HU230545B1 - Antigént és glikolipidet tartalmazó készítmény szublingvális úton történő alkalmazásra - Google Patents

Antigént és glikolipidet tartalmazó készítmény szublingvális úton történő alkalmazásra Download PDF

Info

Publication number
HU230545B1
HU230545B1 HU0203972A HUP0203972A HU230545B1 HU 230545 B1 HU230545 B1 HU 230545B1 HU 0203972 A HU0203972 A HU 0203972A HU P0203972 A HUP0203972 A HU P0203972A HU 230545 B1 HU230545 B1 HU 230545B1
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
antigen
composition
adjuvant
response
administration
Prior art date
Application number
HU0203972A
Other languages
English (en)
Inventor
Alan Wheeler
Garry Elliott
Christopher Wallace Cluff
Original Assignee
Allergy Therapeutics Limited
Corixa Corporation
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=9883730&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=HU230545(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Allergy Therapeutics Limited, Corixa Corporation filed Critical Allergy Therapeutics Limited
Publication of HUP0203972A2 publication Critical patent/HUP0203972A2/hu
Publication of HUP0203972A3 publication Critical patent/HUP0203972A3/hu
Publication of HU230545B1 publication Critical patent/HU230545B1/hu

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/35—Allergens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/53—DNA (RNA) vaccination
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/54—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the route of administration
    • A61K2039/541—Mucosal route
    • A61K2039/542—Mucosal route oral/gastrointestinal
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55572—Lipopolysaccharides; Lipid A; Monophosphoryl lipid A
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/57—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the type of response, e.g. Th1, Th2

