HUT75705A

HUT75705A - Processes for the manufacture of a medicament in the treatment and prevention of bone loss

Info

Publication number: HUT75705A
Application number: HU9601786A
Authority: HU
Inventors: Virender M Labroo
Original assignee: Zymogenetics Inc
Priority date: 1993-12-30
Filing date: 1994-12-14
Publication date: 1997-05-28
Also published as: RU2166316C2; KR100213963B1; US5389646A; CZ192396A3; NO962752D0; CA2180178C; AU701411B2; HU9601786D0; FI962685A0; NO962752L; WO1995017892A1; AU1403995A; CN1142767A; FI962685A; CA2180178A1

Description

AMERIKAI EGYESÜLT ÁLLAMOK

A találmány tárgya eljárás betegben csontvesztés csökkentésére, melynek során az ilyen kezelést igénylő betegnek egy készítmény hatásos mennyiségét adagoljuk, amely készítmény az (I) általános képletű vegyületet vagy gyógyszerészetileg elfogadható sóját tartalmazza, ahol

R¹ és R² jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, hidroxilcsoport, egyenes vagy elágazó szénláncú 1-17 szénatomos alkoxicsoport, egyenes vagy elágazó szénláncú 2-18 szénatomos aciloxicsoport, vagy egyenes vagy elágazó szénláncú 2-18 szénatomos alkoxi-karbonil -csoport; és • ·

- 2 R³ jelentése (XII) általános képletű csoport, ahol

R⁴ és R⁵ jelentése egymástól függetlenül egyenes vagy elágazó szénláncú 1-18 szénatomos alkilcsoport, vagy a nitrogénatommal együttesen R⁴ és R⁵ jelentése 3 - 10-tagú gyűrű; és n jelentése 1-6 közötti egész szám, továbbá gyógyszerészetileg elfogadható hordozóanyagot tartalmaz .

A találmány szerinti eljárást osteoporosis vagy egyéb csontvesztéssel járó betegségek kezelésében a gyógyszerészetben alkalmazzák.

• ····

62.573/SZE

S.B.G. & K.

Nemzetközi Szabadalmi Iroda

H-1062 Budapest, Andrássy út 113. Telefon: 34-24-950, Fax: 34-24-323

Eljárások csonttömeg vesztés kezelésére és megelőzésére Lo Vu t/-' ElL· /λ Vv

ZYMOGENETICS INC., SEATTLE, WA,

AMERIKAI EGYESÜLT ÁLLAMOK

Feltaláló:

LABROO Virender, MILL CREEK, WA,

AMERIKAI EGYESÜLT ÁLLAMOK

A bejelentés napja:

1994 .

Elsőbbsége

1993. 12

AMERIKAI

30. (08/175,899),

EGYESÜLT ÁLLAMOK

A nemzetközi bejelentés száma: PCT/US94/14568.

A nemzetközi közzététel száma: WO 95/17892.

···· ·· « · ··

- 2 A csontképződés egy dinamikus folyamat, amelynek során a csontváz tömeg illetve szerkezet megújul, illetve fennmarad.

Ez a folyamat, amely csontmegújulás és fenntartás, egyensúly folyamat a csontreszorpció és a csontképződés között, amelyet az osteoclast illetve az osteoblast szabályoz, amely két anyagot tekintünk a csont-újraképződési illetve reszorpciós folyamat kulcs résztvevőinek. Az osteoclast iniciálja az újraképződési ciklust úgy, hogy egy üreget reszorbeál a csontban, amelyet ezt követően az osteoblast által szintetizált, illetve lerakott új csontmátrix tölt ki. Az osteoclast és osteoblast aktivitását komplex kölcsönhatások szabályozzák a szisztémás hormonok között, illetve a lokálisan keletkezett növekedési faktorok között, valamint az aktív újraképződési helyeken a citokinek jelenléte által .

Amennyiben a csont-újraképződésben az egyensúly felbomlik, különféle betegségek alakulnak ki, amely lehet például osteoporosis, Paget-betegség és mellékpajzsmirigy túltengés. Az osteoporosis azzal jellemezhető, hogy a csonttömeg csökken; leggyakrabban ez a postmenopausal nők esetében történik meg, és gyakran különféle erőtlenség, illetve fájdalmas törések a gerincben, a csípőcsontban és a csuklóban kialakulhatnak.

A postmenopausalis nők körülbelül 25 %-a szenved osteoporosisban. Általában elfogadott, hogy a betegség során szerepet játszik az, hogy a keringésben található ösztrogének mennyisége csökken [Komm és munkatársai, Science, 241:81 - 84. (1988)]. Komm és munkatársai ezen túlmenően leírták, hogy az

- 3 Amerikai Egyesült Államokban élő kaukázusi típusú nők 15 %-a veszélyeztetett csípőcsont törésben; és azt is leírták, hogy 45 év feletti nők esetében 247.000 csípőcsont törés történik évente.

