JP2001500364A

JP2001500364A - 飼料

Info

Publication number: JP2001500364A
Application number: JP09529285A
Authority: JP
Inventors: リンドブロム、ラグンヴァルト; 賢二川嶋; ブンケ、パトリック
Original assignee: バイオフィード（タイ）カンパニー、リミテッド
Priority date: 1996-02-14
Filing date: 1997-02-14
Publication date: 2001-01-16
Also published as: BR9707510A; CN1225556A; SE510498C2; AU721811B2; SE9600568D0; ATE234019T1; KR19990082623A; CA2245964A1; EP0881886A1; AU1819097A; WO1997029645A1; DE69719735D1; NZ330906A; SE9600568L; EP0881886B1

Abstract

(57)【要約】以下の微生物の中、少なくとも３つを含む非反芻動物飼料添加物：ａ）ぺジオコックス属ペントサシュース（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓｐｅｎｔｏｓａｃｅｕｓ）；ｂ）ペジオコックス属アシヂラクチシ（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓａｃｉｄｉｌａｃｔｉｃｉ）；ｃ）ピシア属ファリノーサ（Ｐｉｃｉａｆａｒｉｎｏｓａ）；ｄ）デッ.ケラ属ブラッセレンシス（Ｄｅｋｋｅｒａｂｒｕｘｅｌｌｅｎｓｉｓ）；ｅ）桿菌（バチラス属微生物）（Ｂａｃｉｌｌｉ）；ｆ）連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉ）；及びｇ）ブドウ状球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ）。

Description

【発明の詳細な説明】飼料本発明は、動物及びヒトの消化作用に多重共生効果があり、且つ消化管内の正常な生理的寄生菌を平衡に維持する非毒性で非病原性の微生物、酵素（消化酵素）、有機酸及びバクテリオシンである天然物質を含有する新規な組成物に関する。この組成物はまた、現存する感染を停止し、平衡失調した生理的寄生菌を正常状態に再生することができる。このことは、自己の制菌及び殺菌効果を通して極めて多種の動物及びヒトを対象とした検査により検証されている。更に、この新規な組成物は胃及び腸内で飼料に驚異的に作用し、飼料をペプチドやアミノ酸等のより容易に消化される断片に分解させる。このことは、飼料のエネルギー含有成分及び他の成分の総合的利用に極めて有益である。この組成物は豚肉の脂肪とコレステロールを驚異的に還元できる。この組成物はまた、免疫防衛システムを驚異的に高めることができる。発明の背景胃及び小腸、大腸内の細菌性感染を阻止するため、現在多種の生成物が豚、子豚、雌豚、鶏、海老等の動物の治療に用いられている。最も頻繁に用いられる生成物は、通常飼料に混ぜて全飼育工程中に動物に投与される種々の抗生物質である。また、豚等の急性感染も通常、抗生物質で治療される。抗生物質の代わりに共生物質が、腸内の生理的寄生細菌や成長プロモータの安定化のため、ときには用いられる。現存の共生物質の効果は疑わしく、したがって共生物質は効果が無い、少ないの理由で、抗生物質の好適な代替物とは見做されていない。共生物質の効果と作用様式は、微生物の種類に依存する。これ等の生成物の或ものは酵素、例えば炭水化物酵素に基づく商品「バイオフィードプラス」（Ｂｉｏ−ＦｅｅｄＰｌｕｓ）、から成るに過ぎない。また、或ものは桿菌（バチラス）株に基づき、或ものは種々の乳酸菌、連鎖球菌やグラム陽性の細菌からの胞子から成る。これ等全てに共通することは、精製形式のものとして生成されることで、生成される天然酵素及び有機酸は洗い流されれてしまう。そして動物に投与された時、（ａ）コロニー生成が少ないか又は全く無い、（ｂ）微生物が胃の酸部で破壊される、（ｃ）酵素や有機酸の生成が遅れ、成長促進効果をもたらすには到らない、（ｄ）微生物の必須の乳酸が全く生成されないために効能がゼロであるか遅い。したがって、決定的な効能が無い。豚や鶏、家禽、海老等動物の胃腸内で生ずる病原性細菌感染は、畜産家、養殖家と消費者の大きな問題である。畜産家、養殖家が飼育、養殖場に極めて高い衛生基準を保とうとしても、かかる感染を阻止することは可能であるとしても極めて困難であり、離乳期の子豚では激しい下痢の発現は自然の大腸菌と腸管内の乳酸菌との間の関係における免疫因子に依存する。感染と闘うため抗生物質を頻用すると、一般サルモネラ属の抗療性菌株が発生するので大きな問題となる。これ等の細菌の幾つかは多くの抗生物質に対し耐性をもつようになり、動物は抗生物質治療の施行に反して死に到る結果となる。病原性細菌が一旦不平衡を生ずると、動物は飼料消化能力が低下するので通常の方法では体重を増やすことができなくなる。これは飼育家に経済的損失を与えることは自明であるが、それに加え、食肉の品質がしばしば低下し、その消費者が感染する危険も明らかにある。細菌感染に極めて敏感な動物の一群は、雌豚から高頻度で感染してしまう子豚である。離乳期に雌豚から離され、固形飼料の摂取を始めるとき、子豚はしばしば激しい腸内問題を起こす。問題はしばしば、子豚によっては死滅に到るまで激しい。感染はまた、子豚によっては死に到ると云うだけでなく感染した動物の飼育期を不当に長くするので、養豚家に大きな経済的問題を惹起する。罹患した小豚の問題の大きさは、国により異なる。欧州では飼育動物の約１５〜３０％が感染するが、熱帯の国々では数字は、例えば４０％までとかなり高い。ブロイラーの飼育は大きな問題を抱える他の群である。禽類のサルモネラ感染とカンピロバクター感染は極めて頻繁で、養鶏業に大きな経済的損失を与え、鶏の消費者に激症から致死の感染を生ずる。ブロイラーと産卵鶏のサルモネラ感染は、サルモネラ菌があらゆる種類の抗生物質に高度の耐性をもつようになるにしたがい、全世界に亘って制御不可能な段階にまで進行しつつある。動物は一旦病原細菌に感染すると、今日市販の抗生物質や共生物質により治癒は困難で、或いは不可能でさえある。海老の養殖も、食べ残し飼料、排泄物及び化学物質で生じた池腐敗底部層の細菌感染水により、大きな問題を蒙りつつある。これ等全ての環境及び汚染因子が海老の病原細菌感染の危険を増大し、養殖業の大きな経済的不利を招いている。１００％にまで及ぶ死滅率を生ずる最も普通の病原細菌の一つは、多種に亘るビブリオ菌である。環境と汚染の観点から、食肉鶏、産卵鶏及び豚の畜産の提起する大きな問題は、アンモニアの放出の低減に緊急を要することである。飼育床の表面から放出されるアンモニアは家畜に極めて毒性があり、感染の危険を増し、死滅率を高め、生育能率を減ずる。理論的には、感染、抗生物質を用いない成長促進及びエコロジーの改善に係わる上記の問題を解決する慨然的最良の方法は、感染細菌が粘膜表面に付着するのを防ぐこと、或いは既に生理的寄生菌の不平衡を来している動物の場合には、微生物から成り、多重共生効果のある、発現の速い天然「カクテル」の組成物、その固有の消化酵素、その固有の有機酸及びその固有のバクテリオシンを用い、それにより免疫防衛システム強化することにより死滅率を減少し且つ成長率を増大する生理的寄生菌の回復を得る方法を身い出すことである。更に、生成物は発酵工程中に微生物により生成される酵素、有機酸及びバクテリオシンから成るべきである。共性物質が有効と考えられるには、微生物からの代謝物質である酵素、有機酸及びバクテリオシンの多重共性効果の発現が必要である。発明の開示本発明の第一の面は、以下の微生物：ａ）ペジオコックス属ペントサシュース（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓｐｅｎｔｏｓａｃｅｕｓ）；ｂ）ペジオコックス属アシヂラクチシ（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓａｃｉｄｉｌａｃｔｉｃｉ）；ｃ）ピシア属ファリノーサ（Ｐｉｃｉａｆａｒｉｎｏｓａ）；ｄ）デッケラ属ブラッセレンシス（Ｄｅｋｋｅｒａｂｒｕｘｅｌｌｅｎｓｉｓ）；ｅ）桿菌（バチラス属微生物）（Ｂａｃｉｌｌｉ）；ｆ）連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉ）；及びｇ）ブドウ状球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ）の中、少なくとも三つ、好ましくは７つを含むことを特徴とする動物飼料添加物又は組成物に関する。本発明による組成物は、以下のような加水分解活性を示す「消化酵素」である酵素：ｈ）タンパク分解酵素、例えばトリプシン及びペプチダーセ様活性を示す；ｉ）炭水化物開裂酵素、例えばアミラーゼ及びセルラーゼ様活性を示す；ｊ）リポリティック（Ｌｉｐｏｌｙｔｉｃ）酵素、例えばトリアシルグリセロラーゼ様活性を示す；ｋ）ペルオキシダーゼ酵素、例えばカタラーゼ様活性；及びｌ）トランスフェラーゼ、例えばアシルトランスフェラーゼ様活性を示す；を含み、以下の有機酸：ｍ）乳酸；ｎ）酢酸；及びｏ）琥珀酸の中、少なくとも三つを含み、以下のバクテリオシン：ｑ）ペヂオシン（Ｐｅｄｉｏｃｉｎ）Ａ、ニシン（Ｎｉｓｉｎ）、ペヂオシンＡｃＨ及びＰ．アシヂラクチス（ａｃｉｄｉｌａｃｔｉｃｅ）ＰＡＣ１．０を含み、任意に既知のものでよい飼料と共にこれ等を含むことを特徴とする。本発明による好ましい飼料は、水を約８〜１５％、全タンパク質を約１５〜３０％、全リピド（脂質）を０．５〜５％、線維類を約５〜２０％、灰分（ミネラル）類を約８〜２０％、窒素非含有可溶物を約３０〜５０％、活（ｌｉｖｅ）ペジオコックス属ペントサシュースを約６ｘ１０⁴〜３ｘ１０⁹ｇｒａｍ、活ペジオコックス属アシヂラクチシを約１ｘ１０³〜１ｘ１０⁷／ｇｒａｍ、ピシア属ファリノーサを約２ｘ１０³〜１ｘ１０⁸／ｇｒａｍ、デッケラ属ブラッセレンシスを約２ｘ１０³〜２ｘ１０⁸／ｇｒａｍ、連鎖球菌を約２ｘ１０³〜４ｘ１０⁸／ｇｒａｍ、桿菌を約８ｘ１０²〜６ｘ１０⁷／ｇｒａｍ、ブドウ状球菌を約６ｘ１０⁴ 〜６ｘ１０⁷／ｇｒａｍ、乳酸を約０．２〜５％、酢酸を約０．１〜３％、琥珀酸を約０．０１〜２％含み、且つ乾量で約２〜１５ＭＪ／ｋｇのエネルギー量を有する。上記の微生物、酵素、有機及びバクテリオシンは一般に次の特性がある：１）耐胃酸性２）最大７０℃までの耐熱性３）ペレット化が可能４）淡塩水中で安定５）動物及びヒトに無害６）感染を防止する７）感染を除く８）成長促進９）コローニー生成が良好１０）バクテリオシン効果１１）免疫強化効果１２）排泄物中のアンモニアと尿中の尿素を減少本発明によれば、正常な生理的寄生菌をもつ動物と、多分より重要には病的寄生菌をもつ動物と、の両方に予期しない効果がある新規な飼料組成物が提供される。本発明による新規な飼料組成物は以下により詳細に記載されるが、その必須成分として、ペジオコックス属細菌、桿菌（バチラス属微生物）、連鎖球菌及びブドウ状菌、酵母細胞（菌類）、加水分解又は消化酵素、有機酸とバクテリオシンを含む。本発明による新規な飼料組成物が動物内で作用する機構は充分に分かっていないが、本発明による微生物は病原細菌と共に競争的排除則にしたがい正常な平衡の復元を完了し、正常細菌フローラ（生理的寄生菌フローラ）を保護するものと現在のところ推定される。有機酸は、餌袋（食肉鶏及び産卵鶏に対して）と大小腸内のｐＨを低下し、病原細菌が成長するのを困難にする。乳酸も溶解により、病原細菌を殺す。微生物と乳酸の両者はその共性作用により、動物やヒトに用いられるとき、免疫防衛システムを刺激する。餌袋（鶏に対して）と消化管内で、飼料内に既にある消化酵素は飼料に作用してこれをより容易に吸収されるタンパク質、タンパク質の断片及びアミノ酸に分解し、こうして飼料のエネルギー保有成分と他の栄養成分の総合的利用を改善する。何れにせよ、結果は細菌問題をもつ動物も正常な（胃）腸平衡を回復できるようになる。更なる効果は、腸管からの消化摂取は増大され、それにより飼料内の死んだ有機物質を減少し、有害なアンモニアと尿素の生成の減少に導く。極めて重要な結果は、動物の免疫防衛システムがかなり改善され、進行する感染と及び／又は感染侵略者と効果的に闘うことができるようになることである。本発明による組成物を動物に供給することの一つの効果は、他の問題を生ぜず、正常な生理的寄生菌を回復／維持することである。他の効果は、組成物が感染を予防すると共に、他の問題を生ぜず、腸内に高レベルの健康な細菌を保つことができることである。本発明による飼料組成物の更なる効果は、細菌を除去すると共に、飼料のエネルギー保有成分と他の栄養成分との総合的利用を改善することである。上に定義された飼料組成物は、事実上どんな通常の飼料とでも好結果で用いることができ、胃内の酸状態により破壊されない。更に、本発明による組成物内に既にある酵素、有機酸とバクテリオシンは、微生物の急速複製に必要なより多い酵素、有機酸及びバクテリオシンの生成を続けるため、微生物のコロニー形成の速度を増大する。