JP2002502826A

JP2002502826A - Ｈｉｖ感染の治療用組成物および方法

Info

Publication number: JP2002502826A
Application number: JP2000530229A
Authority: JP
Inventors: ヴァシリオスアイアヴラミス; ルイスコーエン
Original assignee: アヴェンティスファーマシューティカルズプロダクツインコーポレイテッド
Priority date: 1998-02-09
Filing date: 1999-02-09
Publication date: 2002-01-29
Also published as: AU752434B2; EP1053012B1; DE69909747D1; ES2203072T3; CA2319356A1; EP1053012A1; WO1999039732A1; ZA991029B; AU2658499A; DE69909747T2; ATE245444T1; DK1053012T3

Abstract

(57)【要約】ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染の抑制または治療方法が提供される。本方法は、ＰＥＧ−アスパラギナーゼ化合物、並びにプロテアーゼインヒビター化合物、リボヌクレオチドレダクターゼインヒビター化合物およびＨＩＶ逆転写酵素抑制化合物から成る群から選ばれる少なくとも１つの化合物を含む医薬的に許容できる組成物の有効量をその必要性がある患者に投与することを含む。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】本発明は、ＰＥＧ−アスパラギナーゼ化合物並びに、場合によってプロテアー
ゼインヒビター化合物、リボヌクレオチドリダクターゼインヒビター化合物およ
びＨＩＶ逆転写酵素インヒビター化合物から成る群から選ばれる少なくとも１つ
の化合物、並びに医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物を目的とする。本発
明はまた、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染を抑制または治療する方法を目
的とし、本方法は、ＰＥＧ−アスパラギナーゼ化合物並びに、場合によってプロ
テアーゼインヒビター化合物、リボヌクレオチドレダクターゼインヒビター化合
物およびＨＩＶ逆転写酵素インヒビター化合物から成る群から選ばれる少なくと
も１つの化合物を含む医薬的に許容できる組成物の有効量を、その必要がある患
者に投与することを含む。

【０００２】従来技術ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）はレトロウイルスであり、免疫系の進行性破
壊（後天性免疫不全症候群；エイズ）並びに中枢および抹消神経系の変性を含む
複合疾患の病原体である。本レトロウイルスは、以前にはＬＡＶ、ＨＴＬＶ−Ｉ
ＩＩまたはＡＲＶとして知られていた。ＨＩＶ感染の治療には、薬剤併用療法を
含む種々の治療法がある。逆転写酵素（ＲＴ）インヒビター化合物と併用される
プロテアーゼインヒビター化合物は、インビトロでもこのウイルスに感染した患
者によるインビボでも成功を示した。プロテアーゼインヒビター化合物は新しい
感染性ウイルスの産生を妨害する。ＨＩＶレトロウイルス増殖の共通の特徴は、
前駆体ポリプロテインがウイルスによってコードされるプロテアーゼによって強
力に翻訳後プロセッシングを受けることで、これによってウイルスの組み立てお
よびウイルス機能に必要な成熟ウイルス蛋白質が完成される。このプロセッシン
グの抑制は新しい感染性ウイルスの産生を妨害する。

【０００３】プロテアーゼインヒビターによるＨＩＶプロテアーゼの抑制は、ＨＩＶ−１の
ライフサイクルの後期ステージでのウイルス由来蛋白分解作用によるプロセッシ
ングを抑制するとともに、そのライフサイクル初期相での感染Ｔリンパ球へのプ
ロウイルスの組込みを防止する可能性がある。ＨＩＶプロテアーゼインヒビター
については詳しく論評されてきた（A.Tomasselli et al., Chimica Oggi. 6:272
0(1991); T. Meek, J. Enzyme Inhibition 6:65-98(1992)）。一般的なレトロウ
イルスの特色は、ポリプロテインの翻訳後プロセッシングである。このプロセッ
シングは、ウイルスによってコードされるＨＩＶプロテアーゼ酵素によって行わ
れる。この翻訳後処理工程によって成熟ポリペプチドが得られ、このポリペプチ
ドは続いて感染性ウイルスの形成および機能を助ける。この分子プロセッシング
が抑制されれば、正常なＨＩＶ産生が停止する。したがって、ＨＩＶプロテアー
ゼの抑制物質は抗ＨＩＶウイルス剤として機能することが明らかになった。

【０００４】レトロウイルスは脊椎動物に広く分布し、人間および動物にＨＩＶ、白血病お
よびリンパ腫を含む多様な疾患を引き起こすことが知られている。全レトロウイ
ルス類が、固有の酵素、逆転写酵素（ＲＴ）の存在という特徴を有する。この酵
素は、ウイルスゲノムＲＮＡを二本鎖のＤＮＡコピーに転写する。したがって、
このウイルスの複製に必要なＨＩＶ逆転写酵素を抑制する手段によってＨＩＶを
制御しようと多大な努力が払われている（V. Merluzzi et al., "Inhibition of
the HIV-1 Replication by a Nonnucleoside Reverse Transcriptase Inhibito
r", Science, 25, 1411(1990))。例えば、現在用いられている治療用化合物ＡＺ
Ｔはウイルスの逆転写酵素の抑制物質である（米国特許第４７２４２３２号）。
残念ながら、これらの化合物の多くには毒性、生物利用性の欠如（インビボでの
活性が短い）、ウイルスの耐性、またはそれらが組み合わさった問題がある。

【０００５】ヌクレオチド類似薬剤の組み合わせによるＨＩＶ逆転写酵素（ＨＩＶ−ＲＴ）
の抑制は、それら薬剤だけではＲＴ機能を完全に抑制することができず、それど
ころか薬剤耐性ウイルス株の出現をもたらすことを示した。これらのエスケープ
変異体株が再定着し、ヌクレオシド類似体療法を無効にする。既知のヌクレオシ
ド類似体混合療法にプロテアーゼ抑制化合物を添加することは、長期間のウイル
スによる負荷を減少させるために役立った。

【０００６】リボヌクレオチドレダクターゼはアロステリックな態様で調節される酵素で、
１つまたはいくつかの電子転移経路を含む複雑な調節機構によって、ヌクレオシ
ドジホスフェートを対応するデオキシヌクレオシドジホスフェートに変換する（
A. Holmgren, (Hydrogen donor system for E. coli Ribonucleoside diphospha
te reductase dependent upon gkutathione), Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 73
:2275-9(1979); L. Therlamder, (Reductase of Ribonucleotides), Ann. Rev.
Biochem. 46:133-58(1979); G.W. Ashley & J. Stubbe, (Current ideas on the
chemical mechanism of ribonucleotide reductase), Pharmac. Ther. 30:301-
29(1985); J. Stubbe, (Ribonucleotide Reductase: Amazing and confusing),
J. Biol. Chem. 265:5329-32(1990)）。リボヌクレオチドレダクターゼによるリ
ボヌクレオチドの還元は、ＤＮＡポリメラーゼがデオキシリボヌクレオチド（ｄ
ＮＴＰ）をＤＮＡ複製過程で利用することを可能にする。

【０００７】リボヌクレオチドレダクターゼ活性は細胞分裂過程と良好な統合性をもち、Ｄ
ＮＡ合成のほとんどが出現する後期Ｇ１および初期Ｓ期で顕著に増加する（J.G.
Corey, T.W. Whitford Jr. (Ribonucleotide reductase and DNA synthesis in
Ehrlich ascites tumor cancer cells), Cancer Res., 32:1301-6(1972);E. Ha
mmerstan, P. Reichard, E. Saluste, (Pyrimidine nucleosides as precursors
of pyrimidines in polynucleotides), J. Biol. Chem., 183:105-109(1950)。
ＤＮＡ合成におけるリボヌクレオチドレダクターゼの役割の重要性は、レダクタ
ーゼをして化学療法剤の標的とした。最近、リボヌクレオチドレダクターゼ抑制
活性を示す２−ヒドロキシ−１Ｈ−イソインドール−１，３−ジオン（ＨＩＳＩ
Ｄ）類が発見された（P. Nandy, E.J. Lien & V.I. Avramis, Acta Oncologica
33(8):953-61(1994); P. Nandy, E.J. Lien & V.I. Avramis, Rec. Adv. Chem
oth. 1:995-996(1994); P. Nandy, E.J. Lien & V.I. Avramis, Med. Chem. Re
s. 5:664-679(1995)) 。

【０００８】ＰＥＧ−アスパラギナーゼ（大腸菌のＡＳＰのポリエチレングリコシル化形）
は化学療法剤として有用であることが示された。特に、ＰＥＧ−アスパラギナー
ゼは、大腸菌のＬ−アスパラギナーゼよりも長い循環半減期をもつまた別の選択
肢であることが示され、小児のリンパ芽球性白血病の多剤化学療法で有用であっ
た（L.J. Ettinger, A.G. Ettinger, V.I. Avramis, P.S. Gaynon, BioDrugs, 7
(1):30-39(1997))。さらにまた、ＰＥＧ−アスパラギナーゼは、単離ＣＮＳの再
発で抗白血病作用を高めるかもしれない（M. Malgolowkin, S. Ortega, D.A. Ca
rcich, D. Steele, D. Tischer, J. Franklin, P. Nandy, A. Periclou, L.J. C
ohen, V.I. Avramis, Proceedings of ASCO, 17(1998))。

【０００９】ＰＥＧ−アスパラギナーゼはアスパラギナーゼとポリエチレングリコールとの
共役物である。この共役物はペジレーションによって生じる。ペジレーションと
は、ポリペプチド（例えば酵素およびホルモン）がポリエチレングリコールと共
役して、その結果生理学的に活性な非免疫原性水溶性ポリペプチド組成物を生じ
る過程である。ポリエチレングリコールは活性の損失からポリペプチドを保護す
る。この組成物は哺乳類の循環系に注射することができ、免疫反応を伴わない。
ペジレーションの過程は米国特許第４１７９３３７号（表題："Non-Immunogenic
Polypeptide",１９７７年７月２８日出願、１９７９年１２月１８日発行）に記
載されている（この文献は参照により本明細書に含まれる）。ペプチドとポリマ
ーとの共有結合は、ＰＥＧ−スクシンイミド誘導体を蛋白質分子の外側のアミノ
基と反応させることによってしばしば影響を受ける。他の方法もまた、米国特許
第４１７９３３７号、Pollack et al., JACS, 98:289(1976)、米国特許第４８４
７３２５号および当技術分野の他の文献で開示されている。

【００１０】発明が解決しようとする課題出願人らは、ＨＩＶ感染の治療で、ＰＥＧ−アスパラギナーゼ（ＰＥＧ−ＡＳ
Ｎａｓｅ）は単独で効果的に作用し、さらにプロテアーゼインヒビター化合物、
ＨＩＶ逆転写酵素インヒビター化合物、またはリボヌクレオチドレダクターゼイ
ンヒビター化合物の１つまたは２つ以上と一緒に相乗的に作用することを見出し
た。

【００１１】したがって、本発明の第一の特徴では、本発明は、ＰＥＧ−アスパラギナーゼ
化合物並びに、場合によってプロテアーゼインヒビター化合物、リボヌクレオチ
ドレダクターゼインヒビター化合物およびＨＩＶ逆転写酵素インヒビター化合物
から成る群から選ばれる少なくとも１つの化合物および医薬的に許容される担体
を含む医薬組成物を目的とする。本発明はまた、その必要がある患者に、ＰＥＧ
−アスパラギナーゼ化合物並びに、場合によってプロテアーゼインヒビター化合
物、リボヌクレオチドレダクターゼインヒビター化合物およびＨＩＶ逆転写酵素
インヒビター化合物から成る群から選ばれる少なくとも１つの化合物を含む医薬
的に許容される組成物の有効量を投与することを含む、ヒト免疫不全ウイルス（
ＨＩＶ）感染を抑制または治療する方法を目的とする。

【００１２】課題を解決するための手段上記および本発明の説明の中で使用されるように、以下の用語は特に別に表示
しないかぎり以下の意味を有すると解される： "アシル"とはＨ−ＣＯ−またはアルキル−ＣＯ−基を意味し、このアルキル基
は本明細書で記載されているとおりである。好ましいアシルは低級アルキルを含む。典型的なアシル基には、ホルミル、ア
セチル、プロパノイル、２−メチルプロパノイル、ブタノイルおよびパルミトイ
ルが含まれる。 "アシルアミノ"とはアシル−ＮＨ−基で、このアシルは本明細書で定義された
とおりである。

【００１３】 "アルケニル"とは、炭素−炭素二重結合を含む脂肪族炭化水素を意味し、直鎖
でも分枝鎖でもよく、約２から約１５の炭素原子を鎖内に含む。好ましいアルケ
ニル基は鎖内に２から約１２の炭素原子、より好ましくは約２から約４の炭素原
子を鎖内に含む。分枝とは、１つまたは２つ以上の低級アルキル基、例えばメチ
ル、エチルまたはプロピルが直鎖状アルケニル鎖に結合していることを意味する
。"低級アルケニル"とは、約２から約４の炭素原子が鎖内に存在することを意味
し、直鎖でも分枝鎖でもよい。アルケニル基は１つまたは２つ以上のハロまたは
シクロアルキル基によって置換されていてもよい。典型的なアルケニル基にはエ
テニル、プロペニル、ｎ−ブテニル、ｉ−ブテニル、３−メチルブト−２−エニ
ル、ｎ−ペンテニル、ヘプテニル、オクテニル、シクロヘキシルブテニルおよび
デセニルが含まれる。

【００１４】 "アルコキシ"とはアルキル−Ｏ−基を意味し、このアルキル基は本明細書に記
載されているとおりである。典型的なアルコキシ基には、メトキシ、エトキシ、
ｎ−プロポキシ、ｉ−プロポキシ、ｎ−ブトキシ、およびヘプトキシが含まれる
。 "アルコキシカルボニル"とはアルキル−Ｏ−ＣＯ−基を意味し、ここでアルキ
ル基は本明細書で定義されたとおりである。典型的なアルコキシカルボニル基に
はメトキシカルボニル、エトキシカルボニル、またはｔ−ブチルオキシカルボニ
ルが含まれる。

【００１５】 "アルキル"とは脂肪族炭化水素を意味し、これは直鎖でも分枝鎖でもよく約１
から約２０の炭素原子を鎖内に含む。好ましいアルキル基は鎖内に１から約１２
の炭素原子を含む。最も好ましいアルキル基は鎖内に１から約３の炭素原子を含
む。分枝とは、１つまたは２つ以上の低級アルキル基（例えばメチル、エチル、
またはプロピル）が直鎖状アルキル鎖に結合していることを意味する。"低級アルキル"とは、鎖内に約１から約３の炭素原子を含むことを意味し、これは直鎖でも分枝鎖でもよい。アルキルは、１つまたは２つ以上の"アルキル基置換基"で
置換することができ、これは同じでも異なっていてもよく、以下の基が含まれる
：ハロ、シクロアルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アシルアミノ、ア
ロイルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニル、アルアルコキシカルボニル
、ヘテロアルアルコキシカルボニル、またはＹ¹Ｙ²ＮＣＯ−（式中Ｙ¹およびＹ² はそれぞれ別個に水素、場合によって置換されたアルキル、場合によって置換さ
れたアリール、場合によって置換されたアルアルキルまたは場合によって置換さ
れたヘテロアルキルであるか、またはＹ¹Ｙ²はＮに一緒に結合し、それによって
Ｙ¹Ｙ²は４から７員ヘテロシクリルに連結される）。典型的なアルキル基にはメ
チル、トリフルオロメチル、シクロプロピルメチル、シクロペンチルメチル、エ
チル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、
３−ペンチル、メトキシエチル、カルボキシメチル、ホルミル、メトキシカルボ
ニルエチル、ベンジルオキシカルボニルメチル、ピリジルメチルオキシカルボニ
ルメチルが含まれる。好ましいアルキル置換基は、ハロ、ヒドロキシ、アルコキ
シ、アミノ、アシルアミノ、アロイルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニ
ル、アルアルコキシカルボニル、ヘテロアルアルコキシカルボニル、スルホニル
、スルフィニル、アシル、アルカノイルまたはＹ¹Ｙ²ＮＣＯ−である。

【００１６】 "アルキルチオ"とはアルキル−Ｓ−基を意味し、ここでアルキル基は本明細書
で規定したとおりである。典型的なアルキルチオ基には、メチルチオ、エチルチ
オ、ｉ−プロピルチオおよびヘプチルチオが含まれる。 "アルキルスルフィニル"はアルキル−ＳＯ−基を意味し、ここでアルキル基は
上記で規定したとおりである。好ましい基はアルキル基が低級アルキルであるも
のである。 "アルキルスルホニル"はアルキル−ＳＯ₂−基を意味し、ここでアルキル基は上記で規定したとおりである。好ましい基はアルキル基が低級アルキルであるも
のである。

【００１７】 "アルキニル"は炭素−炭素三重結合を含む脂肪族炭化水素基を意味し、それら
は直鎖でも分枝鎖でもよく鎖内に約２から約１５の炭素原子を含む。好ましいア
ルキニル基は鎖内に２から約１２の炭素原子を含み、より好ましくは約２から約
４の炭素原子を鎖内に含む。分枝とは１つまたは２つ以上の低級アルキル基（例
えばメチル、エチルまたはプロピル）が直鎖状のアルキニル鎖に結合しているこ
とを意味する。"低級アルキニル"は鎖内に約２から約４の炭素原子が存在するこ
とを意味し、それは直鎖でも分枝鎖でもよい。アルキニル基は、１つまたは２つ
以上のハロによって置換されていてもよい。典型的なアルキニル基にはエチニル
、プロピニル、ｎ−ブチニル、２−ブチニル、３−メチルブチニル、ｎ−ペンチ
ニル、ヘプチニル、オクチニルおよびデシニルが含まれる。

【００１８】 "類似体"とは、特定の化合物またはその種類の化学的改変形を含む化合物を意
味し、これらは、当該化合物に特徴的な医薬的および／または薬理的活性を維持
している。 "アルアルコキシ"はアルアルキル−Ｏ−基を意味し、ここでアルアルキル基は
本明細書で規定したとおりである。典型的なアルアルコキシ基には、ベンジルオ
キシおよび１−または２−ナフタレンメトキシが含まれる。 "アルアルコキシカルボニル"はアルアルキル−Ｏ−ＣＯ−基を意味し、ここで
アルアルキル基は本明細書で規定したとおりである。典型的なアルアルコキシカ
ルボニル基はベンジルオキシカルボニルである。 "アルアルキル"はアリール−アルキル−基を意味し、ここでアリールおよびア
ルキルは本明細書で規定したとおりである。好ましいアルアルキルは低級アルキ
ル部分を含む。典型的なアルアルキル基にはベンジル、２−フェネチルおよびナ
フタレンメチルが含まれる。

【００１９】 "アルアルキルチオ"はアルアルキル−Ｓ−基を意味し、ここでアルアルキル基
は本明細書で規定したとおりである。典型的なアルアルキルチオ基はベンジルチ
オである。 "アリールオキシカルボニル"はアリール−Ｏ−ＣＯ−基を意味し、ここでアリ
ール基は本明細書で規定されるとおりである。典型的なアリールオキシカルボニ
ル基にはフェノキシカルボニルおよびナフトキシカルボニルが含まれる。 "アロイルアミノ"はアロイル−ＮＨ−基で、ここでアロイルは本明細書で規定
されるとおりである。 "アロイル"はアリール−ＣＯ−基を意味し、ここでアリール基は本明細書で規
定されるとおりである。典型的な基にはベンゾイル並びに１−および２−ナフト
イルが含まれる。

【００２０】 "アリール"は単環式または多環式芳香族を意味し、約６から約１４の炭素原子
、好ましくは約６から約１０の炭素原子を含む。アリールは場合によって同じか
または異なる１つまたは２つ以上の"環系置換基"で置換されることができ、ここ
で環系置換基は本明細書で規定されるとおりである。典型的なアリール基には、
フェニルもしくはナフチルまたは置換フェニルもしくは置換ナフチルが含まれる
。 "アリールジアゾ"はアリール−ジアゾ−基を意味し、ここでアリールおよびジ
アゾ基は本明細書で規定されるとおりである。 "アリールオキシ"はアリール−Ｏ−基を意味し、アリール基は本明細書で規定
されたとおりである。典型的な基にはフェノキシおよび２−ナフチルオキシが含
まれる。 "アリールスルホニル"はアリール−ＳＯ₂基を意味し、ここでアリール基は本明細書で規定するとおりである。 "アリールスルフィニル"はアリール−ＳＯ−基を意味し、ここでアリール基は
本明細書で規定するとおりである。 "アリールチオ"はアリール−Ｓ−基を意味し、ここでアリール基は本明細書で
規定するとおりである。典型的なアリールチオ基にはフェニルチオおよびナフチ
ルチオが含まれる。

【００２１】 "カルボキシ"はＨＯ（Ｏ）Ｃ−（カルボン酸）基を意味する。 "本発明の化合物"および同様な表現は、これまでに記載した本発明の化合物を
包含しようとするもので、文脈にしたがいプロドラッグ、医薬的に許容できるそ
の塩および溶媒和物（例えば水和物）を含む。同様に、中間体についての言及は
、それら自体がクレームされているといないにかかわらず、文脈にしたがいそれ
らの塩および溶媒和物を包含しようとするものである。明瞭にするために、文脈
が許す場合は、特定の事例が時には表示されるが、しかしこれらの事例は単に説
明のためで、文脈が許す場合は他の事例を排除しようとするものではない。