Az osteoporosis költsége személyes és anyagi vonatkozásban is óriási. 1984-ben 145.000 bent fekvő beteg törés eset, illetve 107.000 ízületplasztikai, illetve helyettesítési műtét történt 65 év feletti amerikai nők esetében. A betegek közül, akik a csípőcsont törés előtt egyedül éltek, 15 - 20 % hosszú idejű kezelést igényelt a törés következtében, és 1 évvel a törés után még mindig nem nyerte vissza független életmódját. Az összes anyagi költsége az osteoporosis kezelésnek - beleértve a töréseket - az Amerikai Egyesült Államokban 1986-ban 7-10 milliárd dollár volt [Peck és munkatársai, Am. J. Med., 84:275 - 282. (1988)].

Az osteoporosis-sal kapcsolatos csontvesztést exogén ösztrogének adagolásával leállították. Ahhoz, hogy az ösztrogén terápia hatásos legyen, ezt már néhány évvel azelőtt el kell kezdeni, mielőtt a menopausa bekövetkezik. A kezelést 10 - 15 éven át kell folytatni [Am. J. Obstet. Gynecol., 160: 1306 - 1310. (1989)]. Számos különféle típusú ösztrogént ismerünk;

azonban első választás a 17-8-ösztradiol, mivel ez természetesen is előfordul a menopausa előtti nőkben. A javasolt dózisban azonban ez a vegyület számos mellékhatást fejt ki, és így a legsúlyosabb probléma az ösztrogén terápiával kapcsolatban a ···· ··· ·*·· »♦

- 4 • · ^w • · · ·· · ·· • · · · · * · • « · ·· méhrák illetve a mellrák kialakulásának veszélye. A karcinóma kialakulása dózisfüggő, illetve a kezelés időtartamának hosszától függ.

A rákos megbetegedés veszélyét kiküszöbölték úgy, hogy progesztogént alkalmaztak párhuzamosan az ösztrogén terápiával. Ez a kombináció azonban például azt okozhatja, hogy a menses visszatér, és ezt számos nő elfogadhatatlannak tartja. További hátránya az ilyen kezelésnek, hogy a progesztogén hosszú időtartamon át való alkalmazása következtében kialakuló mellékhatások nem teljesen tisztázottak. Ennélfogva a nők igen nagy száma más kezelést kíván, és nem akarja hormonkezelésnek alávetni magát, amely kezelés egyben ugyanakkor a gyors csontvesztést, a menopausát követi, biztonságosan megakadályozza.

Bizonyos szubsztituált 2,3-diaril-l-benzopirán-vegyületekről kimutatták, hogy antiösztrogén aktivitással rendelkeznek, és ugyanakkor igen kis ösztrogenicitásúak, vagy egyáltalán ilyen hatást nem mutatnak. Ezeket javasolták a mellrák kezelésében történő alkalmazásra [lásd a Kapil és munkatársai, 5,254,568 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi bejelentést, és Saeed és munkatársai, J. Med. Chem., 33:3210 - 3216.

(1990); Sharma és munkatársai, J. Med. Chem., 33:3222 - 3229.

(1990); valamint Sharma és munkatársai, J. Med. Chem.,

33:3216 - 3222. (1990) közleményeket]. A vegyületekről korábban nem mutatták ki, hogy a csontreszorpcióra hatást fejtenének ki.

»··· ·»·· · • · »

·. « · · ··· • · · « ···· . , ·· ·· · ·

- 5 ··«· ·· ··· • ·

Továbbra is igény van olyan készítmények és eljárások kidolgozására, amely a csontvesztést csökkenti; különösen az osteoporosis-sal kapcsolatos csontvesztést redukálja. Továbbá olyan hatóanyagokra van szükség, amelyek nem mutatják az ösztrogének nem-kívánatos mellékhatásait. A jelen találmány tárgya ilyen készítmény és eljárások, valamint egyéb előnyökkel is rendelkezik .

Az ábrák rövid leírása

1. ábra: bemutatja bizonyos vegyületek előállítási eljárását, amelyek a jelen találmány eljárásaiban alkalmazhatók;

2. ábra: bemutatja a 2,3-diaril-l-benzopirán hatásait a csontsűrűségre méhtelenített vagy ivartalanított patkányokban.

