JP2000351728A

JP2000351728A - 抗炎症剤

Info

Publication number: JP2000351728A
Application number: JP11163402A
Authority: JP
Inventors: Shigehiro Kataoka; 茂博片岡; Yukihiko Iwai; 幸彦岩井; Norio Yamaguchi; 典男山口; Minoru Saito; 實斉藤
Original assignee: Kikkoman Corp
Current assignee: Kikkoman Corp
Priority date: 1999-06-10
Filing date: 1999-06-10
Publication date: 2000-12-19

Abstract

(57)【要約】（修正有）【課題】皮膚炎症に対する抑制活性が強く、しかも安
全性が高い物質を有効成分として含有させ、抗炎症効果
が期待できる薬剤を提供する。【解決手段】ポリイソプレニル化ベンゾフェノン誘導
体、例えばオトギリソウ科植物の有機溶媒抽出由来のガ
ルシノール（カルボジノール）を有効成分として含有さ
せて、抗炎症剤とする。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、抗炎症剤、さらに
詳しくは、ポリイソプレニル化ベンゾフェノン誘導体を
有効成分として含有させた、抗炎症剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】近年、アトピー性皮膚炎、化学物質過敏
症、花粉症など、炎症性疾患の患者数が増大し、社会問
題にもなっている。従来皮膚炎などの炎症性疾患にはス
テロイド系の薬剤が多用され、一定の治療効果が認めら
れてきた。しかし、最近ではむしろ、ステロイド剤の過
剰使用による副作用が問題とされるようになってきてい
る。また、非ステロイド系の抗炎症剤であるアスピリン
や、インドメタシンは、多量に服用することにより、急
性の胃潰瘍を発症するなど深刻な副作用を有している。
一方、漢方薬など伝統的な医薬にも穏やかな抗炎症作用
を持つもの、例えば甘草のグリチルリチンなどが知られ
ている。しかし、そのような生薬、天然物由来成分は、
副作用が少ない一方、効果の点では必ずしも満足すべき
ものではなかった。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】本発明は、皮膚炎、例
えば化学物質などによって誘導される皮膚炎の予防治療
に有効で、副作用が無く、植物中などに多量に含有し、
その抽出、加工、或いは誘導体化処理が容易で、しかも
安全性が高い物質を求め、その物質を有効成分として含
有させた抗炎症剤を提供することを目的としてなされた
ものである。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、前記した
課題を解決するため、鋭意研究した結果、インド各地に
おいて伝統的に食用にされている、オトギリソウ科植物
の抽出液に、化学物質によって誘導される炎症の予防、
治療に強い活性があること、その活性本体がポリイソプ
レニル化ベンゾフェノン誘導体類であることを初めて明
らかにし、そしてポリイソプレニル化ベンゾフェノン誘
導体を有効成分として含有させれば、抗炎症剤として有
用であることなどを見出し、これらの知見に基づき本発
明を完成するに至った。すなわち、本発明は、ポリイソ
プレニル化ベンゾフェノン誘導体を含有してなる、抗炎
症剤である。以下、本発明を詳細に説明する。

【０００５】

【発明の実施の形態】本発明に用いられるポリイソプレ
ニル化ベンゾフェノン誘導体とは、ベンゾフェノン（ｂ
ｅｎｚｏｐｈｅｎｏｎｅ）の骨格におけるベンゼン核の
水素原子が水酸基、カルボニル基、及び複数のイソプレ
ニル基などの炭化水素鎖などに置換された誘導体類であ
って、それらは水溶性、脂溶性のどちらでもよく、また
その生産手段は特に問われず、化学合成法で得られるも
の、ポリイソプレニル化ベンゾフェノン誘導体を含有す
る植物体などから抽出した抽出物、その精製物などいず
れでもよい。そして、ポリイソプレニル化ベンゾフェノ
ン誘導体類の具体例としては、例えばガルシノール
［（Ｇａｒｃｉｎｏｌ）；別名カンボジノール（Ｃａ
ｍｂｏｇｉｎｏｌ）］、イソガルシノール［（Ｉｓｏｇ
ａｒｃｉｎｏｌ）；別名カンボジン（Ｃａｍｂｏｇｉ
ｎ）］、キサントチモール（Ｘａｎｔｈｏｃｈｙｍｏ
ｌ）、イソキサントチモール（Ｉｓｏｘａｎｔｈｏｃｈ
ｙｍｏｌ）、グッチフェロン（Ｇｕｔｔｉｆｅｒｏｎ
ｅ）などを挙げることができる。それらの中でも、特に
好適なものとして抗炎症活性が強く、しかも、原料植物
体の生産量が多く、その植物体中の含有率も高い、ガル
シノールを挙げることができる。なお、前記のポリイソ
プレニル化ベンゾフェノン誘導体の内でも、特に脂溶性
であるものは、製剤化の上での利便性、生体に対する吸
収効率、作用部位への局在化効率などが大いに期待され
る。

