JP2001524321A - テスト用にヒトの唾液を保存するための方法と装置 - Google Patents

テスト用にヒトの唾液を保存するための方法と装置

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Abstract

(57)【要約】 後続の定量化学分析に使用するために唾液サンプルを保存するための方法と装置。前記方法は、ある場所に於いて、標本カップに直接にだ液サンプルを収集する工程とを含む。前記標本カップは、所定量のｐＨ緩衝生理食塩水溶液と、酵素抑制剤とを収納し、オプションとして、構成化合物特定定性試験ユニットを備える。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】 発明の分野 本発明は、体液サンプルを保存するための方法に関する。詳しくは、本発明は
、後続の薬剤試験に使用するためにヒトの唾液サンプルを保存、保管するための
方法に関する。
【０００２】 背景 薬物及びアルコール乱用は、今日の社会に於いて一般的な問題であり、それら
に悩む人々を破滅させ、彼らに近い人々に悪影響を与えている。薬剤及びアルコ
ール乱用は、社会全体の問題ではあるが、雇用者（ｅｍｐｌｏｙｅｒ）は有害な
影響を受けやすい。現在の職場に於いては、コストと欠勤怠業を最小限にしなが
ら高い品質と生産性を達成することを望む雇用者にとって、集中した（ｆｏｃｕ
ｓｅｄ）効率的な従業員（ｅｍｐｌｏｙｅｅ）は必須である。従業員が高い生産
性を達成、維持するためには、各従業員が健康でかつ機敏であることが重要であ
る。不健康な、又は、注意力の欠如した従業員は、効率を低下させ、更に、自分
自身や他の従業員が怪我をする可能性を増大させるかもしれない。生産性と品質
の低下、医療コストの増大、長期乱用の可能性は、従業員が薬物又はアルコール
を乱用する時に、雇用者が遭遇する可能性のある三つの問題に過ぎない。
【０００３】 職場に於ける薬物及びアルコール乱用と戦うために、多くの雇用者は、義務的
な薬物テストを従業員が受けることを要求している。これらのテストは、通常は
自発的に指令されるものであるが、一般に、従業員がその職場を離れて近所の試
験施設に行くことを必要とするものである。或いは、テストを職場で行うことも
可能であるが、これらのテストの多くは、当然に従業員に最低限のプライバシー
を提供することを含む尿サンプルのテストを必要とするものである。従って、現
在のテスト方法では少なくとも次の二つの問題が生じる。即ち、１）従業員は、
そうでなければ仕事をしているであろう時に、テストを受けるべくその職場を離
れる必要がある、そして２）尿テストによって必要とされるプライバシーにより
、従業員が偽のサンプルを提出する可能性が生じる（即ち、その従業員は別の人
間からサンプルを入手し、この薬剤を含まないサンプルをテストのために提出す
るかもしれない）。従って、雇用者が、従業員に対する不便を最小レベルにしな
がら、従業員のテストをその職場で行う方法を得ることが望ましいであろう。或
いは、法取り締まり担当官が、たとえば、ある個人の血液アルコール又はその他
の薬物レベルを判定するため等の、後の法廷テストの為に容疑者の唾液サンプル
を保存することに於いても類似の方法が有用である。実験室薬物テストに係る不
便と費用を無くする一つの方法として、定量試験が正当なものであるか否かを判
断するために、その唾液収集の時に定性試験を行うことも望ましいであろう。
【０００４】 本発明は、後続の化学分析の為に溶液中に唾液を保存する方法を提供するもの
である。この方法に依れば、従業員は、その職場に留まることが可能となり、テ
スト中に於いては僅かな不便しか必要とせず、更に、後に間違いのない正確なテ
ストを行うことができることを確保しながら、偽のテストを提供することに対す
る必要な予防策が提供されるであろう。
【０００５】 本発明は、又、前記唾液サンプルが不正操作防止シールされた後で、薬物の定
性即時テストを提供することに於いても有用である。
【０００６】 発明の要旨 本発明は、後続の定量化学分析に使用する為に唾液サンプルを保存するための
方法と調合物とに関する。この方法は、ある場所で、唾液サンプルを標本カップ
中に直接に収集する工程を含む。前記標本カップは、所定量のｐＨ緩衝生理食塩
水溶液と酵素抑制剤とを収納している。
【０００７】 前記標本瓶は、オプションとして、構成化合物特定定性テストユニットを備え
ていて、この定性テストユニットは前記瓶から延出する毛細管（ｃａｐｉｌｌａ
ｒｙ）のなかに収容されている。前記定性テストユニットは、乾燥酵素と、溶液
膨張可能プラグ（ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｓｗｅｌｌａｂｌｅ ｐｌｕｇ）と、適当
な比色分析試薬とを含む真空パックカプセルを収納している。前記カプセルを破
ると、所定量の溶液が毛細管に導入され、これによって前記定性テストユニット
を作動させる。その後すぐに、前記溶液膨張可能プラグが膨張して、標本カップ