A találmány tárgya a 2,3-diaril-l-benzopiránok és sóik alkalmazása humán és állatgyógyászat céljára a csontmetabolizmus szabályozására. A találmány szerinti vegyületek például alkalmazhatók olyan betegek kezelésére, amelyek csontvesztés-rizikót szenvednek el osteoporosis (beleértve a poszt menopausalis osteo porosist és a glükokortikoid-kapcsolatos osteoporosist) Paget kór, hiper mellékpajzsmirigy túltengés, rosszindulatú hiperkal6 cémia és egyéb olyan körülmények miatt, amelyek csontreszorpció túlzott sebességével és/vagy csontképződés csökkentett sebességével jellemezhetők.

A találmány szerinti eljárásban alkalmazott 2,3-diaril-l-benzopirán-vegyületek az (I) általános képletű anyagok, ahol az általános képletben

R¹ és R² jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, hidroxilcsoport, egyenes vagy elágazó szénláncú 1-17 szénatomos alkoxicsoport, egyenes vagy elágazó szénláncú 2-18 szénatomos aciloxicsoport, vagy egyenes vagy elágazó szénláncú 2-18 szénatomos alkoxi-karbonil -csoport ; és

R³ jelentése (XII) általános képletű csoport, ahol

R⁴ és R³ jelentése egymástól függetlenül egyenes vagy elágazó szénláncű alkilcsoport, amely 1-18 szénatomot tartalmaz, vagy a nitrogénatommal együttesen R⁴ és R⁵ jelentése 3 - 10-tagú gyűrű; és n jelentése 1-6 közötti egész szám, előnyösen 1-3 közötti egész szám, és legelőnyösebben 1 egész szám.

Előnyösen R⁴ és R⁵ jelentése egymástól függetlenül metilcsoport, etilcsoport, propilcsoport, izopropilcsoport, butilcsoport, izobutilcsoport, szek-butil-csoport vagy tercier-butil-csoport, vagy a nitrogénatommal együttesen R⁴ és R³ jelentése 5- vagy 6-tagú gyűrű. Legelőnyösebben R² jelentése (XIII) képletű csoport vagy (XIV) képletű csoport.

Előnyös megvalósítás esetében az (I) általános képletű vegyület az (la) általános képletű anyag. Egyéb előnyös esetekben az általános képletben R¹ és R² jelentése alkoxicsoport. További előnyös esetekben az általános képletben R¹ és R² jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, hidroxilcsoport vagy 1-4 szénatomos alkoxicsoport, 2-5 szénatomos alkoxi-karbonil-csoport vagy 2-5 szénatomos aciloxicsoport. R² jelentése előnyösen 2-piperidino-etoxi-csoport. Egyéb előnyös esetekben R¹ és R²jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom vagy hidroxilcsoport .

A leírásban az aciloxicsoport elnevezés alatt a (XV) általános képletű csoportokat értjük, ahol az általános képletben

R¹ jelentése egyenes vagy elágazó szénláncú alkilcsoport vagy amino-alkil-csoport.

Különösen előnyösen alkalmazható vegyületek a találmány szerinti eljárásban a (XVI) képletű anyag, ahol r! és R² jelentése egyaránt hidrogénatom, és R² jelentése (XIII) képletű csoport;

továbbá a (XVII) képletű vegyületek, ahol az általános képletben

R¹ jelentése hidroxilcsoport,

R² jelentése hidrogénatom, és

R² jelentése (XIII) képletű csoport;

• ·

- 8 továbbá a (XVIII) képletű vegyületek, ahol az általános képletben

R¹ jelentése hidrogénatom, jelentése hidroxilcsoport, és

R³ jelentése (XIII) képletű csoport;

és a (XIX) képletű vegyület, ahol az általános képletben

R¹ és R³ jelentése egyaránt hidroxilcsoport, és

R³ jelentése (XIII) képletű csoport.

Ugyan az eljárásban előnyösen a fent leírt 2,3-diaril-2H-l-benzopiránokat alkalmazzuk, alkalmazhatók továbbá a 2helyzetben szubsztituált származékok is a csontvesztés csökkentésére. Előnyösen alkalmazható szubsztitúciók ebben az esetben a metilcsoport, etilcsoport, propilcsoport és butilcsoport. Ezen túlmenően az (I) általános képletű vegyület aromás gyűrűiben további szubsztituensek egy vagy több helyzetben elhelyezhetők, és ezek a szubsztituensek lehetnek hidroxilcsoport, fluoratom, trifluor-metil-csoport, cianocsoport, 1-18 szénatomos lineáris alkilcsoport, 1- 18 szénatomos lineáris alkoxicsoport vagy 1-18 szénatomos lineáris aciloxicsoport; továbbá 3-18 szénatomos, elágazó szénláncú alkilcsoport, 3-18 szénatomos, elágazó szénláncú alkoxicsoport vagy 3-18 szénatomos, elágazó szénláncú aciloxicsoport; nitrocsoport, aminocsoport vagy NHCOR általános képletű csoport, ahol

R jelentése 1-18 szénatomos, egyenes szénláncú vagy elágazó szénláncú alkilcsoport.