微生物により生成されるバクテリオシンは少なくとも二つの作用、即ちａ）微生物をそれを殺す能力のある他の細菌から守るため生成されることとｂ）それ自体が抗細菌効果があること、の作用がある。本発明による保存培養及び組成物とその用途及び有益な効果は更に、以下の非限定実施例において示される。実施例１−飼料の作製「保存培養」の作製１．前記微生物を含む１２ｋｇの土壌を、３０ｋｇの米ぬか、１ｋｇの大豆粉末及び１４リットルの水と混合する。混合物を５０℃で１２時間加熱する。１２時間後、温度を３５℃に下げ、混合物をこの温度に４８時間保つ。「保存培養」を約６％まで乾燥し、飼料組成物の作製に直ちに用いられるようにする。飼料組成物の作製１．５００ｋｇの米ぬかを、１．４ｋｇの上記保存培養と混合する。水を加えて含水率を３５％に上げる。２．混合物を１０〜１５ｃｍの層にのばし、プラスチックフィルムで覆い、水の蒸発を防ぐ。８日後に発酵を完了する。３．プラスチックフィルムを除去し、生成物を約７〜９％まで乾燥する。そこで、生成物は直ちに用いられるか、引き続く使用のために紙袋等で包装される。分析水分８．１％総タンパク質２２．７％総脂質３．１％線維類１１．７％灰分（ミネラル）類１４．６％可溶性窒素非含有物質３９．８％微生物の数２ｘ１０⁵〜３ｘ１０⁹ エネルギー保有量１１．４ＭＪ／ｋｇ乾量生成物の使用例１．子豚−乳離れ下痢と他の感染の予防研究の目的は、通常の飼料に１％の本発明による組成物を混合してテストを行うことで、実験は乳離れ日（２４日）に開始し、子豚の平均体重が２０ｋｇになったところで終了した。結果対照群テスト群子豚数１８８１７８開始時の平均生後日数２４．０４日２２．２４日開始時の平均体重６．７８ｋｇ６．１５ｋｇ終了時の平均体重１５．６０ｋｇ１５．０７ｋｇ終了時の平均生後日数６４．０４日５８．２４日平均実験期間４０．００日３６．００日平均生育増量８．８２ｋｇ８．９２ｋｇ平均増量率（／日）０．２２１ｋｇ０．２４８ｋｇサルモネラ感染日３５４０感染子豚数７３５２ノルフロクサジンで治療（Ｎｏｒｆｌｏｘａｚｉｎｅ）注射の日３６せずノルフロクサジンとネオミシン（Ｎｅｏｍｙｃｉｎ）飼料内に投与の日３７せず死滅率、子豚数４２（５８％）５（１０％）結論実験は、サルモネラ感染により、プロトコルの通りには完全に終了し得なかった。サルモネラ感染を起こした対照群の子豚７３頭は病状が極めて悪く、抗生物質による治療にも拘らず数日の中に４２頭が死んだ。６４日目には獣医師は１８８頭の子豚全てを断念する決定をした。本発明による組成物に付いて進行するテスト群の子豚は、対照群の子豚と比較して感染が遅れた。テスト群では、抗生物質を注射又は飼料と混合しなくても、感染と下痢の重症度は軽く、５頭が死んだに過ぎない。この組成物はまた通常の抗生物質の使用と比較して、サルモネラ感染を予防し、サルモネラ菌を破壊する良好な結果を明確に示した。２．子豚−感染の予防研究の目的は通常の飼料に０．５％（組成物５ｋｇ／飼料トン）を混ぜたものの子豚に対する有用性を調べることで、テストは２４日目に開始され、子豚が１５ｋｇに達してとき終了した。結果対照群テスト群子豚数１４３１３３総体重９７５ｋｇ９５４ｋｇ乳離れ時の平均体重６．８２ｋｇ７．１７ｋｇ乳離れ時の平均生後日数２５．４２日２４．０８日終了時の総体重２１３１．５ｋｇ１９６１ｋｇ終了時の総生存子豚数１２８１３０死滅率、子豚数１５（１０．４９％）３（２．２６％）終了時の平均体重１６．６５ｋｇ１５．０８ｋｇ終了時の平均生後日数６６．１９日６０．７８日平均実験期間４０．７７日３６．７６日平均成長量（増量）９．８３ｋｇ７．９１ｋｇ平均成長率（／日）０．２４５ｋｇ０．２１５ｋｇＡＤＧ２４１．０６ｇ２１５．７６ｇＦＣＲ１．５６１．７７ＦＣ／ｋｇ１４．０５１５．９５対照群は体重がより増量したが、これは基本的に対照群の子豚は４日速く生まれていて、子豚の成長率はこの四日間がより速いからである。対照群では、乳離れ下痢の頻度は比較的高い。テスト群では、下痢は全く記録されなかった。死滅率は対照群の方がテスト群よりかなり高い。この高い死滅率は、離乳期が過ぎた後に起こった、対照群における重度の大腸菌感染によるものであった。テスト群における大腸菌感染の重症度は、極めて軽かった。組成物を０．５％とした投与は極めて低いが、感染防止には充分である。しかし、成長率を高めるには充分ではない。３．雌豚この研究の目的は、本発明による組成物１％を通常の飼料に混ぜて、分娩前４週間から乳離れまで雌豚に与えた場合の有用性を調べることであった。結果対照群テスト群雌豚数５４５７子豚数５５４５６７死産子豚２１（３．７９％）１３（２．２９％）ミイラ数５（０．９０％）１０（１．７６％）欠陥子豚総数７（１．２６％）１２（２．１２％）小及び欠陥子豚３３（５．９６％）３５（６．１７％）良好生存子豚５２１（９４．０４％）５３２（９３．８３％）平均出生体重１．４５ｋｇ１．４８ｋｇ平均子豚数／腹９．６５９．３３乳離れ雌豚５１５５乳離れ時死滅率５１（９．７９％）２６（４．８９％）乳離れ子豚４７０５０６乳離れ時平均体重７．０４ｋｇ７．２６ｋｇ平均乳離れ日、生後２７．５７日２７．５９日乳離れ子豚／雌豚９．２２９．２０結論平均出生体重は、テスト群の雌豚からの子豚の方が３０（２％）グラム多かった。死滅率は対照群では９．７９％で、テスト群の４．８９％と比較され、差は５１％である。テスト群の子豚の乳離れ時の平均体重は２２０グラムで、対照群より３．１％重い。これは、離乳期に入るとき重要になる。対照群で死滅率が高いのは、獣医師によると、子豚がより虚弱で、下痢がより激しいことによる。また、これ等は２８日目後４〜７日の間、再生産ができた。雌豚が分娩前４週間と分娩後４週間組成物を与えられると、組成物は免疫防衛システムを増大する。このことは、子豚の感染が防御される共に、乳が濃くなることから明かである。４．雌豚−雌豚の健康状態と前乳離れ死滅率この研究の目的は、組成物を１．５％で通常の飼料に混ぜて与えた（６０ｇ／日／雌豚）場合の有用性を、雌豚の健康状態と前乳離れ死滅率について調べることであった。結果分娩対照群テスト群雌豚数１０１０生存出生子豚総数１０２９５平均出生体重１．２９ｋｇ１．４８ｋｇ平均子豚数／腹１１．１１０．０平均出生豚数／腹１０．２９．５平均死産豚数／腹０．５０．２死産子豚の％４．５２．０平均ミイラ数／腹０．４０．３ミイラの％３．６３．０乳離れ離乳経過雌豚数１０１０離乳経過子豚数８６．０９４．０離乳経過豚／腹８．６９．４前乳離れ死滅率１５．７％１．１％平均離乳体重６．０５ｋｇ６．３３ｋｇ離乳生後日数２１．４日２１．８日結論テスト群の平均体重は分娩時で１９０グラムであり、対照群より１５％高いので、これは実質的なものと見做される。対照群の前乳離れ死滅率１５．７％は、激しい乳離れ下痢によるものである。テスト群の前乳離れ死滅率１．１％は、雌豚を健康に維持し、子豚に必須で子豚を感染から防御する免疫グロブリンをより多く含む乳をださせる、本発明による組成物の直接の結果と判定されなければならない。平均離乳体重の差２８０グラム又は５％も、実質的なものである。５．豚の血液分析と一般的分析値検査は、日本食品研究所により山口大学農学部と協力して行われた。検査の要約は、本発明による組成物は以下の有益な効果をもつと云うものである。食肉（赤筋／脂肪：８５／１５％）対照群テスト群水分６３．４％６４．１％タンパク質１８．５％１９．５％脂肪１６．８％１５．１％コレステロール５０．０ｍｇ４４．４ｍｇＰｈ５．７５．８結論本発明の組成物で飼育した屠殺肉豚は、最後の３ヶ月でコレステロールと脂肪の値が実質的に下がり、これは消費者にとって極めて有益であるものと見做されねばならない。その理由は組成物の生成中に生成され、且つ豚に投与されるとき組成物内の微生物から生ずる共役胆汁酸酵素によるものである。表１参照。６．屠殺肉豚−下痢の防止と飼育期間の短縮検討は、スウェーデン国ウプサラ市のＰｒｏｚｙｍｅＡＢにより、スウェーデン農業科学大学動物育種遺伝学部とスウェーデン国ウプサラ市の動物健康サービス並びにスウェーデン国ウプサラ市のファルメーク屠殺場の協力で企画された。テスト群と対照群は各々２７頭を含んだ。平均初期体重は、テスト群では３２．６ｋｇ、対照群では３２．２ｋｇであった。各群の豚に同量の飼料が与えられたが、テスト群の飼料には本発明による飼料添加物が０．７５％含有した。豚は全て週に一度、体重チェックされた。結果テスト群、２７頭最終体重に達するのに要する、全量５９５０ｋｇの飼料、即ち豚一頭当たり平均２２０．４ｋｇの飼料を用いた。最初の一頭は６２日目に屠殺され、最後の一頭は１５４日目に屠殺された。最終体重に達するのに合計２４５６日、即ち豚一頭当たり平均９４．３日を要した。以下の表１のＦＣＲ３．０３参照。この群の豚は、試験中に何れも医療を必要としなかった。テスト群では副作用も異常行動も観られなかった。対照群、２７頭最終体重に達するのに要する、全量７３３５ｋｇの飼料、即ち豚一頭当たり平均２７１．７ｋｇの飼料を用いた。最初の一頭は７６日目に屠殺され、最後の一頭は１５４日目に屠殺された。最終体重に達するのに合計３０４３日、即ち豚一頭当たり平均１１２．７日を要した。以下の表１のＦＣＲ３．７６参照。この群では７頭が、胃傷害のため医療を必要とした。表１７．ブロイラー、サルモネラ予防この研究は、オランダ国ベークベルゲン７３６０ＡＡ（Ｐ．Ｏ．Ｂｏｘ１５）に在るＤＬＯＩｎｓｔｉｔｕｔｅｆｏｒＡｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＨｅａｌｔｈＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅＲｅｓｅａｒｃｈＤｅｐａｒｔｍｅｎｔＤＬＯ−ＮＬが行った。ブロイラーのサルモネラ感染８個の檻のブロイラーを１４日目に個々に口腔から１０⁴ｃｆｕのサルモネライン・ファンチス（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａｉｎｆａｎｔｉｓ）ＮａＩで感染させ、他の群では５個の自然感染を誘発する標識付きシーダーをおり毎に置いた。シーダーは１４日目に口腔から５ｘ１０⁷ｃｆｕのサルモネラ・インファンチスＮＡＩで感染させておいた。感染又はシーダー設置前の実験用鶏の対サルモネラ状態に付いては、排泄物のサンプリングにより検査した。採取日（感染後１週間）に、各おりから５羽のブロイラーが屠殺され、盲腸でサルモネラ数が推定された。飼料飼料には、成長促進剤としてＺｉｎｃｂａｃｉｔｒａｃｉｎを５０ｍｇ／ｋｇ、コクシジウム抑制剤としてｈａｌｏｆｕｇｉｎｏｎｅを３ｍｇ／ｋｇ、含有させた。飼料は全実験期間に対して用意され、任意に投与された。本発明による飼料添加物は飼料に、そのペレット化前に含有された（乾燥質量で１％）。ペレット化温度は７０℃であった。ミクロバイオロジー感染後７日して、各おりから鶏６羽をランダムに選び（群当たり総数４８羽）、屠殺した。盲腸を取り出し、表面を殺菌した後、無菌状態で取り出す。サルモネラ・インファンチスＮａＩのｃｆｕカウントは、「ブリリアント・グリーン・アガー」（”ＢｒｉｌｌｉａｎｔＧｒｅｅｎＡｇａｒ”）（ＯｘｏｉｄＣＭ３２９）に２０ｐｐｍナリデックス（Ｎａｌｉｄｅｘ）酸で平板培養して推定した。「緩衝ペプトン水」”ＢｕｆｆｅｒｅｄＰｅｐｔｏｎｅＷａｔｅｒ”（ＯｘｏｉｄＣＭ５０９）に盲腸内容物を溶かした１０倍希釈溶液を培養し、濃縮後ＢＧＡ寒天培地に平板培養した。統計結果をスチューデントｔ検定で分析した。結果及び考察シーダーを極めて高いサルモネラ投与量（５ｘ１０⁷）で感染させたことから、予測通り、数日後にはサルモネラ陽性数は約７０％の許容レベルとなった。両テスト群からのブロイラーの盲腸内容物にあるサルモネラｃｆｕ平均数は、対照群からのものより有意に低かった（Ｐ＜０．０１）。表２に、盲腸内容物内の個々のｃｆｕカウントからの結果が示されている。同表では、所定レベルのサルモネラｃｆｕをもったブロイラー数が表されている。これ等の結果から、感染因数（ＩＦ）と防染因数（ＰＦ）を計算できる。ＩＦは、特定群における全鶏の盲腸内容物のグラム当たりのサルモネラ数の相乗平均である。このＩＦから、対照群のＩＦ値を処理群のＩＦ値で割って、ＰＦが得られる。表２盲腸内容物グラム当たり所定サルモネラｃｆｕ数をもった鶏数（防染因数）第１週口腔感染第２週シーダーを介してサンプリングデータにおいて（第１週ｐ．ｉ．）、サルモネラが無いブロイラー数は、対照群よりテスト群の方が多かった（表３）。表３サルモネラ陰性鶏の盲腸サンプルのサルモネラ分析結論本発明による組成物をブロイラーに投与することは、サルモネラの早期排除に有意に寄与する。効果の急速発現は、組成物の含有物である微生物、酵素、有機酸及びバクテリオシンの多重共生作用による。結果は、ブロイラーからサルモネラを除去する組成物の有効生を明確に示している。８．ブロイラー、成長促進この研究の目的は、生後１日の鶏であるブロイラーを屠殺するまで飼育する場合、抗生物質を含まない飼料に１％で混ぜた本発明による組成物で飼育したテスト群を、抗生物質を含む通常の飼料で飼育した対照群と比較することであった。研究は、タイ国ＰａｎａｔＮｉｋｈｏｍにあるＣｈａｉｙａｒｅｅＦａｒｍＣｏ．，Ｌｔｄ．により行われた。