内容物から前記定性テスト液を遮断する。
【０００８】 不正操作防止シールが形成された後、前記標本カップは、オフサイトの第２位
置へと搬送され、ここで、血液又は尿分析に於いて一般的な従来手段によって、
前記唾液サンプル溶液は、唾液構成組成物について定量的に分析される。
【０００９】 好適実施例の説明 一般的に多くの親水性化合物、特にアルコールは、一旦、胃管から血流内に吸
収されると、体の全体水分と均一に混合される。本発明の目的の為に、親水性化
合物とは、体プラズマ（ｂｏｄｙ ｐｌａｓｍａ）中に見られる物質として定義
される。この説明は、エタノール含有量の測定の為に唾液サンプルを保存するた
めの方法と組成物とを詳述するものではあるが、本発明は、実質細胞（ｐａｒｅ
ｎｃｈｙｍａ）によって吸収、排出されるその他の親水性化合物の測定のために
有効であると理解される。これらその他の化合物としては、具体的には、タンパ
ク質、ムチン、マリファナ、アヘン剤、コカイン、カンニビノイド（ｃａｎｎｉ
ｂｉｎｏｉｄｓ）、それらの代謝産物、カテコールアミン、及びカテコールアミ
ン誘導体が含まれる。脂肪組織には、赤血球等の脂質膜によって囲まれた組織又
は組織部分がある。親水性化合物は、そのような組織に入るが、その脂肪にでは
なく、むしろその組織に含まれる水分中に入る。従って、たとえばアルコールは
、数回の循環後に於いて、男性の場合には約０．６０−０．６８リットル／ｋｇ
、女性の場合には約０．５２−０．５４リットル／ｋｇの量で、全量が存在する
。体の水分中に一旦入ると、アルコールは、この量の水の水分中に分散され、新
陳代謝、排出、分配及び排出制限を受ける。
【００１０】 血液のいくつかの部分、特に、血液の水分は、腺の組織、例えば、消化管の外
分泌腺、即ち、口及び口腔、膵臓及びこの経路の他の器官の灌流に必須である。
特に、耳下腺、顎下腺、及び舌下腺を含む、咽頭腔及び口腔の唾液腺の灌流は、
この方法にとって重要である。血液がこれらの腺を灌流する過程に於いて、栄養
素（アミノ酸、炭水化物及び脂肪）とバルク水が、これらの腺の毛細管床（ｃａ
ｐｉｌｌａｒｙ ｂｅｄ（ｓ））から摂取され、その腺の個々の細胞に触れる。
これらの細胞は、一般に腺の「実質」細胞、たとえば、水分、タンパク質又はそ
の他の物質（ムチン等）を「分泌」する細胞、と呼ばれている。それは、腺から
の分泌物の流体部分である、「バルク水」部分、たとえば、実質細胞に存在する
水分、である。最後に、腺の「バルク水」に溶解する物質は、しばしば、その腺
が分泌することが求められるときに、分泌される。唾液腺のいずれかの場合には
、水及びタンパク質性の物質が唾液中に排出される。従って、唾液腺の排出物は
、血漿から発生する、等張性又はわずかに高張性の塩水溶液から成る。これらの
排出物は、更に、その腺に特有の種々の酵素も含むことがあり、それら種々の酵
素は、タンパク質をペプチドおよび／又はアミノ酸、複合炭水化物分解遺留品（
ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ）、脂質代謝遺留品へと分解又は代謝する蛋白分解活性を
有している。
【００１１】 エタノールを消費することによって、エチルアルコール（「アルコール」）が
プラズマ（又は血液）中に存在するとき、前記エチルアルコールは、唾液腺を潅
流する血液の成分となる。アルコールが唾液へと抽出されること、そして、それ
はこの過程に於いてプラズマから濃縮され、これにより、ヒトに於いては、当量
の血液サンプルと比べて、８−１５％高い濃度で存在することが知られている。
唾液中のエタノール含有率は、毛細管血中のそれに比べて約９％高いことが測定
されている、Ｃ Ｌｅｎｔｅｒ，Ｇｅｉｇｙ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｔａｂｌ
ｅｓ，Ｖｏｌ．１，Ｕｎｉｔｓ ｏｆ Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ， Ｂｏｄｙ
Ｆｌｕｉｄｓ，Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ ｏｆ tｈｅ Ｂｏｄｙ，Ｎｕｔｒ ｉｔｉｏｎ，Ｂａｓｌｅ：Ｃｉｂａ−Ｇｅｉｇｙ，１９８１；これをここに参考
文献として合体させる。唾液サンプルに於いて、血液アルコールレベルの測定は
、唾液サンプル中のアルコール濃度を数値化することによって行われる。
【００１２】 研究に依れば、同時に採取された、血液、呼吸及び唾液サンプルのエタノール
濃度には高い相関性が見られる。血液と唾液との間では、ｒ＝０．９７の相関係
数が測定された。９．４濃度％の平均唾液−血液濃度差が観察された。統計的に
は、９５％の信頼度に於いて唾液アルコール濃度は、同時の血液アルコールレベ
ル（ＢＡＬ）の８８−１３６濃度％である。Ａ．Ｗ．Ｊｏｎｅｓ，Ｃｌｉｎ．Ｃ
ｈｅｍ．（１９９３），Ｖｏｌ．３９（９）：１８３７−１８４３、これをここ
に参考文献として合体させる。
