HUT58523A

HUT58523A - Process for producing antiviral compositions from modified gangliosides

Info

Publication number: HUT58523A
Application number: HU911487A
Authority: HU
Inventors: Francesco Della-Valle; Lanfranco Callegaro; Aurelio Romeo
Original assignee: Fidia Spa
Priority date: 1990-05-04
Filing date: 1991-05-03
Publication date: 1992-03-30
Also published as: AU7638991A; AU637694B2; TW210956B; IL98026A0; IT9041589A1; IE911445A1; IT1239060B; HU911487D0; ZA913264B; CA2041884A1; EP0455560A3; KR910019629A; IT9041589A0; EP0455560A2; JPH04225919A

Description

A jelen találmány eljárást mutat be az immunrendszer mechanizmus gátlására. A gátlás olyan módon következik be, hogy az emberi sejtek sejtfelületein levő CD4 determinánsok kifejezése szelektíven módosul módosított gangliozidok alkalmazása segítségével. Ezek a módosított gangliozidok ugyanis gyorsan és szelektíven eltüntetik a CD4 determinánsokat a sejt felületéről szérum jelenlétében. Arról, hogy szelektíven módosítjuk a CD4 determinánsok kifejezését és működését a sejt felszínén módosított gangliozidokat alkalmazva (amelyek a CD4 gyors és szelektív eltűnését idézik elő), lehetségessé válik a vírusok támadáspontjának eltüntetése és belépésük megakadályozása T-helper (segítő) sejtekbe. A humán sejtek vírus fertőzése a sejtfelületi CD4 determinánsokon keresztül megy végbe, ezek eltüntetése tehát gátolja a sejtek, sejtvonalak receptor képességét, ugyanakkor nem gátlódnak a sejtfelületen jelen levő további determinánsok. A találmány tárgya ennek megfelelően, eljárás módosított gangliozidokat tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására, amelyek szelektíven gátolják a CD4 determinánsok kifejezését és működését, és ennek következtében vírusgátló hatásúak.

A jelen találmány olyan eljárást is ismertet, amelynek révén a humán sejtek sejtfelületén jelen levő determinánsok kifejezése és működése szelektíven módosul. A speciális determinánsok kifejezésének és működésének szelektív módosításával az emberi sejteket meg lehet védeni a legyengítő ágensektől, legyenek azok akár exogén, akár endogén eredetűek, olyan módon, hogy a sejtek működése változatlan marad. A jól működő immunrendszer megvédi a szervezetet a fertőző ágensektől, amelyek közé értjük pl. a vírusokat, baktériumokat, parazitákat és hasonlókat. Az a képesség, hogy legyőzzük az ilyen ágenseket és más anyagokat - amelyeket antigéneknek nevezünk és amelyeket az immunrendszer idegen részecskéknek ismer fel -, életfontosságú az egészség és a túlélés szempontjából. Normális körülmények • · · ·

-3··«·· ··· ·« ···* ·· · • ·· ····« ···· ·« * · · · · ·· között az immunrendszer képes leküzdeni sokféle fertőzést és teljes gyógyulást biztosítani, de amikor ez veszélyeztetve van, a fertőzés korlátozás nélkül behatolhat. Az immunrendszer hibás működése kifejeződhet a biológiai aktivitás túltengésével is, amely esetleg valamely természetes komponensének túltermelésében jelentkezik, de jelentkezhet olyan módon is, hogy a szervezetben normálisan jelen levő biológiai komponenseket a szervezet antigénként ismeri fel.

A makrofágok és limfociták különösen érdekeltek az immunfolyamatokban. A makrofágok megtámadják és elpusztítják a fertőző ágenst, miközben információt adnak át ennek szerkezetéről a limfocitáknak. A limfocitáknak két kategóriája van. Az első, amelyet B sejteknek neveznek, antitesteket termel a fertőző ágensek elleni válaszként. Az antitesteknek vannak speciális kombinációs helyeik, amelyek különbséget tesznek az egyes antigének különböző szerkezetei között.