結果対照群テスト群鶏数１０２００１０２００鶏の生後日１日１日終了時の生後日４６日４６日検査中に用いられた薬剤 - Mintervit １日目１日目 - IB A 3 ２２ - Tylan ３２ - Permasol ６９ - ND Clone １０８ - IBD Blen １４１３ - Tylosin S.P. １７用いず - Post-Vaccine １８１５ - Chlor-Ery ２８２８ - Triane ４０４０死んだ鶏第１週８２羽５７羽２１１５１０６３６９５０４３３２７５４３３３６１１８４２７３２５４５計７８５羽３６０羽除去した罹病及び虚弱鶏対照群テスト群第１週１０羽２６羽２２４２０３２６６４１８０５１６０６２６１７１１１８９計２３１羽１４２羽罹病及び虚弱鶏総数、羽第１週９２（０．９０％）８３（０．８１％）２１３９（１．３６％）１２６（１．２４％）３９５（０．９３％）５６（０．５５％）４５１（０．５０％）２７（０．２６％）５５９（０．５８％）３３（０．３２％）６１４４（１．４１％）４３（０．４２％）７４３６（４．２７％）１３４（１．３１％）計１０１６（９．９６％）５０２（４．９２％）生存鶏９１８４９６９８総ｋｇ１７，６９８．４３１１９，８４６．９６平均体重１．９３ｋｇ２．０５ｋｇ総消費飼料量ｋｇ３６．１９５４０．４８９ＦＣＲ２．０５２．０４結論検査は、ＣｈａｉｙａｒｅｅＦａｒｍＣｏ．，Ｌｔｄ．からの経営幹部により極めて良好に管理されたものである。これ等の鶏は屠殺前６日間に抗生物質を投与され、対照群の鶏は下痢を起こし、体重が減り、全死滅率が高かった。最後の週に、抗生物質が停止されると鶏は体重が減り、死滅率が増大した。これは、養鶏家の克服しなければならない大きな問題である。最後の週には、養鶏家の全営業を損ねかねるサルモネラとカンピロバクター再感染の危険が生じた。死滅率の差とテスト群の体重増加は実質的である。１２０グラム／鶏の差と鶏の生存数の多さは、経済的観点から極めて実質的である。９．ブロイラー、コスト利益研究背景タイ国サラブリにあるＳＵＮＥＫＦＯＯＤＬＴＤは、ブロイラーを日本に輸出する会社で、この分野のタイ国における上位１０社に数えられる。ブロイラーを輸出する各会社は、食肉内の抗生物質、化学物質及び病原細菌の残量に関し極めて厳しい規則に従わなければならない。この会社の処理生産能力は、一日当たり６万ブロイラー、即ち年間１９００万ブロイラーである。即ち、最大の利益をあげ且つ日本の消費者と良い関係を確立するために、極めて高い職業的基準でブロイラー飼育をする必要がある。ＳＵＮＥＫは、成長促進と食肉のサルモネラ汚染の排除のため抗生物質の代替として「共生物質」を試す長い経験がある。これまで同社は、市販のものでは、全ての基準を満たすどんな共生物質も見いだしていない。以下、本発明による組成物を用いる試験の条件を述べる。判定基準生後１日の鶏１００００羽の各群を、互いに５０メートル離れた２つの畜舎に収容する。対照群とテスト群は、同一種の無抗生物質飼料が与えられ、同一の標準的医療プログラムに従う。２群を同一数の労働者が看る。テスト群の鶏には、飼料ペレットに０．５％で混ぜた本組成物（ｋｇ／飼料１トン）を用いる。屠殺は、サラブリ地方の決められた屠殺場で、４４〜４６日目に行う。結果対照群テスト群生後１日の鶏数１０６００１００００死滅率第１週１１９（１．１２％）１８０（１．８０％）２１３１（１．２４％）２０３（２．０３％）３１１２（１．０６％）１７２（１．７２％）４１１５（１．０９％）１３８（１．３８％）５９７（０．９２％）２１１（２．１１％）６１７１（１．６１％）１８６（１．８６％）７１３４（１．２６％）７８（０．７８％）計８７９（８．２９％）１１６８（１１．６８％）注）第７週は、テスト群で４日、対照群で３日である。飼料消費量テスト群対照群第１週１，５００ｋｇ１，３５０ｋｇ２３，０６０２，８５０３５，０７０４，７７０４７，１４０６，５４０５７，９５０７，８３０６９，５７０９，９３０７４，０８０２，１６０計３８，３７０ｋｇ３５，４３０ｋｇ注）第７週は、テスト群で４日、対照群で３日である。医療プログラムテスト群対照群１日目ＩＢｖａｃｃｉｎｅＩＢｖａｃｃｉｎｅ１〜３日目ＴｙｌｏｓｉｎＴｙｌｏｓｉｎ１０日目ＮＤｖａｃｃｉｎｅＮＤｖａｃｃｉｎｅ１４日目ＩＢＤｖａｃｃｉｎｅＩＢＤｖａｃｃｉｎｅ１５日目ＡｍｃｏｌｉｓｔｉｎｅＡｍｃｏｌｉｓｔｉｎｅ２２日目ＴｅｔｒａｍｙｃｉｎＴｅｔｒａｍｙｃｉｎ２９日目ＴｅｔｒａｍｙｃｉｎＴｅｔｒａｍｙｃｉｎ３５日目ＮｏｒｆｌｏｘａｃｉｎＮｏｒｆｌｏｘａｃｉｎ総体重１８，７００ｋｇ１６，０００ｋｇ屠殺鶏数９，７２１羽８，８３２羽総消費飼料量３８，３７０ｋｇ３５，４３０ｋｇＦＣＲ２．０５２．２１平均体重／鶏１．９２ｋｇ１．８１ｋｇコスト利益分析経費テスト群対照群生後１日の鶏ＵＳ＄４，２４０ＵＳ＄４，０００医薬６３６６００飼料９，６６９８，９２８テストサンプル１９１．８４０労務２１２２００計ＵＳ＄１４，８３４．６８ＵＳ＄１３，７２８．３６収入計ＵＳ＄２０，１９６ＵＳ＄１７，２８０総純収入ＵＳ＄５，２６１．３２ＵＳ＄３，５５１．６４純収入／鶏ＵＳ＄０．４９６ＵＳ＄０．３５６考察試験は、ＳＵＮＥＫＦＯＯＤＬＴＤにより全て実行され、管理された。Ｂｉｏｆｅｅｄのスタッフは週に一度養鶏場を訪れ、データを収集し、鶏の健康状態をチェックした。ＳＵＮＥＫの決定により、比較試験のため、両群に同一の標準的医療を適用した。結論二群間の差異は、あらゆる点で、有意である。対照群における１１．６８％の死滅率はテスト群の８．２９％と比較すると、約２９％で、統計的に確かに有意である。テスト群の２．０５と対照群の２．２１とのＦＣＲの差は７％を越え、これも実質的はものと判定されなければならない。しかしながら、最も重要なのは、本発明による組成物を用いることの便益を明瞭に示すコスト利益（費用−便益）分析で、３日目以降抗生物質の使用を止めると、かかる種の抗生物質治療は予防的なものに過ぎないので、上記の差異がより大きくものとなることが分かる。しかしながら、テスト群の鶏当たり純利益が１２．４１バーツ（Ｂａｈｔ）／鶏で、対照群の８．８９バーツ／鶏はその４０％となる。本組成物と他の種の微生物生成物の差は、この組成物が始めから微生物、有機酸、酵素及びバクテリオシン等の必要成分の全てを含む完成した「バイオシステム」（”ＢｉｏｔｉｃＳｙｓｔｅｍ）と分類し得ると云うことに依存し、極めて大きい。このことはまた、餌袋内に良好な初期コロニー化を形成し且つ餌袋内で飼料に酵素の直接効果をもたらす保証となる。有機酸は先ず、ｐＨを低下し、病原細菌にとっての条件を不利にする。そして、このことは、ａ）乳酸が直接作用する静菌効果とｂ）微生物からの総合的免疫強化効果と共に、鶏を健康状態に保持するのに必要なものとなる。微生物を含む生成物を鶏に用いるとき、鶏は良好な消化機構があるが栄養摂取機能が低いので、有益な効果の発現をが餌袋内で直接開始させ、胃の酸部で微生物の傷みを最小にすることが極めて重要である。本発明の組成物は、作用が可能になる前に自己の代謝物質の生成から始めなければならないため作用の進行が極めて遅い通常の抗生物質と異なり、始めから直ちに作用を開始する。上記の作用様式が、本発明による組成物を用いると得られる優れた純便益の理由である。また付言できることは、本発明の組成物を用いると、全世界に亘って大きな問題となっている鶏のサルモネラ及びカンピロバクター感染の危険が減少することである。また記録できたことは、対照群と比較してテスト群からはアンモニアの臭いが少なかったことである。１０．エビとプローン池で飼われるプローンは、細菌感染に極めて敏感である。一旦感染が発生すると池の中のエビやプローンは全て死ぬ。感染の危険を最小にするために、本発明による組成物は約２０グラム／ｍ²の濃度で用いられ、池の空底の上に均一に散布される。組成物は７〜１０日間作用し、その後病原微生物の濃度はエビ／プローンを後で傷めない程度に薄められる。後期幼生を放流後、本発明による組成物を２週間、週に２回、２ｋｇ／１６００ｍ²の割合で用いる。更に、組成物の微粉末（メッシュ６０）を１％の混合比で飼料ペレットに混ぜ、毎日エビに与える。結論組成物と飼料添加物で処理した池内でエビは、平均１２０〜１５０日かかる標準群と比べて、１００日で収穫の大きさに成長する。収量もずっと高く、他の種々の感染、例えばビブリオ菌やイエローヘッド、白斑点病ウイルス等のウイルスからの防御が得られる。１１．エビ、ビブリオ感染ビブリオ菌が存在する二つの池から、感染排泄物のサンプルを取った。排泄物中のビブリオ菌の量は培養後、２ｘ１０⁶であった。池の一方では、水を２週間、週に２回、重量３ｋｇの組成物で処理した。また、組成物は飼料ペレットと、組成物１ｋｇ／１００ｋｇ飼料ペレットの割合で混合された。他の池は処理を全く行わなかった。２週間後、両方の池のエビから排泄物を収集して、培養した。結果排泄物中のビブリオ菌は、処理しない対照池では８ｘ１０⁶ｃｆｕ／ｇｒａｍであり、本発明の組成物で処理した池では２ｘ１０³ｃｆｕ／ｇｒａｍであった。１２．猫と犬病気と健康な多数の猫、子猫及び犬に、６ヶ月以上に亘って毎日、本発明による組成物を摂取させた。消化に問題のある動物は数日で健康状態になり、健康な動物は良好な状態のままであった。全動物は排泄物が正常になり、状態が良好で、臭いが少なくなった。１３．馬腸管に問題を生じ、軟便、減量、低栄養状態、毛皮に荒れ及び総合不良状態を示していた、速歩馬として訓練されるべき５０頭の馬に、２週間、本発明による飼料添加物が１日６０グラムで投与した。２週後、投与量は１日１８０グラムに増大された。飼料添加物は１日に亘らされるように通常の飼料に混ぜて与えた。結果３日後既に、排泄物は通常の色と大きさに戻った。４週後、馬は体重を増やし始め、毛皮と総合状態は改善された。その時、馬は再び通常の方法で訓練を開始することができた。１４．環境改善集中飼育の結果、ブロイラー、産卵鶏及び豚の飼育場からの臭いは、非常に大きな問題であると共に、厳しい環境問題となっている。６ヶ月以上に期間に亘り、飼料添加物として本発明による組成物を用いると、飼育場からの臭いは低下し、アンモニアからの臭いが少なくなり、それにより容易に検出される。１ヶ月組成物を用いた後既に、飼育場の状態は抜本的に変わっていた。１５．動物からの尿の分解深さ２メートルの鋸屑層を、長さ１００メートル、幅６メートル、深さ５メートルの特殊容器に付けた。重量５０トンの尿を鋸屑層に吹き付け、本発明による組成物を４０ｍ²に毎に加えた。５時間後、始めの１ｍ層によりブロイラーが吸気した空気が撹拌された。鋸層を通して、臭いの無い水溶液が濾過された。この無臭水は、１００ｐｐｍの遊離窒素及び硫化水素汚染物を含む。１８ケ月間、１日当たり５０トンの尿を分解できる。１８ケ月後、鋸屑の上部１ｍはを新しい鋸屑層と交換する必要がある。尿を分解するこの方法は、環境問題を阻止するために優れている。同様に、本発明による添加物は消化スラッジを分解するのにも用いられ、また得られた生成物は肥料として、また複合物形成に用いることができる。１６．人間への用途細菌感染による腸管問題を患う１０人は、本発明による組成物を１〜３日間、１日に３回、３グラムずつ食用した。結果人々の中６人は１２時間以内に痛み、不快さが無くなり、下痢が止まる反応をした。４人は２４時間後に正常状態になった。１７．栄養に問題のある患者癌患者は通常消化問題を患い、食物を通常のように分解できない、即ち得られる栄養は極めて乏しく、免疫防衛システムが働くのに大きな問題となる。体重が大きく減り、一般不良状態になった入院癌患者が、本発明による組成物を１日に５グラムずつ、飲料水に混ぜて与えられた。結果６日後に軟便の問題は消失し、２週には僅かな体重増が記録された。食欲は戻り、４週後には患者は体重をかなり増やし、健康状態が一般に改善された。１８．酵素、有機酸及びバクテリオシンを含まない本発明による組成物を用いた比較実験以下の研究のもつ目的は、酵素、有機酸及びバクテリオシンが本発明による組成物に必要かどうかを検討することであった。評価のためブロイラーが用いられ、成長速度と死滅率を分析した。１．本生成方法による培養生成物を水で洗浄し、極細ネットを通して濾過し、米ぬかと微生物を酵素、有機酸及びバクテリオシンから分離した。残滓は水で洗浄された。微生物は水相において検出可能なレベルでは検出できず、有機酸と酵素も米ぬかと残留微生物には、検出可能なレベルでは検出できなかった。２．本生成方法による培養生成物を水で洗浄し、ネットを通して濾過し、米ぬかを微生物、酵素、有機酸及びバクテリオシンから分離した。３．以下の試験は生後１日の鶏で行われ、４５日目に、各群に１０００羽の鶏を用い、前に用いられたのと計算後同一量の微生物、即ち通常の飼料に１％添加して用いた。表４参照。表４結論試験は、同一試験場で同一時間に行われた。鶏数（各群に１０００羽）は、結果を評価するのに充分多かった。結果よれば、本発明による微生物、酵素、有機酸及びバクテリオシンの組み合わせは、対照群１と群３，４及び５と比較してテスト群２では成長速度が速めることになる効果の急速発現のために必要なことが明かである。テスト群６は群２より若干良い結果を示しているがこれは、水相を通常の飲み水に混ぜると、どの鶏も組成物を、組成物が飼料ペレットに混ぜられるときより良好で容易に摂取することにより説明される。三ヶ月間組成物を供与した後の豚の血液分析表５表６ＴＧ：トリアシルグリセロールＴＣ：総コレステロールＰＬ：リン脂質類ＦＦＡ：遊離脂肪酸ＧＬ：ブドウ糖１９．生厩肥の腐敗豚のつくる生厩肥を、次のように５個の実験群に分けた。１．対照群２．本発明による組成物０．５％、１％、１．５％及び２％と混合する。次いで、ｐＨ及びアンモニアを測定する。ｐＨは、組成物を添加する３時間前、スラリー中で測定した。空気の供給は、始めの３週間内に三日目毎に行った。