JP2001504443A

JP2001504443A - アーティチョーク（Ｃｙｎａｒａ）抽出物の使用

Info

Publication number: JP2001504443A
Application number: JP50477998A
Authority: JP
Inventors: ルエプ、ミシェル、オー
Original assignee: アールファルマゲゼルシャフトミットベシュレンクターハフツングウントコンパニーコマンデットゲゼルシャフト
Priority date: 1996-07-06
Filing date: 1997-07-05
Publication date: 2001-04-03
Also published as: KR20000022470A; EP0912189A1; DE19627376A1; WO1998001143A1; US20020012708A1; AU3541697A

Abstract

(57)【要約】本発明は、アーティチョーク（Cynara）抽出物、任意にEchinacea抽出物および／またはイラクサ（Urtica）抽出物と組み合わせたアーティチョーク（Cynara）抽出物、特に乾燥抽出物の、医薬品製造のための新規な使用および経口投与可能な医薬品に関する。特に、本発明は、小腸（医薬品または感染による損傷）、骨髄（形成不全および不全、例えば、医薬品または放射線により生じる無顆粒球症の結果生じる形成不全および不全）、胸腺（機能不全、形成不全または形成不良）、脾臓（機能不全）、リンパ節（医薬品または放射線による損傷に起因する形成不全または形成不良）の疾患を治療するための医薬品の製造のための、Echinaceaおよび／またはイラクサ抽出物と組み合わせたアーティチョーク（Cynara）乾燥抽出物の使用、および鎮痛、肝臓、膵臓および腎臓疾患、高血圧、悪性腫瘍、特に、乳房、頸部、結腸または前立腺のがんに対する、これも化学的医薬品と組み合わせた、補助療法としての、アーティチョーク（Cynara）乾燥抽出物の使用に関する。Cynara乾燥抽出物はまた、白血球減少症、顆粒球減少症、リンパ球減少症、赤血球減少症および免疫グロブリン欠乏症の治療のための細胞性免疫促進にも好適である。また、小腸、膵臓および腎臓の炎症性疾患、Ａ型、Ｂ型、Ｃ型肝炎、皮膚病変（足の潰瘍）、Ｉ型およびＩＩ型単純疱疹および帯状疱疹などの細菌またはウィルスで誘導される疾患にも好適である。

Description

【発明の詳細な説明】アーティチョーク（Cynara）抽出物の使用本発明は、アーティチョーク（Cynara）抽出物、任意にEchinacea抽出物および／またはイラクサ（Urtica）抽出物と組み合わせたアーティチョーク（Cynara ）抽出物、特に乾燥抽出物の新規な経口使用に関する。１６世紀頃から、植物に関する書籍が広く使用されるようになったため、アーティチョークを薬として使用することが一般に知られるようになった。民間療法では、アーティチョークは胆汁産生の低下に起因する消化不良の治療に使用することが推奨されており、また、肝治療剤や胆汁分泌促進剤である。この薬は水性抽出物およびアルコール抽出物の形で使用されてきた。第二の作用分野として、顕著な利尿作用が示されており、それがこの植物を脱水剤として使用する基礎となった。利尿の増加に伴って尿酸の排泄が増加するため、この薬は抗リウマチ剤として使用される。また、まれに糖尿病治療剤としても提案された。化学的に同定されてはいなかったが、ある化合物がアーティチョークの葉から単離されたのは非常に早く、１９３４年であり、すでに治療関連成分と呼ばれていた。この化合物は１９５４年にシナリンと同定されたばかりであった。全抽出物は明らかに追加作用物質または相乗作用物質を含有している。全抽出物の代わりに生の植物を摂取することもできる。活性物質のシナリンは本来含まれていないが、この植物を水性媒質中で茹でたときに、その加工中に生成される。重要成分として、カフェオイルキナ酸、苦味成分、フラボノイドの３種の物質が挙げられる。医薬品の目的には、おそらく根出葉の周年栽培からの大きな根出葉を使用する。これらの葉では、胆汁分泌促進活性を有する成分の含有量が最も高い。アーティチョーク抽出物の治療作用原理は単離されたCynaraの成分であるシナリンのみではなく、カフェオイルキナ酸全体に基づくことから、薬物の力はカフェオイルキナ酸全量によって決定される。優れた薬物は、カフェオイルキナ酸を少なくとも０．２％含有する。本発明の目的は、アーティチョーク抽出物を使用することにより、新規な薬および新規な可能な治療法を提供することであった。