JP2001514502A

JP2001514502A - ケモカインドメインを含むキメラポリペプチド

Info

Publication number: JP2001514502A
Application number: JP53794298A
Authority: JP
Inventors: ハーマン，スティーブン・エイチ; スワンバーグ，スティーブン・エル
Original assignee: ジェネティックス・インスチチュート・インコーポレーテッド
Priority date: 1997-02-28
Filing date: 1998-02-27
Publication date: 2001-09-11
Also published as: AU6444098A; US7396911B2; US6730296B1; WO1998038212A2; AU735358B2; US20070160570A1; US20090148507A1; EP1012309A2; WO1998038212A3; US6100387A

Abstract

(57)【要約】本発明は、異種ポリペプチドに共有結合したケモカインポリペプチドをコードする配列を含むキメラＤＮＡ分子、それによりコードされるキメラポリペプチド、ならびにそれらの使用方法を提供する。

Description

【発明の詳細な説明】ケモカインドメインを含むキメラポリペプチド発明の背景一般的には、本発明は、ケモカインポリペプチドドメインを含むキメラポリペプチドに関する。より詳細には、本発明は、異種ポリペプチドに共有結合したケモカインポリペプチドをコードする組み換えポリヌクレオチド配列の宿主細胞中での発現、ならびにケモカイン受容体同定のための研究ツール、ワクチンアジュバント、移動性細胞の化学走性補充のための作用剤、アンギオテンシンの刺激または阻害のための作用剤、自己免疫性疾患および炎症に対する作用剤、およびある種の受容体へのＨＩＶの結合を阻害する作用剤としてのかかるキメラポリペプチドの使用に関する。ケモカイン（または化学走性サイトカイン）は、移動性細胞を化学的に誘引しうるサイトカイン分子の１のクラスであり、炎症における細胞補充および活性化に関与している。一般的には、ケモカインは、サイトカインのごとき他の小型蛋白と同様、８〜１０ｋＤａの範囲の分子量を有しており、インビボにおいて急激に不活性化され、これらの蛋白は比較的短い半減期を有すると考えられている。大部分のケモカインは、これらの蛋白のアミノ末端付近の２個の非常に保存されたシステインアミノ酸の間隔に基づいて２つのサブグループＣＸＣまたはＣＣに分類できる。ＣＸＣおよびＣＣサブグループにおいて、アミノ酸配列類似性に基づいて、サモカインはさらに関連ファミリーに分類される。ＣＸＣケモカインファミリーは、ＩＬ−１０およびＭｉｇファミリー；ＧＲＯα、ＧＲＯβ、およびＧＲＯγファミリー；インターロイキン−８（ＩＬ−８）ファミリー；ならびにＰＦ４ファミリーを包含する。ＣＣケモカインファミリーは、単球化学誘引蛋白（ＭＣＰ）ファミリー；マクロファージ抑制蛋白−１α（ＭＩＰ−１α）、マクロファージ抑制蛋白−１β(ＭＩＰ−１β)、およびランテス(regulated on acti vation normal T cell expressed（ＲＡＮＴＥＳ））；ならびにリンホタクチンファミリーを包含する。ケモカインファミリーのケモカイン幹細胞由来因子１α（ＳＤＦ−１α）および幹細胞由来因子１β（ＳＤＦ−１β）は、アミノ酸配列類似性によりＣＸＣおよびＣＣケモカインサブグループに対してほぼ同等に関連している。ケモカインファミリーの個々のメンバーは少なくとも１つのケモカイン受容体に結合することが知られており、一般的には、ＣＸＣケモカインはＣＸＣＲクラスの受容体のメンバーに結合し、ＣＣケモカインは、ＣＣＲクラスの受容体のメンバーに結合する。例えば、ＳＤＦ−１αはＣＸＣＲ受容体フシン／ＣＸＣＲ４のリガンドであることが知られており、ＭＩＰ−１αはＣＣＲ受容体ＣＣＲ１、ＣＣＲ４およびＣＣＲ５に結合する。ケモカイングラジエントの存在は、リンパ球、白血球および抗原提示細胞（ＡＰＣ）のごとき移動性細胞（自己免疫反応、炎症または正常な免疫応答に関与している可能性があり、あるいは血管新生または他の細胞プロセスを刺激または抑制する他の細胞間因子を放出しうる）を誘引する。例えば、自己免疫性疾患においては、抗原性自己蛋白を産生している器官中の自己蛋白に対して応答しうるリンパ球の浸潤または補充が必要とされる。炎症性のアテローム性傷害は、一部には、当該部位に補充された白血球による血管コンパートメントの浸潤による。免疫応答を誘発するためには、抗原性蛋白および糖蛋白がＢリンパ球表面に結合して抗体産生を刺激しなければならず、これらが抗原提示細胞により捕獲され、処理され、Ｔリンパ球に対して提示されてＴリンパ球応答を媒介しなければならない。特定部位に対するケモカイングラジエントにより誘引される場合、ＩＰ１０またはＩＬ−８を分泌する移動性細胞は、当該部位における血管形成を抑制または刺激しうる。ケモカインを用いて、適当なケモカイン受容体を発現している移動性細胞に対する化学誘引グラジエントを確立させてもよく、あるいは存在している化学誘引性グラジエントを覆い隠してもよい。ケモカイン受容体は、ウイルス蛋白との相互作用のごとき、化学走性以外の機能にも関与している。ＨＩＶ−１は、細胞表面の特定蛋白に結合してこれらの細胞への侵入を有利なものとし、複製し、あるいは宿主ＤＮＡ中にのウイルス遺伝子を完成させる。Ｔリンパ球および他の細胞（抗原提示細胞を包含）上のＣＤ４蛋白は、ＨＩＶ−１ウイルスエンベロープ蛋白ｇｐ１２０に結合することが示されている。このことは、ｇｐ１２０のコンホーメーション変化を引き起こして、ｇｐ１２０およびおそらくＣＤ４の領域を露出させ、ついで、この領域がケモカイン受容体と結合すると考えられている。現在に至るまで、ＣＸＣＲ４（フシン（fusin ）としても知られる）、ＣＣＲ５、および他の数種のケモカイン受容体はＨＩＶ −１の共受容体として同定されている。ＨＩＶ−１の単球指向性（Ｍ−指向性）単離体は、細胞感染のためにＣＣＲ５との相互作用を必要とし、一方、Ｔリンパ球指向性（Ｔ−指向性）ＨＩＶ−１単離体は別の共受容体ＣＸＣＲ４を感染に必要とする。ＨＩＶ−１がＣＣＲ２およびＣＣＲ３のごとき他のＣＣＲ受容体を使用して、それらを発現する細胞への侵入を有利にすることを示すいくつかの証拠もある。ＨＩＶ−２単離体については、フシン／ＣＸＣＲ４単独のごときある種のケモカイン受容体が細胞への結合および細胞への侵入に必要な細胞表面蛋白を提供しうるように思われる。ＣＤ４およびフシン／ＣＸＣＲ４を発現している細胞に対するＨＩＶ−１感染は、フシン／ＣＸＣＲ４に結合する精製ＳＤＦ−１αの添加により大幅に抑制される。我々は、精製ＳＤＦ−１αの存在下、３７℃での短時間のプレインキュベーションにより、受容体が大幅にダウンレギュレーションされることを見いだした。ケモカイン−受容体相互作用を促進、変化または抑制する新しい組成物、ならびにそれらの使用方法に対する必要性が存在し続けている。発明の概要出願人は、初めて、ケモカインポリペプチドドメインを含むキメラポリペプチドをコードする新規キメラＤＮＡ分子を構築した。これらの構築物から発現されるキメラポリペプチドは、ケモライン受容体発現細胞との新規相互作用を包含する、新規特性を示した。１の具体例において、本発明は、キメラポリペプチドをコードする単離ポリヌクレオチドを含む組成物を提供し、キメラポリペプチドは、少なくとも１種の異種ポリペプチドに共有結合した少なくとも１種のケモカインポリペプチドを含む。好ましくは、ケモカインポリペプチドはＳＤＦ−１α、ＭＩＰ−１α、またはＭＩＰ −１βであるか、あるいはＳＤＦ−１α、ＭＩＰ−１α、またはＭＩＰ−１β由来のものである。好ましくは、異種ポリペプチドはＦｃポリペプチドである。もう１つの具体例は、キメラポリペプチドをコードする単離ポリペプチドを含む組成物を提供し、該組成物中において、異種ポリペプチドはケモカインポリペプチドのアミノ末端に、好ましくはリンカーポリペプチドにより共有結合している。もう１つの具体例は、キメラポリペプチドをコードする単離ポリヌクレオチドを含む組成物を提供し、該組成物中において、異種ポリペプチドは異種ポリペプチドはケモカインポリペプチドのカルボキシル末端に、好ましくはリンカーポリペプチドにより共有結合している。もう１つの具体例において、本発明は、キメラポリペプチドをコードする単離ポリヌクレオチドを含む組成物を提供し、該ポリヌクレオチドは：（ａ）配列番号：２のヌクレオチド１２からヌクレオチド１２１３までのヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｂ）配列番号：２のヌクレオチド６９からヌクレオチド１２１３までのヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｃ）配列番号：２のヌクレオチド７２からヌクレオチド１２１３までのヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｄ）配列番号：２のヌクレオチド７５からヌクレオチド１２１３までのヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｅ）配列番号：２のヌクレオチド配列のフラグメントを含むポリヌクレオチド；（ｆ）受託番号ＡＴＣＣ９８３３８として寄託されたクローンＳ１−３の全長蛋白コーディング配列のヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｇ）受託番号ＡＴＣＣ９８３３８として寄託されたクローンＳ１−３の成熟蛋白コーディング配列のヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｈ）配列番号：１のアミノ酸配列を含むキメラポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；（ｉ）配列番号：１のアミノ酸２０からアミノ酸３２８までのアミノ酸配列を含むキメラポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；（ｊ）配列番号：１のアミノ酸２２からアミノ酸３２８までのアミノ酸配列を含むキメラポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；（ｋ）配列番号：１のアミノ酸配列のフラグメントを含むキメラポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；（ｌ）上記（ａ）〜（ｋ）に示すポリヌクレオチドのいずれか１つに対して相捕的なヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；および（ｍ）上記（ａ）〜（ｌ）に示すポリヌクレオチドのいずれか１つの中のケモカインポリペプチドをコードする配列および異種ポリペプチドをコードする配列に、ストリンジェントな条件下で同時にハイブリダイゼーションしうるポリヌクレオチドからなる群より選択される。好ましくは、かかるポリヌクレオチドは、配列番号：２のヌクレオチド１２からヌクレオチド１２１３までのヌクレオチド配列;受託番号ＡＴＣＣ９８３３８として寄託されたクローンＳ１−３の全長蛋白コーディング配列のヌクレオチド配列；または受託番号ＡＴＣＣ９８３３８として寄託されたクローンＳ１−３の成熟蛋白コーディング配列のヌクレオチド配列を含む。さらなる具体例において、本発明は、キメラポリペプチドをコードする単離ポリヌクレオチドを含む組成物を提供し、該ポリヌクレオチドは：（ａ）配列番号：４のヌクレオチド１２からヌクレオチド１２０７までのヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｂ）配列番号：４のヌクレオチド６９からヌクレオチド１２０７までのヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｃ）配列番号:４のヌクレオチド配列のフラグメントを含むポリヌクレオチド；（ｄ）受託番号ＡＴＣＣ９８３３９として寄託されたクローンＳＫ２−２の全長蛋白コーディング配列のヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｅ）受託番号ＡＴＣＣ９８３３９として寄託されたクローンＳＫ２−２の成熟蛋白コーディング配列のヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｆ）配列番号：３のアミノ酸配列を含むキメラポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；（ｇ）配列番号：３のアミノ酸２０からアミノ酸２３６までのアミノ酸配列を含むキメラポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；（ｈ）配列番号：３のアミノ酸配列のフラグメントを含むキメラポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；（ｉ）上記（ａ）〜（ｈ）に示すポリヌクレオチドのいずれか１つに対して相捕的なヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；および（ｊ）上記（ａ）〜（ｉ）に示すポリヌクレオチドのいずれか１つの中のケモカインポリペプチドをコードする配列および異種ポリペプチドをコードする配列に、ストリンジェントな条件下で同時にハイブリダイゼーションしうるポリヌクレオチドからなる群より選択される。