厩肥中のｐＨ日目対照群ＢＸ−１ＢＸ−２ＢＸ−１ＢＸ−１０．５％１．０１．５％２％０６．６６．４６．４６．３６．４７６．４６．０５．９５．８５．８１４６．４５．９５．８５．７５．６２１７．５６．１５．８５．７５．６厩肥面から約５ｃｍにおける空気中のアンモニア（ｐｐｍ）日目対照群ＢＸ−１ＢＸ−２ＢＸ−１ＢＸ−１０．５％１．０％１．５％２％００００００１４５５ppm − − − ３ppm ２１７５０ppm ５ppm ８ppm ４ppm ５ppm 腐敗プロセスはテスト群では２時間以内に始まる。２週間後、テスト群では対照群と比べて臭いが少なくなる。アンモニアはドレーガー・ガス検出ポンプ・アキュロ２１／３１（ＤｒａｇｅｒＧａｓＤｅｔｅｃｔｏｒＰｕｍｐａｃｃｕｒｏ２１／３１）で測定した。厩肥の臭いは対照群では０日目で極めて強く、２１日目では強力であった。テスト群の酸味は２１日目でより酸味（乳酸）があり、豚の臭いは認められなかった。テストは、アンモニアの生成をその放出により減少する組成物の特性を明瞭に示している。また、環境の観点から極めて重要である、ｐＨを低く保つ能力を明瞭に示している。ｐＨが低く、アンモニアの放出が少ないので、組成物を生厩肥に用いるこの新しい方法は、厩肥に関連する環境問題を低減する。２０．古厩肥の腐敗豚排出の３週間経った古厩肥を、次のように二つの実験群に分ける。１．対照群２．本発明による組成物１％と混合する。次いで、ｐＨ及びアンモニアを測定する。「古」厩肥を水に混ぜて、全水濃度を約６０％とする。ｐＨは、組成物を添加する３時間前、スラリー中で測定した。空気の供給は、始めの２週間内に毎日ブローワーを用いてに行った。結果時間ｐＨテストアンモニアテスト対照群１％対照群１％３時間前８．５８．５５０ｐｐｍ５０ｐｐｍ３時間後８．５７．２５０ｐｐｍ３０ｐｐｍ日数２８．５６．５６０ｐｐｍ＜５ｐｐｍ１４８．８６．２６０ｐｐｍ＜５ｐｐｍ３０８．８６．２５０ｐｐｍ＜５ｐｐｍ２２．微生物の耐熱性組成物を加熱する目的は、代謝活性を調べるためである。組成物は１０分間、１００℃に加熱された。次いで、組成物は水及び砂糖と混合され、酸化炭素＊の生成が監視された。＊（ｃａｒｂｏｎｏｘｉｄｅ）６時間後、砂糖の明白な発酵が認められ、２週間後、砂糖全部が発酵され、乳酸（ｐａｃｔｉｃａｃｉｄｓ）と酢酸とアルコールの生成が検出できた。これ等の結果は、極めて高い温度にも拘らず、微生物はなお酵素と有機酸を生成する代謝活性をもつことを示している。

【手続補正書】特許法第１８４条の８第１項【提出日】平成１０年４月１１日（１９９８．４．１１）【補正内容】これ等の結果は、極めて高い温度にも拘らず、微生物はなお酵素と有機酸を生成する代謝活性をもつことを示している。（以下、追加／補正、頁差し替え）「２３．特に相乗効果を示す追加テスト結果Ａ．寒天培地上の体外実験：サルモネラ菌を用い寒天培地に与えて、サルモネラの成長を測定する。次の微生物を用い、異なる５実験を行う。１．本発明による生成物を用い、７２時間までのサルモネラの濃度変化を調べる。２．分離ペジオコックス属ペントサシュースを用い、７２時間までのサルモネラの濃度変化を調べる。３．分離ペジオコックス属アシジラクチシを用い、７２時間までのサルモネラの濃度変化を調べる。４．分離ピシア属ファリノーサを用い、７２時間までのサルモネラの濃度変化を調べる。５．分離デッケラ属ブラッセレンシスを用い、７２時間までのサルモネラの濃度変化を調べる。結論本発明による生成物を用いるときの相乗効果は極めて明白である。分離微生物Ｂ．サルモネラ攻撃を受ける生後３日の鶏を検査、ペジオコックス属ペントサシュース、ペジオコックス属アシジラクチシ、ピシア属ファリノーサ、デッケラ属ブラッセレンシスの各分離株、及び本発明によるカクテル組成物で治療。ブロイラーのサルモネラ攻撃６おりの中５おりのブロイラーに１日目、ペジオコックス属ペントサシュース、ペジオコックス属アシジラクチシ、ピシア属ファリノーサ、デッケラ属ブラッセレンシスの各分離株の単一投与量１０⁷ｃｆｕ、と本発明によるカクテル組成物１０⁷ｃｆｕを口から投与した。残り１おりには治療を加えず、これを対照群として用いた。６おりのブロイラー（各おりにブロイラ−１０羽）を３日目に口からｃｆｕ初期サルモネラ（Ｓａ１ｍｏｎｅｌｌａｉｎｆａｎｔｉｓ）で感染させた。マイクロバイオロジー感染８日目に鶏は屠殺された。盲腸を取り出し、表面を滅菌後、内容物のサンプルを無菌状態で取りだした。「ブリリアント・グリーン・アガー」上に平板培養して、サルモネラ・インファンチスＮａＩのｃｆｕカウントを概算した。結果群サルモネラ陰性サルモネラ陽性対照０１０ペジオコックス属ペントサシュース１９ペジオコックス属アシジラクチシ１９ピシア属ファリノーサ０１０デッケラ属ブラッセレンシス０１０本発明によるカクテル組成物１００結論本発明による組成物を用いると、サルモネラ感染が有意に抑制され、微生物の組み合わせが、各微生物の分離株や対照群と比較して、相乗効果をもつことが明白に示される。Ｃ．激しい下痢を伴う食品伝染疾患患者を、ペジオコックス属ペントサシュース、ペジオコックス属アシジラクチシ、ピシア属ファリノーサ、デッケラ属ブラッセレンシスの各分離株と本発明によるカクテル組成物で治療した。投与量は１０⁷ｃｆｕで、２日の間１日に２度投与された。本発明によるカクテル組成物で治療された患者は、一時間後に胃の痛みの緩和を感じ、３時間後には下痢が止まった。上記分離株を受容した患者はどんな効果も得られず、痛みと下痢は二日以上続いた。請求の範囲１．以下の微生物：ａ）ペジオコックス属ペントサシュース（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓｐｅｎｔｏｓａｃｅｕｓ）とｂ）ペジオコックス属アシヂラクチシ（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓａｃｉｄｉｌａｃｔｉｃｉ）の少なくとも一方を、以下の微生物：ｃ）ピシア属ファリノーサ（Ｐｉｃｉａｆａｒｉｎｏｓａ）とｄ）デッケラ属ブラッセレンシス（Ｄｅｋｋｅｒａｂｒｕｘｅｌｌｅｎｓｉｓ）の少なくとも一方と組み合わせて含むことを特徴とする不反芻動物用不反芻動物飼料添加物。２．以下の微生物：ｅ）桿菌（バチラス属微生物）（Ｂａｃｉｌｌｉ）ｆ）連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉ）及びｇ）ブドウ状球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ）の中、少なくとも一つをも含むことを特徴とする請求項１に記載の動物飼料添加物。３．微生物ａ）〜ｇ）の全てを含むことを特徴とする上記請求項の何れかに記載の動物飼料添加物。４．以下の加水分解酵素：ｈ）タンパク分解酵素、ｉ）炭水化物開裂酵素、ｊ）リポリティック（Ｌｉｐｏｌｙｔｉｃ）酵素、ｋ）ペルオキシダーゼ酵素及びｌ）トランスフェラーゼ酵素の中、一つ又はそれ以上をも含むことを特徴とする動物飼料添加物。５．前記タンパク分解酵素はトリプシン及びペプチダーセ様活性をもつ酵素を含み、前記炭水化物開裂酵素はアミラーゼ及びセルラーゼ様活性をもつ酵素を含み、前記リポリティック酵素はトリアシルグリセロラーゼ様活性をもつ酵素を含み、ｋ）前記ペルオキシダーゼ酵素はカタラーゼ様活性をもつ酵素を含み、ｌ）前記トランスフェラーゼはアシルトランスフェラーゼ様活性をもつ酵素を含むことを特徴とする請求項４に記載の動物飼料添加物。６．次の有機酸：乳酸、酢酸及び琥珀酸又はそれ等の均等物の中、少なくとも一つ、好ましくは全てを含むことを特徴とする前記請求項の何れか一つに記載の動物飼料添加物。７．次のバクテリオシン：ペヂオシン（Ｐｅｄｉｏｃｉｎ）Ａ、ニシン（Ｎｉｓｉｎ）、ペヂオシンＡｃｈ及びＰ．アシヂラクチス（ａｃｉｄｉｌａｃｔｉｃｅ）ＰＡＣ１．０の中、少なくとも二つを含むことを特徴とする前記請求項の何れか一つに記載の動物飼料添加物。８．既知の動物飼料を含むことを特徴とする前記請求項の何れか一つに記載の動物飼料添加物。９．水を約８〜１５％、全タンパク質を約１５〜３０％、全リピド（脂質）類を０．５〜５％、線維類を約５〜２０％、灰分（ミネラル）類を約８〜２０％、窒素非含有可溶物を約３０〜５０％、活（ｌｉｖｅ）ペジオコックス属ペントサシュースを約６ｘ１０⁴〜３ｘ１０⁹／ｇｒａｍ、活ペジオコックス属アシヂラクチシを約１ｘ１０³〜１ｘ１０⁷／ｇｒａｍ、ピシア属ファリノーサを約２ｘ１０³ 〜１ｘ１０⁸／ｇｒａｍ、デッケラ属ブラッセレンシスを約２ｘ１０³〜２ｘ１０⁸／ｇｒａｍ、連鎖球菌を約２ｘ１０³〜４ｘ１０⁸／ｇｒａｍ、桿菌を約８ｘ１０²〜６ｘ１０⁷／ｇｒａｍ、ブドウ状球菌を約６ｘ１０⁴〜６ｘ１０⁷／ｇｒａｍ、乳酸を約０．２〜５％、酢酸を約０．１〜３％、琥珀酸を約０．０１〜２％含むことを特徴とする前記請求項の何れか一つに記載の動物飼料添加物。１０．乾量で約２〜１５ＭＪ／ｋｇのエネルギー量を有することを特徴とする前記請求項の何れか一つに記載の動物飼料添加物。１１．前記微生物、酵素、有機及びバクテリオシンは次の特性：１）耐胃酸性２）最大７０℃までの耐熱性３）ペレット化が可能４）淡塩水中で安定５）動物及び人間に無害６）感染を防止する７）感染を除くか治療する８）成長促進９）コローニー生成が良好１０）バクテリオシン効果及び１１）免疫強化効果の中、少なくとも一つ、好ましくは全てを有することを特徴とする前記請求項の何れか一つに記載の動物飼料添加物。１２．前記動物飼料動物が人間の食料であり、動物は人間であることを特徴とする請求項１〜１１の何れか一つに記載の動物飼料添加物。１３．動物内に正常細菌フローラ（生理的寄生菌フローラ）を維持し、病的細菌フローラを復元する目的の配合物を作製するための前記請求項の何れか一つに記載する動物飼料添加物の用途。１４．腸管からの摂取を増大する目的の配合物を作製するための請求項１〜１２の何れか一つに記載する動物飼料添加物の用途。１５．動物内の免疫防衛システムを改善する目的の配合物を作製するための請求項１〜１２の何れか一つに記載する動物飼料添加物の用途。１６．乳離れ下痢及び他の感染を予防する目的の配合物を作製するための請求項１〜１２の何れか一つに記載する動物飼料添加物の用途。１７．小豚の乳離れ前死滅率を低下する目的の配合物を作製するための請求項１〜１２の何れか一つに記載する動物飼料添加物の用途。１８．屠殺用豚の下痢を予防し、飼育時間を短縮する目的の配合物を作製するための請求項１〜１２の何れか一つに記載する動物飼料添加物の用途。１９．サルモネラ及び／又はカンピロバクター感染を予防又は減少する目的の配合物を作製するための請求項１〜１２の何れか一つに記載する動物飼料添加物の用途。２０．エビ及びプローンの細菌感染を予防する目的の配合物を作製するための請求項１〜１２の何れか一つに記載する動物飼料添加物の用途。２１．エビのビブリオ感染を予防する目的の配合物を作製するための請求項１９に記載する動物飼料添加物の用途。２２．人間の急性細菌感染を予防する目的の配合物を作製するための請求項１〜１２の何れか一つに記載する動物飼料添加物の用途。２３．動物内のコレステロール及び／又は脂肪の量を低下する目的の配合物を作製するための請求項１〜１２の何れか一つに記載する動物飼料添加物の用途。２４．動物飼料添加物が人間の食料であり、動物が人である、請求項１〜１２の何れか一つに記載する動物飼料添加物又は請求項１３〜１６、１９及び２３の何れか一つに記載する用途。２５．請求項１〜１２の何れか一つに記載の動物飼料添加物を含む動物飼料。【手続補正書】【提出日】平成１０年９月３０日（１９９８．９．３０）【補正内容】明細書飼料本発明は、動物及びヒトの消化作用に多重共生効果があり、且つ消化管内の正常な細菌フローラを平衡に維持する非毒性で非病原性の微生物、酵素（消化酵素）、有機酸及びバクテリオシンである天然物質を含有する新規な組成物に関する。この組成物はまた、現存する感染を停止し、平衡失調した細菌フローラを正常状態に再生することができる。このことは、自己の制菌及び殺菌効果を通して極めて多種の動物及びヒトを対象とした検査により検証されている。更に、この新規な組成物は胃及び腸内で飼料に驚異的に作用し、飼料をペプチドやアミノ酸等のより容易に消化される断片に分解させる。このことは、飼料のエネルギー含有成分及び他の成分の総合的利用に極めて有益である。この組成物は豚肉の脂肪とコレステロールを驚異的に還元できる。この組成物はまた、免疫防衛システムを驚異的に高めることができる。発明の背景胃及び小腸、大腸内の細菌性感染を阻止するため、現在多種の生成物が豚、子豚、雌豚、鶏、海老等の動物の治療に用いられている。最も頻繁に用いられる生成物は、通常飼料に混ぜて全飼育工程中に動物に投与される種々の抗生物質である。また、豚等の急性感染も通常、抗生物質で治療される。抗生物質の代わりに共生物質が、腸内のマイクロフローラ（ｍｉｃｒｏｆｌｏｒａ）や成長プロモータの安定化のため、ときには用いられる。現存の共生物質の効果は疑わしく、したがって共生物質は効果が無い、少ないの理由で、抗生物質の好適な代替物とは見做されていない。共生物質の効果と作用様式は、微生物の種類に依存する。これ等の生成物の或ものは酵素、例えば炭水化物酵素に基づく商品「バイオフィードプラス」（Ｂｉｏ−ＦｅｅｄＰｌｕｓ）、から成るに過ぎない。また、或ものは桿菌（バチラス）株に基づき、或ものは種々の乳酸菌、連鎖球菌やグラム陽性の細菌からの胞子から成る。