- 9 A szakember felismeri, hogy a szubsztitúció általában limitált a szubsztituensek számát és/vagy méretét illetően abból a szempontból, hogy ezek ne befolyásolják a molekula szerkezetét és funkcióját, illetve ne okozzanak nagy változást ennek oldhatóságában, receptorral történő kölcsönhatásában, biológiai aktivitásában, stb. Ennélfogva a szubsztituensek általában számban limitáltak, és kisebb méretű csoportokat jelentenek, mint például kis szénatomos, 1-4 szénatomos alkilcsoportok.

Az (I) általános képletű, találmány szerinti benzopirán-vegyületeket előállíthatjuk a Saeed és munkatársai (J. Med.

Chem., 33:3210 - 3216. (1990); és a Sharma és munkatársai (J.

Med. Chem., 33:3222 - 3229. (1990) által leírt közleményekben, továbbá az 5,254,568 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi bejelentésben leírt eljárásokkal, amelyeket referenciaként adunk meg. Egy előállítási eljárást mutatunk be az 1. ábrán.

A (II) általános képletű dezoxi-benzoin-vegyület báziskatalizált kondenzációját hajtjuk végre 4-hidroxi-benzaldehiddel, és így a (IV) képletű dihidro-4H-l-benzopirán-4-on, valamint a (VI) képletű 2-fenil-kalkon keverékét nyerjük. Hasonlóan, a (III) általános képletű dezoxi-benzoin kondenzációs reakciója 4-hidroxi-benzaldehiddel az (V) képletű dihidro-benzopirán-4-on és a (VII) képletű 2-fenil-kalkon keverékét szolgáltatja. A (VI) képletű és (VII) képletű fenil-kalkonok redukciója nátrium-bórhidriddel, majd ezt követően az alkoholokon végrehajtott termikus ciklodehidratálási reakció, sorrendben a (VIII) általános képletű és (IX) általános képletű 2H-benzopirán-fenolokat szolgáltatja.

A (VIII) általános képletű és (IX) általános képletű vegyületeket ezt követően alkilezzük, és így a (X) illetve a (XI) általános képletű étereket nyerjük. Az (I) általános képletű hidroxi -származékokat (amelyekben legalább R¹ és R^ egyikének jelentése hidroxilcsoport) előállíthatjuk a Sharma és munkatársai (fent leírt) közleményében, illetve az 5,254,568 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi bejelentésben leírt eljárás segítségével. Ennek során a dezoxi-benzoin megfelelően OTHP (O-tetrahidro-piranil)-védett származékait kondenzációs reakcióban reagáltatjuk 4-hidroxi-benzaldehiddel. A piperidino-etoxi-csoportot tartalmazó fenol-származékokat, ahol a szubsztituens a 2-fenil-helyzetben található, úgy állíthatjuk elő, hogy a megfelelő dezoxi-benzoin-vegyületek THP-éter-származékaiból indulunk ki. így lehetővé tesszük, hogy az oldallánc megfelelő hidroxilcsoportja kapcsolódjon szelektív úton ehhez a csoporthoz .

A 2,3-diaril-l-benzopirán-származékokat, amelyek az aromás gyűrűkön egy vagy több szubsztituenst tartalmaznak, szokásos szintetikus eljárásokkal állíthatjuk elő, megfelelő kiindulási anyagokból. Például ezek a prekurzor anyagok lehetnek szubsztituált dezoxi-benzoinok és/vagy szubsztituált benzaldehidek, mint például a 4-hidroxi-3-metoxi-benzaldehid, 3,4-dihidroxi-benzaldehid vagy 2,4-dihidroxi-benzaldehid.

·· ··

- 11 A találmány szerinti eljárásban a 2,3-diaril-l-benzopirán-származékokat gyógyszerészetileg elfogadható só formájában is előállíthatjuk, amelyek különösen előnyösen lehetnek savaddíciós sók, amelyek szerves savakkal vagy szervetlen savakkal képzett sók. Ilyen sók lehetnek például a szerves savakkal képzett sók, mint például a hangyasavval, ecetsavval, propionsavval, glikolsawal, tej savval, piruvinsavval, oxálsavval, borostyánkősavval, almasavval, borkősavval, citromsawal, benzoesavval, szalicilsavval és más, hasonlókkal képzett sók. Alkalmas szervetlen savakkal képzett savaddíciós sók lehetnek a sósavval, hidrogén-bromiddal, kénsavval és a foszforsavakkal, valamint hasonlókkal képzett sók. A savaddíciós sókat a szintézisben előállított vegyületként közvetlenül is nyerhetjük. Más eljárás szerint a szabad bázis formát alkalmas oldószerben oldjuk, amely a megfelelő savat tartalmazza, majd a sót az oldószer elpárologtatásával vagy másképpen az oldószertől történő elválasztással izolálhatjuk.