好ましくは、かかるポリヌクレオチドは、配列番号：４のヌクレオチド１２からヌクレオチド１２０７までのヌクレオチド配列;受託番号ＡＴＣＣ９８３３９として寄託されたクローンＳＫ２−２の全長蛋白コーディング配列のヌクレオチド配列；または受託番号ＡＴＣＣ９８３３９として寄託されたクローンＳＫ２− ２の成熟蛋白コーディング配列のヌクレオチド配列を含む。さらなる具体例において、本発明は、キメラポリペプチドをコードする単離ポリヌクレオチドを含む組成物を提供し、該ポリヌクレオチドは：（ａ）配列番号：６のヌクレオチド１５からヌクレオチド１２２５までのヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｂ）配列番号：６のヌクレオチド８１からヌクレオチド１２２５までのヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｃ）配列番号:６のヌクレオチド配列のフラグメントを含むポリヌクレオチド；（ｄ）受託番号ＡＴＣＣ９８３４１として寄託されたクローンＭＰ−１の全長蛋白コーディング配列のヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｅ）受託番号ＡＴＣＣ９８３４２として寄託されたクローンＭＰ−２の全長蛋白コーディング配列のヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｆ）受託番号ＡＴＣＣ９８３４０として寄託されたクローンＭＰ−６の全長蛋白コーディング配列のヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｇ）受託番号ＡＴＣＣ９８３４１として寄託されたクローンＭＰ−１の成熟蛋白コーディング配列のヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｈ）受託番号ＡＴＣＣ９８３４２として寄託されたクローンＭＰ−２の成熟蛋白コーディング配列のヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｉ）受託番号ＡＴＣＣ９８３４０として寄託されたクローンＭＰ−６の成熟蛋白コーディング配列のヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｊ）配列番号：５のアミノ酸配列を含むキメラポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；（ｋ）配列番号：５のアミノ酸２３からアミノ酸３３１までのアミノ酸配列を含むキメラポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；（ｌ）配列番号：５のアミノ酸配列のフラグメントを含むキメラポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；（ｍ）上記（ａ）〜（ｌ）に示すポリヌクレオチドのいずれか１つに対して相捕的なヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；および（ｎ）上記（ａ）〜（ｍ）に示すポリヌクレオチドのいずれか１つの中のケモカインポリペプチドをコードする配列および異種ポリペプチドをコードする配列に、ストリンジェントな条件下で同時にハイブリダイゼーションしうるポリヌクレオチドからなる群より選択される。好ましくは、かかるポリヌクレオチドは、配列番号：６のヌクレオチド１５からヌクレオチド１２２５までのヌクレオチド配列；受託番号ＡＴＣＣ９８３４１、ＡＴＣＣ９８３４２、およびＡＴＣＣ９８３４０としてそれぞれ寄託されたクローンＭＰ−１、ＭＰ−２、およびＭＰ−６の全長蛋白コーディング配列のヌクレオチド配列；または受託番号ＡＴＣＣ９８３４１、ＡＴＣＣ９８３４２、およびＡＴＣＣ９８３４０としてそれぞれ寄託されたクローンＭＰ−１、ＭＰ−２、およびＭＰ−６の成熟蛋白コーディング配列のヌクレオチド配列を含む。さらなる具体例において、本発明は、キメラポリペプチドをコードする単離ポリヌクレオチドを含む組成物を提供し、該ポリヌクレオチドは：（ａ）配列番号：８のヌクレオチド１６からヌクレオチド１２２６までのヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｂ）配列番号：８のヌクレオチド８５からヌクレオチド１２２６までのヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｃ）配列番号:８のヌクレオチド配列のフラグメントを含むポリヌクレオチド；（ｄ）受託番号ＡＴＣＣＸＸＸＸＸとして寄託されたクローンＭＰＢ−Ｘの全長蛋白コーディング配列のヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｅ）受託番号ＡＴＣＣＸＸＸＸＸとして寄託されたクローンＭＰＢ−Ｘの成熟蛋白コーディング配列のヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｆ）配列番号：７のアミノ酸配列を含むキメラポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；（ｇ）配列番号：７のアミノ酸２４からアミノ酸３３１までのアミノ酸配列を含むキメラポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；（ｈ）配列番号：７のアミノ酸配列のフラグメントを含むキメラポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；（ｉ）上記（ａ）〜（ｈ）に示すポリヌクレオチドのいずれか１つに対して相捕的なヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；および（ｊ）上記（ａ）〜（ｉ）に示すポリヌクレオチドのいずれか１つの中のケモカインポリペプチドをコードする配列および異種ポリペプチドをコードする配列に、ストリンジェントな条件下で同時にハイブリダイゼーションしうるポリヌクレオチドからなる群より選択される。好ましくは、かかるポリヌクレオチドは、配列番号：８のヌクレオチド１６からヌクレオチド１２２６までのヌクレオチド配列;受託番号ＡＴＣＣＸＸＸＸＸとして寄託されたクローンＭＰＢ−Ｘの全長蛋白コーディング配列のヌクレオチド配列；または受託番号ＡＴＣＣＸＸＸＸＸとして寄託されたクローンＭＰＢ−Ｘの成熟蛋白コーディング配列のヌクレオチド配列を含む。特定の好ましい具体例において、ポリヌクレオチドは、発現制御配列に作動可能に連結される。また本発明は、かかるポリヌクレオチド組成物で形質転換された宿主細胞、好ましくは哺乳動物細胞を提供する。（ａ）かかるポリヌクレオチド組成物で形質転換された宿主細胞の培養物を適当な培地中で増殖させ；ついで（ｂ）培養物から蛋白を精製することを含む、キメラポリペプチドの製造方法も提供される。かかる方法により製造されるポリペプチドも、本発明により提供される。好ましい具体例は、かかる方法により製造されるポリペプチドがその成熟形態であるものである。他の具体例において、本発明は、キメラポリペプチドを含む組成物を提供し、該キメラポリペプチドは、少なくとも１種の異種ポリペプチドに共有結合した少なくとも１種のケモカインポリペプチドを含む。好ましくは、ケモカインポリペプチドはＳＤＦ−１α、ＭＩＰ−１α、またはＭＩＰ−１βであるか、あるいはＳＤＦ−１α、ＭＩＰ−１α、またはＭＩＰ−１β由来のものである。好ましくは、異種ポリペプチドはＦｃポリペプチドである。さらなる具体例は、キメラポリペプチドを含む組成物を提供し、該組成物中において、異種ポリペプチドはケモカインポリペプチドのアミノ末端に、好ましくはリンカーポリペプチドにより共有結合している。もう１つの具体例は、キメラポリペプチドを含む組成物を提供し、該組成物中において、異種ポリペプチドはケモカインポリペプチドのカルボキシル末端に、好ましくはリンカーポリペプチドにより共有結合している。もう１つの具体例において、本発明は、キメラポリペプチドを含む組成物を提供し、該キメラポリペプチドは：（ａ）配列番号：１のアミノ酸配列；（ｂ）配列番号：１のアミノ酸２０からアミノ酸３２８までのアミノ酸配列；（ｃ）配列番号：１のアミノ酸２１からアミノ酸３２８までのアミノ酸配列；（ｄ）配列番号：１のアミノ酸２２からアミノ酸３２８までのアミノ酸配列；および（ｅ）配列番号：１のアミノ酸配列のフラグメントからなる群より選択されるアミノ酸配列を含む。好ましくは、かかるポリペプチドは配列番号：１のアミノ酸配列を含む。さらなる具体例において、本発明は、キメラポリペプチドを含む組成物を提供し、該キメラポリペプチドは：（ａ）配列番号：３のアミノ酸配列；（ｂ）配列番号：３のアミノ酸２０からアミノ酸３２６までのアミノ酸配列；および（ｃ）配列番号：３のアミノ酸配列のフラグメントからなる群より選択されるアミノ酸配列を含む。好ましくは、かかるポリペプチドは配列番号：３のアミノ酸配列を含む。さらなる具体例において、本発明は、キメラポリペプチドを含む組成物を提供し、該キメラポリペプチドは：（ａ）配列番号：５のアミノ酸配列；（ｂ）配列番号：５のアミノ酸２３からアミノ酸３３１までのアミノ酸配列；および（ｃ）配列番号：５のアミノ酸配列のフラグメントからなる群より選択されるアミノ酸配列を含む。好ましくは、かかるポリペプチドは配列番号：５のアミノ酸配列を含む。さらなる具体例において、本発明は、キメラポリペプチドを含む組成物を提供し、該キメラポリペプチドは：（ａ）配列番号：７のアミノ酸配列；（ｂ）配列番号：７のアミノ酸２４からアミノ酸３３１までのアミノ酸配列；および（ｃ）配列番号：７のアミノ酸配列のフラグメントからなる群より選択されるアミノ酸配列を含む。好ましくは、かかるポリペプチドは配列番号：７のアミノ酸配列を含む。本発明ポリペプチド組成物はさらに医薬上許容される担体を含んでいてもよい。かかるポリペプチドと特異的に反応する抗体を含む組成物も、本発明により提供される。本発明ポリペプチドおよび医薬上許容される担体を含む治療上有効量の組成物を投与することを含む、医学的状態の予防、治療または改善方法も提供される。また本発明は、（ａ）キメラポリペプチドを含む組成物を、相互作用につき試験すべき分子を含む組成物と混合し、第１の混合物を得て（該キメラポリペプチドは、少なくとも１種の異種ポリペプチドに共有結合した少なくとも１種のケモカインポリペプチドを含む）；（ｂ）第１の混合物を、インジケーター分子を含む組成物と混合し（その結果、インジケーター分子は第１の混合物により変化されうるものである）；ついで（ｃ）変化したインジケーター分子の存在を検出することを含む、キメラポリペプチドと相互作用しうる分子の同定方法を提供する。治療上有効量のキメラポリペプチドを含む少なくとも１の組成物を投与することを含む、生物の一領域に移動性細胞を誘引する方法も提供される。治療上有効量のキメラポリペプチドを含む少なくとも１の組成物を投与することを含む、炎症または自己免疫症状の予防、治療または改善方法も提供される。治療上有効量のキメラポリペプチドを含む少なくとも１の組成物を投与することを含む、抗原提示細胞活性の促進方法も提供され、該方法において、少なくとも１種のキメラポリペプチドは抗原分子を含んでいる。ワクチンおよび治療上有効量のキメラポリペプチドを含む少なくとも１の組成物を投与することを含む、免疫応答の誘導方法が提供される。少なくとも１種のキメラポリペプチドに受容体を結合させることを含む、受容体機能を変化させる方法、ならびに少なくとも１種のキメラポリペプチドに受容体を結合させて、機能的受容体分子数を減少させることを含む、受容体機能を低下させる方法も提供される。治療上有効量のキメラポリペプチドを含む少なくとも１の組成物を投与することを含む、ＨＩＶ感染の予防、治療または改善方法が提供される。好ましくは、キメラポリペプチドのケモカインポリペプチドはＳＤＦ−１α、ＭＩＰ−１α、またはＭＩＰ−１βを含む。本発明の他の態様および利点は、以下の、本発明の好ましい具体例についての詳細な説明を考慮することにより明らかとなろう。図面の簡単な説明図１は、実施例２に記載するキメラポリペプチドの発現を示す。図２は、実施例３に記載する、フシン／ＣＸＣＲ４受容体発現細胞へのキメラＳＤＦ−１αポリペプチドの結合を示す。発明の詳細な説明本発明者らは、初めて、異種ポリペプチドに共有結合したケモカインポリペプチドを含む新規キメラポリペプチドを構築した。これらのキメラポリペプチドはケモカイン受容体と相互作用し、新規特性を有する。本明細書の用語「ケモカイン」は、ケモカイン活性を有するすべての分子、あるいは何らかの種類の変更、付加、挿入、欠失、変異、置換、転換、または修飾によりケモカイン活性を有する分子由来のすべての分子を包含する。特定の細胞集団の化学走性活性は、かかる細胞集団の方向づけまたは移動に対する直接的または間接的な刺激である。好ましくは、細胞集団は、循環血液細胞、骨髄幹細胞を含む。より好ましくは、細胞集団は単球、Ｂ細胞、Ｔ細胞、好塩基球、好酸球、好中球、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、および骨髄幹細胞を包含してもよい。最も好ましくは、細胞集団は、単球、Ｔ細胞、好塩基球、および骨髄幹細胞を包含してもよい。