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Description

Amigám és gífelipídei iartaímaző készítmény szablmgvíílís utón íöriésjö alkalmazásní
A láfelmfety tárgyát legalább egy antigént ás glikolípíd-adjovámt tartalmazó készítofeny szublingválts: ütőn iOríénö alkalmazása képezi tmtkozális és szisztémás ünmunte kiváltására. A találmány tárgyát képezik továbbá a találmány Szerint alkalmatott készítmények, eljárások a találmfety szerinti készítmények előállítására, valamim a készítmények alkalmazása fertőzések, aitemmtmitás, tumor vagy allergia kezelésére, megelőzésére vagy a felsoroltakkal szembeni Ibgéteyság esökkemésére alkalmas gyógyszerek és az antigént felismerő eílesaayagok élőé 11 kására.
A találmány szerinti megoldás profliaktikus vagy terápiás vakcinaként alkalmas immunizálásra, allergia kezelésére, vagy ellenanyagok terme ítélésére.
Az immunrendszer kimömioitan arra fejlődőit ki, hogy felismerje és eltávolítsa az idegen vagy Qí anyagokat a szervezetből. Ezek lehetnek vírusos, bakiét iáiig vagy parazita eredetűek, és jelen lehetnek a gazdaszervezet sejtjein kívül, annak sejtjeiben, vagy lehetnek daganatos eredetűek. Azok származhatnak továbbá más fi»·· Fásokból, és lőhetnek·, nem patógének vágj·' eredendően károsak valamennyi egyénre.
A nyálkahártyával asszociált tmmtmrendszrrt í„rf<m<'í>mf Mi'iM.twon MIM közvetlenül a légutak, genitomelrálís íhágy- és ivarszerv E és ga^ztrotesztinalA traktus {emr^mncmbíet) ep-.teltumvs, valamint a nyál·· , könny- és ondóm irigyek kivezeiörendszere alatt elhelyezkedő nyirökszőveiek alkotják. A. MIS elsődleges terméke azígA.
i gs, a ímnut * xtsez?’ cu'Vsvg. ü'apout λ'>ο mmmmrna-'t k '<;· to kompét ee alkuim ioisv rtak legismertebb és .legsikeresebb módjn a vakeínázás. Természetszerűleg, ahhoz, bőgj egy vakcinái beveze».»?nek és engedélyezzenek, gonak hatásosnak kell lennie, és valamennyi vakcina hatékonysági5 időről-időre ellenőrizni kell figy vakcina hatékonyságát számos fektor befolyásolja, A vakcinákat általában szabkmán vagy intramuszkbárisan nton atbsk be. (.IjSíbban, a szubllngvális alkalmazás van eiteoedöben allergiás betegségek eilenü terápiás vakcinák leadására. Hatásos vakcináknak megfelelő immunitást kell kiválranitik kvamiatív és kvalitatív értelemben, és tárolás során stabilaknak kell knmiílk. Különösen élettelen komponenseket tartalmazó vakcinák esetében, gyakran van. szükség arra, hogy s vakcinák imnmnogén hatjai <· > n\.v»s «'klímázásával fokozzék, Erre szükség leltei bizonyos élő vakcinák, példáid atíenuált vakcinák te teatosmt d ts Adjaván.soknak az antigénre adóit immunválaszt felerősítő kwspooeosekef nevezte.
Az 1920-as években, humán tetápiában alkalmazható állati eredetű anttszérumók kifejlesztését célzó vizsgálatokban azt iniá liák, hogy bizonyos vegyetek, nevezetett antigénekhez vagy antigéneket taAaknasó enitslziókhoz hozzáadott alumfetesbk nagymértékben fokozzák az ellenanyag-termelési, azaz adjnvánshstásak van. Az aliimlninm-hldroxidőt még tna is széles körben alkalmazzák például difiéría- és teíaousztoxoid vaké iákban, és iaazolah il is tirozim alkalmaznak egyes, allergia kezelésére szolgál ó vakcinákban. M ás, az előző eket szohibilitás tekintetében felülmúló adjavánsok is előnyös hatással bírnak, például erősebb immunválaszt váfimtak ki, vagy az írnnran választ például THi-típasó válasz irányába tolják el.
A öB-A 2 220 211 számú Nagy-Brltehai szabadalmi beiefemésböl (Illői) ismert a 1-dez-O-aciiált mönofeszíbrii lipld-A 0D-M.Pt.,)s Kéíniailag, az lehet 4, 5 vagy ő aeiíalt láncú 3-dez-O-,n}mit monolószfbril lipld-A elegye) és azt jelenleg a Corfea Corpmteotl állítja elő. A 3-dez-O-aeilált mönofoszibríl lipid-A előnyöAktaszármmk: fi?25S-5W5<’PÁ
.. >..
sen alkalmazható formáját í az adjutánst) ismertetik a Λ¥Ο 93/1.8 55® számú nemzetközi közzétételi iratban.
A WO 98/44 947 sztená nemzetközi közzélételi iratban allergiás betegségben szenvedő betegek desC!'k'zá'é terápiájában alkalmazható készítmény leírását találjuk, amely megfelelően módosított aifergóot, tir v '»v* 1 oez-O-aciláli monofoszforil lipid-Aadj»vá-»st:tmtafm-az;.
k mk’s cbsfesnti'sekct tettek sobb .ídiutonsok ktfqfés/fesére, kőtömbén a t'sep eltel kőn etnett \.b lasz erősítésére, de hangsúlyozandó, hegy ezen ró adíev.útíok közül csak néhány vált általánosan elfogadottá •humán a&alntazáóra. Az. MRáK adjuvána azonban, engedélyezték.Melanoma vakcmában történő tóbrófeazásra, és M.PL® adjuvánst tartalmazó,: allergia kezdésére mlgátó „kílfelegtó” vakeíák bozzáférhetőek Németországban, Olaszországban és Spanyolországban.
A WO.'itO O'A számú. Chíron által benyújtott nemzetközt közzétételi náthán bioadheziv anyagok, Stdjuvánsok <-«· teútgcnek kombmáciöját tmatómó, nyálkahártyán át bejuttatható készítmény leírását találjuk. A készítmény atkalnuAtsávál az&nbss csak JgO típusú immunválasz. kiváltását mulatták ki. Bloadheziv anyagoknak fizikai vagy1 kémiai éten a nyálkahártyáhez kötöd® anyagukat nevezünk. Úgy bisszök, egyes. satigénWtalmú készítmények ilyeu bíoadhéztója bixtostságosságí aggályokat vet fel. Szabi ingvális alkalmazást nem Írnak le; a ,o \es'irtK '^! ;'!. awa ^a' ovso' ,a) *, aga t,o
Nyilvánvnlő, hogy fennáll az igény mukozálís (nyálkahártyával: asszociált) és szisztémás immunválaszkiváltó'készítmények kifejlesztésére, amelyek védelmet nyújthatnak baktériumok, vírusok.ésmás parazita orga.'· pimusok ellen,, és alkalmazhatók allergia elleni. vakcinákként, Az ilyen készítményeket optimális esetben, a beteg jó együöiró'íködését (compltance”) biztosító úton, például szublíngváiis útón adjuk be . A zt találtuk továbbá, hogy a szuhlingváíis adagolás- á bejrúiatendó vegyidet gyors felszívódását, és .annak megfelelő hozzáférhetőségét biztosítja a biológiai rendszerben. A szublirígvális adagolás előnyösebb továbbá az időnkénti mfektálásuál abban a teklntetbeo, hogy így fenntartható a bejuttatandó- vegyidet megfeleld vérkoncent-ráctójá,- Előnyösen, a 'készítmény -könnyen hozzáférhető adjuvánst tartalmaz.
Az alábbiakban összefoglaljuk a találmány szerinti megoldás lényegét.
A találmány tárgyát, szabltógválls adagolási rendszer képezi, amely az adagolási móddal kapcsolatos, előnyökkel bír. Közelebbről, azt találtuk, hogy glikolipíd adjuváns, például MPL® adjaváhs és antigén alkalmazásával, szitólfegyáíi,s adagolással, mukozális immunválasz (.,.w.vcw«' rtomunm/wm.·*?”', MIR) váltható ki. felsőként ismertük fel, hogy glikoiípld adjavánsok szublmg-vális alkalmazásával szisztémás, Igö típusú válasz, és IgA által közvetített válasz is kiválható. .Meglepő módon azt találtuk, hogy a MIR a szublingvális bejuttatás helyétől távol és -lokálisan egyaránt .kiváltható. IgA mutatható ki például más nyúokszövetekbeu, például a béhraktósbau Rigaiakban és húgy-ivamerveítóen. Ez különös íelentöséggel bír például szexuális úton terjedő betegségek kezelésében, tőivel á szublrógválís alkálróarás kényelmes, és bármely iróngölási rend esetében a beteg jó kőzreurökő-dósét vonhatja maga után.
Úgy fenik, az adiuvártsok hatása tóként két faktorra vezethet® vissza: arra, hogy az antigén állandó kencetitrácíóban van jefen-azon a -helyen. ahol ílmforóták tó más imínttnolögiróiag kompetens sejtek érintkezhetnek vele („depof’ hatás); és arra, 'hogy a limfocitafunkciókat szabályozó citokinek termetódését indikálják. Ugyattez a cél eféthcto pi.ibb eszközök, például liposzómák és immunstimuláns komplexek (ISCÖM-ok) alkalmazásával, amelyek biztosítják, hogy a beléjük zárt antigének antigénpr«i®rstelö sejtekhez jussanak el. Citoktóek termelődé-3séi váltíratják ki bakteriális termékek, például «η «‘baktérium sejtfalak, eodotoxiuok, slb. Citoklntermelét: kiváV lássa különösen előnyös lehet tmmmiknmprumsttalt betegekben, akik szokásos vakcinákra gyakran nem reagálRak. Hemélhetó, hogy a cíttskínlérmetódfe .ily módon íőriénb kiváltásával ax immí.mválasz kívánt irányba terelhető, példáid olyan lseiegségeídsen, ahol csak Tlll vagy TH2-tipúaú választ kívánunk kiváltain (ftoílt és öiföaí,: „IhíBunology'*, 4:. kiadás).
A találmány tárgyát képezi továbbá tmiigénkészíúnéay, amely a TMI-TH2 egyensúlyt TH1 irányba képes eltolni, és amelyet a nyálkahártyái), előnyösen szájon át, és előnyösebben szubfegvális álon adagolnak. A készítmény ánmumerapíábau alkalmazható, előnyösen vakcinákásra.
Az alkalmas továbbá immunválasz úmttómtóyozibám, és e He (wsyagteme lés ki váll ásra.
Az alábbiakban Ö^zetóg.alj-A andál-nány szeriem mr-goklás lém egét rtyzbb mkiemben, a mlalm.án> tarajat az a lebsmcres kepezt, hegy gbkrmpuk'k s/’s/tetnas es nv.)lL·, hártyával asszociált htmtoráiis immun választ váltanak ki antigénekkel szembem amennyiben azokat tartalmazó készítményt szuhímgválui úton adagolnak embernek vagy állatnak. Azt. találtuk, hogy bármely szokásos, szablmgváiís áton adagolható vivöanyág alkalmazható, a gitkolipld-adjuváusok azon képessége, hogy aaíígénrtel együtt, szabimgvális ütőn adagolva IgG, IgG. és lgG!8 termelődését váltják ki a szérumban·, arra utót, hogy a. találmány raetmh megoldás. rgsaram alkalmazható pratóaktikos vakenrak eloaiblasám, valamim slk-tgía ellem des.vm’ivzalaira Az, hoz< a gbkul pd adím.'.msm szt-hmtraato, adagolási kosomén IgA-’enndod&t lepra A kiváltani, azt mutatja-továbbá, hogy a találmány szerinti: megoldás alkalmas tímkozffis· immunitás kiváltására. A tnukozális immunitás különösen alkalmas légúli kórokozók és szexuálisan -erjedő betegségek dlem védelemre.
Álttüáiwságlw, a találmány tárgyát készítmény képezi, amely: (A) .legalább egy stáigém, és. (B) glikollpid-adtuvánsi larlalm.),·, a találmány tárgyár képezi továbbá a készítmény alkalmazása.
Közelebbről, a kdalmmiy egy szempontja szériát, s találmány tárgyát képezi eljárás mukozális és/vagy '•vhzienus nmntmválasz kiváltására arra rászoruló emberben vagy állatban, amely eljárásban, legalább egy autó gént es pbkohpíd-aditivttósi tartalmazó készítményt adnak be.
Más szóval, á találmány tárgyát képezi legalább egy antigén és gliMpM-adptvám alkalmazása mukozális és/vsgy szisztémás mmmuválasz kiváltására alkalmas gyógyszer előállítására.
A. találmány egy további szempontja szerint, a találmány tárgyát képezi eljárás mtíkozán át terjedő betegség kezelésére, amelyben legalább egy1 antigént és glíköltpid-adjuvánst tartalmazó készítményt adnak be- embernek vagy állatnak, szubltngvális útón.
Más szóval tehát, a találmány tárgyát képezi legalább egy antigén és glikolipíd-adjuváns alkalmazása simblingválls úton adagolható, mákosán át terjedő betegség kezelésére alkalmas gyógyszer előállítására.
\ lUiítmru s.c-nm elpua^ok ató.dmasak h?A ,dtaí sö.seótet: mmnüiracoz k^ tóurara
A találmány tárgyát képezi továbbá eljárás Ig.A típusú immunválasz kiváltására emberben vagy áBatban, amely szerint legalább egy antigént és gíúο'φ-d adjuvanst tartalmazó készítményt adunk be szubtíngvális álon.
Más szóval, a találmány tárgyát, képezi legalább egy antigén és glikpliplti'adjuváns alkalmazása swhlísgsáus trón adagolható, IgA típusú immunválasz kiváltására; alkalmas gyógyszer előállítására.
A készítményt hatásos mennyiségben adagoljuk. „Hatásos .mennyiségen” a készítmény nem toxikus, de a kívánt: árunimotógiai válasz kiváltásához elegendő mennyiségét értjük. Szakember képes a készitnréas hmám; memuy iségének megá iiapnására.
A találmány szennli készítmény Ichu proftláktikus (azaz a fertőzés megelőzését célzó), vagy terápiás (a tettozest követően, a betegség kezdéséi célzót.
A készítményt előnyösen embernek. emlősnek, vagy más főemlősnek adjuk be, például nem humán főemlősnek, például emberszabású majomnak vagy egyéb majomnak,, haszonállatnak, például marhának, birkának sertésnek, kecskének vagy lónak; háziállatnak,· például kutyának vagy macskának; laborakb mmi állatnak, például rágcsálóknak, például egérnek, patkánynak vagy tengerimalacnak; madaraknak, például házi, vad- és vadászható madaraknak, például csirkének, pulykának és más tyúk felének, kacsának, libának és hasonlónak adják he.
A találmány .szerinti eljárás ígtí által közvetített immunválaszt is kiválthat.
A találmány egy további szempontja szerint. a taláhuárty tárgyát képezi készítmény, amely;
(A) égy vagy több antigént; és (B) glikolipid-adjuváust tartalmaz.
A találmány egy különösen előnyös megvalósítási módja szerint, a glikoHpid ΤΗ l -tipusó választ kiváltó adjuváns.
A találmány szerinti készítmény előnyösen szubliugváils úton alkalmazható töltőanyagot, vivöanyagoi >ίι·. xmn ς «a 4,»i i iid írj λγ.λ <A.v'> kry< ek m. rak ’ÍRtosé y i bt ?dts mA (szublingválls úton, a nyálkahártyán).
Az. antigén előnyösen baktériumból., vírusból, prionbéi, tumorból, antoantigénből, növényből, állatból vagy más patogén vagy nem patogén om&ulztmtsból származik, és lehet szintetikus vagy rckomhináus ötön clőállftotí antigén.
Az antigén iartafenazhulja az migéumofekulák kiválasztott részeit, vagy lehel szmtetikus ütőn vagy rekmnbínárts technológiával előállítón molekula.
Az antigén előnyösen valamely alíergén. Allergéfteknek antigének meghatározott tipusát nevezzük, m luknál dhím i k -1 tb. 3 k >|. ·. t< i .úti. i upn b o ikt in kvx t vagy lehet szintetikus úton vagy rekombínáns technológiával előállított molekula.
A továbbiakban antigénen vagy amigéneken allergem vagy allergénekei Is értünk.
Az antigén Hornosén pobpeptid. szénhidrát vagy lípid. Az antigén lehet továbbá antigénhstasú polípepiidei kódoló po'mukleotidot tartalmazó vektor, amelyben a polinnkleotld a polirmkfeúfid expressz mfe irányító szabályozó szekvenciákkal fonkcionálísao kapcsolt.
A TŰI-típusa választ kiváltó adjuváas például, de anélkül,. hogy íg^iyüaket a felsoroltakra Imrlátoznáak. MPL® adjuváns. 3D-MFL vagy azok származéka vagy sója; vagy egyéb THI-választ kiváltó adjwváus; vagy ilyen adjuvánsok kombinációja.
A találmány egy előnyös megvalósítási módja szerint, a készítmény vakcina.
A találmány egy előnyős megvalósítási módja szerint, a készítményt vizes óidat, gél, tapasz, szöglete» tabletta/vukorka, kapszula vagy tabletta formájában,. előnyös®» vizes oldat vagy gél formájában állítjuk elő.
A találmány tárgyát képezi továbbá a készítmény alkalmazása bakteriális, vírus- vagy prionfertőzés, vsgy más betegség, például tumor, autoimmun betegség vagy allergiás betegség kezelésére humán vagy állati organizmusban,
A találmány tárgyát képezi továbbá a készítmény alkalmazása az antigem tchsnterő egy vagy·’ több eb lenanyag előállítására. Az így előállított ellenanyagok alkalmazhatók bakteriális, vúus- vagy prionfertözés, vagy más betegség, például tumor,, autoimmw betegség vagy tóinrgtós betegség kezelésére humán vagy állati orgasíztnasban. A salálmány szerinti megoldás különöse® jefenlős légúti putogének és szexuális úton '< »<.t ó >eiegA már -említetteken felül a találmány tárgyát képezi eljárás tortíszérum, vagy abból immimglobuliökészterény előállítóra, amelyben humán vagy állati organizmust imnmmzálúnk a találmány szerinti készítméhnyek
A találmány tárgyát képezi továbbá eljárás a találmány szerinti készítmény előállítására, amely szerint antigént tartalmazó oldatot és glikolipid-adjuvánsl. elegyítünk gyógyászaikig elfogadható töltőanyaggal, hordozóanyaggal vagy vivőanyaggal előnyösen vizes oldat vagy gél formájában
Az alábbiakban részletesen ismertetjük a találmány szerinti megoldást
A találmány szerímt megoldás előnyeit a továbbiakban konkrét megvalósítási -példákon keresztül kívánjak szemléltetni, anélkül azonban, igényünket az ismertetettekre korlátoznánk.
ímnilfflválasz hnmuüváiaszon gerincesek immunrendszere által adott szelektív választ érittok, amelyben specifikus elktossyagok és/vagy cítoíoxlktis sejtek keletkeznek a behatoló organizmus, parazita, ttwszplantált szövet, vagy számos más, a szervezel szántóra idegenként felismert komponens, azaz antigén ellen. A vérben keringő ellenanyagok tormelödését Immorális immiuwáfesznák, a citotosikus sejtek termefodését sejt állal közvetitolt, vagy celluláris immunválasznak nevezzük,