従って、本発明の第一の実施形態は、血清中の血糖、クレアチニンおよび／またはビリルビン濃度を低下させるため、白血球減少症、顆粒球減少症、リンパ球減少症および感染や化学物質により生じた器官および組織の障害、特に小腸のＯ −ＭＡＬＴ系、骨髄、胸腺、脾臓、リンパ節、肝臓、膵臓および腎臓の障害の治療のための細胞性免疫促進のための、アーティチョーク（Cynara）抽出物、特に乾燥抽出物の使用である。好ましい実施形態は従属クレームから明らかである。本発明によれば、ラットを使用したinvivoの研究で、循環系および免疫系の規定されたパラメータおよび肝臓、膵臓、腎臓の規定された機能の規定されたパラメータは、生のアーティチョークの葉から得た、顆粒などのガレヌス処方の形の乾燥抽出物の影響を受ける可能性がある。被験物質を体重１ｋｇ当たり１００ｍｇ使用すると、 − 対照群と比較して、利尿作用に起因する体重の平均増加に対する軽度な負の逸脱作用 − 脾臓および胸腺の平均臓器重量の利用不能な変化 − 細胞性免疫促進の徴候としての、白血球、多形核顆粒球およびリンパ球、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ヘルパー細胞、サプレッサー細胞およびＮＫ（天然キラー）細胞数の増加、特に、Ｂリンパ球の優勢で、特異的な増加 − クレアチニン、ビリルビン、尿素、コレステロール、トリグリセリド、グルコースおよびＧＰＴの低下が誘導される。治療上望ましい作用としては、 − 脂質代謝の病的異常に対する正の影響として表される、コレステロールおよびトリグリセリドの低下とその結果生じるじゅく腫形成のリスクファクターの低下 − 種々の原因により生じた病態形成の炎症過程に対する可能な非特異的治療としての規定された免疫適格細胞の一般的な増加 − 毒性作用により生じたＢリンパ球抑制の治療における補助としてのＢリンパ球細胞数の優勢で、特異的な増加 − 肝治癒効果の面での、ビリルビンおよび肝臓特異的活性値であるＧＰＴ値の低下 − 血糖降下作用と機能的に等しい血清グルコースの低下 − 腎機能およびタンパク質代謝により生成されるアンモニアの解毒の改良として示される血清クレアチニンおよび尿素の低下、およびこの反応サイクルに関連する肝細胞のミトコンドリア性能の増強 − 望ましくない作用が示されていないことが考えられる。規定された血液学的および臨床化学的分析値の記録された変化は、次の２つの側面から考えなければならない。本発明で使用したパラメータに関して観察された結果は、文献に記載されている通り、使用したアーティチョーク抽出物の肝治癒、肝保護および血中脂質低下作用は良好であるが、新規で、まだ知られていなかったことに、炭水化物代謝および肝機能や腎機能の異常ならびに細胞性免疫状態の不全に治療的状況で使用できる生物活性も良好であることを示している。経口投与する種々の起源および濃度のアーティチョーク抽出物は、細胞数の増加および全リンパ系細胞の相対的な細胞数の変化に関して生物学的同等性を示した。生物学的同等性は、臨床化学的パラメータであるビリルビン、クレアチニン、ＧＰＴ、コレステロール、カルシウム、カリウムおよびタンパク質についても認められた。本発明によれば、使用したアーティチョーク（Cynara）抽出物は細胞性免疫促進に特に適していることが発見された。この抽出物を使用すると、白血球、多形核顆粒球およびリンパ球、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ヘルパー細胞、サプレッサー細胞およびＮＫ細胞、特にＢリンパ球数を増加させた。アーティチョーク（Cynara）抽出物は、炭水化物代謝異常の治療、特に、前糖尿病的代謝状態の改善、インシュリンを含む化学的に規定された糖尿病治療剤の減量、膵臓の内分泌機能がいくらか残存している場合には、抽出物の併用投与に、特に有用である。肝機能障害および腎機能障害の治療の他に、アーティチョーク（Cynara）抽出物は、内因性因子および外因性因子、例えば、化学療法や放射線療法により生じる免疫系の障害の補助療法にも有用である。さらに、アーティチョーク（Cynara）抽出物は、前糖尿病状態、例えば、成人型の前糖尿病状態、潜在的な糖尿病性代謝状態、例えば、妊娠、感染、ストレス、肥満による潜在的な糖尿病性代謝状態の治療にも有用であり、膵臓の機能がいくらか残存している場合には、併用療法の形で糖尿病の補助療法としても有用である。動物実験で、Cynara製剤は膵臓の内分泌機能を上昇させた点で、膵臓のランゲルハンス島の形態機能基盤を改善する。動物実験でも、臨床的にも、明確な血糖降下作用が認められた。