【０００６】本発明に用いられるポリイソプレニル化ベ
ンゾフェノン誘導体としては、該誘導体を含有している
前記したような植物体自体、もしくはその粉砕物（それ
らは生、乾燥物どちらでもよい）の抽出物、その精製物
又は部分精製物などを挙げることができる。前記のポリ
イソプレニル化ベンゾフェノン誘導体を含有している植
物としては、オトギリソウ科に属する植物、例えば、熱
帯性植物であるＧａｒｃｉｎｉａｃａｍｂｏｇｉａ
（英名：Ｇｏｒａｋａ）、Ｇａｒｃｉｎｉａｉｎｄｉ
ｃａ（英名：Ｋｏｋａｍ）、Ｇａｒｃｉｎｉａｐｕｒ
ｐｕｒｅａなどを挙げることができる。そしてポリイソ
プレニル化ベンゾフェノン誘導体を得るには、その植物
体の果実、果皮、樹木、樹皮、樹液などいずれでも用い
られる。前記Ｇａｒｃｉｎｉａｃａｍｂｏｇｉａ、Ｇ
ａｒｃｉｎｉａｉｎｄｉｃａの乾燥果実は、インド各
地において料理の酸味料として大量に生産されているの
で、それを用いてもよい。また近年では、これらの乾燥
果実から、ヒドロキシクエン酸の抽出が工業的に大規模
に行われており、その際に生ずる廃棄物であるその抽出
残渣を用いてもよい。

【０００７】ポリイソプレニル化ベンゾフェノン誘導体
は、合成法でも得ることができるが、ポリイソプレニル
化ベンゾフェノン誘導体を含有している前記の各種植物
体から慣用技術を用いて抽出することにより得るのが好
適である。その抽出においては、有機溶媒を用いると当
該物質を効率よく抽出できる。その有機溶媒としては、
例えばメタノール、エタノール、アセトン、酢酸エチ
ル、又はそれらの含水物、クロロホルム、ジクロロメタ
ン、ペンタン、ヘキサン、ヘプタンを挙げることができ
る。本発明において用いられるポリイソプレニル化ベン
ゾフェノン誘導体は、これら有機溶媒の中でも、エタノ
ール、アセトン、ヘキサンなどにより抽出したものが好
ましく用いられる。また、超臨界ガスを用いて抽出する
には、例えば超臨界ガスとして炭酸ガスなどが用いら
れ、これにエントレーナーとしてエタノール、水などを
加え、温度；０〜１００℃、好ましくは２０〜４０℃、
圧力；５〜２０００ｋｇ／ｃｍ²、好ましくは２０〜８
００ｋｇ／ｃｍ²、時間；５分〜４日間、好ましくは３
０分〜２０時間などの条件を適宜組み合わせて行なうこ
とができる。本発明においては、いずれの抽出物も使用
することができる。

【０００８】前記した有機溶媒を用いて抽出物を得るに
は、前記したごとく公知の方法に従えばよく、例えば前
記した植物の果実、果皮、樹木、樹皮を適当に破砕した
後、それらの粉砕物、また該植物の樹液を前記した有機
溶媒で公知の方法を用いて処理する。具体的には、原料
の１〜１００倍（重量比）、好ましくは３〜２０（重量
比）の有機溶媒で、温度０℃以上、好ましくは１０℃か
らその有機溶媒の沸点以下の温度の条件下で、１分〜８
週間、好ましくは１０分〜１週間抽出処理をする。