好ましくは、ケモカインは細胞の方向づけられた移動動を直接的に刺激する能力を有する。特定のポリペプチドが細胞集団に対する化学走性活性を有するかどうかは、細胞の化学走性に関する既知アッセイにおいて当該ポリペプチドを使用することにより、容易に調べることができる。化学走性活性についてのアッセイ（化学走性を誘導または防止する蛋白を同定するものであろう）は、膜を越えての細胞の移動を誘導する蛋白の能力、ならびに１の細胞集団に対する別の細胞集団の付着を誘導する蛋白の能力を測定するアッセイからなる。移動および付着についての適当なアッセイは、Current Protocols in Immunology，Ed．by J．E．Coligan ，A．M．Kruisbeek,D．H．Margulies，E．M．Shevach，W．Strober，Pub．by Gr eene Publishing Associates and Wiley-Interscience（Chapter 6．12，Measur ement of alpha and beta Chemokines 6．12.1-6.12.28)；Taub et al.，J．Cli n．Invest．95:1370-1376，1995;Lind et al.，APMIS 103:140-146，1995;Mulle r et al.，Eur．J.Immunol．25:1744-1748;Gruber et al.，J．of Immunol．152 :5860-5867，1994;Johnston et al.，J．of Immunol．153:1762-1768，1994（参照によりこれらが本明細書に記載されているものとみなす）に記載されたアッセイを包含するが、これらに限らない。本明細書の用語「共有結合」は、化学的な共有結合による、直接的またはリンカー分子（それ自体、分子と共有結合する）を介しての分子相互の結合を意味する。本明細書の用語「異種ポリペプチド」は、ケモカインポリペプチドに共有結合しうるすべてのポリペプチドを包含し、ケモカイン、サイトカイン、免疫グロブリン、抗原、Ｈｉｓ、Ｆｌａｇまたはｍｙｃのごとき抗体結合タグ、レクチン結合ドメイン、トキシン、キナーゼ、プロテアーゼ、他の酵素、構造蛋白、ならびにいずれかの形態の変更、付加、挿入、欠失、変異、置換、転換、または修飾により上記のものから誘導されたポリペプチドが包含される（これらに限らないが、チオレドキシンを除く）。例えば、ケモカインポリペプチドを「リンカー」を介して免疫グロブリンのＦｃ部分に融合させてもよい。２価形態のケモカインについては、かかる融合をＩｇＧ分子のＦｃ部分に対して行うことができる。他の免疫グロブリンイソタイプを用いてかかる融合物を得てもよい。例えば、ケモカイン−ＩｇＭ融合物は、１０価形態のケモカインを生じるであろう。さらに、キメラポリペプチドをＰ１結合を介してミセル調合物中に存在するホスファチジルイノシトールに連結することにより、多価形態のキメラポリペプチドを作ることも可能である。キメラケモカインポリペプチドのフラグメントも、本発明に包含される。好ましくは、かかるフラグメントはポリペプチドの所望活性を保持しているか、あるいは所望活性を発揮するように修飾されたものである。ポリペプチドのフラグメントは直鎖状であってもよく、あるいは例えばH.U.Saragovi，et al.，Bio/Tech nology 10,773-778(1992)およびR.S.McDowell，et al.，J．Amer．Chem．Soc．1 14，9245-9253(1992)（参照により両文献を本明細書に記載されているものとみなす）に記載されたような既知方法を用いて環化させてもよい。本発明において提供されるポリペプチドは、本来的に修飾がなされているかあるいは人工的に処理されて修飾されている精製蛋白のアミノ酸配列に類似したアミノ酸配列により特徴づけられるポリペプチドを包含する。例えば、当業者は、既知方法を用いてポリペプチドまたはＤＮＡ配列中の修飾を行うことができる。ポリペプチド配列中の目的とする修飾は、コーディング配列中の選択アミノ酸残基の変更、付加、挿入、欠失、変異、置換、転換、または修飾を包含する。一例として、１またはそれ以上のシステイン残基を欠失させ、あるいは他のアミノ酸と置換して、分子のコンホーメーションを変化させてもよい。もう１つの例として、さらなるアミノ酸をポリペプチドのＮ末端に付加してもよい。また、ランダム突然変異法を用いてポリペプチドのアミノ酸配列を変更してもよい。炭水化物、脂質またはポリエチレングリコールを包含する他の部分をポリペプチドに結合させること、あるいはかかる部分を除去または変更することも可能である。かかる変更、付加、挿入、欠失、変異、置換、転換、または修飾のための方法は当業者によく知られている（例えば、米国特許第４５１８５８４号参照）。好ましくは、かかる変更、付加、挿入、欠失、変異、置換、転換、または修飾は、ポリペプチドの所望活性を保持させるものであるか、あるいは所望活性を発揮するように修飾するものである。ポリペプチド活性を保持していると考えられ、それゆえスクリーニングまたは他の免疫学的方法に有用でありうるポリペプチド配列の他のフラグメントおよび誘導体についても、本明細書開示により当業者は容易に得ることができる。かかる修飾は本発明に包含されると考えられる。また本発明は全長および成熟形態のキメラケモカインポリペプチドを提供する。かかるポリペプチドの全長形態は、各開示構築物のヌクレオチド配列の蛋白コーディング領域（イントロンを除く）の翻訳により配列表において同定されている。かかるポリペプチドの成熟形態を、開示全長ポリヌクレオチド（好ましくは、ＡＴＣＣに寄託されたもの）を適当な哺乳動物細胞（好ましくは、ＣＨＯまたはＣＯＳ細胞）または他の宿主細胞において発現させることにより得てもよい。ポリペプチドの成熟形態の配列を全長形態のアミノ酸配列から決定してもよい。開示ポリペプチドの種ホモログであるケモカインポリペプチドを包含するキメラケモカインポリペプチドも、本発明により提供される。本発明において提供される配列から適当なプローブまたはプライマーを作成し、所望種由来の適当な核酸ソースをスクリーニングすることにより、種ホモログを単離し、同定してもよい。また本発明は、開示ケモカインポリペプチドまたはケモカインをコードするポリヌクレオチドの対立遺伝子変種（すなわち、単離ポリヌクレオチドの自然発生的別形態であって、単離ポリヌクレオチドによりコードされるものに対して同一、相同的または関連のあるポリペプチドをコードする別形態）も包含する。また本発明は、ストリンジェントな条件下で、好ましくは、非常にストリンジェントな条件下で本明細書記載のポリヌクレオチドとハイブリダイゼーションしうるポリヌクレオチドを包含する。非常にストリンジェントな条件は、例えば、６５℃において４ｘＳＳＣ、または４２℃において５０％ホルムアミドおよび４ｘＳＳＣを包含する。好ましくは、かかるハイブリダイゼーションするポリヌクレオチドは、それらがハイブリダイゼーションするポリヌクレオチドに対して少なくとも７０％（より好ましくは、少なくとも８０％、最も好ましくは９０％または９５％）の相同性を有する。好ましいキメラポリペプチドおよびそれらをコードするポリヌクレオチドキメラケモカインポリペプチドのアミノ酸配列を、それらをコードするポリヌクレオチド配列とともに、以下に示す。これらのキメラポリペプチドにおいて、ケモカインは、［Ｇｌｙ−Ｓｅｒ］₅リンカーペプチドによりＦｃポリペプチドに連結されている。実施例１に記載するように、これらのキメラポリペプチドをコードするポリヌクレオチドはケモカインｃＤＮＡ配列およびゲノムのＦｃ配列に由来するものである。ＳＤＦ−１αドメインを含む、１のかかるキメラポリペプチドをコードするポリヌクレオチドの配列を、ヌクレオチド１２から１２１３まで伸長している蛋白コーディング配列（イントロンを含む）とともに、配列番号：２に示す。このポリヌクレオチドはＳ１−２またはＳ１−３と同定され、これら２つの構築物のＤＮＡ配列は同一と思われる。Ｓ１−２およびＳ１−３によりコードされるキメラポリペプチドのアミノ酸配列を配列番号：１に示す。Ｓ１−２およびＳ１−３によりコードされるキメラポリペプチドは３２８アミノ酸の長さであり、分泌リーダー配列の開裂により配列番号：１のアミノ酸２０、２１、または２２から開始（ポリペプチドがどのようにプロセッシングされるかによる）する成熟ポリペプチドが生じる。ポリヌクレオチド構築物Ｓ１−３は、１９９７年２月２８日にAm erican Type Culture Collectionに寄託され、受託番号ＡＴＣＣ９８３３８を付与された。ＳＤＦ−１α由来のドメインを含む、別のかかるキメラポリペプチドをコードするポリヌクレオチドの配列を、ヌクレオチド１２から１２０７まで伸長している蛋白コーディング配列（イントロンを含む）とともに、配列番号：４に示す。このポリヌクレオチドはＳＫ２−２と同定された。ＳＫ２−２によりコードされるキメラポリペプチドのアミノ酸配列を配列番号：３に示す。ＳＫ２−２によりコードされるキメラポリペプチドは３２６アミノ酸の長さであり、分泌リーダー配列の開裂により配列番号：３のアミノ酸２０から開始する成熟ポリペプチドが得られる。ＳＫ２−２によりコードされるポリペプチドはＳ１−２およびＳ１− ３によりコードされるポリペプチドとは異なる。ＳＫ２−２から２個のアミノ酸が欠失されたことにより、分泌リーダー配列の開裂により常に配列番号：３のアミノ酸２０から開始する生成物を生じることが予測される。ポリヌクレオチド構築物ＳＫ２−２は、１９９７年２月２８日にAmerican Type Culture Collection に寄託され、受託番号ＡＴＣＣ９８３３９を付与された。ＭＩＰ−１αドメインを含む、キメラポリペプチドをコードするポリヌクレオチドの配列を、ヌクレオチド１５から１２２５まで伸長している蛋白コーディング配列（イントロンを含む）とともに、配列番号：６に示す。このポリヌクレオチドはＭＰ−１と同定された。ＭＰ−１のＤＮＡ配列が決定された。ＭＰ−２およびＭＰ−６のＤＮＡ配列はＭＰ−１のＤＮＡ配列と同じであると予想される。これらのクローンは、ＰＣＲによるいくつかのＤＮＡ配列変化を含んでいるかもしれない。ＭＰ−１によりコードされる、そしておそらくＭＰ−２およびＭＰ−６によりコードされるキメラポリペプチドのアミノ酸配列を配列番号：５に示す。ＭＰ−１によりコードされるキメラポリペプチドは３３１アミノ酸の長さであり、分泌リーダー配列の開裂により配列番号：５のアミノ酸２３から開始する成熟ポリペプチドが生じる。ポリヌクレオチド構築物ＭＰ−１、ＭＰ−２、およびＭＰ−６は、１９９７年２月２８日にAmerican Type Culture Collectionに寄託され、受託番号ＡＴＣＣ９８３４１、９８３４２、および９８３４０を付与された。ＭＩＰ−１β由来のドメインを含む、キメラポリペプチドをコードするポリヌクレオチドの配列を、ヌクレオチド１６から１２２６まで伸長している蛋白コーディング配列（イントロンを含む）とともに、配列番号：８に示す。このポリヌクレオチドはＭＰＢ−Ｘと同定された。ＭＰＢ−Ｘによりコードされるキメラポリペプチドのアミノ酸配列を配列番号：７に示す。ＭＰＢ−Ｘによりコードされるキメラポリペプチドは３３１アミノ酸の長さであり、分泌リーダー配列の開裂により配列番号：７のアミノ酸２４から開始する成熟ポリペプチドが得られる。キメラポリペプチドの発現および精製本発明単離ポリヌクレオチドを、Kaufman et al.，Nucleic Acids Res．19，4 485-4490(1991)に開示のｐＭＴ２またはｐＥＤ発現ベクターのごとき発現制御配列に作動可能に連結して、蛋白を組み換え的に製造してもよい。多くの適当な発現制御配列が当該分野において知られている。多くの適当な発現制御配列が当該分野において知られている。組み換え蛋白発現のための一般的方法も知られており、R．Kaufman，Methods in Enzymology 185，537-566(1990)が典型例である。ここで定義する「作動可能に連結」とは、本発明単離ポリヌクレオチドおよび発現制御配列がベクターまたは細胞中に置かれ、連結されたポリヌクレオチド／発現制御配列で形質転換（トランスフェクション）された宿主細胞により発現されるようになっていることを意味する。多くのタイプの細胞は蛋白の発現に適した宿主細胞として作用しうる。哺乳動物細胞は、例えば、サルＣＯＳ細胞、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、ヒト腎臓２９３細胞、ヒト表皮Ａ４３１細胞、ヒトＣｏｌｏ２０５細胞、３Ｔ３細胞、ＣＶ−１細胞、他の形質転換された霊長類細胞系、正常２倍体細胞、一次組織のインビトロ培養から得られる細胞株、一次エクスプラント、ＨｅＬａ細胞、マウス細胞、ＢＨＫ、ＨＬ−６０、Ｕ９３７ＨａＫまたはJurkat細胞を包含する。別法として、酵母のごとき下等真核細胞または細菌のごとき原核細胞において蛋白を製造することが可能である。潜在的に適当な酵母株は、Saccharomycescer evisiae、Schizosaccharomyces pombe、Kluyveromyces株、Candida、または異種蛋白を発現可能な酵母株を包含する。潜在的に適当な細菌株は、Escherichia co li、Bacillus subtilis、Salmonella typhimurium、または異種蛋白を発現可能な細菌株を包含する。