【００２２】 "シクロアルケニル"は非芳香族単環式系または非芳香族多環式系を意味し、約
３から約１０の炭素原子、好ましくは約５から約１０の炭素原子を有し、さらに
少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を含む。好ましい環式環のサイズは、約５
から約６の環状原子を含む。シクロアルケニルは場合によって同じかまたは異な
る１つまたは２つ以上の"環系置換基"で置換される。環系置換基は本明細書で規
定されるとおりである。典型的な単環式シクロアルケニルにはシクロペンテニル
、シクロヘキセニル、シクロヘプテニルなどが含まれる。典型的な多環式シクロ
アルケニルはノルボルニレニルである。

【００２３】 "シクロアルキル"は非芳香族単環式系または非芳香族多環式系を意味し、約３
から約１０の炭素原子、好ましくは約５から約１０の炭素原子を有する。好まし
い環式環のサイズは約５から約６の環状原子を含む。シクロアルキルは場合によ
って同じかまたは異なる１つまたは２つ以上の"環系置換基"で置換される。環系
置換基は本明細書で規定されるとおりである。典型的な単環式シクロアルキルに
はシクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルなどが含まれる。典型的な
多環式シクロアルキルには１−デカリン、ノルボルニル、アダマント−（１−ま
たは２−）イルなどが含まれる。 "誘導体"は、通常の化学者が日常的と考える化学的改変が施された化合物、例
えば酸のエステルまたはアミド、保護基（例えばアルコールまたはチオールのた
めのベンジル保護基およびアミンのために第三ブトキシカルボニル基）を意味す
る。

【００２４】 "ジアゾ"は二価の−Ｎ＝Ｎ−ラジカルを意味する。 "有効量"とは、所望の治療効果を生じることができる本発明の化合物／組成物
の量を意味する。本明細書で規定されるように、"電子吸引基"とは、水素原子が分子内の同じ場
所を占拠した場合水素よりも強く電子をそれ自体に引き寄せる基を指す（J.Marc
h, "Advanced Organic Chemistry", 3rd Ed., John Wiley & Sons p.17(1985)）
。それらには、ニトロ、モノハロアルキル、ジハロアルキル、トリハロアルキル
（例えばＣＦ₃）、ハロゲン、ホルミル、アルキルスルホニル、アルキルスルフィニルなどのような基が含まれる。好ましくはハロゲンである。

【００２５】 "経鼻または吸入投与に適した製剤"とは、患者に経鼻的にまたは吸入によって
投与するために適した形態の製剤を意味する。このような製剤は、粒子サイズが
例えば１から５００ミクロンの範囲（５ミクロンずつ増加する（例えば３０ミク
ロン３５ミクロンなど）２０から５００ミクロンの範囲の粒子サイズを含む）の
粉末形の担体を含むことができる。担体が液体である場合（例えば経鼻スプレー
または点鼻薬のような投与の場合）、適切な製剤は活性成分の水溶液または油性
溶液を含む。エーロゾル投与に適した製剤は、通常の方法にしたがって製造でき
、他の治療薬剤とともに投与できる。吸入療法は、メーター付き吸入器で容易に
投与できる。

【００２６】 "経口投与に適した製剤"とは、患者に経口的に投与するために適した形態の製
剤を意味する。このような製剤は、例えば各々が予め定められた活性成分量を含
むカプセル、カシェーまたは錠剤のような別々の単位として；粉末または顆粒と
して；水性液体または非水性液体中の溶液または懸濁液として；または水溶液中
油剤乳液または油中水溶液乳剤として提供できる。活性成分はまたボーラス、舐
薬またはペーストとしても提供できる。

【００２７】 "非経口投与に適した製剤"とは、非経口的に患者に投与するために適した形態
の製剤を意味する。そのような製剤は無菌的で、乳剤、懸濁剤、水性または非水
性注射溶液が含まれる。それらは分散剤、膨張剤、および抗酸化剤、緩衝剤、制
菌剤および製剤を等張にする溶質を含み、目的の受容者の血液に対してｐＨは適
切に調節される。

【００２８】 "経腸投与に適した製剤"とは、経腸的に患者に投与するために適した形態の製
剤を意味する。そのような製剤は好ましくは座薬の形態で、本発明の有用な化合
物を適切な非刺激性賦形剤または担体（例えばココアバター、ポリエチレングリ
コールまたは座薬ワックス）と混合することによって調製できる。前出の賦形剤
または担体は通常の温度で個体であるが、体温では液体であり、したがって直腸
または膣腔で溶融し活性成分を放出する。

【００２９】 "全身投与に適した製剤"とは、患者に全身的に投与するために適した形態の製
剤を意味する。そのような製剤は、好ましくは経筋的、静脈内、腹腔内、および
皮下注射を含む注射によって投与される。注射の場合、本発明の有用な化合物は
溶液、好ましくは生理学的に適合する緩衝液（例えばハンクス溶液またはリンゲ
ル液）で製剤化される。さらに、当該化合物は個体形で製剤化され、使用直前に
再溶解または懸濁することができる。凍結乾燥形もまた含まれる。全身投与はま
た経粘膜または経皮手段によって実施することもでき、また当該化合物を経口投
与することもできる。経粘膜または経皮投与の場合、透過しなければならない障
壁に対する適切な浸透剤が製剤中に用いられる。そのような製剤は当技術分野で
一般に知られており、経粘膜投与のためには例えば胆汁塩およびフシジン酸誘導
体が含まれる。さらに、浸透を促進するために洗剤を用いることができる。経粘
膜投与は経鼻スプレーの使用、または例えば座薬による。経口投与の場合、当該
化合物は通常の経口投与形、例えばカプセル、錠剤およびトニックとして製剤化
される。

【００３０】 "局所投与に適した製剤"とは局所的に患者に投与するために適した形態の製剤
を意味する。そのような製剤は、当技術分野で一般に知られているように局所軟
膏、膏薬、粉末、スプレーおよび吸入剤、ゲル（水またはアルコール基剤）、ク
リームとして提供するか、または絆創膏として用いるためにマトリックス基剤中
に取り込ませることができる（これは経皮障壁を通って化合物の制御放出を可能
にするであろう）。軟膏として製剤化される場合、活性成分は、パラフィンまた
は水に混合できる軟膏基剤とともに用いることができる。また別には、活性成分
は、水中油クリーム基剤とともにクリーム中で製剤化できる。目の局所投与に適
した製剤には点眼薬が含まれる。この場合活性成分は適切な担体、特に活性成分
のための水性溶媒中に溶解または懸濁される。口内の局所投与のために適した製
剤には、ロゼンジ（香料添加基剤（通常はショ糖およびアラビアゴムまたはトラ
ガカンス）中に活性成分を含む）；トローチ（不活性基剤（例えばゼラチンおよ
びグリセリンまたはショ糖およびアラビアゴム）中に活性成分を含む）；および
口内洗浄剤（適切な液状担体に活性成分を含む）が含まれる。

【００３１】 "膣投与に適した製剤"とは、患者に膣投与するために適した形態の製剤を意味
する。そのような製剤は、ペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、
泡沫またはスプレー製剤として提供され、これらは活性成分の他に当技術分野で
適切であることが知られているような担体を含む。

【００３２】 "ヘテロアルアルコキシカルボニル"はヘテロアルアルキル−Ｏ−ＣＯ−基を意
味し、ここでヘテロアルアルキル基は本明細書で規定されるとおりである。典型
的なヘテロアルアルコキシカルボニル基はチエニルメチルカルボニルである。
"ヘテロアルアルキル"はヘテロアリール−アルキル−基を意味し、ここでヘテロ
アリールおよびアルキルは本明細書で規定されたとおりである。好ましいヘテロ
アルアルキルは低級アルキル部分を含む。典型的なヘテロアルアルキル基はチエ
ニルメチル、ピリジルメチル、イミダゾリルメチルおよびピラジニルメチル含む
であろう。 "ヘテロアルアルキルチオ"はヘテロアルアルキル−Ｓ−基を意味し、ここでヘ
テロアルアルキル基は本明細書で規定されるとおりである。典型的なヘテロアル
アルキルチオ基はピリジルメチルチオである。

【００３３】 "ヘテロアリール"は単環式または多環式芳香族を意味し、約５から約１４の炭
素原子、好ましくは約５から約１０の炭素原子を含み、ここで環の１つまたは２
つ以上の炭素原子は炭素以外の異種元素、例えば窒素、酸素またはイオウである
。好ましい環式環のサイズは約５から約６の環原子を含む。"ヘテロアリール"は
また、同じかまたは異なる１つまたは２つ以上の"環系置換基"で置換でき、これ
ら環系置換基は本明細書で規定されるとおりである。ヘテロアリールの前の接頭
語としてのアザ、オキサまたはチオの名称は、少なくとも窒素、酸素またはイオ
ウが環原子としてそれぞれ存在すること示している。ヘテロアリールの窒素原子
は塩基性窒素原子もよく、さらにまた場合によって対応するＮ−オキシドに酸化
されてもよい。

【００３４】典型的なヘテロアリールおよび置換ヘテロアリール基には、ピラジニル、チエ
ニル、イソチアゾリル、オキサゾリル、ピラゾリル、フラザニル、ピロリル、１
，２，４−チアジアゾリル、ピリダジニル、キノキサリニル、フタラジニル、イ
ミダゾ〔１，２−ａ〕ピリジン、イミダゾ〔２，１−ｂ〕チアゾリル、ベンゾフ
ラザニル、アザインドリル、ベンズイミダゾリル、ベンゾチエニル、チノピリジ
ル、チノピリミジル、ピロロピリジル、イミダゾピリジル、ベンゾアザインドー
ル、１，２，４−トリアジニル、ベンズチアゾリル、フラニル、イミダゾリル、
インドリル、インドリジニル、イソキサゾリル、イソキノリニル、イソチアゾリ
ル、オキサジアゾリル、ピラジニル、ピリダジニル、ピラゾリル、ピリジル、ピ
リミジル、ピロリル、キナゾリニル、キノリニル、１，３，４−チアジアゾリル
、チアゾリル、チエニルおよびトリアゾリルが含まれる。好ましいヘテロアリー
ル基にはピラジニル、チエニル、ピリジル、ピリミジル、イソキサゾリルおよび
イソチアゾリルが含まれる。

【００３５】 "ヘテロアリールジアゾ"はヘテロアリール−ジアゾ−基を意味し、ここでヘテ
ロアリールおよびジアゾ基は本明細書で規定されるとおりである。 "ヘテロアリールスルホニル"はアリール−ＳＯ₂−基を意味し、ここでヘテロアリール基は本明細書で規定されるとおりである。 "ヘテロアリールスルフィニル"はアリール−ＳＯ−基を意味し、ここでヘテロ
アリール基は本明細書で規定されるとおりである。 "ヘテロアリールチオ"はアリール−Ｓ−基を意味し、ここでヘテロアリール基
は本明細書で規定されるとおりである。典型的なヘテロアリールチオ基にはピリ
ジルチオおよびピリミジニルチオが含まれる。

【００３６】 "ヘテロシクレニル"は非芳香族の単環式または多環式炭化水素を意味し、約３
から約１０の炭素原子、好ましくは５から約１０の炭素原子を含み、ここで環の
１つまたは２つ以上の炭素原子は炭素以外の異種成分、例えば窒素、酸素または
イオウ原子で、さらにこれらは少なくとも１つの炭素−炭素二重結合または炭素
−窒素二重結合を含む。好ましい環式環のサイズは約５から約６の環原子を含む
。ヘテロシクレニルの前の接頭語としてのアザ、オキサ、またはチアの名称は、
少なくとも窒素、酸素またはイオウ原子がそれぞれ環の原子として存在すること
を示している。このヘテロシクレニルは場合によって１つまたは２つ以上の環系
置換基で置換されていてもよく、ここで"環系置換基は本明細書で規定されるとおりである。ヘテロシクレニルの窒素原子は塩基性窒素原子でもよい。ヘテロシ
クレニルの窒素またはイオウ原子もまた場合によって、対応するＮ−オキシド、
Ｓ−オキシドまたはＳ，Ｓ−オキシドに酸化されてもよい。典型的な単環式アザ
ヘテロシクレニル基には１，２，３，４−テトラヒドロヒドロピリジン、１，２
−ジヒドロピリジル、１，４−ジヒドロピリジル、１，２，３，６−テトラヒド
ロピリジン、１，４，５，６−テトラヒドロピリミジン、２−ピロリニル、３−
ピロリニル、２−イミダゾリニル、２−ピラゾリニルなどが含まれる。典型的な
オキサヘテロシクレニル基には、３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン、ジヒドロフ
ラニルおよびフルオロジヒドロフラニルが含まれる。好ましいものはジヒドロフ
ラニルである。典型的な多環式オキサヘテロシクレニル基は７−オキサビシクロ
〔２．２．〕ヘプテニルである。好ましい単環式チアヘテロシクレニル環にはジ
ヒドロチオフェニルおよびジヒドロチオピラニルが含まれ、ジヒドロチオフェニ
ルがより好ましい。好ましい環系置換基にはアミジノ、ハロゲン、ヒドロキシ、
アルコキシカルボニルアルキル、カルボキシアルキルまたはＹ¹Ｙ²−Ｎ−（本明
細書で規定したとおり）が含まれる。

【００３７】 "ヘテロシクリル"は、単環式または多環式非芳香族飽和環を意味し、約３から
約１０の炭素原子、好ましくは約５から約１０の炭素原子を含み、環の炭素原子
の１つまたは２つ以上は炭素原子以外の異種元素、例えば窒素、酸素またはイオ
ウである。好ましい環式環の環サイズは約５から約６の環原子を含む。ヘテロシ
クリルの前の接頭語としてのアザ、オキサまたはチアの名称は、少なくとも１つ
の窒素、酸素またはイオウ原子がそれぞれ環原子として存在することを示してい
る。ヘテロシクリルは、場合によって１つまたは２つ以上の同じかまたは異なる
"環系置換基"（本明細書で規定されたとおり）によって置換されていてもよい。
ヘテロシクリルの窒素原子は塩基性窒素原子でもよい。ヘテロシクリルの窒素ま
たはイオウ原子もまた、場合によって対応するＮ−オキシド、Ｓ−オキシド、ま
たはＳ，Ｓ−オキシドに酸化されていてもよい。典型的な単環式ヘテロシクリル
環にはピペリジル、ピロリジニル、ピペラジニル、モルホリニル、チオモルホリ
ニル、チアゾリジニル、１，３−ジオキソラニル、１，４−ジオキサニル、テト
ラヒドロフラニル、テトラヒドロチオフェニル、テトラヒドロチオピラニルなど
が含まれる。好ましいヘテロシクリル基置換基にはアミジノ、ハロゲン、ヒドロ
キシ、アルコキシカルボニルアルキル、カルボキシアルキルまたはＹ¹Ｙ²Ｎ−（
本明細書で規定したとおり）が含まれる。

【００３８】 "水和物"とは、溶媒分子がＨ₂Ｏである溶媒和物を指す。 "ヒドロキシアルキル"はＨＯ−アルキル−基を意味し、ここでアルキルは本明
細書で規定したとおりである。好ましいヒドロキシアルキルは低級アルキルを含
む。典型的なヒドロキシアルキル基には、ヒドロキシメチルおよび２−ヒドロキ
シエチルが含まれる。 "吸湿性"とは吸収を意味し、物質の物理的または化学的特性に影響を及ぼすた
めに十分な獲得された水の量またはその状態を指す（Eds. J. Swarbrick & J.C.
Boylan, Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, Vol.10, p.33）。

【００３９】 "液体剤形"とは、患者に投与するべき活性化合物の投与量が液体形であること
を意味する。例えば医薬的に許容できる乳液、溶液、懸濁液、シロップおよびエ
リキシルを指す。活性化合物に加えて、液体剤形は、当技術分野で一般的に用い
られている不活性希釈剤、例えば水または他の溶媒、可溶化剤および乳化剤、例
えばエチルアルコール、イソプロピルアルコール、エチルカーボネート、酢酸エ
チル、ベンジルアルコール、ベンジルベンゾエート、プロピレングリコール、１
，３−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、油（特に綿実油、グラウン
ドナッツ油、トウモロコシ胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油およびゴマ油）、グリ
セロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコールおよび
ソルビタンの脂肪酸エステルまたはこれら物質の混合物などを含むことができる
。

【００４０】 "ＭＩＳＩＤ（ＰＬ−７）"は式Ｉの化合物を意味し、ここでＲ１はメチル基で
Ｒ２はイソプロピル基である。 "調節する"とは、直接（レセプターにリガンドとして結合することによって）
または間接的に（リガンドの前駆体として、または前駆体からリガンドの産生を
促進する誘発物質として）、ホルモン制御下で維持されている遺伝子の発現を誘
発するか、またはそのような制御下で維持されている遺伝子の発現を抑制する化
合物の能力を意味する。 "患者"とはヒトおよび他の哺乳類を包含する。

【００４１】 "ＰＥＧ−アスパラギナーゼ"とは、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）と共役
した蛋白質合成抑制化合物、アスパラギナーゼを指す。ポリエチレングリコール
は好ましくは約１０００から１０００００ダルトンの平均分子量、より好ましく
は用いられる個々の蛋白質合成抑制化合物の分子量に応じて４０００から４００
００ダルトンの平均分子量を有する。改変の目的は、生物活性を保持しながら、
非共役蛋白質合成抑制化合物を凌ぐインビボでの半減期をもち、さらに免疫原性
が減少した共役蛋白質を得ることであるので、当該ポリマーの分子量はこれらの
条件を最適にするために選択される。好ましくは、ＰＥＧホモポリマーは一方の
端がアルキル基で置換されるが、置換されなくてもよい。好ましくはこのアルキ
ル基はＣ₁−Ｃ₄アルキル基で、もっとも好ましくはメチル基である。当該ポリマ
ーはモノメチル置換ＰＥＧホモポリマーで、約４０００から４００００ダルトン
の分子量をもつ。最も好ましくは、ＰＥＧ−アスパラギナーゼはローヌプーラン
ローア（Rhｏne-Poulenc Rorer)からＯＮＣＡＳＰＡＲの名称で販売されている化合物である。

【００４２】 "医薬組成物"とは、本発明の化合物および、投与態様および剤形の性質に応じ
て以下を含む群から選ばれる少なくとも１つの成分を含有する組成物を意味する
：医薬的に許容できる担体、希釈剤、アジュバント、賦形剤、例えば保存料、充
填剤、崩壊剤、湿潤剤、乳化剤、分散剤、甘味剤、香料、抗菌剤、抗黴剤、潤滑
剤および懸濁剤。分散剤の例には、エトキシル化イソステアリルアルコール、ポ
リオキシエチレンソルビトールおよびソルビタンエステル、微晶質セルロース、
アルミニウムメタヒドロキシド、ベントナイト、寒天およびトラガカンスまたは
これら物質の混合物が含まれる。微生物の作用の防止は種々の抗菌および抗黴剤
、例えばパラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸などによって担
保される。さらに、等張剤（例えば糖、塩化ナトリウムなど）を加えることが望
ましい。注射可能な薬剤形態の長時間の吸収性は、吸収遅延剤（例えばアルミニ
ウムモノステアレートおよびゼラチン）を用いることによって得られる。適切な
担体、希釈剤、溶媒または賦形剤の例には、水、エタノール、ポリオール、それ
らの適切な混合物、植物油（例えばオリーブ油）および注射用有機エステル（例
えばオレイン酸エチル）が含まれる。賦形剤の例にはラクトース、ミルク糖、ク
エン酸ナトリウム、炭酸カルシウム、燐酸二カルシウムが含まれる。崩壊剤の例
には、澱粉、アルギン酸、およびある種の複合ケイ酸塩が含まれる。潤滑剤の例
には、ステアリン酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、タルクとともに高
分子量のポリエチレングリコールが含まれる。

【００４３】 "医薬的に許容できる"とは、適切な医学的判定においてヒトおよびより下等な
動物の細胞と接触して使用するために適切で、不適切な毒性、刺激、アレルギー
性反応などがなく合理的な利益／リスク比を有するものを意味する。 "医薬的に許容できる剤形"とは、本発明の化合物の剤形を意味し、例えば錠剤
、糖衣丸、粉末、エリキシル、シロップ、液体調製物（懸濁剤を含む）、スプレ
ー、吸入用錠剤、ロゼンジ、乳剤、溶液、顆粒、カプセル、および座薬の他に注
射用液体調製物（リポソーム調製物を含む）が含まれる。技術および製剤につい
ては一般に成書に見出される（"Remington's Pharmaceutical Sciences", Mack
Publishing Co., Easton, PA, 最新版）。

【００４４】本明細書で用いられる"医薬的に許容できるプロドラッグ"とは、適切な医学的
判定においてヒトおよびより下等な動物の組織と接触して使用するために適切で
、不適切な毒性、刺激、アレルギー性反応などがなく合理的な利益／リスク比を
有し、それらの目的とされた用途で有効な本発明の有用な化合物のプロドラッグ
とともに、可能な場合は本発明の化合物の両性イオン形を意味する。"プロドラッグ"という用語は、インビボで迅速に形質を変換させて（例えば血中での加水分解によって）本発明の親化合物を生じる化合物を意味する。（代謝による切断
によって）インビボで迅速に変換する官能基は、本発明の化合物のカルボキシル
基と反応する１分類の基を構成する。それらにはアルカノイル（例えばアセチル
、プロピオニル、ブチリルなど）、未置換および置換アロイル（例えばベンゾイ
ルおよび置換ベンゾイル）、アルコキシカルボニル（例えばエトキシカルボニル
）、トリアルキルシリル（例えばトリメチル−およびトリエチシリル）、ジカル
ボン酸（例えばスクシニル）により形成されるモノエステルなどが含まれるが、
ただしこれらに限定されない。

