JP2002145951A - 重合体吸着剤及び製造方法 - Google Patents

重合体吸着剤及び製造方法

Info

Publication number
JP2002145951A
JP2002145951A JP2001244111A JP2001244111A JP2002145951A JP 2002145951 A JP2002145951 A JP 2002145951A JP 2001244111 A JP2001244111 A JP 2001244111A JP 2001244111 A JP2001244111 A JP 2001244111A JP 2002145951 A JP2002145951 A JP 2002145951A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
polymer
porogen
insulin
macroporous
polymers
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
JP2001244111A
Other languages
English (en)
Other versions
JP5226918B2 (ja
Inventor
Karl Chaplin Deissler
カール・チャップリン・ディースラ
Marlin Kenneth Kinzey
マーリン・ケンネス・キンゼイ
John Joseph Maikner
ジョン・ジョセフ・メイクナー
Robert E Rosen
ロバート・イー・ローゼン
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Rohm and Haas Co
Original Assignee
Rohm and Haas Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=22840394&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=JP2002145951(A) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Rohm and Haas Co filed Critical Rohm and Haas Co
Publication of JP2002145951A publication Critical patent/JP2002145951A/ja
Application granted granted Critical
Publication of JP5226918B2 publication Critical patent/JP5226918B2/ja
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Fee Related legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/281—Sorbents specially adapted for preparative, analytical or investigative chromatography
    • B01J20/282—Porous sorbents
    • B01J20/285—Porous sorbents based on polymers
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
    • B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
    • B01D15/10—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features
    • B01D15/20—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features relating to the conditioning of the sorbent material
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
    • B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
    • B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
    • B01D15/32—Bonded phase chromatography
    • B01D15/325—Reversed phase
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/22—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof comprising organic material
    • B01J20/26—Synthetic macromolecular compounds
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/22—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof comprising organic material
    • B01J20/26—Synthetic macromolecular compounds
    • B01J20/261—Synthetic macromolecular compounds obtained by reactions only involving carbon to carbon unsaturated bonds
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/28—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties
    • B01J20/28002—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties characterised by their physical properties
    • B01J20/28004—Sorbent size or size distribution, e.g. particle size
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/28—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties
    • B01J20/28014—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties characterised by their form
    • B01J20/28016—Particle form
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/28—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties
    • B01J20/28054—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties characterised by their surface properties or porosity
    • B01J20/28057—Surface area, e.g. B.E.T specific surface area
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/28—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties
    • B01J20/28054—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties characterised by their surface properties or porosity
    • B01J20/28069—Pore volume, e.g. total pore volume, mesopore volume, micropore volume
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/28—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties
    • B01J20/28054—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties characterised by their surface properties or porosity
    • B01J20/28069—Pore volume, e.g. total pore volume, mesopore volume, micropore volume
    • B01J20/28073—Pore volume, e.g. total pore volume, mesopore volume, micropore volume being in the range 0.5-1.0 ml/g
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/28—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties
    • B01J20/28054—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties characterised by their surface properties or porosity
    • B01J20/28069—Pore volume, e.g. total pore volume, mesopore volume, micropore volume
    • B01J20/28076—Pore volume, e.g. total pore volume, mesopore volume, micropore volume being more than 1.0 ml/g
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/28—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties
    • B01J20/28054—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties characterised by their surface properties or porosity
    • B01J20/28078—Pore diameter
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/28—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties
    • B01J20/28054—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties characterised by their surface properties or porosity
    • B01J20/28078—Pore diameter
    • B01J20/28083—Pore diameter being in the range 2-50 nm, i.e. mesopores
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/28—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties
    • B01J20/28054—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties characterised by their surface properties or porosity
    • B01J20/28078—Pore diameter
    • B01J20/28085—Pore diameter being more than 50 nm, i.e. macropores
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/28—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties
    • B01J20/28054—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties characterised by their surface properties or porosity
    • B01J20/28095—Shape or type of pores, voids, channels, ducts
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/281—Sorbents specially adapted for preparative, analytical or investigative chromatography
    • B01J20/286—Phases chemically bonded to a substrate, e.g. to silica or to polymers
    • B01J20/287—Non-polar phases; Reversed phases
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/305—Addition of material, later completely removed, e.g. as result of heat treatment, leaching or washing, e.g. for forming pores
    • B01J20/3064—Addition of pore forming agents, e.g. pore inducing or porogenic agents
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
    • B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
    • B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
    • B01D15/32—Bonded phase chromatography
    • B01D15/325—Reversed phase
    • B01D15/327—Reversed phase with hydrophobic interaction
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
    • B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
    • B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
    • B01D15/34—Size selective separation, e.g. size exclusion chromatography, gel filtration, permeation
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J2220/00—Aspects relating to sorbent materials
    • B01J2220/50—Aspects relating to the use of sorbent or filter aid materials
    • B01J2220/52—Sorbents specially adapted for preparative chromatography
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J2220/00—Aspects relating to sorbent materials
    • B01J2220/50—Aspects relating to the use of sorbent or filter aid materials
    • B01J2220/54—Sorbents specially adapted for analytical or investigative chromatography
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/89—Inverse chromatography
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/81—Carrier - bound or immobilized peptides or proteins and the preparation thereof, e.g. biological cell or cell fragment as carrier
    • Y10S530/812—Peptides or proteins is immobilized on, or in, an organic carrier
    • Y10S530/815—Carrier is a synthetic polymer

