８５】 別の態様において、式２Ａ又は２Ｂにより表されるアノマーの混合物の各々の
アノマーを置き換えて、式２Ｄ及び２Ｅにより表されるアノマー混合物とするこ
と以外は、スキーム２の手順が実施される。
アノマーを置き換えて、式２Ｄ及び２Ｅにより表されるアノマー混合物とするこ
と以外は、スキーム２の手順が実施される。
【化１９】
【００８６】 前記態様に従って、式２Ｅにより表されるα−アノマーが加水分解される。こ
の結果、式２Ｄにより表される加水分解を受けないβ−アノマーから、式２Ｆに
より表される加水分解されたα−アノマーが分離される。
の結果、式２Ｄにより表される加水分解を受けないβ−アノマーから、式２Ｆに
より表される加水分解されたα−アノマーが分離される。
【化２０】
【００８７】 別の態様において、式２Ａ及び２Ｂにより表されるアノマー混合物を式２Ｇに
より表される四つの立体異性体の混合物と置き換えること以外は、スキーム２の
手順が実施される。
より表される四つの立体異性体の混合物と置き換えること以外は、スキーム２の
手順が実施される。
【化２１】
【００８８】 前記態様に従って、Ｄエナンチオマー及びＥエナンチオマーの両方を含むα−
アノマーが加水分解される。この結果、Ｄエナンチオマー及びＥエナンチオマー
の両方を含む加水分解を受けないβ−アノマーから、Ｄエナンチオマー及びＥエ
ナンチオマーの両方を含む加水分解されたα−アノマーが分離される。
アノマーが加水分解される。この結果、Ｄエナンチオマー及びＥエナンチオマー
の両方を含む加水分解を受けないβ−アノマーから、Ｄエナンチオマー及びＥエ
ナンチオマーの両方を含む加水分解されたα−アノマーが分離される。
【００８９】 加水分解、精製及び酸化的脱カルボキシル化の後、得られたシオキソラン環は
プリン又はピリミシン塩基、或いはその類似体又は誘導体に結合され得る。ジオ
キソラン環に対してプリン又はピリミシン塩基、或いはその類似体又は誘導体が
どのように結合するかに関する当業者に既知の幾つかの例がある。例えば、マン
サー（Ｍａｎｓｏｕｒ）等によるＰＣＴ公報Ｎｏ．ＷＯ／９７／２１７０６には
、ジオキソラン環に対してプリン又はピリミシン塩基、或いはその類似体又は誘
導体を立体選択的に結合させる一つの方法が記載されている。ＷＯ／９７／２１
７０６は、参照として充分に本文中に取り込まれている。
プリン又はピリミシン塩基、或いはその類似体又は誘導体に結合され得る。ジオ
キソラン環に対してプリン又はピリミシン塩基、或いはその類似体又は誘導体が
どのように結合するかに関する当業者に既知の幾つかの例がある。例えば、マン
サー（Ｍａｎｓｏｕｒ）等によるＰＣＴ公報Ｎｏ．ＷＯ／９７／２１７０６には
、ジオキソラン環に対してプリン又はピリミシン塩基、或いはその類似体又は誘
導体を立体選択的に結合させる一つの方法が記載されている。ＷＯ／９７／２１
７０６は、参照として充分に本文中に取り込まれている。
【００９０】 ＷＯ／９７／２１７０６に開示された方法に従うと、出発物質はアシル化され
たジオキソラン環である。ＷＯ／９７／２１７０６に開示された手順の出発物質
は、上記において議論されたスキーム２の生成物の酸化的脱カルボキシル化によ
り得ることができる。酸化的脱カルボキシル化は、Ｃ４炭素原子の立体化学を壊
し、他方、Ｃ２炭素原子の立体化学を保持する。
たジオキソラン環である。ＷＯ／９７／２１７０６に開示された手順の出発物質
は、上記において議論されたスキーム２の生成物の酸化的脱カルボキシル化によ
り得ることができる。酸化的脱カルボキシル化は、Ｃ４炭素原子の立体化学を壊
し、他方、Ｃ２炭素原子の立体化学を保持する。
【００９１】 記載の如く、酸化的脱カルボキシル化段階は、スキーム２の加水分解段階の後
に起こる。Ｃ２炭素原子に関して望ましい立体化学を有する化合物が選択される
。処理される化合物の各ｍｍｏｌは、約２．５ｍＬないし約４．０ｍＬのアセト
ニトリルに溶解される。別の態様において、約３．０ｍＬないし約３．５ｍのア
セトニトリルが、化合物の各ｍｍｏｌに添加された。また別の態様において、約
３．３ｍＬないし約３．４ｍＬのアセトニトリルが、化合物の各ｍｍｏｌに添加
された。
に起こる。Ｃ２炭素原子に関して望ましい立体化学を有する化合物が選択される
。処理される化合物の各ｍｍｏｌは、約２．５ｍＬないし約４．０ｍＬのアセト
ニトリルに溶解される。別の態様において、約３．０ｍＬないし約３．５ｍのア
セトニトリルが、化合物の各ｍｍｏｌに添加された。また別の態様において、約
３．３ｍＬないし約３．４ｍＬのアセトニトリルが、化合物の各ｍｍｏｌに添加
された。
【００９２】 化合物の各ｍｍｏｌに、約０．０８ｍＬないし約０．１２ｍＬのピリジンが添
加された。別の態様において、約０．０９ｍＬないし約０．１１ｍＬのアセトニ
トリルが、化合物の各ｍｍｏｌに添加された。また別の態様において、約０．１
ｍＬのピリジンが、化合物の各ｍｍｏｌに添加された。
加された。別の態様において、約０．０９ｍＬないし約０．１１ｍＬのアセトニ
トリルが、化合物の各ｍｍｏｌに添加された。また別の態様において、約０．１
ｍＬのピリジンが、化合物の各ｍｍｏｌに添加された。
【００９３】 前記混合物に、１．１ｍｍｏｌないし１．５ｍｍｏｌのＰｂ（ＯＡｃ）4 が、
化合物の各ｍｍｏｌに添加された。別の態様において、約１．２ｍｍｏｌないし
約１．４ｍｍｏｌのＰｂ（ＯＡｃ）4 が、化合物の各ｍｍｏｌに添加される。ま
た別の態様において、約１．３ｍｍｏｌのＰｂ（ＯＡｃ）4 が、化合物の各ｍｍ
ｏｌに添加される。
化合物の各ｍｍｏｌに添加された。別の態様において、約１．２ｍｍｏｌないし
約１．４ｍｍｏｌのＰｂ（ＯＡｃ）4 が、化合物の各ｍｍｏｌに添加される。ま
た別の態様において、約１．３ｍｍｏｌのＰｂ（ＯＡｃ）4 が、化合物の各ｍｍ
ｏｌに添加される。
【００９４】 その後、前記混合物を室温で１８時間撹伴した。次いで、前記混合物をＮａＨ
ＣＯ3 の飽和溶液に注いだ。約２．０ｍＬないし約３．０ｍＬのＮａＨＣＯ3 溶
液が、化合物の各ｍｍｏｌに対して使用された。一つの態様において、約２．５
ｍＬないし約２．７ｍＬ、より好ましくは約２．６ｍＬのＮａＨＣＯ3 溶液が、
化合物の各ｍｍｏｌに対して使用された。前記溶液を次いで、更に３０分間撹伴
した。酢酸エチルで４回抽出することにより、水相から有機相が分離された。抽
出物は混合され、無水ＮａＳＯ4 上で乾燥され、そして真空下で蒸発された。所
望により、粗生成物は、ヘキサン中の０〜１５％酢酸エチル勾配を使用するシリ
カゲル上のクロマトクラフィーにより、更に精製され得る。
ＣＯ3 の飽和溶液に注いだ。約２．０ｍＬないし約３．０ｍＬのＮａＨＣＯ3 溶
液が、化合物の各ｍｍｏｌに対して使用された。一つの態様において、約２．５
ｍＬないし約２．７ｍＬ、より好ましくは約２．６ｍＬのＮａＨＣＯ3 溶液が、
化合物の各ｍｍｏｌに対して使用された。前記溶液を次いで、更に３０分間撹伴
した。酢酸エチルで４回抽出することにより、水相から有機相が分離された。抽
出物は混合され、無水ＮａＳＯ4 上で乾燥され、そして真空下で蒸発された。所
望により、粗生成物は、ヘキサン中の０〜１５％酢酸エチル勾配を使用するシリ
カゲル上のクロマトクラフィーにより、更に精製され得る。
【００９５】 本発明の一つの態様において、酸化的脱炭酸工程はグリコシル化に続く。該グ
リコシル化は以下のスキーム３により表される。
リコシル化は以下のスキーム３により表される。
【化２２】 該グリコシル化手順における第一工程は、Ｃ２炭素原子で所望の立体特異性を
有する化合物を得ることである。ある態様によると、式３Ａで表される化合物に
より表されるように、Ｃ２炭素原子でＳの立体化学を有する化合物が好ましい。
その結果、生成物３Ｃにおいてβ−Ｌアノマーの比率がより高くなる。他の態様
によると、Ｃ２炭素原子でＲの立体化学を有する化合物が好ましい。その結果は
、最終生成物においてβ−Ｄアノマーのより高い比率を有する生成物である。
有する化合物を得ることである。ある態様によると、式３Ａで表される化合物に
より表されるように、Ｃ２炭素原子でＳの立体化学を有する化合物が好ましい。
その結果、生成物３Ｃにおいてβ−Ｌアノマーの比率がより高くなる。他の態様
によると、Ｃ２炭素原子でＲの立体化学を有する化合物が好ましい。その結果は
、最終生成物においてβ−Ｄアノマーのより高い比率を有する生成物である。
【００９６】 式３Ａで表される化合物はヨードシランと反応させて式３Ｂで表される化合物
を生成する。ある態様において、該ヨードシランはヨードトリメチルシランであ
る。 他の態様において、該ヨードシランはジヨードシランである。反応について重
要なのは、それが低い温度で起こることである。ある態様によると、該温度は、
シリレート化ピリミジン又はプリン塩基、或いはその類似体又は誘導体でのグリ
コシル化以前には、好ましくは０℃ないし−７８℃である。
を生成する。ある態様において、該ヨードシランはヨードトリメチルシランであ
る。 他の態様において、該ヨードシランはジヨードシランである。反応について重
要なのは、それが低い温度で起こることである。ある態様によると、該温度は、
シリレート化ピリミジン又はプリン塩基、或いはその類似体又は誘導体でのグリ
コシル化以前には、好ましくは０℃ないし−７８℃である。
【００９７】 式３Ｂにより表されるヨード中間体はその後ジクロロメタン中に溶解され、そ
して０℃と−７８℃との間まで冷却される。プリン又はピリミジン塩基、或いは
その類似体又は誘導体がその後選択される。ある態様によると、プリン又はピリ
ミジン塩基、或いはその類似体又は誘導体は、以下の群：
して０℃と−７８℃との間まで冷却される。プリン又はピリミジン塩基、或いは
その類似体又は誘導体がその後選択される。ある態様によると、プリン又はピリ
ミジン塩基、或いはその類似体又は誘導体は、以下の群：
【化２３】 〔式中、 Ｒ2 、Ｒ9 及びＲ11は各々独立して水素原子、炭素原子数１ないし６のアルキ
ル基、炭素原子数１ないし６のアシル基及びＲ8 Ｃ（Ｏ）基（式中、Ｒ8 は、水
素原子又は炭素原子数１ないし６のアルキル基を表す）を表わし、 Ｒ3 、Ｒ4 及びＲ10は各々独立して水素原子、炭素原子数１ないし６のアルキ
ル基、臭素原子、塩素原子、弗素原子、沃素原子及びＣＦ3 基からなる群から選
択され、そして Ｒ5 、Ｒ6 及びＲ7 はおのおの独立して水素原子、臭素原子、塩素原子、弗素
原子、沃素原子、アミノ基、ヒドロキシル基及び炭素原子数３ないし６のシクロ
アルキルアミノ基からなる群から選択される〕から選択される。
ル基、炭素原子数１ないし６のアシル基及びＲ8 Ｃ（Ｏ）基（式中、Ｒ8 は、水
素原子又は炭素原子数１ないし６のアルキル基を表す）を表わし、 Ｒ3 、Ｒ4 及びＲ10は各々独立して水素原子、炭素原子数１ないし６のアルキ
ル基、臭素原子、塩素原子、弗素原子、沃素原子及びＣＦ3 基からなる群から選
択され、そして Ｒ5 、Ｒ6 及びＲ7 はおのおの独立して水素原子、臭素原子、塩素原子、弗素
原子、沃素原子、アミノ基、ヒドロキシル基及び炭素原子数３ないし６のシクロ
アルキルアミノ基からなる群から選択される〕から選択される。
【００９８】 ある態様によると、プリン若しくはピリミジン塩基又は誘導体は、次式：
【化２４】 からなる群より選択される。この態様において、Ｒ2 は、水素原子、炭素原子数
１ないし６のアルキル基、炭素原子数１ないし６のアシル基及びＲ8 Ｃ（Ｏ）基
からなる群より選択され、ここでＲ8 は、水素原子又は炭素原子数１ないし６の
アルキル基を表す。加えて、Ｒ3 及びＲ4 は、各々独立して、水素原子、炭素原
子数１ないし６のアルキル基、臭素原子、塩素原子、弗素原子、沃素原子及びＣ
Ｆ3 基からなる群より選択され、そしてＲ5 、Ｒ6 及びＲ7 は、各々独立して、
水素原子、臭素原子、塩素原子、弗素原子、沃素原子、アミノ基、ヒドロキシル
基及び炭素原子数３ないし６のシクロアルキルアミノ基からなる群より選択され
る。
１ないし６のアルキル基、炭素原子数１ないし６のアシル基及びＲ8 Ｃ（Ｏ）基
からなる群より選択され、ここでＲ8 は、水素原子又は炭素原子数１ないし６の
アルキル基を表す。加えて、Ｒ3 及びＲ4 は、各々独立して、水素原子、炭素原
子数１ないし６のアルキル基、臭素原子、塩素原子、弗素原子、沃素原子及びＣ
Ｆ3 基からなる群より選択され、そしてＲ5 、Ｒ6 及びＲ7 は、各々独立して、
水素原子、臭素原子、塩素原子、弗素原子、沃素原子、アミノ基、ヒドロキシル
基及び炭素原子数３ないし６のシクロアルキルアミノ基からなる群より選択され
る。
【００９９】 他の態様において、プリン又はピリミジン塩基、或いはその類似体又は誘導体
は、次式：
は、次式：
【化２５】 からなる群より選択される。この態様において、Ｒ9 及びＲ11は、各々独立して
、水素原子、炭素原子数１ないし６のアルキル基、炭素原子数１ないし６のアシ
ル基及びＲ8 Ｃ（Ｏ）基からなる群より選択される。加えて、Ｒ10は、水素原子
、炭素原子数１ないし６のアルキル基、臭素原子、塩素原子、弗素原子、沃素原
子及びＣＦ3 基からなる群より選択される。
、水素原子、炭素原子数１ないし６のアルキル基、炭素原子数１ないし６のアシ
ル基及びＲ8 Ｃ（Ｏ）基からなる群より選択される。加えて、Ｒ10は、水素原子
、炭素原子数１ないし６のアルキル基、臭素原子、塩素原子、弗素原子、沃素原
子及びＣＦ3 基からなる群より選択される。
【０１００】 プリン又はピリミジン塩基、或いはその類似体又は誘導体は、シレート化剤（
sylating agent）及び硫酸アンモニウムによりペルシレート化（persylate ）さ
れ、続いてＨＭＤＳの蒸発が行われて、本明細書中でペルシレート化塩基として
参照されまたスキーム３においてＰとして記される、ペルシレート化プリン又は
ピリミジン塩基、或いはその類似体又は誘導体を形成する。ある態様によると、
該シレート化剤は、１，１，１，３，３，３−ヘキサメチルジシラザン、トリメ
チルシリルトリフレート、第三ブチルジメチルシリルトリフレート又はトリメチ
ルシリルクロリドからなる群より選択される。ある態様において、該シレート化
剤は、１，１，１，３，３，３−ヘキサメチルジシラザンである。
sylating agent）及び硫酸アンモニウムによりペルシレート化（persylate ）さ
れ、続いてＨＭＤＳの蒸発が行われて、本明細書中でペルシレート化塩基として
参照されまたスキーム３においてＰとして記される、ペルシレート化プリン又は
ピリミジン塩基、或いはその類似体又は誘導体を形成する。ある態様によると、
該シレート化剤は、１，１，１，３，３，３−ヘキサメチルジシラザン、トリメ
チルシリルトリフレート、第三ブチルジメチルシリルトリフレート又はトリメチ
ルシリルクロリドからなる群より選択される。ある態様において、該シレート化
