JP2001503744A - （―）ヒドロキシクエン酸、調製方法、使用及びそれを含む組成物、特に医薬組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は、（−）ヒドロキシクエン酸マグネシウム、その調製の方法、その食事療法及び治療、特に心臓血管の分野における適用、並びにそれを含む組成物、特に医薬に関する。

Description

【発明の詳細な説明】 （−）ヒドロキシクエン酸、調製方法、使用及びそれを含む組成物、特に医薬組 成物 本発明は、新規（−）ヒドロキシクエン酸化合物、その調製方法及びそれを含 む組成物に関する。 （−）ヒドロキシシトレート((−)ヒドロキシクエン酸又はGarcinia酸)は東南 アジア及び特に南インドにおいて見い出される木であるガルシニア・インジカ(G arcinia indica)又はガルシニア・カンボジア(Garcinia cambogia)の抽出液から 得られる活性成分である。 これら２つの種の植物は、ヒドロキシシトレートの（−）立体異性体を含む。 これら２種の植物の果実の抽出液は、種々の病気を治療するために伝統的なイン ドの医学において広く用いられている。 名前で過剰な体重及び肥満に対抗するための食事療法製品として合衆国において 商品化されている。 周知の薬理活性及び果実から（−）ヒドロキシシトレートを調製するための手 法は既に文献に記載されている。 この製品は、種々の製造業者、例えばFLUKAカンパニーにより市販されている 。 eight managemenC"，New Editions Publishing，1675 Rollins Road，Burlingam e，(A94010，Page 1〜69，1994)は、脂肪材料の合成を減少させることにより（ −）ヒドロキシシトレートが体重を減少させることを示す特定数の研究を記載す る。 世界中の多くの人々、例えばフランスの約400万の人々が高コレステロール血 症を患っている。循環するコレステロールのレベルが脂質の過酸化のため正常な レベルを超えた場合、コレステロール及びコレステロールエステルは動脈の平滑 筋の細胞の中に蓄積し、それらの増殖を刺激し得、動脈壁への脂質の蓄積（アテ ローム）は血栓を形成し得、後に冠状動脈及び大脳動脈を遮断し得る。 現在ある治療（フィブレート（fibrates）、HMG補酵素Ａレダクターゼインヒ ビター等）は、循環するコレステロールのレベルを減少させることを目的とする が、増殖を阻害すること又は動脈の平滑筋の細胞中のコレステロールの蓄積を阻 害することのいずれによっても動脈壁上のコレステロールの病理効果において保 護的役割を果たさない。 更に、肝不全又は腎不全のようなそれらの副作用のため、これらの薬剤は、循 環するコレステロールのレベルが生理学的限度をかなり超える場合にのみ用いら れる。 それゆえ、次の特性： −コレステロールの合成を減少させることができること、 −脈管の平滑筋の細胞中の脂質の蓄積を阻害することができること、 −脈管の平滑筋の細胞中に蓄積した脂質の除去を助けることができること、 −細胞内脂質の削減により細胞増殖を減少させることができること、 −十分な治療余地が与えられること、及び −高い投与量で副作用又は毒性効果が避けられること が与えられた製品を見い出すことが要求されよう。 この理由のため、本発明の対象は、（−）ヒドロキシシトレート の新規化合物、即ち（−）ヒドロキシクエン酸マグネシウム、特に結晶化した（ −）ヒドロキシクエン酸マグネシウム、特に実質的に純粋であるものである。 本発明の対象は、（−）ヒドロキシクエン酸の調製のための方法であって、ガ ルシニア・カンボジアの抽出液を脂肪族アルコールと反応させて沈殿を得て、そ れをタンニン固定化剤の作用にかけ、その固体を除去し、その上清を回収して陰 イオン交換樹脂でのバッチクロマトグラフィーにかけ、次に撹拌下で接触させ続 け、その上清を除去した後、（−）ヒドロキシクエン酸マグネシウムを溶出し、 その溶出液を乾燥させて予想される（−）ヒドロキシクエン酸マグネシウムを得 ることを特徴とする方法でもある。 