これ等全てに共通することは、精製形式のものとして生成されることで、生成される天然酵素及び有機酸は洗い流されれてしまう。そして動物に投与された時、（ａ）コロニー形成が少ないか又は全く無い、（ｂ）微生物が胃の酸部で破壊される、（ｃ）酵素や有機酸の生成が遅れ、成長促進効果をもたらすには到らない、（ｄ）微生物の必須の乳酸が全く生成されないために効能がゼロであるか遅い。したがって、決定的な効能が無い。豚や鶏、家禽、海老等動物の胃腸内で生ずる病原性細菌感染は、畜産家、養殖家と消費者の大きな問題である。畜産家、養殖家が飼育、養殖場に極めて高い衛生基準を保とうとしても、かかる感染を阻止することは可能であるとしても極めて困難であり、離乳期の子豚では激しい下痢の発現は自然の大腸菌と腸管内の乳酸菌との間の関係における免疫因子に依存する。感染と闘うため抗生物質を頻用すると、一般サルモネラ属の抗療性菌株が発生するので大きな問題となる。これ等の細菌の幾つかは多くの抗生物質に対し耐性をもつようになり、動物は抗生物質治療の施行に反して死に到る結果となる。病原性細菌が一旦不平衡を生ずると、動物は飼料消化能力が低下するので通常の方法では体重を増やすことができなくなる。これは飼育家に経済的損失を与えることは自明であるが、それに加え、食肉の品質がしばしば低下し、その消費者が感染する危険も明らかにある。細菌感染に極めて敏感な動物の一群は、雌豚から高頻度で感染してしまう子豚である。離乳期に雌豚から離され、固形飼料の摂取を始めるとき、子豚はしばしば激しい腸内問題を起こす。問題はしばしば、子豚によっては死滅に到るまで激しい。感染はまた、子豚によっては死に到ると云うだけでなく感染した動物の飼育期を不当に長くするので、養豚家に大きな経済的問題を惹起する。罹患した子豚の問題の大きさは、国により異なる。欧州では飼育動物の約１５〜３０％が感染するが、熱帯の国々では数字は、例えば４０％までとかなり高い。ブロイラーの飼育は大きな問題を抱える他の群である。禽類のサルモネラ感染とカンピロバクター感染は極めて頻繁で、養鶏業に大きな経済的損失を与え、鶏の消費者に激症から致死の感染を生ずる。ブロイラーと産卵鶏のサルモネラ感染は、サルモネラ菌があらゆる種類の抗生物質に高度の耐性をもつようになるにしたがい、全世界に亘って制御不可能な段階にまで進行しつつある。動物は一旦病原細菌に感染すると、今日市販の抗生物質や共生物質により治癒は困難で、或いは不可能でさえある。海老の養殖も、食べ残し飼料、排泄物及び化学物質で生じた池腐敗底部層の細菌感染水により、大きな問題を蒙りつつある。これ等全ての環境及び汚染因子が海老の病原細菌感染の危険を増大し、養殖業の大きな経済的不利を招いている。１００％にまで及ぶ死滅率を生ずる最も普通の病原細菌の一つは、多種に亘るビブリオ菌である。環境と汚染の観点から、食肉鶏、産卵鶏及び豚の畜産の提起する大きな問題は、アンモニアの放出の低減に緊急を要することである。飼育床の表面から放出されるアンモニアは家畜に極めて毒性があり、感染の危険を増し、死滅率を高め、生育能率を減ずる。理論的には、感染、抗生物質を用いない成長促進及びエコロジーの改善に係わる上記の問題を解決する慨然的最良の方法は、感染細菌が粘膜表面に付着するのを防ぐこと、或いは既に細菌フローラの不平衡を来している動物の場合には、微生物から成り、多重共生効果のある、発現の速い天然「カクテル」の組成物、その固有の消化酵素、その固有の有機酸及びその固有のバクテリオシンを用い、それにより免疫防衛システム強化することにより死滅率を減少し且つ成長率を増大する細菌フローラの回復を得る方法を見い出すことである。更に、生成物は発酵工程中に微生物により生成される酵素、有機酸及びバクテリオシンから成るべきである。共性物質が有効と考えられるには、微生物からの代謝物質である酵素、有機酸及びバクテリオシンの多重共性効果の発現が必要である。発明の開示本発明の第一の面は、以下の微生物：ａ）ペジオコックス属ペントサシュース（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓｐｅｎｔｏｓａｃｅｕｓ）；ｂ）ペジオコックス属アシヂラクチシ（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓａｃｉｄｉｌａｃｔｉｃｉ）；ｃ）ピシア属ファリノーサ（Ｐｉｃｉａｆａｒｉｎｏｓａ）；ｄ）デッケラ属ブラッセレンシス（Ｄｅｋｋｅｒａｂｒｕｘｅｌｌｅｎｓｉｓ）；ｅ）桿菌（バチラス属微生物）（Ｂａｃｉｌｌｉ）；ｆ）連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉ）；及びｇ）ブドウ状球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ）の中、少なくとも三つ、好ましくは７つを含むことを特徴とする動物飼料添加物又は組成物に関する。本発明による組成物は、以下のような加水分解活性を示す「消化酵素」である酵素：ｈ）タンパク分解酵素、例えばトリプシン及びペプチダーセ様活性を示す；ｉ）炭水化物開裂酵素、例えばアミラーゼ及びセルラーゼ様活性を示す；ｊ）リポリティック（Ｌｉｐｏｌｙｔｉｃ）酵素、例えばトリアシルグリセロラーゼ様活性を示す；ｋ）ペルオキシダーゼ酵素、例えばカタラーゼ様活性；及びｌ）トランスフェラーゼ酵素、例えばアシルトランスフェラーゼ様活性を示す；を含み、以下の有機酸：ｍ）乳酸；ｎ）酢酸；及びｏ）琥珀酸の中、少なくとも三つを含み、以下のバクテリオシン：ｑ）ペヂオシン（Ｐｅｄｉｏｃｉｎ）Ａ、ニシン（Ｎｉｓｉｎ）、ペヂオシンＡｃＨ及びＰ．アシヂラクチス（ａｃｉｄｉｌａｃｔｉｃｅ）ＰＡＣ１．０を含み、任意に既知のものでよい飼料と共にこれ等を含むことを特徴とする。本発明による好ましい飼料は、水を約８〜１５％、全タンパク質を約１５〜３０％、全リピド（脂質）を０．５〜５％、線維類を約５〜２０％、灰分（ミネラル）類を約８〜２０％、非窒素可溶物を約３０〜５０％、活（ｌｉｖｅ）ペジオコックス属ペントサシュースを約６ｘ１０⁴〜３ｘ１０⁹／ｇｒａｍ、活ペジオコックス属アシヂラクチシを約１ｘ１０³〜１ｘ１０⁷／ｇｒａｍ、ピシア属ファリノーサを約２ｘ１０³〜１ｘ１０⁸／ｇｒａｍ、デッケラ属ブラツセレンシスを約２ｘ１０³〜２ｘ１０⁸／ｇｒａｍ、連鎖球菌を約２ｘ１０³〜４ｘ１０⁸／ｇｒａｍ、桿菌を約８ｘ１０²〜６ｘ１０⁷／ｇｒａｍ、ブドウ状球菌を約６ｘ１０⁴〜６ｘ１０⁷／ｇｒａｍ、乳酸を約０．２〜５％、酢酸を約０．１〜３％、琥珀酸を約０．０１〜２％含み、且つ乾量で約２〜１５ＭＪ／ｋｇのエネルギー量を有する。上記の微生物、酵素、有機及びバクテリオシンは一般に次の特性がある：１）耐胃酸性２）最大７０℃までの耐熱性３）ペレット化が可能４）淡塩水中で安定５）動物及びヒトに無害６）感染を防止する７）感染を除く８）成長促進９）コローニー生成が良好１０）殺菌効果１１）免疫強化効果１２）排泄物中のアンモニアと尿中の尿素を減少本発明によれば、正常な細菌フローラをもつ動物と、多分より重要であるが、病的細菌フローラをもつ動物と、の両方に予期しない効果がある新規な飼料組成物が提供される。本発明による新規な飼料組成物は以下により詳細に記載されるが、その必須成分として、ペジオコックス属細菌、桿菌（バチラス属微生物）、連鎖球菌及びブドウ状菌、酵母細胞（菌類）、加水分解又は消化酵素、有機酸とバクテリオシンを含む。本発明による新規な飼料組成物が動物内で作用する機構は充分に分かっていないが、本発明による微生物は病原細菌と共に競争的排除則にしたがい正常な平衡の回復を完了し、正常細菌フローラを保護するものと現在のところ推定される。有機酸は、餌袋（食肉鶏及び産卵鶏に対して）と大小腸内のｐＨを低下し、病原細菌が成長するのを困難にする。乳酸も溶解により、病原細菌を殺す。微生物と乳酸の両者はその共性作用により、動物やヒトに用いられるとき、免疫防衛システムを刺激する。餌袋（鶏に対して）、胃および腸内で、飼料内に既にある消化酵素は飼料に作用してこれをより容易に吸収されるタンパク質、タンパク質の断片及びアミノ酸に分解し、こうして飼料のエネルギー保有成分と他の栄養成分の総合的利用を改善する。何れにせよ、結果は細菌問題をもつ動物も正常な（胃）腸平衡を回復できるようになる。更なる効果は、腸管からの消化摂取は増大され、それにより飼料内の死んだ有機物質を減少し、有害なアンモニアと尿素の生成の減少に導く。極めて重要な結果は、動物の免疫防衛システムがかなり改善され、進行する感染と及び／又は感染病原体と効果的に闘うことができるようになることである。本発明による組成物を動物に供給することの一つの効果は、他の問題を生ぜず、正常な細菌フローラを回復／維持することである。他の効果は、組成物が感染を予防すると共に、他の問題を生ぜず、腸内に高レベルの健康な細菌を保つことができることである。本発明による飼料組成物の更なる効果は、細菌を除去すると共に、飼料のエネルギー保有成分と他の栄養成分との総合的利用を改善することである。上に定義された飼料組成物は、事実上どんな通常の飼料とでも好結果で用いることができ、胃内の酸状態により破壊されない。更に、本発明による組成物内に既にある酵素、有機酸とバクテリオシンは、微生物の急速複製に必要なより多い酵索、有機酸及びバクテリオシンの生成を続けるため、微生物のコロニー形成の速度を増大する。微生物により生成されるバクテリオシンは少なくとも二つの作用、即ちａ）微生物をそれを殺す能力のある他の細菌から守るため生成されることとｂ）それ自体が抗細菌効果があること、の作用がある。本発明による保存培養及び組成物とその用途及び有益な効果は更に、以下の非限定実施例において示される。実施例１−飼料の作製「保存培養」の作製１．前記微生物を含む１２ｋｇの土壌（ｓｏｉｌ）を、３０ｋｇの米ぬか、１ｋｇの大豆粉末及び１４リットルの水と混合する。混合物を５０℃で１２時間加熱する。１２時間後、温度を３５℃に下げ、混合物をこの温度に４８時間保つ。「保存培養」を約６％まで乾燥し、飼料組成物の作製に直ちに用いられるようにする。飼料組成物の作製１．５００ｋｇの米ぬかを、１．４ｋｇの上記保存培養と混合する。水を加えて含水率を３５％に上げる。２．混合物を１０〜１５ｃｍの層にのばし、プラスチックフィルムで覆い、水の蒸発を防ぐ。８日後に発酵を完了する。３．プラスチックフィルムを除去し、生成物を約７〜９％まで乾燥する。そこで、生成物は直ちに用いられるか、引き続く使用のために紙袋等で包装される。分析水分８．１％総タンパク質２２．７％総脂質３．１％線維類１１．７％灰分（ミネラル）類１４．６％可溶性窒素非含有物質３９．８％微生物の数２ｘ１０⁵〜３ｘ１０⁹ エネルギー保有量１１．４ＭＪ／ｋｇ乾量生成物の使用例１．子豚−乳離れ下痢と他の感染の予防研究の目的は、通常の飼料に１％の本発明による組成物を混合してテストを行うことで、実験は乳離れ日（２４日）に開始し、子豚の平均体重が２０ｋｇになったところで終了した。結果対照群テスト群子豚数１８８１７８開始時の平均生後日数２４．０４日２２．２４日開始時の平均体重６．７８ｋｇ６．１５ｋｇ終了時の平均体重１５．６０ｋｇ１５．０７ｋｇ終了時の平均生後日数６４．０４日５８．２４日平均実験期間４０．００日３６．００日平均生育増量８．８２ｋｇ８．９２ｋｇ平均増量率（／日）０．２２１ｋｇ０．２４８ｋｇサルモネラ感染日３５４０感染子豚数７３５２ノルフロクサジンで治療（Ｎｏｒｆｌｏｘａｚｉｎｅ）注射の日３６せずノルフロクサジンとネオミシン（Ｎｅｏｍｙｃｉｎ）飼料内に投与の日３７せず死滅率、子豚数４２（５８％）５（１０％）結論実験は、サルモネラ感染により、プロトコルの通りには完全に終了し得なかった。サルモネラ感染を起こした対照群の子豚７３頭は病状が極めて悪く、抗生物質による治療にも拘らず数日の中に４２頭が死んだ。６４日目には獣医師は１８８頭の子豚全てを断念する決定をした。本発明による組成物に付いて進行するテスト群の子豚は、対照群の子豚と比較して感染が遅れた。テスト群では、抗生物質を注射又は飼料と混合しなくても、感染と下痢の重症度は軽く、５頭が死んだに過ぎない。この組成物はまた通常の抗生物質の使用と比較して、サルモネラ感染を予防し、サルモネラ菌を破壊する良好な結果を明確に示した。２．子豚−感染の予防研究の目的は通常の飼料に０．５％（組成物５ｋｇ／飼料トン）を混ぜたものの子豚に対する有用性を調べることで、テストは２４日目に開始され、子豚が１５ｋｇに達したとき終了した。結果対照群テスト群子豚数１４３１３３総体重９７５ｋｇ９５４ｋｇ乳離れ時の平均体重６．８２ｋｇ７．１７ｋｇ乳離れ時の平均生後日数２５．４２日２４．０８日終了時の総体重２１３１．５ｋｇ１９６１ｋｇ終了時の総生存子豚数１２８１３０死滅率、子豚数１５（１０．４９％）３（２．２６％）終了時の平均体重１６．６５ｋｇ１５．０８ｋｇ終了時の平均生後日数６６．１９日６０．７８日平均実験期間４０．７７日３６．７６日平均成長量（増量）９．８３ｋｇ７．９１ｋｇ平均成長率（／日）０．２４５ｋｇ０．２１５ｋｇＡＤＧ２４１．０６ｇ２１５．７６ｇＦＣＲ１．５６１．７７ＦＣ／ｋｇ１４．０５１５．９５対照群は体重がより増量したが、これは基本的に対照群の子豚は４日速く生まれていて、子豚の成長率はこの四日間により速いからである。対照群では、乳離れ下痢の頻度は比較的高い。テスト群では、下痢は全く記録されなかった。死滅率は対照群の方がテスト群よりかなり高い。