【００１３】 本発明者によって行われた研究によって、口からランダムに「吐き出された」
唾液の量は、平均で約２．０ミリリットルで、通常、１．８５−約２．３５ミリ
リットル、であると測定された。このような唾液のサンプルを、この唾液サンプ
ルを作り出した唾液腺を潅流した血液中のアルコール濃度の推定に利用すること
ができる。
【００１４】 もし、人がつばを吐くことが出来ない場合、たとえば、唾液のサンプルを作り
出すことが恐い場合や、その他の理由によってそれが出来ない場合には、オプシ
ョンとして、口腔に物質を接触させて、上述した腺による唾液の反射刺激を作り
出す。これらの物質の具体例としては、クエン酸（たとえば、レモンウェッジ）
やミルクがある。
【００１５】 次に、適当な溶液中に捕捉され保存された唾液のサンプルを使用して、それが
採取された人のアルコールの血液濃度を推定する。
【００１６】 唾液が導入される前記溶液は、そのサンプル提供者の口腔又は呼吸腔の環境中
に存在可能な、バクテリア、菌、白血球細胞、マクロファージ、又は、その他の
生物による、サンプル中に存在するアルコールやテスト物質の酵素代謝作用の抑
制によって唾液の劣化を減少させる薬剤を含む。前記溶液は、正常な生理体液に
関連するオスマリティ（ｏｓｍａｌｉｔｉｅｓ）の範囲の濃度で存在するイオン
性溶質を含む。前記体液は、体プラズマ、尿及び唾液を含む。
【００１７】 本発明の一好適実施例に於いて、体プラズマ又は尿を模倣する塩及び希釈水性
タンパク質マトリクス水溶液と、酵素抑制剤とを含有する標本溶液が作られる。
本発明に於いて、市販されている塩及び希釈タンパク質マトリクスを使用するこ
とができる。塩及びタンパク質マトリクスは、体プラズマ又は尿のオスマリティ
、組成、ｐＨ及び一般的特性を模倣する。体プラズマに関連する公知のパラメー
タは、そのマトリクス溶液内でのサンプルの定量分析のためのベースライン較正
として作用する。そのような塩及びタンパク質マトリクスの構成物質の具体例に
は、重炭酸塩（ｂｉｃａｒｂｏｎａｔｅ）、カルシウム、塩化物（ｃｈｌｏｒｉ
ｄｅ）、燐酸塩（ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）、カリウム、ナトリウム、硫酸塩（ｓｕ
ｌｆａｔｅ）、亜硫酸塩（ｓｕｌｆｉｔｅ）、アルブミン、アミノ酸、ヌクレオ
チド、ヌクレオシド、尿素、クレアチン、クエン酸塩（ｃｉｔｒａｔｅ）、蟻酸
塩（ｆｏｒｍａｔｅ）、及び乳酸塩（ｌａｃｔａｔｅ）がある。前記塩及びタン
パク質マトリクスは、オプションとして、従来より体液の保存用に使用されてい
る溶液、具体的には、等張食塩水（０．０８５ｇ／Ｌ 塩化ナトリウム）を含む
緩衝塩溶液や５０ｍＭリン酸緩衝生理食塩水等によって置き換えられる。そのよ
うな溶液のｐＨは、好ましくは、７−８である。
【００１８】 本発明の酵素抑制剤は、前記標本溶液水に対して、０．０１−１０モル％の濃
度で含まれる。この薬剤は、前記サンプル又は前記標本カップ中に含まれている
、生細胞内にある薬物やアルコール等の物質を分解する酵素の作用を阻止する作
用を有する。アルコール濃度を測定する本発明の実施例に於いて、アルコール脱
水素酵素の阻害が特に憂慮される。より具体的には、前記酵素抑制剤は、前記標
本溶液に対して０．０５−１モル％含まれる。本発明の酵素抑制剤の具体例とし
ては、アミノグリコシド、セフェロスポリン（ｃｅｐｈｅｌｏｓｐｏｒｉｎｓ）
、テトラサイクリン、サルファ剤、ペニシリン、及びこれらに類似の抗生物質が
ある。
【００１９】 最適な酵素抑制剤濃度は、酵素活性を破壊するその特定の化合物の有効性によ
って決まるものである、と理解される。本発明の薬剤は、更に、前記標本カップ
に存在する生物（ｏｒｇａｎｉｓｍ）に対する二次的な生物学的作用も有するも
のとすることができる。好ましくは、前記酵素抑制剤は、グリコリシス経路反応
を阻害する作用を有する。
【００２０】 オプションとして、前記標本溶液には、殺真菌薬（又は殺菌剤）が添加される
。好ましくは、この殺真菌薬（又は殺菌剤）は、前記標本溶液水に対して、約０
．０１−１０モル％の濃度で含まれる。より好ましくは、前記殺真菌薬（又は殺
菌剤）は、前記標本溶液水に対して、約０．０５−１モル％の濃度で含まれる。
本発明に於いて有効な殺真菌薬又は殺菌剤の具体例としては、ポリミキシン、ポ
リノキシリン、ナイスタチン、塩化ヘダキニウム（ｈｅｄａｑｕｉｎｉｕｍ）、
テトラクロロイソフタロニトリル、及びケトコナゾールがある。
【００２１】 オプションとして、前記標本溶液には殺菌剤が添加される。好ましくは、この
殺菌剤は、前記標本溶液水に対して、約０．０１−１０モル％の濃度で含まれる
。より好ましくは、前記殺菌剤は、前記標本溶液水に対して、約０．０５モル％
より高い濃度で含まれる。本発明に於いて有効な殺菌剤の具体例としては、アミ
ノグリコシド、セフェロスポリン（ｃｅｐｈｅｌｏｓｐｏｒｉｎｓ）、テトラサ
イクリン、サルファ薬、ペニシリン、及びこれらに類似の抗生物質がある。
【００２２】 これらの試薬が調合又は混合される順序は重要ではなく、本発明の前記溶液の