治療の観点から、膵臓機能がいくらか残存する場合に、これは、 − インシュリンの減量（Cynara製剤を３×６００〜９００ｍｇ／日で併用する場合には、インシュリンの量を個別に減量することが必要となる） − 化学的に規定された糖尿病治療剤（各必要量）の減量を意味し、化学的に規定された糖尿病治療剤（各必要量）の減量は、化学的に規定された経口糖尿病治療剤の長期投与による肝毒性、腎毒性、心毒性に対する保護作用を有する。この使用抽出物の中心的な代謝臓器である肝臓に対する作用機作をさらに明らかにするために、四塩化炭素を同時に投与して、in vivoで、毒性による肝実質の部分的変化を誘導した。四塩化炭素で引き起こされる肝壊死は本発明のアーティチョーク（Cynara）抽出物の使用で予防されなかったが、その拡大は明らかに抑えられた。病巣周囲の損傷の少ないまたは損傷を受けていない実質領域は、緩いクロマチン構造と大きな、好塩基性の高い核小体を有する特に大きく明るい核を特徴とする、核の機能的膨潤により目立っていた。核壊死間の無傷の肝細胞領域でタンパク質の生合成が増加していることを示すこれらの微小形態学的徴候は、肝細胞の有糸分裂および二核または多核肝細胞の発生頻度の上昇を伴っていた。これらの知見は、アーティチョーク（Cynara）抽出物の併用療法により誘導された、肝細胞代謝の動員および肝細胞再生の開始と解釈できる。この評価は、コハク酸デヒドロゲナーゼ酵素活性の定性的、定量的検出により支持された。アーティチョーク抽出物の使用の影響下では、コハク酸デヒドロゲナーゼ陰性領域が明らに減少した。無傷の病巣周辺領域の特徴はコハク酸デヒドロゲナーゼの活性が過剰なことである。これは無傷の実質による代償性の過剰な強力反応の表れと考えられる。別のin vivoの研究では、細胞増殖抑制剤、特にシクロホスファミドの毒性により誘導された肝臓およびリンパ系器官の変化に対するアーティチョーク抽出物およびそのEchinacea抽出物（E．pallidaおよびE．angustifolia）との併用の作用を検討した。シクロホスファミドはラットで、赤色骨髄、リンパ系器官、パイエル斑、胸腺、脾臓およびリンパ節の萎縮を誘導する。Cynara抽出物を併用投与すると、シクロホスファミドの損傷作用は軽減された。さらに、Cynara抽出物と Echinacea抽出物を併用投与すると、細胞損傷作用が明らかにさらに減少した（C ynaraとEchinaceaの相乗作用）。細胞増殖抑制作用のあるアルキル化剤を投与した後、Cynara製剤を併用投与すると、骨髄、胸腺、脾臓、腸間膜および頸部リンパ節およびパイエル斑で部分的な偶発的再生が組織学的に検出され、Echinacea 抽出物を併用投与することにより、Cynara製剤は正の相乗的影響を受けている。微小形態に関しては、対応の器官での器官特異的構造の再生と骨髄、特にリンパ系の無傷の細胞による細網間質の明らかなリポピュレーション(repopulation)がはっきりと示される。血液形成組織およびリンパ網内性組織のこの偶発的な再生からは、病的な増殖の増加として表される、有糸分裂活性の上昇の徴候は全く明らかにされない。シクロホスファミドは、一般にＴ細胞よりＢ細胞でより明らかな抗増殖作用によるリンパ球の除去の形で、胸腺の萎縮を誘導した。シクロホスファミドのリンパ球毒性のこれらの種々の作用はこれらの細胞の質によって代謝性能が異なることに起因する。ラットに１４日間、アーティチョーク抽出物とシクロホスファミドを併用経口投与した後、アーティチョーク抽出物の抗毒素作用により、胸腺の皮質および髄質からのリンパ球の完全な除去は子防された。この作用は、Echinacea抽出物の追加投与によりさらに高めることができた。既に、アーティチョーク抽出物単独の治療上の影響下で、胸腺のリンパ球によるリポピュレーションが明らかに起こっており、これは対照群と比較し、約４０％であった。リンパ節の場合、例えば、細網組織のリンパ系細胞によるリポピュレーションが組織学的に認められる。皮質近縁領域では、高密度に詰まった無傷のリンパ系細胞が主であり、皮質領域には、明らかに皮膜下リンパ小節を形成する傾向のある、ゆるやかに配置された無傷のリンパ球がある。リンパ節におけるリンパ網内組織の特徴的な微小構造の回復については、その機能も明らかに回復する。最近、リンパ節の種々の形の応答の実際的な重要性が認められてきた。がん（乳房のがん、頸部のがん）のドレーン領域でＴ細胞（皮質近縁領域）の促進が認められた場合、Ｂ細胞領域が活性化された場合やリンパ節のどの領域も活性化されなかった場合と比較し、患者の予後は良好である。内因性免疫系による外因性の生きている病原体に対する防御の成功は、宿主の免疫応答の強度および質に非常に依存する。宿主生物による無傷の細胞性防御および体液性防御により、腫瘍の形成や拡大を抑えることができる。