剤は、１，１，１，３，３，３−ヘキサメチルジシラザンである。
【０１０１】 ペルシレート化塩基Ｐはジクロロメタン３０ｍＬ中に溶解され、そして式３Ｂ
により表されるヨード中間体に添加される。反応混合物は０ないし７８℃で１．
５時間維持され、その後炭酸水素ナトリウム水溶液に注がれ、そしてジクロロメ
タン（２×２５ｍＬ）で抽出される。有機相が硫酸ナトリウム上で乾燥されて、
式３Ｃで表される化合物を得る。スキーム３において使用されるように、Ｂは、
上記の工程においてペルシレート化されてＰを形成したプリン又はピリミジン塩
基、或いはその類似体又は誘導体の部分を表す。式３Ｃで表される化合物は濾過
により除去され、そして溶媒は減圧下で蒸発させられて粗混合物を生成する。式
Ｃ３により表される生成物は主に、Ｃ４炭素原子での４Ｓ配置を８０％のアノマ
ー純度で有する。出発物質が式３Ａにより表される化合物であるとき、生成物は
主に、８０％のアノマー純度を有するβ−Ｌ鏡像異性体を形成する。
により表されるヨード中間体に添加される。反応混合物は０ないし７８℃で１．
５時間維持され、その後炭酸水素ナトリウム水溶液に注がれ、そしてジクロロメ
タン（２×２５ｍＬ）で抽出される。有機相が硫酸ナトリウム上で乾燥されて、
式３Ｃで表される化合物を得る。スキーム３において使用されるように、Ｂは、
上記の工程においてペルシレート化されてＰを形成したプリン又はピリミジン塩
基、或いはその類似体又は誘導体の部分を表す。式３Ｃで表される化合物は濾過
により除去され、そして溶媒は減圧下で蒸発させられて粗混合物を生成する。式
Ｃ３により表される生成物は主に、Ｃ４炭素原子での４Ｓ配置を８０％のアノマ
ー純度で有する。出発物質が式３Ａにより表される化合物であるとき、生成物は
主に、８０％のアノマー純度を有するβ−Ｌ鏡像異性体を形成する。
【０１０２】 次に、式Ｃ３で表される化合物が脱保護されて、式３Ｄで表される化合物を生
成する。これは、式３Ｃにより表される化合物をエタノール中に溶解し、そして
その後シクロヘキサン及び酸化パラジウムを添加することによって達成され得る
。脱保護工程はまた、当業者に良く知られている他の方法によって為されること
もできる。該反応混合物は７時間還流される。それはその後冷却され、そして濾
過されて固形分を除去する。溶媒は、濾液から減圧蒸留により除去される。式３
Ｄにより表される生成物は、シリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー（
酢酸エチル中での５％ＭＥＯＨ）により精製される。脱保護工程はまた、当業者
に良く知られている他の方法によって為されることもできる。
成する。これは、式３Ｃにより表される化合物をエタノール中に溶解し、そして
その後シクロヘキサン及び酸化パラジウムを添加することによって達成され得る
。脱保護工程はまた、当業者に良く知られている他の方法によって為されること
もできる。該反応混合物は７時間還流される。それはその後冷却され、そして濾
過されて固形分を除去する。溶媒は、濾液から減圧蒸留により除去される。式３
Ｄにより表される生成物は、シリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー（
酢酸エチル中での５％ＭＥＯＨ）により精製される。脱保護工程はまた、当業者
に良く知られている他の方法によって為されることもできる。
【０１０３】 他の態様において、スキーム１で表される化合物は、スキーム４において以下
に示されるもう一つの方法によって生成され得る。
に示されるもう一つの方法によって生成され得る。
【化２６】 約１．０〜１．４当量の間の硫酸が、０〜５℃の間の温度で撹拌しながら、大
過剰の水に一部づつ添加される。例であって限定するものではないが、Ｄ−セリ
ン９．０６ｍｏｌが反応物の１当量を表す場合、約９．５〜１３．３ｍｏｌの間
の硫酸が水７．３Ｌに添加される。他の態様において、約１．１〜１．３当量の
間の硫酸が過剰の水に添加される。更なる態様において、硫酸１．２当量が過剰
の水に添加される。
過剰の水に一部づつ添加される。例であって限定するものではないが、Ｄ−セリ
ン９．０６ｍｏｌが反応物の１当量を表す場合、約９．５〜１３．３ｍｏｌの間
の硫酸が水７．３Ｌに添加される。他の態様において、約１．１〜１．３当量の
間の硫酸が過剰の水に添加される。更なる態様において、硫酸１．２当量が過剰
の水に添加される。
【０１０４】 Ｄ−セリン約１当量が、激しい撹拌下で一部づつ添加される。その後、約１．
０ないし１．４当量の亜硝酸ナトリウム水溶液が滴下添加される。温度は、添加
時間（約７時間）の間、０〜５℃の間に保たれる。反応容器は室温で一晩撹拌さ
れる。水が減圧により除去され、そして残渣（Ｄ−グリセリン酸）がトルエン（
３×１Ｌ）と共に共蒸発（coevaporate ）させられる。残渣はその後アルコール
溶媒約６Ｌと共に約３０分間撹拌される。ある態様によると、該アルコールは式
Ｒ1 ＯＨ（式中、Ｒ1 は炭素原子数１ないし４のアルキル基を表す）で表される
。他の態様によると、該アルコールはメタノール又はエタノールである。生じた
固形分は濾過により除去される。透明溶液が室温で３０〜４０時間撹拌され、ア
ルコールが減圧により除去されて黄色い粘稠のシロップの形態でＤ−グリセレー
トを生じる。該Ｄ−グリセレートはその後、約０．９〜１．１当量の間のジアル
キルアセタールと約８５〜９５℃の温度で反応させられる。適したジアルキルア
セタールの例は、ベンゾイルオキシアセトアルデヒドジアルキルアセタール及び
ベンジルオキシアセトアルデヒドジアルキルアセタールを包含する。ジアルキル
アセタールについて適したアルキル基の例は、メチル基及びエチル基である。
０ないし１．４当量の亜硝酸ナトリウム水溶液が滴下添加される。温度は、添加
時間（約７時間）の間、０〜５℃の間に保たれる。反応容器は室温で一晩撹拌さ
れる。水が減圧により除去され、そして残渣（Ｄ−グリセリン酸）がトルエン（
３×１Ｌ）と共に共蒸発（coevaporate ）させられる。残渣はその後アルコール
溶媒約６Ｌと共に約３０分間撹拌される。ある態様によると、該アルコールは式
Ｒ1 ＯＨ（式中、Ｒ1 は炭素原子数１ないし４のアルキル基を表す）で表される
。他の態様によると、該アルコールはメタノール又はエタノールである。生じた
固形分は濾過により除去される。透明溶液が室温で３０〜４０時間撹拌され、ア
ルコールが減圧により除去されて黄色い粘稠のシロップの形態でＤ−グリセレー
トを生じる。該Ｄ−グリセレートはその後、約０．９〜１．１当量の間のジアル
キルアセタールと約８５〜９５℃の温度で反応させられる。適したジアルキルア
セタールの例は、ベンゾイルオキシアセトアルデヒドジアルキルアセタール及び
ベンジルオキシアセトアルデヒドジアルキルアセタールを包含する。ジアルキル
アセタールについて適したアルキル基の例は、メチル基及びエチル基である。
【０１０５】 その後、約１重量％ないし約１０重量％のＰＴＳＡが添加される。他の態様に
よると、約５重量％のＰＴＳＡが添加される。他の態様においては、固形ＰＴＳ
Ａ約０．０２当量が添加される。反応混合物は減圧下、８５〜９５℃の間の温度
で２〜３時間保たれる。該混合物はその後室温に冷却され、酢酸エチル（２５０
ｍＬ）で希釈され、そして撹拌下で飽和炭酸水素ナトリウム溶液（２５０ｍＬ）
に注がれる。有機相が分離され、そして水相が濃縮され、５〜１０％の酢酸エチ
ル／ヘキサンで溶出するシリカゲルカラムで精製されて、淡黄色油（約５９％）
として所望のジオキソランが２：１又はそれより高いβ／α比で生じる。
よると、約５重量％のＰＴＳＡが添加される。他の態様においては、固形ＰＴＳ
Ａ約０．０２当量が添加される。反応混合物は減圧下、８５〜９５℃の間の温度
で２〜３時間保たれる。該混合物はその後室温に冷却され、酢酸エチル（２５０
ｍＬ）で希釈され、そして撹拌下で飽和炭酸水素ナトリウム溶液（２５０ｍＬ）
に注がれる。有機相が分離され、そして水相が濃縮され、５〜１０％の酢酸エチ
ル／ヘキサンで溶出するシリカゲルカラムで精製されて、淡黄色油（約５９％）
として所望のジオキソランが２：１又はそれより高いβ／α比で生じる。
【０１０６】 さもなくば、スキーム４の工程３の反応物は、スキーム１の対応する反応物に
より置換されることができる。例えば、式４Ｃにより表されるＤ−グリセレート
は、ある態様による式１Ｂにより表される１，３ジオキソラン−４−（４Ｒ）カ
ルボン酸−２，２−ジメチルアルキルエステルで代替される。更に又はさもなく
ば、式４Ｄにより表されるジアルキルアセタールは、式１Ａにより表されオキシ
アルデヒドで代替される。これらの置換は、スキーム４の第三工程について上記
で実質的に開示された反応条件の変更を必要としない。
より置換されることができる。例えば、式４Ｃにより表されるＤ−グリセレート
は、ある態様による式１Ｂにより表される１，３ジオキソラン−４−（４Ｒ）カ
ルボン酸−２，２−ジメチルアルキルエステルで代替される。更に又はさもなく
ば、式４Ｄにより表されるジアルキルアセタールは、式１Ａにより表されオキシ
アルデヒドで代替される。これらの置換は、スキーム４の第三工程について上記
で実質的に開示された反応条件の変更を必要としない。
【０１０７】 本発明の更なる態様において、スキーム４の出発物質は、ジオキソラン環のＣ
４炭素原子でＳ−配置を有する最終生成物を生成するＬ−セリンである。さもな
くば、工程３のＬ−グリセレートは１，３ジオキソラン−４−（４Ｓ）カルボン
酸−２，２−ジメチルアルキルエステルで代替されて、生じるジオキソラン環の
Ｃ４炭素原子でＳ−配置を主に有する最終生成物を生成することができる。
４炭素原子でＳ−配置を有する最終生成物を生成するＬ−セリンである。さもな
くば、工程３のＬ−グリセレートは１，３ジオキソラン−４−（４Ｓ）カルボン
酸−２，２−ジメチルアルキルエステルで代替されて、生じるジオキソラン環の
Ｃ４炭素原子でＳ−配置を主に有する最終生成物を生成することができる。
【０１０８】実施例１．ジオキソランメチルエステルの酵素触媒加水分解分割 （２−（Ｓ）−ベンジルオキシメチル）−４−カルボン酸−１，３−ジオキソ
ランメチルエステル）の２：１（β：α）アノマー混合物（１３６．５ｍｇ、０
．５４１ｍｍｏｌ）を反応容器に量り入れ、そしてＢＥＳ緩衝剤（５ｍＭ溶液６
２６３ｍＬ、ｐＨ７．２）を添加した。物質は不溶な小滴として残存した。α−
キモトリプシン（５ｍｇ／ｍＬ・ＢＥＳバッファ５００μＬ、ｐＨ７．２溶液、
４−ニトロフェニルアセテートアッセイによる０．０１９単位）を添加して反応
を開始し、そして加水分解の速度及び程度を、０．０９８１ｍｍｏｌ・ＮａＯＨ
での自動滴定によりｐＨを７で維持したｐＨ−スタットにより観察した。反応を
、循環についてのシーの等式（Chen. C.S.; Fujimoto, Y.; Girdaukas, G.; Sih
, C.J., J. Am. Chem. Soc. 1982, 104, 7294-99）により決定される高いアノマ
ー純度のために４３％の転換で、残存する出発物質エステルを酢酸エチル（３×
２０ｍＬ）で抽出することにより停止した。水相をｐＨ２に調節し、そして生成
酸を酢酸エチル（３×２０ｍＬ）で抽出した。 双方の抽出物をＭｇＳＯ4 で乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮した。この
方法により、（２−（Ｓ）−ベンジルオキシメチル）−４−（Ｓ）−カルボン酸
−１，３−ジオキソランメチルエステル）を得た。
ランメチルエステル）の２：１（β：α）アノマー混合物（１３６．５ｍｇ、０
．５４１ｍｍｏｌ）を反応容器に量り入れ、そしてＢＥＳ緩衝剤（５ｍＭ溶液６
２６３ｍＬ、ｐＨ７．２）を添加した。物質は不溶な小滴として残存した。α−
キモトリプシン（５ｍｇ／ｍＬ・ＢＥＳバッファ５００μＬ、ｐＨ７．２溶液、
４−ニトロフェニルアセテートアッセイによる０．０１９単位）を添加して反応
を開始し、そして加水分解の速度及び程度を、０．０９８１ｍｍｏｌ・ＮａＯＨ
での自動滴定によりｐＨを７で維持したｐＨ−スタットにより観察した。反応を
、循環についてのシーの等式（Chen. C.S.; Fujimoto, Y.; Girdaukas, G.; Sih
, C.J., J. Am. Chem. Soc. 1982, 104, 7294-99）により決定される高いアノマ
ー純度のために４３％の転換で、残存する出発物質エステルを酢酸エチル（３×
２０ｍＬ）で抽出することにより停止した。水相をｐＨ２に調節し、そして生成
酸を酢酸エチル（３×２０ｍＬ）で抽出した。 双方の抽出物をＭｇＳＯ4 で乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮した。この
方法により、（２−（Ｓ）−ベンジルオキシメチル）−４−（Ｓ）−カルボン酸
−１，３−ジオキソランメチルエステル）を得た。
【０１０９】実施例２．ＮＭＲによるβ−アノマーの純度 分析を、バリアン・ジェミニ・２００ＭＨｚ・ＮＭＲ分光計でＣＤＣｌ3 中で
行った。α−エステルはδ５．３３（3 Ｊ＝４．６Ｈｚ）で三重線を表し、また
β−エステルはδ５．２３（3 Ｊ＝４．６Ｈｚ）でアップフィールドに三重線を
表す。α−酸はδ５．３３（3 Ｊ＝３．６Ｈｚ）で三重線を表し、一方、β−酸
はδ５．１９でアップフィールドに広幅一重線を表す。生成中には、物質又は生
成酸のエピマー化は全く観察されなかった。ＮＭＲ分析により、β−アノマーの
純度は、約９５％の高いアノマー純度又はそれ以上を有することを決定した。
行った。α−エステルはδ５．３３（3 Ｊ＝４．６Ｈｚ）で三重線を表し、また
β−エステルはδ５．２３（3 Ｊ＝４．６Ｈｚ）でアップフィールドに三重線を
表す。α−酸はδ５．３３（3 Ｊ＝３．６Ｈｚ）で三重線を表し、一方、β−酸
はδ５．１９でアップフィールドに広幅一重線を表す。生成中には、物質又は生
成酸のエピマー化は全く観察されなかった。ＮＭＲ分析により、β−アノマーの
純度は、約９５％の高いアノマー純度又はそれ以上を有することを決定した。
【０１１０】実施例３：α−アノマーの純度 生成酸を、ＭｇＳＯ4 で乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮した後に、実施
例１から得た。純度についてＮＭＲにより分析した。α−アノマーを高いアノマ
ー純度で単離した。
例１から得た。純度についてＮＭＲにより分析した。α−アノマーを高いアノマ
ー純度で単離した。
【０１１１】実施例４：アスペルギルス オリザエからの蛋白分解酵素によるβ−アノマーの 酵素分割 実施例１〜２の手順に従い、酵素としてアスペルギルス オリザエからの蛋白