Az smmamcndsztt működésében szerepet játszó tojtok, fánkciójufc leghatékonyabb kifejtéséhez szővetélibe és s/et sebbe szénr tojnék. A teljes stotktotái egyhttésen límfotd rendszernek nevezzük. A limfoid rendszer limtoerízkai. járulékos sejteket (mukrofágoktit és antigttóprezeoláló sejteket), és egyes esetekben epitelsejteket foglal magába®. Az tokkal körülvett szervekbe rendeződve, vagy diffúz limfoid szövethalmozódásként fordul elő. A fő límfofe szervek® és .szöveteket elsődleges (centrális) vagy másodlagos (perifériás) szervekként vagy szövőkként osztályozzuk. A találmány szerinti megoldás a másodlagos limfoid szervekre összpontosít Másodlagos limfoid szervekhez tartoznak a nyálkahárty'ával asszociált szövetek, amelyek olyan kbfmvA'tet <uvmt»'Mck ahol a limibcilák kölcsönhatásba léphetnek egymással, járulékos sejtekkel és antigénekl<észle-es<ebhes·, tninián az elsődleges nyirokszerveklíen íimíbciták keletkeztek (Ihnfopoezls), azok a perifériás másodlagos szövetekbe vándorolnak. A másodlagos limfoid szövetekhez jól szervezeti, tokkal körülhatárolt szervek, a lép és nyirokcsomók, valamint a teststortó található, tok nélküli sejthalmazok tartoznak. A nem szerveződőit limfeíd szövet nagy része nyálkaháriya-felsztoekkel asszociálta® fordul elő, és azt nyálkahártyával asszociált limfoid szövetnek („nínrzrstontoOítóüea fengfeofo riswe»' MA LT) nevezik.
A nyálkahártyák által alkotóit rendszer védi a szervez®® á szervezetbe közvetlenül a nyálkahártya epíielfelszíueín keresztül befelé antigénekkel szemben, i imfotd szövgeket találunk tehat a bzitmkiusí, a léguiak® és a .hügy-ivarszerveket bélelő felszínekkel asszociált®!. A találmány szerinti megoldás elsősorban a szüblíngválís régiói bevonó felszínekkel asszociált limfoid szövetekre vottolkozik. g-zékén- á helyeken, a iő eifektormechanizmiJSt a szekreioros -IgA (sígA) képviseli, amely közvetlenül a nyálkahártya epitelielszineken vagy a szervekben s.zekr®Aodik.
-6A szekretoros IgAa szekréfemoklteö található im-mmtgfobufiMőhb mist 95%-á; teszi ki, és elsődlegese» dímer formáim van jelen, amelyben két mönomer egység kapcsolódik kovalens kötessél egy J-láseon keresztet A dimer IgA polimer ÍKHrmnglobul«weceptorhoz (pIGR) kötődik a nyálkahártya epiíelsejij elitek hazális felszínén. Ez az IgA-pRrR-komplex endocitózíssal a sejtbe Üst. majd az cpitdsett apikálA flumtnál'ís, üreg felőli) felszínére transzport alödik. A szállítás sorát! a plGR egy kicsiny része iesíasá<ídlk <-.» a vtsszutnaradő Komponenst most már szekretoros komponensnek nevezzük. Az IgA tehát dimer hnnútuu szerkretálótek, .-ov-betoros komponenshez kapcsoltan, .A .szetetotös IgA nem aktiválja. a komplenwtreadszert, <fe bevonja a baktériumokat és vírusokat, pél·· dátd polio-, fexackie-, rota* és hetpeszvíotóokak. megakadályozta szék kötődését a nyálkahártyát bélelő epweüwjmmat Ezen felük a felszíni epiteliattthas, egyes vírusokat a plt?K áltál bejuttatott IgA «eaöalizálni képes.
A szekretert» IgA keletkezése, és ezáhal a mukozál» immunválasz. (a továbbiakban MIR) kialakukóa a technika állása szerint ismert eljárásokkal, például 1:1,1 SA-eljárással mutatható ki. A szemléltetés kedvéért, az l. előkészítő példában csak az 1. és 2. példában ismertetett kísérletekben alkalmazott, standardizált ovalbuntitt ELISA-teszteí ismertetjük.
Egy antigén elleni MlR áz adott antigén elleni, mukozális vagy orális toleranciának nevezeti .szisztémás válasz ktelakulásáitoz vezethet. A mukozális immunizálás tehál mind a lokális, mind a szisztémás ímtmmváfez kiváltásának hatásos módja.
Antigén
Wrténetiieg. ,gmtigéír kifejezésen értettek bármely, B-sekeket specifikus ellenanyagok temsdésére ösztönző molekulát. lapjainkban azonban, a kifejezés vonatkozhat bármely twletóára,. amelyet az immunrendszer adaptív elemei - azaz B-sejíek, T-sejtek vagy mindkettő - specifikus módon képesek felismerni. A Kvhmka .teása szerint tehát antigénnek, olyan molektrlát nevezünk, amely preformált ellenanyaggal es/vagy különböző specifikus receptorokkal lép kölcsönhatásba T- és B-sejtek fefektet; A meghatározás vonatkozik a hagyományos értelemben veit „alkrrgénekfe· is, azaz IgE által közvetített hiporszenzitivitási reakciót kiváltó ágensekre. például virágporra.
Allergián (l-es típusú hipefszenztevitásori) környezeti antigénekre (allergénekre) adott váias^eáfcciót értünk, ahol az allergiás egyénekben viszonylagnagy -mennyiségben termelődnek IgE-ellenatiwgok a nem allergiás egyénekhez kepesí ,u»kKek efesotean hjzose-tekhez es Kr/ot.'· scpckKv körödnek v».«wt· hlperszenzitív-tási reakciót idéznek riö a hízósejtekben keletkező termékek (hisztannrt. srb ; ,ikk-n, ha azok a hízósejt vagy bazonl sejr Séfemén íasálha-o igl: es az asztmái, szénanáthát, szérumbetegséget. szisztémás, anafilajcsáí* sokkos vagy kotróik tdenmúhfet kiváltó antigén közit reakció révén felszabadulnak. A hiperszetíziuvitás! reakció négy típusát különböztettek meg (l-es, 11-es. ll-as és IV-esk .A ll-es és ll-as típusú hsperszenzh'tvsíci rcaketó ellenanyag áltál kozvettteft, a negyedik tóként I-sejtek és mukiotágok által közvetített. A találmány izerimi megoldás tehetővé teszi, hogy úgy tmmmnzáíjunk egy antigénnel, hogy <·. reakciót allergiás, Igf: -típusú .immunválasz felől nem allergiás Imniunvlias-z felé telítik el.
A leírás szerinti értelemben tehát ...antigénen’’ értitek bármely allergiát okozó ágensból, uéldáte pollenból (példáéi parlagftihól vagy nyírből származó pollenből), éfelmlszerból, .rovarméregből, pen »zbol ill&ti szőrfel t porntkáböl (.&jfeúferc vagy ö, származó „allergént'’..
« VA találmány szerinti megnldáabím alkalmazott amigén előnyösért egy .irómwogén, azaz immunsejteket az ísdgen elfeni ;,rn-'n válaszra afelvdó mttigfe.
A találnám' er\ c t»iu< ír ^valósítási módja szerint, atalálmány tárgyát vakcinaként'.dhteM készítmény, valamint a vaKcmahao alkalmazható antigén kágezi.
«> uddimmj, x<enu dMiásKm <dkaknai-ott a-mgeti humely sikilmas amm-'n lehet ,mu-h »emfe:krzex re áll vagy a jövőben resafelkerexre fog állal.
A vakcináim alkalmazott antigén típusát számos faktor befolyásolja. Általánosságban, a mikroba minél több antigénje marad meg a vakcinában, annál jobb, és az élé organizmusok általában hatékonyabbak, mim az dőltek, Ez alól & szabály alól kivételek azok a betegségek, amelyekben min felelés valamely patogén hatásért. Ezekben az esetekben, a vakcinát kizárólag a tozfera vagy tóidra alapozhatjuk.
A. találmány szerinti eljárásban alkulmazöti: antigén származhat bármely élő organizmusból; httakt vagy nem élé organizmusból; szubcdlulam fragmentumokból; msoidukból, rckmnbinam DNS alapú antigénekből, vagy anli-ldioti'pus, vagy szintetikus amigenekből. Az antigén származhat természetes vagy attemált organizmusokból, amelyek lehetnek vírusok vagy baktériumok, Az antigén típusa lehet tokpoliszaehaud. iefezínt vagy belső antigén. Ametinvbee re·: antigén rekombmáns· alapú. a.< aaíigem elóáilithairek klonozoit <re expresszi génre'·, vagy csupasz DNS-ról.
Az. amigént wSdmíthaíjak'péídtó keresAlíőtést létesíts molekulával, például díaldehiddel, közsiebbről: ghuáraidehíddel.
Mikroorgauiztnasok, amelyek ellen vakcinák állnak rendelkezésre, vagy amelyek «Ifen vakcinákat: próbálnak előállítani, példád, de aífelkfll, hogy igényinket & felsoroltam koriáítonánk, a kővetkezők: feimönfefe, Wgeí/n, Kfe?d'fe7&, Eurerofezerer, Seoohúr, Zb'ís'eas, Ifersfefe. k'ferré, ^eronnvw, Ctísrémre/hí, /öet.'íí'omonvo’, Aí/ŰMUöéoere,1·, Áferaveh'a, BánmhocímíM,. dön'Aííd.fe, A<'»inobm?í7te, ..Verererltí, Zb-jmeí/a, δοω/Λυ, és .£sehe»réúfe eoh.
Előnyös vakcinák például, de anélkül hogy igényünket: a felsoroltakra, korlátoznánk, a felsoroltak: vacemia fhíndő ellen); vofe hacílius (M /aterori): (TBC ellen); polío; kanyaró; ammpsz; rózsahimlő; sárgaláz; bárártyhímlö; BCC; veszettség, influenza; hepatitisz. A, tífusz, szumárkőhögés; tíioid fáz; kolera; pestis; prjsvmoeoíZíus, ?se?fe^umrens, Ahresjophí'fes úí/feeos-w;?, hepatitisz 8; hepaiisisa C; hí uiuv »'χ lifléria. Texiu alapú vakcinák példád a E'hfewidbtm teumf, GsqwéöeMriam dpfewíöé', Eferm ctó®» és. /w/hAgmr vakcinák, ioxdbs jden’O- betegxegek, aindyek eben vakéinak aíkahnarere <lemm> Enne, a kovMezok -fis herpeszvúusok, adenovfeísok, rhiáovímsök, Sfepdkloosmírroöá, A-csópnrfe $>ψ/οοο<χ«,νΑ, ;V?y<.í>>fem<'eriuuí fep.ree, Tn^wwws pöííidbuí, CMvmydfe, CnuduÁv, Asenwej-tstfe, malária, trtpanoszomiózis, Chagas-kór, sehisostoxmázis és onehocefcozfe okozd körképek.
>ze\uahx utón dviheíb b< legxegek, .unelv v->. ellen előnyösen vakcinákat alkalmazhamánk - a fent említeti Hl\ ex hetpcvdrus által okozott beteg.>egcxen felől a AWáserio gmorrÁoéoe, Tre^ónmó/WlfrAm, /NcAwenux i ogmuhs, Efee»repM«s dsem’, í'Mmpdm. C«(w»míoí>r?eíerfem grawtomffe és hepatitíszvtas: Síid ekvZe’.t belvg-R-gek
- 8 Tümorrnittgéosk jefefoéfel is sgazotlák, és ebből következően, tumorok. s-lfeoi vakcmázás lehetősége is felmerült. Ugyancsak elviekben, a fogamzás és beágyazódás is meggátolható terhességgel összefüggő és más reproduktív hormonok széles.stólája elleni immunitás kiváltásával.
Tipikusan, az antigén polipeptid. de más aatigénstruktúrák, például nukleinsavak, szénhidrátok, ílpidek, teljes vágy attemmlf organizmusok, pé-dául vírusok, baktériumok var» promzoonok ts allmlmazhíífok \ >ei\ u )i ef\ k Λu pc htx podeke? \>hb , © r ro.,.. bm '< ’er 'T> < > cku .u tt < rumk, w r \ bet axaminosavak kovalens módot·, például pcpodkmrs-ekmt keresztül kapesoiodtiAk .álíahnossugumu a pubpepttd kifejezést s „protein” vagy· „pepiid” kifejezésekkel felesefelhetö módon hasznáijnk, amennyiben a molekulák méretére vagy fenkciőjára vonatkozólagsemmifefe kikötést mm.tettünk. Rckornhtnáns poíipeptideker a technika állása szerint ismert módon álltttóiuak sfo, például éiarnbrook és mtsai. kezTem vében feíríak szerint ISatnbrook és mfesl: „Melectúar Cfomng, A Laboraiuj-y Mmma1” 2. kiadás, Coki Spring ilarbor Láb. Press 1l9891]
Általánosságban, adlnvánsnak olyan vegylitetet nevezünk, amely nem specifikus módon fokozza az íttrnmnválám valamely antigénnel szemben, azaz mmumstumdáns hatású- Általánosságban, égy gjlkoitpid sejt· membrán lipid molekula, amelynek hidrofób végéhez szénhidrát oidailáuc kapcsolódik. A találmány szerinti gíikuílpid-adjuvánsok előnyösen módosított lípopoliszaeharldók. A hpopoliszacharidok úgy varrnak módosítva, hogy szók toxlcitása csökkenjék a megfelelő, vad-ttpusá llpupoiiszacharídokhoz képest, vagy ahhoz a lípöpofatmharidhös .képest amelyből származtatták A találmány szerinti -megoldásban alkalmazott ghkvhptdsdjövilns előnyösen detoxiIlkáit entetvbakteriális lípopuliszáehadd, vagy annak lipid--A--kompömmse. A „detoxíükáit” kifejezés egyaránt vonatkozik a miit teljesen aloxikas és alacsony foxlcílúsú mutánsaira. Előnyösen, a detoxlt'ikált adjuvtós a megfelelő vad-típusú toxin toxiestásásak kevesebb mint O,Öi%-át, előnyösebben Ö,QŐÍ%-át tartja meg. Atoxicitást CHCt-sejteken állapíthatjuk meg, a morfológiai változások értékelésével.
Előnyösen, a. giikeiípul--adjuváns THl-iípusú választ indukáló adjuyáus. A leírás szerinti értelemben, „Tl-l I-típusú választ indukáló adjuvánsmt” olyan adjuvánsl értünk, amely fokozza a T Η l választ valamely anti gén ellen. Ilyen adjuvánsokra az is jellemző lehet azonban, hegy egyszerűen fokozzák a keletkező ellenanyagok vagy aníigénspeciflkus sejtek szintjét, vagy moduláló hatású -cítokmek termelődésének kiváltásával akár -energiát (valaszképtelcnséget) is okozhatnak bizonyos sejtpopulációkban.
Közelebbről, valamely antigén elleni immunválasz általában T-sejt által közvetített (ami sejtek őrlésével járhat), vagy Immorális (amelyben az antigén epúópjaln&k felismerése ellemmyag-termelödést vált ki). Az >'! na · / t > i\ 7 \ i .λ·':’ > ’ -u U\ . iíe\! íkttx ni. m rt «ott \ 's d ? ív o í u m házuk közős melyik van fúteúiyban: például, sejt által közvetített űrnntmitást (Tlld) magas 11.-2 és IFNy színt, de alacsony szintű IL-í-terjuelödés, sasig ahmmuáíis immunitást (TI 12) alacsony 11,.-2 és IFHy színt, de magas IL-4, IL-ld, IL.5 színi jellemzi. Az ilyen válaszok szabályozása rendszerint a másodlagos ryitokszervek vagy sejtek szintjén valósul meg, tehát specifikus T-sejtek és amigénprezentáló sejtek cftokínmíntázatának fánnakológiai ólon történő befolyásolásával szabályozható a keletkező nnmunváfes-z típusa és mértéke.
A TI-Il-THú-egyensályt segítő Γ-sejtek („úsíprt- T*ee/Zr) két különböző típusának egymásbaalatólása vagy az. egyik sejttípus, túlsúlya szabja meg. A két sejttípus széleskörű, és gyakran -ellentétes hafest gyakorol az itmwsmndszerre. Ha az immonvalasz Tri l-sejtek fölényének kedvez, ezek a sejtek céll al árts választ Indítanak be, amelyet eOenanyag-iertpelés kísér; míg a THlUsejfek ersösorhim ellenanyag-termeléssel jellemzett válasz: -be.. 9 .· tmiításifert felelősek. Az egyes allergiás reakcióikért felelő elfemuyag-totipus,. az IgE. teme^ődósét, és azal kapcsolatos gyulladásos válaszokat TH2-sejtékbŐl szárazócitokfeek indítják. meg.
Azt. hogy valamely adjaváns naljee hatásos TH'hinébtkáló adjnvámíkéni, úgy vízsgálhatj-uk, hogy nmghatárítzruk egy ansigén eilen,. az antigént es a különböző -adjaváasokat tartalmazó vakcinák beadását kővetően termelődő elfensuyagtfe profilját.
A találmány egy előnyős megval«isitási -ásódjá szerint, az adjaváns módosítóit iipopouszachand ÍLPS). A 4 912:094 számú: számú anierikai egyesölt államokbeli szabadalmi leírásban ismertetettek szerint, az enrérobahtei felís lipopolíszadwíd (I.PS) hatásos írmmmstinml.hrt A? LPS beadása azonban .káros, és esetenken: végzetes l.mükezmém;ekkel is járhat. Ma már ismert, hogy az 1ES-sci asszociált endotoxín aktivitás annak UpM \ komponensével kapcsolatos. Ennek megfelelőén, a találmány szerinti megoldásban előnyösebben a lípidA detoxifMt <artalmatlanítottj származékát alkalmazzuk. A Corixa Corporation állította elő a ílpld-A eredetileg tisztított, detovnkatt endotoMnként rferoxíjdeE entfeíísnh; RDE) ismert, származékai, amely azonban monofoszfotd upjd-Λ t MPl A' adjuváns) néven vált Ismertté. Az MPL'W adjuvámt úgy állnhsyuk elő, hegy Oram-negativ bakiéimnmk (például Salmonella) hsptózmeütesmutánsaiból nyert LPS-t vagy lipíd-A-í, körülbelül 30 percig, szervetlen sav ko.ene·' erősségé oldatába (például fel normál HCI oldatba) visszafolyataok. Ex a kezelés a redukáló vágd glukormmn l. pozíciójában található toszi Alcsoport elvesztéséhez, vezet. Ezen felül, a kezeléssel eltávolítható a mekAuL magjában („eme’*) található szénhidrát a nem redukáló glükózáéin pozíeíójáről. Az MPL<>.adjuváns, a 3-dez-O-adlált monoföszlbíil sipid-A (31'1-MH..) és azok előállítására vonatkozó leírást találunk a 4 436 727 és -1 912 094 számú szántó amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásokban, valamim a El 4-912 094 számú újravizsgálsti igazolásban.
Előnyösebben azonban, módosított I.PS--Í vagy ltpld-A-1 alkalmazunk, umolyben a detozinzált lipid-Aban megmarad a nem redukáló glükőzatnin 6'-pozíciójához kapcsolódó „core” egység. A 4 912 094 szánul számé amerikai egyesült államokbeíl szabadalmi leírásban I.f'S vagy lipid-A Iíven származékainak ismertetését is megtaláljuk. Közelebbről, a 4912 094 számú számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban módosítóit iipoiXjUszaeharid leírását találjuk, amelyet a lipopolisaacharid, a redukáló végű glükózamiuhoz a lipopöltszachand 3'-vegéhez esztcf kötéssel kapcsolódó O-btdroxtmixí$ziinsav egysegének szelektív eltávolításával kapunk, amely eliátáshat· a lipopolisz&cbaridot alkallkus hidrolízisnek yetjilk alá. A találmány szerinti meg'U.ihs.ú -'sse napiban ’íte-t dof-o-aaLlt mn κΊικωι· hetd-A-t <Mpt tó .n’uu.snst), J'-o-zhw ómé A tít»í‘l * vagy LPS-t alkalmazhatunk. A találmány egy előnyős megvalósítási módja szerint, MPL® adjuvánst, DPL-t ta.'s I í'h-t a'kJmazsmk, ahol a rednkálő végi glhkőzamiu3''-pozíciója dez-Q-acilált. Az ilyen vegyítelek 3DMp- '}) fúrt és 3Ö-LES néven ismertek.