Amikor egy antitest kötődik egy antigénhez, kölcsönhatásuk blokkolhatja egy idegen anyag hatását. A limfociták második kategóriája, amelyet T sejteknek neveznek, csak membrán receptorokat alakít ki, amelyek felismerik az antigén szerkezeteket a makrofágoktól kapott információkból. Amikor a T sejtek kölcsönhatásba lépnek az antigénnel, nagy számú hormon (limfokin) bocsátódik ki, amelyek gyulladást indukálhatnak, felerősíthetik vagy gyengíthetik a B sejtek által végzett antitestképződést, vagy közvetlenül pusztíthatnak el bármely idegen sejtet, pl. tumorokat vagy transzplantált szerveket.

Az egyensúly és cserearány a T sejtek, B sejtek és makrofágok között meghatározza egyes egyénekben a fertőzésre adott immunválasz erősségét. Általában úgy gondoljuk, hogy az immunsejtek aktivitásait nagy mértékben szabályozzák a limfokinek és a

-4monokinek, amelyek mindegyikének megvannak a meghatározott kémiai tulajdonságai és funkciói. Dalgleish közleménye [The CD4 Molecule: Function and Structure, Immunology Today, 2, 142 (1986)] beszámol arról, hogy egy, a sejt felületén jelen levő fajlagos determináns, pl. a CD4 molekula érett T limfociták olyan al-populációját határozza meg, amely - az antigén felismerés után [ez a fő hisztokompatibilitási komplex (major histocompatibility complex, MHC) antigénjeire (II. osztály) korlátozódik] - sokféle szabályozó és végrehajtó funkció kialakulásához vezet. A sejt felületen jelen levő CD4 determináns módosítása nyilvánvalóan negatív hatással van a T sejtekre, tehát a T sejt működés blokkolásának tekinthető. A CD4 (T4) antigén a T helper limfociták alapvető receptora, és azt találták erről, hogy alapvető szerepet játszik az AIDS-sel kapcsolatos retrovirus receptoraként [Dalgleish és munkatársai: Natúré 312, 763 (1984)].

A CD4 molekula pontos funkciója ma még nem teljesen világos, de a kísérleti bizonyítékok arra utalnak, hogy ez a fő hisztokompatibilitási komplex II (MHC-II) molekulával kölcsönhatásba lép, hogy hatékonyabban közvetíthesse az antigén meghatározott célpontjainak felismerését a T helper sejtek révén [Gay és munkatársai: Natúré 328. 626 (1987); Doyle és munkatársai: Natúré 330. 256 (1988)]. Ezen kívül tanulmányokat végeztek a CD4 molekula jel-átalakító (transzduktor) szerepével kapcsolatban a membránban [Bank és munkatársai: J. Exp. Med. 162. 1294 (1985)]. A T helper sejtek kezelése fórból észterekkel a CD4 molekula internalizációját idézi elő a citoplazmás szerin gyök C protein kináz által végzett foszforilezésével [Hoxie és munkatársai: J. Bioi. Chem. 261. 1610 (1986); Hoxie és munkatársai: J. Immunoi. 140. 786 (1986)].

Ismertették már azt a módosító vagy árnyékoló hatást is, amelyet CD4 -et kifejező

-5• · · · ···· ···· ·· • · · · · · · • · ···· ·· · • ·· ···«* sejtek savas glikoszfingolipidekkel,pl. gangliozidokkal végzett inkubálásával értek el [Offner és munkatársai: J.Immunol. 139. 3295 (1987); Offner és munkatársai: Biochem Biophys. Rés. Commun. 158. 1050 (1989); Life Science (1989)]. Ezt a hatást el lehet érni olyan gangliozidokkal is, amelyek megfelelő módon kémiailag módosítva vannak a sziálsav rész funkcionális karboxi csoportján [Grassi és munkatársai: J. Immunoi. (1990), nyomdában] és amelyekről - GMi monoszialogangliozid esetében [Svennerholm féle nomenklatúra (1963)] - kimutatták, hogy lelassítják a HIV-t humán immunhiány vírus által okozott fertőzést, amenynyiben megfelelő sejtvonalakat alkalmaznak [Chieco Bianchi és munkatársai: AIDS

3. 501 (1989)]. A CD4 bizonyos gangliozidok, pl. GMi, GDi_a, GDib , GTib , vagy ezek keverékei vagy megfelelő, kémiailag módosított származékai révén történő módosításának vagy árnyékolásának mechanizmusa egyelőre még nem tisztázott.