この高い死滅率は、離乳期が過ぎた後に起こった、対照群における重度の大腸菌感染によるものであった。テスト群における大腸菌感染の重症度は、極めて軽かった。組成物を０．５％とした投与は極めて低いが、感染防止には充分である。しかし、成長率を高めるには充分ではない。３．雌豚この研究の目的は、本発明による組成物１％を通常の飼料に混ぜて、分娩前４週間から乳離れまで雌豚に与えた場合の有用性を調べることであった。結果対照群テスト群雌豚数５４５７子豚数５５４５６７死産子豚２１（３．７９％）１３（２．２９％）ミイラ数５（０．９０％）１０（１．７６％）欠陥子豚総数７（１．２６％）１２（２．１２％）小及び欠陥子豚３３（５．９６％）３５（６．１７％）良好生存子豚５２１（９４．０４％）５３２（９３．８３％）平均出生体重１．４５ｋｇ１．４８ｋｇ平均子豚数／腹９．６５９．３３乳離れ雌豚５１５５乳離れ時死滅率５１（９．７９％）２６（４．８９％）乳離れ子豚４７０５０６乳離れ時平均体重７．０４ｋｇ７．２６ｋｇ平均乳離れ日、生後２７．５７日２７．５９日乳離れ子豚／雌豚９．２２９．２０結論平均出生体重は、テスト群の雌豚からの子豚の方が３０（２％）グラム多かった。死滅率は対照群では９．７９％で、テスト群の４．８９％と比較され、差は５１％である。テスト群の子豚の乳離れ時の平均体重は２２０グラムで、対照群より３．１％重い。これは、離乳期に入るとき重要になる。対照群で死滅率が高いのは、獣医師によると、子豚がより虚弱で、下痢がより激しいことによる。また、これ等は２８日目後４〜７日の間、再生産ができた。雌豚が分娩前４週間と分娩後４週間組成物を与えられると、組成物は免疫防衛システムを増大する。このことは、子豚の感染が防御される共に、乳が濃くなることから明かである。４．雌豚の健康状態と前乳離れ死滅率この研究の目的は、組成物を１．５％で通常の飼料に混ぜて与えた（６０ｇ／日／雌豚）場合の有用性を、雌豚の健康状態と前乳離れ死滅率について調べることであった。結果分娩対照群テスト群雌豚数１０１０生存出生子豚総数１０２９５平均出生体重１．２９ｋｇ１．４８ｋｇ平均子豚数／腹１１．１１０．０平均出生豚数／腹１０．２９．５平均死産豚数／腹０．５０．２死産子豚の％４．５２．０平均ミイラ数／腹０．４０．３ミイラの％３．６３．０乳離れ離乳経過雌豚数１０１０離乳経過子豚数８６．０９４．０離乳経過豚／腹８．６９．４前乳離れ死滅率１５．７％１．１％平均離乳体重６．０５ｋｇ６．３３ｋｇ離乳生後日数２１．４日２１．８日結論テスト群の平均体重は分娩時で１９０グラムであり、対照群より１５％高いので、これは実質的なものと見做される。対照群の前乳離れ死滅率１５．７％は、激しい乳離れ下痢によるものである。テスト群の前乳離れ死滅率１．１％は、雌豚を健康に維持し、子豚に必須で子豚を感染から防御する免疫グロブリンをより多く含む乳をださせる、本発明による組成物の直接の結果と判定されなければならない。平均離乳体重の差２８０グラム又は５％も、実質的なものである。５．豚の血液分析と一般的分析値検査は、日本食品研究所により山口大学農学部と協力して行われた。検査の要約は、本発明による組成物は以下の有益な効果をもつと云うものである。食肉（赤筋／脂肪：８５／１５％）対照群テスト群水分６３．４％６４．１％タンパク質１８．５％１９．５％脂肪１６．８％１５．１％コレステロール５０．０ｍｇ４４．４ｍｇＰｈ５．７５．８結論本発明の組成物で飼育した屠殺肉豚は、最後の３ヶ月でコレステロールと脂肪の値が実質的に下がり、これは消費者にとって極めて有益であるものと見做されねばならない。その理由は組成物の生成中に生成され、且つ豚に投与されるとき組成物内の微生物から生ずる共役胆汁酸酵素によるものである。表１参照。６．屠殺肉豚−下痢の防止と飼育期間の短縮検討は、スウェーデン国ウプサラ市のＰｒｏｚｙｍｅＡＢにより、スウェーデン農業科学大学動物育種遺伝学部とスウェーデン国ウプサラ市の動物健康サービス並びにスウェーデン国ウプサラ市のファルメーク屠殺場の協力で企画された。テスト群と対照群は各々２７頭を含んだ。平均初期体重は、テスト群では３２．６ｋｇ、対照群では３２．２ｋｇであった。各群の豚に同量の飼料が与えられたが、テスト群の飼料には本発明による飼料添加物が０．７５％含有した。豚は全て週に一度、体重がチェックされた。結果テスト群、２７頭最終体重に達するのに要する、全量５９５０ｋｇの飼料、即ち豚一頭当たり平均２２０．４ｋｇの飼料を用いた。最初の一頭は６２日目に屠殺され、最後の一頭は１５４日目に屠殺された。最終体重に達するのに合計２４５６日、即ち豚一頭当たり平均９４．３日を要した。以下の表１のＦＣＲ３．０３参照。この群の豚は、試験中に何れも医療を必要としなかった。テスト群では副作用も異常行動も観られなかった。対照群、２７頭最終体重に達するのに要する、全量７３３５ｋｇの飼料、即ち豚一頭当たり平均２７１．７ｋｇの飼料を用いた。最初の一頭は７６日目に屠殺され、最後の一頭は１５４日目に屠殺された。最終体重に達するのに合計３０４３日、即ち豚一頭当たり平均１１２．７日を要した。以下の表１のＦＣＲ３．７６参照。この群では７頭が、胃傷害のため医療を必要とした。表１７．ブロイラー、サルモネラ予防この研究は、オランダ国ベークベルゲン７３６０ＡＡ（Ｐ．Ｏ．Ｂｏｘ１５）に在るＤＬＯＩｎｓｔｉｔｕｔｅｆｏｒＡｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＨｅａｌｔｈＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅＲｅｓｅａｒｃｈＤｅｐａｒｔｍｅｎｔＤＬＯ−ＮＬが行った。ブロイラーのサルモネラ感染８個の檻のブロイラーを１４日目に個々に口腔から１０⁴ｃｆｕのサルモネラ・インファンチス（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａｉｎｆａｎｔｉｓ）ＮａＩで感染させ、他の群では５個の自然感染を誘発する標識付きシーダーをおり毎に置いた。シーダーは１４日目に口腔から５ｘ１０⁷ｃｆｕのサルモネラ・インファンチスＮａＩで感染させた。感染又はシーダー設置前の実験用鶏の対サルモネラ状態に付いては、排泄物のサンプリングにより検査した。採取日（感染後１週間）に、各おりから５羽のブロイラーが屠殺され、盲腸でサルモネラ数が推定された。飼料飼料には、成長促進剤としてＺｉｎｃｂａｃｉｔｒａｃｉｎを５０ｍｇ／ｋｇ、コクシジウム抑制剤としてｈａｌｏｆｕｇｉｎｏｎｅを３ｍｇ／ｋｇ、含有させた。飼料は全実験期間に対して用意され、任意に投与された。本発明による飼料添加物は飼料に、そのペレット化前に含有された（乾燥質量で１％）。ペレット化温度は７０℃であった。ミクロバイオロジー感染後７日して、各おりから鶏６羽をランダムに選び（群当たり総数４８羽）、屠殺した。盲腸を取り出し、表面を殺菌した後、無菌状態で取り出す。サルモネラ・インファンチスＮａＩのｃｆｕカウントは、「ブリリアント・グリーン・アガー」（”ＢｒｉｌｌｉａｎｔＧｒｅｅｎＡｇａｒ”）（ＯｘｏｉｄＣＭ３２９）に２０ｐｐｍナリデックス（Ｎａｌｉｄｅｘ）酸で平板培養して推定した。「緩衝ペプトン水」”ＢｕｆｆｅｒｅｄＰｅｐｔｏｎｅＷａｔｅｒ”（ＯｘｏｉｄＣＭ５０９）に盲腸内容物を溶かした１０倍希釈溶液を培養し、濃縮後ＢＧＡ寒天培地に平板培養した。統計結果をスチューデントｔ検定で分析した。結果及び考察極めて高いサルモネラ投与量（５ｘ１０⁷）でシーダー感染させたことから、予測通り、数日後にはサルモネラ陽性数は約７０％の許容レベルとなった。両テスト群からのブロイラーの盲腸内容物にあるサルモネラｃｆｕ平均数は、対照群からのものより有意に低かった（Ｐ＜０．０１）。表２に、盲腸内容物内の個々のｃｆｕカウントからの結果が示されている。同表では、所定レベルのサルモネラｃｆｕをもったブロイラー数が表されている。これ等の結果から、感染因数（ＩＦ）と防染因数（ＰＦ）を計算できる。ＩＦは、特定群における全鶏の盲腸内容物のグラム当たりのサルモネラ数の相乗平均である。このＩＦから、対照群のＩＦ値を処理群のＩＦ値で割って、ＰＦが得られる。表２盲腸内容物グラム当たり所定サルモネラｃｆｕ数をもった鶏数（防染因数）第１週口腔感染第２週シーダーを介してサンプリングデータにおいて（第１週ｐ．ｉ．）、サルモネラが無いブロイラー数は、対照群よりテスト群の方が多かった（表３）。表３サルモネラ陰性鶏の盲腸サンプルのサルモネラ分析結論本発明による組成物をブロイラーに投与することは、サルモネラの早期排除に有意に寄与する。効果の急速発現は、組成物の含有物である微生物、酵素、有機酸及びバクテリオシンの多重共生作用による。結果は、ブロイラーからサルモネラを除去する組成物の有効生を明確に示している。８．ブロイラー、成長促進この研究の目的は、生後１日の鶏であるブロイラーを屠殺するまで飼育する場合、抗生物質を含まない飼料に１％で混ぜた本発明による組成物で飼育したテスト群を、抗生物質を含む通常の飼料で飼育した対照群と比較することであった。研究は、タイ国ＰａｎａｔＮｉｋｈｏｍにあるＣｈａｉｙａｒｅｅＦａｒｍＣｏ．，Ｌｔｄ．により行われた。結果対照群テスト群鶏数１０２００１０２００鶏の生後日１日１日終了時の生後日４６日４６日検査中に用いられた薬剤 - Mintervit １日目１日目 - IB A ３２２ - Tylan ３２ - Permasol ６９ - ND Clone １０８ - IBD Blen １４１３ - Tylosin S.P. １７用いず - Post-Vaccine １８１５ - Chlor-Ery ２８２８ - Triane ４０４０死んだ鶏第１週８２羽５７羽２１１５１０６３６９５０４３３２７５４３３３６１１８４２７３２５４５計７８５羽３６０羽除去した罹病及び虚弱鶏対照群テスト群第１週１０羽２６羽２２４２０３２６６４１８０５１６０６２６１７１１１８９計２３１羽１４２羽罹病及び死んだ鶏総数、羽第１週９２（０．９０％）８３（０．８１％）２１３９（１．３６％）１２６（１．２４％）３９５（０．９３％）５６（０．５５％）４５１（０．５０％）２７（０．２６％）５５９（０．５８％）３３（０．３２％）６１４４（１．４１％）４３（０．４２％）７４３６（４．２７％）１３４（１．３１％）計１０１６（９．９６％）５０２（４．９２％）生存鶏９１８４９６９８総ｋｇ１７，６９８．４３１１９，８４６．９６平均体重１．９３ｋｇ２．０５ｋｇ総消費飼料量ｋｇ３６．１９５４０．４８９ＦＣＲ２．０５２．０４結論検査は、ＣｈａｉｙａｒｅｅＦａｒｍＣｏ．，Ｌｔｄ．からの経営幹部により極めて良好に管理されたものである。これ等の鶏は屠殺前６日間に抗生物質を投与され、対照群の鶏は下痢を起こし、体重が減り、総死滅率が高かった。最後の週に、抗生物質が停止されると鶏は体重が減り、死滅率が増大した。これは、養鶏家の克服しなければならない大きな問題である。最後の週には、養鶏家の全営業を損ねかねるサルモネラとカンピロバクター再感染の危険が生じた。テスト群の死滅率の差と体重増加は実質的である。１２０グラム／鶏の差と鶏の生存数の多さは、経済的観点から極めて実質的である。９．ブロイラー、コスト利益研究背景タイ国サラブリにあるＳＵＮＥＫＦＯＯＤＬＴＤは、ブロイラーを日本に輸出する会社で、この分野のタイ国における上位１０社に数えられる。ブロイラーを輸出する各会社は、食肉内の抗生物質、化学物質及び病原細菌の残量に関し極めて厳しい規則に従わなければならない。この会社の処理生産能力は、一日当たり６万ブロイラー、即ち年間１９００万ブロイラーである。即ち、最大の利益をあげ且つ日本の消費者と良い関係を確立するために、極めて高い職業的基準でブロイラー飼育をする必要がある。ＳＵＮＥＫは、成長促進と食肉のサルモネラ汚染の排除のため抗生物質の代替として「共生物質」を試す長い経験がある。これまで同社は、市販のものでは、全ての基準を満たすどんな共生物質も見いだしていない。以下、本発明による組成物を用いる試験の条件を述べる。判定基準生後１日の鶏１００００羽の各群を、互いに５０メートル離れた２つの畜舎に収容する。対照群とテスト群は、同一種の無抗生物質飼料が与えられ、同一の標準的医療プログラムに従う。２群を同一数の労働者が看る。テスト群の鶏には、飼料ペレットに０．５％で混ぜた本組成物（ｋｇ／飼料１トン）を用いる。屠殺は、サラブリ地方の決められた屠殺場で、４４〜４６日目に行う。結果テスト群対照群生後１日の鶏数１０６００１００００死滅率第１週１１９（１．１２％）１８０（１．８０％）２１３１（１．２４％）２０３（２．０３％）３１１２（１．０６％）１７２（１．７２％）４１１５（１．０９％）１３８（１．３８％）５９７（０．９２％）２１１（２．１１％）６１７１（１．６１％）１８６（１．８６％）７１３４（１．２６％）７８（０．７８％）計８７９（８．２９％）１１６８（１１．６８％）注）第７週は、テスト群で４日、対照群で３日である。飼料消費量テスト群対照群第１週１，５００ｋｇ１，３５０ｋｇ２３，０６０２，８５０３５，０７０４，７７０４７，１４０６，５４０５７，９５０７，８３０６９，５７０９，９３０７４，０８０２，１６０計３８，３７０ｋｇ３５，４３０ｋｇ注）第７週は、テスト群で４日、対照群で３日である。