A találmány szerinti eljárásban történő felhasználásra a 2,3-diaril-l-benzopirán-vegyületeket és gyógyszerészetileg elfogadható sóikat gyógyszerészetileg elfogadható hordozóanyaggal formáljuk, és így parenterális, orális, nazális, rektális, szubdermális vagy transzdermális adagolásra alkalmas gyógyszerkészítményt állíthatunk elő. Az előállítást szokásosan alkalmazott eljárásokkal végezzük. A készítmények továbbá tartalmazhatnak egy vagy több hígítóanyagot, töltőanyagot, emulzifikáló anyagot, tartósítószert, puffért és kiszerelőanyagot, stb. A forma lehet például folyadék, por, emulzió, kúp, liposzóma, transzdermális tapasz, szabályozott hatóanyag-kibocsátású szubdermális beültetett forma, tabletta, stb. A szakember a találmány szerinti vegyületeket megfelelő módon készítménnyé alakíthatja a szokásosan gyógyszerészetben alkalmazott eljárások segítségével, amelyeket például a Remington's Pharmaceutical Sciences, Gennaro, ed., Mack Publishing Co., Easton, PA (1990) közleményben leírtak, amelyet referenciaként adunk meg.

Előnyös adagolási forma az orális adagolás. így az aktív hatóanyagot orális adagolásra alkalmas formában kapszula vagy tabletta formában állítjuk elő. Jellemzően a találmány szerinti vegyület gyógyszerészetileg elfogadható sóját hordozóanyaggal elegyítjük, majd tablettává préseljük. Alkalmas hordozóanyagok lehetnek például a keményítő, cukor, dikalcium-foszfát, kalcium-sztearát, magnézium-sztearát és más, hasonlók. Az ilyen készítmények továbbá egy vagy több segédanyagot tartalmazhatnak, amelyek lehetnek például nedvesítőszerek, emulzifikálószerek, tartósítóanyagok, stabilizálószerek, színezőanyagok, stb.

A gyógyszerkészítményeket naponta vagy hetes intervallumokban adagolhatjuk. Az ilyen gyógyszerkészítmény hatásos mennyisége az a mennyiség, amely a csontvesztés inhibiálásának jelentős mértékét biztosítja klinikai körülmények között. Ez a hatásos mennyiség részben függ a kezelendő betegség típusától, a beteg korától, testtömegétől és általános egészségi állapotától, valamint egyéb, a szakember számára nyilvánvaló tényezőktől. Általában a csontvesztés inhibiálását úgy figyelhetjük meg, hogy megmérjük a kezelésnek alávetett, illetve a kontroll csoportok esetében mutatkozó csontvesztés térfogatát. Ezt például akkor figyelhetjük meg, amennyiben 5 - 10 % vagy ennél nagyobb különbség mutatkozik a gerinc csonttömegben, vagy a csont ásványianyag-tartalmában 2 év kezelésen belül. A megfelelő állati modellek esetében, mint például az ivartalanított egerek vagy patkány modellek esetében osteoporosis mérést végeztünk, és ezek általában a humán egyedekben alkalmazandó dózisokat is előre jelzik egy nagyságrend értéken belül. Az állati modellek a post-menopausalis körülmények mimézisét mutatják, és általában osteoporosis modellként alkalmazhatók. Az osteoporosis kezelésében alkalmazható terápiás dózis általában 0,01 - 50 mg/kg/nap, előnyösen 0,05 - 10 mg/kg/nap, és legelőnyösebben 0,1 - 5,0 mg/kg/nap érték közötti.

A gyógyszerkészítményeket egységdózis formában adagolhatjuk napi vagy heti adagolási rend szerint. Más eljárás szerint a vegyületeket alkalmazhatjuk szabályozott hatóanyag-kibocsátású formában, amely például szubdermális - beültetett forma lehet. A beültetett formát úgy állítjuk elő, hogy az aktív hatóanyag kibocsátása meghatározott időtartamon át megfelelő sebességgel történjen, amely időtartam lehet akár több év is. Szabályozott hatóanyag-kibocsátású készítményeket írtak le

- 14 például Sanders és munkatársai [J. Pharm. Sci., 73:1294 - 1297. (1984) közleményben]; továbbá a 4,489,056 számú és a 4,210,644 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi bejelentésekben, amelyeket referenciaként adunk meg.

