ITFI990094A1 - Metodo diagnostico per il riconoscimento di neoplasie umane attraverso la determinazione dell'isoforma ctn-c della tn-c,frammenti di - Google Patents

Metodo diagnostico per il riconoscimento di neoplasie umane attraverso la determinazione dell'isoforma ctn-c della tn-c,frammenti di Download PDF

Info

Publication number
ITFI990094A1
ITFI990094A1 IT1999FI000094A ITFI990094A ITFI990094A1 IT FI990094 A1 ITFI990094 A1 IT FI990094A1 IT 1999FI000094 A IT1999FI000094 A IT 1999FI000094A IT FI990094 A ITFI990094 A IT FI990094A IT FI990094 A1 ITFI990094 A1 IT FI990094A1
Authority
IT
Italy
Prior art keywords
ctn
human
isoform
ligands
fragments
Prior art date
Application number
IT1999FI000094A
Other languages
English (en)
Inventor
Luciano Zardi
Original Assignee
Istituto Naz Per La Ricerca S
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Istituto Naz Per La Ricerca S filed Critical Istituto Naz Per La Ricerca S
Publication of ITFI990094A0 publication Critical patent/ITFI990094A0/it
Priority to IT1999FI000094A priority Critical patent/IT1307864B1/it
Priority to JP2000612753A priority patent/JP4577665B2/ja
Priority to US09/959,373 priority patent/US7109301B1/en
Priority to DE60014064T priority patent/DE60014064T2/de
Priority to PCT/EP2000/003550 priority patent/WO2000063699A1/en
Priority to ES00925224T priority patent/ES2226823T3/es
Priority to AT00925224T priority patent/ATE277352T1/de
Priority to AU44015/00A priority patent/AU779015B2/en
Priority to DK00925224T priority patent/DK1173766T3/da
Priority to EP00925224A priority patent/EP1173766B1/en
Priority to CA2370666A priority patent/CA2370666C/en
Publication of ITFI990094A1 publication Critical patent/ITFI990094A1/it
Application granted granted Critical
Publication of IT1307864B1 publication Critical patent/IT1307864B1/it

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6887—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids from muscle, cartilage or connective tissue
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
    • C07K2317/62—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising only variable region components
    • C07K2317/622—Single chain antibody (scFv)