A tulajdonság, amely ezekben a molekulákban közös, az, hogy a CD4 receptorra vonatkozó módosító vagy árnyékoló aktivitásuk in vitro kísérletekben teljesen eltűnik, ha ezeket a kísérleteket szérum vagy szérumszármazékok jelenlétében végezzük, még akkor is, ha ezek csak igen kis koncentrációban vannak jelen. Ez teljes mértékben kizárja ezeknek a molekuláknak az alkalmazását a CD4 módosítására in vivő.

Az olyan molekulák, amelyek szelektíven módosítanák vagy árnyékolnák a CD4 -et, komoly hasznot és előnyt jelentenének a szakterületen, ha ezekről igazolható lenne, hogy normális biológiai komponensek, pl. szérum vagy szérumkomponensek jelenlétében is működnek. A jelen találmány ilyen molekulákat szolgáltatva megoldja ezt a problémát. A jelen találmány keretében néhány olyan vegyület alkalmazásáról számolunk be, amelyek hatnak a CD4 fehérjére szérum jelenlétében is.

• · • ·

-6• · · · · · · • · ···· · · • · · · · · · ···· · · ··· · · ··

A biológiailag aktív anyag fontos tulajdonsága emberekben az a képesség, hogy megkülönböztetést képes kialakítani pl. olyan módon, hogy szelektíven módosítja egy, a sejtfelületen jelen levő adott determináns kifejezését és működését. Az antitestek a molekulák olyan osztályába tartoznak, amelyek szelektív megkülönböztetést tesznek, de ezeknek bizonyos mellékhatásaik is vannak. A kémiai kompozíciók, a gyógyszerekhez hasonlóan, általában nem képesek különbséget tenni és hathatnak sok különböző típusú emberi sejtre. Következésképpen szükség van olyan kémiai kompozíciókra, amelyek képesek különbséget tenni, és amelyek azzal a szelektív képességgel bírnak, hogy módosítják az emberi sejteken jelen levő determinánsokat olyan módon, hogy megakadályozódjanak a fertőzések vagy más, az immunrendszerrel kapcsolatos nem kívánatos mellékhatások.

A jelen találmány olyan eljárással foglalkozik, amely reverzibilisen gátol egy biológiai folyamatot emberekben olyan módon, hogy bizonyos kémiai ágensek alkalmazásával szelektíven módosítja egy determináns kifejeződését; ez a determináns az emberi sejtek felületén van és CD4 -ként ismeretes. Ezek a kémiai ágensek módosított gangliozidok kompozíciójából vagy módosított gangliozidok és természetes gangliozidok keverékéből állnak, amely kompozíciók a CD4 molekula gyors és szelektív eltűnését idézik elő humán sejtvonalakon. Az ezekkel a módosított gangliozidokkal vagy keverékekkel végzett kezelés után az emberi sejtek - bizonyos idő elteltével - beszüntetik a CD4 kifejezését, és bizonyos biológiai működéseik lelassulnak, pl. kölcsönhatásuk a HÍV vírussal.

A jelen találmány megfogalmazásánál a módosított gangliozid kifejezés olyan vegyület meghatározására szolgál, amelyet meghatározott és reprodukálható kémiai reakciók sorozatával kapunk meg egyetlen természetes gangliozidból vagy ilyenek ···· ···· • · · ····· • · · · ·· ··· ·· ·· keverékéből kiindulva. Az emberi sejtek szelektív módosítása megtörténik szérum jelenlétében is, vagyis a szérum nem közömbösíti a módosított gangliozidok hatását.

A jelen találmány szerinti módosított gangliozidok félszintetikus gangliozid analógok, és a természetes gangliozidoktól abban különböznek, hogy a szfíngozin részben egy egyedi N-acil csoporttal bírnak, mégpedig N-diklór-acetil-csoporttal. Ezeket a komplexeket, amelyeket N-diklór-acetil lizogangliozidoknak neveznek, már leírták a szakirodalomban, pl. a 0373039 számú európai közrebocsátási iratban (1990. június 13), amelynek leírását beépítjük a jelen bejelentésbe. Az előnyös N-diklór-acetil lizoglangliozid az N-diklór-acetil-lizo GMi. Ezekről a vegyületekről ismert, hogy immunszuppresszív hatásuk van.