\ a PS? 23 ,,zama a.nutk.u egyest: t áihitnok'X'b. m.íddrn lemislvm .i ’> öv.'kozó kcpkh' MPLK adfeváas származékot Ismertetik:
ahol R' és h jelentése H; R' nem elágazó vagy elágazó lánoü,. C és .H.atomokból, és adott esőden. Ο, N és. S -atomokból iéiégtílö szénhidrogén, amely, amennyiben több miot egy atomból áll, sebet azonos vagy külön·· böző, és abd a C atomok teljes száma nem haladja meg a 6O-at, és a kör MPL-magot jelöl.
Az MPLS> adjuváns származék lehet továbbá a következő képleró:
ahol a származék kővetkező képlettel jelölt szegmense:
2-bil C atomot tartalmaz; R' nem elágazó vagy elágazó láncú, C és II atomokból. és adott esetben O, N és S .atomokból feMphlő szénhidrogén, amely, smemrylben több mint egy atomból áll, lehet azonos vagy különböző; sí legkevesebb 1, és bármely egeszs^ ám, azzal a kikötéssel, hogy C atomok száma az összes x szegmensben nem haladja meg a óő-at; és ahol R' kémia; Afulrtárája az egyes m.e szegmensekben lehet azonos vagy külörrbőzö; és a kör MH.mmgoi jelöl.
Egy, n Corica Corporauon által gyártott. kereskedelemben hozzáférhető atíyaváns 2% Snmdent, Ö,:2% Tweeá-M-aí, és MPL·® adjuvánst tartalmaz.
Egy további kereskedelemben hozzáférhető adjuváns a Detox® (Corlxa Corporation, amely MP.L® admvártst és .mycobaktermm eredetű sejliaívázet tartalma»..
Az I..PS vagy hpid-A valamennyi ilyen rendelkezésre álló vágy r rendelkezésre álló származéka, vagy sója alkalmazhnm a találmány szerinti megoldásban. Előnyösen, n; „p <»t vegyltietek győgyászatilag «1lögadhsló származékait vagy sóit alkalmazzak.·
A ΤΗ l -vábszl Imlukáló adjnvánst köwetfenál a felhasználást megelőzően is elegyíthetjük a készítmény egyéb komponenseivel. Más eljárás szerint, azt az egyéb komponensekkel együtt fonnoiázzok a gyáriás során. További lehetőség szerin; azt az egy eh komponensekről eltérő időben álljak ba. A készítményt különböző éten adhatjuk be. Előnyösen, u gnkohpni -.rójm ,m\t l ,« ? 50 mg ötennyiségben, előnyösebben 25-59 mg adjak be·.
Vakmnák
A találmány egy további szempontja szeriül., s találmány tárgyát eljárás képezi immunválasz,· előnyöseit mukozális immunválasz kíváhásárrr emlősben, előnyösen emberben, amely szerint a találmány szerinti készítményt szublmgvális úton adjuk be az egyénnek, miáltal abban ellenanyagdrmelést, előnyösen IgA-iermelést és/vagy T-sejtes immunválaszt indukálunk. Előnyösen, megfelelő immnrtválnszi váltónk ki ahhoz, hogy sz egyént fertózésektöl, közelebbről hafoeriális fortózésektői vagy vfatsfertözésekfol megvédjek. Elöayösetv megfelelő immuuváiaszt -váltunk M ahhoz» hogy az egyént betegségek tői megvédják, íüggctlenöl attól, hogy a betegség már fellépett sz egyénben: vagy nem. Az immunválasz tehát mind terápiásán, rajad protllak dúsan (raegeíözö célzattal) előnyösen kiaknázható.
A találmány szerinti kcszttmem. ékből vakcinákat is elöálllthatnnk. Aktív összetevőként antigént tartalmazó vakcinák előállítása szakember számára issteri, Tipikusan, ilyen vakcinákat folyékony formában, oldatokként vagy szusz|>enzlókkéiU állítunk elő, azokat elöálüihaifok továbbá a ielhaarrfolást megelőzően oldható vagy szuszpenzióvá alakítható szilárd formában. A készítményt kiszerelhetjük továbbá gél, emulzió, vagy iiposzóraákba kapszulázod készthuény formájában. Vivőauy aguk kérd alkalmazhatunk pékiám vizel, axtutióninmibszlatót, derdfozt glicerint, cümoít, vagy hasonlókat; valamint a misomltak valamilyen kombinációját.
A készíírnény tartalmazhat szokásosa» alkalmazott vívőanyegökat, például a kővetkezőkéi:: gyógyászatíiag elfogadható tisztaságú masnitól, laktózt, keményítőt, magnéziuin-sAearátot, náőiam-sxacbarint, cellulózt, magnézitmi-karhonámt. ^agy hasonlókat. A készítményt kis.zereiheifok oldat, szuszpenzió, tabletta, pirula, kapszula, a hatóanyag késlelteteti felszabadulását biztosító („retaítkö készítmény vagy por formájában, és IG-il.5%, előnyösen 2S-7(í% tk'-o hatóanyagot tartalmazhat. Amennyiben a vakcinskészítményt Ifoílhxalt formában áliítöttuk elő, a bonbzah keszítmsnyt közvetlenül az alkalmazás előtt, például szttszpmu'tóU alakíthatjuk f^eítmdtaiálh8t§ukwX· A készhményi előnyöse» pufferbeu mkonstltuálfok.
Kívánt e^e-ben. a vakarna kis mennyiségben járulékos összetevőket Í-. tannlmazhat, például nedvesítő anyagokat, emiílgeáferokat, pH-pafTewló anyagokat és/vagy további adjtsvánsokai, ímmlyek fokozzak a vakcina hatásosságát.
Az antigén és adjavá»* aránya széles tartományon beüli váhoztsíható, azzal a kikötéssel, hegy mindkettő hatásos mennyiségben legyen jele». Tipikusan, a vakcinát ágy formwlázznk, hogy 0,2. -20® pg/rni, előnyösen 5-50 pgúni, és legeiönyösebmm Í5 pgúnl végkonceferációbaa tartalmazzon aatigőm. A készlmtény optimális összetételéi előnyös dózistartomány meghatározására, alkalmas Ismert eljárásokkal határozhatjuk meg, például az kar kouvs xü jm( élt ute* -.un. Renuu m Hu ond í! <, et Phartunt Μ<κ» ΐ'ι,Ή hingCompany, 19. kiadás (1995).
A íbuúuíázást kővetően, a vakcinát tartályba mérhetjük, amely lehet steril, és amelyet lezárhatunk, és alacsony hőmérsékleten, például 4u(?-on tárolhatunk, vaej. fogyasztva száríthatunk. A Imfoizáfes a készítmény hosszú ideig, stabil iramában történő tárolását teszi lehetove.
A találmány szerimi megoldásban alkalmazott antigéneket a vakcinában alkalmazhatjuk eredeti formában, vagy valamilyen só formájában. Gyógyászatilag elfogadható sók fehérnek (a pepiid szabad amhw' xyvrii.ocl v^'Att se* i amel^s ktpzödmmok '.ntvetkr -makk, pe'dau sósavval· vagy foszforsavval,. vagy szerves savakkal, például ecelsavvaí, oxálsawaí, borkösavval vagy raaieiasavval. A szabad karb^xil-csoporttal képzett sók ugyancsak származhatnak szervetlen bázisokból, például nátrium-, kálium-, amt mrmtn, kalcium vagy vas-hidroxidokből. és szerves bázisokból, mint például az Izopropilamim trimelilamin, 2-etmunmo-etairoí, híszlidin vagy próbám.
A tablettákéra k roszuhként vagy- más szokásos fotmukskáni, vivöanyaggal együtt kiszerelt készítmények ilyen íramnfesást igényelnek.
Ellenanyagok döáldása a találtnány szerinti készítmény alkalmazásával
A találmány szcrimí készítmények további adjuvás-sok alkalmazása nélkül. közvetlenül alkalmazhatók umnunogénként. az ismertetett utakon beadva, antisz&um, specifikus immunglobulin vagy monoklonáiis ellenanyagok előállítására, a találmány tárgy át képezi tehát eljárás amigéuspecitWus' ámmmglobulm-termelés kiváltására, amely szerint:
a) állatot immmüzámnk a találmány szerinti készítménnyel; b) a® állat szérumából a készítményben található Wigén egy régiójára specifikus üntnunglobdml izolálunk;
c)- monoklonálls ellenanyagokat termel® sejtklónokat .szelektálunk.
Ellenanyagok ddállitására. alkafeazhaté technológiákat ismertetnék például Kohfer és Milstem [Matere 7½ 495(19751],
Ellenanyag-termelést» bármely erre a célra szokásosan állatot,. közelebbről, emlősöket alkalmasaink; Ellenanyag-termelésre elsősorban egereket, patkányokat, tengenmalacókat- és nyálakat alkalmazunk. Az állatók-it -ír m ,-íUieri!.-:vii ke\<-iWdv?si>d kezeljük
Közelebbről, a találmány szerinti, az antigént tartalmazó készítnfecyeket alkalmazhatjuk políklonálís vagy -monoklonáhs ellenanyagok termeltetésére egyaránt: felhasználhatjuk. 'P-oliklonális ellenanyagok előállításához, a kiválasztott állatot (példád egeret, nyalat, kecskét, lovat, tab.) immunizáljuk Az iínmanizáit. állatokból Ismert eljárásokkal szemmel'nyerünk. Ha a szérum más ellenanyagok elfed pdiklortáiis ellenanyagokat tartalmaz, a kívánt poíiklonálls. ellenanyagokat immunaíÜnitásoi. krotnumgtáftával tisztíthatják. Polikiodilis ahtiszérijm előállítására és feldolgozására alkalmas eljárások a leéhdka állása szerint ismertek.
Szakember a találmány szerbül eljárásban atalmázóií antigén elleni -moímkíoíiáMs eltenánysgokst is ο \ s \ dien előállíthat Az monokíonáíis ellenanyagok előállítására .szolgáló hibridótna technológia általános elx, ' ismert. „Halhatatlad’ (fblyámatös szaporodási xe t dudákat hözhattmk. létre sejtfúzióvál és .más eljárása -xx s példád B-limfecíták esik egén DMS-sel törterm \iwelkm íranszionnáéíájával, vagy Epstém-Sárr várassál történő fertőzésével. Az antigémk elten termelődött monokloaális ellenanyagok halmaza különböző eljárásokkal szikijeié, példáéi izotípusra vagy epitópaffmításra..
További djáras szerint, fegprezentáeids könyvtárakat szilrartk:, altöl példád a rágok scFvímgraetstaniokat expreszsrálnak a fágbarok felszínéé nagyszámé kompíe-nentaitást meghatározó régióval (CDR-rel) együtt. Ez a technológia a technika állásé szét >nt fcn ismert.
Antigének elten iránydó ellenanyagok - mind mö-wklmtelis. mind poltklonális ellenanyagok - slkaíitto^xt' ,x n< ra; s zm fi.nthciih a k< ít m Mx k ρν>/Κ s n »u x Mupt«n 1 xöso hat monoklonális ellenanyagok' aik.d.m..t><ra anti-ldknípus ellenanyagok előállítására. Anti-idionpus dtenanyagóknak olyan immunglobulinokat nevezőnk, amelyek a fertőző ágens, amely ellen védettséget kívánunk, létrehozni, antigénjének „belső tükörképér hordozzák.
Arttí-tdiötfeus eitewtyaguk előállítására alkalmas technológiák a technika állása szerint ismertek. Ilyen antl-ldiolípus ellenanyagok alkalmazhatok: kezelésre, vdatwtí üz--antigének írómutragéó régióinak meghatározá·· sára.
A leírás szerinti értelemben- „éllenattyagerr’, hacsak kifejezetten másképp nem kötjük ki, drijlík a teljes ellenanyagok fragmentumait is, amelyek megtartották kötő&kti vitásokat a célantigénnel szemben. Ilyen fragrerantumok teltetnek példád Fv-, F(áb’)- és. Ifrab'ií-fragmenfemok, vslatwt egyláncű dlertáríyagok (bc-FV). Ezaii felől, az ellenanyagok és azok. fragmentumai lehetnek hőmatiizált ellenanyagök és elkngnyag-it’agnmntumök, például az EfoA-239 4ó0 számú európai közzétételi iratban ismerteteítetek.
Készftmények előállítása
A találmány szerimi keazüménjckel elöalhthatj-jk úgy. hogy az mmg<.o i'.vs oldatát a gukobpídadjuvátíssal elegyítjük, és az elegyítést megelőzően vágj·’ azután az elegyhez adjuk a mukozális öten adagolhatóhígftóanyagot, vivöartyagoi vagy hordozóanyagot. Más eljárás szerint, a glíkoiípld-adjuvánst köprecipitállmEuk az: antigénnel Azon, felül, hogy a glíkolipid-adjuvánst a. beadási megelőzően elegyíthetjük vagy feöptecip'-Utluinik a készhmétty többi kömpmtensével, azt beadhatjuk az egyéb kompürmnsekétöl eltérő helyre, vagy azok beadásától eltérő időben. A glikölipld-adjüvásis és antigén elegyet íbrmuiázhatjiík gél, kapszula, gyógycukörka, stb. Ibrmájábtm, vagy kiszerelhetjük különböző eszközök, segiiségéveh például tapasz formájában, amely .tehet két, vagy előnyösen egy jráayhan áteresztő.
Az MPL-t (vagy teás Τ.ΗΊ-választ indukáló adiuvánst), amelyet előzőleg ultrahangkezeléssel vagy más eljárással öldmtunk (az „MFLéb adjüváns- előállítása, és oldása” című fejezetben későbbiekben ismertetettek szerint-v különböző módon hígíthatjuk az antigénhez történő hozzáadása előtt. Λζ MP1 .-adjutánst először tipikusan 0,5-4 mg/ml koncentrációban, például I mgúnl kneoemráelöban oldjuk. Ezt tovább hígíthatjuk 300-3.0 pgónl koncentrációig, előnyösen 100 pg/ml koncentrációig. A hígítást végezhetjük tiszta vízben vagy más oldószerben, például l -50% glicerint tartalmazó vizes gfermoldatbaú.
Fiziológiásán elfogadható hordozóanyagokkém és töltőanyagokként alkalmazhatunk például steril vizet vagy 5% dextrózt tartalmazó vizes oldatot. A készítményeket formnlázhatjuk humán vagy állatorvosi: alkalmazásra, és mukozaln, előnyösed szublíngvális beadásra.
Az ismerteted beadási utak, és dózisok csak, vezérfonalként szolgálnak, és szakember képes bármely adott beteg és állapot ecetébe® meghatározni az optimális mukozális beadási utat és dózist.
A^ésgíttóéúynkd'grrmüázÁsgj.ada^olássés beaMM
A találmány szerinti készítmények szublingvális beadásra alkalmas, gyógyászatílag elfogadható töltőanyaggal, hordozóanyaggal vagy vivöanyaggai lommlszhatók. gyógvászatiiag elfogadható vivöanyrsgok részletes leírását találjuk például a következő kézikönyvben: „Haudboek of Fharmaeeutícal Ezcipieöts, 2. kiadás, szerk: Wade-és Weller, The Pharmaceuticalfoess, London (1894).
Azt találtuk, hogy a ialaimany egy lényeges szempontja szermí, a találmány tárgyát a találmány szerinti készítmény szabiingvális beadása képezi. Előnyösen, gélt vagy más viszkózus készítményt alkalmazunk, mivel így az antigén várhatóan jobban érintkezik a szublingvális nyálkaháriya-feiszhmel. .ló eredményt érhetünk el áronban más készítményekkel, például vizes oldatokkal is, Egerek esetében, egyszerű oldatok alkalmazásával a gél alkalmazását követően tapasztaltakhoz hasonló eredményeket kaptunk. Nem szükségszerű, és nem is kívánatos, hogy a készítmény fizikai vagy kémiai úton a nyálkahártya-szövethez kötődjön.
Ézubliugválls úton adagolható készítmények lehetnek például vizes vagy nem vizes steril oldatok, amelyek tartalmazhatnak antíoxidénsokat, putfereket, bakteriosztaukus anyagokat, továbbá a készítményt az egyén testfolyadékávaí. előnyösen nyálkuhártya-szektőlumával izotóníássá tevő oldott anyagokat; lehetnek továbbá vizes és nem vizes steril szuszpenziók. amelyek tartalmazhatnak szuszpendátó vagy sűrítőanyagokat. A készhményekei kiszerelheijuk egységnyi dózist vagy több dózist tartalmazó tartályban, például lezárt ampullákban és tar 14 iályokhíiít, és tárolhatjuk fagyasztva szántott állapotban ágy, hogy ahhoz csak steril folyékony hmteóaHy^ot· kell hozzáadni közvetlenül a felhasználás előtt.
Előnyösen, a. találmány szerinti készítménybe» hordozóímysg is jelen vau. A hordozóanyag létet olaj-»vízben típusú emulzió. vagy ahmteiumso, például glumínlmn-fosziút vagy ahunmiam-húb-ozid.
Nem feMU- ote-a-vizben típusú enmlziók előnyösen nem toxikus olajt. például szkvalánt vagy szkvalőnt, és emnigeálori, például 'te een-Sü delet getrú útoaimaznak vizes hmteteanypgban. .A vizes hordozóanyag lehet például foszfát-paffen.;. fvntegte sool tat
A {aláírnám tárgyat képezi továbbá pollvates vakmn&készítmény, amely a találmány szeriről vakcittakésziimteyí tartalmaz más amigúnekkel, közelebbről daganatos betegségek, autoimmun betegségek, és azokká1 ka x solatm államok kezelésére alksiimas antigénekkel egyite \ll iumosságbau, hordszóanyagokkéni ülkahuazhaőmk például, ne anélkül, hogy igényünket a felsoroltakra korláiozftádk, dextrózl, vizet, glicerint, eumolt, és azok komhináéióit.
A találmány tárgyúi képezik továbbá gyógyászati csotnagok es kitek, amelyek egy vagy több, a találmány szerinti készítmény egy vagy több komponensével meglökött tűrte·, tartalmaznak.
A készítményeket beadhatjuk kenőcs, paszta, gél, oldat, por, stb, fotmapbam Géleket szokásosan torínalázhaimtk kmtepul, más néven karbomer -- egy kiti-bovivinil-poíiuier .úkaima/axate, vagy celhtlóz alapú sűrítőanyag, például hidroxieíil-cellttlóz, όίόιοχΙρπΐρΙΙ^οΙΙϊϊίόζ, vagy hidrovipropil-sneiileeílulóz, kafeíttmkarktemeiii-eelteáz, rtátrámt-karboxhuetll-cellulóz. etiicethsloz, metilcelluloz alkalmazásával. Gelekel ugyancsak egyvzerten fonmdázhatunk például a felsoroltak valamelyikének alkalmazásával: guntíajábikutn. algmsav. beütötte cetoszteril-alkohol, zselatin, guar-gttmi, magtezium-alummium-szilikát, maltodextrin, polivtttilalkalmi, propilémkarbímái, jwptléaglikol-alghmt, kolfeidálís sziílkon-díoxld, uútrhmt-algirtát, tragantmézga és/vagy xamángumi alkalmazásával. Különösen előnyösen, a karbopolt és a cellulóz alapú vegyületeket alkalmazzuk.