Abstract

(57)【要約】 （修正有） 【課題】クロマトグラフィーにおける好適な剛性ポリマ
ーマトリックスを提供する選択された多孔度及び透過性
特性を有する新規なマクロポーラスポリマーの提供。 【解決手段】（ａ）５０から１００重量％のポリビニル
芳香族モノマー及び（ｂ）０から５０重量％のモノ不飽
和ビニル芳香族モノマーのマクロポーラスポリマーであ
って、（ｉ）特定の全多孔度；（ｉｉ）特定のオペレイ
ショナルなメソポロシティー；（ｉｉｉ）特定の平均粒
子直径；（ｉｖ）特定の表面積；（ｖ）１０バール圧に
おいて７００から１，８００未満の流れ抵抗値及び６０
バール圧において１，５００から７，０００未満の流れ
抵抗値；及び（ｖｉ）ポリマーについて７５から１５０
グラムインシュリン／リッターである総インシュリン容
量及びポリマーについて６０から１５０グラムインシュ
リン／リッターである動的インシュリン容量を有する、
ポリマー。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】本発明は、メディア及び高圧逆相液体クロ
マトグラフィー（ＲＰＣ）における使用に好適な剛性ポ
リマーマトリックスを提供する選択された多孔度及び透
過性特性を有する新規なマクロポーラスポリマーに関す
る。そのポリマーは、長期間の使用の間で圧力の増加の
無い大規模クロマトグラフィーカラムの固定相として特
に有用である。
【０００２】ＲＰＣに有用な固定相は、特に（生体分子
の分離精製に要求されるような）高性能分取モードにお
いて、クロマトグラフィーカラム内部で発生した高い操
作圧力に耐えるために機械的に剛性でなければならな
い。シリカマトリックスは、過去においてこれらの用途
に一般的に使用され、満足すべき機械的剛性を有してい
る。しかし、シリカマトリックスは、高ｐＨ条件下で稼
動されることができず、そのことが幅広い範囲の生体分
子を分離するための使用が厳しく制限されている。この
要因は、クロマトグラフィー操作者が利用可能できる選
択肢を狭め、シリカメディアの製品寿命（それらは厳し
い条件下で清浄化できないのでより早く劣化する）に悪
影響を及ぼし、結果的に商業的生産プロセス全体の経済
性をより悪いものとしている。
【０００３】一方、有機ポリマーを基剤とした固定相
は、非常に広範囲なｐＨ条件に亘り典型的に稼動される
ことができるが、生体分子の分離に広く利用に供され
る。クロマトグラフィーの操作者は、高いｐＨでのプロ
セスを進める選択肢を有し、それはある種の分子用の分
離メディアについての溶解度、選択性及び容量等の改善
された特性のような利点を提示することができる。加え
て、重合体樹脂は、高ｐＨ条件下で良好に清浄化される
ことができ、従って、カラム有効期限を改善し、結局は
プロセス経済を改良する。しかしながら、現在の重合体
固定相は、高性能生体分子の分離に使用される高圧条件
でのメディアにおいて幾分圧縮性である。この圧縮性は
分離プロセスにとって有害である。何故なら運転可能な
流量の範囲を制限し、カラム内のポリマー床の完全性を
低下させることができるからである。例えば、下記の文
献は、「ウォール効果（ｗａｌｌ ｅｆｆｅｃｔｓ）」
がポリマー圧縮を最小化することが知られている、高速
分析操作の代表的カラム条件（０．５ｃｍ未満のカラム
内径）で使用されるポリマーを開示している。しかし、
これらの文献はウォール効果がないことによるポリマー
圧縮からの追加の圧力増大が予期される、大規模な高速
の市販のクロマトグラフィーカラムでの操作を開示して
はいない：ロイド、Ｌ．Ｌ及びワーナー、Ｆ．Ｐ．，独
特な高速マクロポーラス樹脂の分取高性能液体クロマト
グラフィー、Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ、５１
２巻、３６５〜３７６ページ（１９９０）；ロイド、
Ｌ．Ｌ．，高性能液体クロマトグラフィーにおける固定
相としての剛性マクロポーラスコポリマー、レビュー、
Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ、５４４巻、、２０
１〜２１７ページ、（１９９１）。
【０００４】非溶媒の存在下でジビニルベンゼン（ＤＶ
Ｂ）含有モノマー混合物のサスペンション重合から生成
された慣用のマクロポーラスコポリマーは、広範囲の細
孔径分布及び表面積を有するポリマーを与える。例え
ば、米国特許第４，６８６，２６９号は、モノマーの総
重量を基準として５０から３００％の有機補助溶剤を用
いて、モノマーを重合して０．５から５０ミクロンの平
均粒子直径を有し、及び少なくとも６０％のポリビニル
芳香族モノマーを含有する、分析規模での液体クロマト
グラフィーカラム（内径が０．８ｃｍ）に使用されるポ
リマーの調製法を開示するが、その文献は、製造規模で
のクロマトグラフィーカラム、即ち、２から１００ｃ
ｍ、典型的には５から８０ｃｍの内径を有するものにお
いて一般的な、高圧使用条件下で圧縮しない剛性ポリマ
ーマトリックスを提供する、選択された多孔度及び透過
特性を有するポリマーの調製法は開示していない。
【０００５】ポリマーの圧縮性は、分離メディアを通過
する流れの抑制に変換され、クロマトグラフィー系にお
ける追加の背圧を生じさせ、最終的にはサイクル時間の
長期化をもたらす。有意な圧縮を生ぜず、即ち、典型的
なＲＰＣプロセス条件下で発生した高操作圧力に対する
メディアとして耐えることができる重合体固定相が必要
となる。加えて、固定相は、また、望ましいクロマトグ
ラフィー性能を生じさせるために、ある種の標的生体分
子に関する満足すべき物質移動及び容量特性を有するこ
とが不可欠である。
【０００６】本発明で目的とする課題は、ＲＰＣ過程に
おいて同時に満足すべき圧力及び流れ特性を提供しなが
ら、生体分子の分離精製に好適なマクロポーラスポリマ
ー固定相を提供することである。
【０００７】本発明は、（ａ）５０から１００重量％の
１以上のポリビニル芳香族モノマー及び（ｂ）０から５
０重量％の１以上のモノ不飽和ビニル芳香族モノマーの
重合されたモノマー単位を含むマクロポーラスポリマー
であって、 （ｉ）１グラム当たり０．７から２立方センチメートル
の全多孔度； （ｉｉ）１グラム当たり０．７から１．９立方センチメ
ートルのオペレイショナルなメソポロシティー（ｏｐｅ
ｒａｔｉｏｎａｌ ｍｅｓｏｐｏｒｏｓｉｔｙ）； （ｉｉｉ）２から６００ミクロンの平均粒子直径； （ｉｖ）１グラム当たり２００から１５００平方メート
ルの表面積； （ｖ）１０バール圧において７００から１，８００未満
の流れ抵抗値及び６０バール圧において１，５００から
７，０００未満の流れ抵抗値；及び （ｖｉ）ポリマーについて７５から１５０グラムインシ
ュリン／リッターである総インシュリン容量及びポリマ
ーについて６０から１５０グラムインシュリン／リッタ
ーである動的インシュリン容量（ｄｙｎａｍｉｃ ｉｎ
ｓｕｌｉｎ ｃａｐａｃｉｔｙ）を有する、ポリマーを
提供する。
【０００８】好ましい態様において、本発明は、ポリマ
ーが， （ａ）１グラム当たり４００から１０００平方メートル
の表面積； （ｂ）１グラム当たり０．９から１．４立方センチメー
トルのオペレイショナルなメソポロシティー； （ｃ）１０から７５ミクロンの平均粒子直径； （ｄ）１０バール圧において７００から１，５００未満
の流れ抵抗値及び６０バール圧において１，５００から
５，０００未満の流れ抵抗値；及び （ｅ）ポリマーについて９０から１５０グラムインシュ
リン／リッターである総インシュリン容量及びポリマー
について７５から１５０グラムインシュリン／リッター
である動的インシュリン容量を有する、上述のマクロポ
ーラスポリマーを提供する。
【０００９】本発明は、また、水性サスペンションにお
いて、疎水性ポローゲン及び親水性ポローゲンを含む１
００から１７０パーセントのポローゲン混合物及び０．
５から１０％のフリーラジカル重合開始剤の存在下で、
０から５０パーセントのモノビニル芳香族モノマー及び
５０から１００パーセントのポリビニル芳香族モノマー
を重合することを含むマクロポーラスポリマーのを調製
する方法（全てのパーセント量はモノマーの総重量を基
準としている）であって、（ａ）親水性ポローゲンは、
疎水性ポローゲンに対して１．２／１より大で３／１ま
での重量比で存在し；及び（ｂ）親水性ポロ−ゲンは、
１以上の（Ｃ４〜Ｃ１０）アルカノールから選択され、
疎水性ポローゲンは、１以上の（Ｃ７〜Ｃ １０）芳香族
炭化水素及び（Ｃ６〜Ｃ１２）飽和炭化水素から選択さ
れる、方法を提供する。
【００１０】本発明は、更に、混合された生体分子の水
性溶液を、２から１００センチメートルの内径を有する
液体クロマトグラフィーカラム中で上述のマクロポーラ
スポリマーと接触させる混合された生体分子水性溶液の
精製方法であって、カラムが１０から１００バールの圧
力で操作される、方法を提供する。
【００１１】我々は、高圧逆相液体クロマトグラフィー
による生体分子の大規模分離精製に有用な新規なマクロ
ポーラスポリマーが、選択された多孔度及び透過特性を
有して製造され得ることを見出した。特に、我々は、特
定の重合条件下でモノマー相に対して特定割合の特定の
ポロ−ゲン溶媒の使用が意外にも本発明の剛性ポリマー
マトリックスを提供することを見出した。新規なマクロ
ポーラスポリマーは、標的生体分子用に良好な処理量及
び容量（動的及び平衡）を維持しながら、有意の圧縮及
び圧力の増加をもたらすことなく、高圧ＲＰＣにおいて
使用されることができる。
【００１２】本明細書を通して使用されるように、明ら
かな別段の指示がない限り、次の用語は次の意味を有す
る。
【００１３】用語「アルキル（メタ）アクリレート」
は、相当するアクリレート又はメタクリレートエステル
のいずれかを意味する；同様に、用語「メタクリル」
は、アクリル酸又はメタクリル酸及びエステル又はアミ
ド等の相当する誘導体を意味する。全てのパーセンテー
ジは、特に断らない限り、関与するポリマー又は組成物
の総重量を基準にして重量％で表される。用語「コポリ
マー」は、位置異性体を含む異なるモノマーの２以上の
単位を含有するポリマー組成物を意味する。ここでは、
次の略語が使用される：ｇ＝グラム；ｐｐｍ＝重量／容
量による百万分率、ｃｍ＝センチメートル、ｍｍ＝ミリ
メートル、ｍｌ＝ミリリッター、Ｌ＝リッター。特に断
らない限り、掲げられた範囲は、両端の値を含み及び組
み合わせ可能であり、温度は摂氏度(℃)である。
【００１４】ＲＰＣ固定相として有用なマクロポーラス
ポリマーは、既存の物資と比較して増加した構造剛性を
有し、ポリマーを商業規模での製造プロセスにおける使
用に適したものとしている。増加した構造剛性は、選ば
れた重合条件を使用することによるポリマーマトリック
スの構造の変更によって達成された。
【００１５】ポリマーマトリックスの多孔度を変更する
ことは、本発明のマクロポーラスポリマーを調製するう
えで重要である。大きな生体分子を分離するうえで有効
であるためには、好ましくは固定相が、マトリックス中
への、およびマトリックスからの迅速な分子の拡散を可
能にする、開放された多孔性構造を有することである。
更に高水準の多孔度が大きな表面積を許容し、これが標
的分子用のマトリックスの高容量を提供する。最も新し
い、市販の重合体ＲＰＣ固定相は、これらの規準を中心
に設計されているようであり、低圧条件のもとで（典型
的には、１バールから１０バール未満まで及び好ましく
は１から５バールまで；１バール圧＝１０５パスカル又
は１０５Ｐａ）使用される。本発明のマクロポーラスポ
リマーは増加したポリマー剛性を有し、同時に標的分子
に関する高容量及び迅速な粒子内拡散を確保した。
【００１６】本発明のマクロポーラスポリマーは、内径
が２から１００、好ましくは５から８０、より好ましく
は１０から５０センチメートルの液体クロマトグラフィ
ーカラムにおいて、マクロポーラスポリマーと水性溶液
とを接触させて水性溶液に溶解させた生体分子混合物を
精製するのに有用であり、ここでそのカラムは、１０か
ら１００バール及び好ましくは２０から８０バールで操
作される。典型的には、分取規模のＲＰＣは、２０から
８０バール圧において１０から５０ｃｍクロマトグラフ
ィーカラム内で遂行される。
【００１７】選択された重合条件は、本発明のマクロポ
ーラスポリマーを調製するうえで重要な因子を表す。モ
ノマー相に対する混合されたポローゲンの選ばれた比率
並びに疎水性ポローゲンに対する親水性ポローゲンの比
率は、本発明のマクロポーラスポリマーを提供すると信
じられるキーパラメーターである。
【００１８】理論に拘束されることを望むものではない
が、本発明の場合には、ポリマーマトリックス密度が変
更され、全ポリマーの単位容積当たりより多くの固体ポ
リマーを許容し、それによりマトリックス剛性が増加
し、結果的に標的分子についての容量の増加を伴うと考
えられる。モノマーに対するポローゲン量、及び疎水性
対親水性ポローゲン種のバランスの特定の選択は、同時
に改善されたマトリックス剛性を提供しながら、標的分
子（この場合、生体分子）の結合に好ましい仕様で孔径
分布を与えるものと考えられる。
【００１９】本発明の架橋したマクロポーラスコポリマ
ーは、２から６００ミクロン（μｍ）の平均粒子直径を
有する典型的な球状コポリマービーズである。高性能逆
相液体クロマトグラフィー（たとえば、直径が２から１
００ｃｍのカラムにおいて）による生体分子の分離精製
に有用なポリマーは、典型的には２から１５０、好まし
くは５から１００、より好ましくは１０から７５、最も
好ましくは１０から３０μｍの平均粒子直径を有する。
大規模吸着プロセス（直径が数メートルまでのカラム又
は醗酵ブロス等）による生体分子の分離精製に有用なポ
リマーは、典型的には１５０より大から６００まで、好
ましくは２００から５００、より好ましくは２５０から
４００μｍの平均粒子直径を有している。
【００２０】本発明のマクロポーラスポリマーは、典型
的にはサスペンション重合により生成され、１グラム当
たり２００から１５００、好ましくは３００から１２０
０、更に好ましくは４００から１０００平方メートル
（ｍ２／ｇ）の表面積を有する。マクロポーラスポリマ
ーは、好ましくは米国特許第４、３８２、１２４号に記
載されたもの、例えば、その多孔度がポローゲン（「相
エキステンダー」又は「沈殿剤」として知られる）、即
ちそのポリマーに対して非溶媒で、そのモノマーに対し
て溶媒であるもの、の存在下でサスペンション重合によ
りコポリマービーズ中に導入されているものである。慣
用のマクロポーラスポリマーは米国特許第４、３８２、
１２４号に従い調製されたもので、典型的には広範囲の
ポロ−ゲン種、モノマー相に対するポローゲン濃度、モ
ノマー種類、架橋モノマー種、架橋剤濃度、重合開始剤
及び開始剤濃度の使用が包含される。しかしながら、本
発明は、ある種の選ばれた種類のポローゲンを使用し、
モノマー相に対して特定の濃度で使用し、特定のモノマ
ー及び選択された架橋度、選択された重合開始剤濃度で
調製されたマクロポーラスポリマーが、高性能逆相液体
クロマトグラフィーによる生体分子の分離精製において
改善された性能を示す剛性ポリマー構造を意外にも有す
るという発見に基づいている。
【００２１】本発明に有用なマクロポーラスポリマーの
調製に用いられることができる好ましいポリビニル芳香
族モノマーには、例えば、ジビニルベンゼン、トリビニ
ルベンゼン、ジビニルトルエン、ジビニルナフタレン、
ジビニルアントラセン及びジビニルキシレンから選択さ