A találmány tehát olyan gyógyászati készítmények előállításával foglalkozik, amelyek aktív anyagként egy vagy több fent említett származékot vagy félszintetikus gangliozid analógot tartalmaznak és különösen olyan gyógyszerkészítmények előállításával, amelyek az említett N-diklór-acetil lizogangliozidokat tartalmazzák. Az ilyen gyógyászati készítmények készíthetők orális, rektális, vaginális, parentális vagy lokális alkalmazásra. Ennek megfelelően ezek lehetnek szilárd vagy félszilárd formában, pl. pilulák, tabletták, zselatin kapszulák, kapszulák, végbélkúpok, lágy zselatin kapszulák, gélek, mikrogömbök, membránok, hüvelytabletták vagy krémek formájában. Parentális alkalmazáshoz olyan formákat használhatunk, amelyek intramuszkuláris vagy szubkután beadáshoz, infúzióhoz, vagy intravénás vagy intracerebráláis injekciókhoz felelnek meg; ennek megfelelően a gyógyászati kompozíciók az aktív anyagok oldatai lehetnek, vagy az aktív anyagok fagyasztva szárított porai lehetnek, összekeverve egy vagy több gyógyászatilag elfogadható hordozóval vagy hígítóval, amelyek megfelelnek a fenti alkalmazásoknak és

-8• · · • · · ♦ ···♦ · • · · · · • · ···· · · · • ·· ····· ···· · · · · · · · · · ozmotikusán megfelelnek a fiziológiás folyadékoknak. A helyi alkalmazáshoz a permet, pl. orrpermet, krém, vagy szemcsepp készítmények előállítása a legcélszerűbb.

Az ilyen készítmények tartalmazhatnak az aktív anyag mellett társult anyagként bizonyos polimereket, pl. savas poliszacharidokat is, mint hiarulonsavat vagy alginsavat; ezek lehetnek kémiailag módosítva és így belekeverve a gyártott termékbe; ezeket bio-anyagok néven nevezhetjük. A kémiailag módosított származékok között említhetjük - a korlátozás szándéka nélkül - a részleges vagy teljes észter származékokat, pl. az etil-, benzil-, vagy dodecilalkohol származékokat, amelyeket hiarulonsavból [lásd a 4,851,521 és 4,965,353 lajstromszámú amerikai egyesült államok-beli szabadalmi leírásokat (Fidia)J vagy alginsavból [lásd a 0251905 számú európai szabadalmi közrebocsátási iratot (Fidia)J alakíthatunk ki.

A találmány szerinti készítményeket embereknek vagy állatoknak adhatjuk be. A találmány szerinti készítmények különösen alkalmasak emló'söknek, elsősorban embereknek. Az ilyen készítmények előnyösen 0,01 -10 tömeg % aktív alkotórészt tartalmaznak oldatok, permetek, szemcseppek és krémek esetében, és 1 - 100 tömeg %, előnyösen 5-50 tömeg % aktív alkotórészt tartalmaznak szilárd formájú készítmények esetében. A beadandó dózis függ az egyedi igényektől, a kívánt hatástól és a választott beadási úttól.

A jelen találmány foglalkozik a találmány szerinti kompozíció gyógyászati alkalmazásával, amely alkalmazás a sejten levő CD4 molekula kifejeződésének módosítására irányul. Az emberek napi adagja injekció (szubkután, intramuszkuláris vagy intracerebrális) esetében 5 mg és 25 mg aktív anyag között változik 1 testtömeg kg-ra vonatkoztatva.

-9·· ·· »«·· e··· ·· ····· ··« • · ···* · · · • · · ····· ···· ·· ··* ·· ··

Az alábbi példák csupán a jelen találmány bemutatását szolgálják, és nem korlátozó jellegűek. Hacsak másképpen nem jelezzük, a megadott százalékok mindenütt tömegszázalékot jelentenek.

1. PÉLDA

Kísérleti úton bemutatjuk a sejtfelületen levő CD4 determinánsok kifejezésének és működésének gátlását és eltüntetését módosított gangliozidok kompozíciója vagy módosított gangliozid molekulák speciális osztálya segítségével.