分解酵素を使用し、（２−（Ｓ）−ベンゾイルオキシメチル）−４−カルボン酸
−１，３−ジオキソランメチルエステル）の２：１（β：α）アノマー混合物を
分離した。結果は、高いアノマー純度を有するβ−アノマーであった。
分解酵素を使用し、（２−（Ｓ）−ベンゾイルオキシメチル）−４−カルボン酸
−１，３−ジオキソランメチルエステル）の２：１（β：α）アノマー混合物を
分離した。結果は、高いアノマー純度を有するβ−アノマーであった。
【０１１２】実施例５：アスペルギルス・オリザエからの蛋白分解酵素によるα−アノマーの 酵素分割 生成酸を、ＭｇＳＯ4 で乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮した後に、実施
例４から得た。α−アノマーを高いアノマー純度で単離した。
例４から得た。α−アノマーを高いアノマー純度で単離した。
【０１１３】実施例６：バシラス リッケンフォーミスからの蛋白分解酵素によるβ−アノマ ーの酵素分割 実施例１〜２の手順に従い、酵素としてバシラス リッケンフォーミスからの
蛋白分解酵素を使用し、（２−（Ｓ）−ベンゾイルオキシメチル）−４−カルボ
ン酸−１，３−ジオキソランメチルエステル）の２：１（β：α）アノマー混合
物を分離した。結果は、高いアノマー純度を有するβ−アノマーであった。
蛋白分解酵素を使用し、（２−（Ｓ）−ベンゾイルオキシメチル）−４−カルボ
ン酸−１，３−ジオキソランメチルエステル）の２：１（β：α）アノマー混合
物を分離した。結果は、高いアノマー純度を有するβ−アノマーであった。
【０１１４】実施例７：バシラス リッケンフォーミスからの蛋白分解酵素によるα−アノマ ーの酵素分割 生成酸を、ＭｇＳＯ4 で乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮した後に、実施
例６から得た。α−アノマーを高いアノマー純度で単離した。
例６から得た。α−アノマーを高いアノマー純度で単離した。
【０１１５】実施例８：バシラス リッケンフォーミスからのサブチリシンによるβ−アノマ ーの酵素分割 実施例１〜２の手順に従い、酵素としてバシラス リッケンフォーミスからの
サブチリシンを使用し、（２−（Ｓ）−ベンゾイルオキシメチル）−４−カルボ
ン酸−１，３−ジオキソランメチルエステル）の２：１（β：α）アノマー混合
物を分離した。結果は、高いアノマー純度を有するβ−アノマーであった。
サブチリシンを使用し、（２−（Ｓ）−ベンゾイルオキシメチル）−４−カルボ
ン酸−１，３−ジオキソランメチルエステル）の２：１（β：α）アノマー混合
物を分離した。結果は、高いアノマー純度を有するβ−アノマーであった。
【０１１６】実施例９：バシラス リッケンフォーミスからのサブチリシンによるα−アノマ ーの酵素分割 生成酸を、ＭｇＳＯ4 で乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮した後に、実施
例８から得た。α−アノマーを高いアノマー純度で単離した。
例８から得た。α−アノマーを高いアノマー純度で単離した。
【０１１７】実施例１０：ストレプトマイセス グリセウスからの蛋白分解酵素によるβ−ア ノマーの酵素分割 実施例１〜２の手順に従い、酵素としてストレプトマイセス グリセウスから
の蛋白分解酵素を使用し、（２−（Ｓ）−ベンゾイルオキシメチル）−４−カル
ボン酸−１，３−ジオキソランメチルエステル）の２：１（β：α）アノマー混
合物を分離した。結果は、高いアノマー純度を有するβ−アノマーであった。
の蛋白分解酵素を使用し、（２−（Ｓ）−ベンゾイルオキシメチル）−４−カル
ボン酸−１，３−ジオキソランメチルエステル）の２：１（β：α）アノマー混
合物を分離した。結果は、高いアノマー純度を有するβ−アノマーであった。
【０１１８】実施例１１：ストレプトマイセス グリセウスからの蛋白分解酵素によるα−ア ノマーの酵素分割 生成酸を、ＭｇＳＯ4 で乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮した後に、実施
例１０から得た。α−アノマーを高いアノマー純度で単離した。
例１０から得た。α−アノマーを高いアノマー純度で単離した。
【０１１９】実施例１２：アスパラギルス メレウスからのアシラーゼによるβ−アノマーの 酵素分割 実施例１〜２の手順に従い、酵素としてアスパラギルス メレウスからのアシ
ラーゼを使用し、（２−（Ｓ）−ベンゾイルオキシメチル）−４−カルボン酸−
１，３−ジオキソランメチルエステル）の２：１（β：α）アノマー混合物を分
離した。結果は、高いアノマー純度を有するβ−アノマーであった。
ラーゼを使用し、（２−（Ｓ）−ベンゾイルオキシメチル）−４−カルボン酸−
１，３−ジオキソランメチルエステル）の２：１（β：α）アノマー混合物を分
離した。結果は、高いアノマー純度を有するβ−アノマーであった。
【０１２０】実施例１３：アスパラギルス メレウス(Aspergillus melleus) からのアシラー ゼによるα−アノマーの酵素分割 生成酸は実施例１２から、それがＭｇＳＯ4 で乾燥され、濾過され、そして真
空下で濃縮された後に得られる。α−アノマーは高アノマー純度で単離される。
空下で濃縮された後に得られる。α−アノマーは高アノマー純度で単離される。
【０１２１】実施例１４：バシラス サブチルス(Bacillus subtilis) からの蛋白分解酵素に よるβ−アノマーの酵素分割 （２−（Ｓ）−ベンゾイルオキシメチル）−４−カルボン酸−１，３−ジオキ
ソランメチルエステルの２：１（β：α）アノマー混合物を分離するために、酵
素としてバシラス サブチルスからの蛋白分解酵素を使用して、実施例１ないし
２の手順に従った。結果は、高アノマー純度を有するβ−アノマーである。実施例１５：バシラス サブチルスからの蛋白分解酵素によるα−アノマーの酵 素分割 生成酸は実施例１４から、それがＭｇＳＯ4 で乾燥され、濾過され、そして真
空下で濃縮された後に得られる。α−アノマーは高アノマー純度で単離される。
ソランメチルエステルの２：１（β：α）アノマー混合物を分離するために、酵
素としてバシラス サブチルスからの蛋白分解酵素を使用して、実施例１ないし
２の手順に従った。結果は、高アノマー純度を有するβ−アノマーである。実施例１５：バシラス サブチルスからの蛋白分解酵素によるα−アノマーの酵 素分割 生成酸は実施例１４から、それがＭｇＳＯ4 で乾燥され、濾過され、そして真
空下で濃縮された後に得られる。α−アノマーは高アノマー純度で単離される。
【０１２２】実施例１６：加水分解酵素ＥＳＬ−００１−０５によるβ−アノマーの酵素分割 （２−（Ｓ）−ベンゾイルオキシメチル）−４−カルボン酸−１，３−ジオキ
ソランメチルエステルの２：１（β：α）アノマー混合物を分離するために、酵
素として多様性クローン酵素(diversa clonenzyme)＃５を使用して、実施例１な
いし２の手順に従った。結果は、高アノマー純度を有するβ−アノマーである。 実施例１７：加水分解酵素ＥＳＬ−００１−０５によるα−アノマーの酵素分割 生成酸は実施例１６から、それがＭｇＳＯ4 で乾燥され、濾過され、そして真
空下で濃縮された後に得られる。α−アノマーは高アノマー純度で単離される。
ソランメチルエステルの２：１（β：α）アノマー混合物を分離するために、酵
素として多様性クローン酵素(diversa clonenzyme)＃５を使用して、実施例１な
いし２の手順に従った。結果は、高アノマー純度を有するβ−アノマーである。 実施例１７：加水分解酵素ＥＳＬ−００１−０５によるα−アノマーの酵素分割 生成酸は実施例１６から、それがＭｇＳＯ4 で乾燥され、濾過され、そして真
空下で濃縮された後に得られる。α−アノマーは高アノマー純度で単離される。
【０１２３】実施例１８：ストレプトマイセスグリセウス(Streptomyces griseus)からのプロ ナーゼ蛋白分解酵素によるβ−アノマーの酵素分割 （２−（Ｓ）−ベンゾイルオキシメチル）−４−カルボン酸−１，３−ジオキ
ソランメチルエステルの２：１（β：α）アノマー混合物を分離するために、酵
素としてストレプトマイセスからのプロナーゼを使用して、実施例１ないし２の
手順に従った。結果は、高アノマー純度を有するβ−アノマーである。実施例１９：ストレプトマイセスグリセウスからのプロナーゼ蛋白分解酵素によ るα−アノマーの酵素分割 生成酸は実施例１８から、それがＭｇＳＯ4 で乾燥され、濾過され、そして真
空下で濃縮された後に得られる。α−アノマーは高アノマー純度で単離される。
ソランメチルエステルの２：１（β：α）アノマー混合物を分離するために、酵
素としてストレプトマイセスからのプロナーゼを使用して、実施例１ないし２の
手順に従った。結果は、高アノマー純度を有するβ−アノマーである。実施例１９：ストレプトマイセスグリセウスからのプロナーゼ蛋白分解酵素によ るα−アノマーの酵素分割 生成酸は実施例１８から、それがＭｇＳＯ4 で乾燥され、濾過され、そして真
空下で濃縮された後に得られる。α−アノマーは高アノマー純度で単離される。
【０１２４】実施例２０：ライゾパス アライサス(Rhizopus arrhizus) からの脂肪分解酵素 によるβ−アノマーの酵素分割 （２−（Ｓ）−ベンゾイルオキシメチル）−４−カルボン酸−１，３−ジオキ
ソランメチルエステルの２：１（β：α）アノマー混合物を分離するために、酵
素としてライゾパス アライサスからの脂肪分解酵素を使用して、実施例１ない
し２の手順に従った。結果は、高アノマー純度を有するβ−アノマーである。実施例２１：ライゾパス アライサスからの脂肪分解酵素によるα−アノマーの 酵素分割 生成酸は実施例２０から、それがＭｇＳＯ4 で乾燥され、濾過され、そして真
空下で濃縮された後に得られる。α−アノマーは高アノマー純度で単離される。
ソランメチルエステルの２：１（β：α）アノマー混合物を分離するために、酵
素としてライゾパス アライサスからの脂肪分解酵素を使用して、実施例１ない
し２の手順に従った。結果は、高アノマー純度を有するβ−アノマーである。実施例２１：ライゾパス アライサスからの脂肪分解酵素によるα−アノマーの 酵素分割 生成酸は実施例２０から、それがＭｇＳＯ4 で乾燥され、濾過され、そして真
空下で濃縮された後に得られる。α−アノマーは高アノマー純度で単離される。
【０１２５】実施例２２：シュードモナス属タイプＢ種からのリポタンパク質脂肪分解酵素に よるβ−アノマーの酵素分割 （２−（Ｓ）−ベンゾイルオキシメチル）−４−カルボン酸−１，３−ジオキ
ソランメチルエステルの２：１（β：α）アノマー混合物を分離するために、酵
素としてシュードモナス属タイプＢ種からのリポタンパク質脂肪分解酵素を使用
して、実施例１ないし２の手順に従った。結果は、高アノマー純度を有するβ−
アノマーである。実施例２３：シュードモナス属タイプＢ種からのリポタンパク質脂肪分解酵素に よるα−アノマーの酵素分割 生成酸は実施例２２から、それがＭｇＳＯ4 で乾燥され、濾過され、そして真
空下で濃縮された後に得られる。α−アノマーは高アノマー純度で単離される。
ソランメチルエステルの２：１（β：α）アノマー混合物を分離するために、酵
素としてシュードモナス属タイプＢ種からのリポタンパク質脂肪分解酵素を使用
して、実施例１ないし２の手順に従った。結果は、高アノマー純度を有するβ−
アノマーである。実施例２３：シュードモナス属タイプＢ種からのリポタンパク質脂肪分解酵素に よるα−アノマーの酵素分割 生成酸は実施例２２から、それがＭｇＳＯ4 で乾燥され、濾過され、そして真
空下で濃縮された後に得られる。α−アノマーは高アノマー純度で単離される。
【０１２６】実施例２４：細菌性蛋白分解酵素によるβ−アノマーの酵素分割 （２−（Ｓ）−ベンゾイルオキシメチル）−４−カルボン酸−１，３−ジオキ
ソランメチルエステルの２：１（β：α）アノマー混合物を分離するために、酵
素として細菌性蛋白分解酵素を使用して、実施例１ないし２の手順に従った。結
果は、高アノマー純度を有するβ−アノマーである。実施例２５：細菌性蛋白分解酵素によるα−アノマーの酵素分割 生成酸は実施例２４から、それがＭｇＳＯ4 で乾燥され、濾過され、そして真
空下で濃縮された後に得られる。α−アノマーは高アノマー純度で単離される。
ソランメチルエステルの２：１（β：α）アノマー混合物を分離するために、酵
素として細菌性蛋白分解酵素を使用して、実施例１ないし２の手順に従った。結
果は、高アノマー純度を有するβ−アノマーである。実施例２５：細菌性蛋白分解酵素によるα−アノマーの酵素分割 生成酸は実施例２４から、それがＭｇＳＯ4 で乾燥され、濾過され、そして真
空下で濃縮された後に得られる。α−アノマーは高アノマー純度で単離される。
【０１２７】実施例２６：シュードモナス セパシア(Pseudomonas Cepacia) からの脂肪分解 酵素によるβ−アノマーの酵素分割 （２−（Ｓ）−ベンゾイルオキシメチル）−４−カルボン酸−１，３−ジオキ
ソランメチルエステルの２：１（β：α）アノマー混合物を分離するために、酵
素としてシュードモナス セパシアからの脂肪分解酵素を使用して、実施例１な
いし２の手順に従った。結果は、高アノマー純度を有するβ−アノマーである。 実施例２７：シュードモナス セパシアからの脂肪分解酵素によるα−アノマー の酵素分割 生成酸は実施例２６から、それがＭｇＳＯ4 で乾燥され、濾過され、そして真
空下で濃縮された後に得られる。α−アノマーは高アノマー純度で単離される。
ソランメチルエステルの２：１（β：α）アノマー混合物を分離するために、酵
素としてシュードモナス セパシアからの脂肪分解酵素を使用して、実施例１な
いし２の手順に従った。結果は、高アノマー純度を有するβ−アノマーである。 実施例２７：シュードモナス セパシアからの脂肪分解酵素によるα−アノマー の酵素分割 生成酸は実施例２６から、それがＭｇＳＯ4 で乾燥され、濾過され、そして真
空下で濃縮された後に得られる。α−アノマーは高アノマー純度で単離される。
【０１２８】実施例２８：コレステロール エステラーゼによるβ−アノマーの酵素分割 （２−（Ｓ）−ベンゾイルオキシメチル）−４−カルボン酸−１，３−ジオキ
ソランメチルエステルの２：１（β：α）アノマー混合物を分離するために、酵
素としてコレステロール エステラーゼを使用して、実施例１ないし２の手順に
従った。結果は、高アノマー純度を有するβ−アノマーである。実施例２９：コレステロールエステラーゼによるα−アノマーの酵素分割 生成酸は実施例２８から、それがＭｇＳＯ4 で乾燥され、濾過され、そして真
空下で濃縮された後に得られる。α−アノマーは高アノマー純度で単離される。
ソランメチルエステルの２：１（β：α）アノマー混合物を分離するために、酵