A készítményeket az adagolási formulával tenrpattbílís módon adagoljuk, profliaktíkusan és/vagy terápiásam hatásos mennyiségben. A teadandó mennyiség, műi általában 0,5-250 pg antigén dózisonként, fegg a kezelendő egyéntől, az egyén imnmnrendszerének ellenanysg-szmtötlzáió képességétől, és attól, hogy milyen mértéké védettséget kivmmnk előidézni.. A dózis előnyösen körültelúl 2-4Ö pg/dózis. Egyes esetekben, a beteget somzattezefesteu részesítjük, növekvő amigéndózisok beadásával.
A dózist előnyösen körültehll 0,1 ml térfogatban adjuk be, de a beadási rendet kialakíthatjuk ügy, hogy ,v a te.me ás· alacsonyabb térfogat beadásával kezdjük, és magasabb térfogat beadásával fejezzük be. A beadott aktív összetevő pontos mennyisége .szakember megítélésén múlhat, és azt külön tneghatározhaijuk minden egyes egyénre.
A. készítményt beadhatjuk egyelte dózisban, vagy előnyősért, több dózisban.. Több dózis beadását magában foglaló beadási rend eseten, először l~i 0 külön dózissal vakcinúzunk, majd további dóz·sokat adunk be megfelelő időközönként ahhoz, hogy ftetetrtsuk vagy megerősítsük az immunválaszt, például egy második dózist adunk te tel hónap múlva, és szükség szeriül, további dózist (dózisokat) adunk be néhány hónap élteitével. Amemtyihen a készítményt allergia kezelésére alkalmazzuk, tt beadási rend gyakoribb adagolást foglal magában. Az adagolási rendet is - legalább részben -, az egyén szükségletei szertat határozzuk meg, és az szakember megítélésért alapul.
is.
Az. etnbU'tteV'n iéiül, a?, antigén; (antigéneket) tartalmazó készítményt más immimszabályozó szerekv, í pé'dául mu'irs\e;ob-íhn<-4k<d cvvürt ts adagoítattuz
A taiálramy szerinti megoldást a továbbiakban konkrét megvalósítási példákon keresztel kívánjuk szemléltetni, anélkül azostbao:, hogy igényünket az ismertetettekre korlátoznánk.
A péí.k,'
MELldldjavánsoMaleMlHgtea l,2-dipalmití>il-SN-gricerö-34bszfo-ko1int (DPPQ olítownk doíteml k<m<:emrádób;m, abszolút «tanéiban. Az >MPL feloldásához, a szolubilizálsndó MPL-TEA (írfeiíiarnin) só minden egye milligrammjához 27 «I DFCC-t adtunk. MPL4 s fent ismertetettek szerint álflthaftmk elő. Az eternit-oly módon távollteitek el, hogy óvatosan .Nrgázt áramoltattunk a tartályba.. Ernán, az MPL.minden egyes milligrammjára számítva 1.0 ml pirogéamemes. injektálásra alkalmas vizes adtunk a be»záríto;t MPt/DCCP-e légyhez, Az. oldatot 60-7ö°C-on, fürdös ultrahangkészülékben ultrahanggal keféltük az. elegy feiiisztalásáig. Ezután, az MPL/DPPC oldatot „SFCA 290-4520 Nalgene típusú, 0,2 pm pórusátméröju filteren sterilre szűrtök. Az MPL/'DPPC oldatot aszeptikus körgtaáuyek mellett, lyőmgóal konmttrációban, pimgéhmestesitelt, MPL-AF jelölésselellátott tartályokba szétmértek (DPCC szuriáktánsban szeluhillzált MPL), és d'XXon tároltuk.
Ovaihamih (XOA) / MPLáhsadjnváns / szublmgvális gél előállítása
A TH t-valaszs kiváltó aknvüás egérben s specifikus lgG2a- és IgGJő-ellenanyagok. a ni2-válas?.í kiváltó aktivitás specifikus IgGJ-ellenanyagok és fgE-eltetsanydgok termelődésének meghatározásával állapítható meg. Specifikus, szekretert» IgA-elieaanyagok jelenléte utal arra, hogy mukozálls válasz - lokális (nyál edenatnagvk tctwelndexA vig\ tex^li (vagináin, dtemwagok termelődése) - létrejött-e a sz-rhlingvális immunizálást kővetően. X alameh készümenx mimunngen képess égét vizsgálhatjuk azonban úgy is, hogy csak a speuffes
1.gG-vdja.-zí mérjék sztmmKm
A s.’s'utldteles kedvéért: kísérletet végeziteik tehát egereken, ovalbmw (XÖA), egy modellateigénksat elfogadott, koz.i.>.ue!tmt áltergénként viselkedő:, tyúktojásból származó antigén ellen termelődő allergénspecífikus ellenanyagok preflljtmak szemléltetésére.
K-indulási artj agai·.:
I. Karbopol TR- s NF lórzsoittet (0,83%)
A. 1 í)0 mg ksrrbopol TR-1 XP 20 ml WFI-ban (,.η'Ηίον (őr «ímetem”; injektálásra alkalmas víz) - &,$% vegyes-%- gél,
S. az A gélhez Ü,8 ml. 1Ö térfogat-/f-os TEAO ttrltellamm) oldatot adjunk -- 0,8 vegyus-% gél,
Π. MPi. Ar glicerm 120 mg toll . A.
MPL 40 mg
ÜPPC 4,32 óig
glicerío §04 gi
Wl· · Íí7.m.va«?j? yoíte; qs) lő ml
Uirtahangkezeléssel körtedéiül 80 nm áhíiéröjő részecskékké alakítva.
B. Liofilrzálás
C. Rekoteteálás ; ,2 ml WFl-vel 20 mg/ml Hl Ovalbiunln tömoklat (33 mg/ml) MPL.
Ovnlbumin 3 3: Wg
Wí:í l ,0 ml :j
Készíitea}· Itdeklálásra
Karbopol törzsoldat 1920 pl
Ováltanin tömőidet 480 pl
Glicerin 480 td
WFÍ 720 οι
MPL glicerin 400 μί
1. Akarbopoh, ΧΌΑ-t, glicerint.&WFI-15 ml-es tartályba mértük, és wnex készülékkel elegyítettük.
2, A fenti elegyhez adtak az MPteglicerin «legyet, és a vortexslést tovább Ltíyt&tek.
Egerek termmizáláss:
0’ ot mdtezo testén Ha J>C ct.etlx fa portokat kumt) tt tteszknzdhnk teM »ζ»'λ' rek öntudatlanná váltak,. a megfelelő, kStebözó mernryfeégíi XOArt tartáteaző géiliésvímstey 20 ui-et adtak be a nyelv alá, öl percre. Öt perc elteltével, a gélt 1,0 nrl térfegatő,. O%-<ss teológiás .wold.ití J te-teteó segít áégévei a száitel kiöfelóetíük.
Három 'tetei később, az egereket az első ^kezeléssel azonos tettet testek. Az: egereket a második. .kezeléstől onmtnok 2 bet ntülvú elvéreztettük, és a szérumot összegyüitöttük. Ezeket XöA-speeitttes lgG~ elfenanyagek teeteere túrtak (l IS-L<{járással,
Asteövtteatefi IgO-válasz 20 pl karbopal gélben, szabimgvális úton, 83,2 pg vagy 3,4 pg. avttemmnai m 3 te χρ MPl Jzl kezeit. ?< bet máísj ^metéli kezdésben feszestfett, kot hétteí később eberezteteit egerekben [átlagos GD (optikai denzitás} értékek a csoportot képező 5-5 egér eredményei alapján|.
Op-éríékek küitebözö szérmphígitáste tpelieti
1/ÍÓ 1/30 1/00 1/270 r IM1Ö |
i. csoport 83.2 pg XOA ki LO 0,75 0,5 0,3
2. csoport 3,4 pg XGA (te 0.5 0,35 0.15 0,S5 j
3. csoport csak karbopol 0,15 0.1 0,05 0,05 0,05
2. pélte
Az egerek immunizálására altetetete készteépte plbálÖGsp
A kartsopofeap vagy más töltőanyagban, MPL nélWI (vizes álstpő készítmények) oldott XÖzVMPL-4 az l, példában ismertetetek szerbi éltetek elő, eltekintve .az dite dózisok afateteától.
E^Ltemtmízálása
l. A készítmény beadása előtt mindegyik egeret atestetizátek.
... π ..
2. A megfelelő készítmény 20 gLét 5 perere, a nyelv alá adlttk he. A fenti módún,. az egyes egérmpottok íagjai a kővetkező mennyiségű összetevőket kapták 20 pl rétfogatban.
Csoport Antigén MPL. Vsvdanyag
1 80 pg ovaíhtimm 20 pg MPL. Karhopol
·> 80 pg övaíhamm OpgMPL Karbopoí
3 0 pg övalbmnin ÍÓ0 pg MPl. Karhupol
4 hOpgovalhumm a0 pg M PL Töltőanyag
3. Öt perc múlva, a készítményeket 1,0 mi térfogatú, 0,95-á-os soohiatial a szájból kiöbhtetiük.
4. Az első vakeinázást kővetően három hétiek és újabb két hét máivá,. az egereket ismét a fenti kezelésiben re vettettük..
3. .Az egereket a harmadik- kezelést követben- 2 héttel elvéreztettük, és a szémmolmi felhaszaálásig -
C on éneitek ön f> lüdv-nm^doijadekokaí a guMatnmk, a azes.ő habomé kmt.lmetuvk mUlza taroltuk
ő. A szérumokat és mosöfoiyaéákokat ovallmmin-spedükus ellenanyagok jelenlétére teszteltük a fenu ekbenmár h-me»:etclL'k szarni
EreíhtjetjyeM
XOA-:sgedfe!S^raHilgG;;e&tgÍsyagpktitgi^jpgillüxfeto^teIhá2.íSÖ)
Csoport Szérum Igö í Szérum lgG2á Szérum IgG
1 0,0625 {0,375} 0,35 (0,4) Tót 0,3)
'> 0 0 OJ (0.05)
3 0 0 0.25 ítÍ.02;.
4 0.95 (0,0I) 05$5 (0..,.2} 1,0(0,05!
Az XQA elleni erős szérans-lgG-válasz kiváltásához MPL hozzáadására van szükség, ami az: IgGSaelleswyagválasz alapján - úgy tűnik - egyúttal TH-MlpMú választ is indokai.
Ari a?, áj és váratlan megfigyelést teltük, hogy amennyiben MPL-t alkalmaztunk admvánsként, erős XOA-specjfíkus IgA-válasz jött létre.
Karbopoí vlvhanyagként történő alkalmazása egerekben. »em járt, nyilvánvaló előnnyel. Valójában, meggyőző bizonyítékokkal támasziöítük alá. hogy az XOA-t és Mi’L-t tartalmazó vizes alapú készítmény katbópól nélkül sokkal hntnoöogéxmísh egerekbe», mind az ígG, mind az IgA-váiasz kiváltása lekmtetében. VI<18vőanyag. alkalmazására azonban szükség van vakcmakészítoéayek esetében, és a karbopol megfelelő és szokásosai) alkalmazott vivőanyag humán és állati alkalmazásra egyaránt .4 Ttvite/f pé/iáík során· mfehuíirotí nntóiXTCÁ
1. Az egyes csoportokba tartozó öt-öt egérből szánnazö szérumokat (1:2 .amuyba», borát-pufferben hígítva! ELlSA-eljárással teszteltük az. ovalbumin elleni tgG- vagy IgA-ellensnyagok ttterének meghatározására.
2. Az MISA-vizsgáit kísítek reGln·? a ksheikezö készülékekre és eszközökre volt szükségünk:
A. Immumn 2“ lemez, te> Uukú. lapos-fenekű, DYNATECH Laboratories; katalógusszám: #11-01034>5 tétéiként három. lemezt tesztelitek (10 egér szérumának duplíkátumbm történő tesztelésére elegendő memo iségeil,
B. övakmmin (tyúktojás), Sigma Grade .5 (l mg/mí injektálásra alkalmas vízben), amelyet minden lesztetessél frissen készítettünk;
C. tiszta (antektóvozGit) pipettahegyek;
D. 20 μΐ, 1Ö0 μΐ, 200 μΙ, 1000 ul pipetták;
E. k csatornás pipetta; 208 μί térfogat mérésére:
F. tiszta (új:), 13 mm átmérőjű tesztcsövek,vagy 2 ml-es fágyasztóampullák és állvány;
G. “Parahint”, vagy “Sárán Wrap”;
TI. 1 notrnál ThSÖ4;
I. tormaperoxídázzal jelölt anti-lgG vagy arm-lgA második ellenanyag (1:5 080 arányban hígítva) bonthern Bmtechnölogy Asscesates. Inc.:
3. OPD-készbt; <Hemléndiamin iabietták, lemezenként és hígítónyagwként egy késztet; “Ábbott. Labs’ in. vitro Test, katalógusszám: 7IS1E. Gyakran eleve rendelkezésre áll a labömtórmnmkhan.
K. tesztelendő egérszénutmk. Hosszá ideig történő tároláshoz a szérumokat 1:2 arányban borátptif terhén kél I higítam.
L. Börát-puflur (BB1
A következőket oldottak 4 Iker steril WFI-beat
12,4 g bórsav, Fisher Scientífíc #73-5(8);
0,704 g nátrium-borát (börax), Fisher Sc-entifle #§271-500;
Az oldatot szobshómérsékteten tároljuk, teját&ií ideje hat hónap.
M. Borát-pufter a- 8,1% Tween-20iBB-l'2.0):
l ml Tween-zO a_t„sg..'.st (Sigma #P-1379) adunk l liter BB-pstterhez, és alaposan elkeverjük. Az oldatot szobahőmérsékleten tároljuk, lejárati ideje hat hónap.
N. Borát-pulfer - Tween-20 --1.% BSA (BB-BSA):
iyög EDTA-I (négy nátrimnos só; Fisher Scienflfie #BP 121-500) és 10 g BSA-t (V. frakció, pwteázmentes. Boehringcr M&mfnmm »180-3 58) oldunk 1 liter ÖB-T28-pufferbem
ö. 0,85 mol/1 karbosátfbskarbonat puSeroidat::
4,2 g NaHCOj-at és 5,3 g Na2CO3-«t oldunk i liter Mi-vízben vagy steril, irrigáláste alkalmas vízben, és -az oldái pll-jál 9,6-ía ál.íitgik be. Az oldatot 4%xm tároljuk, lejárati ideje három hónap, felhasználás előli .szobaltomérséktetüre melegítjük.
- 19 P. Automata pipetta,
Q. vortex keverő;
R. állványok rutkrocetíü-fíúga-cvövek szamára;.
S. 490 nm-en O.D. meghatároznom képes .ELISA-nlvasó;
T. 37°C-ra beáll ácsit inkubátor;:
1.1. 25 ml-es sxerológtaí pipetták (Fisher Scientííu:);
V. 15 tul-es kókuszos polipropilén-csövek (FisherScR-ntstk·);
W. reagenstartálynk többcsatotsás pipetta szamára;
X. automata letneztnoso.
3. ELlSA-teszt kivitelezése
A. Tészímitigéa. lekötése a. lemezhez
I. Az adjuváJtsvizs^sflmz, a lemezeket 51) pg/ml koncentrációjú ttsfogtetttel vontuk be:
Az 1 mg/mi cívalbumin-törzsoldai 2,5 mi-ét 47,5 ml· térfogatú, 0,05 múld karbonát/bíkarbouái puffeihez adtuk. Ez a mennyiség: mélyedésenként 1 Ott pl oldat alkalmazása. esetén négy, 9ó lyukú lemez bevonására elegendő.
II. Ezután, a lemezeket ‘'Saras Wrap” filmmel fedtük, és egy éjszakáit át, sötét helyen, 4®C-on állni hagytuk.
A S í '* k, kr ti,..1 el x’ ? 't x cm i!> ste* .')· * uU > a ' tu '. \ tette '·. »x>.
megelőzően teítefegyik hígiiott mintát vortexétok. A higításuk készítésénél, a szérum törzsesövekböl történő kimérésére mindig új pipettabegyet kell használni.
I -V Gdjusaussaí cs <n.rnmmmJ immum/últ egc-tvk s..%'ruma.'uk kc-.foohi<fot<..>.i l ö sfot
C. . A. lemezek blokkolása
I. -Amikor vafemenuyt szérummintát meghigitottuk. a lemezt úgy készítjük elő, hogy abból a bevonó pufiért (“cmfemg)-erőteljesen a lefolyóba kirázzuk.
II. A lemezt a mamiék okiat eltávolítására papírvattára csapkodjuk. A lemezt az automata lemezmosóval, amelyet úgy programoztunk, hogy 350 pl pufferrel mosson. és az .egyes mosások közt 5 másudpcretg.yútjos, BB-T20-tnosófolyadékkal mossuk
Itt. .A többcsatornás pipettával a níétyedéseklicz 250 pí BÖ-BSA-oldatot adunk. A lemezt Sárán Wmp’’filmmel fedjük és lezárjuk, majd 30-percig, 37:<!C-on tekhbáliuL
D. A mmták felvitele a lemezre l A blokkoló puffért erőteljesen a lefolyóba kozzuk, és a maradék oldat eltávolítására papírvattára csapkodjuk.
II. -Az egyes lemezekea, rnindegytk mélyedésbe. Kló ul BB-BSA-oldatot mérünk; Az #1 oszlopban, a. megfelelően meghiglfott szértmtmijtíák 100 pl-ét adjttk a. megfelelő mélyedésekhez. Mindegyik szérummintát dnplikátumokban tesztelünk.
III. A minták elegyítésére, a többcsatornás pipettával az 41 oszlopban 1Ö0 pl oldatot az egyes mélyedésekből .felszíniuk és visszanyernünk, és az eljárási nyolcszor megismételjük, majd 100 id-t a 42 oszlop mélyedéseibe viszitek át. A megfelelő elegyítés érdekében, a felszívást és visszaayomást ismét nyolc alkalommal elvé- géz αϊΚ, es 100' W ul mmtat a #3 -oszlopba viszünk át A somzaíhigitást & #12. oszlopig ismételtük. A ú12. oszlopban végiéit elegyítést követően svptpemshegtökben maradt 100 pl tóiként uMtaw! kjdobjiJk f kktr, lük pl oldatnak keli fennie a lemez valamennyi mélyedésében.
B. laktibáeió
A. lemezeket “Sárán Wrap”' fítanéí vagy Parsftanel fedőik, és lezárjak. A lemezeket 1 órán át, 3TCoa mkobáijúL A le nem kötődött ellenanyagai a 3. A lépésben ismertetetlek szerint eltávolítjuk, és a lemezt ezúttal Is: BB-'nö-pírflferr8l..h^comszor.mossuk,
F. K enj egálom
L A peíoxidázzal jelölt anti-lgG második ellenanyag konjugámmőt úgy készítők elő, hogy azt 1:5 Oöö arányban BB-BSA-pafferben hígítják (10 pl ellenanyag: 5ii ml í3B-BSA-pnfferben, 50 ml-es kónuszos esőben). A csövet több mint hússzor fejjel lefelé ferdítjük, és az alapos elegyítés érdekében 30 másodperig vortexeljük. A hígított ellenanyagot tiszta reagenstartálvbá öntjök. IgA-konfegáiimiöt hasonló módon készltheiifek.
A konjagátnm oldat 100 μΙ-ét adjak a lemez valamennyi mélyedéséhez, beleéretve a kontroll mélyedéseket is.
Ili. A lemezt lefedjük, és 1 órán át, 37°€-on nAubáijuk.
IV. A konjugátem oldatot eltávolítjuk, és a lemezt a 3.A lépésben ismertetettek szériái háromszor mossuk.
<1 b n ovmrsO eld'nxa?a l k sznbszt’átaí kokmmetriás reagenst 10-15 perced a felhasználás előtt készítjük el (időt hagyva a íelms tlleld'Xlasm) oly módon, hogy 3 optikai deaztiás elöhívsVahfeífei oldmik 30,4 ml sznbszirátpüfferbeu, egy fohátel lefedett, 50 ml-es könaszos polipropilén-esőben.
II. A többcsatornás pipettával i 00-100 ni reagenst adnak valamennyi mélyedéshez. A lemezt 15 peréig, szobahömémék léten: inkubáliúk.
III. A reakelóí 15 pere múlva úgy állítják le, hogy valaamnayi mélyedéshez 50 pl, í mol/í kénsavat adunk a többcsatornás pipetta alkalmazásával,
H. OD-ériékek leolvasása a lemezről
L A lemezeket egymást követően kell ,,stoppolnom:” egy, hogy 1-2 perces időintervallum legyen az egyes .lemezek közt, é» így a rnádó leállításától a feoivaaásig eltelt idő ái‘ a dó egyen az egye lemezek esetében (miután az utolsó lemezen icalhmttuk a reakciót, 491) nm-es huHámhosszon leolvassak az első lemezt a megfelelő lemezolvasőt:. A második ktm'X 1-2 perccel később olvassak le, a harmadikat szintén 1-2 peresei később, és Így tovább.;
i. Az injmüBögén títer meghatározása
Az egyes szérammimák í hetei a kettes alapú smozatlngaás első olyan tagja hígításának reeíprokakénl adtuk meg. amelynek Oi)-értéke elérte a háttérérték, kétszereséi, vagy meghaladta azt. A kontroll állatok Ql> értékeit mindegyik hígítás esetében átlagoltuk, és á csoportokra vmmtkozó átlagtitereket számoltunk.
Az idézett szakirodalmi hivatkozások feljtss terjedehniAben a knamtás részéi képezik.