蛋白が酵母または細菌において生成される場合、その中で生成された蛋白を、例えば適当部位のリン酸化またはグリコシレーションにより修飾して機能的蛋白を得る必要があるかもしれない。既知化学的または酵素的方法を用いてかかる共有結合を行ってもよい。本発明単離ポリヌクレオチドを１種またはそれ以上の昆虫発現ベクター中の適当な制御配列に作動可能に連結し、昆虫発現系を用いることにより蛋白を得てもよい。バキュロウイルス／昆虫細胞発現系のための材料および方法は、例えばIn vitrogen,San Diego，California，USAからのキット形態（MaxBac^Rキット）で市販されており、かかる方法は当該分野においてよく知られており、SummersおよびSmith，TexasAgricultural Experiment Station Bulletin No．1555(1987)（参照により本明細書に記載されているものとみなす）に記載のようなものがある。本明細書で用いるように、本発明ポリヌクレオチドを発現可能な昆虫細胞は「形質転換」されている。本発明蛋白をトランスジェニック動物の生産物として、例えば、蛋白をコードしているヌクレオチド配列を含む体細胞または生殖細胞により特徴づけられるトランスジェニックウシ、ヤギ、ブタ、またはヒツジの乳の成分として発現させてもよい。別法として、本発明蛋白を精製容易形態として発現させてもよい。例えば、マルトース結合蛋白（ＭＢＰ）、グルタチオン−Ｓ−トンスフェラーゼ（ＧＳＴ）またはチオレドキシン（ＴＲＸ）との融合蛋白のごとき融合蛋白として発現させてもよい。かかる融合蛋白の発現および精製のためのキットは、それぞれNew En glan BioLab(Beverly，MA)、Pharmacia(Piscataway，NJ)およびInVitrogenから市販されている。蛋白にエピトープでタグを付し、次いで、かかるエピトープに指向された特異的抗体を用いることにより精製することもできる。１のかかるエピトープ(「フラッグ」)はKodak(New Haeven，CT)から市販されている。組み換え蛋白の発現に適した培養条件下で形質転換宿主細胞を培養することにより本発明蛋白を製造してもよい。次いで、得られた発現蛋白を、ゲル濾過およびイオン交換クロマトグラフィーのごとき既知精製プロセスを用いてかかる培養物（すなわち、培地または細胞抽出物）から精製してもよい。また、蛋白の精製は、蛋白に結合するであろう作用剤を含有するアフィニティーカラム；コンカナバリンＡ−アガロース、ヘパリンートヨパール^RまたはCibacrom blue 3GAセファロース^Rのごときアフィニティーカラムによる１またはそれ以上のカラム工程;フェニルエーテル、ブチルエーテル、またはプロピルエーテルのごとき樹脂を用いる疎水性相互作用クロマトグラフィーを用いる１またはそれ以上の工程；あるいは免疫アフィニティークロマトグラフィーを包含する。最後に、疎水性ＲＰ−ＨＰＬＣ媒体、例えば懸垂メチルまたは他の脂肪族基を有するシリカゲルを用いる１またはそれ以上の逆相高品質液体クロマトグラフィー(ＲＰ−ＰＬＣ）工程を用いてさらに蛋白を精製することができる。いくつかまたはすべての上記精製工程を種々組み合わせて用いて実質的に均一な単離組み換え蛋白を得ることもできる。かくして精製された蛋白は他の哺乳動物蛋白を実質的に含まず、本発明において「単離蛋白」と定義される。既知の慣用的化学合成により蛋白を製造してもよい。合成的手段による本発明蛋白の構築方法は当業者に知られている。合成的に構築された蛋白配列は、一次、二次または三次構造および／またはコンホーメーション特性を共有することによって、蛋白活性をはじめとする共通の生物学的特性を有する可能性がある。よって、それらを、治療化合物のスクリーニングおよび抗体生成のための免疫学的プロセスにおいて、天然の精製蛋白の生物学的活性または免疫学的置換物として使用してもよい。キメラポリペプチドの用途キメラケモカインポリペプチドを、ケモカイン受容体を発現している細胞の同定、または単離受容体分子に対するケモカインの結合についての研究のためのツールとして使用することができる。構築物は、ケモカイン受容体を発現している細胞とともにインキュベーションされた場合にこれらの細胞に結合し、市販蛍光タグ抗体、またはキメラポリペプチドのヒト免疫グロブリンＦｃ領域のごとき異種ポリペプチドドメインに結合しうる他の蛋白を用いて示すことができる。これにより、ケモカインに対する表面受容体を有する細胞ならびに細胞表面のこの受容体の密度が示される。キメラケモカインポリペプチドとケモカイン受容体との間の相互作用を、Biac oreセンサー（Pharmacia）を用いて表面プラスモン共鳴の変化を測定することにより直接的に検出することもできる。製造者の推奨により、Biacoreセンサーチップ上の異なるフローセルにケモカイン受容体またはキメラポリペプチドを共有結合的に固定化することもできる。ついで、相互作用につき試験すべき分子をフローセルの反対側に注入し、共鳴ユニットの変化（センサーチップ表面に結合した蛋白質量を反映する）として結合を検出する。受容体−リガンド活性についての他の適当なアッセイは、Current Protocols in Immunology，edited by J．E.Coligan，A．M．Kruisbeek，D．H．Margulies ，E．M.Shevach，W．Strober，published by Greene Publishing Associates an d Wiley-Interscience(Chapter 7．28，Measurement of Cellular Adhesion und er staticconditions 7．28．1-7.28.22)；Takai et al.，Proc．Natl．Acad．S ci．USA 84:6864-6868，1987；Bierer et al.，J．Exp．Med．168:1145-1156，1 988;Rosensteinet al.，J．Exp．Med．169:149-160，1989;Stoltenborg et al. ，J．Immunol. Methods 175:59-68，1994;Stitt et al.，Cell 80:661-670，1995（参照によりこれらが本明細書に記載されているものとみなす）に記載されたものを包含するが、これらに限らない。キメラケモカインポリペプチドをワクチンアジュバントとして使用することもできる。免疫応答を誘導するために注射される蛋白および糖蛋白は、Ｂリンパ球の表面に結合して抗体産生を刺激しなければならず、抗原提示細胞に捕獲され、処理され、Ｔリンパ球に対して提示されてＴリンパ球応答を媒介するものでなくてはならない。キメラケモカイン−Ｆｃポリペプチドを抗原に含めて注射することにより、ケモカインの化学誘引的な存在によって必要なＡＰＣｓおよびリンパ球の浸潤が誘導されるであろう。Ｆｃドメインをキメラポリペプチドに含ませることの１の利点は、キメラポリペプチドがケモカイン単独の場合よりも長い生物学的半減期を有するようになることである。また、注射部位の細胞上に存在するＦｃ受容体に結合しうるＦｃドメインをキメラポリペプチド中に含ませることにより、ケモカイン活性が当該部位に貯蔵所のように濃縮され、長時間にわたりケモカイングラジエントが維持されることが可能になり、必要な応答性細胞集団の浸潤を確実なものとなるであろう。キメラケモカインポリペプチドを用いて抗原提示細胞（ＡＰＣ）の活性を増強することもできる。キメラポリペプチドのケモカインドメインの存在はＡＰＣを化学走性的に誘引するであろう。さらに、抗原性分子をキメラポリペプチド中に含ませて、ＡＰＣのデリバリーを行うこともできよう。かかる抗原含有キメラポリペプチドはＡＰＣ表面に結合し、吸収され、キメラポリペプチドがＡＰＣ中で分解された場合、キメラポリペプチドの抗原性部分がＭＨＣ蛋白との相互作用およびＡＰＣ表面上の提示のために放出される。キメラケモカインポリペプチドを用いて、移動性細胞の化学走性的補充を行うこともできる。キメラケモカインを用いて、適当なケモカイン受容体を発現している移動性細胞に対する化学誘引グラジエントを確立してもよく、あるいは存在している化学誘引グラジエントを覆い隠してもよい。大型または特に安定な異種ポリペプチドをキメラポリペプチド中に含ませることにより、キメラポリペプチドはより長い生物学的半減期を有するようになり、より長く継続する化学誘引グラジエントを確立できるようにうになり、あるいはすでに確立されているグラジエントをより効果的に覆い隠すそうになる。また、特定部位にキメラカモカインポリペプチドを指向させてその部位に化学誘引グラジエントを確立する異種ポリペプチドドメインを、特定の分子または細胞に結合させることによって選択してもよい。化学誘引グラジエントを変化させることにより、キメラケモカインポリペプチドを用いて、移動性細胞の補充が必要な炎症性疾患および自己免疫疾患を治療することができる。さらに、ＩＬ−８またはＩＰ−１０のごとき他の細胞間因子を産生する移動性細胞を特定部位に誘引することにより、例えば、キメラケモカインポリペプチドを用いてその部位における血管新生を刺激し（例えば、補充される移動性細胞がＩＬ−８を分泌する場合）、あるいはその部位における血管新生を抑制（例えば、補充される移動性細胞がＩＰ−１０を分泌する場合）してもよい。さらに、骨髄移植レシピエントの骨髄中にキメラケモカインポリペプチドのグラジエントを確立することにより、キメラケモカインポリペプチドを用いて、移植骨髄細胞を必要とされる骨髄に補充することができよう。同様に、キメラケモカインポリペプチドを用いてある種の因子を分泌する特定のクラスの移動性細胞を誘引することによって、他の細胞プロセスに影響を及ぼすこともできよう。キメラケモカインポリペプチドを用いてケモカイン−受容体相互作用の性質に影響を及ぼしてもよく、それらの受容体への内因性分子の結合をブロックしてもよい。受容体に結合することにより、キメラケモカインは、正常リガンドを介して受け取られるのと同様のシグナルを伝達することができる。異種ポリペプチドがＦｃポリペプチドである場合、その２価の性質によって、このシグナルはより低い分子密度のリガンドにおいて伝達されうる。キメラポリペプチドを結合することにより伝達されるシグナルは、キメラポリペプチドの構造により、正常リガンドとは異なる性質を有する可能性がある。これには長時間の誘発／活性化、または活性化の抑制が含まれる。キメラポリペプチドは、その大きなサイズまたは異種ポリペプチドドメィンの構造の性質により、単量体リガンドと比較してインビボにおいて長い半減期を有し、おそらく、長時間のシグナリング／活性化を導くであろう。また、キメラポリペプチドの大きなサイズは、天然リガンドの結合をブロックしうる何らかの立体障害を生じさせるであろう。キメラケモカインポリペプチドは、正常リガンドに結合し、これを介するさらなるシグナリングを不活性化させることにより、正常リガンドに対する受容体の応答を脱感作しうる。受容体が１つよりも多いシグナリング機能を有する場合、キメラケモカインポリペプチドは１の形態のシグナリングを抑制する一方で、別の形態のシグナリングを促進または変化させうる。また、キメラケモカインポリペプチドは受容体に結合し、ダウンレギュレーションおよび／または受容体の吸収を引き起こしうる。さらに、キメラケモカインポリペプチドは受容体に結合し、受容体の吸収および破壊を引き起こし、かくして、受容体を膜表面にリサイクルさせない可能性がある。また、１の受容体に結合することにより、キメラポリペプチドは別の受容体または膜蛋白を脱感作させ、あるいはその正常機能を発揮できないようにする可能性もある。キメラケモカインポリペプチドを用いて、ケモカイン受容体へのウイルスの結合をブロックすることにより、ＨＩＶまたは他のウイルスによる細胞への感染を防止することもできる。ＳＤＦ−１αおよびＦｃポリペプチドを含むキメラケモカインポリペプチドは、フシン／ＣＸＣＲ４受容体発現細胞に結合することが示されている。この結合は、複数の方法で、Ｔ−指向性ＨＩＶ−１単離体のフシン陽性細胞への感染をブロックするであろう。該複数の方法とは、存在するケモカイン受容体を求めてＨＩＶと競合すること、吸収によるケモカイン受容体のダウンレギュレーション、ならびにＨＩＶが感染に必要とする受容体の脱感作である。同様の様式で、ＭＩＰ−１αまたはＭＩＰ−１βポリペプチドおよびＦｃポリペプチドから構成される構築物はＣＣＲ５受容体発現する細胞に結合するであろう。この結合は、複数の方法で、Ｍ−指向性ＨＩＶ−１単離体のＣＣＲ−５陽性細胞への感染をブロックするであろう。該複数の方法とは、存在するケモカイン受容体を求めてＨＩＶと競合すること、吸収によるケモカイン受容体のダウンレギュレーション、ならびにＨＩＶが感染に必要とする受容体の脱感作である。ケモカインドメインのＮ末端におけるアミノ酸付加のごときキメラポリペプチドの変化は、結合を促進するが、シグナリングを消失させる可能性があり、その結果、強力な拮抗作用を生じさせる可能性がある。数種の異なるケモカインを含むようにキメラケモカインポリペプチドを作成することにより、広範なケモカイン受容体を阻害あるいは脱感作させることができ、かくして、他のケモカイン受容体を用いて細胞に感染するように変異したウイルス単離体をブロックすることができる。一連の広範な受容体に結合するようにケモカイン配列を修飾することも可能であり、かくして、１の構築物はＣＣＣＲ５ならびに他のＣＣＣＲ受容体に結合でき、別の構築物はＣＸＣＲ４ならびに種々の他のＣＸＣＲ受容体に結合できるようになるであろう。