素としてコレステロール エステラーゼを使用して、実施例１ないし２の手順に
従った。結果は、高アノマー純度を有するβ−アノマーである。実施例２９：コレステロールエステラーゼによるα−アノマーの酵素分割 生成酸は実施例２８から、それがＭｇＳＯ4 で乾燥され、濾過され、そして真
空下で濃縮された後に得られる。α−アノマーは高アノマー純度で単離される。
【０１２９】実施例３０：加水分解酵素ＥＳＬ−００１−０２によるβ−アノマーの酵素分割 （２−（Ｓ）−ベンジルオキシメチル）−４−カルボン酸−１，３−ジオキソ
ランメチルエステルの２：１（β：α）アノマー混合物を分離するために、酵素
として加水分解酵素ＥＳＬ−００１−０２を使用して、実施例１ないし２の手順
に従った。結果は、高アノマー純度を有するβ−アノマーである。実施例３１：加水分解酵素ＥＳＬ−００１−０２によるα−アノマーの酵素分割 生成酸は実施例３０から、それがＭｇＳＯ4 で乾燥され、濾過され、そして真
空下で濃縮された後に得られる。α−アノマーは高アノマー純度で単離される。
ランメチルエステルの２：１（β：α）アノマー混合物を分離するために、酵素
として加水分解酵素ＥＳＬ−００１−０２を使用して、実施例１ないし２の手順
に従った。結果は、高アノマー純度を有するβ−アノマーである。実施例３１：加水分解酵素ＥＳＬ−００１−０２によるα−アノマーの酵素分割 生成酸は実施例３０から、それがＭｇＳＯ4 で乾燥され、濾過され、そして真
空下で濃縮された後に得られる。α−アノマーは高アノマー純度で単離される。
【０１３０】実施例３２：馬肝臓エステラーゼによるβ−アノマーの酵素分割 （２−（Ｓ）−ベンジルオキシメチル）−４−カルボン酸−１，３−ジオキソ
ランメチルエステルの２：１（β：α）アノマー混合物を分離するために、酵素
として馬肝臓エステラーゼを使用して、実施例１ないし２の手順に従った。結果
は、高アノマー純度を有するβ−アノマーである。実施例３３：馬肝臓エステラーゼによるα−アノマーの酵素分割 生成酸は実施例３２から、それがＭｇＳＯ4 で乾燥され、濾過され、そして真
空下で濃縮された後に得られる。α−アノマーは高アノマー純度で単離される。
ランメチルエステルの２：１（β：α）アノマー混合物を分離するために、酵素
として馬肝臓エステラーゼを使用して、実施例１ないし２の手順に従った。結果
は、高アノマー純度を有するβ−アノマーである。実施例３３：馬肝臓エステラーゼによるα−アノマーの酵素分割 生成酸は実施例３２から、それがＭｇＳＯ4 で乾燥され、濾過され、そして真
空下で濃縮された後に得られる。α−アノマーは高アノマー純度で単離される。
【０１３１】実施例３４：牛膵臓蛋白分解酵素によるβ−アノマーの酵素分割 （２−（Ｓ）−ベンゾイルオキシメチル）−４−カルボン酸−１，３−ジオキ
ソランメチルエステルの２：１（β：α）アノマー混合物を分離するために、酵
素として牛膵臓蛋白分解酵素を使用して、実施例１ないし２の手順に従った。結
果は、高アノマー純度を有するβ−アノマーである。実施例３５：牛膵臓蛋白分解酵素によるα−アノマーの酵素分割 生成酸は実施例３４から、それがＭｇＳＯ4 で乾燥され、濾過され、そして真
空下で濃縮された後に得られる。α−アノマーは高アノマー純度で単離される。
ソランメチルエステルの２：１（β：α）アノマー混合物を分離するために、酵
素として牛膵臓蛋白分解酵素を使用して、実施例１ないし２の手順に従った。結
果は、高アノマー純度を有するβ−アノマーである。実施例３５：牛膵臓蛋白分解酵素によるα−アノマーの酵素分割 生成酸は実施例３４から、それがＭｇＳＯ4 で乾燥され、濾過され、そして真
空下で濃縮された後に得られる。α−アノマーは高アノマー純度で単離される。
【０１３２】実施例３６：ストレプトマイセス カエスピトサス(Streptomyces caespitosus) からの蛋白分解酵素によるβ−アノマーの酵素分割 （２−（Ｓ）−ベンジルオキシメチル）−４−カルボン酸−１，３−ジオキソ
ランメチルエステルの２：１（β：α）アノマー混合物を分離するために、酵素
としてストレプトマイセス カエスピトサスからの蛋白分解酵素を使用して、実
施例１ないし２の手順に従った。結果は、高アノマー純度を有するβ−アノマー
である。実施例３７：ストレプトマイセス カエスピトサスからの蛋白分解酵素によるα −アノマーの酵素分割 生成酸は実施例３６から、それがＭｇＳＯ4 で乾燥され、濾過され、そして真
空下で濃縮された後に得られる。α−アノマーは高アノマー純度で単離される。
ランメチルエステルの２：１（β：α）アノマー混合物を分離するために、酵素
としてストレプトマイセス カエスピトサスからの蛋白分解酵素を使用して、実
施例１ないし２の手順に従った。結果は、高アノマー純度を有するβ−アノマー
である。実施例３７：ストレプトマイセス カエスピトサスからの蛋白分解酵素によるα −アノマーの酵素分割 生成酸は実施例３６から、それがＭｇＳＯ4 で乾燥され、濾過され、そして真
空下で濃縮された後に得られる。α−アノマーは高アノマー純度で単離される。
【０１３３】実施例３８：バチラス リッケンフォーミス(Bacillus licheniformis)からの蛋 白分解酵素によるβ−アノマーの酵素分割 （２−（Ｓ）−ベンジルオキシメチル）−４−カルボン酸−１，３−ジオキソ
ランメチルエステルの２：１（β：α）アノマー混合物を分離するために、酵素
としてバチラス リッケンフォーミスからの蛋白分解酵素を使用して、実施例１
ないし２の手順に従った。結果は、高アノマー純度を有するβ−アノマーである
。実施例３９：バチラス リッケンフォーミスからの蛋白分解酵素によるα−アノ マーの酵素分割 生成酸は実施例３８から、それがＭｇＳＯ4 で乾燥され、濾過され、そして真
空下で濃縮された後に得られる。α−アノマーは高アノマー純度で単離される。
ランメチルエステルの２：１（β：α）アノマー混合物を分離するために、酵素
としてバチラス リッケンフォーミスからの蛋白分解酵素を使用して、実施例１
ないし２の手順に従った。結果は、高アノマー純度を有するβ−アノマーである
。実施例３９：バチラス リッケンフォーミスからの蛋白分解酵素によるα−アノ マーの酵素分割 生成酸は実施例３８から、それがＭｇＳＯ4 で乾燥され、濾過され、そして真
空下で濃縮された後に得られる。α−アノマーは高アノマー純度で単離される。
【０１３４】実施例４０：２−（Ｓ）−ベンジルオキシメチル−４−（Ｒ）−ヨード−１，３ −ジオキソラン及び２−（Ｓ）−ベンジルオキシメチル−４−（Ｓ）−ヨード− １，３−ジオキソラン（化合物４０）の製造
【化２７】 １：２の比率で２Ｓ−ベンジルオキシメチル−４Ｓ アセトキシ−１，３−ジ
オキソラン及び２Ｓ−ベンジルオキシメチル−４Ｒ−アセトキシ−１，３−ジオ
キソランからなる混合物（６ｇ；２３．８ｍｍｏｌ）を真空下で、トルエンとの
共沸蒸留により乾燥した。トルエンの除去後、残渣油を乾燥ジクロロメタン（６
０ｍＬ）に溶解し、そしてヨードトリメチルシラン（３．５５ｍＬ）は、強力な
撹拌下、−７８℃で添加された。添加後、ドライアイス／アセトン浴を取り外し
、そして混合物は室温まで暖められた（１５分）。生成物は、２Ｓ−ベンジルオ
キシメチル−４Ｒ−ヨード−１，３−ジオキソラン及び２Ｓ−ベンジルオキシメ
チル−４Ｓ−ヨード−１，３−ジオキソランであった。 ２Ｒ−ベンジルオキシメチル−４Ｓ アセトキシ−１，３−ジオキソラン及び
２Ｒ−ベンジルオキシメチル−４Ｒ−アセトキシ−１，３−ジオキソランからな
る出発混合物が選択された場合は、当該分野で通常の技術を有する者により理解
されるであろう。得られる生成物は、２Ｒ−ベンジルオキシメチル−４Ｒ−ヨー
ド−１，３−ジオキソラン及び２Ｒ−ベンジルオキシメチル−４Ｓ−ヨード−１
，３−ジオキソランである。更に、ベンジル基の代わりにベンゾイル置換基を有
する出発物質は、ベンジル基ではなくベンゾイル置換基を有する生成物をもたら
すであろう。
オキソラン及び２Ｓ−ベンジルオキシメチル−４Ｒ−アセトキシ−１，３−ジオ
キソランからなる混合物（６ｇ；２３．８ｍｍｏｌ）を真空下で、トルエンとの
共沸蒸留により乾燥した。トルエンの除去後、残渣油を乾燥ジクロロメタン（６
０ｍＬ）に溶解し、そしてヨードトリメチルシラン（３．５５ｍＬ）は、強力な
撹拌下、−７８℃で添加された。添加後、ドライアイス／アセトン浴を取り外し
、そして混合物は室温まで暖められた（１５分）。生成物は、２Ｓ−ベンジルオ
キシメチル−４Ｒ−ヨード−１，３−ジオキソラン及び２Ｓ−ベンジルオキシメ
チル−４Ｓ−ヨード−１，３−ジオキソランであった。 ２Ｒ−ベンジルオキシメチル−４Ｓ アセトキシ−１，３−ジオキソラン及び
２Ｒ−ベンジルオキシメチル−４Ｒ−アセトキシ−１，３−ジオキソランからな
る出発混合物が選択された場合は、当該分野で通常の技術を有する者により理解
されるであろう。得られる生成物は、２Ｒ−ベンジルオキシメチル−４Ｒ−ヨー
ド−１，３−ジオキソラン及び２Ｒ−ベンジルオキシメチル−４Ｓ−ヨード−１
，３−ジオキソランである。更に、ベンジル基の代わりにベンゾイル置換基を有
する出発物質は、ベンジル基ではなくベンゾイル置換基を有する生成物をもたら
すであろう。
【０１３５】実施例４１：２−（Ｓ）−ベンジルオキシメチル−１，３−ジオキソラン−４− （Ｓ）−イル）−２−オキソ−４−アミノアセチル−ピリミジン（化合物４１） の合成
【化２８】 以前に製造された、ジクロロメタン中のヨード中間体（化合物４０）は、−７
８℃まで冷却された。１，１，１，３，３，３−ヘキサメチルジシラザン（ＨＭ
ＤＳ）及び硫酸アンモニウムにおける還流により形成されたパーシレーテッド(p
ersylated)Ｎ−アセチルシトシン（１．１当量）は、ＨＭＤＳのエバポレーショ
ンに続いて、ジクロロメタン３０ｍＬ中に溶解され、そして上記ヨード中間体に
添加された。反応混合物は１．５時間、−７８℃に保たれ、次いで二炭酸ナトリ
ウム水溶液中に注がれ、そしてジクロロメタン（２×２５ｍＬ）により抽出され
た。 有機層は硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過により固体を除去し、そして溶媒
は真空下でエバポレーションされ、粗製混合物８．１ｇが製造された。β−Ｌ−
４’−ベンジル−２’−デオキシ−３’−オキサシチジン及びそのα−Ｌ異性体
は、それぞれ５：１の比率で形成された。この粗製混合物は、シリカゲル上でク
ロマトフラフィー（酢酸エチル中メタノール５％）により分離され、純粋なβ−
Ｌ（β）異性体（４．４８ｇ）を生じさせた。或いは、上記混合物のエタノール
からの再結晶化は純粋なβ異性体４．９２ｇ並びにβ及びα−異性体の１：１の
比率の混合物３．１８ｇを生じさせる。
８℃まで冷却された。１，１，１，３，３，３−ヘキサメチルジシラザン（ＨＭ
ＤＳ）及び硫酸アンモニウムにおける還流により形成されたパーシレーテッド(p
ersylated)Ｎ−アセチルシトシン（１．１当量）は、ＨＭＤＳのエバポレーショ
ンに続いて、ジクロロメタン３０ｍＬ中に溶解され、そして上記ヨード中間体に
添加された。反応混合物は１．５時間、−７８℃に保たれ、次いで二炭酸ナトリ
ウム水溶液中に注がれ、そしてジクロロメタン（２×２５ｍＬ）により抽出され
た。 有機層は硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過により固体を除去し、そして溶媒
は真空下でエバポレーションされ、粗製混合物８．１ｇが製造された。β−Ｌ−
４’−ベンジル−２’−デオキシ−３’−オキサシチジン及びそのα−Ｌ異性体
は、それぞれ５：１の比率で形成された。この粗製混合物は、シリカゲル上でク
ロマトフラフィー（酢酸エチル中メタノール５％）により分離され、純粋なβ−
Ｌ（β）異性体（４．４８ｇ）を生じさせた。或いは、上記混合物のエタノール
からの再結晶化は純粋なβ異性体４．９２ｇ並びにβ及びα−異性体の１：１の
比率の混合物３．１８ｇを生じさせる。
【０１３６】実施例４２：２−（Ｓ）−ベンジルオキシメチル−１，３−ジオキソラン−４− （Ｓ）−イル）−２−オキソ−４−アミノ−ピリミジン（化合物４２）
【化２９】 保護されたβ−Ｌ異性体（４．４ｇ）（化合物４１）は、閉じた容器中で飽和
メタノール性アンモニア（２５０ｍＬ）中に分散され、そして室温で１８時間、
強力に撹拌された。次いで溶媒が真空下で除去され、純粋な形態の脱アセチル化
ヌクレオシドを得た。
メタノール性アンモニア（２５０ｍＬ）中に分散され、そして室温で１８時間、
強力に撹拌された。次いで溶媒が真空下で除去され、純粋な形態の脱アセチル化
ヌクレオシドを得た。
【０１３７】実施例４３：２−（Ｓ）−ヒドロキシメチル−１，３−ジオキソラン−４−（Ｓ ）−イル）−２−オキソ−４−アミノ−ピリミジン（化合物４３）
【化３０】 β−Ｌ−４’−ベンジル−２’−デオキシ−３’−オキサシチジン（化合物４
２）をエタノール（２００ｍＬ）中に溶解し、次いでシクロヘキセン（６ｍＬ）
及び酸化パラジウム（０．８ｇ）を添加した。反応混合物は７時間還流され、次
いでそれは冷却され、そして固体を除去するために濾過された。真空蒸留により
、濾液から溶媒を除去した。粗製生成物はシリカゲル上でフラッシュクロマトグ
ラフィー（酢酸エチル中メタノール５％）により精製され、白色固体（２．３３
ｇ；全体的収率８６％）が得られた。αD 22＝−４６．７°（ｃ＝０．２８５；
メタノール）、融点１９２ないし１９４℃。
２）をエタノール（２００ｍＬ）中に溶解し、次いでシクロヘキセン（６ｍＬ）
及び酸化パラジウム（０．８ｇ）を添加した。反応混合物は７時間還流され、次
いでそれは冷却され、そして固体を除去するために濾過された。真空蒸留により
、濾液から溶媒を除去した。粗製生成物はシリカゲル上でフラッシュクロマトグ
ラフィー（酢酸エチル中メタノール５％）により精製され、白色固体（２．３３
ｇ；全体的収率８６％）が得られた。αD 22＝−４６．７°（ｃ＝０．２８５；
メタノール）、融点１９２ないし１９４℃。
【０１３８】 以下の実施例４４ないし４６は、実施例１の出発物質（２−（Ｓ）−ベンジル
オキシメチル−４−カルボン酸−１，３−ジオキソランメチルエステル）を製造
する方法を説明する。実施例４４：Ｄ−グリセリン酸の製造
オキシメチル−４−カルボン酸−１，３−ジオキソランメチルエステル）を製造
する方法を説明する。実施例４４：Ｄ−グリセリン酸の製造
【化３１】 硫酸（２９７ｍＬ；１１．１４ｍｏｌ；１．２３当量）を数部に分けて、撹拌
及び冷却（０ないし５℃）下、過剰量の水（７３００ｍＬ）に添加した。Ｄ−セ
リン（９５２ｇ；９．０６ｍｏｌ；１当量）は強力な撹拌下、一部で添加され、
次いで硝酸ナトリウム水溶液（水３０６０ｍＬ中７６９ｇ；１１．１４ｍｏｌ；