【０００９】また、上記のごとくして得られる抽出処理
物自体を本発明に用いてもよいが、好ましくは有機溶媒
を通常の方法、例えばロータリーエバポレーターなどを
使用して除去するのがよい。この有機溶媒除去物に、凍
結乾燥、加熱乾燥などの慣用技術処理を施してもよい。

【００１０】上記抽出物からポリイソプレニル化ベンゾ
フェノン誘導体を精製するには、公知の天然有機化合物
類の分離・精製法を採用すればよい。例えば、活性炭、
シリカ、化学修飾シリカ、ポリマ−系担体などを用いた
吸脱着、あるいはクロマトグラフィー、液−液抽出、分
別沈澱などの手法により、不純物を除き精製する。具体
的には、本発明の抽出物をＯＤＳ−カラムクロマトグラ
フィーに供し、６０〜１００％（ｖ／ｖ）エタノール溶
液（または適宜の濃度のメタノール或いはアセトニトリ
ルでもよい。）で溶出・分画する。これらのクロマトグ
ラフィーによって分離される成分を集め、濃縮・結晶化
するとポリイソプレニル化ベンゾフェノン誘導体が得ら
れる。なお、得られた当該物は、合成法によって別の誘
導体類に変えることもでき、このようにして得られたポ
リイソプレニル化ベンゾフェノン誘導体もまた本発明に
おいて有効に使用することができる。

【００１１】前記した抽出物、その抽出物の精製物、す
なわちポリイソプレニル化ベンゾフェノン誘導体自体
（これを原料として新に合成されたポリイソプレニル化
ベンゾフェノン誘導体も含む）、あるいは前記抽出物の
中間精製物は、後述するごとく、代表的な皮膚炎症惹起
物質であるホルボールエステルによる皮膚炎症を抑制す
る活性が極めて強いことが確認された。そしてこのポリ
イソプレニル化ベンゾフェノン誘導体は、後述のごとく
安全性も極めて高い。

【００１２】したがって、前記のポリイソプレニル化ベ
ンゾフェノン誘導体を含んだ、抽出物、精製物あるいは
中間精製物などいずれかを有効成分として含有させるこ
とにより、前記した効果が期待できる本発明の抗炎症剤
とすることができる。そして、必要により、前記のポリ
イソプレニル化ベンゾフェノン誘導体に、薬剤に通常用
いられている適当な賦形剤、例えば乳糖、澱粉、油脂な
どを添加して本発明の抗炎症剤とすることもできる。ま
た、必要により、ポリイソプレニル化ベンゾフェノン誘
導体の１種又は２種以上を併用することもできる。

【００１３】本発明の抗炎症剤は、ポリイソプレニル化
ベンゾフェノン誘導体を、例えば０．００００１〜１０
％（ｗ／ｗ）、好ましくは、０．０００１〜５％（ｗ／
ｗ）含有させて用いられる。また、ポリイソプレニル化
ベンゾフェノン誘導体単独か、もしくは他の薬剤との合
剤とするかして、それらに乳化剤、安定化剤、増量剤な
どを混合してもよい。本抗炎症剤は、経口、外用、注射
の何れの方法によっても投与しうる。経口剤としては散
剤、錠剤、顆粒剤、カプセル剤、シロップ剤など任意の
剤形を採用しうる。外用剤としては、乳剤、軟膏剤など
が好適である。注射剤としては、ポリイソプレニル化ベ
ンゾフェノン誘導体に、界面活性剤、プロピレングリコ
ール、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセル
ロースなどを加えた乳濁液が好適に用いられる。