Description

Descrizione della Domanda di Brevetto di Invenzione dal titolo : Metodo diagnostico per il riconoscimento di neoplasie umane attraverso la determinazione dell'isoforma cTN-C della TN-C, frammenti di anticorpi e loro coniugati utilizzati in detto metodo e loro uso.
Campo dell’invenzione
La presente invenzione si riferisce ad un metodo diagnostico che consente l'identificazione di neoplasie umane in modo altamente specifico per mezzo di frammenti di anticorpo ricombinante umano e a detti frammenti e loro coniugati. L'invenzione si riferisce inoltre all'uso dei frammenti e loro coniugati per la preparazione di formulazioni utili anche a scopo terapeutico.
Stato dell'arte
Durante la crescita neoplastica, la matrice extracellulare (qui di seguito MEC ) dei tessuti normali in cui il tumore si accresce viene rimodellata in seguito ai processi di degradazione proteolitica e di sintesi di nuovi componenti. I componenti della MEC dei tumori differiscono da quelli dei tessuti normali sia in termini quantitativi che qualitativi e contribuiscono a creare le condizioni adatte per la crescita e la progressione tumorale, fra cui l'anglogenesi, la quale gioca un ruolo determinante nella progressione neoplastica.
La Tenascina-C (qui di seguito TN-C) è una glicoproteina composta di sei subunità simili fra loro ed unite da ponti disolfuro; essa è codificata da un unico gene e la sua espressione è regolata da un unico promotore.
Per un meccanismo noto come "splicing alternativo’', nove domini proteici, omologhi ai “domini di tipo III della fibronettina" ( qui di seguito FNIII) possono essere inclusi o esclusi dal mRNA della TN-C umana, dando origine a molteplici isoforme proteiche.
E' anche noto che le isoforme di TN-C sono largamente presenti nei tessuti adulti normali e che isoforme di TN-C che includono la maggior parte o tutti i nove domini sopra riportati vengono espresse a livelli molto elevati nei tessuti neoplastici.
I reagenti ad oggi disponibili per riconoscere le isoforme della TN-C sono anticorpi monoclonali mulini che non solo non sono adatti in quanto tali per un utilizzo nell’uomo (es. immunoscintigrafia) ma inoltre reagiscono indiscriminatamente con le isoforme presenti sia nei tessuti neoplastici che in quelli sani.
E’ evidente alla luce di quanto suddetto che sarebbe estremamente importante disporre di un metodo e dei reagenti capaci di identificare solo le isoforme presenti nei tessuti neoplastici in quanto questo consentirebbe una diagnosi assai precisa e specifica e darebbe inoltre la possibilità, a scopo terapeutico, dì veicolare un farmaco o un altro effettore solo nel tumore. Descrizione delle figure
Figura 1 A : Modello della struttura in domini di una subunità della TN-C umana. I simboli ovali e quadrati rappresentano, rispettivamente, le EGF-like e FN-like repeats. Sono anche rappresentate, la parte amino terminale globulare e quella COOH terminale omologa al fibrinogeno. Le FN-like repeats da A1 a D, la cui espressione é regolata da “splicing” alternativo del pre-mRNA, sono punteggiate. La parte superiore della figura mostra anche le proteine di fusione TN-C-beta-galattosidasi o le proteine ricombinanti utilizzate. Le frecce mostrano la localizzazione degli epitopi di ciascun anticorpo ricombinante o monoclonale. Λ indica continuità.
Figura 1 B: Elettroforesi in Sodio Dodecil Solfato (4-18% SDS PAGE) della proteina ricombinante TN-C “lunga” (contenente I domini da A1 a D) e TN-C “corta" (senza I domini da A1 a D) colorato con Coomassie Blu e immunoblots colorati con gli scFv TN11 e TN12.
Figura 1 C: Immunoblots di differenti proteine di fusione e ricombinanti (A) colorati con gli scFv TN11 e TN12. I valori riportati a sinistra indicano la massa molecolare (in Kilodaltons) degli standards.
Figura 2 : Northern blots di poly(A) rich RNA ottenuto da tessuti umani adulti di: cuore (1), cervello (2), placenta (3), polmone (4), fegato (5), muscolo scheletrico (6), rene (7) e pancreas (8) e da tessuti umani fetali di: cervello (1), polmone (2), fegato (3) e rene (4) ottenuti usando il cDNA probe descritto nel testo, specifico per l’isoforma cTN-C, il probe HT11 che riconosce tutte le isoforme di TN-C e il cDNA di G3PDH umana per normalizzare i blots. I numeri sulla sinistra rappresentano la misura, in kb, degli standards.
Figura 3 : Analisi immunoistochimica di sezioni di glioblastoma con scFv TN11 (A e B) e con doppia colorazione ottenuta con scFv TN11 (rosso) e mAb KI67 (marrone) (C,E,F, e G); sezione di una metastasi cerebrale di carcinoma polmonare con scFv TN11 (D). Barra= 10 micron.