上述の方法のための好ましい条件は、 −脂肪族アルコールがＣ₁−Ｃ₆アルコール、好ましくはプロパノール、イソプ ロパノール又はエタノールであり、 −タンニン固定化剤がポリピロリドン誘導体、好ましくはポリビニルポリピロ リドンであり、 −固体の除去が遠心により行われ、 −陰イオン交換樹脂が好ましくはDEAE−SEPHADEX A50樹脂であり、 −溶出液の乾燥が凍結乾燥により行われる。 （−）ヒドロキシクエン酸マグネシウムは、極めて有用な薬理特性を有し、そ れは特にフリーラジカルに関して、著しい低脂肪、抗コレステロール、抗アテロ ーム、及び抗酸化特性が与えられる。それは特に、コレステロール合成を減少さ せ、脈管平滑筋の細胞中の脂質の蓄積を阻害し、脈管平滑筋の細胞中に蓄積した 脂質の除去を助け、細胞内脂質の減少により細胞増殖を減少させることができ、 結果として、脈管内皮上の脂肪の蓄積を減少させることができる。 それは、更に、抗ストレス、抗疲労及び細胞再生特性が与えられる。それは、抗 高血圧症特性も与えられることが見い出されている。 これらの特性は、以下の実験部に詳述される。それらは、薬剤としての（−） ヒドロキシクエン酸マグネシウムの使用を正当化する。 本発明による薬剤は、例えば、脂質の局所的蓄積により又は循環するコレステ ロールレベルの増加により引きおこされる病気、例えば脈管狭窄症、脂質の線、 アテロームの形成、血栓症及び巨視的及び微視的循環に影響を与える脈管の病気 及び高コレステロール血症の治療的及び防止的処置の両方のために用いられる。 それらは、フリーラジカルのような酸化剤の効果と連結した老化性疾患にも用 いられる。 それらは、動脈の高血圧の治療的及び防止的処置の両方にも用いられる。 処置される患者及び問題の疾患により種々であり得る通常の投与量は、例えば 、少くとも20日の、ヒトへの経口投与により１日当り100〜1000mgの（−）ヒド ロキシクエン酸マグネシウムであり得る。 本発明の対象は、少くとも活性成分として（−）ヒドロキシクエン酸マグネシ ウムを含む医薬組成物でもある。 これらの組成物において、活性成分は、有利には、有効な生理的投与量で存在 し：上述の組成物は、特に、有効な抗高コレステロール血症又は抗高血圧症投与 量の少くとも１の活性成分を含む。 薬剤として、（−）ヒドロキシクエン酸マグネシウムを、消化又は非経口経路 を意図した医薬組成物に組み込むことができる。 これらの薬理組成物は、例えば、固体又は液体であり得、ヒトの医学に一般に 用いられる医薬形態、例えばコートしていない又は糖 でコートした錠剤、カプセル、粒子、カラメル、坐剤、注入用調製物、クリーム 、ローション又はゲルで供され得；それらは通常の方法に従って調製される。そ れらは、活性成分に、これらの医薬組成物中に通常用いられる賦形剤、例えばタ ルク、アラビアゴム、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、ココ アバター、水性もしくは非水性ビヒクル、動物もしくは植物源の脂肪物、パラフ ィン誘導体、グリコール、種々の湿潤剤、分散剤もしくは乳化剤、防腐剤を組み 合わせることができる。 本出願人は、更に、（−）ヒドロキシクエン酸マグネシウムが無機物、特に生 理的酵素反応に関連する金属、特に、亜鉛、鉛、マンガン、セレン及びケイ素の 効果を発揮させることができ、ビタミン、特にビタミンＡ，Ｃ及びＥの効果を発 揮させることができることを発見した。 上述の無機物及びビタミン製品は高コレステロール血症に関してわずかな保護 効果しか示さず、これらの効果は治療に用いると認めるのに十分なレベルでない 。