キメラケモカインポリペプチドを混合して同時投与することにより、最大数のケモカイン受容体タイプをＨＩＶまたは他の単離体による結合から防御することもできよう。投与および用量本発明キメラポリペプチド（どのような源からであってもよく、組み換え法および非組み換え法によるものを包含するが、これらに限らない）を、医薬上許容される担体と混合して医薬組成物中に用いてもよい。かかる組成物は（ポリペプチドおよび担体のほかに）、希釈剤、充填剤、塩類、バッファー、安定化剤、可溶化剤、および当該分野でよく知られた他の物質を含有していてもよい。用語「医薬上許容される」は、有効成分の生物学的活性の有効性を妨害しない無毒の物質を意味する。担体の特性は投与経路に依存する。本発明医薬組成物は、Ｍ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＴＮＦ、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ −５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２、ＩＬ−１３、ＩＬ−１４、ＩＬ−１５、ＩＦＮ、ＴＮＦ０、ＴＮＦ１、ＴＮＦ２、Ｇ−ＣＳＦ、Ｍｅｇ−ＣＳＦ、スロンボポイエチン、幹細胞因子、およびエリスロポイエチンのごときサイトカイン、リンホカイン、または他の造血因子を含有していてもよい。医薬組成物はさらに、ポリペプチド活性を増強し、あるいは治療においてその活性または有用性を補う他の作用剤を含有していてもよい。かかるさらなる因子および／または作用剤を医薬組成物に含有させて、本発明蛋白との相乗効果を発揮させ、あるいは副作用を最小化してもよい。逆に、特定のサイトカイン、リンホカイン、他の造血因子、血栓溶解因子または抗血栓因子、または抗炎症剤の処方に本発明ポリペプチドを含有させて、サイトカイン、リンホカイン、他の造血因子、血栓溶解因子または抗血栓因子、または抗炎症剤の副作用を最小化してもよい。本発明ポリペプチドは、多量体（例えば、ヘテロダイマーまたはホモダイマー）またはそれ自体もしくは他の蛋白との複合体となって活性でありうる。結果的に、本発明医薬組成物は、かかる多量体または複合体形態の本発明ポリペプチドを含むものであってもよい。本発明医薬組成物は、本発明ポリペプチドと蛋白もしくはペプチド抗原との複合体の形態であってもよい。蛋白および／またはペプチド抗原は、Ｂリンパ球ならびにＴリンパ球に対して刺激シグナルを送達するであろう。Ｂリンパ球はその表面免疫グロブリン受容体を通して抗原に応答するであろう。Ｔリンパ球は、ＭＨＣ蛋白による抗原提示後、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）を通して抗原に応答するであろう。ＭＨＣならびに宿主細胞のクラスＩおよびクラスＩＩのＭＨＣ遺伝子によりコードされたものを包含する構造上関連した蛋白は、Ｔリンパ球に対するペプチド抗原の提示に役立つであろう。抗原成分は、精製ＭＨＣ−ペプチド複合体のみとして、または直接Ｔ細胞にシグナルを送ることのできる同時刺激分子とともに供給されうる。あるいはまた、Ｂ細胞上の表面免疫グロブリンならびにＴ細胞上のＴＣＲおよび他の分子に結合しうる抗体を、本発明医薬組成物と混合することもできる。本発明医薬組成物はリポソーム形態であってもよく、その中で本発明蛋白はさらに他の医薬上許容される担体、脂質のごとき両親媒性作用剤（水溶液中でミセルのような凝集体形態、不溶性単層、液状結晶またはラメラ層として存在）と混合されている。リポソーム処方に適する脂質は、モノグリセリド、ジグリセリド、スルファチジド、リゾレシチン、リン脂質、サポニン、胆汁酸等を包含するが、これらに限らない。かかるリポソーム処方の製造は当業者のレベルの範囲内であり、例えば、米国特許第４２３５８７１、４５０１７２８、４８３７０２８、および４７３７３２３号（参照によりそれらすべてを本明細書に記載されているものとみなす）に記載されたようなものである。本明細書の用語「治療上有効量」とは、有意な患者の利益、例えば、かかる症状の徴候の改善、治癒、治癒速度の増大を示すに十分な医薬組成物または方法の各有効成分の合計量を意味する。単独で投与される個々の有効成分について用いる場合、該用語は当該成分のみをいう。有効成分の組み合わせに用いる場合、逐次投与あるいは同時投与にかかわらず治療効果を生じる有効成分量の合計量をいう。本発明の治療方法の実施において、治療上有効量の本発明ポリペプチドを治療すべき症状を有する哺乳動物に投与する。本発明方法に従って、単独またはサイトカイン、リンホカインもしくは他の造血因子のごとき他の治療薬とともに本発明キメラポリペプチドを投与してもよい。１種またはそれ以上のサイトカイン、リンホカインまたは他の造血因子と共投与する場合、本発明蛋白をサイトカイン、リンホカイン、他の造血因子、血栓溶解因子もしくは抗血栓因子と同時または逐次投与してもよい。逐次投与する場合、担当医師は、サイトカイン、リンホカイン、他の造血因子、血栓溶解因子もしくは抗血栓因子と本発明ポリペプチドとの組み合わせにおける適切な投与順序を決定するであろう。本発明医薬組成物中または本発明の実施に用いる本発明ポリペプチドの投与を種々の慣用的方法、例えば、経口的摂食、吸入、または皮内、皮下、または静脈注射で行うことができる。患者への静脈注射が好ましい。治療上有効量の本発明ポリペプチドを経口投与する場合、本発明ポリペプチドは錠剤、カプセル、粉末、溶液またはエリキシルの形態であろう。錠剤形態で投与する場合、本発明医薬組成物はゼラチンのごとき固体担体またはアジュバントをさらに含有していてもよい。錠剤、カプセル、および粉末は、約５ないし９５％の本発明ポリペプチド、好ましくは約２５ないし９０％の本発明ポリペプチドを含有する。液体形態で投与する場合、水、ペトロレウム、動物または植物起源の油脂、例えばピーナッツ油、鉱油、大豆油、またはゴマ油、または合成油脂を添加してもよい。液体形態の医薬組成物は、生理食塩溶液、デキストロースまたは他の糖類溶液、またはグリコール類（例えばエチレングリコール、プロピレングリコールもしくはポリエチレングリコール）をさらに含有していてもよい。液体形態で投与する場合、医薬組成物は、約０.５ないし９０重量％の本発明ポリペプチド、好ましくは約１ないし５０％の本発明ポリペプチドを含有する。治療上有効量の本発明ポリペプチドを静脈、皮内または皮下注射により投与する場合、本発明ポリペプチドはパイロジェン不含で、非経口的に許容される水溶液の形態であろう。適切なｐＨ、等張性、安定性を有するかかる非経口的に許容される蛋白溶液の調製は、当業者の範囲内である。静脈、皮内、または皮下注射用の好ましい医薬組成物は、本発明キメラポリペプチドのほかに、注射用塩化ナトリウム、リンゲル溶液、注射用デキストロース、注射用デキストロースおよび塩化ナトリウム溶液、注射用乳酸含有リンゲル溶液、または当該分野で知られている他の担体を含有すべきである。本発明医薬組成物は、安定化剤、保存料、バッファー、抗酸化剤、または当業者に知られた他の添加物を含んでいてもよい。本発明医薬組成物中の本発明ポリペプチドの量は、治療すべき症状の性質および重さ、ならびに患者がすでに受けている治療の性質による。最終的には、担当医師が、各患者を治療すべき本発明キメラポリペプチド量を決定するであろう。まず、担当医師は、低用量の本発明ポリペプチドを投与し、患者の応答を観察する。最適治療効果が得られるまで、より高用量の本発明ポリペプチドを投与してもよく、最適治療効果が得られた時点で用量をさらに増加させない。本発明方法を実施するための種々の医薬組成物は、体重１ｋｇあたり約０.０１μｇないし約１００ｍｇの本発明ポリペプチド（好ましくは、体重１ｋｇあたり約０.１μ ｇないし約１０ｍｇ、より好ましくは体重１ｋｇあたり０.１μｇないし約１ｍｇの本発明ポリペプチドを含有すべきである。本発明組成物を用いる静脈投与による治療の期間は、治療すべき疾病の重さならびに各患者の状態および応答により変化させられるであろう。本発明ポリペプチドの各適用期間は、連続静脈投与の場合１２ないし２４時間の範囲であると考えられる。最終的には、担当医師が、本発明医薬組成物を用いる静脈投与による治療の期間を決定するであろう。本発明ポリペプチドを用いて動物を免役して、本発明キメラポリペプチドと特異的に反応するポリクローナルおよびモノクローナル抗体を得てもよい。キメラポリペプチド全体またはそのフラグメントを免疫原として用いてかかる抗体を得てもよい。ペプチド免疫源はカルボキシ末端にシステイン残基をさらに含んでいてもよく、キーホールリムペット・ヘモシアニン（ＫＬＨ）のごときハプテンに結合する。かかるペプチドを合成する方法は当該分野において知られてお，り、例えば、R．P．Merrifield，J．Amer．Chem．Soc．85，2149-2154(1963)；J．L．Krste nansky，et.al.，FEBS Lett．211，10(1987)に記載のごときものがある。本発明ポリペプチドに結合するモノクローナル抗体は、本発明ポリペプチドの免疫検出用の有用な診断薬でありうる。本発明キメラポリペプチドに結合する中和抗体は、キメラポリペプチドのケモカインドメインに対応するケモカインに関連した症状の治療薬として有用でありうるし、さらに当該ケモカインの異常発現が関与しているいくつかの形態の癌の治療におけるある種の腫瘍の治療において有用でありうる。癌細胞または白血球細胞の場合、本発明ポリペプチドに対する中和モノクローナル抗体は、キメラポリペプチドのケモカインドメインに対応するケモカインにより媒介されうる癌細胞の転移蔓延の検出および予防に有用でありうる。骨、軟骨、腱または靭帯の再生に有用な本発明組成物に関して、治療方法は、組成物を局所的、全身的、またはインプラントもしくはデバイスのごとく局部的に投与することを包含する。投与する場合、本発明に使用する治療組成物は、もちろん、パイロジェン不含の生理学的に許容される形態である。さらに、望ましくは、組成物をカプセル封入するかまたは粘性形態として注射して骨、軟骨または組織ダメージ部位に送達してもよい。局所投与は傷の治癒および組織修復に適する。上記組成物中に含有されていてもよい本発明ポリペプチド以外の治療上有用な作用剤を、代替的または付加的に、本発明方法における組成物と同時または逐次投与してもよい。好ましくは、骨および／または軟骨形成のためには、組成物は、ポリペプチド含有組成物を骨および／または軟骨ダメージ部位に送達し、滑および軟骨の発生のための構造を提供し、さらに最適には体内に吸収されうるマトリックスを含有するであろう。かかるマトリックスは、他の移植される医学的器具に現在使用されている材料からできていてもよい。マトリックス材料の選択は、生体適合性、生分解性、機械的特性、美容上の外観および界面特性に基づく。組成物の特別な適用により適当な処方が決定されよう。組成物用として可能なマトリックスは生分解性で、化学的に知られた硫酸カルシウム、リン酸三カルシウム、ヒドロキシアパタイト、ポリ乳酸、ポリグリコール酸およびポリ無水物であってもよい。他の使用可能な材料は生分解性で、生物学的によく知られたもの、例えば、骨または皮膚のコラーゲンである。さらにマトリックスは純粋な蛋白または細胞外マトリックス成分を含んでいてもよい。他の可能なマトリックスは、焼結ヒドロキシアパタイト、バイオガラス、アルミネート、または他のセラミックスのごとき生分解性でなく、化学的に知られたものである。マトリックスは上記タイプの材料の組み合わせ、例えばポリ乳酸およびヒドロキシアパタイトあるいはコラーゲンおよびリン酸三カルシウムを含んでいてもよい。バイオセラミックスを、組成物中、例えばカルシウム−アルミネート− ホスフェート中において変更してもよく、加工して孔サイズ、粒子サイズ、粒子形状および生分解性を変化させてもよい。１５０ないし８００ミクロンの範囲の直径を有する多孔性粒子形態の乳酸およびグリコール酸の５０：５０（モル重量）のコポリマーが現在のところ好ましい。いくつかの適用例においては、カルボキシメチルセルロースまたは自己由来の血餅のごとき隔離剤を用いてマトリックスからのキメラポリペプチド組成物の解離を防止することが有用であろう。隔離剤の好ましいファミリーは、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、およびカルボキシメチルセルロースを包含するアルキルセルロース（ヒドロキシアルキルセルロースを包含）のごときセルロース性材料であり、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）のカチオン性の塩が最も好ましい。他の好ましい隔離剤は、ヒアルロン酸、アルギン酸ナトリウム、ポリ（エチレングリコール）、ポリオキシエチレンオキシド、カルボキシビニルポリマーおよびポリ（ビニルアルコール）を包含する。本発明に有用な隔離剤の量は、全処方重量に対して０.５〜２０重量％、好ましくは１〜１０重量％であり、この量は、ポリマーマトリックスからの蛋白の脱離を防止し、組成物の適切な取り扱いを可能にする量であるが、前駆細胞がマトリックスから浸潤し、そのことにより前駆細胞の骨形成活性を促進する機会を蛋白に付与するようにするには、あまり多くないようにする。さらなる組成物において、本発明ポリペプチドが骨および／または軟骨の欠損、傷、または組織の治療に有益な他の作用剤と混合されていてもよい。これらの作用剤は、上皮増殖因子（ＥＧＦ）、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、形質転換増殖因子（ＴＧＦ−αおよびＴＧＦ−β）、およびインスリン様増殖因子（ＩＧＦ）を包含する。