【００４５】本発明で有用な化合物の代謝により切断可能な基がインビボで切断される容易
さのために、そのような基をもつ化合物はプロドラッグとして機能する。代謝に
より切断可能な基をもつ化合物は、代謝により切断可能な基が存在することによ
り、親化合物が有する可溶性および／または吸収速度の強化の結果として生体利
用性の改善を示すことができるという利点を有する。プロドラッグについての完
全な考察は以下の文献で提供される："Design of Prodrugs", H. Bundgaard, ed
., Elsevier,(1985); "Methods in Enzymology", K. Widder etal., Ed., Acade
mic Press, 42, p.309-396(1985); "A Textbook of Drug Design asnd Developm
ent", Krogsgaard-Larsen & H. Bundgaard, ed., Chapter 5; "Design and Appl
ications of Prodrugs", p.113-191(1991); "Advanced Drug Delivery Reviews"
, H. Bundgard, 8, p.1-38(1992); Journal of Pharmaceutical Sciences, 77,
p.285(1988); Chem. Pharm. Bull., N. Nakaya et al., 32, p.692(1984); "Pro
-drugs as Novel Delivery Systems", T. Higuchi & V. Stella, Vol.14 of the
A.C.S. Symposium Series, and Bioreversible Carriers in Drug Design, Edw
ard B. Roche, ed., American Pharmaceutical Association and Pergamon Pres
s,(1987)（これらの文献は参照により本明細書に含まれる）。

【００４６】 "医薬的に許容できる塩"とは、本発明の化合物の比較的無毒な無機および有機
酸付加塩、並びに塩基付加塩を意味する。これらの塩は、本化合物の最終的な単
離および精製中にその場で（インシトゥで）調製できる。特に、酸付加塩は、そ
の遊離塩基の形態の精製化合物を適切な有機または無機酸と別々に反応させ、こ
のようにして形成された塩を単離することによって調製できる。典型的な酸付加
塩には、ヒドロブロミド、塩酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩、酢酸
塩、オキサレート、バリレート、オリエート、パルミテート、ステアレート、ラ
ウレート、ボレート、安息香酸塩、乳酸塩、リン酸塩、トシレート、クエン酸塩
、マレイン酸塩、フマール酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、ナフチレート、メシレ
ート、グルコヘプトネート、ラクチオビオネート、スルファメート、マロネート
、サリチル酸塩、プロピオネート、メチレン−ビス−ヒドロキシナフトエート、
ゲンチシン酸塩、イセチオネート、ジ−ｐ−トルオイルタルタレート、メタン−
スルホネート、エタンスルホネート、ベンゼンスルホネート、ｐ−トルエンスル
ホネート、シクロヘキシルスルファメートおよびキナテスラウリルスルホネート
などが含まれる（例えば以下の文献を参照されたい：S.M. Berge et al., "Phar
maceutical Salts", J. Pharm. Sci., 66:1-19(1977)、この文献は参照により本
明細書に含まれる）。

【００４７】塩基付加塩はまた、遊離酸の形態の精製化合物を適切な有機または無機塩基と
別々に反応させ、このようにして形成された塩を単離することによって調製でき
る。塩基付加塩には医薬的に許容できる金属塩およびアミン塩が含まれる。適切
な金属塩にはナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、バリウム塩、亜鉛塩、
マグネシウム塩およびアルミニウム塩が含まれる。ナトリウムおよびカリウム塩
が好ましい。適切な無機塩基付加塩は金属塩基から調製できる。これらには水素
化ナトリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水酸化
アルミニウム、水酸化リチウム、水酸化マグネシウム、水酸化亜鉛が含まれる。
適切なアミン塩基付加塩は、安定な塩を形成するために十分な塩基性をもつアミ
ンから調製できる。これらのアミンには、その低い毒性および医学的用途での受
容性のために医化学領域でしばしば用いられるアミンが含まれ、アンモニア、エ
チレンジアミン、Ｎ−メチル−グルカミン、リジン、アルギニン、オルニチン、
コリン、Ｎ，Ｎ'−ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロケイン、ジエタノールアミン、プロケイン、Ｎ−ベンジルフェネチルアミン、ジエチルアミン、ピ
ペラジン、トリス（ヒドロキシメチル）−アミノメタン、テトラメチルアンモニ
ウムヒドロキシド、トリエチルアミン、ジベンジルアミン、エフナミン、デヒド
ロアビエチルアミン、Ｎ−エチルピペリジン、ベンジルアミン、テトラメチルア
ンモニウム、テトラエチルアンモニウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリ
メチルアミン、エチルアミン、塩基性アミノ酸（例えばリジンおよびアルギニン
）、およびジシクロヘキシルアミンなどが含まれる。

【００４８】 "環系置換基"とは、芳香族または非芳香族環系に結合した置換基を意味し、以
下を含む：水素、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルアルキル、ヘテロア
ルアルキル、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキル、アルコキシ、アリールオキシ、
アリアルコキシ、アシル、アロイル、ハロ、ニトロ、シアノ、カルボキシ、アル
コキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、アルアルコキシカルボニル、ア
ルキルスルホニル、アルールスルホニル、ヘテロアリールスルホニル、アルキル
スルホニル、アリールスルフィニル、ヘテロアリールスルフィニル、アルキルチ
オ、アリールチオ、ヘテロアリールチオ、アルアルキルチオ、ヘテロアルアルキ
ルチオ、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクリル、アリールジアゾ
、ヘテロアリールジアゾ、Ｙ¹Ｙ²Ｎ−、Ｙ¹Ｙ²Ｎ−アルキル−、Ｙ¹Ｙ²ＮＣＯ−
またはＹ¹Ｙ²ＮＳＯ₂−、ここでＹ¹およびＹ²はそれぞれ別個に水素、場合によって置換されたアルキル、場合によって置換されたアリール、場合によって置換
されたアルアルキルまたは、場合によって置換されたヘテロアルアルキル、また
は、置換基がＹ¹Ｙ²Ｎ−の場合はＹ¹およびＹ²のうちの１つは本明細書で規定さ
れたアシルまたはアロイルで、他方のＹ¹およびＹ²は以前に規定されたとおりで
、さらに置換基がＹ¹Ｙ²ＮＣＯ−またはＹ¹Ｙ²ＮＳＯ₂−の場合は、Ｙ¹およびＹ ² はまたＮと一緒になって、それによりＹ¹およびＹ²は連結され４から７員のヘテロシクリルまたはヘテロシクレニルを形成する。環系が飽和または部分的に飽
和されている場合、"環系置換基"はさらにメチレン（Ｈ₂Ｃ＝）、オキソ（Ｏ＝）、チオキソ（Ｓ＝）を含む。

【００４９】 "固形剤形"とは、本発明の有用な化合物で構成された剤形が固形、例えばカプ
セル、錠剤、ピル、粉末、糖衣丸または顆粒であることを意味する。そのような
固形剤形では、本発明の有用な化合物は以下の少なくとも１つの薬剤と混合され
る：不活性な通常の賦形剤（または担体）、例えばクエン酸ナトリウムまたは燐
酸二カルシウムまたは（ａ）充填剤もしくは膨張剤、例えば澱粉、ラクトース、
ショ糖、グルコース、マンニトールおよび珪酸、（ｂ）結合剤、例えばカルボキ
シメチルセルロース、アライネート、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、ショ糖
およびアラビアゴム、（ｃ）保湿剤、例えばグリセロール、（ｄ）崩壊剤、例え
ば寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモまたはタピオカ澱粉、アルギン酸、ある種
の複合ケイ酸塩および炭酸ナトリウム、（ｅ）溶解遅延剤、例えばパラフィン、
（ｆ）吸収促進剤、例えば四級アンモニウム化合物、（ｇ）湿潤剤、例えばセチ
ルアルコールおよびグリセロールモノステアレート、（ｈ）吸着剤、例えばカオ
リンおよびベントナイト、（ｉ）潤滑剤、例えばタルク、ステアリン酸カルシウ
ム、ステアリン酸マグネシウム、固形ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナ
トリウム、（ｊ）乳白剤、（ｋ）緩衝剤、および遅延態様で腸管の一定の部分に
本発明の有用な化合物を放出させる薬剤。

【００５０】 "溶媒和物"とは、本発明の化合物と１つまたは２つ以上の溶媒分子との物理的
結合を意味する。この物理的結合には水素結合が含まれる。ある種の事例では、
例えば１つまたは２つ以上の溶媒分子が結晶性個体の結晶格子内に取り込まれて
いる場合は、溶媒和物は単離することができる。"溶媒和物"は溶液相および単離
可能溶媒和物の両方を包含する。典型的な溶媒和物には、水和物、エタノレート
、メタノレートなどが含まれる。具体的な実施態様では、"約"または"ほぼ"という用語は、ある与えられた値ま
たは範囲の２０％以内、好ましくは１０％以内、より好ましくは５％以内を意味
する。

【００５１】好ましい実施態様本発明の好ましい実施態様は、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染を抑制ま
たは治療する方法で、本方法は、ＰＥＧ−アスパラギナーゼ化合物を含む医薬的
に許容できる組成物の有効量を、その必要性がある患者に投与することを含む。本発明の別の好ましい実施態様は、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染を抑
制または治療する方法で、本方法は、ＰＥＧ−アスパラギナーゼ化合物および少
なくとも１つのプロテアーゼインヒビター化合物を含む医薬的に許容できる組成
物の有効量を、その必要性がある患者に投与することを含む。

【００５２】本発明の別の好ましい実施態様は、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染を抑
制または治療する方法で、本方法は、ＰＥＧ−アスパラギナーゼ化合物および少
なくとも１つのＨＩＶ逆転写酵素抑制化合物を含む医薬的に許容できる組成物の
有効量を、その必要性がある患者に投与することを含む。本発明の別の好ましい実施態様は、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染を抑
制または治療する方法で、本方法は、ＰＥＧ−アスパラギナーゼ化合物および少
なくとも１つのリボヌクレオチドレダクターゼインヒビター化合物を含む医薬的
に許容できる組成物の有効量を、その必要性がある患者に投与することを含む。

【００５３】本発明の別の好ましい実施態様は、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染を抑
制または治療する方法で、本方法は、ＰＥＧ−アスパラギナーゼ化合物、少なく
とも１つのプロテアーゼインヒビター化合物および少なくとも１つのリボヌクレ
オチドレダクターゼインヒビター化合物を含む医薬的に許容できる組成物の有効
量を、その必要性がある患者に投与することを含む。本発明の別の好ましい実施態様は、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染を抑
制または治療する方法で、本方法は、ＰＥＧ−アスパラギナーゼ化合物、少なく
とも１つのプロテアーゼインヒビター化合物および少なくとも１つのＨＩＶ逆転
写酵素インヒビター化合物を含む医薬的に許容できる組成物の有効量を、その必
要性がある患者に投与することを含む。

【００５４】本発明の別の好ましい実施態様は、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染を抑
制または治療する方法で、本方法は、ＰＥＧ−アスパラギナーゼ化合物、少なく
とも１つのリボヌクレオチドレダクターゼインヒビター化合物および少なくとも
１つのＨＩＶ逆転写酵素インヒビター化合物を含む医薬的に許容できる組成物の
有効量を、その必要性がある患者に投与することを含む。本発明の別の好ましい実施態様は、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染を抑
制または治療する方法で、本方法は、ＰＥＧ−アスパラギナーゼ化合物、少なく
とも１つのプロテアーゼインヒビター化合物、少なくとも１つのリボヌクレオチ
ドレダクターゼインヒビター化合物および少なくとも１つのＨＩＶ逆転写酵素イ
ンヒビター化合物を含む医薬的に許容できる組成物の有効量を、その必要性があ
る患者に投与することを含む。

【００５５】本発明の別の好ましい実施態様は、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染を抑
制または治療する方法で、本方法は、ＰＥＧ−アスパラギナーゼ化合物、並びに
プロテアーゼインヒビター化合物、リボヌクレオチドレダクターゼインヒビター
化合物およびＨＩＶ逆転写酵素インヒビター化合物から成る群から選ばれる少な
くとも１つの化合物を含む医薬的に許容できる組成物の有効量を、その必要性が
ある患者に投与することを含む。本発明の別の好ましい実施態様は、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染を抑
制または治療する方法で、本方法は、少なくとも１つの下記式Ｉのリボヌクレオ
チドレダクターゼインヒビター化合物、またはその医薬的に許容できる塩、その
Ｎ−オキシド、その溶媒和物、その酸ビオイソステアもしくはそのプロドラッグ
含む医薬的に許容できる組成物の有効量を、その必要性がある患者に投与するこ
とを含む：

【００５６】

【００５７】式中、Ｒ１はアルキル、アルケニル、アルキニルまたは電子吸引基；およびＲ２はアルキル、アルケニル、アルキニルである。

【００５８】本発明のまた別の好ましい実施態様はＨＩＶの産生を抑制するか、またはＨＩ
Ｖの蔓延を制限する方法で、本方法は、ＰＥＧ−アスパラギナーゼ化合物並びに
場合によってプロテアーゼインヒビター化合物、リボヌクレオチドレダクターゼ
インヒビター化合物およびＨＩＶ逆転写酵素インヒビター化合物から成る群から
選ばれる少なくとも１つの化合物を含む医薬的に許容できる組成物にＨＩＶ感染
細胞集団を暴露することを含む。本発明のまた別の好ましい実施態様はＨＩＶ逆転写酵素活性を抑制する方法で
、本方法は、ＰＥＧ−アスパラギナーゼ化合物並びに場合によってプロテアーゼ
インヒビター化合物、リボヌクレオチドレダクターゼインヒビター化合物および
ＨＩＶ逆転写酵素インヒビター化合物から成る群から選ばれる少なくとも１つの
化合物を含む組成物にＨＩＶ逆転写酵素を接触させることを含む。

【００５９】本発明のまた別の好ましい実施態様はＨＩＶ逆転写酵素活性を抑制する方法で
、本方法は、式Ｉの化合物を含む組成物にＨＩＶ逆転写酵素を接触させることを
含む。本発明のまた別の好ましい実施態様はＨＩＶ逆転写酵素活性を抑制する方法で
、本方法は、下記式をもつＭＩＳＩＤを含む組成物にＨＩＶ逆転写酵素を接触さ
せることを含む。

【００６０】

【００６１】本発明のまた別の好ましい実施態様はＨＩＶ逆転写酵素活性を抑制する方法で
、本方法は、ＰＥＧ−アスパラギナーゼ化合物を含む組成物にＨＩＶ逆転写酵素
を接触させることを含む。本発明のまた別の好ましい実施態様はＨＩＶ−ＲＮＡ産生を選択的に抑制する
方法で、本方法は、ＰＥＧ−アスパラギナーゼ化合物および少なくとも１つのプ
ロテアーゼインヒビター化合物を含む医薬的に許容できる組成物にＨＩＶ感染細
胞集団を暴露することを含む。本発明のまた別の好ましい実施態様はＨＩＶ−ＲＮＡ産生を選択的に抑制する
方法で、本方法は、ＰＥＧ−アスパラギナーゼ化合物およびサキナビルを含む医
薬的に許容できる組成物にＨＩＶ感染細胞集団を暴露することを含む。

【００６２】本発明のまた別の好ましい実施態様はＨＩＶ−ＲＮＡ産生を選択的に抑制する
方法で、本方法は、ＰＥＧ−アスパラギナーゼ化合物、並びに場合によってプロ
テアーゼインヒビター化合物、リボヌクレオチドレダクターゼインヒビター化合
物およびＨＩＶ逆転写酵素抑制化合物から成る群から選ばれる少なくとも１つの
化合物を含む組成物にＨＩＶ感染細胞集団を接触させることを含む。本発明のまた別の好ましい実施態様はＨＩＶ−ＲＮＡ産生を抑制する方法で、
本方法は、式Ｉの化合物を含む組成物にＨＩＶ感染細胞集団を接触させることを
含む。

【００６３】本発明のまた別の好ましい実施態様はＨＩＶ−ＲＮＡ産生を抑制する方法で、
本方法は、ＭＩＳＩＤを含む組成物にＨＩＶ感染細胞集団を接触させることを含
む。本発明のまた別の好ましい実施態様はＨＩＶ−ＲＮＡ産生を抑制する方法で、
本方法は、ＰＥＧ−アスパラギナーゼ化合物を含む組成物にＨＩＶ感染細胞集団
を接触させることを含む。本発明のまた別の好ましい実施態様にしたがえば、プロテアーゼインヒビター
化合物は、サキナビル、ネルフィナバー、エンジノビア、インジナバー、リトナ
バー、クリキシバン、ビラセプト、ノルバーおよびＶＸ−４７８から選ばれる。

【００６４】本発明のより好ましい実施態様にしたがえば、プロテアーゼインヒビター化合
物はサキナビルである。本発明の別の好ましい実施態様にしたがえば、ＨＩＶ逆転写酵素抑制化合物は
、ＡＺＴ（レトロバー、ジドブジン）、ｄｄＩ（ビデクス、ジダノシン）、ｄｄ
Ｃ（ヒビド、ザルシタビン）、ｄ４Ｔ（ゼリト、スタブジン）および３ＴＣ（エ
ピバー、ラミブジン）から選ばれる。本発明の別の好ましい実施態様にしたがえば、ＨＩＶ逆転写酵素抑制物質はＡ
ＺＴである。

【００６５】本発明の別の好ましい実施態様にしたがえば、リボヌクレオチドレダクターゼ
インヒビター化合物は以下から選ばれる：ヒドロキシウレア（ＨＵ）、ＢＷ−３
４８Ｕ８７、３−アミノピリジン−２−カルボキサアルデヒドチオセミカルバゾ
ン（３−ＡＰ）アミドクス（ＶＦ２３６；ＮＳＣ−３４３３４１；Ｎ，３，４−
トリヒドロキシベンゼンンカルボキシイミドアミド）、ＢＩＬＤ１２５７（２−
ベンジル−３−フェニルプロピオニル−Ｌ−（Ｎ−メチル）バリル−Ｌ−３（メ
チル）バリル−Ｌ−（Ｎ４、Ｎ４−テトラメチレン）アスパラギニル−Ｌ−（３
，３−テトラメチレン）アスパルチル−Ｌ−（４−メチル）ロイシン）、ＢＩＬ
Ｄ１３５７（２−ベンジル−３−フェニルプロピオニル−Ｌ−（Ｎ−メチル）バ
リル−Ｌ−３−（メチル）バリル−Ｌ−（Ｎ４，Ｎ４−テトラメチレン）アスパ
ラギニル−Ｌ−（３，３−テトラメチレンアスパラギン酸１−〔１（Ｒ）−エチ
ル−２，２−ジメチルプロピルアミド）〕、ＢＩＬＤ１６３３、ＢＩＬＤ７３３
（３−フェニルプロピオニル−Ｌ−（Ｎ−メチル）バリル−Ｌ−〔３−メチル）
バリル−Ｌ−〔３−（ピロリジン−１−イルカルボニル）〕アラニル−Ｌ−（１
−カルボキシシクロペンチル）グリシル−Ｌ−（４−メチル）ロイシノール）、
ＢＩＬＤ１２６３（２−ベンジル−３−フェニルプロピオニル−Ｌ−（Ｎ−メチ
ル）バリル−Ｌ−３−（メチル）バリル−Ｌ−（Ｎ４，Ｎ４−テトラメチレン）
アスパラギニル−Ｌ−（３，３−テトラメチレン）アスパルチル−Ｌ−（４−メ
チル）ロイシノール）、ＢＩＬＤ１３５１（１−〔１（Ｓ）−〔５（Ｓ）−〔３
−〔（オール−シス）−２，６−ジメチルシクロヘキシル〕ウレイド〕−２（Ｓ
）−（３，３−ジメチル−２−オキソブチル）−６，６−ジメチル−４−オキソ
ヘプタノイルアミノ〕−１−〔１（Ｒ）−エチル−２，２−ジメチルプロピルカ
ルバモル〕メチル〕シクロペンタンカルボン酸〕）、ＣＩ−Ｆ−アラＡ（２−ク
ロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−ベータ−Ｄ−アラビノフラノシル）
アデニン、ＤＡＨ（Ｄ−アスパルティック−ベータ−ヒドロキサメート）、ＤＤ
ＦＣ（２'−デオキシ−２'，２'−ジフルオロシチジン）、Ｄｉｄｏｘ（ＶＦ１４７；ＮＳＣ３２４３６０；Ｎ，３，４−トリヒドロキシベンズアミド）、Ｅｕ
ｒｄ（３'−エチニルウリジン），ＧＴＩ２０４０、ＧＴＩ２５０１、ＩＭＨＡＧ（１−イソキノリルメタン−Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ'−アミノグアニン）、ＬＹ２０７７０２（２'、２'−ジフルオロ−２'−デオキシリボフラノシル−２，６ −ジアミノプリン）、ＬＹ２９５５０１（Ｎ−〔〔３，４−ジクロロフェニル）
アミノ〕カルボニル〕２，３−ジヒドロ−５−ベンゾフランスルホンアミド）、
ＭＤＬ１０１７３１（ＦＭｄＣ；ＫＷ２３３１；（２Ｅ）−２'−デオキシ−２'
−フルオロメチレン）シチジン）、パラバクチン、スロフェナー（ＬＹ１８６６
４１；Ｎ−〔〔（４−クロロフェニル）アミノ〕カルボニル〕−２，３−ジヒド
ロ−１Ｈ−インデン−５−スルホンアミド）、ＴＡＳ１０６（Ｅｃｙｄ；３'− エチニルシチジン）、トリアピン（ＯＣＸ１９１；ＯＣＸ０１９１）、トリミド
クス（ＶＦ２３３；Ｎ，３−４，５−テトラヒドロキシベンゼンカルボキシイミ
ドアミド）、および下記式Ｉの化合物。