Emberi limfocitákat inkubálunk az N-dilór-acetil lizo GMi módosított gangliozid különböző koncentrációival. A sejteket megfestjük CÜ4, CDs, CD3 -ra fajlagos (T4, Te, T3 Coulter Clone, Coulter Electronic, Hieleah, Florida, Amerikai Egyesült Államok) és OKT4 -re fajlagos (Ortho Diagnostics, Raritan, New Jersey, Amerikai Egyesült Államok) monoklonális antitesteket (Mab) alkalmazva: ezek a monoklonális antitestek fluoreszceinhez vannak kapcsolva. Ha megmérjük a jelzett sejtpopuláció átlagos fluoreszcenciás intenzitását (MFI) az N-dilór-acetil lizo GMi egyes koncentrációinál, megbecsülhetjük, mennyi N-diklór-acetil lizo GMi szükséges a fluoreszcencia 50 % -os gátlásának eléréséhez (I50). Az I50 érték a kisebb limfocitáknál 5 /üm. Az N-diklór-acetil lizo GMi kompozíciójának azt a koncentrációját, amelynél a fluoreszcenciás intenzitás mérőszáma 0 %, kísérletileg határozzuk meg.

Az emberi sejteket fiziológiás konyhasóoldattal inkubáljuk különböző koncentrációjú N-diklór-acetil lizo GMi -gyei együtt szérum jelenlétében 37° C hőmérsékleten, 1 órán át. A sejteket ezután mossuk, megfelelő monoklonális antitestekkel inkubáljuk, 1 % formalinnal rögzítjük, és MFI -vei elemezzük 488 nm -es lézerfénynél végzett gerjesztés után. Az értékeket az 1. táblázatban mutatjuk be.

-10• · · · · · ·· ·· · ♦ ·· ····· ··· ······ ··· ···· · · ··· ·« ··

1. TÁBLÁZAT

N-diklór-acetil lizo GMi koncentrációja (Mg/ml)	Átlagos fluoreszcenciás intenzitás (a pozitív kontroll százalékában)
2	anti CD4 Mab	100
	anti CD3 Mab	100
5	anti CD4 Mab	60
	anti CD3 Mab	100
10	anti CD4 Mab	28
	anti CD3 Mab	100
25	anti CD4 Mab	0
	anti CD3 Mab	100
50	Mab anti CD4	0
	Mab anti CD3	100

-11• · · ·

Az 1. táblázatban feltüntetett értékek azt mutatják, hogy az N-diklór-acetil lizo GMi szelektíven módosítja a CD4 receptort a nélkül, hogy megváltoztatná a CD3 receptort.

2. PÉLDA

Molt 3 sejteket (5 . 10⁶) inkubálunk N-diklór-acetil lizo GMi különböző koncentrációival (l^g/ml -tői 250jKg/ml -ig) 60 percen át 37° C hőérsékleten BMS jelenlétében (BMS Serum Substitute, Biochrom. Kg. Seromed, Berlin, Németország). Inkubálás után a kifejezett CD4 százalékát kimutatjuk CD4 -re fajlagos Mab -bal (T4 Coulter Clone, Coulter Electronics, Hialeah, Florida, Amerikai Egyesült Államok). Pozitív kontrollként kísérletet végzünk GMi monoszialoganglioziddal is azonos kísérleti körülmények között, mint amelyekről az N-diklór-acetil lizo GMi -nél beszámoltunk.

A 2. táblázat mutatja be a CD4 százalékát Molt 3 sejtekben kifejezve különböző kémiai molekulák különböző koncentrációinál végzett inkubálások után, amint ezt az 1. példában leírtuk. A kémiai ágensek távollétében kifejezett CD4 a kísérlet során 89%.

• ·

2. TÁBLÁZAT

1 Xg/ml		25^g/ml	125 jKg/ml
N-diklór-acetil-
lizo GMi 75 %	74%	47%	13%
GMi 88 %	81 %	52%	0%

·« ·« ··«· ···· ·* • · · · · · · · ·· ···· · · · • » · · · · · · ··»· «· ··· · · · ·

A 2. táblázatban feltüntetett eredmények azt jelzik, hogy a GM1 -nek és kémiai származékának módosító hatása dózis-válasz görbe függvénnyel bír.