Claims (9)

  1. SZABADALMI IGÉNYPONTOK
    1. Sziiblingváiisatt besdha-ő, legalább egy antigént és gllkolipid-adjevánst tartalmazó készítmény.
    <uko<<' s <.* s s-m'íí'b ii'nifl'ib \’QÍ mrr'ít <- Ui'Wm<í ahd 5 mukiVD > mmiBiia v.' a sziibltógváliá beadás helyétől távol és lokálisan egyaránt kiváltódik..
  2. 2. Az L igénypont szerinti szabiisgválisan beadható készítmény az ott meghatározott alkalmazásra, ahöl IgA-termeibdósstd járó hmmrn válasz; váltunk ki.
  3. 3. Az L igénypont szerinti sznblmgválisan beadható készítmény áá ott öiégbátározoft alkalmazásra, ahol IgG -tenneíódessel járó mmnmválaazi váltunk ki.
  4. 4. A f-3. igénypontok bármelyike szerinti sxab'lingválismi beadható készítmény az ott megliátótozott álkalmazásra;. ahol az imtmmváta kiváltása emberben- vagy állatban, bakteriális va^ vírusos fertőzés, amoímmonitás, rak vagy allergia kezelésére szolgál.
  5. 5. Az 1-4. ménvpntitok bíumelvtke szermu szublingvölisan keadíiatö keszttovor a? olt mezs-atan-zott alkalmazásra, ahol a gllkolipid-adjuváns ’ΠΙ I-választ indukáló glikoíipid-adjuváns.
  6. 6. Az 5. igénypont szerinti szitbímgválisan beadható készítmény az ott meghatározott alkalmazásra, ahol a gliköHpid-aditíváns 3-de-OmóiIált mőnefeszfttril-ΙίρκΙ-Α (MP.L*j vagy annak származéka vagy sója.
  7. 7. Az 1-6. igénypontok bármelyike szerinti szubliugválisan beadható készítmény az tót megháláröZöíi aiknlmazásra, ahol az antigén baktériumból, vírusból, pnonból, neoplazmáböl, autvamigééből, állathat vagy növényből származik vágj· rekombmáns vagy szintetikus anyag,
    §. Az L7. igény pontok bármelyike szerinti .-swbllngváíisan beadható készítmény az ott meghatározott alkalmazásra, ahol az antigén polipeptid formában vart jelem
  8. 9,. Az 1-4. igénypontok bármelyike s-mrmti sznblísgválísan beadható készítmény az ott meghatározott alkalmazásra, ahol az antigén allergén.
    iö. Az 1-9. igénypontok bármelyike szerinti szublingválisan beadható készítmény az ott meghatározott alkalmazásra, ahol az antigén egy antígénhatásó poiipeptidei kódoló prilinukíeotidöt tartalmazó vektor, ahol a polinnkleotid annak expresszióját irányító szabályozó székvwtiákkaljftmkeienálisan képcsőit.
    .11.. Az l · ICt igénypontok bármelyiké szérmti szublhigváíi.sam beadható készítmény az ott meghatározott alkalmazásra, ahol a legalább egy antigén és a glikolipjd-adjováns egyetlen készítményben együttesen van jelen,
  9. 12. A 1 i . igénypont szerinti. sznblingválisan beadható készítmény az ott meghatározott- alkalmazásra, amely vizes óidat, gél, kapszula, gyögj cukorka vágy tabletta formájában vart kiszerelve.
    A meghatalmazott:
HU0203972A 2000-01-14 2001-01-15 Antigént és glikolipidet tartalmazó készítmény szublingvális úton történő alkalmazásra HU230545B1 (hu)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GBGB0000891.2A GB0000891D0 (en) 2000-01-14 2000-01-14 Formulation
GB0000891.2 2000-01-14
PCT/GB2001/000142 WO2001051082A1 (en) 2000-01-14 2001-01-15 Composition of antigen and glycolipid adjuvant sublingual administration