１．２３当量）が滴下された。 添加時間（７時間）の間、温度は０ないし５℃に保たれた。反応容器は一晩室
温で撹拌され、そして反応はＴＬＣ（ニンヒドリン）により監視された。反応を
完了させるために、反応容器温度を０ないし５℃に保ちながら、追加の硫酸（１
１５ｍＬ；４．３１ｍｏｌ；０．４７当量）及び硝酸ナトリウム水溶液（水１１
００ｍＬ中２５５ｇ；３．６９ｍｏｌ；０．４当量）が添加された。次いで反応
容器は撹拌下、室温で１８時間保たれた。溶液中に窒素が１時間バブリングされ
、そして反応容器温度を２８ないし３０℃に保ちながら、水が真空により除去さ
れた。残渣（Ｄ−グリセリン酸）はトルエン（３×３Ｌ）と共エバポレーション
された。
及び冷却（０ないし５℃）下、過剰量の水（７３００ｍＬ）に添加した。Ｄ−セ
リン（９５２ｇ；９．０６ｍｏｌ；１当量）は強力な撹拌下、一部で添加され、
次いで硝酸ナトリウム水溶液（水３０６０ｍＬ中７６９ｇ；１１．１４ｍｏｌ；
１．２３当量）が滴下された。 添加時間（７時間）の間、温度は０ないし５℃に保たれた。反応容器は一晩室
温で撹拌され、そして反応はＴＬＣ（ニンヒドリン）により監視された。反応を
完了させるために、反応容器温度を０ないし５℃に保ちながら、追加の硫酸（１
１５ｍＬ；４．３１ｍｏｌ；０．４７当量）及び硝酸ナトリウム水溶液（水１１
００ｍＬ中２５５ｇ；３．６９ｍｏｌ；０．４当量）が添加された。次いで反応
容器は撹拌下、室温で１８時間保たれた。溶液中に窒素が１時間バブリングされ
、そして反応容器温度を２８ないし３０℃に保ちながら、水が真空により除去さ
れた。残渣（Ｄ−グリセリン酸）はトルエン（３×３Ｌ）と共エバポレーション
された。
【０１３９】実施例４５：Ｄ−メチルグリセレートの製造
【化３２】 Ｄ−グリセリン酸はメタノール（６Ｌ）で３０分間撹拌され、そして固体は濾
過により除去された。透明な溶液は室温で３５ないし３８時間撹拌され、そして
反応はＴＬＣ（ＤＣＭ／メタノール８：２ Ｒｆ＝０．６３）により監視された
。メタノールは真空により除去され、黄色粘性シロップ（１１００ｇ）を得た。
過により除去された。透明な溶液は室温で３５ないし３８時間撹拌され、そして
反応はＴＬＣ（ＤＣＭ／メタノール８：２ Ｒｆ＝０．６３）により監視された
。メタノールは真空により除去され、黄色粘性シロップ（１１００ｇ）を得た。
【０１４０】実施例４６：２−（Ｒ，Ｓ）−ベンゾイルオキシメチル−４−Ｒ−メチルカルボ キシレート−１，３−ジオキソランの製造
【化３３】 ベンゾイルオキシアセトアルデヒドジメチルアセタール（１４６ｇ、９５％、
０．６６モル、１当量）及びＤ−メチルグリセレート（９９ｇ、０．８２モル、
１．２５当量）の混合物は９０℃まで加熱され、次いで固体ＰＴＳＡ（２．７５
ｇ、０．１４５モル、０．０２２当量）が添加された。反応混合物は真空下（水
アスピレーター）、９０ないし９５℃で２．５時間保たれた（ＴＬＣ、ヘキサン
／酢酸エチル １：１、Ｒｆ−０．４７）。反応混合物は室温まで冷却され、酢
酸エチル（２５０ｍＬ）により稀釈され、そして撹拌下で飽和ＮａＨＣＯ3 溶液
（２５０ｍＬ）に注がれた。有機層は分離され、そして水層は酢酸エチル（１５
０ｍＬ）により一回抽出された。集められた有機層は濃縮され、そして５ないし
１０％の酢酸エチル／ヘキサンで展開しているシリカゲルカラム上で精製され、
淡黄色油（５９％）として、２．１：１のβ／α比で所望の生成物１１２．４ｇ
を得た。
０．６６モル、１当量）及びＤ−メチルグリセレート（９９ｇ、０．８２モル、
１．２５当量）の混合物は９０℃まで加熱され、次いで固体ＰＴＳＡ（２．７５
ｇ、０．１４５モル、０．０２２当量）が添加された。反応混合物は真空下（水
アスピレーター）、９０ないし９５℃で２．５時間保たれた（ＴＬＣ、ヘキサン
／酢酸エチル １：１、Ｒｆ−０．４７）。反応混合物は室温まで冷却され、酢
酸エチル（２５０ｍＬ）により稀釈され、そして撹拌下で飽和ＮａＨＣＯ3 溶液
（２５０ｍＬ）に注がれた。有機層は分離され、そして水層は酢酸エチル（１５
０ｍＬ）により一回抽出された。集められた有機層は濃縮され、そして５ないし
１０％の酢酸エチル／ヘキサンで展開しているシリカゲルカラム上で精製され、
淡黄色油（５９％）として、２．１：１のβ／α比で所望の生成物１１２．４ｇ
を得た。
【０１４１】 以下の実施例４７は、実施例１の酵素分離の大規模版を説明する。実施例４７：β−２−（Ｒ）−ベンゾイルオキシメチル−１，３−ジオキソラン −４−（Ｒ）−メチルカルボキシレートの大規模製造
【化３４】 β／α−２−ベンゾイルオキシメチル−４−メチルカルボキシレート−１，３
−ジオキソラン（２０ｇ；７５．１２ｍｍｏｌ）の混合物は、３０℃でアセトニ
トリル（４０ｍＬ）及びリン酸緩衝液（１６０ｍＬ）に分散された。α−キモト
リプシンが一部で添加され（７．５ｍＬ）、次いで、α異性体を加水分解するた
めに、ＮａＯＨの１Ｎ溶液（全量４６ｍＬ）が６時間以上かけて滴下された。ｐ
Ｈは定期的に監視され、そして温度が３０℃に保たれつつ、７．１ないし７．２
に保たれた。６時間後、混合物は酢酸エチル（１×８０ｍＬ）で抽出された。次
いで、有機層は分離され、そして水層は酢酸エチル（２×５０ｍＬ）で抽出され
た。集められた有機層は飽和ＮａＨＣＯ3 （２０ｍＬ）により洗浄され、無水Ｎ
ａ2ＳＯ4上で乾燥され、そして溶媒は真空下で除去され、透明油（８５．６％；
ＨＰＬＣによると、２．２４％より少ないα−異性体を有するβ−異性体）１２
．６３ｇが残った。 この実施例は、２−ベンゾイルオキシメチル−４−メチルカルボキシレート−
１，３−ジオキソランのβ−異性体の大規模製造をもたらすために、キモトリプ
シンを実施例４ないし３９で使用されている酵素のいずれとも置き換えて従われ
得ることは、当該分野で通常の技術を有する者により理解される。
−ジオキソラン（２０ｇ；７５．１２ｍｍｏｌ）の混合物は、３０℃でアセトニ
トリル（４０ｍＬ）及びリン酸緩衝液（１６０ｍＬ）に分散された。α−キモト
リプシンが一部で添加され（７．５ｍＬ）、次いで、α異性体を加水分解するた
めに、ＮａＯＨの１Ｎ溶液（全量４６ｍＬ）が６時間以上かけて滴下された。ｐ
Ｈは定期的に監視され、そして温度が３０℃に保たれつつ、７．１ないし７．２
に保たれた。６時間後、混合物は酢酸エチル（１×８０ｍＬ）で抽出された。次
いで、有機層は分離され、そして水層は酢酸エチル（２×５０ｍＬ）で抽出され
た。集められた有機層は飽和ＮａＨＣＯ3 （２０ｍＬ）により洗浄され、無水Ｎ
ａ2ＳＯ4上で乾燥され、そして溶媒は真空下で除去され、透明油（８５．６％；
ＨＰＬＣによると、２．２４％より少ないα−異性体を有するβ−異性体）１２
．６３ｇが残った。 この実施例は、２−ベンゾイルオキシメチル−４−メチルカルボキシレート−
１，３−ジオキソランのβ−異性体の大規模製造をもたらすために、キモトリプ
シンを実施例４ないし３９で使用されている酵素のいずれとも置き換えて従われ
得ることは、当該分野で通常の技術を有する者により理解される。
【０１４２】実施例４８：β ２−（Ｒ）−ベンゾイルオキシメチル−１，３−ジオキソラン −４−（Ｒ）−カルボン酸の製造
【化３５】 β ２−（Ｒ）−ベンゾイルオキシメチル−１，３−ジオキソラン−４−（Ｒ
）−メチルカルボキシレート−１，３−ジオキソラン（１５．３２７ｇ；５７．
５７ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（６０ｍＬ）に溶解し、次いで水（１５ｍＬ）が撹拌下
添加された。内部温度は２０℃に設定された。次いで、水（１５ｍＬ）中ＬｉＯ
Ｈ（２．４１ｇ；５７．５７ｍｍｏｌ）の溶液を７分以上かけて滴下した。反応
混合物を２２℃で、追加の４０分間撹拌した。ＴＨＦを真空下で除去し、そして
残渣を水（７０ｍＬ）で稀釈した。得られた溶液をジクロロメタン（２×３５ｍ
Ｌ）で抽出した。厳密なｐＨ−メーター制御下で（初期ｐＨ：８．３６ないし３
．０２）、水層を３０％Ｈ2 ＳＯ4 （９．５ｍＬ）により酸性化し、次いでＤＣ
Ｍ（４×６０ｍＬ）で抽出した。有機層を集め、そして溶媒を真空下で除去し、
薄緑色シロップ（１４．２６ｇ）が得られ、それは一晩真空下に保たれた。
）−メチルカルボキシレート−１，３−ジオキソラン（１５．３２７ｇ；５７．
５７ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（６０ｍＬ）に溶解し、次いで水（１５ｍＬ）が撹拌下
添加された。内部温度は２０℃に設定された。次いで、水（１５ｍＬ）中ＬｉＯ
Ｈ（２．４１ｇ；５７．５７ｍｍｏｌ）の溶液を７分以上かけて滴下した。反応
混合物を２２℃で、追加の４０分間撹拌した。ＴＨＦを真空下で除去し、そして
残渣を水（７０ｍＬ）で稀釈した。得られた溶液をジクロロメタン（２×３５ｍ
Ｌ）で抽出した。厳密なｐＨ−メーター制御下で（初期ｐＨ：８．３６ないし３
．０２）、水層を３０％Ｈ2 ＳＯ4 （９．５ｍＬ）により酸性化し、次いでＤＣ
Ｍ（４×６０ｍＬ）で抽出した。有機層を集め、そして溶媒を真空下で除去し、
薄緑色シロップ（１４．２６ｇ）が得られ、それは一晩真空下に保たれた。
【０１４３】実施例４９：β−２−（Ｒ）−ベンゾイルオキシメチル−４−（Ｒ，Ｓ）−メチ ルカルボキシレート−１，３−ジオキソランの製造
【化３６】 四酢酸鉛（９４４．８ｇ；２．０２４モル；１．２当量）を、氷浴中の酸（４
２５．５ｇ；１．６８７モル；１．０当量）及びピリジン（１９３ｍＬ）のアセ
トニトリル（６．８Ｌ）溶液に部分で（portion-wise）添加した。反応容器を室
温まで温まらせておき、そして撹拌した。反応をＴＬＣ（ヘキサン：酢酸エチル
６：４）により確認した。それをセライトの小パッド（約１インチ）で濾過した
。次いで、濾液を５Ｌの飽和水性炭酸水素ナトリウム溶液上に注ぎ（反応混合物
は褐色に変わる）、そして固体炭酸水素ナトリウムを添加することによりｐＨを
８になるように調節した。濾液を再度、セライトの小パッド（約１インチ）で濾
過し、黒い鉛塩を除き淡黄色の混合物を得た。有機相を分離し、そして水相を酢
酸エチル（４×２Ｌ）で抽出した。集めた有機相を濃縮し、そして得られた油を
トルエン（３×２Ｌ）により共蒸発させて（co-evaporated ）褐色のシロップ状
物を得た。 このシロップ状物（３７４ｇ）を更にシリカゲルの小パッド（１ｇ粗製物；２
ｇシリカ）で濾過により精製し、３．５Ｌの溶媒混合物（酢酸エチル：ヘキサン
８：２）で溶離して純粋な生成物３３２．３ｇ（７４％）を得た。この最終的な
濾過段階は任意である。
２５．５ｇ；１．６８７モル；１．０当量）及びピリジン（１９３ｍＬ）のアセ
トニトリル（６．８Ｌ）溶液に部分で（portion-wise）添加した。反応容器を室
温まで温まらせておき、そして撹拌した。反応をＴＬＣ（ヘキサン：酢酸エチル
６：４）により確認した。それをセライトの小パッド（約１インチ）で濾過した
。次いで、濾液を５Ｌの飽和水性炭酸水素ナトリウム溶液上に注ぎ（反応混合物
は褐色に変わる）、そして固体炭酸水素ナトリウムを添加することによりｐＨを
８になるように調節した。濾液を再度、セライトの小パッド（約１インチ）で濾
過し、黒い鉛塩を除き淡黄色の混合物を得た。有機相を分離し、そして水相を酢
酸エチル（４×２Ｌ）で抽出した。集めた有機相を濃縮し、そして得られた油を
トルエン（３×２Ｌ）により共蒸発させて（co-evaporated ）褐色のシロップ状
物を得た。 このシロップ状物（３７４ｇ）を更にシリカゲルの小パッド（１ｇ粗製物；２
ｇシリカ）で濾過により精製し、３．５Ｌの溶媒混合物（酢酸エチル：ヘキサン
８：２）で溶離して純粋な生成物３３２．３ｇ（７４％）を得た。この最終的な
濾過段階は任意である。
【０１４４】実施例５０：９−（２−（Ｒ）−ベンジルオキシメチル−１，３−ジオキソラン −４−イル）−６−クロロ−２−アミノプリン（化合物５０ａ）及び、９−（２ −（Ｒ）−ベンジルオキシメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）−６−ヨ ード−２−アミノプリン（化合物５０ｂ）の製造
【化３７】 ＴＭＳＩ（２８．２ｍＬ；１９８．１２モル 当量）を、−１５℃で糖（２−
（Ｒ）−ベンジルオキシメチル−４−カルボキシル−１，３−ジオキソラン）（
５２．７５ｇ；１９８．１２ミリモル；１当量）のジクロロメタン（７５０ｍＬ
）溶液に添加した。−１５℃にて２．５時間後、シリル化２−アミノ−６−クロ
ロプリン（６２ｇ；１９８ミリモル；１当量）を固体としての反応混合物に添加
した。撹拌を同じ温度で更に２．５時間続けた。反応混合物を室温までゆっくり
温まらせておき、次いで室温で４０時間撹拌を続けた。次に、混合物を水性Ｎａ
ＨＣＯ3 溶液（１Ｌ）上に注いだ。それをＮａ2 Ｓ2 Ｏ3 と共に２０分間撹拌し
、そして小パッドセライトで濾過する。次いで、有機相を分離し、そして水相を
ジクロロメタン（１×２００ｍＬ）で抽出した。集めた有機相を濃縮し、粗製物
８７ｇを得た。酢酸エチル／ヘキサン（６：４）で溶出する、シリカゲル（４５
０ｇ）を用いた粗製物のカラム精製によりβ／α比２．３：１をもつ共役生成物
（coupled product ）６７．７ｇ（８１％；１：１クロロ／ヨード混合物）を得
た。 代わりに、所望の最終生成物が同じ化合物であるが、反対の立体化学（opposi
te stereochemistry）（即ち、Ｌ−体におけるβ：α立体異性体の２：１混合物
）のものであってもよい。 上で議論された手順に従う。しかし、糖２−（Ｒ）−ベンジルオキシメチル−
４−カルボキシル−１，３−ジオキソランは２−（Ｓ）ベンジルオキシメチル−
４−カルボキシル−１，３−ジオキソランに置換えられる。
（Ｒ）−ベンジルオキシメチル−４−カルボキシル−１，３−ジオキソラン）（
５２．７５ｇ；１９８．１２ミリモル；１当量）のジクロロメタン（７５０ｍＬ
）溶液に添加した。−１５℃にて２．５時間後、シリル化２−アミノ−６−クロ
ロプリン（６２ｇ；１９８ミリモル；１当量）を固体としての反応混合物に添加
した。撹拌を同じ温度で更に２．５時間続けた。反応混合物を室温までゆっくり
温まらせておき、次いで室温で４０時間撹拌を続けた。次に、混合物を水性Ｎａ
ＨＣＯ3 溶液（１Ｌ）上に注いだ。それをＮａ2 Ｓ2 Ｏ3 と共に２０分間撹拌し
、そして小パッドセライトで濾過する。次いで、有機相を分離し、そして水相を
ジクロロメタン（１×２００ｍＬ）で抽出した。集めた有機相を濃縮し、粗製物
８７ｇを得た。酢酸エチル／ヘキサン（６：４）で溶出する、シリカゲル（４５
０ｇ）を用いた粗製物のカラム精製によりβ／α比２．３：１をもつ共役生成物
（coupled product ）６７．７ｇ（８１％；１：１クロロ／ヨード混合物）を得
た。 代わりに、所望の最終生成物が同じ化合物であるが、反対の立体化学（opposi