しかし、今日、最も重要な免疫不全の原因はがん患者に対する細胞増殖抑制作用のあるコルチコステロイド療法である。最後に、Cynara製剤の経口投与は、Echinacea処方と併用した場合も、悪性腫瘍の治療として、また、腫瘍に対する細胞増殖抑制作用のある化学療法および放射線療法の補助療法として好適である。種々の二次的代用物が抽出物に特異的な薬動力学的活性プロフィールを示すが、活性では「一般的な作用の基本スキーム」が認められる。活性物質、投与量および投与期間に依存して、標的器官は内分泌系、神経系および免疫系の間の相互作用の影響を受けた。 Urtica抽出物と根、葉および草本部分からのCynara抽出物をラットの動物モデルに投与した後、Cynara抽出物およびEchinacea抽出物について上記したものと同様の作用が、骨髄、胸腺、脾臓、リンパ節、肝臓、膵臓および腎臓および小腸のＯ−ＭＡＬＴ系に対して実験的に認められた。同じ研究で、アーティチョーク抽出物は腸間膜リンパ節に対しても同じ治療作用を示した。この器官でも、アーティチョーク抽出物による治療下では、シクロホスファミド中の完全な動員はリンパ球によるリポピュレーションで代償された。この保護作用は主として、Ｔ領域のリンパ芽球に関連し、Ｂ領域からのリンパ球およびＴ領域からの成熟した微小細胞性リンパ球ではそれ程明らかではなかった。臨床の外来患者での研究では、アーティチョーク抽出物の作用を、高脂血症と随伴する肝疾患を有する患者で１４週間にわたり検討した。この抽出物は高コレステロール血症および／または高トリグリセリド血症の患者の病的な代謝状態に対し正の影響を与えた。同時に、肝特異性酵素活性の上昇も抑えた。実施例５０歳から８０歳の患者４０例を対象として、高脂血症や肝障害の患者に対するアーティチョーク抽出物の効果を調べるための臨床試験を実施した。患者には、以下に示す組成の抽出物混合物を平均で１９日間投与した。アーティチョークの葉の抽出液の乾燥粉末（２５〜３５：１）単位重量当たり６０．００容量％抽出溶媒：純水ＤＡＢ１０（ＤＡＢ＝ドイツ薬局法）その他の成分：グルコース１２．７５重量％シリカの微細粉末７．７５重量％滑石２．８重量％ステアリン酸マグネシウム０．８重量％炭酸カルシウム１１．４重量％ショ糖０．６重量％ジャガイモ澱粉３．９重量％患者は既存の脂質代謝と肝障害について治療したが、これ以外の基礎疾患（糖尿病、高血圧、心臓障害、高尿酸血症、喘息、てんかん、甲状腺疾患、骨粗鬆症）に対して併用していた長期的投薬は変更することなく継続した。対象患者のうち、肝臓疾患患者が２８％、化学組成が明らかな糖尿病治療剤を服用している糖尿病患者が１２％、脂質とγ−ＧＴ値が高い患者が４７％であったが、この中には心疾患や高血圧の患者が含まれていた。心臓血管疾患を有する患者では、アーティチョーク製剤（３００ｍｇ）の投与期間中、ＡＣＥ阻害剤（４５％）、α−２受容体拮抗剤（５％）、カルシウム拮抗剤（４０％）、利尿薬（４５％）、あるいはこれらの薬剤の複数の組み合わせ（１５％）を継続投与した。アーティチョーク製剤を、ＡＣＥ阻害剤、α−２受容体拮抗剤、カルシウム拮抗剤、利尿薬、あるいはこれらの薬剤の複数の組み合わせと併用投与した際に、投与後平均１９日目以降に、γ−ＧＴ値が８．７％減少、ＧＰＴ値が１１．６％減少、ＧＯＴ値が１０．０％減少したのは注目に値する。高脂血症と高血圧がみられた患者２１例では、脂質レベルを低下させるアーティチョーク療法の結果、コレステロール値やトリグリセリドの減少だけでなく、平均５％の収縮期血圧の低下や６．８％の拡張期血圧低下が観察された。このことからアーティチョーク療法は、一定範囲の高血圧に対する抗高血圧作用や、化学組成の明らかな抗高血圧剤との併用で、血圧を下げる相乗効果を有する補助薬ともなりえると結論できる。これは、化学組成の明らかな抗高血圧剤の必要用量を減少できることを意味し、この結果、望ましくない副作用の危険を減少させることができる。たとえば、肝臓におけるγ−ＧＴの合成は、コレスターゼや慢性的なアルコール摂取、あるいは治療効果のある用量の薬剤によって誘導させることができ、肝細胞中の可溶性γ−ＧＴの活性上昇と膜結合型の増加が起こる。合成誘導後の血清中γ−ＧＴ増加量は、病気の種類や程度に左右される。これらの関係、特に、化学組成が明らかな薬剤の慢性投与などで認められるγ −ＧＴ活性の上昇や、逆にアーティチョーク製剤の同時投与による高いγ−ＧＴ活性の低下からは、アーティチョーク乾燥抽出物の併用投与は、肝臓毒性を高めることはなく、むしろ有意に低下させると結論できる。これはＡＣＥ阻害剤、α −２受容体拮抗剤、カルシウム拮抗剤、利尿剤、あるいは対応する合成剤で部分的に顕著であった。