【００６６】本発明の別の好ましい実施態様にしたがえば、リボヌクレオチドレダクターゼ
インヒビター化合物は式Ｉの化合物である。本発明の別の好ましい実施態様にしたがえば、本発明は、ヒト免疫不全ウイル
ス（ＨＩＶ）感染を抑制または治療する方法を目的とし、本方法は、式Ｉの化合
物、またはその医薬的に許容できる塩、そのＮ−オキシド、その溶媒和物、その
酸ビオイソステアもしくはそのプロドラッグの医薬的に有効な量をそのような治
療を必要としている患者に投与することを含む。式Ｉの式中、Ｒ１は低級アルキ
ル、低級アルケニル、低級アルキニル、または電子吸引基で、さらにＲ２は低級
アルキル、低級アルケニル、低級アルキニルである。

【００６７】本発明の別の好ましい実施態様にしたがえば、本発明は、ヒト免疫不全ウイル
ス（ＨＩＶ）感染を抑制または治療する方法を目的とし、本方法は、式Ｉの化合
物、またはその医薬的に許容できる塩、そのＮ−オキシド、その溶媒和物、その
酸ビオイソステアもしくはそのプロドラッグの医薬的に有効な量をそのような治
療を必要としている患者に投与することを含む。式Ｉの式中、Ｒ１は低級アルキ
ル、低級アルケニル、低級アルキニル、またはハロゲン基で、さらにＲ２は低級
アルキル、低級アルケニル、低級アルキニルである。

【００６８】本発明の別の好ましい実施態様にしたがえば、本発明は、ヒト免疫不全ウイル
ス（ＨＩＶ）感染を抑制または治療する方法を目的とし、本方法は、式Ｉの化合
物、またはその医薬的に許容できる塩、そのＮ−オキシド、その溶媒和物、その
酸ビオイソステアもしくはそのプロドラッグの医薬的に有効な量をそのような治
療を必要としている患者に投与することを含む。式Ｉの式中、Ｒ１は低級アルキ
ルまたはハロゲン基で、さらにＲ２は低級アルキルである。本発明の別の好ましい実施態様にしたがえば、本発明は、ヒト免疫不全ウイル
ス（ＨＩＶ）感染を抑制または治療する方法を目的とし、本方法は、式Ｉの化合
物、またはその医薬的に許容できる塩、そのＮ−オキシド、その溶媒和物、その
酸ビオイソステアもしくはそのプロドラッグの医薬的に有効な量をそのような治
療を必要としている患者に投与することを含む。式Ｉの式中、Ｒ１はハロゲン基
で、さらにＲ２は低級アルキルである。

【００６９】本発明の別の好ましい実施態様にしたがえば、本発明は、ヒト免疫不全ウイル
ス（ＨＩＶ）感染を抑制または治療する方法を目的とし、本方法は、式Ｉの化合
物、またはその医薬的に許容できる塩、そのＮ−オキシド、その溶媒和物、その
酸ビオイソステアもしくはそのプロドラッグの医薬的に有効な量をそのような治
療を必要としている患者に投与することを含む。式Ｉの式中、Ｒ１は低級アルキ
ルで、さらにＲ２は低級アルキルである。本発明の別の好ましい実施態様にしたがえば、本発明は、ヒト免疫不全ウイル
ス（ＨＩＶ）感染を抑制または治療する方法を目的とし、本方法は、式Ｉの化合
物、またはその医薬的に許容できる塩、そのＮ−オキシド、その溶媒和物、その
酸ビオイソステアもしくはそのプロドラッグの医薬的に有効な量をそのような治
療を必要としている患者に投与することを含む。式Ｉの式中、Ｒ１は臭素または
塩素原子で、さらにＲ２はメチル基またはイソプロピル基である。

【００７０】本発明の別の好ましい実施態様にしたがえば、本発明は、ヒト免疫不全ウイル
ス（ＨＩＶ）感染を抑制または治療する方法を目的とし、本方法は、式Ｉの化合
物、またはその医薬的に許容できる塩、そのＮ−オキシド、その溶媒和物、その
酸ビオイソステアもしくはそのプロドラッグの医薬的に有効な量をそのような治
療を必要としている患者に投与することを含む。式Ｉの式中、Ｒ１はメチル基で
、さらにＲ２は低級アルキルである。本発明の別の好ましい実施態様にしたがえば、本発明は、ヒト免疫不全ウイル
ス（ＨＩＶ）感染を抑制または治療する方法を目的とし、本方法は、式Ｉの化合
物、またはその医薬的に許容できる塩、そのＮ−オキシド、その溶媒和物、その
酸ビオイソステアもしくはそのプロドラッグの医薬的に有効な量をそのような治
療を必要としている患者に投与することを含む。式Ｉの式中、Ｒ１はメチル基で
、さらにＲ２はイソプロピル基である。

【００７１】本発明の別の好ましい実施態様にしたがえば、蛋白質合成抑制化合物はＰＥＧ
−アスパラギナーゼである。本発明の別の好ましい実施態様にしたがえば、プロテアーゼインヒビター化合
物はサキナビルまたはエンジノビアである。本発明の別の好ましい実施態様にしたがえば、プロテアーゼインヒビター化合
物はサキナビルである。本発明の別の好ましい実施態様にしたがえば、ＨＩＶ逆転写酵素インヒビター
化合物はＡＺＴおよび３−ＴＣから選ばれる。本発明の別の好ましい実施態様にしたがえば、リボヌクレオチドレダクターゼ
インヒビター化合物はＭＩＳＩＤ（ＰＬ−７）である。

【００７２】本発明の別の好ましい実施態様にしたがえば、本発明にしたがって使用される
化合物は同時併用で投与される。本発明の別の好ましい実施態様にしたがえば、本発明にしたがって使用される
化合物は連続的に投与される。本発明の別の好ましい実施態様にしたがえば、本発明にしたがって使用される
化合物は連続的に、好ましくはプロテアーゼインヒビターを投与し、続いてＰＥ
Ｇ−アスパラギナーゼ化合物が投与される。本発明の別の好ましい実施態様にしたがえば、本発明にしたがって使用される
化合物は連続的に、好ましくはサキナビルを投与し、続いてＰＥＧ−アスパラギ
ナーゼ化合物が投与される。本発明の別の好ましい実施態様にしたがえば、本発明にしたがって使用される
化合物は連続的に、好ましくはサキナビル、続いてＰＥＧ−アスパラギナーゼ化
合物、続いてＨＩＶ逆転写酵素抑制化合物およびリボヌクレオチドレダクターゼ
インヒビター化合物から成る群から選ばれる１つまたは２つ以上の化合物の順で
投与される。

【００７３】本発明の別の好ましい実施態様にしたがえば、本発明は、ヒト免疫不全ウイル
ス（ＨＩＶ）感染を抑制または治療する方法を目的とし、本方法は、ＰＥＧ−ア
スパラギナーゼ化合物並びに、プロテアーゼインヒビター化合物、リボヌクレオ
チドレダクターゼインヒビター化合物およびＨＩＶ逆転写酵素抑制化合物から成
る群から選ばれる少なくとも１つの化合物を相乗的に併用して、その必要がある
患者に投与することを含む。本発明の別の好ましい実施態様にしたがえば、本発明は、ヒト免疫不全ウイル
ス（ＨＩＶ）感染を抑制または治療する方法を目的とし、本方法は、ＰＥＧ−ア
スパラギナーゼ化合物および少なくとも１つのプロテアーゼインヒビター化合物
を相乗的に併用してその必要がある患者に投与することを含む。本発明の別の好ましい実施態様にしたがえば、本発明は、ヒト免疫不全ウイル
ス（ＨＩＶ）感染を抑制または治療する方法を目的とし、本方法は、ＰＥＧ−ア
スパラギナーゼ化合物および少なくとも１つのリボヌクレオチドレダクターゼイ
ンヒビター化合物を相乗的に併用して、その必要がある患者に投与することを含
む。

【００７４】本発明の別の好ましい実施態様にしたがえば、本発明は、ヒト免疫不全ウイル
ス（ＨＩＶ）感染を抑制または治療する方法を目的とし、本方法は、ＰＥＧ−ア
スパラギナーゼ化合物および少なくとも１つのＨＩＶ逆転写酵素抑制化合物を相
乗的に併用してその必要がある患者に投与することを含む。本発明の別の好ましい実施態様にしたがえば、本発明は、ヒト免疫不全ウイル
ス（ＨＩＶ）感染を抑制または治療する方法を目的とし、本方法は、ＰＥＧ−ア
スパラギナーゼ化合物および少なくとも１つのプロテアーゼインヒビター化合物
および少なくとも１つのリボヌクレオチドレダクターゼインヒビター化合物を相
乗的に併用して、その必要がある患者に投与することを含む。

【００７５】本発明の別の好ましい実施態様にしたがえば、本発明は、ヒト免疫不全ウイル
ス（ＨＩＶ）感染を抑制または治療する方法を目的とし、本方法は、ＰＥＧ−ア
スパラギナーゼ化合物および少なくとも１つのプロテアーゼインヒビター化合物
および少なくとも１つのＨＩＶ逆転写酵素抑制化合物を相乗的に併用して、その
必要がある患者に投与することを含む。本発明の別の好ましい実施態様にしたがえば、本発明は、ヒト免疫不全ウイル
ス（ＨＩＶ）感染を抑制または治療する方法を目的とし、本方法は、ＰＥＧ−ア
スパラギナーゼ化合物および少なくとも１つのリボヌクレオチドレダクターゼイ
ンヒビター化合物および少なくとも１つのＨＩＶ逆転写酵素抑制化合物を相乗的
に併用して、その必要がある患者に投与することを含む。

【００７６】本発明のさらに別の目的は、複数の活性成分（担体有りまたは担体無し）を含
むキットを提供することである。本キットは、それらを合わせて本発明の新規な
併用療法を実施するために有効に用いることができる。本発明のまた別の目的は、本発明にしたがって利用できる複数の活性成分を含
むために、それだけでまたはそれ自体で有益な併用療法で利用できる新規な医薬
組成物を提供することである。

【００７７】理論に拘束されることは望まないが、本発明は以下のメカニズムによって機能
すると考えられる。Ｔ細胞は、哺乳類の体の中でＨＩＶウイルスが感染する主な
細胞である。Ｔ細胞はＨＩＶ感染の場合のウイルス工場であると考えられる。新
しいＴ細胞に再感染するためには、ＨＩＶウイルスはＴ細胞に侵入し複製しなけ
ればならない。このウイルスの複製および被包化プロセスには細胞内酵素の参画
が必要である。ＰＥＧ−アスパラギナーゼ（胸腺系細胞に固有の蛋白質合成抑制
化合物）は、コンピテント複製およびＨＩＶウイルスの組み立てに必要な酵素の
合成を抑制する場合、並びにＨＩＶウイルスに対する他の抗増殖作用を提供する
場合に非常に有用であることが示されている。さらに、ＰＥＧ−アスパラギナー
ゼ並びに、プロテアーゼインヒビター化合物、ＨＩＶ−ＲＴインヒビター化合物
およびリボヌクレオチドレダクターゼインヒビター化合物から成る群から選ばれ
る１つまたは２つ以上の化合物の併用は相乗作用を示し、長期間にわたってウイ
ルス負荷を減少させる。

【００７８】ＰＥＧ−アスパラギナーゼが機能すると考えられている細胞内メカニズムは、
アミノ酸のアスパラギン（Ａｓｎ）の供給を妨げることによって、ＨＩＶ感染Ｔ
細胞が細胞内蛋白質およびウイルス蛋白質を合成するのを阻害するものである。
したがって、感染細胞をＰＥＧ−アスパラギナーゼのようなアスパラギナーゼで
処理することによって、細胞性およびウイルス性蛋白質の合成が抑制される。こ
れらの蛋白質は、プロウイルス（哺乳類ＤＮＡに組み込まれたウイルス由来ＤＮ
Ａ）からのウイルスコード遺伝子の転写および翻訳に必要である。ウイルス由来
ＲＮＡがいったんＲＮＡポリメラーゼによってプロウイルスから転写されると、
その後に続く２つの経路が存在する。このＲＮＡはリボヌクレオチドｓによって
用いられ、ウイルス由来蛋白質（例えばＨＩＶ−ＲＴ）を製造する。後に、同じ
ＲＮＡはｒｅｖ−蛋白質によって加工されＨＩＶ−１ゲノムＲＮＡとなる。この
ＲＮＡは既に合成されているＨＩＶ−ＲＴと結合し、そのような２つの分子が一
緒に存在するとき、それらは新規なＨＩＶウイルスのゲノム物質を構成する。Ｈ
ＩＶプロテアーゼは、ウイルス由来蛋白質を処理して最終的なウイルスパッケー
ジングとする際に必要である。新しいＨＩＶ−１ウイルスは、続いて新しい完全
なウイルスとしてＴ細胞から発芽することができる。したがって、ＰＥＧ−アス
パラギナーゼのようなアスパラギナーゼと併用されるプロテアーゼインヒビター
化合物は、ＨＩＶ−１ウイルスの複製に必要なプロセスを相乗的態様で抑制する
ことができる。

【００７９】本発明の組成物および治療方法は、ＨＩＶプロテアーゼの抑制、ＨＩＶ感染の
予防および治療、並びにその結果としての病的状態（例えばエイズ）の治療に有
用である。エイズの治療またはＨＩＶ感染の予防もしくは治療は、広範囲のＨＩ
Ｖ感染状態、すなわちエイズ、ＡＲＣ（エイズ）関連合併症（症状の明らかなも
のおよび不顕性のもの、並びに急性または潜在的にＨＩＶに暴露されているもの
）の治療と定義されるが、ただしこれらに限定されない。例えば、本発明の化合
物は、過去のＨＩＶ暴露の可能性（例えば輸血、体液交換、咬傷、事故による注
射針の刺し傷、および外科手術時の患者血液による汚染）の後のＨＩＶ感染の治
療で有用である。

【００８０】本発明の治療または予防方法では、ＰＥＧ−アスパラギナーゼ化合物並びに場
合によって、プロテアーゼインヒビター化合物、ＨＩＶ逆転写酵素抑制化合物お
よびリボヌクレオチドレダクイターゼインヒビター化合物から成る群から選ばれ
る１つの化合物を、種々の態様、例えば場合によって投薬方法を用いて併用療法
として投与できる。例えば、ＰＥＧ−アスパラギナーゼ化合物並びに場合によっ
て、プロテアーゼインヒビター化合物、ＨＩＶ逆転写酵素抑制化合物およびリボ
ヌクレオチドレダクイターゼインヒビター化合物から成る群から選ばれる１つま
たは２つ以上の化合物を、患者に同時にまたは別々の時期に投与できる。ただし
別々の時期に投与する場合は、本発明の治療効果をもたらすように両化合物の医
薬的に有効な量が患者の体内に存在する相応な期間にそれらが投与されることを
条件とする。

【００８１】したがって、本発明のまた別の目的は、ＨＩＶに付随する生理的状態を治療ま
たは予防するキットを提供することで、本キットは複数の別々の容器を含み、こ
こで当該容器の少なくとも１つはＰＥＧ−アスパラギナーゼ化合物を含み、さら
に少なくとももう１つの容器は、プロテアーゼインヒビター化合物、ＨＩＶ逆転
写酵素抑制化合物およびリボヌクレオチドレダクイターゼインヒビター化合物か
ら成る群から選ばれる１つまたは２つ以上の化合物を含み、さらに本発明の併用
療法を遂行するために本キットが効果的に利用できるように、当該容器は場合に
よって医薬担体を含む。

【００８２】したがって、本発明のまた別の目的は、ＨＩＶに付随する生理的状態を治療ま
たは予防するキットを提供することで、本キットは複数の別々の容器を含み、こ
こで当該容器の少なくとも１つは式Ｉの化合物を含み、さらに少なくとももう１
つの容器は、ＰＥＧ−アスパラギナーゼ化合物、プロテアーゼインヒビター化合
物、ＨＩＶ逆転写酵素抑制化合物およびリボヌクレオチドレダクターゼインヒビ
ター化合物から成る群から選ばれる１つまたは２つ以上の化合物を含み、さらに
本発明の併用療法を遂行するために本キットを効果的に利用できるように、当該
容器は場合によって医薬担体を含む。

【００８３】キットのまた別の実施態様では、当該容器の少なくとも１つは、プロテアーゼ
インヒビター化合物、ＨＩＶ逆転写酵素抑制化合物またはリボヌクレオチドレダ
クターゼインヒビター化合物を含まずにＰＥＧ−アスパラギナーゼ化合物を含み
、さらに少なくとももう１つの容器は、ＰＥＧ−アスパラギナーゼ化合物は含ま
ないが、プロテアーゼインヒビター化合物、ＨＩＶ逆転写酵素抑制化合物および
リボヌクレオチドレダクターゼインヒビター化合物から成る群から選ばれる１つ
または２つ以上の化合物を含むはずである。

【００８４】キットのまた別の実施態様では、当該容器の少なくとも１つは、ＰＥＧ−アス
パラギナーゼ化合物、プロテアーゼインヒビター化合物、ＨＩＶ逆転写酵素抑制
化合物または別のリボヌクレオチドレダクターゼインヒビター化合物を含まずに
式Ｉの化合物を含み、さらに少なくとももう１つの容器は、式Ｉの化合物は含ま
ないが、プロテアーゼインヒビター化合物、ＨＩＶ逆転写酵素抑制化合物および
別のリボヌクレオチドレダクターゼインヒビター化合物から成る群から選ばれる
１つまたは２つ以上の化合物を含むはずである。

【００８５】キットのまた別の実施態様では、当該容器の少なくとも１つは、ＰＥＧ−アス
パラギナーゼ化合物、プロテアーゼインヒビター化合物、ＨＩＶ逆転写酵素抑制
化合物または別のリボヌクレオチドレダクターゼインヒビター化合物を含まずに
ＭＩＳＩＤ（ＰＬ−７）を含み、さらに少なくとももう１つの容器は、ＭＩＳＩ
Ｄ（ＰＬ−７）を含まないが、プロテアーゼインヒビター化合物、ＨＩＶ逆転写
酵素抑制化合物およびリボヌクレオチドレダクターゼインヒビター化合物から成
る群から選ばれる１つまたは２つ以上の化合物を含むはずである。

【００８６】本発明は、本明細書で言及する特定のおよび好ましい分類の全ての適切な組み
合わせを包含することは理解されよう。本発明の化合物（例えば原料物質、中間体または最終生成物）は、本明細書の
記載にしたがって調製されるか、またはこれまでに用いられもしくは文献に記載
された既知の方法を適用または応用することによって製造される。式Ｉの化合物は、これまでに用いられまたは文献に記載された既知の方法を適
用または応用して製造できる。特に、文献（P. Nandy, E.J. Lien, V.I. Avrami
s, Med. Chem. Res. 5:664-679(1995)）に記載された式Ｉの誘導体を製造する既
知の方法によって製造される。

【００８７】本発明の有用な化合物は場合によって塩として供給される。医薬的に許容でき
る塩は、医療目的のために投与できるので特に有益である。医薬的に許容できな
い塩は単離および精製の目的のために製造工程で有用で、幾つかの事例では本発
明の化合物の立体異性体を分離するばあいに有用である。後者は特に光学的に活
性なアミンから調製したアミンの塩の場合に特に言えることである。

【００８８】本発明の有用な化合物がカルボキシ基または十分に酸性のビオイソステアを含
む場合、塩基付加塩を形成することができ、さらに簡単により使用に便利な形態
にすることができ、実際塩を用いるということは本質的に遊離塩基の形態を使用
することになる。本発明の有用な前述の化合物はまた別の治療用化合物と混合して、（希釈剤ま
たは担体とともにまたはそれらを含まないで）医薬組成物を形成することができ
る。このような医薬組成物は、投与により本発明の併用療法をもたらす組合せ活
性成分の同時投与を提供する。

【００８９】本発明の有用な化合物を単独で投与することが可能であるが、それらは医薬組
成物として提供することが好ましい。獣医用および人間用の両方の用途のための
本発明の有用な医薬組成物は、上記に規定した少なくとも１つの本発明の化合物
を、１つまたは２つ以上の許容できる担体および場合によって他の治療用成分と
ともに含む。ある好ましい実施態様では、併用療法に必要な活性成分は同時投与用のただ１
つの医薬組成物中にまとめることができる。