また、目下のところ、治療組成物は獣医学的用途にも価値がある。詳細には、ヒトのほかに、家畜およびサラブレッドのウマが本発明ポリペプチドを用いるかかる治療に望ましい患者である。組織の再生に使用されるポリペプチド含有医薬組成物の投与規則は、キメラポリペプチドの作用を変化させる種々の要因、例えば形成が望まれる組織重量、ダメージ部位、ダメージを受けた組織の状態、傷のサイズ、必要な組織のタイプ（例えば、骨）、患者の年齢、性別、および食事、感染の重さ、投与期間、ならびに他の臨床的要因を考慮して医師が決定するであろう。用量は、復元に使用するマトリックスのタイプおよび医薬組成物中の他のポリペプチドの含有に応じて変更されてもよい。例えば、ＩＧＦＩ（インスリン様増殖因子Ｉ）のごとき他の既知増殖因子の最終組成物への添加も用量に影響しうる。組織／骨の増殖および／または修復を、例えばＸ線、組織形態学的調査およびテトラサイクリン標識により定期的に評価することにより経過をモニターすることができる。本発明ポリヌクレオチドを遺伝子治療に用いることもできる。かかるポリヌクレオチドをインビボまたはエクスビボで細胞に導入して哺乳動物対象中で発現させることができる。核酸を細胞または生物に導入するための他の知られた方法により本発明ポリヌクレオチドを投与してもよい（ウイルスベクターに入れて、あるいは裸のＤＮＡの形態として等があるが、これらに限らない）。本発明蛋白存在下で細胞をエクスビボにおいて培養して増殖させ、あるいはかかる細胞に対する所望効果を生じさせ、あるいはかかる細胞中に所望活性を生じさせてもよい。次いで、処理された細胞を、治療目的で、インビボにおいて導入することができる。本明細書に引用した特許および文献を、参照により全体が本明細書に記載されているものとみなす。以下の実施例は本発明の具体例を説明するが、開示範囲を限定するものではない。実施例１−キメラポリペプチドをコードするプラスミ構築４種のＤＮＡフラグメント（ケモカインコーディングフラグメント、リンカーおよびＩｇＧ４遺伝子のＦｃ部分の一部を含有するフラグメント、ＩｇＧ４遺伝子のＦｃ部分の残りを含有するフラグメント、ならびにベクターフラグメント）を連結することによりキメラ遺伝子構築物を含有するプラスミドを作成した。得られたプラスミドは、ヒトＩｇＧ４のヒンジ領域の第１コドンにイン−フレームで連結された［グリシン−セリン］₅リンカー配列にインーフレームで連結されたケモカインコーディング配列を含む。このキメラ遺伝子のＦｃ領域は、ヒトＩｇＧ４のヒンジ、ＣＨ２およびＣＨ３領域から構成され、イントロンおよびＩｇＧ４停止コドン下流の数個の塩基を含む。このキメラ遺伝子構築物のＦｃ部分も２個のアミノ酸変化を含み、それにより、Ｆｃ−受容体結合および補体固定が減じられる。ケモカインコーディングフラグメント：ヒトＳＤＦ−１α ｃＤＮＡを鋳型とし、ＳＤＦ−１α配列の上流および下流にそれぞれＮｏｔＩおよびＢａｍＨＩ部位を付加するＰＣＲプライマーを用いるＰＣＲを使用して、クローンＳ１−２およびＳ１−３のＳＤＦ−１αフラグメントを得た。クローンＳ１−２およびＳ１−３のＳＤＦ−１αフラグメントは、シグナル配列の開始ＡＴＧの上流の１１個の塩基から成熟蛋白配列の最終コドンまでからなっている。ＮｏｔＩ部位がシグナル配列上流に付加され、その後に成熟蛋白コーディング配列が続き、クローンＳ１−２およびＳ１−３によりコードされている蛋白のアミノ酸２０および２１についての６個のヌクレオチドが欠失されている以外は、クローンＳＫ２−２のＳＤＦ−１αフラグメントは、Ｓ１−２およびＳ１−３のＳＤＦ−１αフラグメントと同様に構築された。ヒトＭＩＰ− １α ｃＤＮＡ（ＨＵＭＣＹＴＮＥＷＡ対立遺伝子）を鋳型とし、ＭＩＰ−１α配列の上流および下流にそれぞれＮｏｔＩおよびＢａｍＨＩ部位を付加するＰＣＲプライマーを用いるＰＣＲを使用して、クローンＭＰ−１、ＭＰ−２およびＭＰ−６のＭＩＰ−１ αフラグメントを得た。ＭＩＰ−１α配列に対する蛋白配列はＨＵＭＣＹＴＮＥＷＡ（配列番号：９）由来のものである。すべてのヒトにおいてもう１つのＭＩＰ−１α対立遺伝子が存在するとは限らないが、ＨＵＭＣＹＴＮＥＷＡはすべてのヒトに存在する。ＰＣＲにおいて、３'ＭＩＰ−１αプライマーによりいくつかのヌクレオチドが変化したが、これらのヌクレオチド変化はアミノ酸配列を変化させない。ＭＰ−１のＤＮＡ配列は決定されたが、ＭＰ−２およびＭＰ−６のＤＮＡ配列はＭＰ−１のＤＮＡ配列と同じであると予想された。これらのクローンはいくつかのＰＣＲにより生じたＤＮＡ配列変化を含んでいる可能性がある。クローンＭＰ−１、ＭＰ−２およびＭＰ−６のＭＩＰ−１αフラグメントは、シグナル配列の開始ＡＴＧの上流の１４個の塩基から成熟蛋白配列の最終コドンまでからなる。ヒトＰＨＡにより刺激されたＴ細胞のｃＤＮＡを鋳型とし、ＭＩＰ−１β配列の上流および下流にそれぞれＮｏｔＩおよびＢａｍＨＩ部位を付加するＰＣＲプライマーを用いるＰＣＲを使用して、クローンＭＰＢ−ＸのＭＩＰ−１βフラグメントを得た。ＭＩＰ−１β配列のヌクレオチドおよび蛋白配列はＨＵＭＡＣＴ２Ａ（配列番号：１０）由来である。ＭＩＰ−１βフラグメントは、シグナル配列の開始ＡＴＧの上流の１５個の塩基から成熟蛋白配列の最終コドンまでからなると推定される。リンカーおよび部分ＩｇＧ４Ｆｃフラグメント；すべてのキメラ遺伝子構築物は、［グリシン−セリン］₅リンカー配列およびヒトＩｇＧ４のＦｃ領域の一部をコードする同じＤＮＡフラグメントを使用している。ＩｇＧ４配列中に変異を導入して、ＣＨ２領域の２個のアミノ酸を野生型から変化させた（配列番号：１中、１１６ＬがＥに、１１８ＧがＡに変化し、ヌクレオチド変化に対応している）。このフラグメント中のＩｇＧ４配列はイントロン（配列番号：２のヌクレオチド３４６から４６３まで）を含む。プラスミドＧ０８１（ｐｈｈｃｄ２８.２ｈｉｇｇ４ｍｃｙｓ）を鋳型として、５'末端にＢａｍＨＩ部位およびＧｌｙ−Ｓｅｒリンカー領域を付加する１のＰＣＲプライマーおよび３' 末端にＳａｃＩＩ部位を付加するもう１つのプライマーを用いるＰＣＲを使用して、変異したヒトＩｇＧ４配列からリンカー／部分Ｆｃフラグメントを得た。ＩｇＧ４Ｆｃフラグメントの残りの部分：ＳａｃＩＩおよびＥｃｏＲＩを用いる制限酵素消化により、ヒトＩｇＧ４をコードするプラスミドＧ０２２からＤＮＡフラグメントを得て、精製した。このフラグメント中のＩｇＧ４配列はイントロン（配列番号：２のヌクレオチド７９４から８９０まで）を含む。このフラグメントのヒトＩｇＧ４配列において、野生型ＩｇＧ４配列からの塩基対変化（配列番号：２の塩基８３２ＣがＴに変化）がイントロン領域中に見られ、それはキメラ遺伝子構築物によりコードされる遺伝子産物の発現または組成に影響しないと考えられる。ベクターフラグメント：このフラグメントは、ｐＥＤ.ＦｃベクターをＮｏｔＩおよびＥｃｏＲＩで消化してヒトＩｇＧ１インサートを除去し、ｐＥＤベクターと同様のＣＯＳおよびＣＨＯ哺乳動物発現配列を有するベクターフラグメントを得ることにより、ｐＥＤ.Ｆｃベクターから得た。実施例２−キメラポリペプチドの発現および精製キメラプラスミド構築物によりコードされるキメラポリペプチドＳ１−３、ＳＫ２−２、ＭＰ−１およびＭＰ−６を、ＣＯＳ細胞における一時的発現により発現させ、細胞培養培地中に遊離させた。Lipofectamine^TMReagent（GibcoBRL）を用い、製品添付の説明書に従って、下記の変更を加えて、ＣＯＳ１（クローンＭ６）細胞を適当なプラスミドで一時的にトランスフェクションした。トランスフェクション１６〜２４時間前に、１００ｍｍ組織培養ディッシュ中の完全ＤＭＥ培地（１０％ウシ胎児血清、２ｍＭグルタミン、およびそれぞれ１００ユニットのペニシリンおよびストレプトマイシンを補足したＤＭＥ)にＣＯＳ細胞をプレートあたり約１〜１.５ｘ１０⁶個の密度で撒いた。ＣＯＳ細胞のすべてのインキュベーションは１０％ＣＯ₂中３７℃で行った。各細胞培養ディッシュ用に、８μｇのプラスミドＤＮＡおよび４８μｌのLipofectamine^TMReagentを０.８ｍｌのＤＭＥ中に混合する。室温で３０分後、３．２ｍｌのＤＭＥ（２ｍＭグルタミン、およびそれぞれ１００ユニットのペニシリンおよびストレプトマイシンを補足）をＤＮＡ−Lipofectamine^TMReagent混合物に添加し、混合し、ついでＤＭＥで洗浄したＣＯＳ細胞に重層する。１８ないし２４時間インキュベーション後、この培地を完全ＤＭＥ培地と置換する。さらに２ないし４時間インキュベーション後、ＣＯＳプレートを５〜１０ｍｌのＤＭＥで２回洗浄し、ついで血清不含(２ｍＭグルタミン補足)ＤＭＥ１０ｍｌを添加する。さらに３６ないし４８時間インキュベーション後、培地を集め、遠心分離によりＣＯＳ細胞を除去する。同様のやり方でキメラポリペプチドＭＰＢ−Ｘも発現させることができる。分泌キメラポリペプチドをこの培地から精製することができ、あるいは既知濃度のヒトＩｇＧ４カッパを用いるＥＬＩＳＡによりキメラポリペプチドを定量して標準曲線を得た後、培地を種々のアッセイに使用することができる。細胞培養培地中に分泌された発現キメラポリペプチド濃度を、ヒトＩｇＧ４を標準物質として用いるＥＬＩＳＡにより決定した結果を下表に示す。表１プロテインＡセファロース（Pharmacia CL-4B）を用いる免疫沈降によりキメラポリペプチドを細胞培養上清から精製した。例えば、下記方法によりキメラポリペプチドを７５ｍｌの馴化培地から精製することができる。馴化培地を５０ｍＭＴｒｉｓ，ｐＨ７.５とする。約１ｍｌのＰＢＳに懸濁した１００ｍｇのプロテインＡセファロースを添加する。４℃で回転させながら一晩インキュベーションを行う。アジ化ナトリウムを添加する。遠心分離によりプロテインＡセファロースを集め、BioRad Poly-Prepカラムに移す。セファロースを１０ないし２０ｍｌのＰＢＳで洗浄する。１２ｍＭＨＣｌでキメラポリペプチドを溶離させ、即座に５０ｍＭＴｒｉｓ，ｐＨ７.５を添加して溶離液を中和する。セファロースを２ｍｌの１２ｍＭＨＣｌに懸濁することにより段階的に溶離を行い、１ｍｌのフラクションを集める。フラクション中のキメラポリペプチド量をＥＬＩＳＡにより定量することができる。図１のパネルＡ〜Ｄはクマシブルー染色したＳＤＳ−ＰＡＧＥゲルであり、哺乳動物ＣＯＳ細胞におけるキメラケモカインポリペプチドの発現を示す。プロテインＡを用いてキメラポリペプチドを精製し、ついで還元条件下および非還元条件下でのＳＤＳ−ＰＡＧＥゲルで電気泳動した。ＳＤＦ−１α−ＦｃキメラポリペプチドＳ１−３およびＳＫ２−２、ならびにＭＩＰ−１α−ＦｃキメラポリペプチドＭＰ−１、ＭＰ−２およびＭＰ−６は、還元条件下において〜１０ｋＤa のＭｒのバンドとして移動し、非還元条件下において〜８０ｋＤａのバンドとして移動した。実施例３−受容体発現細胞へのキメラポリペプチドの結合ＳＤＦ−Ｆｃキメラポリペプチドを用いて数種のヒト細胞系を染色し、これらの細胞により発現される受容体へのキメラポリペプチドの結合を示した。典型的な結合アッセイを以下に説明する。２〜１０％ＦＣＳ、０〜０.０２％ＢＳＡ、０〜０.０２％ウサギ血清、および０.０２〜０.１％アザイドを含有する培地中の細胞を氷上で短時間（１５〜６０分）インキュベーションした。ＳＤＦ−Ｆｃキメラポリペプチドを添加して０.５〜２μｇ／ｍｌの濃度とした。時々混合しながらインキュベーションした後、試料を５〜６ｍｌの上記培地で洗浄した。フシン／ＣＸＣＲ４に特異的なマウスモノクローナル抗体（１２Ｇ５，ＩｇＧ２ａ）（５〜２０μｇ／ｍｌ添加）を用いて並行して細胞を染色した。陰性対照用には、ヒトＩｇＧ４またはマウスＩｇＧ２ａを５〜２０μｇ／ｍｌとして使用した。ついで、１：１００希釈した第２抗体または検出抗体とともに細胞を短時間インキュベーションした。使用検出抗体は、ＰＥ蛍光標識したヤギ抗ヒトＩｇＧＦ(ａｂ)'₂抗体（ヒトＩｇＧ４対照およびＳＤＦ−Ｆｃ試料用）またはヤギ抗マウスＩｇＧF(ａｂ'）₂抗体（マウスＩｇ対照、ネズミ抗ヒトフシン、およびネズミ抗ヒト細胞表面蛋白もしくはＣＤ３用）であった。さらに１５〜６０分間氷上で時々混合し、ついで、５〜６ｍｌの染色培地を添加し、細胞を４００μｌ中に懸濁し、ＦＡＣＳＣＡＮ（ＢＤ）蛍光活性化細胞アナライザーを用いて分析した。表２は、抗フシン抗体またはキメラＳＤＦ−１αケモカインポリペプチドＳ１ −３またはＳＫ２−２の結合による染色JurkatおよびＵ９３７細胞についての結果を示す。フシン特異的ｍＡｂ（１２Ｇ５）を用いる、ヒトＴ細胞系およびヒト単球系によるフシン／ＣＸＣＲ４発現の検出は、ＳＤＳ−Ｆｃ構築物ＳＫ２−２またはＳ１−３を用いる検出と同等である。急性Ｔ細胞白血球患者由来のJurkat 細胞、および組織球リンパ腫患者由来のマクロファージ様細胞系Ｕ９３７を用いた。５０μｌの染色バッファー（２％ＦＣＳ、２％ウサギ血清および０.１％アザイドを含有するＲＰＭＩ−１６４０（フェノールレッド不含、１０ｍＭＨＥＰＥＳ含有）またはＰＢＳからなる）を入れた１２ｘ７５ｍｍプラスチックチューブに約５ｘ１０⁵個の細胞を添加した。培地のみまたはマウスＩｇＧ２ａ対照抗体のいずれかからなる抗フシン染色対照は染色において同等の結果を示した。抗フシンｍＡｂ１２Ｇ５を染色バッファーで希釈して添加して、最終濃度１６ μｇ／ｍｌ（実験１）または２０μｇ／ｍｌ（実験２）とした。氷上で混合しながら３０分後、細胞を５ｍｌの染色バッファーで洗浄し、ヤギ抗マウスＩｇＰＥ（Southern Biotech）の１：１００希釈物１００-μｌを添加して細胞結合マウス抗体を検出した。