A találmány szerinti eljárást az alábbi példán részletesen bemutatjuk, amely példa nem jelenti a találmány tárgykörének korlátozását .

···· ··· • · · • ····

- 15 Példa

A 2- [4-(2-piperidino-etoxi)-fenil]-3-fenil-2H-l-benzopiránt a Central Drug Research Institute, Lucknow, India intézetből nyertük. A vegyületet CDRI 85/287 névvel jelezték. A CDRI 85/287 anyag hatását petefészek-eltávolított patkányokon a csontreszorpcióra mértük. 2 hónapos nőstény Sprague Dawley legalább 200 g testtömegü patkányokat előzetesen ³H-tetraciklinnel (Du Pont NEN Research Products, Boston, MA) jelöltük intraperitoneális injekció segítségével úgy, hogy 15 μθί ³H-tetraciklint adagoltunk hetente 3 alkalommal. Az utolsó előzetes jelző injektálás után 3 nappal a patkányokat véletlenszerűen az alábbi kezelési csoportokba osztottuk (10 állat/csoport):

a) színlelt/hordozóanyag (placebo),

b) petefészek-eltávolított (OVX)/hordozóanyag,

c) OVX/CDRI 85/287; 15 mg labdacs = 1 mg/nap/kg 250 g tömegű patkányokban,

d) OVX/l7S-ösztradiol; 0,5 mg labdacs = 35 mg/nap/kg

250 g tömegű patkányokban;

e) OVX/ labdacs kombináció (CDRI 85/287 + ösztradiol),

f) alapvonal kontroll.

CDRI 85/287 és 17S-ösztradiol (E₂) vegyületeket szubkután módon fenntartott hatóanyag-kibocsátású labdacs formában beültettünk. A koleszterin, laktóz, cellulózok, foszfátok és sztearátok tartalmú mátrixot állítottunk elő az Innovative • ·

- 16 Research of America (Toledo, OH) eljárása szerint. A labdacsokat úgy terveztük, hogy a hormont 60 nap időtartam alatt bocsás sák ki.

A sebészeti eljárásokat általános érzéstelenített (ketamin/xilazin) állatokon hajtottuk végre. A hát és a farok közötti terület középvonalában kis középvonali testközép mögé eső metszetet végeztünk. A peritoneális üregbe történő bevezetést két izom átvágásával végeztük, amelyet a test mindkét oldalán fél-háromnegyed hosszúság mentén hajtottunk végre.

A petefészket az izombemetszéseken keresztül kivettük, majd egyetlen vágással a petevezeték cső és a méhszarv között elválasztottuk. A méhszarvat ezután a hashártyaüregbe visszavittük, és egy vagy több varrat alkalmazásával az izomréteget lezártuk. Miután mindkét petefészket eltávolítottuk, a labdacsot beültettük szubkután úton a hát közepén található bőrbemetszésen keresztül. Ezután a bőrt bőrcsipeszekkel zártuk le abból a célból, hogy a bemetszési helyek rágását megakadályozzuk .

A patkányokat ketrecenként két állatcsoportban tartottuk, és 12 óra megvilágítás/12 sötétség alkalmazását végeztük körülbelül 70°F (21°C) hőmérsékleten. Párosán végzett táplálást alkalmaztunk, és minden egyes állatpár 40 g kiegészített tápanyagot kapott (Harlan/Teklad Laboratories #86604; Animál Specialities, Inc., Hubbard, OR). Ez az adagolás naponta történt, továbbá nem limitáltan vizet adagoltunk az állatoknak.

• ·

Β · • · « ·

A testtömeget mértük a kísérlet során teljes időtartamban. Az elpusztítás előtti 2 nappal, illetve 8 nappal a patkányok calcein zölt 15 mg/kg fluoreszcens csontjelző intraperitoneális injektálásban részesültek, amely alkalmas arra, hogy hisztomorf mérésben az adott csontszekciókat mérjük.

A sebészeti beavatkozás utáni 57. vagy 58. napon az állatokat elpusztítottuk. A sípcsontokat eltávolítottuk, és a lágy szövetektől megtisztítottuk. Ezt követően 1 cm hosszúságú metszeteket a közeli területről többszörös alkoholos és kloroformos mosással dehidratáltunk, és így a maradó zsírt és szövetet eltávolítottuk. A szekciók csontsűrűségét mértük Archimedes elv alapján (csonttömeg + csonttérfogat vízben).