3. PÉLDA

Molt 3 sejteket (5 . 10⁶) inkubálunk N-diklór-acetil lizo GMi különböző koncentrációival (1 /íg/ml-től 250 /.tg/ml-ig) 60 percen át 37° C hőmérsékleten borjúembrió szérum (FCS) különböző koncentrációi (1 %-tól 5 %-ig) jelenlétében. Inkubálás után a kifejezett CD4 százalékot kimutatjuk CD4 -re fajlagos Mab -al (T4 Coulter Electronics, Hieleah, Florida, Amerikai Egyesült Államok).

Pozitív kontrollként kísérletet végzünk GMi monoszialoganglioziddal is azonos kísérleti körülmények között, mint amelyekről az N-diklór-acetil lizo GMi-nél beszámoltunk.

A 3. táblázat mutatja be az adatokat a CD4 százalékára vonatkozóan a Molt 3 sejtekben kifejezve a kétféle molekula különböző koncentrációival és a borjúembrió szérum különböző koncentrációival végzett inkubálás után. A kémiai ágensek távollétében kifejezett CD4 a kísérlet során 84 %.

f

3. TÁBLÁZAT

N-DIKLÓR-ACETIL LIZO GMi

Koncentráció		25/dg/mI	75y<g/ml	125^g/ml
FCS 1 %	70%	44%	47%	30 %
2 %	73%	55%	50%	49 %
5 %	77%	64%	55%	50 %

GMi

Koncentráció	lXg/ml	25Ag/ml	75_fcMg/ml	125^g/ml
FCS 1 %	82%	80%	50%	10 %
2%	84%	83%	80%	25 %
5 %	85 %	81%	83%	72 %

4« ···· «··« «4 ····· · · * • · · ·*» 9 · · • ·· 9 9 9 9 · • 999 ·9 999 9· ··

-15Α 3. táblázatban feltüntetett eredmények azt jelzik, hogy az N-diklór-acetil lizo GMi vegyület esetében a fokozott szérumkoncentrációk nem változtatják meg a vegyület módosító hatását a CD4 receptorokra, míg a GMi esetében ez a módosító hatás eltűnik szérum jelenlétében.

Az alábbi példákban bemutatunk tipikus gyógyászati kiszereléseket.

1. készítmény - egy 2 ml-es ampulla az alábbiakat tartalmazza:

- N-diklór-acetil lizo GMi	5 mg
- nátrium-klorid	16 mg
- citrát puffer (pH 6)
injekcióhoz alkalmas vízben	2 ml
	térfogatig

2. készítmény

100 g szemcsepp az alábbiakat tartalmazza:

- N-diklór-acetil lizo GMi (5 g kevert foszfolipid liposzómában)

- polietilénglikol monosztearát

- glicerin

- p-hidroxi-benzoesav-észter

- víz

4,0 g

1,5 g

125 mg

72,9 g

-16• ·

3. készítmény

100 g krém, amely hialuronsav etil-alkohollal képzett teljes észterét tartalmazza, az alábbiakból áll:

- N-diklór-acetil lizo GMi

1.000 g

- hialuronsav etil-alkohollal képzett

teljes észtere	0.200 g
polietilénglikol monosztearát 400	10.000 g
cetiol V	5.000 g
lanette SX	2.000 g
metil-p-hidroxi-benzoát	0.075 g
propil-p-hidroxi-benzoát	0.050 g
nátrium-dihidro-acetát	0.100 g
glicerin (gyógyszerkönyvi)	1.500 g
szorbit 70	1.500 g
vizsgáló krém	0.050 g
injekcióhoz alkalmas víz	100.000 g tömegig

4, készítmény

100 g krém, amely hialuronsav etil-alkohollal képzett részleges észterét tartalmazza (75 % észterezett karboxilcsoport 25 % sóként lekötött karboxilcsoport), az alábbiakból áll:

- N-diklór-acetil lizo GMi 1.000 g

- hialuronsav etil-alkohollal képzett részleges észtere

0.200 g ι

-17• · ·

- poletilénglikol monosztearát 400 - cetiol V	10.000 g 5.000 g
- lanette SX	2.000 g
- metil-para-hidroxi-benzoát - propil-para-hidroxi-benzoát - nátrium-dihidro-acetát	0.075 g 0.050 g 0.100 g
- glicerin (gyógyszerkönyvi minőség) - szorbit 70	1.500 g 1.500 g
- vizsgáló krém - injekcióhoz alkalmas víz	0.050 g 100.000 g tömegig