医療プログラムテスト群対照群１日目ＩＢｖａｃｃｉｎｅＩＢｖａｃｃｉｎｅ１〜３日目ＴｙｌｏｓｉｎＴｙｌｏｓｉｎ１０日目ＮＤｖａｃｃｉｎｅＮＤｖａｃｃｉｎｅ１４日目ＩＢＤｖａｃｃｉｎｅＩＢＤｖａｃｃｉｎｅ１５日目ＡｍｃｏｌｉｓｔｉｎｅＡｍｃｏｌｉｓｔｉｎｅ２２日目ＴｅｔｒａｍｙｃｉｎＴｅｔｒａｍｙｃｉｎ２９日目ＴｅｔｒａｍｙｃｉｎＴｅｔｒａｍｙｃｉｎ３５日目ＮｏｒｆｌｏｘａｃｉｎＮｏｒｆｌｏｘａｃｉｎ総体重１８，７００ｋｇ１６，０００ｋｇ屠殺鶏数９，７２１羽８，８３２羽総消費飼料量３８，３７０ｋｇ３５，４３０ｋｇＦＣＲ２．０５２．２１平均体重／鶏１．９２ｋｇ１．８１ｋｇコスト利益分析経費テスト群対照群生後１日の鶏ＵＳ＄４，２４０ＵＳ＄４，０００医薬６３６６００飼料９，６６９８，９２８テストサンプル１９１．８４０労務２１２２００計ＵＳ＄１４，８３４．６８ＵＳ＄１３，７２８．３６収入計ＵＳ＄２０，１９６ＵＳ＄１７，２８０総純収入ＵＳ＄５，２６１．３２ＵＳ＄３，５５１．６４純収入／鶏ＵＳ＄０．４９６ＵＳ＄０．３５６考察試験は、ＳＵＮＥＫＦＯＯＤＬＴＤにより全て実行され、管理された。Ｂｉｏｆｅｅｄのスタッフは週に一度養鶏場を訪れ、データを収集し、鶏の健康状態をチェックした。ＳＵＮＥＫの決定により、比較試験のため、両群に同一の標準的医療を適用した。結論二群間の差異は、あらゆる点で、有意である。対照群における１１．６８％の死滅率はテスト群の８．２９％と比較すると、約２９％で、統計的に確かに有意である。テスト群の２．０５と対照群の２．２１とのＦＣＲの差は７％を越え、これも実質的はものと判定されなければならない。しかしながら、最も重要なのは、本発明による組成物を用いることの便益を明瞭に示すコスト利益（費用−便益）分析で、３日目以降抗生物質の使用を止めると、かかる種の抗生物質治療は予防的なものに過ぎないので、上記の差異がより大きなものとなることが分かる。しかしながら、テスト群の鶏当たり純利益が１２．４１バーツ（Ｂａｈｔ）／鶏で、対照群の８．８９バーツ／鶏はその４０％となる。本組成物と他の種の微生物生成物の差は、この組成物が始めから微生物、有機酸、酵素及びバクテリオシン等の必要成分の全てを含む完成した「バイオシステム」（”ＢｉｏｔｉｃＳｙｓｔｅｍ）と分類し得ると云うことに依存し、極めて大きい。このことはまた、餌袋内に良好な初期コロニー化を形成し且つ餌袋内で飼料に酵素の直接効果をもたらす保証となる。有機酸は先ず、ｐＨを低下し、病原細菌にとっての条件を不利にする。そして、このことは、ａ）乳酸が直接作用する制菌効果とｂ）微生物からの総合的免疫強化効果と共に、鶏を健康状態に保持するのに必要なものとなる。微生物を含む生成物を鶏に用いるとき、鶏は良好な消化機構があるが栄養摂取機能が低いので、有益な効果の発現を餌袋内で直接開始させ、胃の酸部で微生物の傷みを最小にすることが極めて重要である。本発明の組成物は、作用が可能になる前に自己の代謝物質の生成から始めなければならないため作用の進行が極めて遅い通常の抗生物質と異なり、始めから直ちに作用を開始する。上記の作用様式が、本発明による組成物を用いると得られる優れた純便益の理由である。また付言できることは、本発明の組成物を用いると、全世界に亘って大きな問題となっている鶏のサルモネラ及びカンピロバクター感染の危険が減少することである。また記録できたことは、対照群と比較してテスト群からはアンモニアの臭いが少なかったことである。１０．エビとプローン池で飼われるプローンは、細菌感染に極めて敏感である。一旦感染が発生すると池の中のエビやプローンは全て死ぬ。感染の危険を最小にするために、本発明による組成物は約２０グラム／ｍ²の濃度で用いられ、池の空底の上に均一に散布される。組成物は７〜１０日間作用し、その後病原微生物の濃度はエビ／プローンを後で害しない程度に薄められる。後期幼生を放流後、本発明による組成物を２週間、週に２回、２ｋｇ／１６００ｍ²の割合で用いる。更に、組成物の微粉末（メッシュ６０）を１％の混合比で飼料ペレットに混ぜ、毎日エビに与える。結論組成物と飼料添加物で処理した池内でエビは、平均１２０〜１５０日かかる標準群と比べて、１００日で収穫の大きさに成長する。収量もずっと高く、他の種々の感染、例えばビブリオ菌やイエローヘッド、白斑点病ウイルス等のウイルスからの防御が得られる。１１．エビ、ビブリオ感染ビブリオ菌が存在する二つの池から、感染排泄物のサンプルを取った。排泄物中のビブリオ菌の量は培養後、２ｘ１０⁶であった。池の一方では、水を２週間、週に２回、重量３ｋｇの組成物で処理した。また、組成物は飼料ペレットと、組成物１ｋｇ／１００ｋｇ飼料ペレットの割合で混合された。他の池は処理を全く行わなかった。２週間後、両方の池のエビから排泄物を収集して、培養した。結果排泄物中のビブリオ菌は、処理しない対照池では８ｘ１０⁶ｃｆｕ／ｇｒａｍであり、本発明の組成物で処理した池では２ｘ１０³ｃｆｕ／ｇｒａｍであった。１２．猫と犬病気と健康な多数の猫、子猫及び犬に、６ヶ月以上に亘って毎日、本発明による組成物を摂取させた。消化に問題のある動物は数日で健康状態になり、健康な動物は良好な状態のままであった。全動物は排泄物が正常になり、状態が良好で、臭いが少なくなった。１３．馬腸管に問題を生じ、軟便、減量、低栄養状態、毛並に荒れ及び総合不良状態を示していた、競走馬として訓練されるべき５０頭の馬に、２週間、本発明による飼料添加物が１日６０グラムで投与した。２週後、投与量は１日１８０グラムに増大された。飼料添加物は１日に亘らされるように通常の飼料に混ぜて与えた。結果３日後既に、排泄物は通常の色と大きさに戻った。４週後、馬は体重を増やし始め、毛並と総合状態は改善された。その時、馬は再び通常の方法で訓練を開始することができた。１４．環境改善集中飼育の結果、ブロイラー、産卵鶏及び豚の飼育場からの臭いは、非常に大きな問題であると共に、厳しい環境問題となっている。６ヶ月以上の期間に亘り、飼料添加物として本発明による組成物を用いると、飼育場からの臭いは低下し、アンモニアからの臭いが少なくなり、それにより容易に検出される。１ヶ月組成物を用いた後既に、飼育場の状態は抜本的に変わっていた。１５．動物からの尿の分解深さ２メートルの鋸屑層を、長さ１００メートル、幅６メートル、深さ５メートルの特殊容器に付けた。重量５０トンの尿を鋸屑層に吹き付け、本発明による組成物を４０ｍ²毎に加えた。５時間後、始めの１ｍ層によりブロイラーが吸気した空気が撹拌された。鋸層を通して、臭いの無い水溶液が濾過された。この無臭水は、１００ｐｐｍの遊離窒素及び硫化水素汚染物を含む。１８ケ月間、１日当たり５０トンの尿を分解できる。１８ケ月後、鋸屑の上部１ｍはを新しい鋸屑層と交換する必要がある。尿を分解するこの方法は、環境問題を阻止するために優れている。同様に、本発明による添加物は消化スラッジを分解するのにも用いられ、また得られた生成物は肥料として、また複合物形成に用いることができる。１６．人間への用途細菌感染による腸管問題を患う１０人は、本発明による組成物を１〜３日間、１日に３回、３グラムずつ食用した。結果人々の中６人は１２時間以内に痛み、不快さが無くなり、下痢が止まる反応を示した。４人は２４時間後に正常状態になった。１７．栄養に問題のある患者癌患者は通常消化問題を患い、食物を通常のように分解できない、即ち得られる栄養は極めて乏しく、免疫防衛システムが働くのに大きな問題となる。体重が大きく減り、概略不良状態になった入院癌患者５人に、本発明による組成物を１日に５グラムずつ、飲料水に混ぜて与えられた。結果６日後に軟便の問題は消失し、２週には僅かな体重増が記録された。食欲は戻り、４週後には患者は体重をかなり増やし、健康状態が概略に改善された。１８．酵素、有機酸及びバクテリオシンを含まない本発明による組成物を用いた比較実験以下の研究のもつ目的は、酵素、有機酸及びバクテリオシンが本発明による組成物に必要かどうかを検討することであった。評価のためブロイラーが用いられ、成長速度と死滅率を分析した。１．本生成方法による培養生成物を水で洗浄し、極細ネットを通して濾過し、米ぬかと微生物を酵素、有機酸及びバクテリオシンから分離した。残滓は水で洗浄された。微生物は水相において検出可能なレベルでは検出できず、有機酸と酵素も米ぬかと残留微生物には、検出可能なレベルでは検出できなかった。２．本生成方法による培養生成物を水で洗浄し、ネットを通して濾過し、米ぬかを微生物、酵素、有機酸及びバクテリオシンから分離した。３．以下の試験は各群に１０００羽の鶏を用い、生後１日の鶏で行われ、４５日目に終了され、前に用いられたのと計算後同一量の微生物、即ち通常の飼料に１％添加して用いた。表４参照。表４結論試験は、同一試験場で同一時間に行われた。鶏数（各群に１０００羽）は、結果を評価するのに充分多かった。結果によれば、本発明による微生物、酵素、有機酸及びバクテリオシンの組み合わせは、対照群１と群３，４及び５と比較してテスト群２及び６では成長速度を速めることになる効果の急速発現のために必要なことが明かである。テスト群６は群２より若干良い結果を示しているがこれは、水相を通常の飲み水に混ぜると、どの鶏も組成物を、組成物が飼料ペレットに混ぜられるときより良好で容易に摂取することにより説明される。三ヶ月間組成物を供与した後の豚の血液分析表５表６ＴＧ：トリアシルグリセロールＴＣ：総コレステロールＰＬ：リン脂質類ＦＦＡ：遊離脂肪酸ＧＬ：ブドウ糖１９．生厩肥の腐敗豚のつくる生厩肥を、次のように５個の実験群に分けた。１．対照群２．本発明による組成物０．５％、１％、１．５％及び２％と混合する。次いで、ｐＨ及びアンモニアを測定する。ｐＨは、組成物を添加する３時間前、スラリー中で測定した。空気の供給は、始めの３週間内に三日目毎に行った。厩肥中のｐＨ日目対照群ＢＸ−１ＢＸ−２ＢＸ−１ＢＸ−１０．５％１．０％１．５％２％０６．６６．４６．４６．３６．４７６．４６．０５．９５．８５．８１４６．４５．９５．８５．７５．６２１７．５６．１５．８５．７５．６厩肥面から約５ｃｍにおける空気中のアンモニア（ｐｐｍ）日目対照群ＢＸ−１ＢＸ−２ＢＸ−１ＢＸ−１０．５％１．０％１．５％２％００００００１４５５ppm − − − ３ppm ２１７５０ppm ５ppm ８ppm ４ppm ５ppm 腐敗プロセスはテスト群では２時間以内に始まる。２週間後、テスト群では対照群と比べて臭いが少なくなる。アンモニアはドレーガー・ガス検出ポンプ・アキュロ２１／３１（ＤｒａｇｅｒＧａｓＤｅｔｅｃｔｏｒＰｕｍｐａｃｃｕｒｏ２１／３１）で測定した。厩肥の臭いは対照群では０日目で極めて強く、２１日目では強力であった。テスト群の酸味は２１日目でより酸味（乳酸）があり、豚の臭いは認められなかった。テストは、アンモニアの生成および放出を減少する組成物の特性を明瞭に示している。また、環境の観点から極めて重要である、ｐＨを低く保つ能力を明瞭に示している。ｐＨが低く、アンモニアの放出が少ないので、組成物を生厩肥に用いるこの新しい方法は、厩肥に関連する環境問題を低減する。２０．古厩肥の腐敗豚排出の３週間経った古厩肥を、次のように二つの実験群に分ける。１．対照群２．本発明による組成物１％と混合する。次いで、ｐＨ及びアンモニアを測定する。「古」厩肥を水に混ぜて、全水濃度を約６０％とする。ｐＨは、組成物を添加する３時間前、スラリー中で測定した。空気の供給は、始めの２週間内に毎日ブローワーを用いて行った。結果時間ｐＨテストアンモニアテスト対照群１％対照群１％３時間前８．５８．５５０ｐｐｍ５０ｐｐｍ３時間後８．５７．２５０ｐｐｍ３０ｐｐｍ日数２８．５６．５６０ｐｐｍ＜５ｐｐｍ１４８．８６．２６０ｐｐｍ＜５ｐｐｍ３０８．８６．２５０ｐｐｍ＜５ｐｐｍ２２．微生物の耐熱性組成物を加熱する目的は、代謝活性を調べるためである。組成物は１０分間、１００℃に加熱された。次いで、組成物は水及び砂糖と混合され、酸化炭素＊の生成が監視された。＊（ｃａｒｂｏｎｏｘｉｄｅ）６時間後、砂糖の明白な発酵が認められ、２週間後、砂糖全部が発酵され、乳酸（ｐａｃｔｉｃａｃｉｄｓ）と酢酸とアルコールの生成が検出できた。これ等の結果は、極めて高い温度にも拘らず、微生物はなお酵素と有機酸を生成する代謝活性をもつことを示している。２３．特に相乗効果を示す追加テスト結果Ａ．寒天培地上の体外実験：サルモネラ菌を用い寒天培地に与えて、サルモネラの成長を測定する。次の微生物を用い、異なる５実験を行う。１．本発明による生成物を用い、７２時間までのサルモネラの濃度変化を調べる。２．分離ペジオコックス属ペントサシュースを用い、７２時間までのサルモネラの濃度変化を調べる。３．分離ペジオコックス属アシジラクチシを用い、７２時間までのサルモネラの濃度変化を調べる。４．分離ピシア属ファリノーサを用い、７２時間までのサルモネラの濃度変化を調べる。５．分離デッケラ属ブラッセレンシスを用い、７２時間までのサルモネラの濃度変化を調べる。結論本発明による生成物を用いるときの相乗効果は極めて明白である。分離微生物のテスト結果は、サルモネラの成長を非常にわずかしか抑制しないことを示している。Ｂ．サルモネラ攻撃を受ける生後３日の鶏を検査、ペジオコックス属ペントサシュース、ペジオコックス属アシジラクチシ、ピシア属ファリノーサ、デッケラ属ブラッセレンシスの各分離株、及び本発明によるカクテル組成物で治療。ブロイラーのサルモネラ攻撃６おりの中５おりのブロイラーに１日目、ペジオコックス属ペントサシュース、ペジオコックス属アシジラクチシ、ピシア属ファリノーサ、デッケラ属ブラッセレンシスの各分離株の単一投与量１０⁷ｃｆｕ、と本発明によるカクテル組成物１０⁷ｃｆｕを口から投与した。残り１おりには治療を加えず、これを対照群として用いた。