れる１以上のモノマーが含まれる：上記架橋剤のそれぞ
れの様々な位置異性体のいかなるものも好適であり；好
ましくは、ポリビニル芳香族モノマーはジビニルベンゼ
ンである。典型的には、マクロポーラスポリマーは５０
から１００％、好ましくは６５から１００％、より好ま
しくは７５から１００％のポリビニル芳香族モノマー単
位を含む。
【００２２】任意に、エチレングリコールジアクリレー
ト、エチレングリコールジメタクリレート、トリメチロ
ールプロパントリアクリレート、トリメチロールプロパ
ントリメタクリレート、グリシジルメタクリレート、ジ
エチレングリコールジビニルエーテル及びトリビニルシ
クロヘキサン等の脂肪族架橋性モノマーは、また、ポリ
ビニル芳香族架橋剤に加えて用いられることができる。
使用されるとき、脂肪族架橋性モノマーは、典型的には
マクロポーラスポリマーの重合単位として、マクロポー
ラスコポリマーを形成するのに使用される全モノマー重
量を基準にして０から２０％、好ましくは０から１０
％、さらに好ましくは０から５％である。
【００２３】本発明に有用なマクロポーラスコポリマー
の調製に使用され得る好適なモノ不飽和ビニル芳香族モ
ノマーには、例えば、スチレン、α‐メチルスチレン、
（Ｃ １〜Ｃ４）アルキル置換スチレン、ハロ置換スチレ
ン（ジブロモスチレン及びトリブロモスチレン）、ビニ
ルナフタレン及びビニルアントラセンが含まれ；好まし
くは、モノ不飽和ビニル芳香族モノマーは、１以上のス
チレン及び（Ｃ１〜Ｃ ４）アルキル置換スチレンから選
択される。好適な（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル置換スチレン
の中には、例えば、エチルビニルベンゼン、ビニルトル
エン、ジエチルスチレン、エチルメチルスチレン及びジ
メチルスチレンが含まれ；上記ビニル芳香族モノマー中
でそれぞれの種々のいかなる位置異性体も好適であると
理解される；好ましくはモノ不飽和ビニル芳香族モノマ
ーはエチルビニルベンゼンである。典型的には、マクロ
ポーラスポリマーは、０から５０％、好ましくは０から
３５％及びより好ましくは０から２５％のモノ不飽和ビ
ニル芳香族モノマー単位を含む。
【００２４】任意に、脂肪族不飽和モノマーのような非
芳香族ビニルモノマー、例えば、塩化ビニル、アクリロ
ニトリル、（メタ）アクリル酸及び（メタ）アクリル酸
のアルキルエステル（アルキル（メタ）アクリレート）
等は、また、ビニル芳香族モノマーに加えて使用される
ことができる。使用に際して、マクロポーラスコポリマ
ーを形成するのに使用される全モノマー重量を基準にし
て非芳香族ビニルモノマーは、典型的には、マクロポー
ラスコポリマーの重合単位として、０から２０％、好ま
しくは０から１０％、より好ましくは０から５％であ
る。
【００２５】好ましいマクロポーラスポリマーは、１以
上のジビニルベンゼンコポリマー、スチレン‐ジビニル
ベンゼンコポリマー、ジビニルベンゼン‐エチルビニル
ベンゼンコポリマー及びスチレン‐エチルビニルベンゼ
ン‐ジビニルベンゼンコポリマーから選択され；より好
ましくは、ジビニルベンゼン‐エチルビニルベンゼン及
びスチレン‐エチルビニルベンゼン‐ジビニルベンゼン
ポリマーである。
【００２６】本発明のマクロポーラスポリマーを調製す
るために有用なポローゲンには、（Ｃ７〜Ｃ１０）芳香
族炭化水素及び（Ｃ６〜Ｃ１２）飽和炭化水素等の疎水
性ポローゲン；（Ｃ４〜Ｃ１０）アルカノール及びポリ
アルキレングリコール等の親水性ポローゲンが含まれ
る。好適な（Ｃ７〜Ｃ１０）芳香族炭化水素には、例え
ば、１以上のトルエン、エチルベンゼン、オルトキシレ
ン、メタキシレン及びパラキシレンが含まれ；上記それ
ぞれの炭化水素について種々の如何なる位置異性体も好
ましいと理解される。好ましくは、その芳香族炭化水素
は、トルエン又はキシレン又はキシレンの混合物又はト
ルエン及びキシレンの混合物である。好適な（Ｃ６〜Ｃ
１２）飽和炭化水素には、例えば、１以上のヘキサン、
ヘプタン及びイソオクタンが含まれ；好ましくは、飽和
炭化水素は、イソオクタンである。好ましい（Ｃ４〜Ｃ
１０）アルカノールには、例えば、１以上のイソブチル
アルコール、ｔｅｒｔ‐アミルアルコール、ｎ‐アミル
アルコール、イソアミルアルコール、メチルイソブチル
カルビノール（４‐メチル‐２‐ペンタノール）、ヘキ
サノール及びオクタノールが含まれ；好ましくはそのア
ルカノールは、メチルイソブチルカルビノール及びオク
タノール等の１以上の（Ｃ５〜Ｃ８）アルカノールから
選択される。好ましくは、ポローゲン混合物は、１以上
の（Ｃ５〜Ｃ８）アルカノールから選択される親水性ポ
ローゲン及び１以上の（Ｃ７〜Ｃ１０）芳香族炭化水素
から選択される疎水性ポローゲンである。
【００２７】典型的には、本発明のポリマーの調製に使
用されるポローゲンの総量は、モノマーの重量を基準に
して１００から１７０％、好ましくは１１０から１６０
％、より好ましくは１１５〜１５０％、最も好ましくは
１２０から１４０％である。１７０％より上のポロ−ゲ
ン濃度において、ポリマーは充填されたカラム中で高圧
条件において不良な流れ抵抗値（高圧縮性）を有し；１
００％より低いポロ−ゲン濃度において、ポリマーは、
（カラム貫通試験でのインシュリン容量によって測定さ
れるような）不良なクロマトグラフィー特性を有する。
加えて、本発明のポリマーを調製するのに使用されるポ
ローゲンは、疎水性溶媒（「疎水性ポローゲン」）及び
より疎水性でない溶媒（「親水性」ポローゲン）を含む
混合溶媒系に基づいている。親水性ポローゲンは、多少
制限された水溶解度（例えば、０．５から５％）を有し
ており、疎水性ポローゲン（１０から１００ｐｐｍ、ま
たはそれ以下の典型的水溶解度）より多く水溶性であ
る。
【００２８】典型的には、親水性ポローゲン対疎水性ポ
ローゲンの比は１．２／１より大で３／１までであり、
好ましくは１．３／１から２．７／１、より好ましくは
１．４／１から２．５／１，最も好ましくは１．６／１
から２．４／１である。約１．２／１以下の親水性／疎
水性比において、許容可能な流れ抵抗性能を有するポリ
マーは、また、減少したクロマトグラフィー性能（イン
シュリン容量試験における物質移動アクセスの制限によ
って測定された）を有する。３／１を超える親水性／疎
水性ポローゲン比においては、ポリマーは、減少した全
体容量性能（カラムフローテスト過程での吸着されるイ
ンシュリンの量の減少により測定）を有するであろう。
典型的には、混合ポローゲンは、（Ｃ７〜Ｃ１０）芳香
族炭化水素及び（Ｃ４〜Ｃ１０）アルカノールを含み、
好ましい混合ポローゲンは、キシレン及びメチルイソブ
チルカルビノールを含む。
【００２９】本発明のポリマーを調製するのに有用な重
合開始剤には、ペルオキシド、ヒドロペルオキシド、及
び関連開始剤等のモノマー可溶性開始剤が含まれ、；例
えば、ベンゾイルペルオキシド、ｔｅｒｔ‐ブチルヒド
ロペルオキシド、キュメンペルオキシド、テトラリンペ
ルオキシド、アセチルペルオキシド、カプロイルペルオ
キシド、ｔｅｒｔ‐ブチルペルオクトエート（ｔｅｒｔ
‐ブチルペルオキシ‐２‐エチルヘキサノエートとして
も知られる）、ｔｅｒｔ‐アミルペルオクトエート、ｔ
ｅｒｔ‐ブチルペルベンゾエート、ｔｅｒｔ‐ブチルジ
ペルフタレート、ジシクロヘキシルペルオキシジカーボ
ネート、ジ（４‐ｔｅｒｔ‐ブチルシクロヘキシル）ペ
ルオキシジカーボネート及びメチルエチルケトンペルオ
キシドがある。また、アゾジイソブチロニトリル、アゾ
ジイソブチルアミド、２，２’‐アゾ‐ビス（２，４‐
ジメチルバレロニトリル）、アゾ‐ビス（α‐メチル‐
ブチロニトリル）及びジメチル、ジエチル、又はジブチ
ルアゾ‐ビス（メチルバレレート）のようなアゾ開始剤
も有用である。好ましいペルオキシド開始剤はベンゾイ
ルペルオキシドのようなジアシルペルオキシド及びｔｅ
ｒｔ‐ブチルペルオクトエート及びｔｅｒｔ‐ブチルペ
ルベンゾエートのようなペルオキシエステルである；よ
り好ましくは、開始剤はベンゾイルペルオキシドであ
る。好適なペルオキシド開始剤の使用濃度は、ビニルモ
ノマーの総重量を基準にして０．５％から１０％、好ま
しくは１から９％、より好ましくは２から７％、最も好
ましくは３から５％である。最も好ましくは、フリーラ
ジカル開始剤はモノマーの総重量を基準にして２から７
％で存在し、１以上のジアシルペルオキシド及びペルオ
キシエステルから選択される。
【００３０】本発明のマクロポーラスポリマーを調製す
るために有用な分散剤及び沈殿防止剤は、ヒドロキシア
ルキルセルロース骨格、１から２４の炭素原子を含有す
る疎水性アルキル側鎖、及びヒドロキシアルキルセルロ
ース骨格のそれぞれの繰り返し単位を置換する平均で１
から８、好ましくは１から５のエチレンオキサイド基を
有する非イオン性界面活性剤であって、該アルキル側鎖
は、ヒドロキシアルキルセルロース骨格の１００繰り返
し単位当たり０．１から１０のアルキル基の量で存在す
るものである。ヒドロキシアルキルセルロースにおける
アルキル基は、１から２４の炭素を含むことができ、直
鎖、分岐鎖又は環状であり得る。より好ましくは、１０
０無水グルコース単位当たり０．１から１０の
（Ｃ１６）アルキル側鎖、及びそれぞれの無水グルコー
ス単位を置換する約２．５から４のエチレンオキサイド
基を含有するヒドロキシエチルセルロースである。分散
剤の典型的な使用濃度は、全水性相重量を基準にして約
０．０１から約４％である。
【００３１】本発明のマクロポーラスポリマーを作るの
に有用な他の分散剤及び沈殿防止剤は、親水性骨格を含
有するポリマーであり、それらは、２相の界面において
それらの親油性部分をモノマー相に及びそれらの親水性
部分を水性相に配向することができる。これらの重合体
分散剤には、セルロース、ポリビニルピロリドン、ポリ
ビニルアルコール及び澱粉等が含まれる。分散剤の混合
物もまた用いることができる。これらの他の分散剤は、
それらが幾分より大量の凝集した物質又はそうでなけれ
ば望ましくない物質を生成する傾向にあるので、あまり
好ましくはない傾向にある。
【００３２】典型的なマクロポーラスコポリマーの調製
は、例えば、懸濁助剤（分散剤、保護コロイド及びバッ
ファー等）を含有する連続水性相溶液の調製の後で、５
０から１００％のポリビニル芳香族モノマー、フリーラ
ジカル開始剤及びモノマー混合物１部当たり１から１．
７部の混合ポローゲン(疎水性及び親水性ポローゲン)を
含有するモノマー混合物を混合させることを含むことが
できる。それから、モノマー／混合ポローゲン配合物
は、昇温下（典型的には４０から１２０℃、好ましくは
６０から１００℃；例えば、１から２０時間、好ましく
は３から１５時間の間）で重合され、ポローゲンは、次
に種々の手段で結果物であるポリマービーズから除去さ
れる；例えば、トルエン、キシレン、及び（Ｃ４〜Ｃ
１０）アルコールは、蒸留又は溶剤洗浄によって除去さ
れ、ポリアルキレングリコールは、水洗により除去され
る。結果として生ずるマクロポーラスコポリマーは、そ
れから脱水そして乾燥等の慣用の手段で分離される。
【００３３】マクロポーラスポリマーの調製は、ポリマ
ー表面の、重合過程で使用される分散剤及び沈殿防止剤
の残留物を浄化する酵素処理を、任意に含むことができ
る。酵素処理は、典型的には重合過程で、重合に引き続
いて又はポリマーの分離後にマクローポーラスポリマー
を酵素物質（１以上のセルロース分解酵素及び蛋白質加
水分解酵素（ｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃ ｅｎｚｙｍｅ）
から選択される）と接触させることを含む。日本特許出
願昭６１‐１４１７０４号及び昭５７‐９８５０４号
が、ポリマー樹脂の調製過程での酵素使用の更なる一般
的及び具体的詳細に関して参照されることができる。好
適な酵素には、例として、セルロースをベースとした分
散剤系用のβ‐１，４‐グルカン‐４‐グルカノヒドラ
ーゼ、β‐１，４‐グルカン‐４‐グルカンヒドラー
ゼ、β‐１，４‐グルカン‐４‐グルコヒドラーゼ、β
‐１，４‐グルカン‐４‐セロビオヒドラーゼ等のセル
ロース分解酵素；ゼラチンをベースとした分散剤系用ウ
ロキナーゼ、エラスターゼ及びエンテロキナーゼ等の蛋
白質加水分解酵素が挙げられる。典型的には、ポリマー
に対して使用される酵素量は、ポリマーの全重量を基準
にして２から３５％、好ましくは５から２５％、より好
ましくは１０から２０％である。
【００３４】本発明のマクロポーラスポリマーは特に充
填されたクロマトグラフィーカラム用途に有用であり、
そこではポリマーの多孔度及び機械的強度は、長期間で
の使用で圧力の増大なしに、高い処理量で生体分子の高
性能分離精製での使用を可能とする。
【００３５】任意に、マクローポーラスポリマーは、コ
ーティングされることができ、または慣用のスルホン
化、クロロメチル化及びアミン化等の公知の手段によ
り、様々な慣用のイオン化官能基（カルボン酸基等の弱
酸官能基；第一級、第二級又は第三級アミン官能基等の
弱塩基官能基；スルホン酸基等の強酸官能基；塩化第四
級アンモニウム基又は水酸化第四級アンモニウム基等の
強塩基官能基）で後官能化されることができる。
【００３６】本発明のマクロポーラスポリマーは、向上
された剛性ポリマー構造及び重合過程でポリマーに導入
された選択された多孔度の結果である、改善された透過
性（低流れ抵抗）を特徴としている。透過率（Ｋ）は、
ダルシー法（Ｄａｒｃｙ’ｓＬａｗ）（式１）によりカ
ラムに発生した背圧と関連づけられる：
【００３７】
【式１】
【００３８】ここで：μ＝粘度（ミリパスカル・秒又は
センチポイズ） Ｖ＝線速度（ｃｍ／時） ΔＰ＝圧力降下（バール） ｄｐ＝ポリマーの平均粒子直径（ミクロン）
【００３９】上記の変数の単位は、それらの一般的な形
式で表現されている；式１を無次元数にするためには単
位の変換が必要であると理解される。ポリマーがより剛
性（即ち、圧縮性の少ない）であればあるほど、ポリマ
ーの透過性は大きくなり、任意の溶媒粘度、線速度及び
粒子直径の組み合わせにおいて、より低い背圧を与え
る。カラムクロマトグラフィー分離精製への適用にとっ
て典型的な層流条件下で、カラム内の背圧は、また、カ
ルマン‐コーゼニー（Ｃａｒｍａｎ‐Ｋｏｚｅｎｙ）式
（式２）で表わされることができる：
【００４０】
【式２】
【００４１】ここで：ε＝粒子間空隙容量（ｃｍ３／ｃ
ｍ３）
【００４２】Ｇ．グイオコン、Ｓ．ゴーシャンシラジ及
びＡ．カッティの「分取及び非線形クロマトグラフィー
の基本」；アカデミックプレス（１９９４）及びＷ．
Ｌ．マックカーベ、Ｊ．Ｃ．スミス及びＰ．ハリオット
の「ケミカルエンジニアリングにおけるユニット操
作」；マクロウヒル（１９８５）のような文献が、ダル
シー法及びカルマン‐コーゼニー式（式１及び２）につ
いての更なる一般的及び具体的詳細のために参照され
る。
【００４３】式１と２を組み合わせることにより、クロ
マトグラフィーカラムにおける透過率（又は流れ抵抗）
がポリマー樹脂床の粒子間空隙容積（即ち、ポリマー粒
子間の容積）に関連することが示される；εは、ポリマ
ー床の単位容積当たりの空隙容積として表される。この
関係は、式３で表される。
【００４４】
【式３】
【００４５】本発明の目的のために、我々はポリマーの
特徴的な「流れ抵抗」値を透過率の逆数と定義する。特
徴的な「流れ抵抗」値は、中〜高圧条件下でのメディア
の下でいかに良好な特性を示すかの指標である：低い流