アーティチョーク製剤のこのような肝臓に対する保護的・治療的効果は、クロフィブレートとシクロフォスファミドを同時投与する動物実験の結果からも裏付けられている。ここで評価に用いた臨床化学パラメータは、上記のin vivo試験で用いられたパラメータと実質的には同じであった。患者を対象にした本試験で得られたいくつものパラメータの結果はこれと酷似していた。総コレステロール −１２．０％（患者）対−３０％（in vivo）ＧＰＴ −１１．９％対−１１．６％ビリルビン −７．７％対−５．１％グルコース −８．７％対−８．５％方法論的に精密に収集された再現性のあるこのin vivo実験のデータは、ヒトについての解析にもそのまま用いることができると考えられる。平均体重３１０グラムの雄のウィスター・ラットを、室温２１℃±１℃、相対湿度約６０％、昼夜１２時間ずつの通常環境で飼育した。飼育環境に順応させるため、実験前にこの環境で１２日間飼育した。餌は、ペレット状の標準飼料Altromin C1000を与えた。飲水は、水道水を無制限に与えた。アーティチョーク抽出物の組成および投与量は以下の通りである。１．生のアーティチョークの葉から得られた標準的な乾燥抽出物（２５〜２３：１）と前述の少量成分を含有した炭酸カルシウムと糖を含有する顆粒。抽出溶媒：蒸留水ＤＡＢ１０出発薬剤：アーティチョーク（Cynarae Folium）の生葉、Hagers Handbuch/ PFX 剤型：顆粒１．６７ｍｇ（無処理のアーティチョークの乾燥抽出物ＦＣ約１ｍｇを０．０２ｍｌの蒸留水に懸濁）、０．５ｍｌ＝２５ｍｇ／２５０ｍｇ体重。１０匹の雄のウィスター・ラットを下表のような処理群に分けて検討した。本発明の試験物質ＦＣを、麻酔していない動物の胃内に、硬質球状プローブを使用して１日１回、７日間投与した。投与溶液は投与直前に新たに調製し、均質な形で投与した。対照群の個体には同量の生理食塩水を与えた。以上の２試験は、規定されたin vivoモデルを用いて、治療効果を異なる作用を受ける生理学的フィードバック機構の相乗効果として、早期に指示する特異的マーカを同時に確率することを目的としていた。詳細には、末梢血で検出を行った。 − 複合的に：赤血球（ＲＢＣ）、白血球（ＷＢＣ）、血小板（ＰＬＴ）、ヘモグロビン（ＨＧＢ）、ヘマトクリット（ＨＣＴ）、赤血球恒数：平均赤血球容積（ＭＣＶ）、平均赤血球血色素量（ＭＣＨ）、平均赤血球血色素濃度（ＭＣＨＣ）、赤血球分布幅（ＲＤＷ） − フローサイトメトリーで：白血球鑑別：顆粒球、単球、リンパ球、Ｂ細胞、Ｔ細胞、ヘルパー細胞、サプレッサー細胞 − 複合的に：ＧＰＴ、ＧＯＴ；グルコース、コレステロール、トリグリセリドＮａ）Ｃｌ；クレアチニン、尿素。完全自動血液分析機器であるSysmex K-1000を用いて次のものが測定できた：ＷＢＣ、ＲＢＣ、ＰＬＴ、ＨＧＢ、ＨＣＴ、ＭＣＶ、ＭＣＨ、ＭＣＨＣ。この装置の本体は基本的に水圧システム（ＨＳ）と電子システム（ＥＳ）から構成されていた。ＨＳは、吸引、ピペッティング、希釈、撹拌、細胞破砕に用いた。ＥＳは、ＨＳで得られた信号を分析して変換し、結果をプリンタへ送った。またＥＳは、マイクロプロセッサを用いて検査手順や検査ステーションをモニタし、検査の精度管理を行った。ヘマトクリット値は血液中の赤血球量をパーセントで示したものである。ヘモグロビンは赤血球中の色素蛋白であるが、赤血球数やヘマトクリット値とともに貧血の重要な診断基準とした。分類は赤血球恒数を用いて行った。赤血球の大きさとヘモグロビン量は、赤血球容積（ＭＣＶ＝平均赤血球容積）、赤血球のヘモグロビン含有量（ＭＣＨ＝平均赤血球血色素量）、平均赤血球血色素濃度（ＭＣＨＣ）から求めた。赤血球分布幅（ＲＤＷ）は、赤血球大小不同の尺度とした。酵素、グルコース、脂質、電解質、クレアチニン、尿素、蛋白などのパラメータは、分析装置Cobas Miraで測定したが、選択的、方法志向性、光度計測、あるいはイオン選択法を使い分けた。報告書の追補に精度管理データと解析用の統計データを示した。白血球の鑑別は、適切な全血塗抹標本を作成してフローサイトメトリーFACSca nで行った（散乱光測定法）。白血球の鑑別は、白血球を特異的なモノクロナール抗体と反応させた後に蛍光活性のある細胞を識別した（蛍光測定法）。投与後７日目の定量分析結果は以下の通りであった。白血球（総数）、リンパ球（総数）、Ｔリンパ球（ＣＤ２＋／ＣＤ４５ＲＡ−）、Ｂリンパ球（ＣＤ２−／ＣＤ４５ＲＡ＋）、ヘルパーリンパ球（ＣＤ４−／ＣＤ８ｂ＋）、およびＮＫ細胞（ＣＤ８ａ＋／ＣＤ８ｂ−）リンパ球の表現型を確認するため、以下に示すＰｈａｒｍｉｎｇｅｎ社（サンディエゴ、米国）の蛍光色素が結合した抗体をリンパ球に反応させた。フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）結合・抗ラットＣＤ２マウスモノクロナール抗体Ｒ−フィコエリトリン（Ｒ−ＰＥ）結合・抗ラットＣＤ４５ＲＡ（あるいはＡ／Ｂ）マウスモノクロナール抗体フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）抗ラットＣＤ４マウスモノクロナール抗体Ｒ−フィコエリトリン（Ｒ−ＰＥ）結合・抗ラットＣＤ８（ββ鎖）マウスモノクロナール抗体フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）結合・抗ラットＣＤ８ａマウスモノクロナール抗体標識：ａ）ＣＤ２／ＣＤ４５ＲＡ＝Ｔ細胞およびＢ細胞ｂ）ＣＤ４／ＣＤ８ｂ＝Ｔ₄細胞およびＴ₈細胞ｃ）ＣＤ８ａ／ＣＤ８ｂ＝ＮＫ細胞各抗体５μｌをＮａＥＤＴＡ含血液５０μｌと室温暗所で２０分反応させる。反応液を２ｍｌのBecton-Dickinson社製溶血試薬（Lyses Reagent）と混合し、上記の条件で１０分反応させた。次に４００×ｇで６分間遠心し上清を分離した。沈殿を３ｍｌの洗浄液（Cell Wash）で洗い、４００×ｇで６分間遠心した。ペレットを１００μｌのCell Washに懸濁した。この懸濁液をフローサイトメトリーで分析した。実験前の順応期間と実験期間を通して、試験動物の一般状態を観察記録した。また、体重は毎日測定した。実験の最後にすべての試験動物を無痛屠殺し、解剖した。腹腔、骨盤内、胸郭内の器官を肉眼観察し、脾臓と胸腺の重量を測定した。いずれの個体にも胃内投与に由来する機能障害はみられなかった。実験終了まで試験物質を投与された個体に臨床的な問題行動はみられなかった。投与期間中の平均体重増加を以下に示す。Ｉ対照群１２．６％ＩＩＦＣ群８．１％ＦＣ投与群の平均体重増加率は対照群ほど大きくなかった。これは主に、試験物質のアクアレティック（Aquaretic）作用によるものである。試験物質ＦＣの効力は、白血球数（ＷＢＣ）、赤血球数（ＲＢＣ）、血小板数（ＰＬＴ）に対する刺激効果から間接的に求めた。表１は、投与後のこれらの細胞数をそれぞれ示したもので、表２は、各処理群の平均数と対照群とを比較した際の差異をパーセントで示している。本発明の試験物質ＦＣの測定結果は以下の通りである。 − 明白な白血球数の３５％増加¹⁾ − 他のパラメータ（ＲＢＣやＰＬＴなど）は、−１％から−２％の生理学的範囲にとどまった。（¹⁾対照群の値＝１００％）赤血球数（ＲＢＣ）の単位は１０¹²／ｌ、白血球数（ＷＢＣ）と血小板数（ＰＬＴ）の単位は１０⁹／ｌ。ヘモグロビンのモル濃度（ＨＧＢ）の単位はｍｍｏｌ／ｌ、ヘマトクリット（ＨＣＴ）はｌ／ｌ、ＭＣＶはｆｌ、ＭＣＨＣはｍｍｏｌ／ｌ、ＭＣＨはａｍｏｌである。（変換方法：ｍｍｏｌ／ｌ＝ｇ／ｄｌ×０．６２０６；ｌ／ｌ＝％×１００；ｆｌ＝μｍ³；ｆｍｏｌ＝ｐｇ×０．０６２；ａｍｏｌ＝６２×ｐｇ）赤血球数の単位は１０²／ｌ、白血球数と血小板数の単位は１０⁹／ｌ。ヘモグロビンのモル濃度の単位はｍｍｏｌ／ｌ、ヘマトクリット（ＨＣＴ）はｌ／ｌ、ＭＣＶはｆｌ、ＭＣＨはａｍｏｌ、ＭＣＨＣはｍｍｏｌ／ｌである。対照群の各パラメータの値と比較した際の変動パーセント。試験物質ＦＣは、ＨＧＢ、ＨＣＴ、ＭＣＶおよびＭＣＨＣに対して生理学的に注目すべき効果を示さなかった。以下の臨床化学的な代謝物を複合した方法特異的な方式で定量分析した。ビリルビン、クレアチニン、尿素、グルタミン酸オキザロ酢酸トランスアミナーゼ（ＧＯＴ）、グルタミン酸ピルビン酸トランスアミナーゼ（ＧＰＴ）、γ− グルタミルトランスフェラーゼ（ＧＧＴ）、グルコース、コレステロール、トリグリセリド、カルシウム、およびナトリウム。試験物質ＦＣについての測定結果は以下の通りであった： − 明らかな減少がみられたものクレアチニン１６．７％ＧＰＴ１１．６％コレステロール３０．０％グルコース８．５％ − わずかな減少がみられたものビリルビン５．１％尿素４．６％ＧＬＤＨ３．２％トリグリセリド１．０％試験物質ＦＣによるビリルビン、クレアチニン、ＧＰＴ、コレステロール、カルシウム、カリウム、および蛋白の生物学的に等価な変化を計測したが、その性質も変動量も同等であった。処理群ＩＩでは、多核白血球、単球、Ｔリンパ球、Ｂリンパ球、ヘルパー細胞、サプレッサー細胞、およびＮＫ細胞の細胞数を対照群と比較して示した。試験物質ＦＣでは以下のものの増加率が認められた： − 白血球３５．２％¹⁾ リンパ球３１．１％Ｔリンパ球数１５．３％Ｂリンパ球数５８．５％ヘルパー細胞１４．０％サプレッサー細胞２０．３％単球２４．５％（¹⁾対照群の値＝１００％）

