JP2001517075A - 組換え血管内皮細胞増殖因子d(vegf―d) - Google Patents
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Abstract
Description
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1. 配列番号3,配列番号5,配列番号8,または配列番号9に示すアミノ酸 配列に実質的に相当するアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする核酸配 列からなる単離核酸分子であって、前記ポリペプチドが、血管透過性または内皮 細胞の増殖を刺激する能力を有するか、または、それらのフラグメントまたはア ナログが、血管新生、血管透過性、内皮細胞増殖、分化、遊走もしくは生存から なるグループから選択される少なくとも一つの生物活性を刺激する能力を有する か、あるいは内皮細胞に結合する能力を有するが少なくとも一つの前記生物活性 を刺激する能力を有さない、配列番号3,配列番号5,配列番号8,または配列 番号9に示すアミノ酸配列に実質的に相当するアミノ酸配列を有するポリペプチ ドをコードする核酸配列からなる単離核酸分子。 2. 前記核酸分子がアミノ酸配列、 ドする核酸配列を含む、請求項1の核酸分子。 3. 前記内皮細胞が血管内皮細胞およびリンパ内皮細胞からなるグループから 選択される、請求項1の核酸分子。 4. ゲノムDNAである、請求項1の核酸分子。 5. cDNAである、請求項1の核酸分子。 6. 配列番号1,配列番号4,配列番号6,配列番号7の核酸配列、または、 ストリンジェントな条件下で前述の配列の一つとハイブリダイズするDNA配列 を有する、請求項5の核酸分子。 7. 配列番号4の核酸配列を有する、請求項6の核酸分子。 8. 血管透過性または内皮細胞の増殖を刺激する能力を有するポリペプチドを コードする、請求項1〜7のいずれかの核酸分子。 9. 配列番号3の64から172のアミノ酸残基、または、配列番号5の93 から201のアミノ酸残基を有するポリペプチドをコードする、請求項1の核酸 分子。 10.前記ポリペプチドが、更にアフィニティータグペプチド配列を有する、請 求項9の核酸分子。 11.内皮細胞に結合する能力を有するが内皮細胞の増殖を刺激する能力を有さ ないポリペプチドをコードする、請求項1〜7のいずれかの核酸分子。 12.前記内皮細胞が血管内皮細胞およびリンパ内皮細胞からなるグループから 選択される、請求項11の核酸分子。 13.前記核酸分子がヒトDNA分子である、請求項1の核酸分子。 14.請求項1〜13のいずれかの核酸を有するベクター。 15.請求項14のベクターでトランスフォームまたはトランスフォームされた宿 主細胞。 16.配列番号3,配列番号5,配列番号8,または配列番号9に示すアミノ酸 配列に実質的に相当するアミノ酸配列を有する単離ポリペプチドであって、前記 ポリペプチドが、血管透過性または内皮細胞の増殖を刺激する能力を有するか、 または、それらのフラグメントまたはアナログが、細胞増殖、細胞分化、細胞遊 走、細胞生存、および血管透過性からなるグループから選択される少なくとも一 つの内皮細胞生物活性を刺激する能力を有するか、あるいは内皮細胞に結合する 能力を有するが 少なくとも一つの前記生物活性を刺激する能力を有さない、配列番号3,配列番 号5,配列番号8,または配列番号9に示すアミノ酸配列に実質的に相当するア ミノ酸配列を有する単離ポリペプチド。 17.前記ポリペプチドが、アミノ酸配列、 る、請求項16のポリペプチド。 18.前記内皮細胞が血管内皮細胞およびリンパ内皮細胞からなるグループから 選択される、請求項16のポリペプチド。 19.配列番号3または配列番号5に実質的に相当するアミノ酸配列を有する、 請求項16のポリペプチド。 20.配列番号5に実質的に相当するアミノ酸配列を有する、請求項19のポリ ペプチド。 