最終的有用性に対して無関係である。
【００２３】 上記試薬は、十分に混合され、好ましくは、１０−４０ミリリットル、好まし
くは、少なくとも１５ｍｌで約１８ｍｌ以下の量で、殺菌容器に投入されるべき
である。この材料及び試薬の量は、研究所が、アルコール脱水素酵素分析等の従
来技術によって前記標本カップ内に存在するアルコールの濃度を測定するのに十
分適したものである。オプションとして、異なる量の標本カップ溶液を利用して
、分析法の必要に応じて、サンプルを収集するのに利用される。大量の標本カッ
プ溶液でサンプルを希釈するには、正確な分析結果を得るために、そのサンプル
の一次増幅（ｐｒｉｍａｒｙ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ）が必要となること
があると理解される。前記標本カップは、好ましくは、テスト前に於ける不正変
更又は開放を防止するためにシーリングする手段を有する。前記標本カップは、
より好ましくは、テストアリコット（ｔｅｓｔ ａｌｉｑｕｏｔ）を抽出するた
めのポートを有する。
【００２４】 本発明の作業に於いて、テスト参加者は、マトリクス溶液を含む標本カップ中
に唾をはく。一旦、サンプルが採取されると、そのカップをシールし、その後の
テストのために、現場から離れた研究所へ搬送される。好ましくは、前記サンプ
ルを収納した標本カップは、約４℃−２５℃の温度で保管される。
【００２５】 次に、１００マイクロリットル（０．１ｍｌ）のサンプルアリコットを、分析
し、これによって得られた値を、その元の血液サンプル中の血液アルコールのミ
リグラム／デシリットル（ｍｇ／ｄｌ）濃度を推定するべく、４４．８の係数で
積算する。本発明者によって行われた研究によって、本発明の唾液サンプルとエ
チルアルコールを含有する同時に抽出された静脈血液レベルとの間には６−８濃
度％の誤差があることが判った。比較分析は、ガスクロマトグラフィーにより行
なった。
【００２６】 血液アルコール試験に適用可能な本発明の第２実施例は、サンプル中に存在す
るアルコールの量を、そのサンプル収集場所で、或いは、必要な化学反応を行う
試薬システムを備えることにより、数値化するための手段と、サンプルの分析お
よび／又はビジュアル化を可能にする関連の検出システムとを備える。
【００２７】 唾液サンプルを収集、保持及び保管するための上記標本溶液試薬に加えて、前
記収集システムにそのような成分を添加するために、インサイチュ分析溶液は、
更に、補助因子として作用するＮＡＤＰからＮＡＤＰＨへの形成を伴って、アル
コール脱水素酵素によってエタノールをアセトアルデヒドへ変換する酵素分析を
使用したアルコール分析を行うための試薬を含有する。アルコールオキシダーゼ
単体、又は、ペルオキシダーゼ酵素との組み合わせによっても、比色分析酸化還
元反応生成物が提供されると理解される。前記テスト条件下で、唾液サンプル中
のアルコールは、前記酵素と過剰量のＮＡＤＰ反応し、反応生成物であるアセト
アルデヒド、及び還元された補助因子であるＮＡＤＰＨをを定量的に形成する。
更に、アルコール以外の唾液構成化合物の検出の為には、異なる酵素システムが
必要とされ、これらの酵素は、構成化合物に対する酸化還元化学反応を行うため
の触媒抗体（ｃａｔａｌｙｔｉｃ ａｎｔｉｂｏｄｙ）等と同様に、当該技術に
於いて知られている。
【００２８】 唾液サンプルからアルコールの濃度を測定するのに必要な別の試薬によって、
ＮＡＤＰＨと、ニトロブルーテトラゾリウム（ＮＢＴ）との相互作用が起こる。
ＮＢＴは、定量的にＮＡＤＰＨと相互作用して還元ホルマザンを形成する。これ
らの化合物は、強く着色されており、−通常は暗青色−、従って、分光測光法的
手段によって容易に数値化される。
【００２９】 以下の例は、本発明の様々な実施例を例示する目的に提供されるものであり、
いかようにも本発明を限定するものと見なされてはならない。
【００３０】 図１は、唾液構成化合物の立入定性的検出と、その後の定量分析用に構成され
た全体を１０によって示す標本カップを図示している。ネジ蓋１２は、ボトル１
６の口１４を選択的にシールするように構成されている。オプションとして、唾
液サンプルの収集後、前記蓋１２とボトル１６との両方に接触するべく不正操作
防止接着テープ（図示せず）が使用される。前記ボトル１６は、このボトルの壁
２０から延出する少なくとも一つの中空毛細管１８を有する。この毛細管１８は
、前記ボトル壁２０の、前記標本カップ１０が直立位置に配置された時に、ボト
ル１６内の標本溶液が前記毛細管開口部をカバーするような位置から延出してい
る。好ましくは、前記毛細管１８は、ボトル１６の一体部分である。前記ボトル
１６は、適当な熱可塑材料から射出成形される。前記ボトル１６は、透明（ｃｌ
ｅａｒ）又は半透明（ｔｒａｎｓｌｕｃｅｎｔ）な外観を有する。
【００３１】 唾液構成化合物の立入定性検出用に構成された標本カップは、検出のために所
定量の溶液を回収し、その後、この量を、標本溶液のバルクから分離するように