【００９０】担体の選択および当該担体中の活性物質の内容は、一般に活性化合物の可溶性
および化学的特性、具体的な投与態様ならびに調剤で生じる条件にしたがって決
定される。例えばラクトース、クエン酸ナトリウム、炭酸カルシウム、燐酸二カ
ルシウムのような賦形剤、並びに澱粉、アルギン酸およびある種の複合ケイ酸塩
のような崩壊剤は潤滑剤（例えばステアリン酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナト
リウムおよびタルク）とともに錠剤を製造するために用いることができる。カプ
セルを製造するためには、ラクトースおよび高分子量ポリエチレングリコールを
用いるのが有利である。水性懸濁液を用いる場合は、それらは懸濁を促進する乳
化剤を含むことができる。ショ糖、エタノール、ポリエチレングリコール、プロ
ピレングリコール、グリセロールおよびクロロホルムまたはそれらの混合物のよ
うな希釈剤も用いることができる。

【００９１】本発明の乳液の油相は既知の態様で既知の成分で構成できる。油相が単に乳化
剤（また別にはエマルジェントとして知られている）を含む場合は、望ましくは
油相は、脂肪もしくは油と、または脂肪および油の両方と少なくとも１つの乳化
剤の混合物を含む。好ましくは、親水性乳化剤が、安定剤として作用する親油性
乳化剤とともに含まれる。さらにまた油および脂肪の両方を含有することが好ま
しい。総合すれば、乳化剤は安定剤とともに、または安定剤無しに乳化ワックス
を形成し、さらに油および脂肪と混合されて乳化軟膏基剤を形成し、この乳化軟
膏基剤はクリーム製剤の油状分散相を形成する。本発明の製剤で使用するために
適したエマルジェントおよび乳化安定剤には、トゥイーン（登録商標）６０（Tw
een 60）、スパン（登録商標）８０（Span 80)、セトステアリルアルコール、ベ
ンジルアルコール、ミリスチルアルコール、グリセロールモノ−ステアレートお
よびラウリル硫酸ナトリウムが含まれる。

【００９２】所望の場合は、クリーム基剤の水相は、例えば少なくとも３０％（ｗ／ｗ）の
多価アルコール（すなわち２つまたは３つ以上のヒドロキシ基をもつアルコール
）、例えばポリエチレングリコール、ブタン１，３−ジオール、マンニトール、
ソルビトール、グリセロールおよびポリエチレングリコール（ＰＥＧ４００を含
む）並びにそれらの混合物を含むことができる。所望の場合は、局所製剤は、皮
膚またはその他の影響を受けている領域への活性成分の吸収または浸透を強化す
る化合物を含むことができる。そのような皮膚浸透強化剤の例にはジメチルスル
ホキシドおよび関連類似体が含まれる。

【００９３】製剤のための適切な油または脂肪の選択は、所望の化粧特性の達成を基準にす
る。したがって、クリームは好ましくは脂ぎらず染みをつけず洗い流すことがで
きる製品で、チューブおよび他の容器から漏れないように適切な粘度を有するも
のである。直鎖または分枝鎖の一塩基性または二塩基性アルキルエステル、例え
ばジ−イソプロピルミリステート、デシルオリエート、イソプロピルパルミテー
ト、ブチルステアレート、２，エチルヘキシルパルミテートまたは、クロダモー
ル（Crodamol）ＣＡＰとして知られている分枝鎖エステルの混合物を用いること
ができるが、最後の３つが好ましい。これらは、所望される特性に応じて単独で
または組み合わせて用いることができる。高分子量ポリエチレングリコールと同様にラクトースまたはミルク糖のような
賦形剤を用いて、固形製剤もまた軟質および硬質充填ゼラチンカプセル中の充填
物として用いることができる。

【００９４】医薬組成物は、適切な製剤として人間または動物に局所または全身投与によっ
て投与できる。この局所または全身投与は、経口、吸入、直腸、経鼻、口腔、舌
下、膣内投与、非経口投与（皮下、筋肉内、静脈内、皮内、髄膜内および硬膜外
投与を含む）、槽内および腹腔内投与を含む。好ましいルートは例えば受容者の
状態によって変動することは理解されよう。製剤は、単位剤形として調剤分野で周知の任意の方法によって製造できる。そ
のような方法は、１つまたは２つ以上の補助成分を構成する担体と活性成分を結
合させる工程を含む。一般に、製剤は、液状担体または微細分割固形担体または
その両方と活性成分を均一にかつ密接に結合させ、続いて必要な場合には製品に
成形するこによって製造できる。

【００９５】錠剤は打錠または鋳型成形によって、場合により１つまたは２つ以上の補助成
分を用いて製造できる。打錠剤は、場合によって結合剤、潤滑剤、不活性希釈剤
、保存料、界面活性剤または分散剤と混合した自由な流動形状（例えば粉末また
は顆粒）の活性成分を適切な機械で圧縮して製造できる。鋳型成形錠は、不活性
希釈剤で湿らせた粉末化合物の混合物を適切な機械で鋳型成形して製造できる。
錠剤は、場合によって被覆しまたは刻み目を入れることができ、さらにその中の
活性成分の徐放性または制御放出を提供するために製剤化できる。直腸投与用の固形組成物には、既知の方法で製剤化され、本発明の少なくとも
１つの化合物を含有する座薬が含まれる。

【００９６】所望の場合、およびより効果的な分布のために、徐放性または標的誘導系（例
えば生体適合性、生物分解性ポリマーマトリックス（例えばポリ（ｄ，ｌ−ラク
チドコグリコリド))、リポソーム、およびマイクロスフィア）に微小カプセルと
して化合物を取り込ませるかまたは結合させ、さらに、２週間またはそれ以上の
期間化合物の連続的徐放性放出を提供する皮下または筋肉内デポットと称される
技術によって皮下または筋肉内に注射することができる。化合物は、例えば細菌
保持フィルターをろ過することによって、または滅菌水または他の何らかの注射
可能な滅菌媒体に使用直前に溶解できる滅菌固形組成物中に殺菌剤を取り込ませ
ることによって滅菌することができる。

【００９７】本発明の組成物中の活性成分の実際の投与量レベルは、個々の組成物および投
与方法について所望の治療反応を得るために有効な活性成分量を得るために変動
するであろう。したがって選択される投与量レベルは、所望の治療効果、投与ル
ート、所望の治療期間および他の要因に左右される。ホストに１日１回または分割して投与される本発明の有用な化合物の１日の投
与量は、例えば１日当たり約０．００１から約１００ｍｇ／ｋｇ体重、好ましく
は０，０１から１０ｍｇ／ｋｇ／日であろう。単位投与量組成物は、１日の投与
量を得るために用いることができるようにその何分の一かの量を含むことができ
る。しかしながら、個々の患者の固有の投与量は、体重、一般的健康状態、性別
、食事、時間および投与ルート、吸収および排泄速度、他の薬剤との併用および
治療される個々の疾患の重篤度を含む種々の要因によって左右されることは理解
されよう。

【００９８】投与される各成分の量は、当該疾患の病因および重篤度、患者の状態および年
齢、各成分の効能並びに他の因子を考慮しながら主治医が決定する。製剤は１回投与分の容器または多数回分の容器（例えば封入アンプルおよび弾
性栓子付きバイアル）で提供でき、さらに凍結乾燥状態で保存できる。後者の場
合は、使用直前に滅菌した液状担体（例えば注射用の水）を加えるだけである。
即席の注射溶液および懸濁液は、滅菌粉末、顆粒、および前述の種類の錠剤から
調製できる。

【００９９】本発明の化合物、それらの製造方法、およびそれらの生物学的活性は以下の実
施例の精査からより明瞭になるであろう。これらの実施例は説明のために提供さ
れ、本発明の範囲を限定するものと解されるべきではない。本発明の化合物または組成物の生物学的活性を評価する手順は本明細書に記載
したように実施するか、またはこれまでに用いられるか、もしくは文献に記載さ
れた既知の手順を利用もしくは応用して実施した。

【０１００】実施例非放射性ＨＩＶ逆転写酵素アッセイについての一般的方法論（Boehringer Mannh eim）下記は、ＨＩＶ逆転写酵素アッセイの一般的手順である。１日目 --サンプルは、ウイルス±薬剤フラスコから得た（７日間のインキュベーション
）上清及びペレットであった。これらは熱失活しなかった。 --サンプルを４℃下、２０００ｇで３０分間遠心分離した。 --上清を無菌のラベルを付けたチューブに移した。０．５ｍｌのＰＥＧ溶液を添加した。ＰＥＧ用の希釈剤として１．２ＭＮａＣｌを使用した。ＰＥＧ溶液：３０％ｗ／ｖ、１００ｍｌ中の３０ｇ。 --完全に混合した。 --０℃（冷蔵庫内で氷中）下、ｏ／ｎをインキュベートした。２日目 --５００μｌのサンプルを４℃下、８０００ｇで１０分間遠心分離した。８０００ｒｐｍを使用して８０００ｇを達成した。 --上清を廃棄した。サンプルから全てのＰＥＧ滴を除去するように注意した。 --４０μｌの溶菌緩衝液を添加した。 --ペレットを完全に再懸濁した。 --懸濁液を新しい反応チューブに移した。 --室温（２５℃）下で３０分間インキュベートした。 --標準希釈液を作成した。

【０１０１】

【０１０２】 --４０μｌの標準液を反応チューブに移した（ｎ＝７×２）。 --反応緩衝液を作成した。４３０μｌのオートクレーブした水の中で鋳型（バイアル４）を再構成した
。１ｍｌインキュベーション緩衝液／ヌクレオチドのバイアル（バイアル３）
を添加した。１００μｌの再構成した鋳型（バイアル４）をヌクレオチド溶液バイアル（
バイアル３）へ添加した。 --２０μｌの反応緩衝液を全てのチューブ、すなわち未知及び標準へ添加した。 --インキュベーターのラック中、３７℃で１５時間インキュベートした。３日目 --ワードパーフェクト（wordperfect）を使用してＥＬＩＳＡアッセイ用の鋳型を作成した。 --ホイルパケット（foil packet）を開け、キット内に提供されたフレーム及びストリップを使用してｍｔｐ（マイクロタイタープレート）モジュールを構築し
た。未知ｎ＝。それゆえ全サンプルｎ＝。標準ｎ＝。ストリップはそれぞれ８つのウェルを有し、それゆえのストリップを必要と
した。注意：８の最も近い倍数に切り上げる必要がある。 --鋳型あたり６０μｌを反応チューブからｍｔｐモジュールの対応のウェルへ移
した。 --ｍｔｐを提供されたカバーストリップで覆った。

【０１０３】インキュベーター中、３７℃で１時間インキュベートした。必要により、洗浄溶液を作成した。注意：提供された溶液は１０×溶液であり、それゆえオートクレーブした水を
用いて希釈する必要がある。 ^**２２５ｍｌのオートクレーブした水を提供されたボトルに添加することによ
り１ビンの洗浄溶液を作成した。十分に混合した。アッセイの間、氷中で維持し
た。 --デカンテーションにより溶液を完全に除去した。 --デカンテーション前の３０秒間の浸積時間を用いて１回の濯ぎにつき２５０μ
ｌを用いて、プレートを５回洗浄した。 --抗−ディッグ−ポッドワーキング溶液（anti-dig-pod working solution）を作成した。 ^**抗−ディッグ−ポッドワーキング溶液を作成した。５００μｌのオートクレーブした水を抗−ディッグ−ポッドバイアル（バイ
アル＃６）へ添加し、４℃で保存した。凍結はしなかった。 ^**抗−ディッグ−ポッドワーキング溶液の作成必要な容量を計算した。ウェル×２００μｌ＝ｍｌ各４．９５ｍｌのコンジュゲート希釈緩衝液（溶液＃８）に５０μｌの抗−デ
ィッグ−ポッド溶液（バイアル＃６）を使用した。ｍｌの抗−ディッグ−ポッド溶液（バイアル＃６）を、ｍｌのコンジュゲート希釈緩衝液（溶液＃８）に添加した。 --ｍｔｐのウェルあたり２００μｌの抗−ディッグ−ポッドワーキング溶液を
添加した。 --ｍｔｐを提供されたカバーストリップで覆った。 --インキュベーター中、３７℃で１時間インキュベートした。 --デカンテーション前の３０秒間の浸積時間を用いて２５０μｌを用いて１回の
濯ぎにつきプレートを５回洗浄した。 --エンハンサーを用いてａｂｔｓ基質溶液を作成した。 ^**ａｂｔｓ基質溶液の作成。基質緩衝液のボトル（ボトル＃９）中、ａｂｔｓ粉末混合物（バイアル＃
１０）を溶解させた。必要な容量を計算した。ウェル×２００μｌ＝ｍｌ ^**適切な量のエンハンサーを溶液に添加した。１ｍｌのａｂｔｓ基質溶液（
ボトル＃９）のそれぞれに対して１ｍｇの基質エンハンサー（バイアル＃１１）
を使用した。ｍｇの基質エンハンサー（バイアル＃１１）を各ｍｌのａｂｔｓ基質溶液（ボトル＃９）へ添加した。 --ｍｔｐのウェルあたり２００μｌのａｂｔｓ基質溶液をエンハンサーと共に添
加した。 --１０、２０及び３０分後に４０５ｎｍ（基準波長４９０ｎｍ）でプレートを解
読した。

【０１０４】実施例１ＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅ化合物及びサキナビルの組合せの措置材料及び方法これらの研究に使用した細胞系は、ＣＣＲＦ／ＣＥＭ／０、ヒトＴ白血病細胞
系であった。ＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅ（ＯＮＣＡＳＰＡＲ）は、Rhone-Poulenc Ro
rerより供給を受けた。サキナビルは市販されていた。ＲＰＭＩ−１６４０培地（Irvine Scientific, Irvine, CA）を、１０％ウシ胎仔血清（Gemini Biosourc
e, Calabasas, CA）、５％１ＭＨｅｐｅｓ緩衝液及び５％非必須アミノ酸（
Irvine Scientific, Irvine, CA）で強化（enrich）した。使用した薬剤濃度は下記の通りであった。ＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅＩＣ５０単独：０．４ＩＵ／ｍｌサキナビルＩＣ５０単独：２５μＭＰＥＧ／ＳＡＱコンボＩＣ５０：０．２３３ＩＵ／ｍｌ＋１５．５２μＭ要約すると、２×１０⁶細胞／ｍｌを、３７℃下、５％ＣＯ₂下、ＰＨＡ＋培地
で４８時間刺激した。更に同一数の細胞を、ＰＨＡ（フィトヘマグルチニン）を
含まない培地中で４８時間インキュベートして、ネガティブコントロールとして
役立てた。この時点で、標準プロトコルにより細胞にＨＩＶ−１ウイルスを接種
した。ＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅ及び／又はサキナビルを細胞へ適切な濃度で添加し
た（前記参照）。７日間の曝露の間、コントロールの細胞は薬剤を含まない培地
中に再懸濁した。５日目に、培地の１ｍｌのアリコートをフラスコから採取して
、液体窒素下で保存した。７日目に、培地の１ｍｌのアリコートを２以上フラス
コから採取して、液体窒素下で保存した。更に、残りの細胞をペレット化して、
−８０℃で保存した。この実施例により得られたサンプルを区分（itemize）して、非放射性逆転写酵素アッセイ（Boehringer Mannehim）を使用してＨＩＶ−ＲＴについてアッセイした。検量線を決定し、実験サンプルについてのＨＩＶ−ＲＴレベルを計算し
た。

【０１０５】結果Ｔ細胞由来のサンプルにおけるＨＩＶ−ＲＴアッセイからの第１の観察結果は
、処理後のＣＥＭ／０Ｔ細胞の上清においてＨＩＶ−ＲＴ／ウイルスは存在し
なかったということである。実験結果を図１に示す。Ｔ細胞ペレット自体を細胞内ＨＩＶ−ＲＴについて試験した。０．４ＩＵ／ｍ
ｌ（ほぼＩＣ₅₀濃度）のＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅは、約３０％のＨＩＶ−ＲＴ阻害
を示した。ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤化合物であるサキナビルは、２５μＭ（ほ
ぼＩＣ₅₀濃度）単独で、未処理のコントロール細胞培養ＨＩＶ−ＲＴと比較して
約７０％程ＨＩＶ−ＲＴ活性を消耗させた。最後に、本発明者等はＰＥＧ−ＡＳ
Ｎａｓｅ及びサキナビルの同時の組合せは相乗的であり、これらの組合せの薬剤
のＩＣ₅₀濃度はそれぞれ０．２３３ＩＵ／ｍｌ及び１４．５μＭであったことを
示した。これらの濃度は、ＣＥＭ／０Ｔ細胞におけるそれぞれのＩＣ₅₀値より
も非常に低かった。ＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅ及びサキナビルの組合せの措置は、未
処理のコントロール値と比較して約８２．３％程細胞内ＨＩＶ−ＲＴを阻害した
。検討これらの薬剤処理後、Ｔ細胞は上清中でＨＩＶ−１を減少（shed）させなかっ
たので、ＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅ及びサキナビルはＴ細胞に対して相乗的であるだ
けでなく、ＨＩＶ−１に対して選択的に相乗的でもあるらしい。これらの薬剤は
、新規なＨＩＶ−１粒子の培地（患者の血清又は血漿と同等）への放出において
十分に抑制性であった。低濃度の組合せは、高濃度の２つの薬剤サキナビルのほ
とんどの活性よりもＨＩＶ−ＲＴに対して抑制性であるという事実は、この組合
せがプロウイルスレベルにおいてＨＩＶを選択的に阻害することを強力に示唆し
ている。これらの薬剤及びこれらの組合せは、ＨＩＶ−ＲＴを細胞内で抑制／阻害する
ので、これらはＨＩＶをプロウイルスレベルで阻害することが示唆される。換言
すると、統合されたＨＩＶプロウイルスはｍＲＮＡを生成するが、これはウイル
スタンパク質へ翻訳されず、それゆえＲＴ又は培地中で分離される完全なウイル
ス粒子の生成を阻害する。したがって、理論的基礎においては、更なるＨＩＶ感
染は、未感染のＴ細胞において達成することができない。

【０１０６】実施例２：細胞障害性の測定材料及び方法ヒト白血病Ｔ細胞系（以後ＣＥＭ／０とする）を、本実施例に使用した。ＰＥ
Ｇ−ＡＳＮａｓｅは、商品名 Oncaspar（登録商標）の下、Rhone-Poulenc Rorer
Pharmaceuticals Incより入手した。サキナビルは、商品名 Invirase（登録商標）の下、Roche laboratoriesより入手した。Irvine Scientific, Irvineより入手したＲＰＭＩ−１６４０培地を、１０％ウシ胎仔血清（Gemini Biosource,
Calabasas, CAより入手）、５％１ＭＨｅｐｅｓ緩衝液及び５％非必須アミノ酸（Irvine Scientific, Irvine, CAより入手）で強化した。実験を行って、サキナビル及びＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅの細胞障害性を測定した
。いずれかの化合物単独での細胞障害性を測定するために、２×１０⁵細胞／ｍｌを、下記の薬剤濃度を用いて２４ウェルプレート中でインキュベートした。ＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅ：１．０、０．７５、０．５、０．４、０．３、０．２
、０．１、０．０３ＩＵ／ｍｌサキナビル：１０^-4、１０^-5、１０^-6、１０^-7、１０^-8Ｍ結果インビトロでＣＥＭ／０細胞の細胞増殖抑制条件を生じさせるＰＥＧ−ＡＳＮ
ａｓｅ濃度は約０．５ＩＵ／ｍｌであった。１及び０．７５ＩＵ／ｍｌのＰＥＧ
−ＡＳＮａｓｅ濃度は有意な細胞殺傷を生じ、７２時間でＣＥＭ／０細胞に対し
て細胞障害性であった。０．０３、０．１、０．２、０．３及び０．４ＩＵ／ｍ
ｌの濃度は、コントロール（未処理細胞）の増殖速度と比較して細胞増殖の阻止
にわずかに有効であった。しかしながら、０．５ＩＵ／ｍｌのＰＥＧ−ＡＳＮａ
ｓｅ濃度は、比較的平坦な細胞増殖曲線を示した。したがって、この濃度を用い
て７２時間の細胞分裂抑制作用が生じた。それゆえ、０．５ＩＵ／ｍｌを含むＰ
ＥＧ−ＡＳＮａｓｅ濃度範囲を、組合せの措置の研究に使用した。このＴ細胞系
におけるＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅの薬剤、濃度及び時間依存性細胞障害作用を示す
。７２時間のインキュベーション期間後に、ＣＥＭ／０細胞におけるサキナビル
のＩＣ₅₀は２６μＭであることを決定した。結果を図２に示す。サキナビルを用
いた複数の独立実験は、２１〜２８μＭのＩＣ₅₀を示した。０．００１〜１μＭ
のサキナビル濃度は細胞殺傷を起こさなかった。１０μＭの濃度は、未処理のコ
ントロールサンプルと比較してわずか８．７６％の殺傷性を示した。試験した最
高濃度である１００μＭでは、コントロール細胞と比較して９９．５０％の細胞
を殺傷した。したがって、１〜４０μＭのサキナビル濃度を続く実験に使用して
、ＣＥＭ／０細胞における組合せのサキナビル／ＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅ治療法を
試験した。