Publications (3)

Publication Number Publication Date
HUP0203972A2 HUP0203972A2 (hu) 2003-03-28
HUP0203972A3 HUP0203972A3 (en) 2011-02-28
HU230545B1 true HU230545B1 (hu) 2016-11-28

Family

ID=9883730

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU0203972A HU230545B1 (hu) 2000-01-14 2001-01-15 Antigént és glikolipidet tartalmazó készítmény szublingvális úton történő alkalmazásra

Country Status (15)

Country Link
US (1) US8470331B2 (hu)
EP (3) EP2100616B1 (hu)
JP (1) JP4648603B2 (hu)
AR (1) AR027924A1 (hu)
AU (1) AU2001228625A1 (hu)
CA (1) CA2397359C (hu)
CZ (1) CZ304941B6 (hu)
DE (1) DE60139305D1 (hu)
DK (1) DK2100616T3 (hu)
ES (2) ES2561360T3 (hu)
GB (2) GB0000891D0 (hu)
HU (1) HU230545B1 (hu)
PL (1) PL356963A1 (hu)
SK (1) SK288411B6 (hu)
WO (1) WO2001051082A1 (hu)

Families Citing this family (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20060030826A1 (en) * 1996-06-04 2006-02-09 Vance Products Incorporated,d/b/a Cook Urological Incorporated Implantable medical device with anti-neoplastic drug
US20060025726A1 (en) * 1996-06-04 2006-02-02 Vance Products Incorporated, D/B/A Cook Urological Incorporated Implantable medical device with pharmacologically active layer
US20060052757A1 (en) * 1996-06-04 2006-03-09 Vance Products Incorporated, D/B/A Cook Urological Incorporated Implantable medical device with analgesic or anesthetic
GB9706957D0 (en) 1997-04-05 1997-05-21 Smithkline Beecham Plc Formulation
GB9820525D0 (en) * 1998-09-21 1998-11-11 Allergy Therapeutics Ltd Formulation
AU2003280324A1 (en) 2002-11-26 2004-06-18 Alk-Abello A/S Pharmaceutical allergen product
US8012505B2 (en) 2003-02-28 2011-09-06 Alk-Abello A/S Dosage form having a saccharide matrix
WO2005115449A1 (en) * 2004-05-28 2005-12-08 Alk-Abelló A/S Method of treating allergy and infection by eliciting an iga antibody response
ITMI20061117A1 (it) * 2006-06-09 2007-12-10 Michele Bonanomi Una composizione farmaceutica per la somministrazione sublinguale di vaccini metodo per la sua preparazione e sui usi
EP2468300B1 (en) 2006-09-26 2017-12-20 Infectious Disease Research Institute Vaccine composition containing synthetic adjuvant
US20090181078A1 (en) 2006-09-26 2009-07-16 Infectious Disease Research Institute Vaccine composition containing synthetic adjuvant
EP2425242B1 (en) 2009-04-29 2019-06-05 Pravin K. Muniyappa Device and method for the diagnosis of gastrointestinal allergy
CN102481312B (zh) 2009-06-05 2015-07-15 传染性疾病研究院 合成的吡喃葡萄糖脂佐剂
GB201009273D0 (en) * 2010-06-03 2010-07-21 Glaxosmithkline Biolog Sa Novel vaccine
EA027236B1 (ru) 2011-04-08 2017-07-31 Иммьюн Дизайн Корп. Иммуногенные композиции и способы применения таких композиций для индукции гуморального и клеточного иммунного ответа
JP5650780B2 (ja) 2012-04-04 2015-01-07 日東電工株式会社 ワクチン組成物
EP3388835B1 (en) 2012-05-16 2020-04-01 Immune Design Corp. Vaccines for hsv-2
CN105209047B (zh) 2013-04-18 2020-08-18 免疫设计股份有限公司 用于癌症治疗的gla单一疗法
US9463198B2 (en) 2013-06-04 2016-10-11 Infectious Disease Research Institute Compositions and methods for reducing or preventing metastasis
WO2017173398A1 (en) 2016-04-01 2017-10-05 Duke University Alpha-helical peptide nanofibers as a self-adjuvanting vaccine platform
CN114901293A (zh) * 2020-03-24 2022-08-12 安炳哲 用于预防或治疗幼小的哺乳动物得与黏膜相关的传染性疾病的血清组成物的制造方法、通过该方法制造的血清组成物及其用途
KR102151962B1 (ko) 2020-03-24 2020-09-04 안병철 어린 포유동물의 전염성 질병을 예방 또는 치료하기 위한 혈청 조성물의 제조방법, 상기 방법에 의해 제조된 혈청 조성물 및 이의 용도