構成されている。検出量の分離によって、前記定性検出の試薬が、その後の定量
分析に干渉することがない。図２は、前記毛細管１８の断面を図示している。こ
の毛細管１８の壁厚２２は、オプションとして、ボトル壁２０の壁厚よりも小さ
い。薄い毛細管はフレキシブルであり、毛細管の湾曲を許容する。薄壁のアンプ
ル２４は、毛細管１８の内腔（ｂｏｒｅ）内に挿入されるように構成されている
。このアンプル２４は、毛細管内腔の大半部分を充填する。該アンプル２４は、
その全体が２６によって図示されたインサイチュ比色検出用の試薬と、更に、溶
液膨張可能プラグ材２８とを有する。好ましくは、該アンプル２４のコンテンツ
は、真空下で保存される。前記試薬２６は、対象の唾液構成物に対して特異的な
凍結乾燥酵素と、適当な酸化還元活性比色分析指示薬とを含む。オプションとし
て、前記酵素と指示薬は、グラスウール等の不活性物質と混合される。前記溶液
膨張可能プラグ２８は、好ましくは、前記標本溶液との接触によって、急速に水
和する不活性親水性ポリマである。この溶液膨張可能プラグ２８は、具体的には
、セルロース、カルボキシメチルセルロース、ゼラチン、アルギネート、及びそ
れらの混合物である。
【００３２】 前記構成化合物特異的試薬と膨張可能プラグ材とを含むアンプルが、前記フレ
キシブルな毛細管に挿入される。測定量の溶液が前記ボトル内にシールされる。
唾液サンプルは、使用者が前記蓋を外し、ボトル内に唾を吐くことによって収集
され、その後、ボトルは再びシールされ、オプションとして、接着テープによっ
て不正操作防止シールされる。前記唾液溶液を旋回させると、前記毛細管が曲げ
られ、その内部に収納された前記アンプルを破る。アンプルが破れると、毛細管
と、標本カップボトル内の上部空間との間の圧力を均一にするべく溶液が毛細管
を満たす。前記毛細管に導入される溶液の量は、圧力とアンプルの容積とによっ
て制御される。溶液が毛細管を満たすと、前記検出試薬が活性化されると共に、
前記膨張可能プラグが水和し、前記検出量を溶液の残り部分から閉じる。使用さ
れた検出試薬の量に基づいて、比色分析的な変化によって最小量の成分化合物が
唾液サンプル中に存在することが示される。従って、重複テスト、一つの物質の
増分検出、又は、複数の物質のベースライン検出のために、標本カップボトルに
組み込まれた複数の毛細管が使用される。前記化合物検出に関連するテスト試薬
の比色分析的変化は、前記毛細管のクリア又は透明な壁を通じて観察可能である
。
【００３３】 本発明のアンプルは、パスツールピペットや融点管等のガラス管から構成され
る。このガラス管の一端部は、火炎シールされ、次に、前記膨張可能プラグ材と
検出試薬とが順次この管に追加される。次に、瓶内部の圧力を低減するべく、ア
ンプルの開放端部を真空ラインに繋ぐ。真空ラインがチューブを減圧している間
、前記管における試薬の上部の領域は、管がシールされ、前記真空ラインから外
されるまで熱源によって軟化される。前記真空ラインは、機械式回転ポンプやア
スピレータ等の従来手段によって維持される。この真空シールされたアンプルは
、オプションとして、制御された破損を容易にするべく、特定のポイントに於い
て、刻み目を付けられるか、その他の方法で弱く形成される。
【００３４】 例１ 下記の化合物は、本発明の酵素抑制成分としてそれぞれ有効である。これら個
々の酵素抑制成分の概略有効濃度も提供されている。 番号 化合物 濃度 １． ２−デオキシグルコース １０ｍＭ ２． ロテノン １−５ｍＭ ３． 還元型グルタチオン（ＧＳＨ） １ｍＭ ４． オクタオエート（ｏｃｔａｏａｔｅ） ０．５ｍＭ ５． β−ＮＡＤＨ １．０ｍＭ ６． 過酸化水素Ｈ2Ｏ2及びＦｅ+++ それぞれ１．０ｍＭ ７． ヨードアセテート １ｍＭ ８． ヨードアセトアミド １ｍＭ ９． 可溶性シアニド １ｍＭ １０．金属アルミニウム １ｍＭ １１．クロルヘキシジン ５ｍＭ １２．可溶性アジド ０．５ｍＭ １３．ブチルパラベン ５ｍＭ １４．シクロヘキシルアデノシン ５ｍＭ １５．アルファ−シアノ−４− ヒドロキシシンナマート １ｍＭ １６．アルファ−シアノ−ベータ （１−フェニルインドール−３−イル） アクリレート １ｍＭ １７．グリセロール １ｍＭ １８．パラコート １ｍＭ １９．マンノヘプツロース １ｍＭ ２０．３−ブロモピルベート ０．５ｍＭ ２１．グルコース１．６−ビスホスフェート １ｍＭ ２２．チバクロン・ブルー３Ｇ−Ａ １ｍＭ ２３．３−デオキシグルコソン （３−ｄｅｏｘｙｈｇｌｕｃｏｓｏｎｅ） （３−ＤＧ） １ｍＭ ２４．アクチノマイシンＤ １ｍＭ ２５．シクロヘキシミド １ｍＭ ２６．クエン酸マグネシウム １ｍＭ ２７．オキサラート １ｍＭ ２８．グルタマート １ｍＭ ２９．可溶性フッ化物及びニトロプルシド ４ｍＭ
【００３５】 例２ １リットルの殺菌脱イオン水に、下記の化合物を添加して体液の保存に適した
溶液濃度を得た。２．ｍＭのＮａＣｌ，０．３５ｍＭのＫＣｌ，０．０７ｍのＣ
ａＣｌ2，０．１ｍＭのＣａＳＯ4，０．１２ｍＭのＮａ2ＰＯ4，２３ｍｇのクレ