5. készítmény - 100 g krém, amely anyag hialuronsav benzil-alkohollal képzett teljes észterét tartalmazza, az alábbiakból áll:

- N-diklór-acetil lizo GMi 1.000g

- hialuronsav benzil-alkohollal képzett teljes észtere 0.2000g

- poletilénglikol monosztearát 400 10.000g

- cetiol V 5.000g

- lanette SX 2.000g

- metil-para-hidroxi-benzoát 0.075g

- propil-para-hidroxi-benzoát 0.050g

- nátrium-dihidro-acetát 0.100g

- glicerin (gyógyszerkönyvi minőség) 1.500g

- szorbit 70 1.500g

- vizsgáló krém 0.050g

- injekcióhoz alkalmas víz 100.000g tömegig

-18·· ·· · · · · ···· ·· ····· ··· ·· ···· ·· · • ·· ····· ···· ·· ··· · · · ·

6. készítmény

100 g krém, amely hialuronsav benzil-alkohollal képzett részleges észterét tartalmazza (75' % észterezett karboxilcsoport - 25 % sóként lekötött karboxilcsoport), az alábbiakból áll:.

- N-diklór-acetil lizo GMi 1.000 g

- hialuronsav benzil-alkohollal képzett részleges észtere 0.200g

- poletilénglikol monosztearát 400 10.000g

- cetiol V 5.000g

- lanette SX 2.000g

- metil-para-hidroxi-benzoát 0.075g

- propil-para-hidroxi-benzoát 0.050g

- nátrium-dihidro-acetát 0.100g

- glicerin (gyógyszerkönyvi minőség) 1.500g

- szorbit 70 1.500g

- vizsgáló krém 0.050g

- injekcióhoz alkalmas víz 100.000g tömegig

7. készítmény

100 g krém, amely alginsav etil-alkohollal képzett teljes észterét tartalmazza, az alábbiakból áll:

- N-diklór-acetil-lizo GMi 1.000 g

- alginsav etil-alkohollal képzett teljes észtere

0.200 g • ·

poletilénglikol monosztearát 400	10.000 g
cetiol V	5.000 g
lanette SX	2.000 g
metil-para-hidroxi-benzoát	0.075 g
propil-para-hidroxi-benzoát	0.050 g
nátrium-dihidro-acetát	0.100 g
glicerin (gyógyszerkönyvi minó'ség)	1.500 g
szorbit 70	1.500 g
vizsgáló krém	0.050 g
injekcióhoz alkalmas víz	100.000 g tömegig

8, készítmény

100 g krém, amely algínsav etil-alkohollal képzett részleges észterét tartalmazza (50 % észterezett karboxil-csoport - 50 % sóként lekötött karboxilcsoport), az alábbiakból áll:

- N-diklór-acetil-lizo GMi 1.000g

- algínsav etil-alkohollal képzett teljes észtere 0.200g

- poletilénglikol monosztearát 400 10.000g

- cetiol V 5.000g

- lanette SX 2.000g

- metil-para-hidroxi-benzoát 0.075g

- propil-para-hidroxi-benzoát 0.050g • ·

- nátrium-dihidro-acetát	0.100 g
- glicerin (gyógyszerkönyvi minőség) - szorbit 70	1.500 g 1.500 g
- vizsgáló krém - injekcióhoz alkalmas víz	0.050 g 100.000 g tömegig

9. készítmény

100 g krém, amely alginsav benzil-alkohollal képzett teljes észterét tartalmazza, az alábbiakból áll:

- N-diklór-acetil-lizo GMi

- alginsav benzil-alkohollal képzett teljes észtere

- poletilénglikol monosztearát 400

- cetiol V

- lanette SX

- metil-para-hidroxi-benzoát

- propil-para-hidroxi-benzoát

- nátrium-dihidro-acetát

- glicerin (gyógyszerkönyvi minőség)

- szorbit 70

- vizsgáló krém

- injekcióhoz alkalmas víz

l.OOOg

0.200 g

10.000 g

5.000 g

2.000 g

0.075 g

0.050 g

0.100 g

1.500 g

0.050 g

100.000 g tömegig

-21V

10. készítmény • · ···« · · • · · · · « · ···· ·· ··· · · · ·

100 g krém, amely alginsav benzil-alkohollal képzett részleges észterét tartalmazza (50 % észterezett karboxil-csoport - 50 % sóként lekötött hidroxilcsoport), az alábbiakból áll:

- N-diklór-acetil-lizo GMi

1.000 g

- alginsav benzil-alkohollal képzett

teljes észtere	0.200 g
- poletilénglikol monosztearát 400	10.000 g
- cetiol V	5.000 g
- lanette SX	2.000 g
- metil-para-hidroxi-benzoát	0.075 g
- propil-para-hidroxi-benzoát	0.050 g
- nátrium-dihidro-acetát	0.100 g
- glicerin (gyógyszerkonyvi minőség)	1.500 g
- szorbit70	1.500 g
- vizsgáló krém	0.050 g
- injekcióhoz alkalmas víz	100.000 g tömegig

« · « ·

Claims

SZABADALMI IGÉNYPONTOK

1. / Eljárás hatóanyagként N-diklór-acetil lizogangliozid vegyületet tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására azzal jellemezve, hogy az ismert módon előállított hatóanyagot megfelelő gyógyászatilag elfogadható segédanyagokkal összekeverve emberi sejtek felületén levő CD4 determinánsokkal kapcsolatos betegségek elleni gyógyszerkészítményekké alakítjuk.
2. / Az 1. igénypont szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy N-diklór-acetil lizogangliozidként N-diklór-acetil lizo GMi -et tartalmazó gyógyszerkészítményt állítunk elő.
3. / Az 1. igénypont szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy emberi sejtekként agy glia sejtek, emberi T helper sejtek, emberi hámsejtek vagy emberi makrofágok felületén levő CD4 determinánsokkal kapcsolatos betegségek elleni gyógyszerkészítményeket alakítunk ki.
4. / Az 1. igénypont szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy a sejtfelületen levő CD4 determinánsok módosításával, de a sejtfelületen levő egyéb determinánsok változatlanul hagyásával ható gyógyszerkészítményeket alakítunk ki.
5. / Az 1. igénypont szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy CD4 determinánsokkal kapcsolatos betegségként neuroimmunpatológiás állapotok kezelésére alkalmas gyógyszerkészítményeket alakítunk ki.

-23• · • ·»<

« »
6. / Az 5. igénypont szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy neuroimmunpatológiás állapotként sclerosis multiplex kezelésére alkalmas gyógyszerkészítményeket alakítunk ki.
7. / Az 5. igénypont szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy neuroimmunpatológiás állapotként poliradiculo-neuropátia kezelésére alkalmas gyógyszerkészítményeket alakítunk ki.
8. / Az 5. igénypont szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy neuroimmunpatológiás állapotként fertőzó' vírusok fertőzésével társult betegségek kezelésére alkalmas gyógyszerkészítményeket alakítunk ki.
9. / A 8. igénypont szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy fertőző vírusként HIV-I vírus fertőzésével társult betegségek kezelésére alkalmas gyógyszerkészítményeket alakítunk ki.
10. / Az 5. igénypont szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy neuroimmunpatológiás állapotként krónikus neurodegeneratív betegségek vagy az idegrendszerre ható krónikus immunpatológiai betegségek kezelésére alkalmas gyógyszerkészítményeket alakítunk ki.
11. / Az 1 - 10. igénypontok bármelyike szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy ol- datok, permetek, orrcseppek, vagy krémek esetében 0.01 és 10 tömeg % közti mennyiségű hatóanyagot tartalmazó gyógyszerkészítményeket alakítunk ki.

-24·« *4 4444 ··· • 4 · * ·
12. / Az 1 - 10. igénypontok bármelyike szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy szilárd gyógyszerkészítmények esetében 1 és tömeg 100 % közti mennyiségű hatóanyagot tartalmazó gyógyszerkészítményeket alakítunk ki.
13. / A 12. igénypont szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy szilárd gyógy- szerkészítmények esetében 5 és 50 tömeg % közti mennyiségű hatóanyagot tartalmazó gyógyszerkészítményeket alakítunk ki.
14. / Az 1 - 10. igénypontok bármelyike szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy szub- kután, intramuszkuláris vagy intracerebrális injekciókhoz alkalmas készítmények esetében testtömeg-kilogrammonként 5-25 mg közti hatóanyagot tartalmazó adagokat alakítunk ki.