Figura 4. Analisi immunoistochimica di sezioni seriali dì carcinoma duttale invasivo della mammella con scFv TN12 (A e C) e scFv TN11 (B e D) e sezioni seriali di meningioma con scFv TN12 (E) e scFv TN11 (F). Barra= 10 micron.
Figura 5 : Dimostrazione per mezzo di Southern blot della specificità del cRNA probe usato per gli esperimenti di ibridizzazione “in situ”. In basso, colorazione con etidio bromuro del gel di agaroso. 1 : TN fnALL (che include 11 DNA della TN-C umana dal dominio 2<'>di tipo III al dominio 7 di tipo III, compresi quelli sottoposti a splicing). 2: TNfn1-8 (come la sequenza di TNfnALL ma senza I domini sottoposti a splicing). 3: tutti i domini TNegf-like.
4: dominio D di tipo III. 5: dominio C di tipo III. 6: dominio 1 di tipo III. 7: TNegf-like domini da 8 a 10. 8: Standard.
In alto, Southern blot degli stessi frammenti, descritti in precedenza, ibridizzati con il probe marcato DIG. I numeri sulla destra sono espressi in kilobasi.
Figura 6 : Due differenti ingrandimenti di esperimenti di ibridizzazione “in situ" su sezioni al criostato di glioblastoma umano con il probe di cRNA del dominio C marcato DIG. Il segnale positivo era visibile solo in alcune cedute tumorali con grande nucleo.
Descrizione dettagliata dell'invenzione
E' stato ora trovato che le isoforme di TN-C umana contenenti il dominio C (qui di seguito cTN-C) sono fortemente espresse nelle strutture vascolari e in prossimità di cellule in proliferazione di astrocitoma di grado elevato (grado Ili e glioblastoma). Le isoforme in questione sono anche ampiamente espresse nelle strutture vascolari di neoplasie polmonari umane mentre queste isoforme non sono evidenziabili in nessun tessuto umano adulto normale.
La presente invenzione si riferisce pertanto ad un metodo per la identificazione di tessuti neoplastici sia "in vivo" che "in vitro" attraverso la determinazione della presenza delle isoforme cTN-C della TN-C.
L'invenzione si riferisce inoltre ai ligandi capaci di riconoscere la cTN-C e loro coniugati.
Per ligandi secondo la presente invenzione si intendono gli anticorpi e loro frammenti o qualsiasi altra molecola capace di riconoscere e legarsi alla cTN-C.
In particolare come ligandi si intendono secondo l'invenzione frammenti di anticorpi ricombinanti umani, più in particolare frammenti scFv, Infatti piccoli frammenti di anticorpi umani, quali appunto i scFv, non si accumulano nel fegato, non sono immunogenici e mostrano una migliore penetrazione nei tessuti rispetto alle immunoglobuline convenzionali.
I coniugati utili secondo l’invenzione si possono ottenere secondo le tecniche note coniugando in maniera biochimica o genetica il ligando per la cTN-C alle molecole appropriate allo scopo prefisso diagnostico e/o terapeutico. Molecole appropriate per la coniugazione con il ligando possono essere, per esempio, radioisotopi, sostanze fluorescenti, citochine, tossine, agenti fotosensibilìzzanti, agenti trombizzanti ecc.
Per la costruzione dei coniugati secondo l'invenzione si possono utilizzare, ad esempio, oltre al ligando come sopra definito anche peptidi o altri tipi di molecole non proteiche.
Particolarmente interessante secondo l'invenzione è il ligando rappresentato dal frammento di anticorpo ricombinante umano scFv la cui sequenza è riportata in Tabella 1 ed è qui di seguito denominato TN11.
Parte sperimentale
Isolamento di frammenti di anticorpo contro l'isoforma TN-C "lunga"
Una libreria fagica di scFv umani è stata selezionata utilizzando come antigene la variante “lunga” della TN-C comprendente tutti i domini FNIII sottoposti a splicing alternativo. I medi di coltura delle colònie batteriche ottenute da tale selezione sono stati analizzati utilizzando la tecnica ELISA usando come antigeni le varianti di TN-C con tutti (“lunga") o nessun dominio FNIII (“corta”) sottoposto a splicing alternativo. Questo studio ha permesso l'identificazione di un clone che produceva anticorpi specifici per la forma "lunga” di TN-C. Dal sumatante della coltura batterica di questo clone, da noi denominato TN11, il scFv è stato purificato per immunocromatografia usando una colonna di Sepharoso a cui era stato coniugato il frammento ricombinante A-D (contenente tutti i domini FNIII sottoposti a splicing alternativo).