アチン、３００ｍｇの尿素、３ｍｇの乳酸、及び０．５ｍｇのウシ血清アルブミ
ン。この溶液を、ＥＤＴＡ・２ナトリウム塩を使用してｐＨ７．１に緩衝した。
例１の酵素抑制剤であるヨードアセテートを、１．３ｍＭの濃度になるように添
加した。
【００３６】 例３ 例２の標本溶液１５．０ｍｌを、シール可能な蓋を備えた２オンスの目盛り付
き標本カップに入れた。被験者はこの標本カップ中に唾液を吐いた。標本溶液と
唾液との総量は１７ｍｌであった。次に、１００マイクロリットル（０．１ｍｌ
）を分析し、これによって得られた値を、４４．８の係数で積算して元の血液サ
ンプル中の血液アルコール濃度ｍｇ／ｄｌを推定した。この増倍係数は、唾液の
エチルアルコール濃度が被験者の同時ＢＡＬの１．１３−１．１５倍であること
を考慮している。前記アリコットを、同時抽出血液サンプルと同様、従来のガス
クロマトグラフィー法によって分析した。前記血液サンプルに対して前記唾液サ
ンプルに基づくＢＡＬには７．１％の濃度誤差があった。前記標本溶液中に含ま
れる尿素は、前記定量分析用の標準として作用する。
【００３７】 例４ 例３に記載した方法を反復して、従来のガスクロマトグラフィー法によって、
アリコットのメチルアンフェタミンを分析した。被験者の血液と比較して、本発
明から得られたメチルアンフェタミンの唾液テストに基づくレベルには５−１１
％の誤差が観察された。
【００３８】 例５ 例３に記載した方法を反復して、従来のガスクロマトグラフィー法によって、
アリコットのカテコールアニン（ｃａｔｅｃｈｏｌａｎｉｎ）を分析した。被験
者の血液と比較して、本発明から得られたカテコールアニンの唾液テストに基づ
くレベルには５−９％の誤差が観察された。
【００３９】 例６ 例３に記載した方法を反復して、従来のガスクロマトグラフィー法によって、
アリコットのアヘン剤を分析した。被験者の血液と比較して、本発明から得られ
たアヘン剤又は代謝産物の唾液テストに基づくレベルには６−１２％の誤差が観
察された。
【００４０】 本発明は、その必須特徴の精神から離脱することなく、その他の具体的態様で
実施することができる。従って、本実施例は、すべての観点に於いて、例示的で
あり、非限定的なものと考慮されなければならず、本発明の範囲は、上記記載に
よってではなく添付の請求項によって示されるものであり、従って、これら請求
項の意味及び均等範囲内に起こる全ての改変も本発明の範囲に含まれるものと理
解される。
【図面の簡単な説明】
【図１】 本発明の標本カップの斜視図
【図２】 図１に図示された標本カップの細管の断面図
【手続補正書】特許協力条約第３４条補正の翻訳文提出書
【提出日】平成１１年１２月２０日（１９９９．１２．２０）
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正内容】
【特許請求の範囲】
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００２
【補正方法】変更
【補正内容】
【０００２】 背景 薬物及びアルコール乱用は、今日の社会に於いて一般的な問題であり、それら
に悩む人々を破滅させ、彼らに近い人々に悪影響を与えている。薬剤及びアルコ
ール乱用は、社会全体の問題ではあるが、雇用者（ｅｍｐｌｏｙｅｒ）は、特に
、それによる有害な影響を受けやすい。現在の職場に於いては、コストと欠勤怠
業を最小限にしながら高い品質と生産性を達成することを望む雇用者にとって、
集中した（ｆｏｃｕｓｅｄ）効率的な従業員（ｅｍｐｌｏｙｅｅ）は必須である
。従業員が高い生産性を達成、維持するためには、各従業員が健康でかつ機敏で
あることが重要である。不健康な、又は、注意力の欠如した従業員は、効率を低
下させ、更に、自分自身や他の従業員が怪我をする可能性を増大させるかもしれ
ない。生産性と品質の低下、医療コストの増大、長期乱用の可能性は、従業員が
薬物又はアルコールを乱用する時に、雇用者が遭遇する可能性のある三つの問題
に過ぎない。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００９
【補正方法】変更
【補正内容】
【０００９】 好適実施例の説明 一般的に多くの親水性化合物、特にアルコールは、一旦、胃管から血流内に吸
収されると、体の全体水分と均一に混合される。本発明の目的の為に、親水性化
合物とは、体プラズマ（ｂｏｄｙ ｐｌａｓｍａ）中に見られる物質として定義
される。この説明は、エタノール含有量の測定の為に唾液サンプルを保存するた
めの方法と組成物とを詳述するものではあるが、本発明は、実質細胞（ｐａｒｅ
ｎｃｈｙｍａ）によって吸収、排出されるその他の親水性化合物の測定のために
有効であると理解される。これらその他の化合物としては、具体的には、タンパ
ク質、ムチン、マリファナ、アヘン剤、コカイン、カンニビノイド（ｃａｎｎｉ
ｂｉｎｏｉｄｓ）、それらの代謝産物、カテコールアミン、及びカテコールアミ
ン誘導体が含まれる。脂肪組織には、赤血球等の脂質膜によって囲まれた組織又