【００１４】本発明の抗炎症剤の投与量は、治療すべき
症状、年令、体重などにより異なるが、例えば通常、成
人１日あたり、ポリイソプレニル化ベンゾフェノン誘導
体として１〜５０００ｍｇ、好ましくは１０〜２０００
ｍｇ程度である。また、本発明の抗炎症剤を皮膚炎症な
どに局所的に外用する場合は、１回につきポリイソプレ
ニル化ベンゾフェノン誘導体として０．００１μｇ〜１
００ｍｇ、好ましくは０．１μｇ〜１０ｍｇを患部に塗
布して用いられる。

【００１５】

【実施例】以下に、参考例、実験例および実施例を示
し、本発明をさらに詳細に説明するが、本発明は、それ
らの例によってなんら限定されるものではない。参考例１（ガルシノールの調製）ガルシノールは、インド産の食用果実であるＧａｒｃｉ
ｎｉａｉｎｄｉｃａの乾燥果皮（Ｋｏｋａｍ）より、
以下の方法で抽出、精製した。Ｇａｒｃｉｎｉａｉｎ
ｄｉｃａの乾燥果皮から、先ずヒドロキシクエン酸を抽
出した。その方法は、Ｙ．Ｓ．Ｌｅｗｉｓの方法（Ｍｅ
ｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ、７７巻、６
１５頁参照）によった。すなわち、上記果皮２００ｇに
６００ｍｌの水を加え、１１５℃、１５分間、オ−トク
レ−ブ処理した。ブッフナ−漏斗上（ト−ヨ−のろ紙Ｎ
ｏ．２を使用）で吸引ろ過し、更に、ろ液が全量で６０
０ｍｌになるまで水で洗った。かくのごとくして、抽出
残渣を得た。

【００１６】次いで、この抽出残渣の湿重量５０ｇに対
して５００ｍｌのエタノールを添加し、室温（２０℃）
で３時間撹拌しながら抽出を行った。残渣をろ別し、抽
出液をロータリーエバポレーターにて減圧乾固し、抽出
エキスを得た。これをメタノール１０ｍｌに溶解し、不
溶物をろ別後、ＹＭＣゲルＯＤＳ−ＡＭ１２０−Ｓ５０
（ＹＭＣＣｏ．Ｌｔｄ．製）の内径３２ｍｍ×３５ｃ
ｍのカラムクロマトグラフィーに供した。アセトニトリ
ル９０％溶液にて溶出される成分のうち、３６５ｎｍに
吸収を有する２つの主たる画分を集めた。このうち、後
半に溶出した黄色の画分をロータリーエバポレーターに
てアセトニトリルを溜去して淡黄色の乳濁液を得た。こ
の乳濁液に、３倍容の酢酸エチルを添加して抽出を行
い、有機溶媒層を無水硫酸ナトリウムで脱水した後、ロ
ータリーエバポレーターにて濃縮乾固した。その乾固物
を少量のアセトニトリルに加温溶解し、冷却すると淡黄
色の針状結晶が得られた。この結晶をろ別し、少量の冷
アセトニトリルで洗浄した後、真空デシケーター中で乾
燥させた。最終的に１５０ｍｇの結晶が得られた。この
結晶の融点は１２０℃、比旋光度は−１３５°、紫外部
吸収は２５０ｎｍ及び３６５ｎｍ、マススペクトル測定
による分子量は６０２であった。これらの値から、この
物質は、Ａ．Ｖ．ＲａｍａＲａｏら（Ｔｅｔｒａｈｅ
ｄｒｏｎＬｅｔｔ．、２１巻、１９７５−１９７８頁、
１９８０年参照）及びＮ．Ｋｒｉｓｈｎａｍｕｒｔｈ
ｙら（ＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔ．、２２巻、
７９３−７６９頁、１９８１年参照）によって報告さ
れたポリイソプレニル化ベンゾフェノンの一種であるガ
ルシノール（カンボジノール）と一致した。