Per la ulteriore caratterizzazione del TN11 è stata utilizzata la tecnica di immunoblotting con cui si è valutata la specifica reazione con TN-C “lunga" e “corta” e con varie proteine ricombinanti e di fusione (TN A-D, TN B-D, TN C , TN B, λΤΝ27 e λΤΝΒΰ) contenenti diversi dominii della TN-C umana (Fig. 1A ). Con questa tecnica si è dimostrato che, oltre a riconoscere la forma “lunga” della TN-C (già dimostrato con la tecnica di ELISA durante le fasi di selezione), il TN11 reagiva specificamente con tutti i frammenti proteici contenenti il dominio C (fig. 1B, C). Ciò dimostrava che l’epitopo riconosciuto da TN11 è localizzato all'interno del dominio C della TN-C. Con esperimenti simili si è dimostrato che il TN11 non reagisce con la TN-C purificata dal medio di coltura di fìbroblasti umani normali poiché la TN-C prodotta da queste cellule non contiene il dominio C.
Esperimenti di RT-PCR sono stati condotti su RNA totale estratto da colture di fibroblasti umani normali (GM-6114, ATCC, Rockville, MD, USA), da cellule derivate da melanoma umano (SKMEL-28, ATCC, Rockville, MD, USA) e da campioni tissutali di glioblastoma umano e di un meningioma, usando i seguenti primers:
5’ GCTACCCCCTAGTACTGATTTTATTGTCTA (dalla base 4542 alla 4571 della sequenza della TN-C umana,
5’ TTTCCAGTGGCTCAGACTGC (sequenza complementare, dalla base 5028 alla 5047),
5’ CTGGTCTGAGTCTTGGTTCCGTCC (sequenza complementare, dalla base 5322 alla base 5345).
Gli esperimenti di RT-PCR hanno rivelato che il dominio C della TN-C, assente nelle cellule GM-6114 ed SKMEL-28 e nei meningiomi è presente nel mRNA della TN-C purificato da frammenti di glioblastoma umano.
Analisi tipo Northern blot usando mRNA da tessuti umani normali, rispettivamente adulti ed embrionali ed una sonda di cDNA contenente 270 basi (4630- 4899) della sequenza della TN-C umana, hanno dimostrato che il mRNA di questo dominio è espresso limitatamente ai tessuti fetali (cervello, fegato, rene), mentre è assente dal mRNA dei tessuti adulti (fig.
2).
L’affinità di legame dell'anticorpo purificato TN11 alla TN "lunga” è stata determinata per analisi dell'interazione utilizzando il BIAcore. La costante di dissociazione è risultata di 1.3x10-10.
L'analisi immunoistochimica usando TN11, specifico per il dominio C della TN-C, ha confermato che nei tessuti adulti normali la presenza del dominio C non è riscontrabile, mentre la TN-C totale (evidenziata dalla reazione con l’anticorpo monoclonale BC-4 specifico per tutte le isoforme di TN-C umana, poiché riconosce un epitopo della zona costante della molecola di TN-C umana ) è largamente presente.
Inoltre è stato dimostrato che la quasi totalità di glioblastomi studiati esprime livelli molto elevati del dominio C, con 14 casi di tumore su 15 aventi una forte positività (Tabella 2 e Fig. 3) In particolare, la presenza di questa isoforma di TN-C è stata identificata principalmente in vicinanza delle strutture vascolari in aree con elevata attività proliferativa cellulare, nello stroma di nidi di cellule tumorali (Fig. 3 A,B,C,E e G) e nelle cellule in proliferazione (Fig. 3 F). Al contrario, nessuna reazione positiva si è ottenuta in altri tumori del cervello ad eccezione di due meningiomi su 23 che erano debolmente positivi solo in vicinanza delle strutture vascolari (Tabella 2 e Fig. 4). Abbiamo in oltre potuto osservare una considerevole presenza di cTN-C in sezioni di neoplasie polmonari, specialmente in concomitanza delle strutture vascolari.
Utilizzando sonde di cRNA marcate DIG specifiche per cTN-C (vedi Fig. 5) sono state eseguite ibridazioni "in situ" su sezioni criostatiche di glioblastoma (Fig. 6 A e B). I risultati dimostrano che l'isoforma cTN-C è prodotta da cellule tumorali, anche se non tutte le cellule tumorali producono l'isoforma cTN-C.
Abbiamo anche dimostrato l’espressione di cTN-C nelle strutture vascolari nel modello sperimentale di melanoma umano in topi nudi (utilzzando le cellule SK-MEL-28 ). L’iniezione in topi nudi portatori di melanoma umano di scFv TN11 radiomarcato ha dimostrato l’accumulo specifico dell’anticorpo sulle strutture vascolari del solo tumore.
In conclusione, la determinazione della presenza dell'isoterma cTN-C della TN-C costituisce un valido metodo diagnostico per vari tipi di neoplasie e la presenza di questa isoforma in tessuti neoplasie! può essere utilmente sfruttata anche a fini terapeutici.
Tabella 2
Reattività degli scFv TN11 e TN12 con tumori primari di vario istotipo.
Tutti i tumori erano fortemente positivi con scFv TN12 che riconosce tutte le isoforme di TN-C. L' scFv TN11 riconosce solo l'isoforma di TN-C che contiene il dominio C. w II caso positivo presentava positività solo in alcune strutture vascolari.
Il caso positivo era un meningioma di transizione e presentava positività solo in alcune strutture vascolari.
<<3>> In 7 casi positivi , 3 presentavano positività sia nel tessuto connettivo che in alcune strutture vascolari, e 3 casi presentavano positività solo in alcune strutture vascolari.
<(4) >Nei 3 casi positivi la colorazione fu debolmente evidenziabile.