ＳＤＦ−Ｆｃ染色用に、対照は培地のみまたはヒトＩｇＧ４抗体のいずれかからなっていた。ＳＤＦ−Ｆｃ構築物を添加して最終濃度０.５ μｇ／ｍｌ（実験１のＳＫ２−２の場合）または１μｇ／ｍｌ（実験２のＳ１− ３の場合）とした。撹拌しながら氷上で３０分後、細胞を５ｍｌの染色バッファーで洗浄し、ヤギ抗ヒトＩｇＰＥの１：１００希釈物１００μｌを添加して細胞結合ＳＤＦ−Ｆｃを検出した。対照抗体は第２抗体のみを上回る増加を示さなかった。抗フシン（１２Ｇ５）での染色はＳＤＦ−Ｆｃ構築物について見られる結果と同等であり、抗フシン抗体結合により示されるのと同じく、フシン受容体を発現しているすべてのヒト細胞はＳＤＦ−Ｆｃキメラポリペプチドにも結合することが示された。フシンを発現しないヒトＲＰＭＩ８８６６細胞(染色されないことにより示される)はＳＤＦ−Ｆｃキメラポリペプチドに結合しなかった（データ示さず）。表２中の実験１の結果は、図２にヒストグラムとして示す結果に対応している。ヒストグラムのｘ軸は３つの領域に分けられている（図２Ａ参照）。Ｍ１＝チャンネル１〜１１；Ｍ２＝チャンネル１１〜１２３；およびＭ３＝チャンネル１２３〜１３７０。これらの各領域中の適当にゲートされた（gated）細胞のパーセンテージとしてデータを示す。さらにピークチャンネルおよび中間数チャンネルも表２に示す。ピークチャンネルは、細胞の最大分配を含むチャンネルである。中間数は、このポイントの右または左に５０％の細胞が存在するチャンネルである。図２のパネルＡ〜Ｄは実験１についてのヒストグラムであり、抗フシン抗体１２Ｇ５をキメラポリペプチドＳＫ２−２と比較するものである。細線は対照のものであり、太線は１２Ｇ５（図２Ａおよび２Ｃ）またはＳＫ２−２（図２Ｂおよび２Ｄ）のものである。図２Ａおよび２ＢはJurkat細胞の染色を示す。図２Ｃおよび２ＤはＵ９３７細胞の染色を示す。表２抗フシンｍＡｂおよびＳＤＦ−Ｆｃ構築物によるJurkat細胞およびＵ９３７細胞染色表３抗フシンｍＡｂおよびＳＤＦ−Ｆｃ構築物によるリンパ球および樹状細胞染色 ^*マウスガンマ２ａ対照＋ヤギ抗マウスＰＥ第２工程^** ヒトＩｇＧ４対照＋ヤギ抗ヒトＰＥ第２工程表３は、抗フシン抗体またはキメラＳＤＦ−１αケモカインポリペプチドＳ１ −３またはＳＫ２−２の結合による、末梢血から単離されたＴリンパ球、ならびに樹状細胞およびヒト骨髄から単離された他の付着性細胞（ＩＬ−４およびＧＭＳＦ含有培地、ついで、ＴＮＦ含有培地での培養後のもの）の染色結果を示す。これらの結果は、フシン受容体を発現している種々の細胞がキメラＳＤＦ−１αケモカインポリペプチドに結合することを示す。表４抗フシンｍＡｂおよびキメラＳＤＦ−Ｆｃ構築物によるＵ９３７細胞染色中におけるヒトＳＤＦ−１β添加効果 ^*マウスガンマ２ａ対照＋ヤギ抗マウスＰＥ第２工程^** ヒトＩｇＧ４対照＋ヤギ抗ヒトＰＥ第２工程表４に示す実験のために、E．coliから調製された、Ｎ末端メチオニン残基を含んでいる精製ヒトＳＤＦ−１βケモカインを、抗フシン抗体またはキメラＳＤＦ−１αポリペプチドのいずれかと混合し、ついで、アザイド存在下で細胞とともに氷上でインキュベーションした。表４の結果は、ＳＤＦ−１βケモカイン量を１０倍に増加させると、細胞に対する抗フシン抗体の結合がある程度除去されるが、細胞に対するキメラＳＤＦ−Ｆｃポリペプチド量は減少しないことを示す。このことは、細胞上の結合部位（おそらく、フシン受容体）に対するキメラＳＤＦ −Ｆｃポリペプチドのアフィニティーが十分に高く、過剰のＳＤＦ−１βケモカインの添加によっても競合され得ないことを示唆する。細胞に対するＭＩＰ−１α−ＦｃおよびＭＩＰ−１β−Ｆｃキメラポリペプチドの結合は、上記と類似の細胞染色アッセイにより調べられる。実施例４−キメラポリペプチドによるカルシウムフラックスの変化または抑制細胞膜中に存在する受容体にケモカインが結合する場合、カルシウムフラックスが誘導されうる。キメラケモカインポリペプチドがこれらの受容体に結合する場合、カルシウムフラックスの期間、強度、または特性が変化しうるあい、カルシウムフラックスが抑制されうる。下記プロトコールを用いてこのカルシウムフラックスを測定することができ、受容体に対するケモカインおよびキメラケモカインポリペプチドの結合の影響を比較することができる。細胞を集め、第１洗浄バッファー（約ｐＨ７.２の１ｍＭＭＯＰＳまたはＨＥＰＥＳ、１ｍＭＣａＣｌ₂、１ｍＭグルコース、１４０ｍＭＮａＣｌ）で２回洗浄し、１ｍｌあたり１０⁷個に調節し、ローディング／ＦＡＣＳバッファー(約ｐＨ７.２の１ｍＭＭＯＰＳまたはＨＥＰＥＳ、１ｍＭＣａＣｌ₂、１ｍＭグルコース、１４０ｍＭＮａＣｌ、０.２％ＢＳＡ)に再懸濁する。使用直前にＦＬＵＯ−３エステルの５０μｇバイアル（Molecular Probes，cat．#F-12 42）を５０μｌのＤＭＳＯに溶解する。１ｍｌの各細胞に５μｌのＦＬＵＯ−３エスエステル（約５μＭ、異なる細胞タイプには異なる濃度が必要）を添加する。室温で２０〜３０分インキュベーションする。培地(例えば、ウシ胎児血清含有ＲＰＭＩ)で２回洗浄する。細胞を培地(またはローディング／ＦＡＣＳバッファー)に再懸濁して１ｍｌあたり１０⁷個とする。使用準備が整うまで氷上に保存する(あるいは室温保存)。カルシウムフラックスを試験するために、１ｍｌのバッファーあたり細胞１００μｌとして、細胞をローディング／ＦＡＣＳバッファー中に希釈する。ＦＡＣＳＣＡＮ（ＢＤ）蛍光活性化細胞アナライザーを用いてロードした細胞のバックグラウンド値を決定する（ＦＬ１チャンネルを使用；最大シグナル約２００にセット）。適当に刺激し（１またはそれ以上の試薬を順次用いる）、３〜１５分またはそれ以上ＦＡＣＳで読み、カルシウムフラックスによる蛍光の増加を観察する。イオノフォア（イオノマイシン）を陽性対照として使用して、試験細胞がカルシウムフラックスを示しうることを示すことができる。実施例５−キメラポリペプチドによる化学走性の刺激化学走性に関する下記アッセイのいずれかにより、化学走性を刺激するキメラケモカインポリペプチドの能力を試験することができる。これらのアッセイ（化学走性を誘導または阻止する蛋白を同定する）により、膜を越えての細胞の移動を誘導する細胞の能力、ならびに１の細胞集団の他の細胞集団への付着を誘導する細胞の能力が測定される。移動および付着の関する適当なアッセイは、Curren t Protocolsin Immunology，Ed by J.E．Coligan，A.M．Kruisbeek，D.H．Margu lies，E.M.Shevach，W.Strober，Pub．Greene Publishing Associates and Wile y-Interscience(Chapter 6.12，Measurement of alpha and beta Chemokines 6. 12.1-6.12.28;Taubet al．J．Clin．Invest．95:1370-1376，1995;Lind et al． APMIS 103:140-146,1995;Muller et al Eur．J．Immunol．25:1744-1748;Gruber et al．J．of Immunol.152:5860-5867，1994;Johnston et al．J．of Immunol ．153:1762-1768，1994（参照により、これらを本明細書に記載されているものとみなす）に記載されたものを包含するが、これらに限らない。実施例６−キメラポリペプチド結合による受容体のダウンモジュレーションケモカイン受容体をダウンモジュレーションするキメラＳＤＦ−Ｆｃポリペプチドの能力をヒトＳＤＦ−１βの能力と比較した。ヒトＳＤＦ−１βまたはキメラＳＤＦ−ＦｃポリペプチドのいずれかとともにJurkat細胞を３７℃で３時間または１５時間インキュベーションし、ついで、実施例３記載のごとく細胞を洗浄し、抗フシン抗体で染色した。模擬実験においては、ＳＤＦ−１βもキメラＳＤＦ−Ｆｃポリペプチドも含有しないＣＯＳ細胞上清とともに細胞をインキュベーションした。これらの実験の結果を表５に示す。表５ヒトＳＤＦ−１βまたはキメラＳＤＦ−Ｆｃとのインキュベーションによるフシン／ＣＸＣＲ４のダウンモジュレーションヒトＳＤＦ−１βによるフシン受容体の明かなダウンモジュレーションは、ＳＤＦ−１βがフシンに結合することによる、抗フシン抗体による染色ブロックのみによるものとはいえない。なぜなら、表４に示す結果は、ヒトＳＤＦ−１βの存在は、ここに見られる程度にまで抗フシン抗体の結合を妨げないことを示しているからである。キメラＳＤＦ−Ｆｃポリペプチドによるダウンモジュレーションは、このキメラポリペプチドとのインキュベーション後に抗フシン抗体が結合しないこと（表５）、および３〜１５時問のインキュベーション後に残存するキメラＳＤＦ−Ｆｃポリペプチドを検出するためのＰＥ−標識ヤギ抗ヒトＩｇによりこれらの細胞が弱く染色されること（データ示さず）により示される。ＭＩＰ−１α−ＦｃおよびＭＩＰ−１β−Ｆｃキメラポリペプチドが細胞に結合することによる受容体のダウンレギュレーションは、上記と類似の受容体ダウンレギュレーションに関するアッセイにより調べられる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｐ 37/04 Ｃ０７Ｋ 14/52 43/00 １１１ 16/24 Ｃ０７Ｋ 14/52 Ｇ０１Ｎ 33/53 Ｄ 16/24 ＰＣ１２Ｎ 5/10 33/566 Ｇ０１Ｎ 33/53 Ｃ１２Ｎ 15/00 ＺＮＡＡ 5/00 Ｂ 33/566 Ａ６１Ｋ 37/02 (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＧＷ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ (72)発明者スワンバーグ，スティーブン・エルアメリカ合衆国02118マサチューセッツ州ボストン、ショーミュート・アベニュー 524番、アパートメント１

Claims

【特許請求の範囲】１．キメラポリペプチドをコードする単離ポリヌクレオチドを含む組成物であって、キメラポリペプチドが、少なくとも１種の異種ポリペプチドに共有結合した少なくとも１種のケモカインポリペプチドを含むものである組成物。２．異種ポリペプチドがケモカインポリペプチドのアミノ末端に共有結合している請求項１の組成物。３．コードされるキメラポリペプチドが、異種ポリペプチドおよびケモカインポリペプチドに共有結合したリンカーポリペプチドを含むものである請求項２の組成物。４．異種ポリペプチドがケモカインポリペプチドのカルボキシル末端に共有結合している請求項１の組成物。５．コードされるキメラポリペプチドが、異種ポリペプチドおよびケモカインポリペプチドに共有結合したリンカーポリペプチドを含むものである請求項４の組成物。６．ケモカインポリペプチドがＳＤＦ−１α由来のものである請求項１の組成物。７．ケモカインポリペプチドがＳＤＦ−１αである請求項１の組成物。８．ケモカインポリペプチドがＭＩＰ−１α由来のものである請求項１の組成物。９．ケモカインポリペプチドがＭＩＰ−１αである請求項１の組成物。１０．ケモカインポリペプチドがＭＩＰ−１β由来のものである請求項１の組成物。１１．ケモカインポリペプチドがＭＩＰ−１βである請求項１の組成物。１２．異種ポリペプチドがＦｃポリペプチドである請求項１の組成物。１３．ポリヌクレオチドが（ａ）配列番号：２のヌクレオチド１２からヌクレオチド１２１３までのヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｂ）配列番号：２のヌクレオチド６９からヌクレオチド１２１３までのヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｃ）配列番号：２のヌクレオチド７２からヌクレオチド１２１３までのヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｄ）配列番号：２のヌクレオチド７５からヌクレオチド１２１３までのヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｅ）配列番号：２のヌクレオチド配列のフラグメントを含むポリヌクレオチド；（ｆ）受託番号ＡＴＣＣ９８３３８として寄託されたクローンＳ１−３の全長蛋白コーディング配列のヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｇ）受託番号ＡＴＣＣ９８３３８として寄託されたクローンＳ１−３の成熟蛋白コーディング配列のヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｈ）配列番号：１のアミノ酸配列を含むキメラポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；（ｉ）配列番号：１のアミノ酸２０からアミノ酸３２８までのアミノ酸配列を含むキメラポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；（ｊ）配列番号：１のアミノ酸２２からアミノ酸３２８までのアミノ酸配列を含むキメラポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；（ｋ）配列番号：１のアミノ酸配列のフラグメントを含むキメラポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；（ｌ）上記（ａ）〜（ｋ）に示すポリヌクレオチドのいずれか１つに対して相捕的なヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；および（ｍ）上記（ａ）〜（ｌ）に示すポリヌクレオチドのいずれか１つの中のケモカインポリペプチドをコードする配列および異種ポリペプチドをコードする配列に、ストリンジェントな条件下で同時にハイブリダイゼーションしうるポリヌクレオチドからなる群より選択されるものである請求項１の組成物。