HU223005B1 - Eljárás elágazó láncú ciklodextrinek előállítására - Google Patents
Eljárás elágazó láncú ciklodextrinek előállítására Download PDFInfo
- Publication number
- HU223005B1 HU223005B1 HU9701186A HUP9701186A HU223005B1 HU 223005 B1 HU223005 B1 HU 223005B1 HU 9701186 A HU9701186 A HU 9701186A HU P9701186 A HUP9701186 A HU P9701186A HU 223005 B1 HU223005 B1 HU 223005B1
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- group
- product
- acetyl
- cyclodextrin
- acetylglucosamine
- Prior art date
Links
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 title claims abstract description 19
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 19
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title description 29
- -1 N-acetylglucosaminyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 29
- OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N N-acelyl-D-glucosamine Natural products CC(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 21
- MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N N-acetylglucosamine Natural products CC(=O)N[C@@H](C=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N 0.000 claims abstract description 21
- OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N N-acetyl-beta-D-glucosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N 0.000 claims abstract description 20
- 229950006780 n-acetylglucosamine Drugs 0.000 claims abstract description 19
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims abstract description 18
- MBLBDJOUHNCFQT-UHFFFAOYSA-N N-acetyl-D-galactosamine Natural products CC(=O)NC(C=O)C(O)C(O)C(O)CO MBLBDJOUHNCFQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 16
- OVRNDRQMDRJTHS-CBQIKETKSA-N N-Acetyl-D-Galactosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-CBQIKETKSA-N 0.000 claims abstract description 15
- HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N schardinger α-dextrin Chemical group O1C(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(O)C2O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC2C(O)C(O)C1OC2CO HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 14
- 229940097362 cyclodextrins Drugs 0.000 claims abstract description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 7
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 5
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 claims description 24
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 17
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 12
- HFHDHCJBZVLPGP-RWMJIURBSA-N alpha-cyclodextrin Chemical compound OC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)CO)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1CO HFHDHCJBZVLPGP-RWMJIURBSA-N 0.000 claims description 9
- 230000006196 deacetylation Effects 0.000 claims description 9
- 238000003381 deacetylation reaction Methods 0.000 claims description 9
- 239000012670 alkaline solution Substances 0.000 claims description 5
- WHGYBXFWUBPSRW-FOUAGVGXSA-N beta-cyclodextrin Chemical compound OC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)CO)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1CO WHGYBXFWUBPSRW-FOUAGVGXSA-N 0.000 claims description 5
- 125000002536 galactosaminyl group Chemical group 0.000 claims description 5
- GDSRMADSINPKSL-HSEONFRVSA-N gamma-cyclodextrin Chemical compound OC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)CO)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1CO GDSRMADSINPKSL-HSEONFRVSA-N 0.000 claims description 5
- LCTORNIWLGOBPB-GASJEMHNSA-N (3r,4s,5s,6r)-2-amino-6-(hydroxymethyl)oxane-2,3,4,5-tetrol Chemical compound NC1(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O LCTORNIWLGOBPB-GASJEMHNSA-N 0.000 claims 1
- 229920001450 Alpha-Cyclodextrin Polymers 0.000 claims 1
- 229940043377 alpha-cyclodextrin Drugs 0.000 claims 1
- 229960004853 betadex Drugs 0.000 claims 1
- 229940080345 gamma-cyclodextrin Drugs 0.000 claims 1
- 230000000850 deacetylating effect Effects 0.000 abstract description 3
- 125000002566 glucosaminyl group Chemical group 0.000 abstract description 3
- 125000003047 N-acetyl group Chemical group 0.000 abstract description 2
- LCTORNIWLGOBPB-PHYPRBDBSA-N (2s,3r,4s,5r,6r)-2-amino-6-(hydroxymethyl)oxane-2,3,4,5-tetrol Chemical group N[C@@]1(O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O LCTORNIWLGOBPB-PHYPRBDBSA-N 0.000 abstract 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 30
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 15
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 12
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 11
- 238000004992 fast atom bombardment mass spectroscopy Methods 0.000 description 10
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 9
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 8
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 8
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 8
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 8
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 7
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 6
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 6
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 6
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 6
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 6
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 5
- 125000002519 galactosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 5
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 5
- 125000000311 mannosyl group Chemical group C1([C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 5
- 101000588395 Bacillus subtilis (strain 168) Beta-hexosaminidase Proteins 0.000 description 4
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OVRNDRQMDRJTHS-RTRLPJTCSA-N N-acetyl-D-glucosamine Chemical class CC(=O)N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-RTRLPJTCSA-N 0.000 description 4
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 4
- 238000010517 secondary reaction Methods 0.000 description 4
- 238000012916 structural analysis Methods 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 3
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 3