６おりのブロイラー（各おりにブロイラ−１０羽）を３日目に口からｃｆｕ初期サルモネラ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａｉｎｆａｎｔｉｓ）で感染させた。マイクロバイオロジー感染８日目に鶏は屠殺された。盲腸を取り出し、表面を滅菌後、内容物のサンプルを無菌状態で取りだした。「ブリリアント・グリーン・アガー」上に平板培養して、サルモネラ・インファンチスＮａＩのｃｆｕカウントを概算した。結果群サルモネラ陰性サルモネラ陽性対照０１０ペジオコックス属ペントサシュース１９ペジオコックス属アシジラクチシ１９ピシア属ファリノーサ０１０デッケラ属ブラッセレンシス０１０本発明によるカクテル組成物１００結論本発明による組成物を用いると、サルモネラ感染が有意に抑制され、微生物の組み合わせが、各微生物の分離株や対照群と比較して、相乗効果をもつことが明白に示される。Ｃ．激しい下痢を伴う食品伝染疾患患者を、ペジオコックス属ペントサシュース、ペジオコックス属アシジラクチシ、ピシア属ファリノーサ、デッケラ属ブラッセレンシスの各分離株と本発明によるカクテル組成物で治療した。投与量は１０⁷ｃｆｕで、２日の間１日に２度投与された。本発明によるカクテル組成物で治療された患者は、一時間後に胃の痛みの緩和を感じ、３時間後には下痢が止まった。上記分離株を受容した患者はどんな効果も得られず、痛みと下痢は二日以上続いた。請求の範囲１．次の微生物の少なくとも一つと、ａ）ペジオコックス属ペントサシュース（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓｐｅｎｔｏｓａｃｅｕｓ）とｂ）ペジオコックス属アシヂラクチシ（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓａｃｉｄｉｌａｃｔｉｃｉ）次の微生物の少なくとも一つと、ｃ）ピシア属ファリノーサ（Ｐｉｃｉａｆａｒｉｎｏｓａ）とｄ）デッケラ属ブラッセレンシス（Ｄｅｋｋｅｒａｂｒｕｘｅｌｌｅｎｓｉｓ）次の微生物の少なくとも一つと、ｅ）桿菌（バチラス属微生物）（Ｂａｃｉｌ１ｉ）ｆ）連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉ）ｇ）ブドウ状球菌（Ｓｔａｐｈｙ１ｏｃｏｃｃｉ）次の加水分解酵素の一つ以上と、ｈ）タンパク分解酵素、ｉ）炭水化物開裂酵素、ｊ）リポリティック（Ｌｉｐｏｌｙｔｉｃ）酵素、ｋ）ペルオキシダーゼ酵素及びｌ）トランスフェラーゼ酵素次の有機酸の少なくとも一つと、ｍ）乳酸ｎ）酢酸ｏ）琥珀酸次のバクテリオシンの少なくとも一つと、ｑ）ペヂオシン（Ｐｅｄｉｏｃｉｎ）Ａ、ニシン（Ｎｉｓｉｎ）、ペヂオシンＡｃＨ及びＰ．アシヂラクチス（ａｃｉｄｉｌａｃｔｉｃｅ）ＰＡＣ１．０を含むことを特徴とする不反芻動物用不反芻動物飼料添加物。２．全ての生きた微生物ａ）〜ｇ）を含むことを特徴とする請求項１記載の動物飼料添加物。３．全ての加水分解酵素ｈ）〜ｌ）を含むことを特徴とする請求項１又は２記載の動物飼料添加物。４．全ての有機酸ｍ）〜ｏ）を含むことを特徴とする請求項１〜３の何れかに記載の動物飼料添加物。５．全てのバクテリオシン：ペヂオシン（Ｐｅｄｉｏｃｉｎ）Ａ、ニシン（Ｎｉｓｉｎ）、ペヂオシンＡｃＨ及びＰ．アシヂラクチス（ａｃｉｄｉｌａｃｔｉｃｅ）ＰＡＣ１．０を含むことを特徴とする請求項１〜４の何れか一つに記載の動物飼料添加物。６．タンパク分解酵素はトリプシン及びペプチダーセ様活性を示し、炭水化物開裂酵素はアミラーゼ及びセルラーゼ様活性を示し、リポリティック（Ｌｉｐｏｌｙｔｉｃ）酵素はトリアシルグリセロラーゼ様活性を示し、ペルオキシダーゼ酵素はカタラーゼ様活性を示し、及びトランスフェラーゼ酵素はアシルトランスフェラーゼ様活性を示すことを特徴とする請求項１〜５の何れか一つに記載の動物飼料添加物。７．既知の動物飼料を含むことを特徴とする請求項１〜６の何れか一つに記載の動物飼料添加物。８．水を約８〜１５％、全タンパク質を約１５〜３０％、全リピド（脂質）類を０．５〜５％、繊維類を約５〜２０％、灰分（ミネラル）類を約８〜２０％、非窒素可溶物を約３０〜５０％、活（ｌｉｖｅ）ペジオコックス属ペントサシュースを約６ｘ１０⁴〜３ｘ１０⁹／ｇｒａｍ、活ペジオコックス属アシヂラクチシを約１ｘ１０³〜１ｘ１０⁷／ｇｒａｍ、ピシア属ファリノーサを約２ｘ１０³ 〜１ｘ１０⁸／ｇｒａｍ、デッケラ属ブラッセレンシスを約２ｘ１０³〜２ｘ１０⁸ ／ｇｒａｍ、連鎖球菌を約２ｘ１０³〜４ｘ１０⁸／ｇｒａｍ、桿菌を約８ｘ１０²〜６ｘ１０⁷／ｇｒａｍ、ブドウ状球菌を約６ｘ１０⁴〜６ｘ１０⁷／ｇｒａｍ、乳酸を約０．２〜５％、酢酸を約０．１〜３％、琥珀酸を約０．０１〜２％含むことを特徴とする請求項１〜６の何れか一つに記載の動物飼料添加物。９．乾量で約２〜１５ＭＪ／ｋｇのエネルギー量を有することを特徴とする請求項１〜８の何れか一つに記載の動物飼料添加物。１０．前記微生物、酵素、有機及びバクテリオシンは次の特性：１）耐胃酸性２）最大７０℃までの耐熱性３）ペレット化が可能４）淡塩水中で安定５）動物及びヒトに無害６）感染を防止する７）感染を除くか治療する８）成長促進９）コローニー生成が良好１０）殺菌効果及び１１）免疫強化効果の中、少なくとも一つ、好ましくは全てを有することを特徴とする請求項１〜９の何れか一つに記載の動物飼料添加物。１１．前記動物飼料動物が人間の食料であり、動物は人間であることを特徴とする請求項１〜１０の何れか一つに記載の動物飼料添加物。１２．動物内に正常細菌フローラを維持し、病的細菌フローラを回復する目的の配合物を作製するための請求項１〜１１の何れか一つに記載する動物飼料添加物の用途。１３．腸管からの摂取を増大する目的の配合物を作製するための請求項１〜１１の何れか一つに記載する動物飼料添加物の用途。１４．動物内の免疫防衛システムを改善する目的の配合物を作製するための請求項１〜１１の何れか一つに記載する動物飼料添加物の用途。１５．乳離れ下痢及び他の感染を予防する目的の配合物を作製するための請求項１〜１１の何れか一つに記載する動物飼料添加物の用途。１６．子豚の乳離れ前死滅率を低下する目的の配合物を作製するための請求項１〜１１の何れか一つに記載する動物飼料添加物の用途。１７．屠殺用豚の下痢を予防し、飼育時間を短縮する目的の配合物を作製するための請求項１〜１１の何れか一つに記載する動物飼料添加物の用途。１８．サルモネラ及び／又はカンピロバクター感染を予防又は減少する目的の配合物を作製するための請求項１〜１１の何れか一つに記載する動物飼料添加物の用途。１９．エビ及びプローンの細菌感染を予防する目的の配合物を作製するための請求項１〜１１の何れか一つに記載する動物飼料添加物の用途。２０．エビのビブリオ感染を予防する目的の配合物を作製するための請求項１８に記載する動物飼料添加物の用途。２１．人間の急性細菌感染を予防する目的の配合物を作製するための請求項１〜１１の何れか一つに記載する動物飼料添加物の用途。２２．動物内のコレステロール及び／又は脂肪の量を低下する目的の配合物を作製するための請求項１〜１１の何れか一つに記載する動物飼料添加物の用途。２３．動物飼料添加物が人間の食料であり、動物が人である、請求項１〜１１の何れか一つに記載する動物飼料添加物又は請求項１２〜１５、１８及び２２の何れか一つに記載する用途。２４．請求項１〜１１の何れか一つに記載の動物飼料添加物を含む動物飼料。２５．動物飼料添加物は、アンモニアの生成を減少しかつ肥料中のｐＨを低下させるため、肥料添加物として使用されることを特徴とする、請求項１〜１１の何れか一つに記載の動物飼料添加物の用途。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者ブンケ、パトリックスウェーデン国ウプサラエス―753 22、ブレットグレンド１

Claims

【特許請求の範囲】１．以下の微生物：ａ）ペジオコックス属ペントサシュース（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓｐｅｎｔｏｓａｃｅｕｓ）；ｂ）ペジオコックス属アシヂラクチシ（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓａｃｉｄｉｌａｃｔｉｃｉ）；ｃ）ピシア属ファリノーサ（Ｐｉｃｉａｆａｒｉｎｏｓａ）；ｄ）デッケラ属ブラッセレンシス（Ｄｅｋｋｅｒａｂｒｕｘｅｌｌｅｎｓｉｓ）；ｅ）桿菌（バチラス属微生物）（Ｂａｃｉｌｌｉ）；ｆ）連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉ）；及びｇ）ブドウ状球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ）の中、少なくとも三つを含むことを特徴とする不反倒動物用不反芻動物飼料添加物。２．微生物ａ）〜ｇ）の全てを含むことを特徴とする請求項１に記載の動物飼料添加物。３．以下の加水分解酵素：ｈ）タンパク分解酵素、ｉ）炭水化物開裂酵素、ｊ）リポリティック（Ｌｉｐｏｌｙｔｉｃ）酵素、ｋ）ペルオキシダーゼ酵素及びｌ）トランスフェラーゼ酵素の中、一つ又はそれ以上をも含むことを特徴とする動物飼料添加物。４．前記タンパク分解酵素はトリプシン及びペプチダーセ様活性をもつ酵素を含み、前記炭水化物開裂酵素はアミラーゼ及びセルラーゼ様活性をもつ酵素を含み、前記リポリティック酵素はトリアシルグリセロラーゼ様活性をもつ酵素を含み、ｋ）前記ペルオキシダーゼ酵素はカタラーゼ様活性をもつ酵素を含み、ｌ）前記トランスフェラーゼはアシルトランスフェラーゼ様活性をもつ酵素を含むことを特徴とする請求項３に記載の動物飼料添加物。５．次の有機酸：乳酸、酢酸及び琥珀酸又はそれ等の均等物の中、少なくとも一つ、好ましくは全てを含むことを特徴とする前記請求項の何れか一つに記載の動物飼料添加物。６．次のバクテリオシン：ペヂオシン（Ｐｅｄｉｏｃｉｎ）Ａ、ニシン（Ｎｉｓｉｎ）、ペヂオシンＡｃＨ及びＰ．アシヂラクチス（ａｃｉｄｉｌａｃｔｉｃｅ）ＰＡＣ１．０の中、少なくとも二つを含むことを特徴とする前記請求項の何れか一つに記載の動物飼料添加物。７．既知の動物飼料を含むことを特徴とする前記請求項の何れか一つに記載の動物飼料添加物。８．水を約８〜１５％、全タンパク質を約１５〜３０％、全リピド（脂質）類を０．５〜５％、線維類を約５〜２０％、灰分（ミネラル）類を約８〜２０％、非窒素可溶物を約３０〜５０％、活（ｌｉｖｅ）ペジオコックス属ペントサシュースを約６ｘ１０⁴〜３ｘ１０⁹／ｇｒａｍ、活ペジオコックス属アシヂラクチシを約１ｘ１０³〜１ｘ１０⁷／ｇｒａｍ、ピシア属ファリノーサを約２ｘ１０〜１ｘ１０⁸／ｇｒａｍ、デッケラ属ブラッセレンシスを約２ｘ１０³〜２ｘ１０⁸／ｇｒａｍ、連鎖球菌を約２ｘ１０³〜４ｘ１０⁸／ｇｒａｍ、桿菌を約８ｘ１０²〜６ｘ１０⁷／ｇｒａｍ、ブドウ状球菌を約６ｘ１０⁴〜６ｘ１０⁷／ｇｒａｍ、乳酸を約０．２〜５％、酢酸を約０．１〜３％、琥珀酸を約０．０１〜２％含むことを特徴とする前記請求項の何れか一つに記載の動物飼料添加物。９．乾量で約２〜１５ＭＪ／ｋｇのエネルギー量を有することを特徴とする前記請求項の何れか一つに記載の動物飼料添加物。１０．前記微生物、酵素、有機及びバクテリオシンは次の特性：１）耐胃酸性２）最大７０℃までの耐熱性３）ペレット化が可能４）淡塩水中で安定５）動物及びヒトに無害６）感染を防止する７）感染を除く８）成長促進９）コローニー生成が良好１０）バクテリオシン効果１１）免疫強化効果の中、少なくとも一つ、好ましくは全てを有することを特徴とする前記請求項の何れか一つに記載の動物飼料添加物。１１．動物は人間であることを特徴とする請求項１〜１０の何れか一つに記載の動物飼料添加物。１２．動物内に正常な生理的寄生菌（フローラ）を維持し、病原細菌のフローラを復元することを目的とする、前記請求項の何れか一つに記載の動物飼料添加物の用途。１３．腸管からの摂取を増大することを目的とする、請求項１〜１１の何れか一つに記載の動物飼料添加物の用途。１４．動物内の免疫防衛システムを改善することを目的とする、請求項１〜１１の何れか一つに記載の動物飼料添加物の用途。１５．乳離れ下痢及び他の感染を予防することを目的とする、請求項１〜１１の何れか一つに記載の動物飼料添加物の用途。１６．子豚の乳離れ前死滅率を低下することを目的とする、請求項１〜１１の何れか一つに記載の動物飼料添加物の用途。１７．下痢を予防し、屠殺用豚の飼育時間を短縮することを目的とする、請求項１〜１１の何れか一つに記載の動物飼料添加物の用途。１８．サルモネラ及び／又はカンピロバクター感染を予防又は低下することを目的とする、請求項１〜１１の何れか一つに記載の動物飼料添加物の用途。１９．エビ及びプローンの細菌感染を予防することを目的とする、請求項１〜１１の何れか一つに記載の動物飼料添加物の用途。２０．エビのビブリオ感染を予防することを目的とする、請求項１〜１１の何れか一つに記載の動物飼料添加物の用途。２１．人間の急性細菌感染を予防することを目的とする、請求項１〜１１の何れか一つに記載の動物飼料添加物の用途。２２．動物内のコレステロール及び／又は脂肪の量を減少することを目的とする、請求項１〜１１の何れか一つに記載の動物飼料添加物の用途。２３．動物が人である、請求項１２〜２１の何れか一つに記載の動物飼料添加物の用途。２４．請求項１〜１１の何れか一つに記載の動物飼料添加物を含む動物飼料。