21.内皮細胞の増殖を刺激する能力を有する、請求項16〜20のいずれかの ポリペプチド。 22.内皮細胞の分化を誘導する能力を有する、請求項16〜20のいずれかの ポリペプチド。 23.血管透過性を誘導する能力を有する、請求項16〜20のいずれかのポリ ペプチド。 24.配列番号3の64から172、または、配列番号5の93から201、の アミノ酸残基を有する、請求項16のポリペプチド。 25.更にアフィニティータグペプチド配列を有する、請求項24のポリペプチ ド。 26.内皮細胞に結合する能力を有するが内皮細胞の増殖を刺激する能力を有さ ない、請求項16または17のポリペプチド。 27.前記内皮細胞が血管内皮細胞およびリンパ内皮細胞からなるグループから 選択される、請求項26のポリペプチド。 28.前記ポリペプチドがヒトタンパク質である、請求項16〜20のいずれか のポリペプチド。 29.請求項16〜28のいずれかのポリペプチドと特異的に反応性を有する抗 体。 30.前記抗体がポリクローナル抗体である、請求項29の抗体。 31.前記抗体がモノクローナル抗体である、請求項29の抗体。 32.前記抗体が検出可能なラベルで標識されている、請求項29の抗体。 33.請求項16のポリペプチドを作る方法であって、前記方法が以下の工程: 前記ポリペプチドをコードする核酸配列が発現するように、プロモーター配列 に操作可能に結合した前記ポリペプチドをコードする核酸配列を有するベクター でトランスフォームまたはトランスフェクトされた宿主細胞を培養する工程;そ して 前記宿主細胞から、または前記宿主細胞が培養される増殖培地から前記ポリペ プチドを単離する工程、 を有する請求項16のポリペプチドを作る方法。 34.VEGF−Dを単離する方法であって、VEGF−Dを発現する細胞を、 細胞からのVEGF−Dの放出を促進するためにヘパリンに曝す工程と、そして その ようにして放出されたVEGF−Dを精製する工程とを有する、VEGF−Dを 単離する方法。 35.請求項1〜9のいずれかの核酸分子によってコードされるポリペプチドを 発現する能力のあるベクターを作る方法であって、前記方法が、前記核酸分子が 少なくとも一つのプロモーターと作用するように結合する位置において、前記核 酸分子をベクターに挿入する工程を有する、請求項1〜9のいずれかの核酸分子 によってコードされるポリペプチドを発現する能力のあるベクターを作る方法。 36.アンチセンスヌクレオチド配列を有するベクターであって、前記アンチセ ンスヌクレオチド配列が、VEGF−DゲノムDNA配列、またはVEGF−D RNA配列、またはVEGF−DをコードするcDNA配列、あるいは、血管 透過性、内皮細胞の増殖および内皮細胞分化から選択される少なくとも一つの生 理活性を促進する、それらのフラグメントまたはアナログの、少なくとも一部に 対して相補的であって、前記ベクターが前記少なくとも一つの生理活性を阻害す るために使用可能である、アンチセンスヌクレオチド配列を有するベクター。 37.内皮細胞を、内皮細胞の増殖を刺激するのに有効な量の請求項16のポリ ペプチドに接触させる工程を有する、内皮細胞の増殖を刺激する方法。 38.前記内皮細胞が、血管内皮細胞およびリンパ内皮細胞からなるグループか ら選択される、請求項37の方法。 39.内皮細胞の増殖、内皮細胞分化および血管透過性から選択される少なくと も一つの生理活性をイン・ヴィヴォで哺乳類において刺激する方法であって、前 記方法が、前記哺乳類に生理活性を刺激するのに有効な量の、前記少なくとも一 つの生理活性を刺激する能力を有する請求項16のポリペプチドを投与する工程 を有する、内皮細胞の増殖、内皮細胞分化および血管透過性から選択される少な くとも一つの生理活性をイン・ヴィヴォで哺乳類において刺激する方法。 40.前記ポリペプチドが、配列番号3の64から172のアミノ酸残基、また は、配列番号5の93から201のアミノ酸残基を有する、請求項39の方法。 