【手続補正書】特許法第１８４条の８第１項【提出日】平成９年７月２７日（１９９７．７．２７）【補正内容】請求の範囲１．全身的な免疫抑制状態の治療、および細胞性免疫促進のための医薬品を製造するための、アーティチョーク（Cynara）抽出物、特に、生の植物からの乾燥抽出物の使用。２．放射線、感染および化学物質により生じた器官および組織損傷、特に小腸のＯ−ＭＡＬＴ系（炎症性疾患、クローン限局性腸炎）、骨髄（骨髄形成不全）、胸腺（機能不全、形成不全または形成不良）、脾臓（機能不全）、リンパ節（医薬品または放射線による損傷に起因する形成不全または形成不良）、肝臓（萎縮、壊死）、Ａ型、Ｂ型およびＣ型肝炎、膵臓（プロテアーゼ、エステラーゼ、カーボハイドラーゼおよびヌクリアーゼの外分泌機能不全および内分泌機能による炭水化物代謝の異常［ランゲルハンス島］）および腎臓（不全）の障害の治療および白血球減少症、顆粒球減少症、リンパ球減少症および免疫グロブリン欠乏症の治療のための、請求項１に記載の使用。３．細胞性免疫促進により末端脈管系の白血球、多形核顆粒球およびリンパ球、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ヘルパー細胞、サプレッサー細胞およびＮＫ（天然キラー）、特にＢリンパ球の細胞数を増加させ、皮質領域および小腸へのｓＩＧＡの分泌誘導を伴うパイエル斑（小腸）の小胞で生存リンパ球の増加が認められ、骨髄中で全血液形成要素の増加が認められ、胸腺、脾臓、腸管膜リンパ節で免疫適格細胞の細胞性刺激が検出され、および／または、肝臓、膵臓および腎臓（血清クレアチニン濃度の低下）の代謝機能が明らかに活性化されることを特徴とする、請求項１に記載の使用。４．炭水化物代謝異常および肝機能および腎機能障害の治療、前糖尿病状態、特に、成人型の前糖尿病状態の治療、感染、ストレスおよび／または肥満の治療、制限された高血圧状態での高血圧の治療のための、および化学的に規定された抗高血圧剤との併用投与後の相乗的補助剤としての、請求項１から３のいずれか一項に記載の使用。５．悪性腫瘍の治療、特に乳房、頸部、結腸または前立腺がんの治療のための経口補助剤として、また細胞増殖抑制剤、特にシクロホスファミドまたは放射線療法と併用する経口補助剤としての、請求項１から３のいずれか一項に記載の使用。６．化学療法、細胞増殖抑制療法または放射線療法の耐容性を高めるため、特に、クロフィブラート、ＡＣＥ阻害剤、α−２受容体拮抗剤、Ｃａ拮抗剤および／または利尿剤から選択した化学的に規定された物質との併用により耐容性を高めるための、鎮痛補助剤、特に内分泌系、神経系および免疫系の間の相互作用に対する正の影響を有する薬理学的成分としての、請求項１に記載の使用。７．細菌またはウィルスで誘導される疾患、特に、小腸の炎症性疾患（クローン限局性腸炎）、膵臓、腎臓および肝臓の萎縮、Ａ型、Ｂ型およびＣ型肝炎、皮膚病変（足の潰瘍）ならびにＩ型およびＩＩ型単純疱疹および帯状疱疹の治療のための補助剤としての、請求項１から３のいずれか一項に記載の使用。８．乾燥させた形、特に、粉末、生の植物からの乾燥抽出物または薬物（乾燥植物）、顆粒、特に、カプセル、錠剤、特に被覆錠、またはトローチとしての、生の植物、特に、水性、有機および／または超臨界溶媒、特に二酸化炭素を使用して抽出したものなどの抽出ジュースとしての、請求項１から７の一項または複数の請求項に記載の使用。９．全身的な免疫抑制状態の治療および細胞性免疫促進のための、アーティチョーク（Cynara）乾燥抽出物を含有する、炭酸カルシウムおよび糖類を含有する顆粒の形の経口投与可能な医薬品。１０．薬物対抽出物比（ＤＥＶ固有）が２５：１から３５：１のCynara抽出物を含有する、請求項９に記載の医薬品。１１．アーティチョーク（Cynara）抽出物を、Echinacea抽出物、特に、乾燥抽出物（E.pallidaおよびE.angustifolia）および／またはイラクサ（Urtica）抽出物、特に根、葉または草本部分からの乾燥抽出物と組み合わせて含有する、請求項９に記載の医薬品。１２．薬物対抽出物比が４：１から８：１のEchinacea抽出物を含有することを特徴とする、請求項１１に記載の医薬品。１３．薬物対抽出物比が６：１から１５：１のイラクサ（Urtica）抽出物を含有することを特徴とする、請求項９に記載の医薬品。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｐ 35/00 Ａ６１Ｐ 35/00 43/00 １１１ 43/00 １１１ (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＵ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＥＥ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＰ，ＫＲ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＶ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ

Claims

【特許請求の範囲】１．放射線、感染および化学物質により生じた器官および組織損傷、特に小腸のＯ−ＭＡＬＴ系（炎症性疾患、クローン限局性腸炎）、骨髄（骨髄形成不全）、胸腺（機能不全、形成不全または形成不良）、脾臓（機能不全）、リンパ節（医薬品または放射線による損傷に起因する形成不全または形成不良）、肝臓（萎縮、壊死）、Ａ型、Ｂ型およびＣ型肝炎、膵臓（プロテアーゼ、エステラーゼ、カーボハイドラーゼおよびヌクリアーゼの外分泌機能不全および内分泌機能による炭水化物代謝の異常［ランゲルハンス島］）および腎臓（不全）の障害の治療、全身的な免疫抑制状態の治療、白血球減少症、顆粒球減少症、リンパ球減少症および免疫グロブリン欠乏症の治療のための細胞性免疫促進のための医薬品を製造するための、アーティチョーク（Cynara）抽出物、特に、生の植物からの乾燥抽出物の使用。２．細胞性免疫促進により末端脈管系の白血球、多形核顆粒球およびリンパ球、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ヘルパー細胞、サプレッサー細胞およびＮＫ（天然キラー）、特にＢリンパ球の細胞数を増加させ、皮質領域および小腸へのｓＩＧＡの分泌誘導を伴うパイエル斑（小腸）の小胞で生存リンパ球の増加が認められ、骨髄中で全血液形成要素の増加が認められ、胸腺、脾臓、腸管膜リンパ節で免疫適格細胞の細胞性刺激が検出され、および／または、肝臓、膵臓および腎臓（血清クレアチニン濃度の低下）の代謝機能が明らかに活性化されることを特徴とする、請求項１に記載の使用。３．炭水化物代謝異常および肝機能および腎機能障害の治療、前糖尿病状態、特に、成人型の前糖尿病状態の治療、感染、ストレスおよび／または肥満の治療、制限された高血圧状態での高血圧の治療のための、および化学的に規定された抗高血圧剤との併用投与後の相乗的補助剤としての、請求項１または２に記載の使用。４．悪性腫瘍の治療、特に乳房、頸部、結腸または前立腺がんの治療のための経口補助剤として、また細胞増殖抑制剤、特にシクロホスファミドまたは放射線療法と併用する経口補助剤としての、請求項１または２に記載の使用。５．化学療法、細胞増殖抑制療法または放射線療法の耐容性を高めるため、特に、クロフィブラート、ＡＣＥ阻害剤、α−２受容体拮抗剤、Ｃａ拮抗剤および／または利尿剤から選択した化学的に規定された物質との併用により耐容性を高めるための、鎮痛補助剤、特に内分泌系、神経系および免疫系の間の相互作用に対する正の影響を有する薬理学的成分としての、請求項１に記載の使用。６．細菌またはウィルスで誘導される疾患、特に、小腸の炎症性疾患（クローン限局性腸炎）、膵臓、腎臓および肝臓の萎縮、Ａ型、Ｂ型およびＣ型肝炎、皮膚病変（足の潰瘍）ならびにＩ型およびＩＩ型単純抱疹および帯状庖疹の治療のための補助剤としての、請求項１または２に記載の使用。７．乾燥させた形、特に、粉末、生の植物からの乾燥抽出物または薬物（乾燥植物）、顆粒、特に、カプセル、錠剤、特に被覆錠、またはトローチとしての、生の植物、特に、水性、有機および／または超臨界溶媒、特に二酸化炭素を使用して抽出したものなどの抽出ジュースとしての、請求項１から６の一項または複数の請求項に記載の使用。８．薬物対抽出物比（ＤＥＶ固有）が２５：１から３５：１のCynara抽出物を使用することを特徴とする、請求項１から７の一項または複数の請求項に記載の使用。９．前記アーティチョーク（Cynara）抽出物を、Echinacea抽出物、特に、乾燥抽出物（E.pallidaおよびE.angustifolia）および／またはイラクサ（Urtica）抽出物、特に根、葉または草本部分からの乾燥抽出物と組み合わせることを特徴とする、請求項１から８の一項または複数の請求項に記載の使用。１０．薬物対抽出物比が４：１から８：１のEchinacea抽出物を使用することを特徴とする、請求項９に記載の使用。１１．薬物対抽出物比が６：１から１５：１のイラクサ（Urtica）抽出物を使用することを特徴とする、請求項９に記載の使用。１２．請求項１から１１の一項または複数の請求項に定義したアーティチョーク（Cynara）乾燥抽出物を含有する、炭酸カルシウムおよび糖類を含有する顆粒の形の経口投与可能な医薬品。