te stereochemistry）（即ち、Ｌ−体におけるβ：α立体異性体の２：１混合物
）のものであってもよい。 上で議論された手順に従う。しかし、糖２−（Ｒ）−ベンジルオキシメチル−
４−カルボキシル−１，３−ジオキソランは２−（Ｓ）ベンジルオキシメチル−
４−カルボキシル−１，３−ジオキソランに置換えられる。
【０１４５】実施例５１：９−（２−（Ｒ）−ベンジルオキシメチル−１，３−ジオキソラン −４−イル）−６−（Ｎ−シクロプロピル）アミノ−２−アミノプリン（化合物 ５１）の製造
【化３８】 エタノール（１００ｍＬ）中の出発物質（６．３ｇ；１４．９５ミリモル；１
当量；平均ｆ．ｗ．＝４２１．５２；Ｃｌ：Ｉ／１：１）の溶液をシクロプロピ
ルアミン（３．１ｍＬ；４４．８４ミリモル；３当量）と共に７５−８０℃で２
０時間還流し、そして室温まで冷却する。反応混合物を濃縮し、ジクロロメタン
（２５ｍＬ）に溶解し及び飽和水性炭酸水素ナトリウム溶液上に注いだ。１０分
間の撹拌の後、有機相を分離し、そして水相をジクロロメタン（２×１５ｍＬ）
で抽出した。次いで、集めた有機相を濃縮して粗製物の量的収量を得、それを次
いでカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、酢酸エチル：ＭｅＯＨ ９８．５
：２．５及び９５．５：５で精製して、β／α混合物としての生成物５．３ｇ（
８９％）を得た。
当量；平均ｆ．ｗ．＝４２１．５２；Ｃｌ：Ｉ／１：１）の溶液をシクロプロピ
ルアミン（３．１ｍＬ；４４．８４ミリモル；３当量）と共に７５−８０℃で２
０時間還流し、そして室温まで冷却する。反応混合物を濃縮し、ジクロロメタン
（２５ｍＬ）に溶解し及び飽和水性炭酸水素ナトリウム溶液上に注いだ。１０分
間の撹拌の後、有機相を分離し、そして水相をジクロロメタン（２×１５ｍＬ）
で抽出した。次いで、集めた有機相を濃縮して粗製物の量的収量を得、それを次
いでカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、酢酸エチル：ＭｅＯＨ ９８．５
：２．５及び９５．５：５で精製して、β／α混合物としての生成物５．３ｇ（
８９％）を得た。
【０１４６】実施例５２：９−（２−（Ｒ）−ヒドロキシメチル−１，３−ジオキソラン−４ −イル）−６−（Ｎ−シクロプロピル）アミノ−２−アミノプリン（化合物５２ ）の製造
【化３９】 出発物質（３．３ｇ）をＭｅＯＨ（８０ｍＬ；２Ｍ）中のアンモニアと共に２
０時間撹拌した。窒素を反応混合物に通気させて過剰なアンモニアを除去した。
次いで溶液を濃縮して、β／α混合物（β／α＝２．３：１）としての粗製物を
得た。β／α異性体を、溶離液としてＤＣＭ／ＭｅＯＨを使用するシリカゲルを
用いるクロマトグラフィーによって分離し、１．１８ｇを得た（７０％β異性体
）。
０時間撹拌した。窒素を反応混合物に通気させて過剰なアンモニアを除去した。
次いで溶液を濃縮して、β／α混合物（β／α＝２．３：１）としての粗製物を
得た。β／α異性体を、溶離液としてＤＣＭ／ＭｅＯＨを使用するシリカゲルを
用いるクロマトグラフィーによって分離し、１．１８ｇを得た（７０％β異性体
）。
【０１４７】実施例５３：９−（２−（Ｒ）−ヒドロキシメチル−１，３−ジオキソラン−４ −イル）−６−（Ｎ−２−シクロプロピル−２−アミノメトキシル）−２−アミ ノプリン（化合物５３）の製造
【化４０】 飽和メタノール性アンモニア３０ｍｌ中の（２Ｒ）−２−ベンゾイルオキシメ
チル−４−（２’−アミノ−６’−シクロプロピルアミノ−プリン−９’−イル
）−１，３−ジオキソラン（４８０ｍｇ）溶液を室温で１８時間撹拌した。混合
物を真空中で蒸発乾固した。残渣を水２０ｍｌに溶解し、塩化メチレン１０ｍＬ
で２回洗浄し、そして凍結乾燥させて、８０％の収率で白色の固体２８３ｍｇを
得た。得られた生成物は約２：１の比をもつβ：α−アノマーの混合物を有して
いた。 代わりに、所望の最終生成物が同じ化合物であるが、反対の立体化学（即ち、
Ｌ−体におけるβ：α立体異性体の２：１混合物）のものであってもよい。 上で議論された手順に従う。しかし、実施例５０の手段に従う際、糖２−（Ｒ
）−ベンジルオキシメチル−４−カルボキシル−１，３−ジオキソランは２−（
Ｓ）−ベンジルオキシメチル−４−カルボキシル−１，３−ジオキソランに置換
えられる。
チル−４−（２’−アミノ−６’−シクロプロピルアミノ−プリン−９’−イル
）−１，３−ジオキソラン（４８０ｍｇ）溶液を室温で１８時間撹拌した。混合
物を真空中で蒸発乾固した。残渣を水２０ｍｌに溶解し、塩化メチレン１０ｍＬ
で２回洗浄し、そして凍結乾燥させて、８０％の収率で白色の固体２８３ｍｇを
得た。得られた生成物は約２：１の比をもつβ：α−アノマーの混合物を有して
いた。 代わりに、所望の最終生成物が同じ化合物であるが、反対の立体化学（即ち、
Ｌ−体におけるβ：α立体異性体の２：１混合物）のものであってもよい。 上で議論された手順に従う。しかし、実施例５０の手段に従う際、糖２−（Ｒ
）−ベンジルオキシメチル−４−カルボキシル−１，３−ジオキソランは２−（
Ｓ）−ベンジルオキシメチル−４−カルボキシル−１，３−ジオキソランに置換
えられる。
【０１４８】実施例５４：９−（２−（Ｓ）−ヒドロキシメチル−１，３−ジオキソラン−４ −イル）−２−アミノプリン（化合物５４）の製造
【化４１】 実施例５０の手順が行われた。その後、６．３ｇの化合物５０を、トリエチル
アミン１００ｍＬを含むエタノール３００ｍＬ中の１０％Ｐｄ／Ｃを覆う５０ｐ
ｓｉの水素に基づく水素化条件にした。３時間の振とう後、触媒を濾過により除
去した。次いで溶媒を蒸発させて、固体を得て、それはエタノール−エーテルか
ら再結晶化されて、Ｌ−体におけるβ：α立体異性体の約２：１の混合物をもつ
化合物５４約４ｇを得た。 代わりに、所望の最終生成物が同じ化合物であるが、反対の立体配置（即ち、
Ｄ−体におけるβ：α立体異性体の約２：１混合物）のものであってもよい。 上で議論された手順に従う。しかし、実施例５０の手段に従う際、糖２−（Ｓ
）−ベンジルオキシメチル−４−カルボキシル−１，３−ジオキソランは２−（
Ｒ）−ベンジルオキシメチル−４−カルボキシル−１，３−ジオキソランに置換
えられる。
アミン１００ｍＬを含むエタノール３００ｍＬ中の１０％Ｐｄ／Ｃを覆う５０ｐ
ｓｉの水素に基づく水素化条件にした。３時間の振とう後、触媒を濾過により除
去した。次いで溶媒を蒸発させて、固体を得て、それはエタノール−エーテルか
ら再結晶化されて、Ｌ−体におけるβ：α立体異性体の約２：１の混合物をもつ
化合物５４約４ｇを得た。 代わりに、所望の最終生成物が同じ化合物であるが、反対の立体配置（即ち、
Ｄ−体におけるβ：α立体異性体の約２：１混合物）のものであってもよい。 上で議論された手順に従う。しかし、実施例５０の手段に従う際、糖２−（Ｓ
）−ベンジルオキシメチル−４−カルボキシル−１，３−ジオキソランは２−（
Ｒ）−ベンジルオキシメチル−４−カルボキシル−１，３−ジオキソランに置換
えられる。
【０１４９】実施例５５：９−（２−（Ｓ）−ヒドロキシメチル−１，３−ジオキソラン−４ −イル）−６−アミノプリン（化合物５５）の製造
【化４２】 実施例５０及び実施例５１で明らかにされた手順が行われた。しかし実施例５
０の手段に従う際、１当量のシリル化２−アミノ−６−クロロプリンは１当量の
シリル化６−アミノプリンに置換えられる。その結果約２：１のβ：α比をもつ
９−（２−（Ｓ）−ヒドロキシメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）−６
−アミノプリンが得られる。 代わりに、所望の最終生成物が同じ化合物であるが、反対の立体化学（即ち、
Ｄ−体におけるβ：α立体異性体の２：１混合物）のものであってもよい。 上で議論された手順に従う。しかし、実施例５０の手段に従う際、糖２−（Ｓ
）−ベンジルオキシメチル−４−カルボキシル−１，３−ジオキソランは２−（
Ｒ）−ベンジルオキシメチル−４−カルボキシル−１，３−ジオキソランに置換
えられる。
０の手段に従う際、１当量のシリル化２−アミノ−６−クロロプリンは１当量の
シリル化６−アミノプリンに置換えられる。その結果約２：１のβ：α比をもつ
９−（２−（Ｓ）−ヒドロキシメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）−６
−アミノプリンが得られる。 代わりに、所望の最終生成物が同じ化合物であるが、反対の立体化学（即ち、
Ｄ−体におけるβ：α立体異性体の２：１混合物）のものであってもよい。 上で議論された手順に従う。しかし、実施例５０の手段に従う際、糖２−（Ｓ
）−ベンジルオキシメチル−４−カルボキシル−１，３−ジオキソランは２−（
Ｒ）−ベンジルオキシメチル−４−カルボキシル−１，３−ジオキソランに置換
えられる。
【０１５０】実施例５６：９−（２−（Ｓ）−ヒドロキシメチル−１，３−ジオキソラン−４ −イル）−６，２−ジアミノプリン（化合物５６）の製造
【化４３】 実施例５０の手順が行われた。その後、６ｇの化合物５０を０℃で乾燥アンモ
ニアにより飽和化されたメタノール０．９Ｌに溶解し、そしてこの溶液を１０５
℃ないし１１０℃で１６時間スチールボンベ内で加熱した。溶液を蒸発乾固し、
そして残渣を溶離液としてクロロホルム−メタノール（４：１）を使用する、シ
リカゲルを用いたクロマトグラフィにより精製し、約３ｇの粗製化合物５６を得
た。この生成物はメタノール−エーテルからの再結晶化により、約２：１のβ：
α比をもつ精製された化合物５６を得ることができる。 代わりに、所望の最終生成物が同じ化合物であるが、反対の立体化学（即ち、
Ｄ−体におけるβ：α立体異性体の２：１混合物）のものであってもよい。 上で議論された手順に従う。しかし、実施例５０の手段に従う際、糖２−（Ｓ
）−ベンジルオキシメチル−４−カルボキシル−１，３−ジオキソランは２−（
Ｒ）−ベンジルオキシメチル−４−カルボキシル−１，３−ジオキソランに置換
えられる。
ニアにより飽和化されたメタノール０．９Ｌに溶解し、そしてこの溶液を１０５
℃ないし１１０℃で１６時間スチールボンベ内で加熱した。溶液を蒸発乾固し、
そして残渣を溶離液としてクロロホルム−メタノール（４：１）を使用する、シ
リカゲルを用いたクロマトグラフィにより精製し、約３ｇの粗製化合物５６を得
た。この生成物はメタノール−エーテルからの再結晶化により、約２：１のβ：
α比をもつ精製された化合物５６を得ることができる。 代わりに、所望の最終生成物が同じ化合物であるが、反対の立体化学（即ち、
Ｄ−体におけるβ：α立体異性体の２：１混合物）のものであってもよい。 上で議論された手順に従う。しかし、実施例５０の手段に従う際、糖２−（Ｓ
）−ベンジルオキシメチル−４−カルボキシル−１，３−ジオキソランは２−（
Ｒ）−ベンジルオキシメチル−４−カルボキシル−１，３−ジオキソランに置換
えられる。
【０１５１】実施例５７：９−（２−（Ｓ）−ヒドロキシメチル−１，３−ジオキソラン−４ −イル）−６−オキソ−６−アミノプリン（化合物５７）の製造
【化４４】 実施例５０の手順が行われた。その後、約６ｇの化合物５０をメタノール２０
０ｍＬ、水５０ｍＬ及びＮａＯＨ１０ｇの混合物に溶解した。溶液を還流下で５
時間加熱し、その時間後、３００ｍＬの水と過剰量のピリジニウムスルホネート
樹脂で希釈する。スラリーを濾過し、樹脂を水で洗浄し、そして集めた水性濾液
を真空下で、蒸発乾固して残渣とし、それを５０％の水性メタノール中に溶解す
る。溶液を活性炭で処理し、濾過し、そして濾液を真空下で蒸発乾固させて、固
体の残渣を得、それをエタノール−水から再結晶化して、約２：１のβ：α比を
もつ純粋な化合物５７を得た。 代わりに、所望の最終生成物が同じ化合物であるが、反対の立体化学（即ち、
Ｄ−体におけるβ：α立体異性体の２：１混合物）のものであってもよい。 上で議論された手順に従う。しかし、実施例５０の手段に従う際、糖２−（Ｓ
）−ベンジルオキシメチル−４−カルボキシル−１，３−ジオキソランは２−（
Ｒ）−ベンジルオキシメチル−４−カルボキシル−１，３−ジオキソランに置換
えられる。
０ｍＬ、水５０ｍＬ及びＮａＯＨ１０ｇの混合物に溶解した。溶液を還流下で５
時間加熱し、その時間後、３００ｍＬの水と過剰量のピリジニウムスルホネート
樹脂で希釈する。スラリーを濾過し、樹脂を水で洗浄し、そして集めた水性濾液
を真空下で、蒸発乾固して残渣とし、それを５０％の水性メタノール中に溶解す
る。溶液を活性炭で処理し、濾過し、そして濾液を真空下で蒸発乾固させて、固
体の残渣を得、それをエタノール−水から再結晶化して、約２：１のβ：α比を
もつ純粋な化合物５７を得た。 代わりに、所望の最終生成物が同じ化合物であるが、反対の立体化学（即ち、
Ｄ−体におけるβ：α立体異性体の２：１混合物）のものであってもよい。 上で議論された手順に従う。しかし、実施例５０の手段に従う際、糖２−（Ｓ
）−ベンジルオキシメチル−４−カルボキシル−１，３−ジオキソランは２−（
Ｒ）−ベンジルオキシメチル−４−カルボキシル−１，３−ジオキソランに置換
えられる。
【０１５２】実施例５８：９−（２−（Ｓ）−ヒドロキシメチル−１，３−ジオキソラン−４ −イル）−２−オキソ−４−アミノ−５−メチルピリミジン（化合物５８）の製 造
【化４５】 実施例５０の手順が行われ、次いで実施例５２の手順が続けられた。しかし、
実施例５０の手段に従う際、１当量のシリル化２−アミノ−６−クロロプリンは
１当量のシリル化２−オキソ−４−アミノ−５−メチル−ピリミジンで置換えら
れる。その結果、約２：１のβ：α比をもつ９−（２−（Ｓ）−ヒドロキシメチ
ル−１，３−ジオキソラン−４−イル）−２−オキソ−４−アミノ−５−メチル
ピリミジンが得られる。 代わりに、所望の最終生成物が同じ化合物であるが、反対の立体化学（即ち、
Ｄ−体におけるβ：α立体異性体の２：１混合物）のものであってもよい。 上で議論された手順に従う。しかし、実施例５０の手段に従う際、糖２−（Ｓ
）−ベンジルオキシメチル−４−カルボキシル−１，３−ジオキソランは２−（
Ｒ）−ベンジルオキシメチル−４−カルボキシル−１，３−ジオキソランに置換
えられる。
実施例５０の手段に従う際、１当量のシリル化２−アミノ−６−クロロプリンは
１当量のシリル化２−オキソ−４−アミノ−５−メチル−ピリミジンで置換えら
れる。その結果、約２：１のβ：α比をもつ９−（２−（Ｓ）−ヒドロキシメチ
ル−１，３−ジオキソラン−４−イル）−２−オキソ−４−アミノ−５−メチル
ピリミジンが得られる。 代わりに、所望の最終生成物が同じ化合物であるが、反対の立体化学（即ち、
Ｄ−体におけるβ：α立体異性体の２：１混合物）のものであってもよい。 上で議論された手順に従う。しかし、実施例５０の手段に従う際、糖２−（Ｓ