Az adatokat ANOVA és Fisher PLSD eljárással analizáltuk StatView ^R software alkalmazásával (Abacus Concepts, Inc., Berkeley, CA). Az eredményeket a táblázatban, illetve a

2. ábrán mutatjuk be. Jelentős eltérést tapasztaltunk a petefészek-eltávolított (OVX), a hordozóanyaggal kezelt állatok, illetve a CDRI 85/287-kezelt állatok között. A színlelt/hordozóanyag kezelt állatok és a petefészek-eltávolított és CDRI 85/287-kezelt állatok között az eltérés nem jelentős.

• ·

- 18 TÁBLÁZAT

Kezelés

Átlagos eltérés

Fisher

PLSD imitált/hordozóanyag az OVX/hordozóanyag állatokkal szemben 0,126 imitált/hordozóanyag az

OVX/CDRI 85/287 kezelt állatokkal szemben 0,055 imitált/hordozóanyag az OVX/E₂ kezelt szemben -0,078 imitált/hordozóanyag az

OVX/CDRI 85/287 + E₂ kezelt állatokkal szemben 0,015

OVX/hordozóanyag az OVX/CDRI 85/287 kezelt állatokkal szemben -0,071

0,058*

0,058

0,058*

0,057

0,057* * = Jelentős eltérés 95 %.

• * 9 · • Λ· • · · • » · • · · · ·· ··

- 19 A találmány szerinti eljárást bizonyos részletességgel illusztrációként a korábbiakban bemutattuk; azonban ez a példa csak az egyértelmű értelmezést szolgálja, és a találmány tárgykörébe beleértünk bármely olyan módosítást, amely a lényeg megváltoztatása nélkül a szakember által végrehajtható.

»· · · • · • · · « » ··· ·· · ·»«« ·· • * ··· • · · • · ·«

- 20 SZABADALMI IGÉNYPONTOK

Claims

1. Eljárás betegben csontvesztés csökkentésére, azzal jellemezve, hogy az ilyen kezelést igénylő betegnek egy készítmény hatásos mennyiségét adagoljuk, amely készítmény az (I) általános képletű vegyületet vagy gyógyszerészetileg elfogadható sóját tartalmazza, ahol

R¹ és R² jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, hidroxilcsoport, egyenes vagy elágazó szénláncú 1-17 szénatomos alkoxicsoport, egyenes vagy elágazó szénláncú 2-18 szénatomos aciloxicsoport, vagy egyenes vagy elágazó szénláncú 2-18 szénatomos alkoxi-karbonil-csoport; és

R³ jelentése (XII) általános képletű csoport, ahol

R⁴ és R³ jelentése egymástól függetlenül egyenes vagy elágazó szénláncú 1-18 szénatomos alkilcsoport, vagy a nitrogénatommal együttesen R⁴ és R³ jelentése 3 - 10-tagú gyűrű; és n jelentése 1-6 közötti egész szám, továbbá gyógyszerészetileg elfogadható hordozóanyagot tartalmaz .

2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az általános képletben • · · · ·

R¹ és R² jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, hidroxilcsoport vagy 1-4 szénatomos alkoxicsoport.

3. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az általános képletben

R¹ jelentése hidrogénatom vagy hidroxilcsoport.

4. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az általános képletben

R² jelentése hidrogénatom vagy hidroxilcsoport.

5. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az általános képletben

R⁴ és R⁵ jelentése egymástól függetlenül metilcsoport, etilcsoport, propilcsoport, izopropilcsoport, butilcsoport, izobutilcsoport, szek-butil-csoport vagy terc-butil-csoport; vagy a nitrogénatommal együttesen R⁴ és R³ jelentése 5 - 6-tagú gyűrű.

6. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az általános képletben

R³ jelentése (XIII) képletű csoport vagy (XIV) képletű csoport.

• · · · · · · ··· • ·· ····· ·· ·

- 22

7. A 6. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az általános képletben

R¹ és R² jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom vagy hidroxilcsoport.

8. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az (la) általános képletű vegyületet alkalmazzuk.

9. A 8. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az általános képletben

R¹ és R² jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom vagy hidroxilcsoport, és

R³ jelentése (XIII) képletű csoport vagy (XIV) képletű csoport.

10. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a kezelt csontvesztés osteoporosis Paget betegség rosszindulatú hipercalcemia vagy túlzott mellékpajzsmirigy-működés következtében következik be.

11. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a kezelt beteg egy post-menopausalis nő.

12. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a készítmény orális adagolásban használható készítmény.

• ·· · · · ··· • · · · · · · • *

- 23

13. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a vegyületet 0,1 - 5,0 mg/kg beteg testtömeg/nap dózisban adagoljuk.

14. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a készítményt napi vagy heti időközönként adagoljuk.

15. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy egy szubdermális beültetett formát alkalmazunk.

16. Eljárás osteoporosis kezelésére, azzal jellemezve, hogy az ilyen kezelést igénylő betegnek az (I) általános képletű vegyületet vagy gyógyszerészetileg elfogadható sóját adagoljuk, ahol az általános képletben

R¹ és R² jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, hidroxilcsoport, egyenes vagy elágazó szénláncú 1-17 szénatomos alkoxicsoport, egyenes vagy elágazó szénláncú 2-18 szénatomos aciloxicsoport, vagy egyenes vagy elágazó szénláncú 2-18 szénatomos alkoxi-karbonil -csoport; és

R³ jelentése (XII) általános képletű csoport, ahol

R⁴ és R³ jelentése egymástól függetlenül egyenes vagy elágazó szénláncú 1-18 szénatomos alkilcsoport, vagy a nitrogénatommal együttesen R⁴ és R³ jelentése 3 - 10-tagú gyűrű; és • · • ·

- 24 n jelentése 1-6 közötti egész szám, továbbá gyógyszerészetileg elfogadható hordozóanyagot tartalmaz, és a készítmény alkalmas csontreszorpció inhibiálására.

17. A 16. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az általános képletben

R⁴ és R⁵ jelentése egymástól függetlenül metilcsoport, etilcsoport, propilcsoport, izopropilcsoport, butilcsoport, izobutilcsoport, szek-butil-csoport vagy terc-butil-csoport; vagy a nitrogénatommal együttesen R⁴ és R^ jelentése 5 - 6-tagú gyűrű.

18. A 16. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az általános képletben

R³ jelentése (XIII) képletű csoport vagy (XIV) képletű csoport.

19. A 16. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az eljárásban az (la) általános képletű vegyületet alkalmazzuk .

20. A 19. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az általános képletben

R¹ és R² jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom vagy hidroxilcsoport, és • · ·

- 25 R³ jelentése (XIII) képletű csoport vagy (XIV) képletű csoport.

21. A 16. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy post-menopausalis nőt kezelünk.

22. Az (I) általános képletű vegyület vagy gyógyszerészetileg elfogadható sója, ahol az általános képletben

R³ jelentése (XII) általános képletű csoport, ahol

R⁴ és R⁵ jelentése egymástól függetlenül egyenes vagy elágazó szénláncú 1-18 szénatomos alkilcsoport, vagy a nitrogénatommal együttesen R⁴ és R³ jelentése 3 - 10-tagű gyűrű; és n jelentése 1-6 közötti egész szám, alkalmazása gyógyszerkészítmény előállítására, amely gyógyszerkészítmény alkalmas a csontvesztés veszélyében szenvedő beteg esetében a csontvesztés csökkentésére.

23. Az (I) általános képletű vegyület vagy gyógyszerészetileg elfogadható sója, ahol az általános képletben R¹ és R² jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, hidroxilcsoport, egyenes vagy elágazó szénláncú 1-17 szénatomos alkoxicsoport, egyenes vagy elágazó szénláncú 2-18 szénatomos aciloxicsoport, vagy egyenes vagy elágazó szénláncú 2-18 szénatomos alkoxi-karbonil-csoport; és

R³ jelentése (XII) általános képletű csoport, ahol

R⁴ és R⁵ jelentése egymástól függetlenül egyenes vagy elágazó szénláncú 1-18 szénatomos alkilcsoport, vagy a nitrogénatommal együttesen R⁴ és R⁵ jelentése 3 - 10-tagú gyűrű; és n jelentése 1-6 közötti egész szám, alkalmazása gyógyszerkészítmény előállítására, amely gyógyszerkészítmény alkalmas osteoporosisban szenvedő beteg osteoporosis

-ellenes kezelésére.

A meghatalmazott ifj. Szentpéteri Áriám szabadalmi ügyviV' ifj. Szentpéteri Ádám szabadalmi ügyvivő az S.B.G, A.K. Nemzetközi

H-lO63,0Wafw»LAiid^ayy dt 113. Telefon:' 34-24-9». F»Á;34-24-323 ··»·· ·» λ' \ t i ϊ • ··· ··« ·· · · · « · · ·»

4/3

CHO ( II ) R4 = H (III) R4 = OCH₃

OH (xi) R1=H. R3 = CH₂CH₂N \

1. abra iQ- S^enípéteri Ádúm szabadalmi ügyviro az S.B.CLA K,NenirxtKözl·Szaba^^Ln&bragja ii-1062 Budapest, Andrássy ót 113. Telefon: 34-24-950, Fax: 34-24-323 kezeles sham/hordozó