【０１０７】実施例３：サキナビル及びＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅの初期の系列的な組合せの研究材料及び方法本実施例において、下記の範囲の濃度を使用して、サキナビル及びＰＥＧ−Ａ
ＳＮａｓｅの組合せの措置を試験した。サキナビルへと続くＰＥＧ−ＡＳＮａｓ
ｅの系統的な組合せの研究のために、細胞を、下記の濃度のＰＥＧ−ＡＳＮａｓ
ｅとともに２４時間インキュベートした。下記の濃度のサキナビルを適切な細胞
へ添加してさらに２４時間保ち、全曝露時間は４８時間となった。曝露は、下記
の調査した濃度の薬剤を用いて組織培養フラスコでインキュベートした２×１０ ⁵ 細胞／ｍｌを含んでいた。結果を図３に示す。使用した薬剤濃度は下記の通りであった。ＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅ：１．０２０、０．７６５、０．５１０、０．２５５及
び０．０２５５ＩＵ／ｍｌサキナビル：４０、３０、２０、１０及び１μＭ全てのインビトロ研究において、ネガティブコントロール細胞を、薬剤を含ま
ない培地中、実験サンプルと同一の期間、同一の条件下でインキュベートした。
細胞密度は、Coulter Channelyzerを連結したCoulter Counterを使用した細胞計
数により、インキュベーション後２４、４８及び７２時間の各実験フラスコにつ
いて測定した。更に、各実験条件についてトリパンブルー排除テストを行った。
細胞数をトリパンブルー試験により測定した生存度細胞数について補正し、未処
理コントロールの百分率として表した。逆配列についても試験した。結果を図４に示す。サキナビルを投与し、細胞を
２４時間インキュベートし、続いてＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅを添加し、更に２４時
間インキュベートした。全曝露時間は４８時間になった。薬剤の配列を除いて、
方法論は前記と同一であった。同一の方法論を使用して、同時の組合せの措置に
ついても試験した。結果を図５、６及び７に示す。同時の組合せの方法論による
実験では、サンプルを同時の組合せに４８時間曝露した。結果試験した各措置は、試験した特定の範囲で相乗効果を示した。ＰＥＧ−ＡＳＮ
ａｓｅ、続くサキナビルの連続的な組合せの措置は、４８時間の曝露後に１．７
２倍の相乗効果を示した。これは、その他の連続的措置及び同時措置により示さ
れた相乗効果に類似していた。本発明は、ある細胞の生存を許容するレベルにお
いて最適の相乗効果を与えるという非常に望ましい結果を示した。

【０１０８】実施例４：アミノ酸レベルの測定材料及び方法細胞懸濁液及び細胞培地におけるアミノ酸レベルを測定する実験を行い、アミ
ノ酸レベル、特にアスパラギン、グルタミン及びアスパラギン酸のレベルに対す
るＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅの効果を測定した。５０μｌの培地及び１０μｌの１ｍＭアミノアドピック酸（aminoadopic acid
）のサンプルを、１．５ｍｌミクロチューブ中の４５０μｌの冷エタノールへ添
加した。混合物をボルテックスし、８７００ｇで２分間遠心分離した。上清をホ
ウケイ酸ガラス試験管（１３×１００ｍｍ）に写し、凍結乾燥した。サンプルを
ＨＰＬＣで分析するまで−２０℃で保存した。ＨＰＬＣの前に、サンプルを、９
５％７ｎＭリン酸水素二ナトリウム及び５％アセトニトリルを含む緩衝液中に
溶解した。結果ＣＥＭ／０細胞を種々の濃度のＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅに２４時間曝露した後、
アスパラギン（Ａｓｎ）の有意な欠乏が観察された。アスパラギンレベルは未処
理コントロールの３．０％未満であった。更に、未処理コントロールの３．０％
未満のレベルに対するグルタミン（ｇｌｎ）の用量依存性欠乏が、最高のＰＥＧ
−ＡＳＮａｓｅ濃度を使用した実験において観察された。アスパラギン酸（Ａｓ
ｐ）レベルは未処理コントロールと比較して２００〜３００％の増加を示すレベ
ルに上昇した。結果を図８に示す。ＨＩＶ−ＲＴ量を計算するために使用した検
量線を図８ａに示す。試験した最低レベルのＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅにおいてさえ、２４時間後のＡｓ
ｎの欠乏が観察された。これは、活性なアミノ酸、特にアスパラギンの欠乏によ
り不法な（illicit）Ｔ細胞を殺傷することができることと一致する。更にＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅは、Ｔ細胞の破壊のメカニズムにおいて重要なＧｌｎレベルを
欠乏させた。

【０１０９】実施例５：Ｔ細胞ペレット中のＨＩＶ−ＲＮＡの、ＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅ及びサキナビルの組合せへの曝露の影響の測定本実施例は、実施例１と同様の手順及び同様の材料濃度を使用して行ったが、
Ｔ細胞ペレット中のＨＩＶ−ＲＮＡのＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅ及びサキナビルの組
合せへの曝露を測定した。本実施例の結果を表１及び２並びに図９及び９ａに示
す。表２における「ＰＥＧ」はＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅを示すことに注意すべきで
ある。これらの結果は、ＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅはＨＩＶ−１のＲＮＡ産生に対して明
白な効果を有しなかったが、同一の細胞培養において７日目にＨＩＶ−ＲＴ阻害
において中程度の効果を有していたことを示している（実施例５ａ参照）。した
がって、ＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅは、たとえＨＩＶ−ＲＴレベルにおいてもタンパ
ク質生合成を阻害した（実施例５ａ参照）。サキナビル単独ではＨＩＶ−ＲＮＡ
産生に対して阻害作用を有し、コントロールと比較して約３６％阻害した（図９
及び９ａ）。ＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅ及びサキナビルの組合せは、相乗的な低濃度
で、ＨＩＶ−ＲＴの約１２％を阻害した（実施例５ａ参照）。しかし、同一の培
養において、ＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅ及びサキナビルの組合せは、低濃度で、ペレ
ットあたりのＲＮＡの４００コピーの測定の下限まで、検出可能なＨＩＶ−１
ＲＮＡを提供しなかった。このデータは、タンパク質阻害剤（ＰＥＧ−ＡＳＮａ
ｓｅ）＋ＨＩＶ−１プロテアーゼ阻害剤（サキナビル）は相乗的に作用するだけ
ではなく、ＨＩＶ−ＲＴに対して選択的に、より重要にはＨＩＶ−１ＲＮＡ産
生に対して選択的に作用することを示している。

【０１１０】実施例５ａ：ＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅ±サキナビルのＨＩＶ−１感染細胞ペレットのＨＩＶ−ＲＴレベルへの影響の測定本実施例は、Ｔ細胞ペレット中のＨＩＶウイルスのＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅ及び
サキナビル単独、これらの組合せへの曝露を測定したことを除いて、実施例７と
同様の手順及び同様の材料濃度で使用して行った。実験の結果を図２ａに示す。
表２ａの「ＰＥＧ」はＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅを示すことに注意すべきである。これらの結果は、ＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅはＨＩＶ−ＲＴ阻害において中程度の
効果を有したことを示している。したがって、ＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅは、ＨＩＶ
−ＲＴレベルにおいてもタンパク質生合成を阻害する。サキナビル単独はＨＩＶ
−ＲＴに対して阻害作用を有し、比較して約１５％阻害した。ＰＥＧ−ＡＳＮａ
ｓｅ及びサキナビルは相乗的に低い濃度において、ＨＩＶ−ＲＴの約１２％を阻
害した／

【０１１１】実施例６：ＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅ及びサキナビルの組合せの措置による、ＣＥＭ／０Ｔ細胞上清中のＨＩＶ−ＲＮＡの阻害の測定実施例５はＴ細胞ペレット中のＨＩＶ−ＲＴをＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅ及びサキ
ナビルの組合せに曝露した結果を示している。しかしながら、実験手順は、Ｔ細
胞のＨＩＶ−１ウイルスへの連続的曝露を刺激するために上清からＨＩＶ−１粒
子を除去しなかった。したがって、Ｔ細胞培養の上清中には常にＨＩＶ−１ウイ
ルスが存在した。ＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅ及びサキナビルの組合せは、細胞ペレット中のＨＩＶ−
ＲＮＡを有意な程度に阻害することを発見した。いくつかのウェルにおいては、
ＨＩＶ−ＲＮＡは、ＰＥＧ＋ＳＡＱ薬剤の組合せによる処理後に定量化すること
ができなかった。したがって、本発明者等はＨＩＶ−ＲＮＡの完全な阻害を達成
した。実施例５由来のＴ細胞の上清をＨＩＶ−ＲＮＡについて分析し、結果を表３及
び４に示す。表３の「ＰＥＧ」はＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅを示すことに注意すべき
である。ＰＥＧ単独は上清中のＨＩＶ−ＲＮＡを約６０％阻害し、ＳＡＱは約６
８％を阻害した。ＰＥＧ＋ＳＡＱの組合せは、未処理コントロールと比較して上
清中のＨＩＶ−ＲＮＡを約７５％減少させた。このＲＮＡ阻害パターンは、同一
の実験からＨＩＶ−ＲＴ及びＨＩＶ−ＲＮＡを阻害することを報告した以前の実
験のパターンと正確に一致した。これらの薬剤は上清中のＨＩＶを「殺さない」ので、ＨＩＶ−ＲＮＡの減少は
、これらの薬剤によるウイルス複製サイクルの阻害による、複製を介した感染及
び非再生の喪失によってのみ達成することができる。特にＨＩＶ−ＲＮＡは、細
胞内で生成されて、それ自体又は完全なＨＩＶ−ウイルス粒子として培地中へ搬
出されない。

【０１１２】実施例７：ＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅ±サキナビル±ＡＺＴ±ＭＩＳＩＤ（ＰＬ−７）のＨＩＶ−１感染細胞ペレットのＨＩＶＲＴレベルに対する影響の測定材料及び方法本実施例に使用した細胞系は、ＣＥＭ／０、ヒトＴ細胞白血病細胞系であった
。ＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅ（ＯＮＣＡＳＰＡＲ）はRhone-Poulenc Rorerより提供を受けた。サキナビルは市販されていた。ＡＺＴはSigmaより購入した。リボヌクレオチドレダクターゼ阻害剤ＭＩＳＩＤは、Nandy P, Lien EJ, Avramis VI,
Med. Chem. Res. 1995, 5:664-679の記載にしたがい合成した。ＲＰＭＩ−１６４０培地（Irvine Scientific, Irvine, CA）を、１０％ウシ胎仔血清（Gemini
Biosource, Calabasas, CA）、５％１ＭＨｅｐｅｓ緩衝液及び５％非必須ア
ミノ酸（Irvine Scientific, Irvine, CA）で強化した。使用した薬剤濃度は下記の通りであった。ＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅＩＣ５０単独：０．４０ＩＵ／ｍｌサキナビルＩＣ５０単独：２５μＭＡＺＴ：１μＭＭＩＳＩＤ（ＰＬ−７）：０．６８５μＭＰＥＧＩＣ５０組合せ：０．２３ＩＵ／ｍｌＳＡＱＩＣ５０組合せ：１４．５２μＭ要約すると、３×１０⁶細胞／ｍｌを、５％ＣＯ₂、３７℃下、ＰＨＡ＋培地で
４８時間刺激した。更に、同数の細胞をＰＨＡを含まない培地中で４８時間イン
キュベートしてネガティブコントロールとして役立てた。この時点で、標準プロ
トコルにより細胞にＨＩＶ−１ウイルスを接種した。本実施例においては、ＰＨ
Ａ刺激した健康なヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）由来のＨＩＶ含有上清を、Ｐ
ＨＡ刺激ＣＥＭ／０細胞培養から除去しなかったことに注意すべきである。それ
ゆえ、ＨＩＶ−１ウイルスは上清中に常に存在し、新規に生成し非感染性のＴ細
胞のインビボ臨床条件を刺激する実験条件は、常に一定のＨＩＶ−１粒子への曝
露下にあった。これらのウイルス粒子は、患者の既に感染したＴ細胞及び／又は
リンパ節により放出された。実験用薬剤を適切な濃度で、ウイルス接種と同時又はウイルスインキュベーシ
ョン９０分後（Ｔ細胞が感染し、新規なＨＩＶ−１ウイルス粒子を生成するのに
十分な時間）に細胞へ添加した。コントロールの細胞を、７日間続いた曝露期間
の間、薬剤を含まない培地中に再懸濁した。コントロールのフラスコの培地のア
リコートを、Ｒｘ５日後に得た。７日目に、各１ｍｌの培地のアリコート３つを
フラスコから採取し、液体窒素下で保存した。更に、残りの細胞を３つに分け、
ペレット化して、−８０℃で保存した。本実施例により生成したサンプルを区分化した。９０分間のウイルスインキュ
ベーションフラスコ由来の細胞ペレットを、非放射性逆転写酵素アッセイ用ＥＬ
ＩＳＡキット（Boehringer Mannheim）を使用してＨＩＶ−ＲＴについてアッセイした。検量線を決定（図１０参照）し、実験サンプルのＨＩＶ−ＲＴレベルを
計算した。結果を表５に示す。表５中の「ＰＥＧ」はＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅを示
すことに注意すべきである。

【０１１３】結果と考察ＣＥＭ／０Ｔ細胞の細胞ペレット由来のサンプルにおけるＨＩＶ−ＲＴＥ
ＬＩＳＡアッセイからの最初の観察結果は、未処理のコントロール細胞と比較し
て、薬剤処理によりＨＩＶ−ＲＴ活性が減少したというものであった。ＨＩＶ−
ＲＴの最も劇的な阻害は、ヌクレオシド類似体逆転写酵素阻害剤ＡＺＴにより引
き起こされた。ＡＺＴに対する耐性を与えるＨＩＶ−ＲＴの変異を有しない野性
型ＨＩＶウイルス粒子についての本発明者等の初期の実験計画及び探索は、ＡＺ
Ｔ単独はこのウイルス株に対して非常に活性であるという結果を示した。ＩＣ₅₀濃度にて単独療法として使用したＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅ又はサキナビル
は、ＨＩＶ−ＲＴをそれぞれ５４％及び８３％阻害した。これらの値は初期の実
験における測定値と類似していた。新規なリボヌクレオチドレダクターゼ（ＲＲ）阻害剤ＭＩＳＩＤ（ＰＬ−７）
をＩＣ₅₀濃度（０．６８５μＭ）にて単独で使用したとき、ＨＩＶ−ＲＴの７３
％の阻害を示した。このことは、ＲＲ阻害剤のこのクラスのメンバーが抗白血病
活性に加えて抗ＨＩＶ活性をも示すという最初の証拠である。ＨＩＶの阻害にお
けるこのクラスの化合物についての生化学的理論的根拠は、細胞内におけるｄＮ
ＴＰプールの枯渇である。ｄＮＴＰプールの欠乏又は還元は、哺乳類ゲノムＤＮ
Ａへの組み込みの前にＨＩＶ−ＲＮＡをプロウイルスＤＮＡへ転換するＨＩＶ−
ＲＴ機能を阻害するだろう。ＰＥＧ＋ＳＡＱの組合せは、本実施例においてＨＩＶ−ＲＴの完全な阻害を引
き起こした。３つの薬剤の組合せＡＺＴ＋ＰＥＧ＋ＳＡＱは、３つのウェルのう
ち２つでＨＩＶ−ＲＴの完全な阻害を引き起こし、第３のウェルの値はコントロ
ールの９５．３％の阻害であった。この薬剤の組合せについての生化学的理論的
根拠は、ＡＺＴがＨＩＶ−ＲＴによる感染を更に阻害すること及びこの阻害がＰ
ＥＧ＋ＳＡＱ措置の非常に有効な抗ＨＩＶ−ＲＴ効果によって増強されるという
ことである。数値がＨＩＶ−ＲＴの１００％阻害に近いので、野性型ＨＩＶウイ
ルスを感染させたこのＴ細胞モデル系における阻害が、２つの薬剤措置に対して
３つの薬剤により改善されたということを証明するのは極めて困難である。ＡＺ
Ｔに部分的に耐性なＨＩＶを用いた実験においては、患者に現れるので、措置は
前記生化学的三段論法の妥当性を証明するだろう。４つの薬剤の組合せＭＩＳＩＤ＋ＡＺＴ＋ＰＥＧ＋ＳＡＱは、３つのウェルの
うち２つでＨＩＶ−ＲＴの完全な阻害を引き起こし、第３のウェルの値はコント
ロールの９５％の阻害であった。これらの値は、ＨＩＶ−ＲＴの最大阻害のため
、３つの薬剤措置に重ね合わせることが可能であった。この組合せについての生
化学的理論的根拠は、ＲＲ阻害剤ＭＩＳＩＤはｄＮＴＰプールを枯渇させこれが
ＨＩＶ−ＲＴに対するＡＺＴ−トリホスフェート（ＡＺＴＴＰ）の活性を増強す
るということである。増強された阻害効果は、タンパク質＋プロテアーゼ阻害剤
のこのウイルスに対する既知の選択的な相乗効果に対して相加的又は相乗的であ
ろう。ＭＩＳＩＤ単独は、かなりの抗ＨＩＶ−ＲＴ活性を有するようなので、こ
の三段論法は、これらのクラスの１以上の薬剤に耐性を有するＨＩＶ粒子を用い
た実験又は多耐性ＨＩＶ変異体に感染した患者において正しいことが示されると
本発明者等は考えている。それゆえ、これらの結果は、ＡＺＴ＋ＰＥＧ＋ＳＡＱ又はＭＩＳＩＤ＋ＡＺＴ
＋ＰＥＧ＋ＳＡＱの３又は４つの薬剤措置がＨＩＶ−ＲＴに対して相乗的に作用
することを示している。

【０１１４】実施例８：ＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅ、サキナビル、ＡＺＴ及びＭＩＳＩＤ（ＰＬ− ７）のＣＥＭ／０細胞上清における相乗効果の測定材料及び方法本実施例に使用した細胞系は、ＣＥＭ／０、ヒトＴ細胞白血病細胞系であった
。ＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅ（ＯＮＣＡＳＰＡＲ）はRhone-Poulenc Rorerより提供を受けた。サキナビル（ＳＱ）は市販されていた。ＡＺＴはSigmaより購入した。リボヌクレオチドレダクターゼ阻害剤ＭＩＳＩＤは、Nandy P, Lien EJ, Avra
mis VI, Med. Chem. Res. 1995, 5:664-679の記載にしたがい合成した。ＲＰＭＩ−１６４０培地（Irvine Scientific, Irvine, CA）を、１０％ウシ胎仔血清（Gemini Biosource, Calabasas, CA）、５％１ＭＨｅｐｅｓ緩衝液及び５％非必須アミノ酸（Irvine Scientific, Irvine, CA）で強化した。使用した薬剤濃度は下記の通りであった。ＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅＩＣ５０単独：０．４０ＩＵ／ｍｌサキナビルＩＣ５０単独：２５μＭＡＺＴ：１μＭＭＩＳＩＤ：０．６８５μＭＰＥＧＩＣ５０組合せ：０．２３ＩＵ／ｍｌＳＡＱＩＣ５０組合せ：１４．５２μＭ要約すると、３×１０⁶細胞／ｍｌを、５％ＣＯ₂、３７℃下、ＰＨＡ＋培地で
４８時間刺激した。更に、同数の細胞をＰＨＡを含まない培地中で４８時間イン
キュベートしてネガティブコントロールとして役立てた。この時点で、標準プロ
トコルにより細胞にＨＩＶ−１ウイルスを接種した。本実施例においては、ＰＨ
Ａ刺激した健康なヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）由来のＨＩＶ含有上清を、Ｐ
ＨＡ刺激ＣＥＭ／０細胞培養から除去しなかったことに注意すべきである。それ
ゆえ、ＨＩＶ−１ウイルスは上清中に常に存在し、新規に生成し非感染性のＴ細
胞のインビボ臨床条件を刺激する実験条件は、常に一定のＨＩＶ−１粒子への曝
露下にあった。これらのウイルス粒子は、患者の既に感染したＴ細胞及び／又は
リンパ節により放出された。

【０１１５】実験用薬剤を適切な濃度で、ウイルス接種と同時又はウイルスインキュベーシ
ョン９０分後（Ｔ細胞が感染し、新規なＨＩＶ−１ウイルス粒子を生成するのに
十分な時間）に細胞へ添加した。コントロールの細胞を、７日間続いた曝露期間
の間、薬剤を含まない培地中に再懸濁した。コントロールのフラスコの培地のア
リコートを、Ｒｘ５日後に得た。７日目に、各１ｍｌの培地のアリコート３つを
フラスコから採取し、液体窒素下で保存した。更に、残りの細胞を３つに分け、
ペレット化して、−８０℃で保存した。本実施例により生成したサンプルを区分化した。９０分間のウイルスインキュ
ベーションフラスコ由来の細胞培養の細胞ペレット（実施例７参照）を、非放射
性アッセイ用キットを使用してＨＩＶ−ＲＮＡ定量アッセイについてアッセイし
た。検量線を決定し、実験サンプルのＨＩＶ−ＲＴレベルを前記と同様にして計
算した。これらの上清サンプルは、実施例７のＴ細胞ペレットの培養に由来するもので
あった。これらの結果を実施例７に示す。ＣＥＭ／０Ｔ細胞の上清由来のサンプルにおけるＨＩＶ−ＲＴＥＬＩＳＡ
アッセイからの最初の観察結果は、薬剤処理により、７日目のＨＩＶ−ＲＴ活性
が同日の未処理のコントロール細胞と比較して減少していたということである。
５日目の未処理コントロール（１つの値）は７日目よりも高いＨＩＶ−ＲＴＯ
．Ｄ．を有していたことは重要である。本発明者等は、検量線の直線性に基づく
最小の定量化濃度よりも低い全てのＯ．Ｄ．値を試験した。ＰＥＧ−ＡＳＮａｓ
ｅ単独を処理したサンプル上清（＃７）のわずか１つが、ネガティブコントロー
ルよりも高いアッセイによるＯ．Ｄ．値を有したが、３つの未処理コントロール
培養上清の平均値よりも低かった。定量的条件におけるＨＩＶ−ＲＴの大きな阻害（０．０７５Ｏ．Ｄ．のネガ
ティブコントロール値の６６％未満又は０．０５Ｏ．Ｄ．）は、単一薬剤とし
てのＳＡＱ（サンプル＃９及び１０）及びＭＩＳＩＤ（サンプル＃１５及び１６
）により引き起こされた（表６参照。表６の「ＰＥＧ」はＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅ
を示すことに注意すべきである）。ＨＩＶ−ＲＴの更に大きな阻害は、ＳＡＱ＋
ＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅの組合せによる３つのサンプル＃１７、１８及び１９、Ｐ
ＥＧ−ＡＳＮａｓｅ＋ＳＡＱ＋ＡＺＴの３つの薬剤の組合せによるサンプル＃２
２及び４つの薬剤の組合せの措置ＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅ＋ＳＡＱ＋ＭＩＳＩＤ＋
ＡＺＴによる全てのサンプル＃２３、２４及び２５において観察された。