れ抵抗値は、低い圧縮率を表し、高い流れ抵抗値は、不
良な圧縮率を表す。
【００４６】追加的に、ダルシー法に従い、透過率又は
流れ抵抗のいずれかを表すには、一般に粒子サイズ効果
（式１のｄｐ）が含まれる。本発明の目的の一つは、粒
子サイズ効果とは独立して、増加したポリマー剛性によ
って改善された流れ抵抗を提供することである。ポリマ
ーに関して粒子サイズを減少しただけでは、式１及び２
で与えられるように、より高い背圧を生じる。
【００４７】典型的には、本発明のマクロポーラスポリ
マーは、１０バール（中間圧力）の操作圧力において７
００から１，８００未満、好ましくは７００から１，５
００未満、より好ましくは１，３００未満の流れ抵抗値
（即ち、１／Ｋ）を有する。高圧操作（６０バールで代
表されるような）において、マクロポーラスポリマー
は、１，５００から７，０００未満、好ましくは１，５
００から５，０００未満、より好ましくは４，５００未
満の流れ抵抗値を有する。ＲＰＣにおける使用に好適な
マクロポーラスポリマーは、（ｉ）１０バール圧の圧力
において１，８００未満の流れ抵抗値及び（ｉｉ）６０
バール圧において７，０００未満の流れ抵抗値を有す
る。上で示した限界より大きな流れ抵抗値を有するポリ
マーは、市販のＲＰＣカラムに見出される中〜高圧にお
ける圧縮に対する十分な抵抗を提供せず、結果として操
作過程での処理量の減少とカラム圧の増大を生ずる。
【００４８】本発明のマクロポーラスポリマーは、ポリ
マーを製造するのに使用されるポローゲンの種類及び比
率によって生成される、選ばれた多孔度及び粒子直径分
布によって特徴付けられる。多孔度は、ミクロメレティ
ックス（Ｍｉｃｒｏｍｅｒｅｔｉｃｓ）（商標）ＡＳＡ
Ｐ‐２４００窒素ポロシメーターを使用して測定され
る。ＩＵＰＡＣ命名法に従う多孔度は次の通りである。 ミクロポロシティー＝２０オングストローム単位未満の
細孔 メソポロシティー＝２０から５００オングストローム単
位の間の細孔 マクロポロシティー＝５００オングストローム単位より
大の細孔
【００４９】本発明の目的のために、「オペレイショナ
ルな」ミクロポロシティーは、５０オングストローム単
位未満の直径を有する細孔と定義され、「オペレイショ
ナルな」メソポロシティーは、５０から５００オングス
トローム単位の間の直径を有する細孔と定義される。こ
こで使用される「オペレイショナルな」多孔度とＩＵＰ
ＡＣ命名法に従い定義される多孔度との間の僅かな相違
は、５０オングストローム単位が本発明のマクロポーラ
スポリマーにおいて目的の生体分子の収着に適応させる
ため（２０オングストローム単位と比較して）、より好
適で、より適切なカットオフ点であるという事実による
ものである。
【００５０】本発明のマクロポーラスポリマーは、０．
７から２の、好ましくは０．９から１．８、より好まし
くは１．０から１．７ｃｍ３／ｇの全多孔度を有する。
典型的には、マクロポーラスポリマーは、０．７から
１．９、好ましくは０．８から１．７、より好ましくは
０．９から１．４ｃｍ３／ｇのオペレイショナルなメソ
ポロシティーを有する。典型的には、マクロポーラスポ
リマーは、０から０．５、好ましくは０から０．３、よ
り好ましくは０から０．２、最も好ましくは０から０．
１ｃｍ３／ｇ未満のオペレイショナルなミクロポロシテ
ィーを有する。典型的には、マクロポーラスポリマー
は、０から０．６、好ましくは０から０．５、より好ま
しくは０から０．３ｃｍ３／ｇのマクロポロシティーを
有する。約０．６ｃｍ３／ｇより大きいマクロポロシテ
ィー値は、全容量の点に関して、標的とする分子サイズ
及び形状の生体分子用ポリマーの作業容量を減じる。
【００５１】インシュリン容量は、同じようなサイズ及
び分子形態の生体分子の大規模分離精製用に好適なメデ
ィアとしての、ポリマーマトリックスの能力の指標とし
て使用される。本発明のマクロポーラスポリマーは、典
型的には６０から１５０ｇ／Ｌ、好ましくは７０から１
５０ｇ／Ｌ、より好ましくは７５から１５０ｇ／Ｌの動
的インシュリン容量を有する。典型的には、マクロポー
ラスポリマーは、７５から１５０ｇ／Ｌ、好ましくは８
０から１５０ｇ／Ｌ、より好ましくは９０から１５０ｇ
／Ｌの総インシュリン容量を有する。動的容量は、如何
に早くポリマーマトリックスが生体分子を捕らえるかの
尺度であり、ポリマーに吸着（ｓｏｒｂ）した全インシ
ュリンに対して１％の漏れが生じるブレークスルーポイ
ントにおいてのインシュリン容量であると定義される。
インシュリン容量はｇ／Ｌ、すなわちポリマー樹脂１リ
ットル当たりのインシュリンのグラムで定義される。生
体分子の高性能、大規模分取クロマトグラフィーにおけ
る使用に好適な本発明のマクロポーラスポリマーは、典
型的には、動的及び合計インシュリン容量の値として、
それぞれ６０および７５ｇ／Ｌ、好ましくはそれぞれが
７０および８０ｇ／Ｌ、より好ましくはそれぞれが７５
およびから９０ｇ／Ｌの値を有する。
【００５２】所定の生体分子（例えば、インシュリン）
用のポリマー樹脂の全容量は、それが精製操作過程でカ
ラムにロードされることができる特定の分子の量に関連
するので重要である。精製プロセス（カラム処理量、溶
媒使用、労力又はサイクル時間）にとって重要な基本的
な経済要因は、直接にカラムにロードされる質量に関係
している。
【００５３】ポリマー樹脂の動的容量は、それが特定分
子に対するポリマーの物質移動効率に関係しているが故
に重要であり、それは精製を行うことのできる時間を記
述する。低い動的容量は、そのポリマーが高速精製プロ
セスには適してないことを示している。
【００５４】本発明の幾つかの態様は、次の実施例に詳
細に述べられている。全ての比率，部及びパーセンテー
ジは、特に断らない限り重量で表されており、使用され
る全ての試薬は、特に断らない限り市販の良質のもので
ある。実施例及び表に使用される略語は相当する記述と
共に下記に挙げられている。
【００５５】ＭＩＢＣ＝メチルイソブチルカルビノール
（４‐メチル‐２‐ペンタノール） ＤＶＢ＝ジビニルベンゼン（メタ／パラ異性体の混合
物） ＥＶＢ＝エチルビニルベンゼン（メタ／パラ異性体の混
合物） ＢＰＯ＝ベンゾイルペルオキシド ｒｐｍ＝分当たりの回転数 ｖ／ｖ＝容積／容積 ｗ／ｖ＝重量／容積 μ＝ミクロン ｎｍ＝ナノメートル ｇ／Ｌ＝グラム／リッター ｃｍ３／ｇ＝立法センチメートル／グラム μｌ＝マイクロリッター ＮＡ＝分析せず
【００５６】実施例１ 本実施例は、本発明のマクロポーラスポリマーの調製を
例示している。有機モノマー相は、次の成分を配合する
ことにより１リッタービーカー中で調製された：１８０
ｇのジビニルベンゼン混合物（８０％ＤＶＢ／２０％Ｅ
ＶＢ）、７３ｇオルトキシレン、１４７ｇＭＩＢＣ及び
１０．６ｇＢＰＯ（７５％純度、２５％水分）。これら
の量は、１２２％混合ポローゲン（全モノマー基準）、
２．０の親水性ポローゲン／疎水性ポローゲン比率及び
４．５％のフリーラジカル開始剤、ＢＰＯ（全モノマー
基準）に相当する。この混合物は、窒素雰囲気下で２０
分撹拌された。
【００５７】コンデンサー、機械撹拌機、熱電対及び窒
素取り入れ口を備えた２リッターの四つ口反応フラスコ
において、次のものを一緒に撹拌して水溶液が調製され
た：７８３ｇの脱イオン水、５．０ｇのカルミナール
（Ｃｕｌｍｉｎａｌ、商標）ＭＨＥＣ‐８０００（メチ
ルヒドロキシエチルセルロース、ハーキュレスケミカル
カンパニーより入手可能、２０℃で２％水溶液について
８，０００ミリパスカル・秒（ｍＰａ・ｓ＝センチポイ
ズ、ｃＰ）の粘度）、０．１５８ｇのラウリル硫酸ナト
リウム、２．９４ｇの５０％水酸化ナトリウム（水溶
液）及び３．１３ｇのホウ酸。溶液は、２５０ｒｐｍで
撹拌しながら温度を８０℃まで迅速に増加させ、そこで
１時間持続させた。溶液は、それから反応容器を空冷し
て周囲温度まで３０分間で冷却された。固体反応物を完
全に溶解させた後、撹拌を止め、有機層（上で作成）が
反応フラスコに加えられた。
【００５８】反応混合物（有機及び水性相が配合された
もの）は、室温において２０分、３００ｒｐｍで撹拌さ
れ、それから４７分に亘り８０℃に加熱された。反応混
合物は、反応物を重合するため８０℃で１２時間保持さ
れた。反応混合物は、それから撹拌機が装備された圧力
容器に移され、１００℃で５時間残存反応物を変換して
重合を終了するため加熱された。
【００５９】重合反応が終了した後で、反応混合物の温
度は、撹拌しながら５０℃に調整された。水性／ポリマ
ー混合物の水性相のｐＨは、約３ｇのホウ酸を加え、引
き続き最終ｐＨに至るまで１０％硫酸（水溶液）をゆっ
くりと加えることにより５．０に調整された。全部で２
５．０ｇのβ‐１，４‐グルカン‐４‐グルカンヒドラ
ーゼ（セルラーゼ（Ｃｅｌｌｕｌａｓｅ）（商標）４０
００、バーレーリサーチ、Ｉｎｃ．より入手可能）が、
酵素粉末を反応容器に４回に分けた等重量の充填で、２
４時間に亘り散布しながら水性／ポリマー混合物に添加
された。温度は、酵素処理の間５０℃に維持された。水
性／ポリマー混合物の水性相のｐＨは、５０％水酸化ナ
トリウム（水溶液）で１２．０に調整され、温度は９０
℃に上昇させ、そこで２時間維持された。水性／ポリマ
ー混合物は、室温に冷却され、フラスコから除去され、
１リッターのクロマトグラフィーカラムに置かれた。水
性相は、ポリマーからろ過され、それからポリマー充填
床は２リッターの脱イオン水で洗浄され、引き続き３．
５リッターのアセトンで洗浄され、最終的に７リッター
の脱イオン水で洗浄された。水湿潤ポリマーは、それか
ら１００℃の温度で２．５ｍｍ（０．１インチ）水銀真
空下で１６時間の間乾燥された。
【００６０】ポリマー１‐４乃至１‐１１は、ポローゲ
ン％、ＭＩＢＣ／キシレン比及びＢＰＯ％が表１で要約
されているように変更された以外は上で提供された記述
に従い調製され；ポリマー試料１‐６は、上で提供され
た記述通りである。サフィックス「Ｃ」を伴い表１にお
いて示される全てのポリマーは、本発明の目的にための
比較例である。ポリマー試料１‐５乃至１‐９は、本発
明のマクロポーラスポリマーの代表例である。ポリマー
試料１‐１２Ｃ、１‐１３Ｃ及び１‐１４Ｃは、上記に
従い調製されるポリマー試料と共に評価される商業的に
入手可能なクロマトグラフ等級のポリビニル芳香族ポリ
マーである。
【００６１】市販のポリマー１‐１２Ｃは、アメルシャ
ムファルマシアカンパニー、英国、リトルシャルフォン
ト、ウプサラからソアース（Ｓｏｕｒｃｅ、商標）３０
ＲＰＣ樹脂として得られる３０μｍの粒子サイズのポリ
（スチレン‐ジビニルベンゼン）物質である。市販のポ
リマー１‐１３Ｃは、アメルシャムファルマシアカンパ
ニー、英国、リトルシャルフォント、ウプサラからソア
ース（Ｓｏｕｒｃｅ、商標）１５ＲＰＣとして得られる
１５μｍの粒子サイズのポリ（スチレン‐ジビニルベン
ゼン）物質である。市販のポリマー１‐１４Ｃは、ポリ
マーラブＬｔｄ．，英国、シロップシャイアーからＰＬ
ＲＰ‐Ｓ３００として得られる１５μｍの粒子サイズの
ポリ（スチレン‐ジビニルベンゼン）物質である。
【００６２】実施例２ この実施例は、インシュリン結合容量についての本発明
のマクロポーラスポリマーの評価を記載している。約５
ｍｌ容積の試料は、小規模の試験カラム（内径１．０ｃ
ｍ×長さ６．３ｃｍ）に充填され、水溶液からウシイン
シュリンの前端吸着（ｆｒｏｎｔ ａｄｓｏｒｐｔｉｏ
ｎ）を評価した；この試験は、ポリマーマトリックス
が、典型的な使用条件下で標的プローブ分子（例えば、
インシュリン）についての迅速な、効率的な物質移動及
び高容量を可能にするか否かを測定するために設計され
た。加えて、約２０ｍｌの試料は、大規模試験カラム
（内径１．０ｃｍ×長さ２５ｃｍ）に充填され、インシ
ュリンの分別／分離が遂行された；この試験は、ポリマ
ーマトリックスが典型的なプロセス条件下で満足な性能
を提供したことを確認するために行われた。
【００６３】５グラムの乾燥ポリマー樹脂（断らない限
り実施例１に従い調製された）は、３５ｍｌの２０％エ
タノール／水（ｖ／ｖ）と共に混合され、少なくとも２
時間周囲温度で静置された。ポリマースラリーは、それ
から１５０ｃｍ／時の線速度で２０％ｖ／ｖエタノール
／水溶液中においてフロー充填によりオムニフィット
（Ｏｍｎｉｆｉｔ、商標）ガラスカラム（ミリポアＣｏ
ｒｐ．から入手可能の大きさ：長さ６．３ｃｍ×内径１
０ｍｍ）中に充填された。カラム充填物の品質は、４０
ｃｍ／時の線速度で２０％ｖ／ｖエタノール／水溶離剤
を流しながら、カラム中に脱イオン水の塩化ナトリウム
１％溶液の５０μＬのパルスで注入することにより確認
された。カラムの効率（プレート／メートル）及び不均
一はヒュウレットパッカードケムステーション（商標）
ソフトウェアーを使用して計算された。許容可能なカラ
ム充填物パラメーター用の目標値は、０．８から１．８
の不均一を有し、最小で５，０００プレート／メートル
であった。
【００６４】水１リッター当たり５グラムの濃度のウシ
インシュリン溶液（シグマケミカルＣｏから入手可能）
が調製された。全部で２００ｍｌのこの溶液を１５０ｃ
ｍ／時の線速度でポンプによりカラムに送り、２９１ｎ
ｍの波長で設定されたＵＶ分光光度検出器（ＡＢＩアナ
リティカル社、クラトス部門より入手可能なスペクトロ
フロー（商標）７８３）が流出液におけるウシインシュ
リンをモニターするために使用された。
【００６５】ポリマー樹脂の動的容量（ｇ／Ｌ）は、Ｕ
Ｖ‐レスポンス曲線中の、ポリマー樹脂に収着される合
計インシュリン量に対して１％のインシュリンブレーク
スルーポイントにおいてポリマー樹脂に収着されるイン
シュリン量を記録することにより得られる。樹脂の全容
量（ｇ／Ｌ）は、ＵＶ分光光度計により流入溶液及び流
出溶液のインシュリン濃度を測定し、それから質量バラ
ンスを計算することにより決定される。結果は、実施例
３での記載中に要約されている。
【００６６】実施例３ 本実施例は、本発明のマクロポーラスポリマーについて
それらの透過率特性、即ち、圧縮抵抗性の評価法を記載
している。ポリマーは、それらの「流れ抵抗」又は１／
Ｋ値（式３を参照）によって特徴付けられる。
【００６７】工業用高圧液体クロマトグラフィーにおい
ては、直接樹脂に力（圧力）を及ぼすピストンを装備し
ているカラムを使用することが一般的である。クロマト
グラフィーサイクルを通して最大予想流れ圧力に等しい
か又はより大きい圧力でピストンを床に圧縮させておく
ことが望ましい。本発明のポリマーの透過率特性を試験
するために、ポリマー樹脂は、プロクロム（ＰｒｏＣｈ
ｒｏｍ、商標）ダイナミックアクシャルコンプレッショ
ンカラム（モデルＬＣ．５０）に充填され、最初に１０
バール圧、それから６０バールの圧縮圧に設定されたピ
ストンで圧縮された。この試験の目的は、それぞれのサ
ンプルの透過率特性（圧縮抵抗）をキャラクタリゼーシ
ョンすることであった。以下詳述する。
【００６８】およそ１００ｇの乾燥ポリマー樹脂（およ
そ５００ｍｌの湿潤樹脂に相当）は、７００ｍｌの２０
％エタノール／水溶液（ｖ／ｖ）に加えられ、少なくと
も２時間周囲温度で静置された。このポリマー試料は、
撹拌されてスラリー状にされ、５ｃｍ（内径）×５４ｃ
ｍ（長さ）プロクロムダイナミックアクシャルコンプレ
ッションＬ．Ｃ．５０３１６Ｌステンレス鋼カラム（プ
ロクロムＳ．Ａ．，フランス製）に流入された。ピスト
ンアセンブリー（作動油圧に変換された外部空気圧によ
って運転される）が作動され、変動圧をポリマー樹脂床