しかしながら、（−）ヒドロキシクエン酸マグネシウムにより顕在化されると 、それらは極めて驚くべき効果を有する。 この理由のため、本発明の更なる対象は、共同作用の組合せであって、（−） クエン酸マグネシウム、並びに次の金属：マグネシウム、銅、コバルト、亜鉛、 ニッケル、セレン、ケイ素、マンガン、リチウム及び鉄からなる群から選択され るイオン化又は非イオン化形態の少くとも１の金属、好ましくは陽イオンの形態 のもの、又は（−）ヒドロキシクエン酸マグネシウム及び少くとも１のビタミン 、特に抗酸化ビタミンを含む。 本発明による好ましい共同作用の組合せは、（−）ヒドロキシクエン酸マグネ シウム及び少くとも２の金属、特に上述の群から選択 される２種の陽イオン及び／又は少くとも２のビタミンを含む。 好ましい条件において、本発明共同作用の組合せは、次の重量の割合：１部の （−）ヒドロキシクエン酸マグネシウム、0.1〜２部の無機塩又は上述の酸化金 属及び／又は0.1〜１部のビタミンにおいて存在し、それは、無機塩又は酸化物 中に、金属が問題の化合物の重量で２〜50重量％、好ましくは５〜40％、特に10 〜35％存在し得る。 上述の金属の中で、セレン及びケイ素が好ましく、好ましくは陽イオンの形態 である。 上述の陽イオンを組み合わせることができる陰イオンは、医薬として許容され る陰イオン、例えば次の酸：塩酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸、酢酸、ギ 酸、プロピオン酸、安息香酸、マレイン酸、フマル酸、コハク酸、酒石酸、クエ ン酸、シュウ酸、グリコール酸、アスパラギン酸、アルカンスルホン酸、例えば メタン又はエタンスルホン酸、アリールスルホン酸、例えばベンゼン又はパラト ルエンスルホン酸又はカルボン酸、又はグルコン酸から得られるものである。 ビタミンとしては、ビタミンＡ，Ｃ及びＥが好ましく用いられ、特にビタミン Ａ及びＥが好ましい。 本発明による組合せは、好ましくは、少くとも50mgの（−）−ヒドロキシクエ ン酸マグネシウム、好ましくは少くとも100mgの（−）ヒドロキシクエン酸マグ ネシウム、特に約250mgの（−）ヒドロキシクエン酸マグネシウムを各々含む、 単位投与量で供される。有利には、単位形態は、20cm³未満、特に10cm³未満、特 に１cm³未満の容量で供される。 本発明の対象である組合せは、（−）ヒドロキシクエン酸マグネシウムのもの と同じ極めて有用な薬理特性を有する。 これらの特性は以下の実験部に詳述される。それゆえ、それらは薬剤としての 上述の組合せの使用を正当化する。 処置される患者及び問題の疾患により種々である通常の投与量は、例えば、２ 〜40mgのコロイド状シリカ及び100〜1500mgのセレン又はグルコン酸マグネシウ ムと組み合わせた、少くとも20日の、ヒトにおいて経口投与による、１日当り10 0〜1000mgの（−）ヒドロキシクエン酸マグネシウムであり得る。 本発明の対象は、上述の組合せを調製するための方法であって、（−）ヒドロ キシクエン酸マグネシウムをイオン化もしくは非イオン化形態の少くとも１の金 属と又は少くとも１の上述の抗酸化性ビタミンと混合させることを特徴とする方 法でもある。 本発明の対象は、（−）ヒドロキシクエン酸マグネシウムを含む組合せ又は（ −）ヒドロキシクエン酸マグネシウム並びに次の金属：マグネシウム、銅、コバ ルト、亜鉛、ニッケル、セレン、ケイ素、マンガン、リチウム及び鉄からなる群 から選択されるイオン化もしくは非イオン化形態の少くとも１の金属の組合せ、 又は薬剤としての（−）ヒドロキシシトレート及び少くとも１のビタミン、特に 抗酸化ビタミンの組合せ、即ちヒト又は動物の体のための治療、治癒又は防止的 処置方法に用いるための（−）ヒドロキシクエン酸マグネシウム又は上述の化合 物の組合せでもある。 治療処置として、これらの金属又はビタミンの周知の使用及び適応が特に言及 され得：実際、それらの効果は（−）ヒドロキシクエン酸マグネシウムにより顕 在化される。 