１４．ポリヌクレオチドが（ａ）配列番号：４のヌクレオチド１２からヌクレオチド１２０７までのヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｂ）配列番号：４のヌクレオチド６９からヌクレオチド１２０７までのヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｃ）配列番号：４のヌクレオチド配列のフラグメントを含むポリヌクレオチド；（ｄ）受託番号ＡＴＣＣ９８３３９として寄託されたクローンＳＫ２−２の全長蛋白コーディング配列のヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｅ）受託番号ＡＴＣＣ９８３３９として寄託されたクローンＳＫ２−２の成熟蛋白コーディング配列のヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｆ）配列番号：３のアミノ酸配列を含むキメラポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；（ｇ）配列番号：３のアミノ酸２０からアミノ酸２３６までのアミノ酸配列を含むキメラポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；（ｈ）配列番号：３のアミノ酸配列のフラグメントを含むキメラポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；（ｉ）上記（ａ）〜（ｈ）に示すポリヌクレオチドのいずれか１つに対して相捕的なヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；および（ｊ）上記（ａ）〜（ｉ）に示すポリヌクレオチドのいずれか１つの中のケモカインポリペプチドをコードする配列および異種ポリペプチドをコードする配列に、ストリンジェントな条件下で同時にハイブリダイゼーションしうるポリヌクレオチドからなる群より選択されるものである請求項１の組成物。１５．ポリヌクレオチドが（ａ）配列番号：６のヌクレオチド１５からヌクレオチド１２２５までのヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｂ）配列番号：６のヌクレオチド８１からヌクレオチド１２２５までのヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｃ）配列番号：６のヌクレオチド配列のフラグメントを含むポリヌクレオチド；（ｄ）受託番号ＡＴＣＣ９８３４１として寄託されたクローンＭＰ−１の全長蛋白コーディング配列のヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｅ）受託番号ＡＴＣＣ９８３４２として寄託されたクローンＭＰ−２の全長蛋白コーディング配列のヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｆ）受託番号ＡＴＣＣ９８３４０として寄託されたクローンＭＰ−６の全長蛋白コーディング配列のヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｇ）受託番号ＡＴＣＣ９８３４１として寄託されたクローンＭＰ−１の成熟蛋白コーディング配列のヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｈ）受託番号ＡＴＣＣ９８３４２として寄託されたクローンＭＰ−２の成熟蛋白コーディング配列のヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｉ）受託番号ＡＴＣＣ９８３４０として寄託されたクローンＭＰ−６の成熟蛋白コーディング配列のヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｊ）配列番号：５のアミノ酸配列を含むキメラポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；（ｋ）配列番号：５のアミノ酸２３からアミノ酸３３１までのアミノ酸配列を含むキメラポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；（ｌ）配列番号：５のアミノ酸配列のフラグメントを含むキメラポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；（ｍ）上記（ａ）〜（ｌ）に示すポリヌクレオチドのいずれか１つに対して相捕的なヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；および（ｎ）上記（ａ）〜（ｍ）に示すポリヌクレオチドのいずれか１つの中のケモカインポリペプチドをコードする配列および異種ポリペプチドをコードする配列に、ストリンジェントな条件下で同時にハイブリダイゼーションしうるポリヌクレオチドからなる群より選択されるものである請求項１の組成物。１６．ポリヌクレオチドが（ａ）配列番号：８のヌクレオチド１６からヌクレオチド１２２６までのヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｂ）配列番号：８のヌクレオチド８５からヌクレオチド１２２６までのヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｃ）配列番号：８のヌクレオチド配列のフラグメントを含むポリヌクレオチド；（ｄ）受託番号ＡＴＣＣＸＸＸＸＸとして寄託されたクローンＭＰＢ−Ｘの全長蛋白コーディング配列のヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｅ）受託番号ＡＴＣＣＸＸＸＸＸとして寄託されたクローンＭＰＢ−Ｘの成熟蛋白コーディング配列のヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；（ｆ）配列番号：７のアミノ酸配列を含むキメラポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；（ｇ）配列番号：７のアミノ酸２４からアミノ酸３３１までのアミノ酸配列を含むキメラポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；（ｈ）配列番号：７のアミノ酸配列のフラグメントを含むキメラポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；（ｉ）上記（ａ）〜（ｈ）に示すポリヌクレオチドのいずれか１つに対して相捕的なヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；および（ｊ）上記（ａ）〜（ｉ）に示すポリヌクレオチドのいずれか１つの中のケモカインポリペプチドをコードする配列および異種ポリペプチドをコードする配列に、ストリンジェントな条件下で同時にハイブリダイゼーションしうるポリヌクレオチドからなる群より選択されるものである請求項１の組成物。１７．ポリヌクレオチドが発現制御配列に作動可能に連結されている請求項１の組成物。１８．請求項１７の組成物で形質転換された宿主細胞。１９．哺乳動物細胞である請求項１８の宿主細胞。２０．（ａ）請求項１８の宿主細胞の培養物を適当な培地中で増殖させ；ついで（ｂ）培養物から蛋白を精製することを含む、キメラポリペプチドの製造方法。２１．請求項２０の方法により製造されるポリペプチド。２２．成熟ポリペプチドを含む請求項２１のポリペプチド。２３．キメラポリペプチドを含む組成物であって、キメラポリペプチドが、少なくとも１種の異種ポリペプチドに共有結合した少なくとも１種のケモカインポリペプチドを含むものである組成物。２４．異種ポリペプチドがケモカインポリペプチドのアミノ末端に共有結合している請求項２３の組成物。２５．キメラポリペプチドが、異種ポリペプチドおよびケモカインポリペプチドに共有結合したリンカーポリペプチドを含むものである請求項２４の組成物。２６．異種ポリペプチドがケモカインポリペプチドのカルボキシル末端に共有結合している請求項２３の組成物。２７．キメラポリペプチドが、異種ポリペプチドおよびケモカインポリペプチドに共有結合したリンカーポリペプチドを含むものである請求項２６の組成物。２８．ケモカインポリペプチドがＳＤＦ−１α由来のものである請求項２３の組成物。２９．ケモカインポリペプチドがＳＤＦ−１αである請求項２８の組成物。３０．ケモカインポリペプチドがＭＩＰ−１α由来のものである請求項２３の組成物。３１．ケモカインポリペプチドがＭＩＰ−１αである請求項３０の組成物。３２．ケモカインポリペプチドがＭＩＰ−１β由来のものである請求項２３の組成物。３３．ケモカインポリペプチドがＭＩＰ−１βである請求項３２の組成物。３４．異種ポリペプチドがＦｃポリペプチドを含むものである請求項２３の組成物。３５．キメラポリペプチドが（ａ）配列番号：１のアミノ酸配列；（ｂ）配列番号：１のアミノ酸２０からアミノ酸３２８までのアミノ酸配列；（ｃ）配列番号：１のアミノ酸２１からアミノ酸３２８までのアミノ酸配列；（ｄ）配列番号：１のアミノ酸２２からアミノ酸３２８までのアミノ酸配列；および（ｅ）配列番号：１のアミノ酸配列のフラグメントからなる群より選択されるアミノ酸配列を含むものである請求項２３の組成物。３６．キメラポリペプチドが（ａ）配列番号：３のアミノ酸配列；（ｂ）配列番号：３のアミノ酸２０からアミノ酸３２６までのアミノ酸配列；および（ｃ）配列番号：３のアミノ酸配列のフラグメントからなる群より選択されるアミノ酸配列を含むものである請求項２３の組成物。３７．キメラポリペプチドが（ａ）配列番号：５のアミノ酸配列；（ｂ）配列番号：５のアミノ酸２３からアミノ酸３３１までのアミノ酸配列；および（ｃ）配列番号：５のアミノ酸配列のフラグメントからなる群より選択されるアミノ酸配列を含むものである請求項２３の組成物。３８．キメラポリペプチドが（ａ）配列番号：７のアミノ酸配列；（ｂ）配列番号：７のアミノ酸２４からアミノ酸３３１までのアミノ酸配列；および（ｃ）配列番号：７のアミノ酸配列のフラグメントからなる群より選択されるアミノ酸配列を含むものである請求項２３の組成物。３９．キメラポリペプチドが配列番号：１のアミノ酸配列を含むものである請求項２３の組成物。４０．キメラポリペプチドが配列番号：３のアミノ酸配列を含むものである請求項２３の組成物。４１．キメラポリペプチドが配列番号：５のアミノ酸配列を含むものである請求項２３の組成物。４２．キメラポリペプチドが配列番号：７のアミノ酸配列を含むものである請求項２３の組成物。４３．さらに医薬上許容される担体を含む請求項２３の組成物。４４．請求項２３のケモカインポリペプチドおよび異種ポリペプチドの両方と反応する抗体を含む組成物。４５．（ａ）請求項２３の組成物を、相互作用につき試験すべき分子を含む組成物と混合し、第１の混合物を得て；（ｂ）第１の混合物を、インジケーター分子を含む組成物と混合し（その結果、インジケーター分子は第１の混合物により変化されうるものである）；ついで（ｃ）変化したインジケーター分子の存在を検出することを含む、キメラポリペプチドと相互作用しうる分子の同定方法。４６．治療上有効量の少なくとも１の請求項２３の組成物を投与することを含む、生物の一領域に移動性細胞を誘引する方法。４７．治療上有効量の少なくとも１の請求項２３の組成物を投与することを含む、血管新生の刺激方法。４８．治療上有効量の少なくとも１の請求項２３の組成物を投与することを含む、血管新生の抑制方法。４９．治療上有効量の少なくとも１の請求項２３の組成物を投与することを含む、炎症の予防、治療または改善方法。５０．治療上有効量の少なくとも１の請求項２３の組成物を投与することを含む、自己免疫症状の予防、治療または改善方法。５１．治療上有効量の少なくとも１の請求項２３の組成物を投与することを含む、抗原提示細胞活性の促進方法であって、請求項２３の少なくとも１種のキメラポリペプチドが抗原分子を含むものである方法。５２．ワクチンおよび治療上有効量の少なくとも１の請求項２３の組成物を投与することを含む、免疫応答の誘導方法。５３．請求項２３の少なくとも１種のキメラポリペプチドに受容体を結合させることを含む、受容体機能を変化させる方法。５４．請求項２３の少なくとも１種のキメラポリペプチドに受容体を結合させ、機能的受容体分子の数を減少させることを含む、受容体機能を低下させる方法。５５．治療上有効量の少なくとも１の請求項２３の組成物を投与することを含む、ＨＩＶ感染の予防、治療または改善方法。５６．投与される組成物が、ＳＤＦ−１αを含む請求項２３のキメラポリペプチド、ならびにＭＩＰ−１αおよびＭＩＰ−１βからなる群より選択されるケモカインを含む請求項２３のキメラポリペプチドを含むものである請求項５５の方法。