【００１７】参考例２（イソガルシノールの調製）参考例１に記載した操作によって、ＯＤＳカラムクロマ
トグラフィーで得られた、前半に溶出された無色の画分
を集めた。これをロータリーエバポレーターにて濃縮乾
固し、エタノールによって加温溶解した。これを穏やか
に冷却し、無色の板状結晶を得た。この結晶をろ別、乾
燥し、最終的に１５ｍｇの結晶を得た。この結晶の融点
は２１８℃、比旋光度は−２０３°、紫外部吸収は２３
２ｎｍ及び２７８ｎｍ、マススペクトル測定による分子
量は６０２であった。これらの値から、この物質は、前
記文献によって報告されたポリイソプレニル化ベンゾフ
ェノンの一種であるイソガルシノール（カンボジン）と
一致した。

【００１８】実験例（ホルボールエステルにより惹起
される皮膚炎症抑制活性試験）ガルシノールの抗炎症効果を評価するため、１０週齢以
上のｄｄｙ雄マウスを用いて、以下のようにして行なっ
た。なお、ガルシノールは、参考例１に記載したと同様
の方法で得たガルシノール標品を用いた。先ず、任意の
ガルシノール濃度（０．５ｗ／ｖ％、０．２５ｗ／ｖ
％）のアセトン溶液を調製した。試験群においては、マ
ウスの右耳に、前記したガルシノールを含むアセトン溶
液を４０μｌ／ｅａｒ塗布し、左耳にはアセトンのみを
塗布し、３０分後、マウスの右耳（外側内側両面）にＴ
ＰＡ（１２−O−テトラデカノイルホルボール−１３−
アセテート）溶液（２００μｇ／ｍｌアセトン）２０μ
ｌ又は４０μｌ／ｅａｒを塗布して耳浮腫を発生させ、
また、左耳にはＴＰＡ溶液の代わりにアセトンのみを塗
布した。一方、対照群においては、マウスの右耳に、ガ
ルシノールを含まないアセトンのみを塗布し、３０分後
に前記したＴＰＡ溶液を塗布して耳浮腫を発生させ、ま
た、左耳にはＴＰＡ溶液の代わりにアセトンのみを塗布
した。

【００１９】４時間後に、試験群及び対照群について、
両耳を切り離し、直径６mmのパンチで打ち抜いてそれぞ
れ左右一対のサンプルを取り出し、直ちにその重量を測
定した。試験群及び対照群の各同一群における左右の耳
の重量差（右重量−左重量；同一マウス）によって、浮
腫の重量増加抑制率（抑制率）を算出した。すなわち、
浮腫の抑制率（％）は、次式によって算出した。抑制率（％）＝（１−重量差［試験群］÷重量差［対照
群］）×１００上記の式によって求めた耳浮腫抑制率の結果を表１に示
す。

【００２０】表１ガルシノールによるＴＰＡ誘導マウス耳浮腫抑制効果ガルシノール濃度（％）ＴＰＡ塗布量（μｌ）抑制率（％）０．５２０７００．２５４０２０

【００２１】表１に示すとおり、ガルシノールは、０．
５％（ｗ／ｖ）アセトン溶液として用い、ＴＰＡを２０
μｌ塗布して浮腫を発生させたとき、７０％の重量増加
抑制率を示した。また、ガルシノール濃度を０．２５％
に下げ、ＴＰＡ溶液の塗布量を４０μｌとした場合で
も、２０％の抑制率を示した。このことから、ガルシノ
ールなどのポリイソプレニル化ベンゾフェノン誘導体
が、強い抗炎症活性を有することがわかる。したがっ
て、ポリイソプレニル化ベンゾフェノン誘導体を有効成
分として含有させれば、抗炎症効果が期待できる医薬
品、すなわち抗炎症剤として利用することができる。

【００２２】実験例２（単回投与毒性試験）体重２９〜３２ｇのＩＣＲ／ｃｒｊ雄マウス（５週齢）
（一群５匹）を使用して、医薬品のための毒性試験法ガ
イドライン（昭和５９年２月１５日薬審第１１８号、都
道府県衛生主管部局長宛厚生省薬務局審査第２課長通
知）に準じ、単回投与毒性試験を行った。すなわち、生
理食塩水にガルシノールを３０ｍｇ／ｍｌの濃度となる
よう懸濁し、この懸濁液をマウスに、体重３０ｇあたり
０．５ｍｌ（５００ｍｇ／体重ｋｇ）の割合で経口投与
し、１４日間観察した。その結果、全例とも死亡動物は
なく、また副作用も認められず、１４日目の剖検におい
ても、組織、臓器の顕微鏡的異常はなんら観察されなか
ったことから、本発明に用いられるガルシノールは、き
わめて毒性が低いことがわかる。