Claims (13)

  1. RIVENDICAZIONI 1. Metodo diagnostico in cui si determina la presenza dell'isoforma cTN-C della TN-C in tessuti e/o fluidi biologici.
  2. 2. Metodo secondo la rivendicazione 1 eseguito "in vitro".
  3. 3. Metodo secondo la rivendicazione 1 eseguito "in vivo".
  4. 4. Metodo secondo la rivendicazione 1 per il riconoscimento di patologie esprimenti lisoforma cTN-C della TN-C.
  5. 5. Ligandi capaci di riconoscere l'isoforma cTN-C della TN-C
  6. 6. Ligandi secondo la rivendicazione 5 in cui detti ligandi sono anticorpi e loro frammenti, e i relativi coniugati, o qualsiasi altra molecola capace di riconoscere e legarsi alla cTN-C.
  7. 7. Ligandi secondo la rivendicazione 6 in cui detti ligandi sono scFv o loro frammenti e i relativi coniugati.
  8. 8. Ligando secondo la rivendicazione 7 in cui il ligando è un frammento di anticorpo ricombinante umano avente sequenza :
  9. 9. Coniugati costituti da un ligando secondo le rivendicazioni 5 - 8 e una molecola scelta nel gruppo costituito da : radioisotopi, sostanze fluorescenti, citochine, tossine, agenti fotosensibilizzanti, agenti trombizzanti ecc. che permettano un uso diagnostico e/o terapeutico del coniugato.
  10. 10 Metodo diagnostico secondo al rivendicazione 1 in cui la determinazione della presenza del'isoforma cTN-C della TN-C in tessuti umani è eseguita utilizzando i ligandi secondo le rivendicazioni 5-8.
  11. 11. Metodo diagnostico secondo al rivendicazione 1 in cui la determinazione della presenza del'isoforma cTN-C della TN-C in tessuti e fluidi biologici umani è eseguita utilizzando i coniugati secondo la rivendicazione 9.
  12. 12. Uso dei ligandi secondo le rivendicazioni 5 - 8 per la preparazione di formulazioni per il trattamento di patologie umane.
  13. 13. Uso dei coniugati secondo la rivendicazione 9 per la preparazione di formulazioni per il trattamento di patologie umane.
IT1999FI000094A 1999-04-20 1999-04-20 Metodo diagnostico per il riconoscimento di neoplasie umane attraversola determinazione dell'isoforma ctn-c della tn-c, frammenti di IT1307864B1 (it)

Priority Applications (11)

Application Number Priority Date Filing Date Title
IT1999FI000094A IT1307864B1 (it) 1999-04-20 1999-04-20 Metodo diagnostico per il riconoscimento di neoplasie umane attraversola determinazione dell'isoforma ctn-c della tn-c, frammenti di
AT00925224T ATE277352T1 (de) 1999-04-20 2000-04-19 Einetenascin-c isoform als marker für neoplasmen
US09/959,373 US7109301B1 (en) 1999-04-20 2000-04-19 Tenascin-C isoform as marker for neoplasias
DE60014064T DE60014064T2 (de) 1999-04-20 2000-04-19 Einetenascin-c isoform als marker für neoplasmen
PCT/EP2000/003550 WO2000063699A1 (en) 1999-04-20 2000-04-19 A tenascin-c isoform as a marker for neoplasias
ES00925224T ES2226823T3 (es) 1999-04-20 2000-04-19 Isoforma c de la tenascina como marcador de neoplasias.
JP2000612753A JP4577665B2 (ja) 1999-04-20 2000-04-19 腫瘍形成のマーカーとしてのテネイシン−ｃアイソフォーム
AU44015/00A AU779015B2 (en) 1999-04-20 2000-04-19 A tenascin-C isoform as a marker for neoplasias
DK00925224T DK1173766T3 (da) 1999-04-20 2000-04-19 Isoform af tenascin-C som markör for neoplasier
EP00925224A EP1173766B1 (en) 1999-04-20 2000-04-19 A tenascin-c isoform as a marker for neoplasias
CA2370666A CA2370666C (en) 1999-04-20 2000-04-19 A tenascin-c isoform as a marker for neoplasias