は組織部分がある。親水性化合物は、そのような組織に入るが、その脂肪にでは
なく、むしろその組織に含まれる水分中に入る。従って、たとえばアルコールは
、数回の循環後に於いて、男性の場合には約０．６０−０．６８リットル／ｋｇ
、女性の場合には約０．５２−０．５４リットル／ｋｇの量で、全量が存在する
。体の水分中に一旦入ると、アルコールは、この量の水の水分中に分散され、新
陳代謝、排出、分配及び排出制限を受ける。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３５
【補正方法】変更
【補正内容】
【００３５】 例２ １リットルの殺菌脱イオン水に、下記の化合物を添加して体液の保存に適した
溶液濃度を得た。２．０ｍＭのＮａＣｌ，０．３５ｍＭのＫＣｌ，０．０７ｍの
ＣａＣｌ2，０．１ｍＭのＣａＳＯ4，０．１２ｍＭのＮａ2ＰＯ4，２３ｍｇのク
レアチン、３００ｍｇの尿素、３ｍｇの乳酸、及び０．５ｍｇのウシ血清アルブ
ミン。この溶液を、ＥＤＴＡ・２ナトリウム塩を使用してｐＨ７．１に緩衝した
。例１の酵素抑制ヨードアセテートを、１．３ｍＭの濃度になるように添加した
。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３８
【補正方法】変更
【補正内容】
【００３８】 例５ 例３に記載した方法を反復して、従来のガスクロマトグラフィー法によって、
アリコットのカテコールアミン（ｃａｔｅｃｈｏｌａｍｉｎｅ）を分析した。被
験者の血液と比較して、本発明から得られたカテコールアミンの唾液テストに基
づくレベルには５−９％の誤差が観察された。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ) ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ， ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，Ｄ Ｋ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ， ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，Ｌ Ｖ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ， ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，Ｕ Ｚ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ

Claims (25)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 親水性化合物のその後の分析のために、唾液サンプルを直接
    に収集し保存するための分析サンプル収集キットであって、以下を有する、 ａ）水中で所定量に希釈すると、正常な生理体液のオスマリティ（ｏｓｍａｌ
    ｉｔｙ）を有する溶液を得るイオン性溶質、そして ｂ）前記親水性化合物を基質として利用可能な酵素の酵素抑制剤であって、前
    記酵素は前記唾液サンプル中に存在する。
  2. 【請求項２】 請求項１のキットであって、前記イオン性溶質は、少なくと
    も正常な体液の構成濃度を有する塩及びタンパク質マトリクスである。
  3. 【請求項３】 請求項２のキットであって、更に、前記溶液を、前記唾液サ
    ンプルの導入後に、ｐＨ７−８の所定値に維持する緩衝液を有する。
  4. 【請求項４】 請求項２のキットであって、前記親水性化合物はエタノール
    であり、前記酵素はアルコール脱水素酵素である。
  5. 【請求項５】 請求項２のキットであって、前記体液はプラズマ又は尿であ
    る。
  6. 【請求項６】 請求項１のキットであって、前記親水性化合物は、エタノー
    ル、タンパク質、マリファナ、マリファナ代謝産物、アヘン剤、アヘン剤代謝産
    物、カンニビノイド（ｃａｎｎｉｂｉｎｏｉｄｓ）、カンニビノイド代謝産物、
    コカイン、コカイン代謝産物、カテコールアニン誘導体及びその代謝産物からな
    るグループから選択される。
  7. 【請求項７】 請求項２のキットであって、前記塩及びタンパク質マトリク
    スは、重炭酸塩、カルシウム、塩化物、燐酸塩、カリウム、ナトリウム、硫酸塩
    、亜硫酸塩,アルブミン、アミノ酸、ビリルビン、ヌクレオチド、ヌクレオシド 、尿素、クレアチン、クエン酸塩、蟻酸塩、及び乳酸塩からなるグループから選
    択される物質を含む。
  8. 【請求項８】 請求項１のキットであって、前記酵素抑制剤は、２−デオキ
    シグルコース、ロテノン、還元型グルタチオン（ＧＳＨ）、オクタオエート（ｏ
    ｃｔａｏａｔｅ）、β−ＮＡＤＨ、過酸化水素Ｈ2Ｏ2及びＦｅ+++、ヨードアセ テート、ヨードアセトアミド、可溶性シアニド、金属アルミニウム、クロルヘキ