41.リンパ管内皮細胞の増殖が刺激される、請求項39の方法。 42.哺乳類における血管新生および新血管新生から選択される少なくとも一つ の生理活性を刺激する方法であって、前記方法が、前記哺乳類に、血管新生また は新血管新生を刺激するのに有効な量の、請求項16のポリペプチドを投与する 工程を有し、前記ポリペプチドが内皮細胞の増殖を刺激する能力を有する、哺乳 類における血管新生および新血管新生から選択される少なくとも一つの生理活性 を刺激する方法。 43.前記ポリペプチドが、配列番号3の64から172のアミノ酸残基、また は、配列番号5の93から201のアミノ酸残基を有する、請求項42の方法。 44.前記ポリペプチドが、更にアフィニティータグペプチド配列を有する、請 求項43の方法。 45.更に、VEGF,VEGF−B,VEGF−C,P1GF,PDGF,F GFおよびヘパリンからなるグループから選択される少なくとも一つの物質を同 時投与する工程を有する、請求項32の方法。 46.哺乳類における血管新生および新血管新生から選択される生理活性を阻害 する方法であって、前記方法が、前記哺乳類に、血管新生または新血管新生を阻 害するのに有効な量の、VEGF−Dのアンタゴニストを投与する工程を有する 、哺乳類における血管新生および新血管新生から選択される生理活性を阻害する 方法。 47.前記VEGF−Dのアンタゴニストが、VEGF−Dに対して特異的な抗 体 を含む、請求項46の方法。 48.前記VEGF−Dのアンタゴニストが、内皮細胞に結合するが、内皮細胞 の増殖、内皮細胞分化および血管透過性から選択される少なくとも一つの生物活 性を刺激する能力を有さない、ポリペプチドを含む、請求項46の方法。 49.前記内皮細胞が、血管内皮細胞およびリンパ内皮細胞からなるグループか ら選択される、請求項48の方法。 50.哺乳類においてVEGF−Dの発現を阻害する方法であって、VEGF− Dを発現する標的細胞を、請求項36のベクターでトランスフォームする工程を 有する、哺乳類においてVEGF−Dの発現を阻害する方法。 51.請求項16〜24のいずれかのポリペプチド、および薬学で許容されるキ ャリアまたはアジュバントを有する、医薬組成物。 52.更に、VEGF,VEGF−B,VEGF−C,PlGF,PDGF,お よびヘパリンからなるグループから選択される少なくとも一つの物質を有する、 請求項51の医薬組成物。 53.請求項29〜32のいずれかの抗体、および薬学で許容されるキャリアま たはアジュバントを有する、医薬組成物。 54.前記抗体がモノクローナル抗体である、請求項53の医薬組成物。 55.請求項16〜24のいずれかの第一のポリペプチド、および第二のポリペ プチドからなる、タンパク質ダイマー。 56.前記タンパク質ダイマーがホモダイマーであり、前記第二のポリペプチド が、 前記第一のポリペプチドと同じである、請求項55のタンパク質ダイマー。 57.前記タンパク質ダイマーがヘテロダイマーであり、前記第二のポリペプチ ドが、VEGF,VEGF−B,VEGF−C,PlGFおよびPDGFから選 択される、請求項55のタンパク質ダイマー。 58.生物試料中におけるVEGF−Dを検出する方法であって、前記試料を、 VEGF−Dに結合する能力のある試薬に接触させる工程と、前記試薬の結合の 発生を検出する工程とを有する、生物試料中におけるVEGF−Dを検出する方 法。 59.前記試薬が請求項29〜32のいずれかの抗体を含む、請求項58の方法 。 60.哺乳類における血管透過性を変調する方法であって、前記方法が、前記哺 乳類に血管透過性を変調するのに有効な量の、請求項16〜24のいずれかのポ リペプチド、または請求項29〜32のいずれかの抗体を投与する工程を有する 、哺乳類における血管透過性を変調する方法。 61.内皮細胞の増殖を刺激する能力を有する、請求項16のポリペプチドを、 前記哺乳類に投与する工程を有する、請求項60の方法。 62.