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
IT1999FI000094A IT1307864B1 (it) 1999-04-20 1999-04-20 Metodo diagnostico per il riconoscimento di neoplasie umane attraversola determinazione dell'isoforma ctn-c della tn-c, frammenti di

Publications (3)

Publication Number Publication Date
ITFI990094A0 ITFI990094A0 (it) 1999-04-20
ITFI990094A1 true ITFI990094A1 (it) 2000-10-20
IT1307864B1 IT1307864B1 (it) 2001-11-19

Family

ID=11352932

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
IT1999FI000094A IT1307864B1 (it) 1999-04-20 1999-04-20 Metodo diagnostico per il riconoscimento di neoplasie umane attraversola determinazione dell'isoforma ctn-c della tn-c, frammenti di

Country Status (11)

Country Link
US (1) US7109301B1 (it)
EP (1) EP1173766B1 (it)
JP (1) JP4577665B2 (it)
AT (1) ATE277352T1 (it)
AU (1) AU779015B2 (it)
CA (1) CA2370666C (it)
DE (1) DE60014064T2 (it)
DK (1) DK1173766T3 (it)
ES (1) ES2226823T3 (it)
IT (1) IT1307864B1 (it)
WO (1) WO2000063699A1 (it)

Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IT1317108B1 (it) * 2000-12-06 2003-05-26 Philogen Srl Processo per la selezione di frammenti anticorporali anti-angiogenesi,frammenti anticorpali anti-angiogenesi cosi' ottenuti e loro uso.
US7189820B2 (en) * 2001-05-24 2007-03-13 Human Genome Sciences, Inc. Antibodies against tumor necrosis factor delta (APRIL)
JP2005517388A (ja) * 2001-11-19 2005-06-16 アプライド モレキュラー エボリューション，インコーポレイテッド 腫瘍特異的モノクローナル抗体
CA2586661A1 (en) * 2004-11-09 2006-05-18 Philogen S.P.A. Antibodies against tenascin-c
EP2268608A4 (en) 2008-04-01 2012-01-11 Biosearch Technologies Inc DARK NUCLEIC ACID STABILIZED FLUOROPHORE DEACTIVATOR PROBES
BR112013002444A2 (pt) 2010-08-13 2016-05-24 Roche Glycart Ag anticorpo, polinucleotídeo e polipeotídeo isolados, composição, vetor, cécula hospedeira, conjulgado de anticorpo, formulação farmacêutica, uso do anticorpo, métodos para produzir um anticorpo, tratar um indivíduo, induzir a lise celular de uma célula tumorosa e diagnosticar uma doença em um indivíduo
CN109071652B (zh) 2016-05-11 2022-09-23 豪夫迈·罗氏有限公司 包含tnf家族配体三聚体和生腱蛋白结合模块的抗原结合分子
WO2017194441A1 (en) 2016-05-11 2017-11-16 F. Hoffmann-La Roche Ag Modified anti-tenascin antibodies and methods of use
GB201621806D0 (en) 2016-12-21 2017-02-01 Philogen Spa Immunocytokines with progressive activation mechanism
EP3601346A1 (en) 2017-03-29 2020-02-05 H. Hoffnabb-La Roche Ag Bispecific antigen binding molecule for a costimulatory tnf receptor
CN107058596A (zh) * 2017-06-19 2017-08-18 上海市第十人民医院 一种与恶性胶质瘤诊断相关的标志物及其应用

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1992004464A1 (en) * 1990-09-05 1992-03-19 Wistar Inst Monoclonal antibodies against tenascin
JPH0643167A (ja) * 1992-04-06 1994-02-18 Amano Pharmaceut Co Ltd 癌マーカーであるテネイシン及びその定量法
HU220347B (hu) * 1994-07-11 2001-12-28 Board Of Regents The University Of Texas System Készítmény az érrendszer specifikus koagulálásához
WO1996008513A1 (en) * 1994-09-16 1996-03-21 The Scripps Research Institute Cytotactin derivatives that stimulate attachment and neurite outgrowth, and methods of making and using same
JP3850492B2 (ja) * 1996-08-23 2006-11-29 独立行政法人理化学研究所 テネイシン誘導因子