に適用する。ピストンは、約１０バールの液圧を与える
よう最初に設定される；樹脂床はピストンがもはや動か
なくなったとき充填されたと考えられる。床の高さは、
それから測定された。２０％エタノール／水（ｖ／ｖ）
溶液１０ｍｌの流れが床を平衡化するために３０分間樹
脂床を通過させられた。
【００６９】一般に、ポリビニル芳香族ポリマー床の粒
子間空隙容積（又は透過率）を測定するため、移動相
は、プローブ分子の適合性に関しては、ポリビニル芳香
族ポリマーの疎水性表面とプローブ分子との相互作用を
除去し又は減少させるよう選択されなければならない。
線状ポリスチレン、ブルーデキストラン及びポリエチレ
ングリコール等の慣用のプローブ分子が使用されてもよ
いが、非極性移動相（テトラヒドロフラン及びトルエン
等）の使用が必要とされる。下記に記載される方法で使
用されるプローブ分子は、しかしながら非極性溶媒の使
用を必要とせず、任意の水性‐有機溶媒系、例えば、２
０％エタノールにおいて使用されることができる。
【００７０】カラム中の全空隙容積（粒子内及び粒子間
双方）を測定するために、１％塩化ナトリウム（２０％
水性エタノール中のｗ／ｖ）２ｍｌが系中に注入され
た。塩は伝導率検知器によって検出された。粒子間空隙
容積だけを測定するためには０．１〜０．９μｍのイオ
ン荷電エマルションポリマー（ｉｏｎｉｃａｌｌｙ ｃ
ｈａｒｇｅｄ ｅｍｕｌｓｉｏｎ ｐｏｌｙｍｅｒ）又
は微粉砕されたイオン荷電ポリマー（例えば、弱酸官能
基（カルボキシレート基）、強酸官能基（スルホネー
ト）、又は塩化第四級アンモニウム基等のイオン化可能
な官能基を有する架橋ポリスチレン）を１％含有する２
０％エタノール溶液（水性）が、床を通して流れる２０
％エタノール（水性）の流れに注入された。粒子は、２
８０ｎｍに設定されたＵＶ検知器により検出された。イ
オン荷電ポリマープローブ粒子の大きさのため、粒子
は、本発明のポリマー樹脂の細孔を貫通しなかった。イ
オン荷電ポリマープローブ粒子の表面性質のため（これ
らの粒子は芳香族構造及び表面全体にわたって分布する
高濃度のイオノゲン基（ｉｏｎｏｇｅｎｉｃ ｇｒｏｕ
ｐ）を有していた）、本発明ポリマー樹脂に対する疎水
性引力／保持力（ｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉｃ ａｔｔｅｎ
ｔｉｏｎ／ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ）が防止された。
【００７１】ポリマー床の全空隙容積（塩プローブ溶離
容積）が決定され、ポリマー粒子の外部の空隙容積と合
計された（イオン荷電エマルション又は粉砕ポリマー溶
離容積）。これらの値は、測定された床容積と一緒に式
２及び３におけるεを計算するのに使用された。１０バ
ールにおいて試験の後に、同一の評価が６０バールにお
いて遂行された。
【００７２】表１は、本発明（ポリマー１‐５乃至１‐
９）及び種々の比較ポリマー（サフィックスＣを有する
ポリマー）のマクロポーラスポリマーの流れ抵抗及びイ
ンシュリン容量特質を要約する。表中のポリマーの詳細
な記載及びそれらの相当する同定に関し、実施例１の記
載が参照される。表１の記載には、ポリマーを調製する
ためにポローゲンパーセント（全モノマー基準）、親水
性ポローゲン／疎水性ポローゲン比率（ＭＩＢＣ／キシ
レン）及び使用されるフリーラジカル開始剤％（全モノ
マー基準）；中間圧及び高圧においてｇ／Ｌでのインシ
ュリン容量及び流れ抵抗値；与えられたポリマー試料の
インシュリン容量及び流れ抵抗について個々の値の後の
括弧内の記載は、表１で示されるインシュリン容量及び
流れ抵抗値を生じさせるために試験され、共に平均化さ
れた同一プロセス（同一ポローゲンパーセント、親水性
ポローゲン／疎水性ポローゲン比率及びＢＰＯ％）に従
い調製された異なるポリマーの数を示している。表２は
選ばれた試料の追加のポリマー特性（表面積、多孔度）
を提供する。
【００７３】比較ポリマー１‐１Ｃは、高すぎるポロー
ゲン濃度が高圧における不満足な圧縮率を示し、一方で
１‐１０Ｃ及び１‐１１Ｃのポリマーは低すぎるポロー
ゲン濃度が、満足した圧縮率(低流れ抵抗)を提供する
が、著しく低いインシュリン容量を提供することを示し
ている。比較ポリマー１‐１Ｃ、１‐２Ｃ及び１‐３Ｃ
はポローゲンパーセント濃度を低減することは流れ抵抗
特性を改善する傾向があることを示す；しかしながら、
流れ抵抗性能は、高圧操作については不満足であり、加
えて、低ポロ−ゲン濃度及び低ＭＩＢＣ／キシレン比
（比較ポリマー１‐４Ｃ）の組み合わせについては動的
インシュリン容量が不満足となることを示している。
【００７４】ポリマー１‐５乃至１‐９は、本発明のポ
リマーを調製するのに使用されるポローゲンパーセント
及び親水性ポローゲン／疎水性ポローゲン比パラメータ
ーを均衡させることにより提供される、高いインシュリ
ン容量及び（高圧における）低い流れ抵抗の予期しない
組み合わせの代表例である。
【００７５】市販のポリマー試料１‐１２Ｃ及び１‐１
３Ｃは、双方とも受け入れられない圧縮率特性を示す
が、ポリマー１‐１２Ｃは、適当なインシュリン容量性
能を提供する。市販のポリマー１‐１４Ｃはぎりぎりの
許容可能な圧縮性能を提供するが、インシュリン容積
は、許容値よりかなり下である。
【００７６】
【表１】
【００７７】
【表２】
【００７８】実施例４ 本実施例は、酵素処理をした場合及び酵素処理をしない
場合における、本発明のマクロポーラスポリマーを調製
することの効果を記載している。酵素処理は、ポリマー
の表面汚染（例えば、イオン性又は荷電物質）から生じ
るビーズ間の望ましくない引力のために使用過程で時折
おきる、ポリマーの凝集又は集塊を最小限にする。酵素
処理を使用する利点は、結果として生じる球状ポリマー
粒子が凝集せず、即ち、粒子がお互いに接着して集塊を
形成しないことである。酵素処理はポリマービーズ表面
から（重合過程で使用される）分散剤及び沈殿防止剤の
痕跡を浄化及び除去し、その結果、カラム内で自由に流
れ、均一に詰まるポリマービーズを提供し、延いては使
用過程での最小の床容積及び低い圧力降下特性に通じる
ものであると信じられる。
【００７９】実施例１に記載されたのと同様に調製され
たマクロポーラスポリマーの五つの異なる試料は次のよ
うに処理された：４部分（４Ａ〜４Ｄ）がセルラーゼ
（下記に記載）で処理され、１試料（４Ｅ）は、セルラ
ーゼで処理されなかった；試料は、それらの沈降特性が
評価された。それぞれのポリマー樹脂の試料は、（約２
５ｍｌの湿潤分散容積に相当する３．５ｇ乾燥物）２５
ｍｌのメスシリンダー中で計量された。それぞれのシリ
ンダーに２０％エタノール（水性）の２０ｍｌが添加さ
れた。それからシリンダーは、ガラス棒で撹拌されスラ
リーを提供し、混合物は１６時間又は一晩沈降させられ
た。試料は次いでガラス棒で完全に混合するまで再度撹
拌された。試料を混合後、ガラス棒は除去され、２０％
エタノール（水性）で洗浄され、シリンダー内の合計容
積を２５．０ｍｌに調整した。約０．５ｍｌの２０％エ
タノールが、それぞれの試料を洗浄し、調整するために
使用された。試料は、それから４日間観察され、沈降し
た床容積（樹脂）が、時間の関数として記録された。結
果は、表３に要約されている。
【００８０】ポリマー４Ａの酵素処理（高温硬化の
前）：約２５０ｍｌのスラリー化された樹脂（１５０ｍ
ｌの樹脂を含有する）が、コンデンサー、機械的撹拌
機、熱電対及び窒素取り入れ口を装備した２リッター
の、四つ口フラスコに添加された。１００ｍｌの脱イオ
ン水がスラリーに加えられ、ｐＨがホウ酸を使用して
５．０に調整され、それから２８ｇのセルラーゼ（商
標）４０００（ポリマーにつき１９％）がスラリーに添
加された。混合物は、３７℃に加熱され、３時間撹拌さ
れた。反応混合物は、それから撹拌機が装備された圧力
容器に移され、１００℃で５時間加熱された。水性／ポ
リマー混合物は、室温まで冷却され、フラスコから除去
され、１リッターのクロマトグラフィーカラムに置かれ
た。水性相は、ポリマーからろ過され、それからポリマ
ー充填床は７リッターの脱イオン水で洗浄され、引き続
き３．５リッターのアセトンで洗浄され、最終的に７リ
ッターの脱イオン水で洗浄された。水湿潤ポリマーは、
それから１００℃の温度において２．５ｍｍ水銀真空下
で１６時間の間乾燥された。
【００８１】ポリマー４Ｂの酵素処理（高温硬化の後、
溶媒洗浄の前）：約２５０ｍｌのスラリー化された樹脂
（１５０ｍｌの樹脂を含有する）が、撹拌機が装備され
た圧力容器に移され、１００℃で５時間加熱された。水
性／ポリマー混合物は、室温まで冷却され、コンデンサ
ー、機械的撹拌機、熱電対及び窒素取り入れ口を装備し
た２リッターの、四つ口フラスコに移動された。１００
ｍｌの脱イオン水がスラリーに加えられ、ｐＨがホウ酸
を使用して５．０に調整され、それから２８ｇのセルラ
ーゼ４０００（ポリマーにつき１９％）がスラリーに添
加された。混合物は、３７℃に加熱され、３時間撹拌さ
れた。反応混合物は、それからフラスコから除去され、
１リッターのクロマトグラフィーカラム内に置かれた。
水性相は、ポリマーからろ過され、それからポリマー充
填床は７リッターの脱イオン水で洗浄され、引き続き
３．５リッターのアセトンで洗浄され、最終的に７リッ
ターの脱イオン水で洗浄された。水湿潤ポリマーは、そ
れから１００℃の温度おいて２．５ｍｍ水銀真空下で１
６時間の間乾燥された。
【００８２】ポリマー４Ｃの酵素処理（高温硬化の後、
溶媒洗浄の後、溶媒再洗浄の前）：約２５０ｍｌのスラ
リー化された樹脂（１５０ｍｌの樹脂を含有する）が、
撹拌機が装備された圧力容器に移され、１００℃で５時
間加熱された。水性／ポリマー混合物は、室温まで冷却
され、フラスコから除去され、１リッターのクロマトグ
ラフィーカラム内に置かれた。水性相は、ポリマーから
ろ過され、それからポリマー充填床は７リッターの脱イ
オン水で洗浄され、引き続き３．５リッターのアセトン
で洗浄され、最終的に７リッターの脱イオン水で洗浄さ
れた。その混合物は、コンデンサー、機械的撹拌機、熱
電対及び窒素取り入れ口を装備した２リッターの、四つ
口フラスコに移された。１００ｍｌの脱イオン水がスラ
リーに加えられ、ｐＨがホウ酸を使用して５．０に調整
され、それから２８ｇのセルラーゼ４０００（ポリマー
につき１９％）がスラリーに添加された。その混合物
は、３７℃に加熱され、３時間撹拌された。反応混合物
は、それからフラスコから除去され、１リッターのクロ
マトグラフィーカラム内に置かれた。水性相は、ポリマ
ーからろ過され、それからポリマー充填床は７リッター
の脱イオン水で洗浄され、引き続き３．５リッターのア
セトンで洗浄され、最終的に７リッターの脱イオン水で
洗浄された。水湿潤ポリマーは、それから１００℃の温
度において２．５ｍｍ水銀真空下で１６時間の間乾燥さ
れた。
【００８３】ポリマー４Ｄの酵素処理（高温硬化の後、
溶媒洗浄の後、ポリマーを乾燥後、溶媒再洗浄の後）：
約２５０ｍｌのスラリー化された樹脂（１５０ｍｌの樹
脂を含有する）が、撹拌機が装備された圧力容器に移さ
れ、１００℃で５時間加熱された。水性の／ポリマー混
合物は、室温まで冷却され、フラスコから除去され、１
リッターのクロマトグラフィーカラム内に置かれた。水
性相は、ポリマーからろ過され、それからポリマー充填
床は７リッターの脱イオン水で洗浄され、引き続き３．
５リッターのアセトンで洗浄され、最終的に７リッター
の脱イオン水で洗浄された。水湿潤ポリマーは、それか
ら１００℃の温度において２．５ｍｍ水銀真空下で１６
時間の間乾燥された。乾燥試料は、コンデンサー、機械
的撹拌機、熱電対及び窒素取り入れ口を装備した２リッ
ターの、四つ口フラスコに移された。１００ｍｌの脱イ
オン水がスラリーに加えられ、ｐＨがホウ酸を使用して
５．０に調整され、それから２８ｇのセルラーゼ４００
０（ポリマーにつき１９％）がスラリーに添加された。
その混合物は、３７℃に加熱され、３時間撹拌された。
反応混合物は、それからフラスコから除去され、１リッ
ターのクロマトグラフィーカラム内に置かれた。水性相
は、ポリマーからろ過され、それからポリマー充填床は
７リッターの脱イオン水で洗浄され、引き続き３．５リ
ッターのアセトンで洗浄され、最終的に７リッターの脱
イオン水で洗浄された。水湿潤ポリマーは、それから１
００℃の温度において２．５ｍｍ水銀真空下で１６時間
の間乾燥された。
【００８４】ポリマー４Ｅの処理（酵素無し）：約２５
０ｍｌのスラリー化された樹脂（１５０ｍｌの樹脂を含
有する）が、撹拌機が装備された圧力容器に移され、１
００℃で５時間加熱された。水性／ポリマー混合物は、
室温まで冷却され、フラスコから除去され、１リッター
のクロマトグラフィーカラム内に置かれた。水性相は、
ポリマーからろ過され、それからポリマー充填床は７リ
ッターの脱イオン水で洗浄され、引き続き３．５リッタ
ーのアセトンで洗浄され、最終的に７リッターの脱イオ
ン水で洗浄された。水湿潤ポリマーは、それから１００
℃の温度において２．５ｍｍ水銀真空下で１６時間の間
乾燥された。
【００８５】表３の結果は、本発明のマクロポーラスポ
リマーがポリマー粒子の集塊又は凝集を最小限にするた
め様々な方法で酵素処理されてもよいことを証明する。
１８時間の沈降後において、処理ポリマー（４Ａ‐４
Ｄ）の容積は小さく、当初の分散された容積の９４％で
ある未処理ポリマーと比較して、各サンプルは当初の分
散された容積の６０％を表していることから証明され
る。
【００８６】
【表３】
【００８７】同様に、酵素処理及び酵素無処理ポリマー
樹脂の試料が、調製され、カラム操作に使用された場合
の圧力降下特性について評価された。それぞれの樹脂ス
ラリーの約１２００ｍｌ（約５５０ｍｌのポリマー樹脂
を含む）が６．２ｃｍのアミコン（商標）バンテージカ
ラム（Ｖａｎｔａｇｅ ｃｏｌｕｍｎ）内に配置され
た。５４５ｍｌの樹脂床が形成され、レイニン（Ｒａｉ
ｎｉｎ、商標）ＨＰＬＸポンプを使用して５０ｍｌ／分
（１７８ｃｍ／時）でＵＳＰ（米国薬局方）等級の水、
３床容積で洗浄され、引き続き６５％アセトン／３５％
ＵＳＰ等級水の混合物で洗浄され、それから最終的に５
０ｍｌ／分において９９．５％アセトンで洗浄された。
圧力は、０から６．９×１０６Ｐａ（１平方インチ当た
り１０００ｐｓｉ又はポンド）のレンジのアッシュクロ
フト（Ａｓｈｃｒｏｆｔ）（商標）圧力試験計器で測定
された。セルラーゼ処理された試料は、未処理試料
（１．４×１０６Ｐａ又は２００ｐｓｉ）に比較して、
カラム断面で減少した圧力降下である（１．４×１０５
Ｐａ又は２０ｐｓｉ）を有していた。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 マーリン・ケンネス・キンゼイ アメリカ合衆国ペンシルバニア州19147, フィラデルフィア，ランバード・ストリー ト・812，ナンバー11 (72)発明者 ジョン・ジョセフ・メイクナー アメリカ合衆国ペンシルバニア州18951, クエーカータウン，メイアー・ロード・ 1810 (72)発明者 ロバート・イー・ローゼン アメリカ合衆国ペンシルバニア州19027, メルローズ・パーク，ランフェアー・ロー ド・516 Ｆターム(参考） 4J011 JA13 JA14 NA01 4J100 AB00Q AB02Q AB03Q AB07Q AB15P AB16P BB03Q CA01 CA04 EA13 HA55 HC00 JA17