【０１１６】ＡＺＴに対する耐性を与えるＨＩＶ−ＲＴの変異を有しない野性型ＨＩＶウイ
ルス粒子についての本発明者等の初期の実験計画及び探索は、ＡＺＴ単独はこの
ウイルス株に対して非常に活性であるという結果を示した。新規なリボヌクレオチドレダクターゼ（ＲＲ）阻害剤ＭＩＳＩＤをＩＣ₅₀濃度
（０．６８５μＭ）にて単独で使用したとき、単一薬剤及び３つのその他の薬剤
との組合せと同様にＨＩＶＲＴの有意な阻害を示した。これは細胞ペレットの
と同様の結果（実施例７参照）であり、ＲＲ阻害剤のこのクラスのメンバーが、
細胞内及びＴ細胞培養の上清サンプルにおいて抗白血病活性に加えて抗ＨＩＶ活
性をも示すという最初の証拠である。ＰＥＧ＋ＳＡＱの組合せは、本実施例及び細胞ペレットについての前述の実験
においてＨＩＶ−ＲＴの完全な阻害を引き起こした。前記の実験では、ＨＩＶ−
ＲＴの９６％の阻害であった（実施例７参照）。３つの薬剤の組合せＡＺＴ＋Ｐ
ＥＧ＋ＳＡＱは、３つのウェルのうち２つでＨＩＶ−ＲＴの完全な阻害を引き起
こし、第３のウェルの値はコントロールの９５．３％の阻害であった。一方、上
清においては、サンプル＃２０〜２２において同一のパターンが観察された。４つの薬剤の組合せＭＩＳＩＤ＋ＡＺＴ＋ＰＥＧ＋ＳＡＱは、上清サンプルウ
ェルの３つすべてでＨＩＶ−ＲＴの完全な阻害を引き起こした。これらの値は、
同一実験に由来する細胞ペレットにおける測定値に対応した。これらの値は、Ｈ
ＩＶ−ＲＴの最大阻害のため、本発明者等が以前に測定した３つの薬剤措置に重
ね合わせることが可能であった。この組合せについての生化学的理論的根拠は、ＲＲ阻害剤ＭＩＳＩＤはｄＮＴ
Ｐプールを枯渇させ、これがＨＩＶ−ＲＴに対するＡＺＴ−トリホスフェート（
ＡＺＴＴＰ）の活性を増強するということである。増強された阻害効果は、タン
パク質＋プロテアーゼ阻害剤のこのウイルスに対する既知の選択的な相乗効果に
対して相加的又は相乗的であろう。ＭＩＳＩＤ単独はかなりの抗ＨＩＶ−ＲＴ活
性を有するようなので、この三段論法は、これらのクラスの１以上の薬剤に耐性
を有するＨＩＶ粒子を用いた実験又は多耐性ＨＩＶ変異体に感染した患者におい
て正しいことが示されると本発明者等は考えている。

【０１１７】実施例９：ＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅ、サキナビル、ＡＺＴ及びＭＩＳＩＤ（ＰＬ− ７）のＣＥＭ／０細胞ペレットにおける相乗効果の測定材料及び方法本実施例に使用した細胞系は、ＣＥＭ／０、ヒトＴ細胞白血病細胞系であった
。ＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅ（ＯＮＣＡＳＰＡＲ）はRhone-Poulenc Rorerより提供を受けた。サキナビルは市販されていた。ＡＺＴはSigmaより購入した。ＭＩＳＩＤ、リボヌクレオチドレダクターゼ阻害剤は、Nandy P, Lien EJ, Avramis VI
, Med. Chem. Res. 1995, 5:664-679の記載にしたがい合成した。ＲＰＭＩ−１６４０培地（Irvine Scientific, Irvine, CA）を、１０％ウシ胎仔血清（Gemin
i Biosource, Calabasas, CA）、５％１ＭＨｅｐｅｓ緩衝液及び５％非必須
アミノ酸（Irvine Scientific, Irvine, CA）で強化した。使用した薬剤濃度は下記の通りであった。ＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅＩＣ５０単独：０．４０ＩＵ／ｍｌサキナビルＩＣ５０単独：２５μＭＡＺＴ：１μＭＭＩＳＩＤ：０．６８５μＭＰＥＧＩＣ５０組合せ：０．２３ＩＵ／ｍｌＳＡＱＩＣ５０組合せ：１４．５２μＭ要約すると、３×１０⁶細胞／ｍｌを、５％ＣＯ₂、３７℃下、ＰＨＡ＋培地で
４８時間刺激した。更に、同数の細胞をＰＨＡを含まない培地中で４８時間イン
キュベートしてネガティブコントロールとして役立てた。この時点で、標準プロ
トコルにより細胞にＨＩＶを接種した。本実施例においては、ＰＨＡ刺激した健
康なヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）由来のＨＩＶ含有上清を、ＰＨＡ刺激ＣＥ
Ｍ／０細胞培養から除去しなかったことに注意すべきである。それゆえ、ＨＩＶ
−１ウイルスは上清中に常に存在し、新規に生成し非感染性のＴ細胞のインビボ
臨床条件を刺激する実験条件は、常に一定のＨＩＶ−１粒子への曝露下にあった
。これらのウイルス粒子は、患者の既に感染したＴ細胞及び／又はリンパ節によ
り放出された。

【０１１８】実験用薬剤を適切な濃度で、ウイルス接種と同時又はウイルスインキュベーシ
ョン９０分後（Ｔ細胞が感染し、新規なＨＩＶ−１ウイルス粒子を生成するのに
十分な時間）に細胞へ添加した。コントロールの細胞を、７日間続いた曝露期間
の間、薬剤を含まない培地中に再懸濁した。コントロールのフラスコの培地のア
リコートを、Ｒｘ５日後に得た。７日目に、各１ｍｌの培地のアリコート３つを
フラスコから採取し、液体窒素下で保存した。更に、残りの細胞を３つに分け、
ペレット化して、−８０℃で保存した。本実施例により生成したサンプルを区分化した。９０分間のウイルスインキュ
ベーションフラスコ由来の細胞培養の細胞ペレット（実施例７参照）を、非放射
性アッセイ用キットを使用してＨＩＶ−ＲＮＡ定量アッセイについてアッセイし
た。検量線を決定し、実験サンプルのＨＩＶ−ＲＴレベルを前記と同様にして計
算した。サンプルはＴ細胞ペレットの培養に由来し、かつＨＩＶ−ＲＴの結果について
の前記のものと同一の実験に由来した。結果を実施例７（細胞ペレット）及び実
施例８（上清）において検討した。ＣＥＭ／０Ｔ細胞のサンプルにおけるＨＩＶ−ＲＴＥＬＩＳＡ定量的アッ
セイからの最初の観察結果は、薬剤処理により、７日目のＨＩＶＲＮＡ活性が
同日の未処理のコントロール細胞と比較して減少していたということである。定
量的結果を表７及び図１１に示す。表７の「ＰＥＧ」はＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅを
示すことに注意すべきであるＡＺＴ単独で引き起こされる定量的な期間におけるＨＩＶＲＮＡの阻害（サ
ンプル＃１１〜１３）は、単一薬剤としてのＳＡＱ及びＭＩＳＩＤよりも大きか
った（ＡＺＴに対する感受性ＨＩＶ−１ウイルス）。ＨＩＶ−ＲＴの大きな阻害
は、ＳＡＱ＋ＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅの組合せ（コントロールの３８％）及びＰＥ
Ｇ−ＡＳＮａｓｅ＋ＳＡＱ＋ＡＺＴの３つの薬剤の組合せ（コントロールの３０
％）により観察された。４つの薬剤の組合せの措置ＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅ＋ＳＡ
Ｑ＋ＭＩＳＩＤ＋ＡＺＴを用いて試験した３つ全てのサンプル＃２３、２４及び
２５は、コントロールの２０％という本実施例における最大のＨＩＶ−ＲＮＡを
有していた。このことは、リボヌクレオチドレダクターゼ阻害剤であるＭＩＳＩ
Ｄの有意な貢献を示している。新規なリボヌクレオチドレダクターゼ（ＲＲ）阻害剤ＭＩＳＩＤをＩＣ₅₀濃度
（０．６８５μＭ）にて単独で使用したとき、単一薬剤及び最も重要なことには
３つのその他の薬剤との組合せと同様にＨＩＶＲＴの有意な阻害を示した。こ
れは細胞ペレットと同様の結果（実施例６参照）であり、ＲＲ阻害剤のこのクラ
スのメンバーが、細胞内及びＴ細胞培養の上清サンプルにおいて抗白血病活性に
加えて抗ＨＩＶ活性をも示すという繰り返しの証拠である。この組合せについての生化学的理論的根拠は、ＭＩＳＩＤ、ＲＲ阻害剤はｄＮ
ＴＰプールを枯渇させこれがＨＩＶ−ＲＴに対するＡＺＴ−トリホスフェート（
ＡＺＴＴＰ）の活性を増強するということである。増強された阻害効果は、タン
パク質＋プロテアーゼ阻害剤のこのウイルスに対する既知の選択的な相乗効果に
対して相加的又は相乗的であろう。ＭＩＳＩＤ単独はかなりの抗ＨＩＶ−ＲＴ活
性を有するようなので、この三段論法は、これらのクラスの１以上の薬剤に耐性
を有するＨＩＶ粒子を用いた実験又は多耐性ＨＩＶ変異体に感染した患者におい
て正しいことが示されると本発明者等は考えている。

【０１１９】実施例１０：ＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅ、サキナビル、ＡＺＴ及びＭＩＳＩＤ（ＰＬ −７）のＨＩＶ−ＲＴの抑制における相乗効果の測定材料及び方法本実施例に使用した細胞系は、ＣＥＭ／０、ヒトＴ細胞白血病細胞系であった
。ＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅ（ＯＮＣＡＳＰＡＲ）はRhone-Poulenc Rorerより提供を受けた。サキナビルは市販されていた。ＡＺＴはSigmaより購入した。ＭＩＳＩＤ、リボヌクレオチドレダクターゼ阻害剤は、Nandy P, Lien EJ, Avramis VI
, Med. Chem. Res. 1995, 5:664-679の記載にしたがい合成した。ＲＰＭＩ−１６４０培地（Irvine Scientific, Irvine, CA）を、１０％ウシ胎仔血清（Gemin
i Biosource, Calabasas, CA）、５％１ＭＨｅｐｅｓ緩衝液及び５％非必須
アミノ酸（Irvine Scientific, Irvine, CA）で強化した。使用した薬剤濃度は下記の通りであった。ＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅＩＣ５０単独：０．４０ＩＵ／ｍｌサキナビルＩＣ５０単独：２５μＭＡＺＴ：１μＭＭＩＳＩＤ：０．６８５μＭＰＥＧＩＣ５０組合せ：０．２３ＩＵ／ｍｌＳＡＱＩＣ５０組合せ：１４．５２μＭ要約すると、３×１０⁶細胞／ｍｌを、５％ＣＯ₂、３７℃下、ＰＨＡ＋培地で
４８時間刺激した。更に、同数の細胞をＰＨＡを含まない培地中で４８時間イン
キュベートしてネガティブコントロールとして役立てた。この時点で、標準プロ
トコルにより細胞にＨＩＶを接種した。本実施例においては、ＰＨＡ刺激した健
康なヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）由来のＨＩＶ含有上清を、ＰＨＡ刺激ＣＥ
Ｍ／０細胞培養から除去しなかったことに注意すべきである。それゆえ、ＨＩＶ
−１ウイルスは上清中に常に存在し、新規に生成し非感染性のＴ細胞のインビボ
臨床条件を刺激する実験条件は、常に一定のＨＩＶ−１粒子への曝露下にあった
。本実施例において、本発明者等は、Ｔ細胞におけるコントロールのＨＩＶ−Ｒ
ＮＡにより非常に高いＨＩＶ−１力価を観察した（実施例９参照）。これらのウ
イルス粒子は、患者の既に感染したＴ細胞及び／又はリンパ節により放出された
。

【０１２０】実験用薬剤を適切な濃度で、ウイルス接種と同時又はウイルスインキュベーシ
ョン９０分後（Ｔ細胞が感染し、新規なＨＩＶ−１ウイルス粒子を生成するのに
十分な時間）に細胞へ添加した。コントロールの細胞を、７日間続いた曝露期間
の間、薬剤を含まない培地中に再懸濁した。コントロールのフラスコの培地のア
リコートを、Ｒｘ５日後に得た。７日目に、各１ｍｌの培地のアリコート３つを
フラスコから採取し、液体窒素下で保存した。更に、残りの細胞を３つに分け、
ペレット化して、−８０℃で保存した。上清サンプルをＴ細胞培養から得、−８
０℃で保存した。本実施例により生成したサンプルを区分化した。９０分間のウ
イルスインキュベーションフラスコ由来の細胞培養の細胞ペレット（実施例９参
照）を、非放射性アッセイ用キットを使用してＨＩＶ−ＲＮＡ定量アッセイにつ
いてアッセイした。本発明者等は、これらＴ細胞の上清からの定量的ＨＩＶ−Ｒ
ＮＡの結果を開示する。検量線を決定し、実験サンプルのＨＩＶ−ＲＴレベルを
前記と同様にして計算した。結果と考察サンプルは、ＨＩＶ−ＲＴの結果（実施例８参照）及びＴ細胞における定量的
ＨＩＶ−ＲＮＡ（実施例９参照）についての前記のものと同一の実験に由来する
Ｔ細胞ペレットの培養に由来した。ＣＥＭ／０Ｔ細胞の上清サンプルにおけるＨＩＶ−ＲＴ定量的アッセイか
らの最初の観察結果は、薬剤処理により、７日目のＨＩＶＲＮＡ活性が同日の
未処理のコントロール細胞と比較して減少していたということである。定量的結
果を添付の表（表８）に示す。表８の「ＰＥＧ」はＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅを示す
ことに注意すべきである。定量的コントロールＨＩＶ−ＲＮＡレベル（ウイルス
ゲノムコピー／ｍｌ）は過去の実験の値よりも高く、未処理のコントロールレベ
ルと類似していた（Ｔ細胞ペレットの２１４，４４５対上清の１９５，４８３）
。

【０１２１】ＳＡＱ、ＡＺＴ又はＭＩＳＩＤ単独により引き起こされる定量的期間における
ＨＩＶ−ＲＮＡの阻害（サンプル＃８〜１６）は、これらの中で非統計学的に有
意であった（ＡＺＴに対する感受性ＨＩＶ−１ウイルス）。未処理コントロール
と比較して上清におけるＨＩＶ−ＲＮＡの同様の阻害％が、ＳＡＱ＋ＰＥＧ−Ａ
ＳＮａｓｅの組合せ又はＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅ＋ＳＡＱ＋ＡＺＴの３つの薬剤の
組合せにより観察された。しかしながら、４つの薬剤の組合せの措置ＭＩＳＩＤ
＋ＡＺＴ＋ＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅ＋ＳＡＱを用いて試験した３つ全てのサンプル
＃２３、２４及び２５は、コントロールの５０％という本実施例における最大の
ＨＩＶ−ＲＮＡ阻害を有していた。このことは、リボヌクレオチドレダクターゼ
阻害剤であるＭＩＳＩＤの有意な貢献を明確に示している。後者のデータセット
は、コントロールの２０％のＴ細胞ペレットにおいて示されたＨＩＶ−ＲＮＡ阻
害の処理の観察結果を確認した（実施例９）。過去の実験のデータ及び本実施例
の証拠は、上清中のＨＩＶ力価が高く残存する程、Ｔ細胞及び上清中のウイルス
の阻害は低くなることを示している。換言すれば、データは、ａ）これらの組合
せの措置はこれらの条件下、すなわち高いＨＩＶ−ＲＮＡコピー数及び／又はウ
イルス血症を有する患者において連続的に提供しなければならないこと、ｂ）Ａ
ＺＴ＋ＳＡＱの増強は、第三のＲＴ阻害剤、例えば３ＴＣ又はＲＲ阻害剤、例え
ばＭＩＳＩＤ又はヒドロキシ尿素によってＨＩＶ−ＲＴに対するＡＺＴトリホス
フェート（ＡＺＴＴＰ）の活性を増強されることを要求することを示唆している
。新規なリボヌクレオチドレダクターゼ（ＲＲ）阻害剤ＭＩＳＩＤをＩＣ₅₀濃度
（０．６８５μＭ）にて単独で使用したとき、単一薬剤として有意なＨＩＶ−Ｒ
ＮＡ阻害を示した。この値はＳＡＱ又はＡＺＴの阻害とほぼ等しかった。最も重
要なのは、ＭＩＳＩＤが、３つのその他の薬剤との組合せにおいて、Ｔ細胞ペレ
ット及び上清におけるＨＩＶ−ＲＴに対して（実施例７及び８参照）並びに上清
中に残存するＨＩＶ−ＲＮＡの抑制に対して（表８）有意に有用であることを示
したことである。これはＴ細胞ペレット（実施例６及び９参照）における結果で
あり、ＲＲ阻害剤のこのクラスのメンバーが、細胞内及びＴ細胞培養の上清サン
プルにおいて抗白血病活性に加えて抗ＨＩＶ活性をも示すという繰り返しの証拠
である。この組合せについての生化学的理論的根拠は、ＲＲ阻害剤ＭＩＳＩＤはｄＮＴ
Ｐプールを枯渇させ、これがＨＩＶ−ＲＴに対するＡＺＴ−トリホスフェート（
ＡＺＴＴＰ）の活性を増強するということである。増強された阻害効果は、タン
パク質＋プロテアーゼ阻害剤のこのウイルスに対する既知の選択的な相乗効果に
対して相加的又は相乗的であろう。ＭＩＳＩＤ単独はかなりの抗ＨＩＶ−ＲＴ活
性を有するようなので、この三段論法は、これらのクラスの１以上の薬剤に耐性
を有するＨＩＶ粒子を用いた実験又は多耐性ＨＩＶ変異体に感染した患者におい
て正しいことが示されると本発明者等は考えている。

【０１２２】実施例１０：ＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅ、サキナビル、ＡＺＴ及び３ＴＣのＣＥＭ／０細胞ペレットに対する相乗作用の測定本実施例は、実施例９と同様の手順、同一の材料濃度を使用して行った。しか
しながら、ＭＩＳＩＤの代わりに３ＴＣを使用した。本実施例においては、ＰＥ
Ｇ−ＡＳＮａｓｅ、サキナビル、ＡＺＴ及び３ＴＣの組合せに対するＴ細胞上清
中のＨＩＶ−ＲＮＡの曝露を測定した。本実施例の結果を表９に示す。表９の「
ＰＥＧ」はＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅを示すことに注意すべきである。表９において
、サキナビル及びＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅ単独によりＨＩＶ−ＲＴがある程度阻害
されることが示された。しかしながら、ＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅ、サキナビル、Ａ
ＺＴ及び３ＴＣの組合せはＨＩＶ−ＲＴの完全な阻害を引き起こした。実施例１１：ＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅ、サキナビル、ＡＺＴ及び３ＴＣのＣＥＭ／０細胞上清に対する相乗作用の測定本実施例は、実施例１０と同様の手順、同一の材料濃度を使用して行った。し
かしながらＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅ、サキナビル、ＡＺＴ及び３ＴＣの組合せに対
するＴ細胞上清中のＨＩＶ−ＲＮＡの曝露を測定した。本実施例の結果を表１０
に示す。表１０の「ＰＥＧ」はＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅを示すことに注意すべきで
ある。表１０において、サキナビル及びＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅ単独によりＨＩＶ
−ＲＴがある程度阻害される（それぞれ、コントロールの５５％及び７３％）こ
とが示された。ＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅ、サキナビル及びＡＺＴの組合せは大きな
ＨＩＶ−ＲＮＡ阻害を引き起こした（コントロールの約２１％）。しかしながら
、ＰＥＧ−ＡＳＮａｓｅ、サキナビル、ＡＺＴ及び３ＴＣの組合せはＨＩＶ−Ｒ
Ｔの完全な阻害を引き起こした（コントロールの０％）（表１０参照）。本発明は、本発明の精神又は必須の特性から離れることなしにその他の特定の
形態で具体化されるだろう。