    シジン、可溶性アジド、ブチルパラベン、シクロヘキシルアデノシン、アルファ
    −シアノ−４−ヒドロキシシンナマート、アルファ−シアノ−ベータ（１−フェ
    ニルインドール−３−イル）アクリレート、グリセロール、パラコート、マンノ
    ヘプツロース、３−ブロモピルビン酸塩、グルコース１，６−ビスホスフェート
    、チバクロン・ブルー３Ｇ−Ａ、３−デオキシグルコソン（３−ｄｅｏｘｙｈｇ
    ｌｕｃｏｓｏｎｅ）（３−ＤＧ）、アクチノマイシンＤ、シクロヘキシミド、ク
    エン酸２マグネシウム、オキサラート、グルタマート、可溶性フッ化物及びニト
    ロプルシドからなるグループから選択される。
  9. 【請求項９】 請求項６のキットであって、前記酵素抑制剤は、グリコリシ
    ス経路反応を阻害する作用を有する。
  10. 【請求項１０】 請求項１のキットであって、更に、約０．１−１０モル％
    の濃度で存在する殺細菌剤を有する。
  11. 【請求項１１】 請求項１のキットであって、更に、約０．１−１０モル％
    の濃度で存在する殺菌剤を有する。
  12. 【請求項１２】 体プラズマ中の化合物の存在を測定する方法であって、以
    下の工程を有する、 ａ）唾液サンプルを、第１位置に於いて、実質的にｐＨ緩衝生理食塩水と酵素
    抑制剤とを含む測定水溶液を収納した標本カップ中に直接に収集し、 ｂ）こぼれること（ｓｐｌｌａｇｅ）と不正変更に備えて、前記標本カップを
    シールし、 ｃ）前記標本カップを第２位置に搬送し、そして ｄ）前記第２位置に於いて、前記標本の前記化合物を分析する。
  13. 【請求項１３】 請求項１２の方法であって、 前記化合物は、エタノール、タンパク質、マリファナ、マリファナ代謝産物、
    アヘン剤、アヘン剤代謝産物、カンニビノイド（ｃａｎｎｉｂｉｎｏｉｄｓ）、
    カンニビノイド代謝産物、コカイン、コカイン代謝産物、カテコールアニン誘導
    体及びその代謝産物からなるグループから選択される。
  14. 【請求項１４】 請求項１２の方法であって、前記化合物はエタノールであ
    る。
  15. 【請求項１５】 請求項１２の方法であって、前記測定水溶液は、１０−４
    ０ミリリットルの量を有する。
  16. 【請求項１６】 請求項１２の方法であって、前記測定溶液は、更に、実質
    的に、体液組成物を模倣する塩及びタンパク質マトリクスからなる。
  17. 【請求項１７】 請求項１２の方法であって、前記マトリクスは、定量分析
    標準である。
  18. 【請求項１８】 請求項１２の方法であって、前記測定溶液は、更に、実質
    的に殺菌剤を含む。
  19. 【請求項１９】 請求項１２の方法であって、前記測定溶液は、更に、実質
    的に殺細菌剤を含む。
  20. 【請求項２０】 唾液中の親水性化合物の定性検出及び定量分析のための唾
    液サンプル収集キットであって、以下を有する、 ａ）水中で所定量に希釈すると、正常な生理体液のオスマリティ（ｏｓｍａｌ
    ｉｔｙ）を有する溶液を得るイオン性溶質、そして ｂ）前記親水性化合物を基質として利用可能な酵素の酵素抑制剤であって、前
    記酵素は前記唾液サンプル中に存在する、 ｃ）前記溶液と前記抑制剤とを収納する標本ボトル、前記ボトルは、それから
    延出する、圧縮可能で、光透過性の毛細管を有し、該毛細管は前記溶液によって
    カバーされる開口部と、融合遠端部とを有する、 ｄ）前記毛細管内にフィットするように構成されたアンプル、前記アンプルは
    １気圧以下の内圧を有する、 ｅ）前記親水性化合物からそれを基質として反応物を生成するように構成され
    た酵素、前記酵素は前記アンプル中に含まれている、そして ｆ）前記酵素に近接して配置されて、前記反応物と酸化還元カップリングする
    ための比色分析指示薬システムであって、前記比色分析指示薬システムは前記ア
    ンプル中に含まれている。
  21. 【請求項２１】 請求項２０のキットであって、前記標本ボトルは、熱可塑
    性物質により構成される。
  22. 【請求項２２】 請求項２０のキットであって、更に膨張可能プラグを有し
    、該プラグは前記アンプル内に収納されている。
  23. 【請求項２３】 請求項２０のキットであって、前記イオン性溶質は、少な
    くとも正常な体液の構成濃度を有する塩及びタンパク質マトリクスである。
  24. 【請求項２４】 請求項２０のキットであって、前記親水性化合物はエタノ
    ールであり、前記酵素はアルコール脱水素酵素及びアルコールオキシダーゼ／ペ
    ルオキシダーゼから成るグループから選択される。
  25. 【請求項２５】 請求項２４のキットであって、前記指示薬システムは、還
    元状態でニトロブルーテトラゾリウムと反応するＮＡＤＰである。
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