Claims (10)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】（ａ）５０から１００重量％の１以上のポ
    リビニル芳香族モノマー及び（ｂ）０から５０重量％の
    １以上のモノ不飽和ビニル芳香族モノマーの重合された
    モノマー単位を含むマクロポーラスポリマーであって、 （ｉ）１グラム当たり０．７から２立方センチメートル
    の全多孔度； （ｉｉ）１グラム当たり０．７から１．９立方センチメ
    ートルのオペレイショナルなメソポロシティー； （ｉｉｉ）２から６００ミクロンの平均粒子直径； （ｉｖ）１グラム当たり２００から１５００平方メート
    ルの表面積； （ｖ）１０バール圧において７００から１，８００未満
    の流れ抵抗値及び６０バール圧において１，５００から
    ７，０００未満の流れ抵抗値；及び （ｖｉ）ポリマーについて７５から１５０グラムインシ
    ュリン／リッターである総インシュリン容量及びポリマ
    ーについて６０から１５０グラムインシュリン／リッタ
    ーである動的インシュリン容量を有する、ポリマー。
  2. 【請求項２】ポリビニル芳香族モノマーが、１以上のジ
    ビニルベンゼン、トリビニルベンゼン、ジビニルトルエ
    ン、ジビニルナフタレン、ジビニルアントラセン及びジ
    ビニルキシレンから選択される請求項１に記載のポリマ
    ー。
  3. 【請求項３】モノ不飽和ビニル芳香族モノマーが、１以
    上のスチレン及び（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル置換スチレン
    から選択される請求項１に記載のポリマー。
  4. 【請求項４】ポリマーが， （ａ）１グラム当たり４００から１０００平方メートル
    の表面積； （ｂ）１グラム当たり０．９から１．４立方センチメー
    トルのオペレイショナルなメソポロシティー； （ｃ）１０から７５ミクロンの平均粒子直径； （ｄ）１０バール圧において７００から１，５００未満
    の流れ抵抗値及び６０バール圧において１，５００から
    ５，０００未満の流れ抵抗値；及び （ｅ）ポリマーについて９０から１５０グラムインシュ
    リン／リッターである総インシュリン容量及びポリマー
    について７５から１５０グラムインシュリン／リッター
    である動的インシュリン容量を有する請求項１に記載の
    ポリマー。
  5. 【請求項５】（ａ）７５から１００重量％の１以上のポ
    リビニル芳香族モノマー及び（ｂ）０から２５重量％の
    １以上のモノ不飽和ビニル芳香族モノマーの重合された
    モノマー単位を含む請求項１に記載のポリマー。
  6. 【請求項６】ポリマーが、１以上のジビニルベンゼンコ
    ポリマー、スチレン‐ジビニルベンゼンコポリマー、ジ
    ビニルベンゼン‐エチルビニルベンゼンコポリマー及び
    スチレン‐エチルビニルベンゼン‐ジビニルベンゼンコ
    ポリマーから選択される請求項１に記載のポリマー。
  7. 【請求項７】水性サスペンションにおいて、疎水性ポロ
    ーゲン及び親水性ポローゲンを含む１００から１７０パ
    ーセントのポローゲン混合物及び０．５から１０％のフ
    リーラジカル重合開始剤の存在下で、０から５０パーセ
    ントのモノビニル芳香族モノマー及び５０から１００パ
    ーセントのポリビニル芳香族モノマーを重合することを
    含むマクロポーラスポリマーを調製する方法（全てのパ
    ーセント量はモノマーの総重量を基準としている）であ
    って、（ａ）親水性ポローゲンは、疎水性ポローゲンに
    対して１．２／１より大で３／１までの重量比で存在
    し；及び（ｂ）親水性ポロ−ゲンは、１以上の（Ｃ４〜
    Ｃ１０）アルカノールから選択され、疎水性ポローゲン
    は、１以上の（Ｃ７〜Ｃ １０）芳香族炭化水素及び（Ｃ
    ６〜Ｃ１２）飽和炭化水素から選択される、方法。
  8. 【請求項８】親水性ポロ−ゲンが１以上の（Ｃ５〜
    Ｃ８）アルカノールから選択され、疎水性ポローゲンが
    １以上の（Ｃ７〜Ｃ１０）芳香族炭化水素から選択され
    る請求項７に記載の方法。
  9. 【請求項９】更に、１以上のセルロース分解酵素及び蛋
    白質加水分解酵素から選択される酵素でマクロポーラス
    ポリマーを処理することを含み、ここで、該酵素が重合
    過程中、重合に引き続いて又はポリマーの分離後におい
    てマクロポーラスポリマーと接触される請求項７に記載
    の方法。
  10. 【請求項１０】混合された生体分子の水性溶液を、２か
    ら１００センチメートルの内径を有する液体クロマトグ
    ラフィーカラム中で請求項１のマクロポーラスポリマー
    と接触させる混合された生体分子水性溶液の精製方法で
    あって、カラムが１０から１００バールの圧力で操作さ
    れる、方法。
JP2001244111A 2000-08-11 2001-08-10 重合体吸着剤及び製造方法 Expired - Fee Related JP5226918B2 (ja)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US22437300P 2000-08-11 2000-08-11
US60/224373 2000-08-11