Family Cites Families (53)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB1128637A (en) 1966-09-13 1968-09-25 Beecham Group Ltd Influenza vaccine
US3541201A (en) 1968-12-18 1970-11-17 Ethan Alan Brown Novel sodium chloride encapsulated injectionable substances
GB1377074A (en) 1971-07-13 1974-12-11 Beecham Group Ltd Process for preparing injectable compositions
US4070455A (en) * 1974-02-16 1978-01-24 Beecham Group Limited Process for preparing injectable desensitizing compositions and products thereof in microparticle form
GB1492973A (en) 1974-02-16 1977-11-23 Beecham Group Ltd Process for preparing injectable compositions
EP0182442B2 (en) 1978-12-22 1996-04-03 Biogen, Inc. Recombinant DNA molecules and their method of production
US4258029A (en) * 1979-04-23 1981-03-24 Connaught Laboratories Limited Synthetic adjuvants for stimulation of antigenic responses
US4436727A (en) 1982-05-26 1984-03-13 Ribi Immunochem Research, Inc. Refined detoxified endotoxin product
US4987237A (en) 1983-08-26 1991-01-22 Ribi Immunochem Research, Inc. Derivatives of monophosphoryl lipid A
DE3521994A1 (de) * 1985-06-20 1987-01-02 Bayer Ag N-(2-aminoacylamido-2-desoxy-hexosyl)-amide-, -carbamate und -harnstoffe, verfahren zu ihrer herstellung sowie ihre verwendung in arzneimitteln
GB8607679D0 (en) 1986-03-27 1986-04-30 Winter G P Recombinant dna product
US5244663A (en) * 1987-01-28 1993-09-14 Medibrevex Therapeutic method against allergy
US4975420A (en) * 1987-09-30 1990-12-04 University Of Saskatchewan Agents and procedures for provoking an immune response to GnRH and immuno sterilizing mammals
FR2621916B1 (fr) * 1987-10-19 1990-03-09 Bioeurope Derives de la l-tyrosine solubles dans l'eau et procede pour leur preparation
US4912094B1 (en) 1988-06-29 1994-02-15 Ribi Immunochem Research Inc. Modified lipopolysaccharides and process of preparation
GB9106048D0 (en) 1991-03-21 1991-05-08 Smithkline Beecham Biolog Vaccines
EP0640347A1 (en) 1992-03-03 1995-03-01 Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd. Oral vaccine
ATE188613T1 (de) * 1992-06-25 2000-01-15 Smithkline Beecham Biolog Adjuvantien enthaltende impfstoffzusammensetzung
EP0688205A1 (en) * 1993-03-11 1995-12-27 Secretech, Inc. Polymeric mucoadhesives in the delivery of immunogens at mucosal surfaces
HU219056B (hu) * 1993-03-23 2001-02-28 Smithkline Beecham Biologicals Sa 3-O-Dezacilezett monofoszforil-lipid A-t tartalmazó vakcinakészítmény
US5723130A (en) 1993-05-25 1998-03-03 Hancock; Gerald E. Adjuvants for vaccines against respiratory syncytial virus
CA2167691A1 (en) * 1993-08-27 1995-03-02 Martin J. Blaser Campylobacter jejuni antigens, and methods for their production and use
GB9326253D0 (en) * 1993-12-23 1994-02-23 Smithkline Beecham Biolog Vaccines
US5514665A (en) 1993-12-30 1996-05-07 University Of British Columbia Method of preventing or reducing the risk of infection by bacterial pathogens utilizing simple and conjugated dextrans
US5997873A (en) * 1994-01-13 1999-12-07 Mount Sinai School Of Medicine Of The City University Of New York Method of preparation of heat shock protein 70-peptide complexes
US5646115A (en) * 1994-10-07 1997-07-08 Heska Corporation Ectoparasite saliva proteins and apparatus to collect such proteins
AU4977896A (en) * 1995-02-17 1996-09-04 Immunotherapy, Inc. Immunotherapy screening, prognosis, and treatment methods and compositions
KR100201352B1 (ko) * 1995-03-16 1999-06-15 성재갑 단일주사 백신 제형
GB9508785D0 (en) 1995-04-29 1995-06-21 Smithkline Beecham Plc Novel compositions
US5762943A (en) * 1996-05-14 1998-06-09 Ribi Immunochem Research, Inc. Methods of treating type I hypersensitivity using monophosphoryl lipid A
US5973128A (en) * 1996-11-22 1999-10-26 The Hospital For Sick Children Research And Development Lp Glycolipid mimics and methods of use thereof
KR100531491B1 (ko) 1997-03-10 2005-11-28 바이엘 코포레이션 백신으로서 소 호흡 코로나바이러스
JP5019494B2 (ja) 1997-04-01 2012-09-05 コリクサ コーポレーション モノホスホリルリピドａの水性免疫アジュバント組成物
US6491919B2 (en) * 1997-04-01 2002-12-10 Corixa Corporation Aqueous immunologic adjuvant compostions of monophosphoryl lipid A
GB9706957D0 (en) 1997-04-05 1997-05-21 Smithkline Beecham Plc Formulation
AU7983198A (en) * 1997-06-23 1999-01-04 Ludwig Institute For Cancer Research Improved methods for inducing an immune response
GB9717953D0 (en) 1997-08-22 1997-10-29 Smithkline Beecham Biolog Vaccine
GB9720585D0 (en) 1997-09-26 1997-11-26 Smithkline Beecham Biolog Vaccine
CA2319380A1 (en) * 1997-11-10 1999-05-20 Statens Serum Institut Nucleic acid fragments and polypeptide fragments derived from m. tuberculosis
WO1999064074A1 (en) * 1998-06-11 1999-12-16 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Methods and compositions for delivering proteins to macrophage cells and cells of macrophage derived lineage
EP1086228A1 (en) 1998-06-12 2001-03-28 SMITHKLINE BEECHAM BIOLOGICALS s.a. Recombinant production of toxoplasma sag1 antigen
AU4376199A (en) 1998-06-26 2000-01-17 Pasteur Merieux Serums Et Vaccins Mucosal targeting immunisation
GB9820525D0 (en) 1998-09-21 1998-11-11 Allergy Therapeutics Ltd Formulation
US6734172B2 (en) * 1998-11-18 2004-05-11 Pacific Northwest Research Institute Surface receptor antigen vaccines
SI1031347T1 (en) * 1999-01-27 2002-10-31 Idea Ag Transnasal transport/immunisation with highly adaptable carriers
ATE481108T1 (de) 1999-02-26 2010-10-15 Novartis Vaccines & Diagnostic Verwendung von bioadhaesiven und adjuvantien für die mukosale anwendung von antigenen
GB9909077D0 (en) * 1999-04-20 1999-06-16 Smithkline Beecham Biolog Novel compositions
EE200100552A (et) * 1999-04-23 2002-12-16 Pharmexa A/S Meetod kasvuteguri IL-5 aktiivsuse in vivo mahasurumiseks, IL-5 analoog, seda kodeeriv nukleiinhappefragment ning kasutamine immunogeense kompositsiooni valmistamiseks
UA81216C2 (en) * 1999-06-01 2007-12-25 Prevention and treatment of amyloid disease
AU5731200A (en) 1999-06-11 2001-01-02 Endorex Corporation Adjuvant-containing polymerized liposomes for oral, mucosal or intranasal vaccination
GB9924529D0 (en) 1999-10-15 1999-12-15 Smithkline Beecham Biolog Novel compounds
EP1289530B1 (en) 2000-06-14 2006-10-04 PORTER, William Leslie Lipids for modulating immune response
GB0020089D0 (en) 2000-08-15 2000-10-04 Smithkline Beecham Biolog Vaccine Composition

Also Published As

Publication number Publication date
EP1255563B1 (en) 2009-07-22
ES2561360T3 (es) 2016-02-25
EP2322212A1 (en) 2011-05-18
WO2001051082A1 (en) 2001-07-19
EP2100616A2 (en) 2009-09-16
EP2100616A3 (en) 2009-09-23
DK2100616T3 (en) 2016-02-08
JP2003519669A (ja) 2003-06-24
GB0000891D0 (en) 2000-03-08
SK10412002A3 (sk) 2003-05-02
CZ304941B6 (cs) 2015-02-04
GB2360210B (en) 2004-12-15
CA2397359C (en) 2012-06-05
ES2328336T3 (es) 2009-11-12
CA2397359A1 (en) 2001-07-19
HUP0203972A3 (en) 2011-02-28
JP4648603B2 (ja) 2011-03-09
PL356963A1 (en) 2004-07-12
DE60139305D1 (de) 2009-09-03
SK288411B6 (sk) 2016-10-03
EP1255563A1 (en) 2002-11-13
GB0101035D0 (en) 2001-02-28
AR027924A1 (es) 2003-04-16
EP1255563B2 (en) 2016-03-02
GB2360210A (en) 2001-09-19
US8470331B2 (en) 2013-06-25
AU2001228625A1 (en) 2001-07-24
HUP0203972A2 (hu) 2003-03-28
EP2100616B1 (en) 2015-11-25
CZ20022417A3 (cs) 2003-03-12
ES2328336T5 (es) 2016-06-21
US20030165512A1 (en) 2003-09-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HU230545B1 (hu) Antigént és glikolipidet tartalmazó készítmény szublingvális úton történő alkalmazásra
Dawson et al. Current understanding of the equine immune response to Rhodococcus equi. An immunological review of R. equi pneumonia
JP4010462B2 (ja) インフルエンザワクチン組成物
Phillips et al. Enhanced antibody response to liposome-associated protein antigens: preferential stimulation of IgG2a/b production
ES2277413T3 (es) Formulacion que comprende un antigeno, un adyuvante inductor de una reaccion th-1 y un aminoacido poco soluble en agua, para uso en inmunizacion.
CN111375055A (zh) 一种2019-nCoV亚单位疫苗组合物及其免疫方法
BRPI0621185A2 (pt) substáncias imunogênicas da mucosa que compreendem um adjuvante a base de ácido poliinosìnico-ácido policitidìlico
JPH04507106A (ja) ヒドロキシアパタイト―抗原結合体及びポリ―ｉｇ免疫応答を生成する方法
EP0789590B1 (en) Chitosan induced immunopotentiation
Klinguer et al. Lipophilic quaternary ammonium salt acts as a mucosal adjuvant when co-administered by the nasal route with vaccine antigens
JP6073239B2 (ja) 抗原隠蔽剤としての使用のための、ヒトラクトフェリン誘導ペプチド
AT409086B (de) Neue verwendung von antikörpern als impfstoffe
EP1827488B1 (en) Composition comprising phosphatidyl serine and an antigen or allergen and the use thereof
JP2004043332A (ja) 経口用リポソーム製剤
Grubhofer An adjuvant formulation based on N-acetylglucosaminyl-N-acetylmuramyl-L-alanyl-D-isoglutamine with dimethyldioctadecylammonium chloride and zinc-L-proline complex as synergists
Ahlstedt et al. Specific antibody responses in rats and mice after daily immunization without adjuvant
CN114470198A (zh) 一种用于防治新冠肺炎的SARS-CoV-2卵黄中和抗体IgY喷雾剂
AU2020284771A1 (en) Preparation of risedronate zinc micronano-adjuvant, and use of same as vaccine adjuvant
PL206260B1 (pl) Immunogenna kompozycja liposomowa, jej zastosowanie, sposoby jej wytwarzania i kompozycja szczepionki
Roska et al. Immune complex disease in guinea pig lungs: elicitation with pigeon serum
Rebelatto Nasal-associated lymphoid tissue and intranasal immunizations in cattle
JP4711964B2 (ja) ワクチンのアジュバントとしてリン酸鉄を含むワクチン組成物
Hjálmsdóttir The many moods of liposomes: an investigation into liposomes as mediators of difficult immune responses
San Gil Studies on cellular changes, antibody responses, and protective immunity against actinobacillus pleuropneumoniae elicited intradermal immunization
Easeman Induction of mucosal immune responses in the horse