Also Published As

Publication number Publication date
CA2370666C (en) 2010-06-01
DE60014064T2 (de) 2006-02-23
DE60014064D1 (de) 2004-10-28
ATE277352T1 (de) 2004-10-15
US7109301B1 (en) 2006-09-19
JP2002542486A (ja) 2002-12-10
JP4577665B2 (ja) 2010-11-10
IT1307864B1 (it) 2001-11-19
AU4401500A (en) 2000-11-02
DK1173766T3 (da) 2005-01-31
AU779015B2 (en) 2005-01-06
WO2000063699A1 (en) 2000-10-26
CA2370666A1 (en) 2000-10-26
EP1173766A1 (en) 2002-01-23
EP1173766B1 (en) 2004-09-22
ITFI990094A0 (it) 1999-04-20
ES2226823T3 (es) 2005-04-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Schabath et al. CD24 affects CXCR4 function in pre-B lymphocytes and breast carcinoma cells
Aoyama et al. A pathogenic autoantibody, pemphigus vulgaris‐IgG, induces phosphorylation of desmoglein 3, and its dissociation from plakoglobin in cultured keratinocytes
Bechard et al. Characterization of the secreted form of endothelial-cell-specific molecule 1 by specific monoclonal antibodies
US10301356B2 (en) Immune system modulators
WO2001057182A3 (en) Nucleic acids, proteins, and antibodies
BR112016017649B1 (pt) Polipeptídeo isolado compreendendo substratos de matriptase e de ativador do plasminogênio u e outras porções cliváveis, composição farmacêutica compreendendo o dito polipeptídeo, bem como métodos para produzir e fabricar um polipeptídeo isolado compreendendo uma porção clivável e uso da composição farmacêutica e quantidade terapeuticamente eficaz da dita composição no tratamento de um distúrbio ou doença
JP2005514425A (ja) Ｍｕｃ１８抗原に対する抗体
ITFI990094A1 (it) Metodo diagnostico per il riconoscimento di neoplasie umane attraverso la determinazione dell&#39;isoforma ctn-c della tn-c,frammenti di
BRPI0620747A2 (pt) anticorpo contra periostina, e uma composição farmacêutica compreendendo este para prevenir ou tratar uma doença na qual está envolvida periostina
Kon et al. Mapping of functional epitopes of osteopontin by monoclonal antibodies raised against defined internal sequences
NZ545477A (en) Cytotoxicity mediation of cells evidencing surface expression of CD44
Pellizzari et al. Immunotherapy using IgE or CAR T cells for cancers expressing the tumor antigen SLC3A2
Sweetwyne et al. Functional analysis of the matricellular protein SPARC with novel monoclonal antibodies
ES2205593T3 (es) Anticuerpos contra vasp (fosfoproteina estimulada por vasodilatadores), celulas de hibridoma para su preparacion, y empleo de dichos anticuerpos.
Spessotto et al. Laminin isoforms 8 and 10 are primary components of the subendothelial basement membrane promoting interaction with neoplastic lymphocytes
WO2023174029A1 (zh) 一种prlr抗原结合蛋白及其制备方法和应用
Zhang et al. Transferrin Receptor Targeting Chimeras (TransTACs) for Membrane Protein Degradation
KR100738401B1 (ko) 급성백혈병- 및 림프모구 림프종 특이 ｃｄ43의항원결정부위 및 이의 용도
Szecsi et al. Identification of patient‐specific peptides for detection of M‐proteins and myeloma cells
CA3188143A1 (en) Antigen-specific t cell receptors and chimeric antigen receptors, and methods of use in immune signaling modulation for cancer immunotherapy
JP2005519120A (ja) 個別化抗ガン抗体
WO2001055300A8 (en) Nucleic acids, proteins, and antibodies
Kawata et al. Detection of epithelial ovarian-cancer-associated antigens involved in immune complexes by monoclonal antibodies
WO2001055313A3 (en) Nucleic acids, proteins, and antibodies
CN101501501A (zh) 用于检测前列腺癌的抗膜联蛋白a3单克隆抗体