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2012196376A Division JP5580379B2 (ja) 2000-08-11 2012-09-06 重合体吸着剤及び製造方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JP2002145951A true JP2002145951A (ja) 2002-05-22
JP5226918B2 JP5226918B2 (ja) 2013-07-03

Family

ID=22840394

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2001244111A Expired - Fee Related JP5226918B2 (ja) 2000-08-11 2001-08-10 重合体吸着剤及び製造方法
JP2012196376A Expired - Lifetime JP5580379B2 (ja) 2000-08-11 2012-09-06 重合体吸着剤及び製造方法

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2012196376A Expired - Lifetime JP5580379B2 (ja) 2000-08-11 2012-09-06 重合体吸着剤及び製造方法

Country Status (7)

Country Link
US (1) US6387974B1 (ja)
EP (1) EP1179732B2 (ja)
JP (2) JP5226918B2 (ja)
CN (1) CN1205239C (ja)
CZ (1) CZ20012922A3 (ja)
DE (1) DE60102327T3 (ja)
NO (1) NO332995B1 (ja)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2005531651A (ja) * 2002-05-30 2005-10-20 アメルシャム・バイオサイエンシーズ・アクチボラグ マクロ多孔性架橋ポリマー粒子
JP2019500917A (ja) * 2015-10-22 2019-01-17 サイトソーベンツ・コーポレーション 生体液よりタンパク質ベースの毒素とカリウムを除去するための多機能性の血液適合性多孔性ポリマービーズ吸着剤