本発明の更なる対象は、（−）ヒドロキシクエン酸マグネシウム、又は（−） ヒドロキシクエン酸マグネシウム及び次の金属：マグネシウム、銅、コバルト、 亜鉛、ニッケル、セレン、ケイ素、マンガン、リチウム及び鉄から選択されるイ オン化又は非イオン化形態 の少くとも１の金属、又は（−）ヒドロキシクエン酸マグネシウム及びビタミン 、特に抗酸化性ビタミンを含む組合せの、食品、栄養補給物もしくは栄養添加物 として、又は美容製品としての使用である。 それゆえ、本発明の対象は、（−）ヒドロキシクエン酸又は上述の組合せを含 む食品、栄養又は美容組成物でもある。 本発明の更なる対象は、心臓−血管疾患の治療、特にコレステロール又は高血 圧により引きおこされる局所的又は全身的病気の治療のための薬剤の調製のため の、（ー）ヒドロキシクエン酸マグネシウム、又は（−）ヒドロキシクエン酸マ グネシウム及び次の金属：マグネシウム、銅、コバルト、亜鉛、ニッケル、セレ ン、ケイ素、マンガン、リチウム及び鉄からなる群から選択される少くとも１の 金属、又は（−）ヒドロキシクエン酸マグネシウム及び／又は少くとも１のビタ ミン、特に抗酸化ビタミンの共同的組合せである。 好ましい条件下で、上述の心臓−血管疾患の治療のための薬剤は、脂質抗酸化 特性を有する薬剤である。 特に好ましい条件下において、上述の薬剤は、高コレステロール血症及びそれ により引きおこされる病気の治療又は動脈の高血圧の治療を意図するものである 。 以下の例は本願を詳述する。 実験部 実施例１：（−）ヒドロキシクエン酸マグネシウムの調製 ガルシニア・カンボジア(供給元：GREENTECH，St Beauzire-France)滴定剤の3 0％抽出液及び60ｇ／ｌのヒドロキシクエン酸の１kgを２ｌのエタノールと反応 させて沈殿を得て、それを50ｇのポリビニルピロリドンの作用にかけ、その反応 媒体を30分、撹拌し、その固体を15分、6000ｇの遠心により除去し、その上清を 回収する。そ れを、0.1ＭのNaCl（pH3.0）で平衡化した200ｇのDEAE SEPHADEX A50陰イオン交 換樹脂でのバッチクロマトグラフィー(1.5モルの酸当り１ｇの樹脂)にかけ、16 時間、撹拌して、デカントし、その上清を除いた後、塩化マグネシウムの0.5Ｍ 溶液1000mlで溶出し、４時間、撹拌し、その溶出液を回収して乾燥させ、そして 70ｇの予想される生成物を得る。 実施例２：錠剤を以下の処方に従って調製した： （−）ヒドロキシクエン酸マグネシウム（活性成分） 300mg グルコン酸マグネシウム 360mg コロイド状シリカ 7.5mg 錠剤を仕上げるための賦形剤 1000mg （賦形剤の詳細：ラクトース、デンプン、タルク、ステアリン酸マグネシウム） 実施例３：分割可能な錠剤を、以下の処方に従って調製した。 （−）ヒドロキシクエン酸マグネシウム 150mg セレン 5mg ビタミンＥ 75mg 錠剤を仕上げるための賦形剤 250mg （賦形剤の詳細：ラクトース、デンプン、タルク、硫酸マグネシウム） 実施例４；分割可能な錠剤を、以下の処方に従って調製した。 （−）ヒドロキシクエン酸マグネシウム 375mg コロイド状シリカ 7.5mg セレン 40mg 錠剤を仕上げるための賦形剤 1000mg 実施例５：飲むためのアンプルを以下の処方に従って調製した。 （−）ヒドロキシクエン酸マグネシウム 300mg グルコン酸マグネシウム 100mg セレン 40μｇ アンプルを仕上げるための賦形剤 10ml （賦形剤の詳細：蒸留水） 実施例６：飲むための懸濁液のためのサチェットを以下の処方に従って調製し た： （−）ヒドロキシクエン酸マグネシウム 500mg グルコン酸マグネシウム 100mg サチェットを仕上げるための賦形剤 5ｇ （賦形剤の詳細：ラクトース） 実施例７：飲むための懸濁液のためのサチェットを以下の処方に従って調製し た： （−）ヒドロキシクエン酸マグネシウム 250mg グルコン酸マグネシウム 150mg サチェットを仕上げるための賦形剤 5ｇ （賦形剤の詳細：ラクトース） 薬理学的研究 １）ヒト上皮細胞の及びラット動脈平滑筋細胞の死亡率の研究 （−）ヒドロキシシトレートの及び異なる無機物の抗酸化効果を、ラット肝細 胞、並びにヒト上皮細胞及びラット動脈平滑筋細胞を用いて、Michielsら(“A n ew experimental model to study oxygentoxicity”，Arch．int．Physiol．Bio chem．94(5)，S13〜S18，1986)により記載されるプロトコルに従ってテストした 。 これらの化合物の動脈平滑筋の増殖へ及び細胞内脂質の蓄積へのこれらの化合 物の阻害効果も、Shrivastavaら(Meth．Find．Exp．Clin．Pharmacol．15(6)， ページ345〜350，1993)を用いてテストした。 種々の産物を以下の濃度で各々テストした：培養培地中、 −（−）ヒドロキシシトレート 0.1mM −シリコン 0.036mM −マグネシウム 0.1mM 次の結果を得た： （−）ヒドロキシシトレートのみでは細胞死亡率に対する保護は有さないこと が最初に観察できる。マグネシウムのみではこの死亡率は極めてわずかであるが 、（−）ヒドロキシクエン酸マグネシウムはより大きな保護効果を有する。 （−）ヒドロキシクエン酸マグネシウムは細胞死亡率を大きく減少させ（70± ８％）、酸化損傷に対するこの物質の保護効果を証明する。 脂質の蓄積及び細胞増殖に関して、（−）ヒドロキシクエン酸マグネシウムの 効果の極めて大きな増加が（−）ヒドロキシシトレート又はマグネシウムに対し て観察される。 これらの結果は全く予想されないものである。 ２）高コレステロール血症のウサギにおけるコレステロールレベル及び脂質の析 出への生体内効果の研究 20の雄のウサギ(Elevage scientifique des Dombes：2.5〜３kg )の２つのバッチに、８週間にわたってコレステロールの豊富な食事（１％）を 与えた。第１のバッチは処理せず、それゆえ対照として供し、第２のバッチには 経口投与により750mg／kgの（−）ヒドロキシクエン酸マグネシウムを供した。 ４週間の処置後の脂質の分析は、（−）ヒドロキシクエン酸マグネシウムを受容 したウサギにおいてLDL'sの減少及びHDL'sの増加を示した。 ４週間後及び８週間後の大動脈の壁で行った分析（10のウサギ）は、（−）ヒ ドロキシクエン酸マグネシウムを受容した脂質の析出物の数の減少を示した。３）高コレステロール血症のウサギにおいて抗アテローム性動脈硬化症効果の研 究 15の雄のウサギ(Elevage scientifique des Dombes：2.5〜３kg)の２つのバッ チに、Ｄ＋８〜Ｄ＋37の期間、0.2％、次にＤ＋69まで１％のコレステロールの 豊富な食事を与え、動物を殺した。 第１のバッチは処理せず、それゆえ対照として供し、第２のバッチには経口経 路により500mg／kgの（−）ヒドロキシクエン酸マグネシウムを与えた。処理が 終わった後の分析は、62日間の高コレステロール血症のウサギにおける500mg／k g／日の投与量の経口投与による（−）ヒドロキシクエン酸マグネシウムの投与 が次の効果を有することを示した： −死なない −十分に許容される −対照と比べて食物消費又は体重に顕著な効果はない −血液学的パラメータに変化はない −処理したバッチにおける肝臓保護効果を示す肝臓酵素の減少 −対照に対して、処理したウサギにおけるHDLレベルの増加（＋12.5％）に伴 う全コレステロールレベル（−13.75％）、LDL's（16.36％）及び全コレステロ ール／HDL比（−25.72％）の減少 −心臓、肝臓、牌臓（−20.3％）及び腎上腺の重さの減少 −これらの器官への高コレステロール血症に対する保護効果及び生じたストレ スの減少を示す処理したバッチにおける（−21.6％） −対照バッチに対する処理したバッチにおける大動脈脈管壁への脂質析出物の 46.3％の減少 これらの結果は、ヒドロキシクエン酸マグネシウムが、高コレステロール血症 のウサギに、非毒性投与量で低コレステロール及び抗アテローム性動脈硬化効果 を有することを示す。 ４）高血圧症ラットにおける抗高血圧活性の研究 （−）ヒドロキシクエン酸マグネシウムを12の高血圧のラットで テストした。12の他の高血圧のラットのバッチを対照バッチとして用いた。対照 （未処理）に対して17％±３％の動脈圧の平均減少率が、経口投与による１日当 り１キログラム当り500mgのラットの比率の１週間の処置の後に認められた。 ５）毒性 （−）ヒドロキシクエン酸マグネシウムの毒性は、腹腔内経路により２ｇ／kg 超であり、又はラットの経口投与で７ｇ／kg超である。金属、特に塩又は無機酸 化物の形態のもの（頻繁に微量要素として投与される）は公知である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｋ 33/06 Ａ６１Ｋ 33/06 33/24 33/24 33/30 33/30 33/34 33/34 Ａ６１Ｐ 3/06 Ａ６１Ｐ 3/06 9/00 9/00 9/10 9/10 9/12 9/12 39/06 39/06 Ｃ０７Ｃ 51/41 Ｃ０７Ｃ 51/41

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．（−）ヒドロキシクエン酸マグネシウム。 ２．（−）ヒドロキシクエン酸マグネシウムの調製のための方法であって、ガ ルシニア・カンボジアの抽出物を脂肪族アルコールと反応させて沈殿を得て、そ れをタンニン固定化剤の作用にかけ、その固体を除去してその上清を回収し、陰 イオン交換樹脂でのバッチクロマトグラフィーにかけ、次に撹拌下で接触させ続 け、その上清を除去し、次に（−）ヒドロキシクエン酸マグネシウムを溶出し、 その溶出液を乾燥させて予想される（−）ヒドロキシクエン酸マグネシウムを得 ることを特徴とする方法。 ３．ヒト又は動物の体のための治療、治癒又は予防的処置に用いるための（− ）ヒドロキシクエン酸マグネシウム。 ４．心臓血管の疾患の処置を意図した薬剤の調製のための（−）ヒドロキシク エン酸マグネシウムの使用。 ５．（−）ヒドロキシクエン酸マグネシウム及び医薬として許容される賦形剤 を含むことを特徴とする医薬組成物。 ６．（−）ヒドロキシクエン酸マグネシウム並びに次の金属：マグネシウム、 銅、コバルト、亜鉛、ニッケル、セレン、シリコン、マンガン、リチウム及び鉄 からなる群から選択されるイオン化もしくは非イオン化形態の少くとも１の金属 、又は（−）ヒドロキシクエン酸マグネシウム及び少くとも１のビタミンを含む ことを特徴とする組合せ物。 ７．次の金属：マグネシウム、銅、コバルト、亜鉛、ニッケル、セレン、シリ コン、マンガン、リチウム及び鉄からなる群から選択される少くとも２の金属を 含むことを特徴とする請求項６に記載の共同的組合せ物。 ８．少くとも50mgの（−）ヒドロキシクエン酸マグネシウムを含む単位投与の 形態の請求項６又は７に記載の組合せ物。 ９．重量で、（−）ヒドロキシクエン酸マグネシウム１部について、0.1〜２ 部の無機塩もしくは金属酸化物、又は（−）ヒドロキシクエン酸マグネシウム１ 部について、0.1〜１部の少くとも１のビタミンを含むことを特徴とする請求項 ６〜８のいずれか一に記載の組合せ物。 10．食事又は栄養製品としての（−）ヒドロキシクエン酸マグネシウム又は請 求項６〜９のいずれか一に記載の組合せ物の使用。 11．美容用製品としての（−）ヒドロキシクエン酸マグネシウム又は請求項６ 〜９のいずれか一に記載の組合せ物の使用。