【０１２３】表１ ^*Ｎは上清のウイルスのゲノムコピー数／ｍｌ又はコピー数／細胞ペレットである。ＨＩＶ−１モニターアッセイのダイナミックレンジは４００〜７５０，００
０コピー／ｍｌである。４００コピー／ｍｌ未満の量が必要か否かを研究所に質
問した。

【０１２４】表２ＨＩＶ−ＲＮＡアッセイ用のサンプルリストＨＩＶ−ＲＮＡアッセイについて全１３のペレット

【０１２５】表２ａＨＩＶ−ＲＴアッセイ＃４についてのサンプルログＭＳ検量線Ｙ＝０．５９５５（Ｘ）＋０．０９３６３ｒ＝０．９９６７

【０１２６】表３ＨＩＶモニターアッセイの結果得られた上清上清 ^*ＨＩＶウイルスは培地から除去されなかった。ＨＩＶ−１は、Ｔ細胞を除いてこれらの薬剤により「殺される」ことができなかった。したがって、ＰＥＧ−Ａ
ＳＮａｓｅの上清中の低レベルのＨＩＶは、感染によるＨＩＶの喪失及びＴ細胞
による非再生によるものである。この観察結果は、検出不可能なＨＩＶＲＮＡ
の細胞ペレットデータと十分に適合した。

【０１２７】表４Ｎ^*はウイルスゲノムコピー数／上清又はコピー数／細胞ペレットである。ＨＩＶ−１モニターアッセイのダイナミックレンジは４００〜７５０，０００コピ
ー／ｍｌである。４００コピー／ｍｌ未満の量が必要か否かを研究所に質問した
。

【０１２８】表５抗ＨＩＶ剤の相乗効果研究についてのサンプルログ実験デザインＣＥＭ／０、ＰＨＡ刺激、４８時間ＣＥＭ／０、ウイルス接種、９０分間のインキュベーション薬剤曝露Ｒｘ７日後の細胞ペレットＥＬＩＳＡアッセイ検量線Ｙ＝１．１３Ｘ＋０．１００ｒ＝０．９９９表５−１

【０１２９】表５−２ ^*その他の２つの点が０の場合、単一の点の決定を示す

【０１３０】表６抗ＨＩＶ剤の相乗効果研究についてのサンプルログ実験デザインＣＥＭ／０、ＰＨＡ刺激、４８時間ＣＥＭ／０、ウイルス接種、同時の薬剤曝露Ｒｘ７日後の細胞懸濁液由来の上清ＥＬＩＳＡアッセイ検量線Ｙ＝０．７３７９５Ｘ＋０．３００６ｒ＝０．９９９６２表６−１

【０１３１】表７抗ＨＩＶ剤の相乗効果研究についてのサンプルログＨＩＶ−ＲＮＡについて試験するサンプル表８抗ＨＩＶ剤の相乗効果研究についてのサンプルログ実験デザインＣＥＭ／０、ＰＨＡ刺激、４８時間ＣＥＭ／０、ウイルス接種、９０分間のインキュベーション及び薬剤曝露Ｒｘ７日後の細胞ペレットＥＬＩＳＡアッセイ

【０１３２】表９ＨＩＶ−ＲＴＥＬＩＳＡアッセイについてのサンプルログ実験デザインＣＥＭ／０、ＰＨＡ刺激、４８時間ＣＥＭ／０、ウイルス接種、＋／−９０分間のインキュベーション及び薬剤曝露
Ｒｘ７日後の細胞懸濁液由来のペレット及び上清ＥＬＩＳＡアッセイ検量線Ｙ＝０．７５８４７Ｘ＋０．０７７９２ｒ＝０．９９９１４

【０１３３】表１０抗ＨＩＶ剤の相乗効果研究についてのサンプルログ実験デザインＣＥＭ／０、ＰＨＡ刺激、４８時間ＣＥＭ／０、ウイルス接種、９０分間のインキュベーション、薬剤曝露Ｒｘ７日後の細胞懸濁液由来の上清ＥＬＩＳＡアッセイＨＩＶ−ＲＮＡアッセイ

【図面の簡単な説明】

【図１】図１は、ＩＣ50の濃度のＰＥＧ−アスパラギナーゼもしくはサキナビル（ＳＡ
Ｑ）単独またはそれらの組み合わせで処理したＣＥＭ／０−Ｔ細胞（±ＰＨＡ）
でのＨＩＶ−ＲＴの抑制を示す。

【図２】図２は、異なる薬剤濃度について７２時間後のＴ細胞（ＣＥＭ／０）へのサキ
ナビルの細胞毒性を表す。

【図３】図３は、異なる薬剤濃度について単独使用および連続併用（ＰＥＧ−アスパラ
ギナーゼの後でサキナビル）した場合のＴ細胞へのＰＥＧ−アスパラギナーゼお
よびサキナビルの細胞毒性を示す。

【図４】図４は、異なる薬剤濃度について単独使用および連続併用（サキナビルの後で
ＰＥＧ−アスパラギナーゼ）した場合のＴ細胞へのそれらの細胞毒性を示す。

【図５】図５は、異なる薬剤濃度について単独使用および同時併用した場合のＴ細胞へ
のＰＥＧ−アスパラギナーゼおよびサキナビルの細胞毒性を示す。

【図５ａ】図５ａは、ＰＥＧ−アスパラギナーゼおよびサキナビルを同時併用および単独
使用で細胞に暴露した後のＨＩＶ−ＲＴの抑制を示す。

【図６】図６は、異なる薬剤濃度について同時併用した場合のＰＥＧ−アスパラギナー
ゼおよびサキナビルのＴ細胞での相乗作用を示す。

【図７】図７は、サキナビルの後でＰＥＧ−アスパラギナーゼおよびＰＥＧ−アスパラ
ギナーゼの後でサキナビルを連続併用した場合、並びにＰＥＧ−アスパラギナー
ゼとサキナビルを同時併用した場合のＣＥＭ／０における併用指標を示す。

【図８】図８は、異なる濃度のＰＥＧ−アスパラギナーゼに２４時間暴露した後のＣＥ
Ｍ／０−Ｔ細胞でのアスパラギン、グルタミンおよびアスパラギン酸濃度の減少
を示す。

【図８ａ】図８ａは、種々の濃度のＨＩＶ−ＲＴに対する光学濃度（ＯＤ）の検定曲線を
示す。

【図９】図９は、ＰＥＧ−アスパラギナーゼおよびサキナビルを単独使用並びに併用し
て細胞に暴露した後の細胞ペレット当たりのＨＩＶＲＮＡコピー数を示したもの
である。

【図９ａ】図９ａは、ＰＥＧ−アスパラギナーゼおよびサキナビルを単独使用並びに併用
して細胞に暴露した後の細胞ペレット当たりのＨＩＶＲＮＡコピー数をＬｏｇ10
で示したものである。

【図１０】図１０は、ＨＩＶ−ＲＴのＥＬＩＳＡアッセイのための検定曲線を示す。

【図１１】図１１は、ＰＥＧ−アスパラギナーゼ、サキナビル、ＡＺＴおよびＭＩＳＩＤ
の単独療法、並びにサキナビルとＰＥＧ−アスパラギナーゼ；ＡＺＴ、サキナビ
ルとＰＥＧ−アスパラギナーゼ；およびＭＩＳＩＤ、ＡＺＴ、サキナビルとＰＥ
Ｇ−アスパラギナーゼの併用療法で処理したＣＥＭ−Ｔ細胞のＨＩＶ−１ＲＮＡ
定量アッセイを示す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｋ 31/343 Ａ６１Ｋ 31/4035 31/4035 31/427 31/427 31/44 31/44 31/47 31/47 31/496 31/496 31/7068 31/7068 31/7072 31/7072 31/7076 31/7076 31/708 31/708 45/00 38/00 47/34 45/00 47/48 47/34 Ａ６１Ｐ 31/18 47/48 Ａ６１Ｋ 31:7072）Ａ６１Ｐ 31/18 37/54 //(Ａ６１Ｋ 38/46 37/02 31:7072） (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ) ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ (72)発明者コーエンルイスアメリカ合衆国ペンシルヴァニア州 19464 ポッツタウンビーチウッドテラス 100 Ｆターム(参考） 4C076 AA06 AA12 AA17 AA22 AA24 AA29 BB01 BB13 BB21 BB25 BB30 CC35 EE23A EE59 FF02 4C084 AA02 AA17 DC01 DC32 NA15 ZB332 4C086 AA01 AA02 BA06 BC11 BC17 BC27 BC28 BC42 BC50 BC82 CB07 EA17 EA18 GA08 MA01 MA04 MA10 NA15 ZB33 ZC20 4C206 FA53 GA08 HA27 JA13 MA01 MA04 MA10 MA17 NA15 ZB33

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染を抑制または治療する
方法であって、前記方法が、有効量のＰＥＧ−アスパラギナーゼ化合物、並びに
場合によってプロテアーゼインヒビター化合物、リボヌクレオチドレダクターゼ
インヒビター化合物およびＨＩＶ逆転写酵素抑制化合物から成る群から選ばれる
少なくとも１つの化合物をその必要がある患者に投与することを含む前記ヒト免
疫不全ウイルス感染の抑制または治療方法。
【請求項２】少なくとも１つの化合物がプロテアーゼインヒビター化合物
である請求項１に記載の方法。
【請求項３】少なくとも１つの化合物がリボヌクレオチドレダクターゼイ
ンヒビター化合物である請求項１に記載の方法。
【請求項４】少なくとも１つの化合物がＨＩＶ逆転写酵素抑制化合物であ
る請求項１に記載の方法。
【請求項５】前記プロテアーゼインヒビター化合物が、サキナビル、ネル
フィナバー、インジナバー、エンジノビア、リトナバー、クリキシバン、ビラセ
プト、ノルバー、およびＶＸ−４７８から選ばれる請求項１に記載の方法。
【請求項６】前記プロテアーゼインヒビター化合物がサキナビルまたはエ
ンジノビアである請求項１に記載の方法。
【請求項７】前記プロテアーゼインヒビター化合物がサキナビルである請
求項１に記載の方法。
【請求項８】前記リボヌクレオチドレダクターゼインヒビター化合物が、
ヒドロキシウレア（ＨＵ）、ＢＷ−３４８Ｕ８７、３−アミノピリジン−２−カ
ルボキサアルデヒドチオセミカルバゾン（３−ＡＰ）アミドクス（ＶＦ２３６；
ＮＳＣ−３４３３４１；Ｎ，３，４−トリヒドロキシベンゼンカルボキシイミド
アミド）、ＢＩＬＤ１２５７（２−ベンジル−３−フェニルプロピオニル−Ｌ−
（Ｎ−メチル）バリル−Ｌ−３（メチル）バリル−Ｌ−（Ｎ４、Ｎ４−テトラメ
チレン）アスパラギニル−Ｌ−（３，３−テトラメチレン）アスパルチル−Ｌ−
（４−メチル）ロイシン）、ＢＩＬＤ１３５７（２−ベンジル−３−フェニルプ
ロピオニル−Ｌ−（Ｎ−メチル）バリル−Ｌ−３−（メチル）バリル−Ｌ−（Ｎ
４，Ｎ４−テトラメチレン）アスパラギニル−Ｌ−（３，３−テトラメチレンア
スパラギン酸１−〔１（Ｒ）−エチル−２，２−ジメチルプロピルアミド）〕、
ＢＩＬＤ１６３３、ＢＩＬＤ７３３（３−フェニルプロピオニル−Ｌ−（Ｎ−メ
チル）バリル−Ｌ−〔３−メチル）バリル−Ｌ−〔３−（ピロリジン−１−イル
カルボニル）〕アラニル−Ｌ−（１−カルボキシシクロペンチル）グリシル−Ｌ
−（４−メチル）ロイシノール）、ＢＩＬＤ１２６３（２−ベンジル−３−フェ
ニルプロピオニル−Ｌ−（Ｎ−メチル）バリル−Ｌ−３−（メチル）バリル−Ｌ
−（Ｎ４，Ｎ４−テトラメチレン）アスパラギニル−Ｌ−（３，３−テトラメチ
レン）アスパルチル−Ｌ−（４−メチル）ロイシノール）、ＢＩＬＤ１３５１（
１−〔１（Ｓ）−〔５（Ｓ）−〔３−〔（オール−シス）−２，６−ジメチルシ
クロヘキシル〕ウレイド〕−２（Ｓ）−（３，３−ジメチル−２−オキソブチル
）−６，６−ジメチル−４−オキソヘプタノイルアミノ〕−１−〔１（Ｒ）−エ
チル−２，２−ジメチルプロピルカルバモル〕メチル〕シクロペンタンカルボン
酸〕）、ＣＩ−Ｆ−アラＡ（２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−
ベータ−Ｄ−アラビノフラノシル）アデニン、ＤＡＨ（Ｄ−アスパルティック−
ベータ−ヒドロキサメート）、ＤＤＦＣ（２'−デオキシ−２'，２'−ジフルオロシチジン）、Ｄｉｄｏｘ（ＶＦ１４７；ＮＳＣ３２４３６０；Ｎ，３，４−ト
リヒドロキシベンズアミド）、Ｅｕｒｄ（３'−エチニルウリジン），ＧＴＩ２０４０、ＧＴＩ２５０１、ＩＭＨＡＧ（１−イソキノリルメタン−Ｎ−ヒドロキ
シ−Ｎ'−アミノグアニン）、ＬＹ２０７７０２（２'、２'−ジフルオロ−２'−
デオキシリボフラノシル−２，６−ジアミノプリン）、ＬＹ２９５５０１（Ｎ−
〔〔３，４−ジクロロフェニル）アミノ〕カルボニル〕２，３−ジヒドロ−５−
ベンゾフランスルホンアミド）、ＭＤＬ１０１７３１（ＦＭｄＣ；ＫＷ２３３１
；（２Ｅ）−２'−デオキシ−２'−フルオロメチレン）シチジン）、パラバクチ
ン、スロフェナー（ＬＹ１８６６４１；Ｎ−〔〔（４−クロロフェニル）アミノ
〕カルボニル〕−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−５−スルホンアミド）、
ＴＡＳ１０６（Ｅｃｙｄ；３'−エチニルシチジン）、トリアピン（ＯＣＸ１９１；ＯＣＸ０１９１）、トリミドクス（ＶＦ２３３；Ｎ，３−４，５−テトラヒ
ドロキシベンゼンカルボキシイミドアミド）、および下記式Ｉの化合物、または
その医薬的に許容できる塩、そのＮ−オキシド、その溶媒和物、その酸ビオイソ
ステアもしくはそのプロドラッグから選ばれる請求項１の方法：式中、Ｒ１はアルキル、アルケニル、アルキニル、または電子吸引基で；さらに
Ｒ２はアルキル、アルケニルである。
【請求項９】前記リボヌクレオチドレダクターゼインヒビター化合物が式
Ｉの化合物である請求項９に記載の方法。
【請求項１０】前記リボヌクレオチドレダクターゼインヒビター化合物が
式Ｉの化合物または、その医薬的に許容できる塩、そのＮ−オキシド、その溶媒
和物、その酸ビオイソステアもしくはそのプロドラッグで、式中Ｒ１が低級アル
キル、低級アルケニル、低級アルキニル、または電子吸引基で、さらにＲ２が低
級アルキル、低級アルケニル、低級アルキニルである請求項９に記載の方法。
【請求項１１】前記リボヌクレオチドレダクターゼインヒビター化合物が
式Ｉの化合物または、その医薬的に許容できる塩、そのＮ−オキシド、その溶媒
和物、その酸ビオイソステアもしくはそのプロドラッグで、式中Ｒ１が低級アル
キル、低級アルケニル、低級アルキニル、またはハロゲン基で、さらにＲ２が低
級アルキル、低級アルケニル、低級アルキニルである請求項９に記載の方法。
【請求項１２】前記リボヌクレオチドレダクターゼ化合物が式Ｉの化合物
または、その医薬的に許容できる塩、そのＮ−オキシド、その溶媒和物、その酸
ビオイソステアもしくはそのプロドラッグで、式中Ｒ１が低級アルキルまたはハ
ロゲン基で、さらにＲ２が低級アルキルである請求項９に記載の方法。
【請求項１３】前記リボヌクレオチドレダクターゼ化合物が式Ｉの化合物
または、その医薬的に許容できる塩、そのＮ−オキシド、その溶媒和物、その酸
ビオイソステアもしくはそのプロドラッグで、式中Ｒ１がハロゲン基で、さらに
Ｒ２が低級アルキルである請求項９に記載の方法。
【請求項１４】前記リボヌクレオチドレダクターゼインヒビター化合物が
式Ｉの化合物または、その医薬的に許容できる塩、そのＮ−オキシド、その溶媒
和物、その酸ビオイソステアもしくはそのプロドラッグで、式中Ｒ１が低級アル
キルで、さらにＲ２が低級アルキルである請求項９に記載の方法。
【請求項１５】前記リボヌクレオチドレダクターゼインヒビター化合物が
式Ｉの化合物または、その医薬的に許容できる塩、そのＮ−オキシド、その溶媒
和物、その酸ビオイソステアもしくはそのプロドラッグで、式中Ｒ１が臭素また
は塩素原子で、さらにＲ２がメチル基またはイソプロピル基である請求項９に記
載の方法。
【請求項１６】前記リボヌクレオチドレダクターゼインヒビター化合物が
式Ｉの化合物または、その医薬的に許容できる塩、そのＮ−オキシド、その溶媒
和物、その酸ビオイソステアもしくはそのプロドラッグで、式中Ｒ１がメチル基
で、さらにＲ２が低級アルキルである請求項９に記載の方法。
【請求項１７】前記リボヌクレオチドレダクターゼインヒビター化合物が
式Ｉの化合物または、その医薬的に許容できる塩、そのＮ−オキシド、その溶媒
和物、その酸ビオイソステアもしくはそのプロドラッグで、式中Ｒ１がメチル基
で、さらにＲ２がイソプロピル基である請求項９に記載の方法。
【請求項１８】前記式Ｉのリボヌクレオチドレダクターゼインヒビター化
合物がＭＩＳＩＤである請求項１に記載の方法。
【請求項１９】前記ＨＩＶ逆転写酵素抑制化合物が、ＡＺＴ（レトロバー
、ジドブジン）、ｄｄＩ（ビデクス、ジダノシン）、ｄｄＣ（ヒビド、ザルシタ
ビン）、ｄ４Ｔ（ゼリト、スタブジン）および３ＴＣ（エピバー、ラミブジン）
から選ばれる請求項１に記載の方法。
【請求項２０】前記ＨＩＶ逆転写酵素抑制化合物が、ＡＺＴ（レトロバー
、ジドブジン）および３ＴＣ（エピバー、ラミブジン）である請求項１に記載の
方法。
【請求項２１】前記ＨＩＶ逆転写酵素抑制化合物がＡＺＴ（レトロバー、
ジドブジン）である請求項１に記載の方法。
【請求項２２】ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染を抑制または治療す
る方法であって、前記方法が、下記式Ｉの化合物、またはその医薬的に許容でき
る塩、そのＮ−オキシド、その溶媒和物、その酸ビオイソステアもしくはそのプ
ロドラッグを含む医薬的に許容できる組成物の有効量をその必要がある患者に投
与することを含む前記ヒト免疫不全ウイルス感染の抑制または治療方法：式中、Ｒ１はアルキル、アルケニル、アルキニル、または電子吸引基で；さらに
Ｒ２はアルキル、アルケニル、アルキニルである。
【請求項２３】ＰＥＧ−アスパラギナーゼ化合物、並びに場合によってプ
ロテアーゼインヒビター化合物、リボヌクレオチドレダクターゼインヒビター化
合物およびＨＩＶ逆転写酵素抑制化合物から成る群から選ばれる少なくとも１つ
の化合物を含む医薬的に許容できる組成物にＨＩＶ感染細胞集団を暴露すること
を含む、ＨＩＶの産生を抑制またはＨＩＶの蔓延を制限する方法。
【請求項２４】前記化合物の投与が同時である請求項１に記載の方法。
【請求項２５】前記化合物の投与が連続的である請求項１に記載の方法。
【請求項２６】前記医薬的に許容できる組成物が、ＰＥＧ−アスパラギナ
ーゼ化合物、並びにプロテアーゼインヒビター化合物、リボヌクレオチドレダク
ターゼインヒビター化合物およびＨＩＶ逆転写酵素抑制化合物から成る群から選
ばれる少なくとも１つの化合物の相乗作用を示す組み合わせを含む請求項１に記
載の方法。
【請求項２７】ＰＥＧ−アスパラギナーゼ化合物、および場合によって以
下の１つまたは２つ以上（プロテアーゼインヒビター化合物、リボヌクレオチド
レダクターゼインヒビター化合物およびＨＩＶ逆転写酵素抑制化合物）、および
医薬的に許容できる担体を含む組成物。
【請求項２８】ＨＩＶに付随する生理学的状態を治療または予防するキッ
トであって、前記キットが複数の別々の容器を含み、前記容器の少なくとも１つ
がＰＥＧ−アスパラギナーゼ化合物を含み、前記容器の少なくとももう１つが、
プロテアーゼインヒビター化合物、ＨＩＶ逆転写酵素抑制化合物およびリボヌク
レオチドレダクターゼインヒビター化合物を含み、さらに前記容器が場合によっ
て医薬的担体を含む前記ＨＩＶ付随状態の治療または予防キット。