Families Citing this family (24)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GR1002662B (el) * 1996-06-05 1997-04-07 ������� ���������� ����������� ��� �������� ������� ... Μεθοδος παραγωγης προιοντων που προσροφουν πετρελαιο και οργανικους διαλυτες.
EP1394196A1 (en) * 2002-08-16 2004-03-03 Rohm And Haas Company Resin for solid phase synthesis
DE60322000D1 (de) * 2002-08-16 2008-08-21 Rohm & Haas Harze mit niedrigem Leerraum und Verfahren zu deren Herstellung
US20040063856A1 (en) * 2002-09-30 2004-04-01 Bohling James Charles Resin for solid phase synthesis
US6884829B2 (en) * 2002-10-18 2005-04-26 Robert L. Albright Hemocompatible coated polymer and related one-step methods
WO2004047981A1 (en) * 2002-11-25 2004-06-10 Varian, Inc. Irregularly-shaped macroporous copolymer particles and methods of using same
US6921703B2 (en) * 2003-05-13 2005-07-26 Texas Instruments Incorporated System and method for mitigating oxide growth in a gate dielectric
DK1589045T3 (da) * 2004-04-20 2007-07-23 Rohm & Haas Polymeradsorbent og fremgangsmåde til fremstilling og anvendelse heraf
US20060247361A1 (en) * 2005-05-02 2006-11-02 Varian, Inc. Polar functionalized polymer modified porous substrate for solid phase extraction
US7311825B2 (en) * 2005-05-02 2007-12-25 Varian, Inc. Polymer modified porous substrate for solid phase extraction
US20060266707A1 (en) * 2005-05-26 2006-11-30 Fisher Jon R Drying method for macroporous polymers, and method of preparation and use of macroporous polymers made using the method
EP1907089B1 (en) * 2005-07-28 2011-11-23 Bio-Rad Laboratories, Inc. Separation of proteins based on isoelectric point using solid-phase buffers
CA2617645C (en) 2005-08-03 2014-09-09 Merck Patent Gesellschaft Mit Beschraenkter Haftung Hydrophilic crosslinked polymer
CN101875005A (zh) * 2010-07-15 2010-11-03 上海市安全生产科学研究所 苯吸附材料及其制备方法
MY178616A (en) 2012-09-17 2020-10-19 Grace W R & Co Chromatography media and devices
KR20160087859A (ko) * 2013-11-17 2016-07-22 뉴 프로테인테크 인크. 크로마토그래픽 물질을 제조하는 방법
JP6853670B2 (ja) 2014-01-16 2021-04-07 ダブリュー・アール・グレース・アンド・カンパニー−コーンＷ Ｒ Ｇｒａｃｅ ＆ Ｃｏ−Ｃｏｎｎ 親和性クロマトグラフィー媒体及びクロマトグラフィーデバイス
SG11201607341SA (en) 2014-03-04 2016-10-28 Merck Patent Gmbh Robust antibody purification
CN107847907A (zh) 2014-05-02 2018-03-27 格雷斯公司 官能化载体材料以及制备和使用官能化载体材料的方法
CA2970732C (en) 2014-12-15 2023-05-16 Merck Patent Gmbh Target molecule capture from crude solutions
EP3302784B1 (en) 2015-06-05 2021-10-06 W.R. Grace & Co.-Conn. Adsorbent bioprocessing clarification agents and methods of making and using the same
CN109154604B (zh) * 2016-04-24 2023-07-21 沃特世科技公司 用于对用两亲强碱性部分改性的聚糖进行分析的带电表面反相色谱材料方法
CN105854826B (zh) * 2016-05-05 2018-02-09 济南大学 一种乙烯基苄基三甲基氯化铵改性芦苇杆吸附剂的制备
CN105749868B (zh) * 2016-05-05 2018-01-23 济南大学 一种乙烯基苄基三甲基氯化铵改性碳纤维吸附剂的制备

Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0224303A (ja) * 1988-07-12 1990-01-26 Sanken Kako Kk 多孔性交又共重合体の製造方法
JPH02126155A (ja) * 1988-11-07 1990-05-15 Hitachi Ltd 分離カラム
JPH03168203A (ja) * 1989-11-29 1991-07-22 Tokyo Organ Chem Ind Ltd 多孔性架橋共重合体の製造方法
JPH03217201A (ja) * 1990-01-23 1991-09-25 Tokyo Organ Chem Ind Ltd 多孔性樹脂に依る吸着分離方法
JPH10502107A (ja) * 1994-06-21 1998-02-24 ザ ダウ ケミカル カンパニー 増大した吸着能力および運動特性をもつ重合体状吸着剤およびその製造方法
JPH11158230A (ja) * 1997-11-27 1999-06-15 Arakawa Chem Ind Co Ltd 水酸基含有多孔質樹脂の製造方法
JPH11183460A (ja) * 1997-12-17 1999-07-09 Tosoh Corp 液体クロマトグラフィー用充填剤及びその製造方法及び使用法
JPH11193310A (ja) * 1997-12-27 1999-07-21 Arakawa Chem Ind Co Ltd アルキル基含有多孔質ポリマー、その製造方法及びその用途
JP2000202284A (ja) * 1999-01-07 2000-07-25 Rohm & Haas Co 高表面積吸着剤およびその調製法

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4382124B1 (en) * 1958-07-18 1994-10-04 Rohm & Haas Process for preparing macroreticular resins, copolymers and products of said process
JPS5798504A (en) 1980-12-11 1982-06-18 Mitsubishi Monsanto Chem Co Production of vinyl polymer
JP2534979B2 (ja) * 1984-12-27 1996-09-18 東ソー株式会社 液体クロマトグラフイ−用充てん剤
JPS61141704A (ja) * 1985-11-11 1986-06-28 Mitsubishi Kasei Vinyl Co ビニル系重合体の製造方法
US5416124A (en) * 1994-06-21 1995-05-16 The Dow Chemical Company Polymeric adsorbents with enhanced adsorption capacity and kinetics and a process for their manufacture

Patent Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0224303A (ja) * 1988-07-12 1990-01-26 Sanken Kako Kk 多孔性交又共重合体の製造方法
JPH02126155A (ja) * 1988-11-07 1990-05-15 Hitachi Ltd 分離カラム
JPH03168203A (ja) * 1989-11-29 1991-07-22 Tokyo Organ Chem Ind Ltd 多孔性架橋共重合体の製造方法
JPH03217201A (ja) * 1990-01-23 1991-09-25 Tokyo Organ Chem Ind Ltd 多孔性樹脂に依る吸着分離方法
JPH10502107A (ja) * 1994-06-21 1998-02-24 ザ ダウ ケミカル カンパニー 増大した吸着能力および運動特性をもつ重合体状吸着剤およびその製造方法
JPH11158230A (ja) * 1997-11-27 1999-06-15 Arakawa Chem Ind Co Ltd 水酸基含有多孔質樹脂の製造方法
JPH11183460A (ja) * 1997-12-17 1999-07-09 Tosoh Corp 液体クロマトグラフィー用充填剤及びその製造方法及び使用法
JPH11193310A (ja) * 1997-12-27 1999-07-21 Arakawa Chem Ind Co Ltd アルキル基含有多孔質ポリマー、その製造方法及びその用途
JP2000202284A (ja) * 1999-01-07 2000-07-25 Rohm & Haas Co 高表面積吸着剤およびその調製法

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2005531651A (ja) * 2002-05-30 2005-10-20 アメルシャム・バイオサイエンシーズ・アクチボラグ マクロ多孔性架橋ポリマー粒子
JP2019500917A (ja) * 2015-10-22 2019-01-17 サイトソーベンツ・コーポレーション 生体液よりタンパク質ベースの毒素とカリウムを除去するための多機能性の血液適合性多孔性ポリマービーズ吸着剤

Also Published As

Publication number Publication date
CZ20012922A3 (cs) 2002-03-13
US20020042487A1 (en) 2002-04-11
EP1179732B1 (en) 2004-03-17
EP1179732A3 (en) 2003-06-18
DE60102327D1 (de) 2004-04-22
JP5226918B2 (ja) 2013-07-03
NO20013803L (no) 2002-02-12
JP5580379B2 (ja) 2014-08-27
EP1179732B2 (en) 2012-02-29
US6387974B1 (en) 2002-05-14
CN1338480A (zh) 2002-03-06
JP2012247437A (ja) 2012-12-13
DE60102327T2 (de) 2005-03-17
CN1205239C (zh) 2005-06-08
EP1179732A2 (en) 2002-02-13
NO332995B1 (no) 2013-02-11
NO20013803D0 (no) 2001-08-03
DE60102327T3 (de) 2012-07-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP5580379B2 (ja) 重合体吸着剤及び製造方法
Yilmaz et al. A facile method for preparing molecularly imprinted polymer spheres using spherical silica templates
Zeng et al. Preparation and characterization of polar polymeric adsorbents with high surface area for the removal of phenol from water
JP4335168B2 (ja) ポリマー吸着剤、ならびに調製および使用方法
JP3158186B2 (ja) アルキル基含有多孔質樹脂、その製造方法及びその用途
Zhang et al. Poly (glycidyl methacrylate–divinylbenzene–triallylisocyanurate) continuous-bed protein chromatography
Martel et al. Sorption of aromatic compounds in water using polymer sorbents containing amino groups
Xu et al. Preparation and application of monodisperse, highly cross-linked, and porous polystyrene microspheres for dye removal
Hosoya et al. Uniform-size hydrophobic polymer-based separation media selectively modified with a hydrophilic external polymeric layer
Zhou et al. Macroporous polymeric ion exchanger of high capacity for protein adsorption
CA2970732C (en) Target molecule capture from crude solutions
US20060237367A1 (en) Polymeric adsorbent, and method of preparation and use
Suárez et al. Functionalized glycidyl methacrylate based polymers as stationary phases for protein retention
Lewandowski et al. A novel polar separation medium for the size exclusion chromatography of small molecules: Uniformly sized, porous poly (vinylphenol-co-divinylbenzene) beads
JPH11193310A (ja) アルキル基含有多孔質ポリマー、その製造方法及びその用途
US20060266707A1 (en) Drying method for macroporous polymers, and method of preparation and use of macroporous polymers made using the method
KR100699442B1 (ko) 거대다공성 중합체의 건조방법, 제조방법 및 그 방법을이용하여 제조된 거대다공성 중합체의 용도
Gökaltun et al. Octadecylamine-attached poly (3-chloro-2-hydroxypropyl methacrylate-co-ethylene dimethacrylate) microspheres as a new stationary phase for microbore reversed phase chromatography
Zhou et al. A new method for the synthesis of gigaporous polymer beads
JP2003284947A (ja) 吸着剤及びその製造方法

Legal Events

Date Code Title Description
RD02 Notification of acceptance of power of attorney

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7422

Effective date: 20061017

A621 Written request for application examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621

Effective date: 20080807

RD02 Notification of acceptance of power of attorney

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7422

Effective date: 20080807

A977 Report on retrieval

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007

Effective date: 20120207

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20120307

A601 Written request for extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601

Effective date: 20120606

A602 Written permission of extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602

Effective date: 20120611

A601 Written request for extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601

Effective date: 20120706

A602 Written permission of extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602

Effective date: 20120711

A601 Written request for extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601

Effective date: 20120806

A602 Written permission of extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602

Effective date: 20120809

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20120906

TRDD Decision of grant or rejection written
A01 Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01

Effective date: 20130307

A61 First payment of annual fees (during grant procedure)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61

Effective date: 20130315

R150 Certificate of patent or registration of utility model

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150

FPAY Renewal fee payment (event date is renewal date of database)

Free format text: PAYMENT UNTIL: 20160322

Year of fee payment: 3

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

LAPS Cancellation because of no payment of annual fees