）−ベンジルオキシメチル−４−カルボキシル−１，３−ジオキソランは２−（
Ｒ）−ベンジルオキシメチル−４−カルボキシル−１，３−ジオキソランに置換
えられる。
【０１５３】実施例５９：９−（２−（Ｓ）−ヒドロキシメチル−１，３−ジオキソラン−４ −イル）−２−オキソ−４−アミノ−５−フルオロピリミジン（化合物５９）の 製造
【化４６】 実施例５０の手順が行われ、次いで実施例５２の手順が続けられた。しかし、
実施例５０の手段に従う際、１当量のシリル化２−アミノ−６−クロロプリンは
１当量のシリル化２−オキソ−４−アミノ−５−フルオロ−ピリミジンで置換え
られる。その結果、約２：１のβ：α比をもつ９−（２−（Ｓ）−ヒドロキシメ
チル−１，３−ジオキソラン−４−イル）−２−オキソ−４−アミノ−５−フル
オロピリミジンが得られる。 代わりに、所望の最終生成物が同じ化合物であるが、反対の立体化学（即ち、
Ｄ−体におけるβ：α立体異性体の２：１混合物）のものであってもよい。 上で議論された手順に従う。しかし、実施例５０の手段に従う際、糖２−（Ｓ
）−ベンジルオキシメチル−４−カルボキシル−１，３−ジオキソランは２−（
Ｒ）−ベンジルオキシメチル−４−カルボキシル−１，３−ジオキソランに置換
えられる。
実施例５０の手段に従う際、１当量のシリル化２−アミノ−６−クロロプリンは
１当量のシリル化２−オキソ−４−アミノ−５−フルオロ−ピリミジンで置換え
られる。その結果、約２：１のβ：α比をもつ９−（２−（Ｓ）−ヒドロキシメ
チル−１，３−ジオキソラン−４−イル）−２−オキソ−４−アミノ−５−フル
オロピリミジンが得られる。 代わりに、所望の最終生成物が同じ化合物であるが、反対の立体化学（即ち、
Ｄ−体におけるβ：α立体異性体の２：１混合物）のものであってもよい。 上で議論された手順に従う。しかし、実施例５０の手段に従う際、糖２−（Ｓ
）−ベンジルオキシメチル−４−カルボキシル−１，３−ジオキソランは２−（
Ｒ）−ベンジルオキシメチル−４−カルボキシル−１，３−ジオキソランに置換
えられる。
【０１５４】実施例６０：９−（２−（Ｓ）−ヒドロキシメチル−１，３−ジオキソラン−４ −イル）−２，４−ジオキソピリミジン（化合物６０）の製造
【化４７】 実施例５０の手順が行われ、次いで実施例５２の手順が続けられた。しかし、
実施例５０の手段に従う際、１当量のシリル化２−アミノ−６−クロロプリンは
１当量のシリル化２，４−ジオキソ−ピリミジンで置換えられる。その結果、約
２：１のβ：α比をもつ９−（２−（Ｓ）−ヒドロキシメチル−１，３−ジオキ
ソラン−４−イル）−２，４−ジオキソピリミジンが得られる。 代わりに、所望の最終生成物が同じ化合物であるが、反対の立体化学（即ち、
Ｄ−体におけるβ：α立体異性体の２：１混合物）のものであってもよい。 上の製法に従う。しかし、実施例５０の手段に従う際、糖２−（Ｓ）−ベンジ
ルオキシメチル−４−カルボキシル−１，３−ジオキソランは２−（Ｒ）−ベン
ジルオキシメチル−４−カルボキシル−１，３−ジオキソランに置換えられる。
実施例５０の手段に従う際、１当量のシリル化２−アミノ−６−クロロプリンは
１当量のシリル化２，４−ジオキソ−ピリミジンで置換えられる。その結果、約
２：１のβ：α比をもつ９−（２−（Ｓ）−ヒドロキシメチル−１，３−ジオキ
ソラン−４−イル）−２，４−ジオキソピリミジンが得られる。 代わりに、所望の最終生成物が同じ化合物であるが、反対の立体化学（即ち、
Ｄ−体におけるβ：α立体異性体の２：１混合物）のものであってもよい。 上の製法に従う。しかし、実施例５０の手段に従う際、糖２−（Ｓ）−ベンジ
ルオキシメチル−４−カルボキシル−１，３−ジオキソランは２−（Ｒ）−ベン
ジルオキシメチル−４−カルボキシル−１，３−ジオキソランに置換えられる。
【０１５５】実施例６１：９−（２−（Ｓ）−ヒドロキシメチル−１，３−ジオキソラン−４ −イル）−２，４−ジオキソ−５−メチルピリミジン（化合物６１）の製造
【化４８】 実施例５０の手順が行われ、次いで実施例５２の手順が続けられた。しかし、
実施例５０の手段に従う際、１当量のシリル化２−アミノ−６−クロロプリンは
１当量のシリル化２，４−ジオキソ−５−メチルピリミジンで置換えられる。そ
の結果、約２：１のβ：α比をもつ９−（２−（Ｓ）−ヒドロキシメチル−１，
３−ジオキソラン−４−イル）−２，４−ジオキソ−５−メチルピリミジンが得
られる。 代わりに、所望の最終生成物が同じ化合物であるが、反対の立体化学（即ち、
Ｄ−体におけるβ：α立体異性体の２：１混合物）のものであってもよい。 上で議論された手順に従う。しかし、実施例５０の手段に従う際、糖２−（Ｓ
）−ベンジルオキシメチル−４−カルボキシル−１，３−ジオキソランは２−（
Ｒ）−ベンジルオキシメチル−４−カルボキシル−１，３−ジオキソランに置換
えられる。
実施例５０の手段に従う際、１当量のシリル化２−アミノ−６−クロロプリンは
１当量のシリル化２，４−ジオキソ−５−メチルピリミジンで置換えられる。そ
の結果、約２：１のβ：α比をもつ９−（２−（Ｓ）−ヒドロキシメチル−１，
３−ジオキソラン−４−イル）−２，４−ジオキソ−５−メチルピリミジンが得
られる。 代わりに、所望の最終生成物が同じ化合物であるが、反対の立体化学（即ち、
Ｄ−体におけるβ：α立体異性体の２：１混合物）のものであってもよい。 上で議論された手順に従う。しかし、実施例５０の手段に従う際、糖２−（Ｓ
）−ベンジルオキシメチル−４−カルボキシル−１，３−ジオキソランは２−（
Ｒ）−ベンジルオキシメチル−４−カルボキシル−１，３−ジオキソランに置換
えられる。
【０１５６】 高い程度の配列相同性をもつ酵素及び反応条件の最適化の選択を限定すること
なしに含む本発明の幾つかの変更及び変形は、本発明の上述の詳細な記載から当
業者にとって明らかであろう。このような変更及び変形は上記特許請求の範囲に
定義されたように、本発明の１又はそれ以上の具体的態様の範囲内にあることを
意図するものである。
なしに含む本発明の幾つかの変更及び変形は、本発明の上述の詳細な記載から当
業者にとって明らかであろう。このような変更及び変形は上記特許請求の範囲に
定義されたように、本発明の１又はそれ以上の具体的態様の範囲内にあることを
意図するものである。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:66 Ｃ１２Ｒ 1:69） 1:125 (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:845 Ｃ１２Ｒ 1:545） 1:38 (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:66） (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:125） (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:845） (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:38） (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ，ＺＷ )，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ， ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ， ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，Ｃ Ｒ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ， ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，Ｋ Ｚ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ， ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，Ｓ Ｋ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ (72)発明者 シンポイア，アレックス カナダ国，ケベック エイチ３ヴイ １シ −２，モントリオール，リッジウッド ア ヴェニュー 3550 アバートメント 22 (72)発明者 ジャネス，ラナ カナダ国，オンタリオ エム４ピー ｌエ ス２，トロント，ローハンプトン アヴェ ニュー 299 アパートメント 1122 (72)発明者 カズラウスカス，ロマス カナダ国，ケベック エイチ４エイ ２ケ イ２，モントリオール，ヒングストン ア ヴェニュー 4625 Ｆターム(参考） 4B064 AE45 AE58 CA21 CB06 CD27
Claims (16)
- 【請求項１】 次式Ａ又は次式Ｂ； 【化１】 〔式中、 Ｗはベンジル基又はベンゾイル基を表し、そしてＲ1 は炭素原子数１ないし６
のアルキル基及び炭素原子数６ないし１５のアリール基からなる群から選択され
る〕で表されるβ−アノマーとα−アノマーとのアノマー混合物から立体選択的
にジオキソラン・ヌクレオシド類似体を製造する方法であって、 優先的に一方のアノマーを立体選択的に加水分解するために、前記混合物を、
コレステロール・エステラーゼ、加水分解酵素ＥＳＬ−００１−０２、馬肝臓エ
ステラーゼ、牛膵臓蛋白分解酵素、α―キモトリプシン、ステレプトマイセス
カエスピトーシス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｃａｅｓｐｉｔｏｓｉｓ）由来
の蛋白分解酵素、バシラス リッケンフォーミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈ
ｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）由来のサブスチリシン（ｓｕｂｓｔｉｌｉｓｉｎ）、アス
パラギラス オリザエ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕ ｏｒｙｚａｅ）由来の蛋白分解
酵素、バシラス リッケンフォーミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏ
ｒｍｉｓ）由来の蛋白分解酵素、ステレプトマイセス グリセウス（Ｓｔｒｅｐ
ｔｏｍｙｃｅｓ ｇｒｉｓｅｕｓ）由来の蛋白分解酵素、アスパラギラス メレ
ウス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｍｅｌｌｅｕｓ）由来のアシラーゼ、バシラス サブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）由来の蛋白分解酵素、加
水分解酵素ＥＳＬ−００１−０５、ステレプトマイセス グリセウス（Ｓｔｒｅ
ｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇｒｉｓｅｕｓ）由来のプロナーゼ蛋白分解酵素、ライゾパ
ス アライザス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ ａｒｒｈｉｚｕｓ）由来の脂肪分解酵素、
シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属のタイプＢ種由来のリポ蛋白脂肪
分解酵素、シュードモナス セパシア（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｃｅｐａｃｉ
ａ）由来の脂肪分解酵素並びに細菌性蛋白分解酵素からなる群から選択される酵
素により立体選択的に加水分解して、前記式中のＲ1 がＨで置換された生成物を
形成させ、 加水分解を受けていない出発物質から前記生成物を分離し、 Ｃ４位の官能基（ＣＯＯＲ1 ）をプリニル基又はピリミジニル基、或いはその
類似体又は誘導体で立体選択的に置換することからなる方法。 - 【請求項２】 前記加水分解段階が、少なくとも８０％のアノマー純度を有
する出発物質を生ぜしめる請求項１記載の方法。 - 【請求項３】 前記加水分解段階が、少なくとも９０％のアノマー純度を有
する出発物質を生ぜしめる請求項１記載の方法。 - 【請求項４】 前記加水分解段階が、少なくとも９５％のアノマー純度を有
する出発物質を生ぜしめる請求項１記載の方法。 - 【請求項５】 前記加水分解段階が、少なくとも９８％のアノマー純度を有
する出発物質を生ぜしめる請求項１記載の方法。 - 【請求項６】 前記加水分解段階が、少なくとも８０％のアノマー純度を有
する生成物を生ぜしめる請求項１記載の方法。 - 【請求項７】 前記加水分解段階が、少なくとも９０％のアノマー純度を有
する生成物を生ぜしめる請求項１記載の方法。 - 【請求項８】 前記加水分解段階が、少なくとも９５％のアノマー純度を有
する生成物を生ぜしめる請求項１記載の方法。 - 【請求項９】 前記加水分解段階が、少なくとも９８％のアノマー純度を有
する生成物を生ぜしめる請求項１記載の方法。 - 【請求項１０】 前記式中のＷがベンジル基を表し、そして前記酵素がコレ
ステロール・エステラーゼ、加水分解酵素ＥＳＬ−００１−０２、馬肝臓エステ
ラーゼ、牛膵臓蛋白分解酵素、α―キモトリプシン、ステレプトマイセス カエ
スピトーシス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｃａｅｓｐｉｔｏｓｉｓ）由来の蛋
白分解酵素、バシラス リッケンフォーミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎ
ｉｆｏｒｍｉｓ）由来のサブスチリシン（ｓｕｂｓｔｉｌｉｓｉｎ）からなる群
から選択される請求項１記載の方法。 - 【請求項１１】 前記酵素がα―キモトリプシンである請求項１０記載の方
法。 - 【請求項１２】 前記酵素が牛膵臓由来の蛋白分解酵素である請求項１０記
載の方法。 - 【請求項１３】 前記式中のＷがベンゾイル基を表し、そして前記酵素がア
スパラギラス オリザエ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕ ｏｒｙｚａｅ）由来の蛋白分
解酵素、バシラス リッケンフォーミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆ
ｏｒｍｉｓ）由来の蛋白分解酵素、バシラス リッケンフォーミス（Ｂａｃｉｌ
ｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）由来のサブチリシン、ステレプトマイセ
ス グリセウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇｒｉｓｅｕｓ）由来の蛋白分解酵
素、アスパラギラス メレウス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｍｅｌｌｅｕｓ）由
来のアシラーゼ、バシラス サブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ
）由来の蛋白分解酵素、加水分解酵素ＥＳＬ−００１−０５、ステレプトマイセ
ス グリセウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇｒｉｓｅｕｓ）由来のプロナー
ゼ蛋白分解酵素、ライゾパス アライザス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ ａｒｒｈｉｚｕ
ｓ）由来の脂肪分解酵素、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属のタイ
プＢ種由来のリポ蛋白脂肪分解酵素、細菌性蛋白分解酵素、シュードモナス セ
パシア（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｃｅｐａｃｉａ）由来の脂肪分解酵素からな
る群から選択される請求項１記載の方法。 - 【請求項１４】 前記プリニル基又はピリミジニル基、或いはその類似体又
は誘導体が次式： 【化２】 〔式中、 Ｒ2 、Ｒ9 及びＲ11は水素原子、炭素原子数１ないし６のアルキル基、炭素原
子数１ないし６のアシル基及びＲ8 Ｃ（Ｏ）基（式中、Ｒ8 は、水素原子又は炭
素原子数１ないし６のアルキル基を表す）を表わし、 Ｒ3 、Ｒ4 及びＲ10は各々独立して水素原子、炭素原子数１ないし６のアルキ
ル基、臭素原子、塩素原子、弗素原子、沃素原子及びＣＦ3 基からなる群から選
択され、そして Ｒ5 、Ｒ6 及びＲ7 は各々独立して水素原子、臭素原子、塩素原子、弗素原子
、沃素原子、アミノ基、ヒドロキシル基及び炭素原子数３ないし６のシクロアル
キルアミノ基から選択される〕で表される群から選択される請求項１記載の方法
。 - 【請求項１５】 プリン又はピリミジン塩基、或いはその類似体又は誘導体
が、次式： 【化３】 で表される群から選択される請求項１記載の方法。 - 【請求項１６】 前記置換段階が、更に、 第二混合物をアシル化してアシル化第二混合物を生成させ、そして 前記アシル化第二混合物をプリン又はピリミジン塩基、或いはその類似体又は
誘導体、及びルイス酸でグリコシル化して、ジオキソラン・ヌクレオシド類似体
を生成させることからなる請求項１記載の方法。
Applications Claiming Priority (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US11975699P | 1999-02-11 | 1999-02-11 | |
| US60/119,756 | 1999-02-11 | ||
| US11988599P | 1999-02-12 | 1999-02-12 | |
| US60/119,885 | 1999-02-12 | ||
| PCT/CA2000/000144 WO2000047759A1 (en) | 1999-02-11 | 2000-02-11 | Stereoselective synthesis of nucleoside analogues |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2002538780A true JP2002538780A (ja) | 2002-11-19 |
Family
ID=26817660
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2000598654A Pending JP2002538780A (ja) | 1999-02-11 | 2000-02-11 | ヌクレオシド類似体の立体選択的合成 |
Country Status (5)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP1151133A1 (ja) |
| JP (1) | JP2002538780A (ja) |
| AU (1) | AU2653200A (ja) |
| CA (1) | CA2362570A1 (ja) |
| WO (1) | WO2000047759A1 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2007533598A (ja) * | 2003-07-31 | 2007-11-22 | ワッカー ケミー アクチエンゲゼルシャフト | Ｏｈ−保護された［４−（２，６−ジアミノ−９ｈ−プリン−９−イル）−１，３−ジオキソラン−２−イル］メタノール−誘導体の製法 |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA2385349A1 (en) | 1999-09-24 | 2001-04-05 | Francis J. Giles | Method for the treatment or prevention of viral infection using nucleoside analogues |
| WO2001032153A2 (en) | 1999-11-04 | 2001-05-10 | Shire Biochem Inc. | Method for the treatment or prevention of flaviviridae viral infection using nucleoside analogues |
| WO2001058894A1 (en) * | 2000-02-11 | 2001-08-16 | Shire Biochem Inc. | Stereoselective synthesis of nucleoside analogues |
| WO2002051852A1 (fr) * | 2000-12-27 | 2002-07-04 | Mitsui Chemicals, Inc. | Procede de production d'un derive de saccharide non naturel |
| AU2003285230B2 (en) * | 2002-11-18 | 2010-04-22 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Stereoselective process for the production of dioxolane nucleoside analogues |
| ES2568467T3 (es) | 2004-02-03 | 2016-04-29 | Emory University | Métodos para la fabricación de nucleósidos de 1,3-dioxolano |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5190867A (en) * | 1986-05-08 | 1993-03-02 | Shell International Petroleum Company, Ltd. | Process for the preparation of R-2,2-R1,R2 -1,3-dioxolane-4-methanol |
| DD277698A1 (de) * | 1988-12-06 | 1990-04-11 | Ve Forschungszentrum Biotechno | Verfahren zur herstellung von substituierten (s)-1,3-dioxolan-4-carbonsaeureestern aus den racematen |
| US5283346A (en) * | 1989-03-23 | 1994-02-01 | Hoffmann-La Roche Inc. | Dioxolanes |
| US5276151A (en) * | 1990-02-01 | 1994-01-04 | Emory University | Method of synthesis of 1,3-dioxolane nucleosides |
| GB9525606D0 (en) * | 1995-12-14 | 1996-02-14 | Iaf Biochem Int | Method and compositions for the synthesis of dioxolane nucleosides with - configuration |
-
2000
- 2000-02-11 AU AU26532/00A patent/AU2653200A/en not_active Abandoned
- 2000-02-11 JP JP2000598654A patent/JP2002538780A/ja active Pending
- 2000-02-11 WO PCT/CA2000/000144 patent/WO2000047759A1/en not_active Application Discontinuation
- 2000-02-11 CA CA002362570A patent/CA2362570A1/en not_active Abandoned
- 2000-02-11 EP EP00904756A patent/EP1151133A1/en not_active Withdrawn
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2007533598A (ja) * | 2003-07-31 | 2007-11-22 | ワッカー ケミー アクチエンゲゼルシャフト | Ｏｈ−保護された［４−（２，６−ジアミノ−９ｈ−プリン−９−イル）−１，３−ジオキソラン−２−イル］メタノール−誘導体の製法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AU2653200A (en) | 2000-08-29 |
| EP1151133A1 (en) | 2001-11-07 |
| CA2362570A1 (en) | 2000-08-17 |
| WO2000047759A1 (en) | 2000-08-17 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR100381705B1 (ko) | 비씨에이취-189와 그 관련 화합물의 입체선택적 합성방법및 비씨에이취-189의 신규한 유도체 | |
| EP1265890B1 (en) | Stereoselective synthesis of nucleoside analogues | |
| JP2002538780A (ja) | ヌクレオシド類似体の立体選択的合成 | |
| JP2916163B2 (ja) | リパーゼおよびエステラーゼによるエステル化およびエステル開裂方法 | |
| JPH05117277A (ja) | フロ〔３，４−ｃ〕ピリジン誘導体の製造方法 | |
| KR101157468B1 (ko) | 1,3-디옥솔란 뉴클레오시드 제조방법 | |
| EP0500364B1 (en) | Optically active 1,3-dioxin-4-ones | |
| Zhou et al. | Scaleable processes for the synthesis of (−)-β-d-2, 6-diaminopurine dioxolane (Amdoxovir, DAPD) and (−)-β-d-2-aminopurine dioxolane (APD) | |
| Lunardi et al. | Highly stereoselective preparation of (3R, 4S)-3, 4-chromanediol by deracemization of (±)-3-hydroxy-4-chromanone by Trichosporon cutaneum | |
| JP3410452B2 (ja) | 光学活性イノシトールトリフォスフェートの製造法 | |
| Choi et al. | Stereoselective synthesis of amino-substituted apio dideoxynucleosides through a distant neighboring group effect | |
| JP3173850B2 (ja) | 光学活性イノシトール誘導体の製造法 | |
| KR20010075363A (ko) | 광학 활성 트로피논 모노카르복실산 유도체의 제조 방법 | |
| JP3010382B2 (ja) | （ｒ）−２−プロポキシベンゼン誘導体の製造法 | |
| KR20060095772A (ko) | α-１-인산화-２-데옥시-２-플루오로아라비노시드 및２’-데옥시-２’-플루오로-β-Ｄ-아라비노뉴클레오시드의제조법 | |
| JP2002281997A (ja) | 鏡像異性的に純粋な１，３−ジオキソラン−４−オン誘導体若しくは１，３−オキサチオラン−５−オン−誘導体の酵素的製造方法 | |
| WO1997003053A1 (en) | N-(acyloxymethyl or hydroxymethyl) (optionally (oxa or thia) substituted)bicyclo([2.2.1] or [2.2.2])azalk(an or en)one compounds | |
| Huang | Synthetic studies on carbocyclic nucleosides | |
| CA2049047A1 (en) | Process for producing carboxetanocin g or a intermediate therefor | |
| JP2004067583A (ja) | 新規ペプチド誘導体 | |
| JPH07231794A (ja) | ペネム類の製造方法 | |
| JPH06319593A (ja) | 光学活性１，４−ジヒドロピリジン化合物の製造方法 | |
| JPH10248592A (ja) | 光学活性２−ベンジルコハク酸およびその誘導体の製法 |