内皮細胞に結合する能力を有するが、内皮細胞の増殖を刺激する能力を有 さない、請求項16のポリペプチドを、前記哺乳類に投与する工程を有する、請 求項60の方法。 63.VEGF受容体2の活性化方法であって、前記受容体を有する細胞を、受 容体を活性化するのに有効な用量のVEGF−Dに曝す工程を有する、VEGF 受容体2の活性化方法。 64.VEGF受容体3の活性化方法であって、前記受容体を有する細胞を、受 容 体を活性化するのに有効な用量のVEGF−Dに曝す工程を有する、VEGF受 容体3の活性化方法。 65.前記方法が、イン・ヴィヴォで行われる、請求項63または64の方法。 66.前記方法が、イン・ヴィトロで行われる、請求項63または64の方法。 67.VEGF−Dに特異的に結合する試薬と、前記試薬の結合を検出するため の手段を有する、診断または予知のテストキット。 68.前記特異的に結合する試薬が、請求項29〜32のいずれかの抗体を含む 、請求項67のテストキット。 69.ポリメラーゼに作用するように結合する、VEGF−D DNAに対して 特異的なプライマーの対を有する、診断または予知のテストキットであって、前 記ポリメラーゼがDNAサンプルからのVEGF−D DNAを選択的に増幅す ることが可能となる、診断または予知のテストキット。 70.試験対象においてVEGF−D遺伝子構造の異常を検出する方法であって 、以下の工程: 前記試験対象からDNAサンプルを提供する工程; 前記サンプルを、ポリメラーゼに作用するように結合した、VEGF−D D NAに対して特異的な、プライマーのセットに接触させ、そして前記サンプルか らのVEGF−D DNAをポリメラーゼ連鎖反応によって選択的に増幅させる 工程;および 前記サンプルからの増幅されたVEGF−D DNAのヌクレオチド配列を、 配列番号1または配列番号4に示すヌクレオチド配列と比較する工程、 を有する、試験対象においてVEGF−D遺伝子構造の異常を検出する方法。 71.VEGF−Dのアンタゴニストであって、血管透過性、内皮細胞の増殖お よび内皮細胞分化から選択される、VEGF−Dによって誘導される少なくとも 一つの生物活性を阻害する能力を有し、前記アンタゴニストがVEGF−Dまた はVEGF−D受容体に結合するが、VEGF−Dよりも前記少なくとも一つの 生物活性を刺激する能力が弱い(less able)、VEGF−Dのアンタゴニスト。 72.前記アンタゴニストが、VEGF−Dに選択的に結合する抗体を含む、請 求項71のVEGF−Dのアンタゴニスト。 73.前記抗体がモノクローナル抗体である、請求項72のVEGF−Dのアン タゴニスト。 74.前記アンタゴニストが、VEGF−D受容体に結合するが、前記少なくと も一つの生物活性を刺激する能力が弱い、VEGF−Dポリペプチドのフラグメ ントまたはアナログを含む、請求項71のVEGF−Dのアンタゴニスト。 75.哺乳類における肺の血液循環および/またはガス交換を改善する方法であ って、前記方法が、前記哺乳類に、血液循環および/またはガス交換を改善する のに有効な量の、VEGF−Dを投与する工程を有する、哺乳類における肺の血 液循環および/またはガス交換を改善する方法。 76.哺乳類における、血管透過性の増加による心臓および/または肺の液体貯 留を治療する方法であって、前記方法が前記哺乳類に血管透過性を減少させるの に有効な量の、VEGF−Dのアンタゴニストを投与する工程を有する、哺乳類 における、血管透過性の増加による心臓および/または肺の液体貯留を治療する 方法。 77.腸の吸収不良症候群を患う患者における腸の吸収不良症候群を治療する方 法であって、前記方法が前記患者に腸の血液循環および/または血管透過性を増 加させるのに有効な量の、VEGF−Dを投与する工程を有する、腸の吸収不良 症候群 を患う患者における腸の吸収不良症候群を治療する方法。
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