【００２３】実施例１＜ガルシノールを含有させた抗炎
症剤（シロップ剤）の調製＞参考例１に記載したと同様にして得たガルシノールを乳
鉢で微粉末とし、これを滅菌精製水に懸濁し、この懸濁
液にチェリーシロップを穏やかに撹拌しながら添加して
１２００ｍｌとする下記組成のシロップ剤を調製した。
このシロップ剤は、１日当たり１〜３回服用でき、１回
当たり５ｍｌの服用でガルシノール２００ｍｇを含有し
た、シロップ状の抗炎症剤である。＜シロップ剤の組成＞ガルシノール４８ｇチェリーシロップ１０００ｍｌ滅菌精製水残余

【００２４】実施例２＜ガルシノールを含有させた抗炎
症剤（散剤）の調製＞参考例１に記載したと同様にして得たガルシノール標品
と、乳糖、結晶セルロースとを下記組成で混合し、これ
を精製水で練合した後、常法により粉末状または細粒状
とした散剤１ｋｇを調製した。この散剤は、１包を１ｇ
として、１包の服用でガルシノール２００ｍｇを含有し
た抗炎症剤（散剤）である。＜散剤の組成＞ガルシノール２００ｇ乳糖６００ｇ結晶セルロース２００ｇ

【００２５】実施例３＜ガルシノールを含有させた抗炎
症剤（チンキ）の調製＞参考例１に記載したと同様にして得たガルシノール標品
をエタノールに溶解し、これを精製水で希釈して下記組
成のチンキを調製した。＜チンキの組成＞ガルシノール０．１ｇエタノール７０ｍＬ精製水３０ｍＬ

【００２６】実施例４＜ガルシノールを含有させた抗炎
症剤（軟膏）の調製＞参考例１に記載したと同様にして得たガルシノール標品
をエタノールに溶解し、これを白色ワセリンに混練し、
ガルシノールを０．５％含有する、下記組成の軟膏を調
製した。＜軟膏の組成＞ガルシノール０．５ｇエタノール２．０ｍＬ白色ワセリン９７．５ｇ

【００２７】

【発明の効果】本発明に用いられるポリイソプレニル
化ベンゾフェノン誘導体は、皮膚炎症に対する抑制活性
が強く、植物中などに多量に含有し、その抽出、加工、
或いは誘導体化処理が容易で、しかも安全性が高い物質
である。したがって、この物質を有効成分として含有さ
せた、本発明の抗炎症剤は、炎症の予防、治療などの効
果が期待できるので、極めて有用である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考） // Ｃ０７Ｄ 311/74 Ｃ０７Ｄ 311/74 (72)発明者斉藤實千葉県野田市野田339番地キッコーマン株式会社内Ｆターム(参考） 4C062 FF13 HH01 4C086 AA01 AA02 BA08 MA01 MA04 NA14 ZB11 4C088 AB12 AC04 BA10 CA06 CA07 CA08 CA09 CA10 CA14 MA04 MA17 MA23 MA43 MA52 MA63 ZA89 ZB11 4C206 AA01 AA02 CB24 CB25 KA08 MA01 MA04 NA14 ZA89 ZB11

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】ポリイソプレニル化ベンゾフェノン誘導
体を含有してなる、抗炎症剤。
【請求項２】ポリイソプレニル化ベンゾフェノン誘導
体がオトギリソウ科植物の植物体の有機溶媒抽出物由来
のポリイソプレニル化ベンゾフェノン誘導体である、請
求項１記載の抗炎症剤。
【請求項３】ポリイソプレニル化ベンゾフェノン誘導
体が、ガルシノール（カンボジノール）である、請求項
１記載の抗炎症剤。