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 description 2
- OVRNDRQMDRJTHS-KEWYIRBNSA-N N-acetyl-D-galactosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-KEWYIRBNSA-N 0.000 description 2
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 description 2
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 description 2
- MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N beta-D-galactosamine Natural products NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001460 carbon-13 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 2
- 230000005859 cell recognition Effects 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 2
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 125000002791 glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 2
- 125000003827 glycol group Chemical group 0.000 description 2
- 125000003147 glycosyl group Chemical group 0.000 description 2
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 210000004738 parenchymal cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 2
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MSWZFWKMSRAUBD-GASJEMHNSA-N 2-amino-2-deoxy-D-galactopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 2-amino-2-deoxy-D-glucopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 0.000 description 1
- 241001019659 Acremonium <Plectosphaerellaceae> Species 0.000 description 1
- 241000228245 Aspergillus niger Species 0.000 description 1
- 244000045232 Canavalia ensiformis Species 0.000 description 1
- 235000010520 Canavalia ensiformis Nutrition 0.000 description 1
- 229920002101 Chitin Polymers 0.000 description 1
- 241000238424 Crustacea Species 0.000 description 1
- 241000238557 Decapoda Species 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 101150096839 Fcmr gene Proteins 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000000536 complexating effect Effects 0.000 description 1
- 238000006482 condensation reaction Methods 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 229960002442 glucosamine Drugs 0.000 description 1
- 150000002302 glucosamines Chemical class 0.000 description 1
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 1
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002440 hepatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 210000005228 liver tissue Anatomy 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000001953 sensory effect Effects 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B30/00—Preparation of starch, degraded or non-chemically modified starch, amylose, or amylopectin
- C08B30/12—Degraded, destructured or non-chemically modified starch, e.g. mechanically, enzymatically or by irradiation; Bleaching of starch
- C08B30/18—Dextrin, e.g. yellow canari, white dextrin, amylodextrin or maltodextrin; Methods of depolymerisation, e.g. by irradiation or mechanically
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/0006—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid
- C08B37/0009—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid alpha-D-Glucans, e.g. polydextrose, alternan, glycogen; (alpha-1,4)(alpha-1,6)-D-Glucans; (alpha-1,3)(alpha-1,4)-D-Glucans, e.g. isolichenan or nigeran; (alpha-1,4)-D-Glucans; (alpha-1,3)-D-Glucans, e.g. pseudonigeran; Derivatives thereof
- C08B37/0012—Cyclodextrin [CD], e.g. cycle with 6 units (alpha), with 7 units (beta) and with 8 units (gamma), large-ring cyclodextrin or cycloamylose with 9 units or more; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/69—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit
- A61K47/6949—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit inclusion complexes, e.g. clathrates, cavitates or fullerenes
- A61K47/6951—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit inclusion complexes, e.g. clathrates, cavitates or fullerenes using cyclodextrin
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B82—NANOTECHNOLOGY
- B82Y—SPECIFIC USES OR APPLICATIONS OF NANOSTRUCTURES; MEASUREMENT OR ANALYSIS OF NANOSTRUCTURES; MANUFACTURE OR TREATMENT OF NANOSTRUCTURES
- B82Y5/00—Nanobiotechnology or nanomedicine, e.g. protein engineering or drug delivery
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Nanotechnology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Abstract
A találmány tárgya olyan elágazó láncú ciklodextrinek és sóikelőállítása, amelyekben a ciklodextringyűrű hid- roxilcsoportjához ?-kötéssel N-acetil-glükóz-aminil-csoport, glükóz-aminil-csoport, N-acetil-galaktóz-aminil-cso- port vagy galaktóz-aminil-csoportkapcsolódik. A találmány szerint a fenti ciklodextrineket úgy állítjákelő, hogy ciklodextrint és N-acetil-glükózamint vagy N-ace- til-galaktózamint tartalmazó oldatot egy N-acetil-hexózaminidázzalreagáltatnak, és kívánt esetben a kapott terméket dezacetilezik. ŕ
Description
A találmány tárgya elágazó láncú ciklodextrinek előállítása. A találmány közelebbről a következő ciklodextrinek előállítására vonatkozik: N-acetil-glükóz-aminil-ciklodextrinek, amelyekben az N-acetil-glükóz-aminil-csoport a ciklodextrin gyűrűjén lévő hidroxilcsoporthoz βkötéssel kapcsolódik; glükóz-aminil-ciklodextrinek, amelyekben a glükóz-aminil-csoport a ciklodextringyűrű hidroxilcsoportjához β-kötéssel kapcsolódik, valamint a fenti vegyületek sói; N-acetil-galaktóz-aminil-ciklodextrinek, amelyekben az N-acetil-galaktóz-aminil-csoport a ciklodextringyűrű hidroxilcsoportjához β-kötéssel kapcsolódik; galaktóz-aminil-ciklodextrinek, amelyekben a galaktóz-aminil-csoport a ciklodextringyűrű hidroxilcsoportjához β-kötéssel kapcsolódik, és e vegyületek sói. A találmány szerint ezen elágazó láncú ciklodextrineket enzimatikus reakció útján állítjuk elő.
A ciklodextrin (a továbbiakban CD) ciklusos dextrin, amely a-l,4-kötésekkel egymáshoz kapcsolt glükózokat tartalmaz. Ismertek 6, 7, illetve 8 glükózt tartalmazó α-, β- és γ-CD változatai. Az utóbbi időben előállítottak javított oldhatóságú elágazó láncú CDszármazékokat, amelyekben a-l,6-kötéssel helyettesítő, így glükozil- vagy maltozilcsoport van a CD-gyűrűhöz kötve.
Minthogy molekulán belüli hidrofób üreget tartalmaznak, az említett CD-k és az elágazó CD-származékok zárványkomplexeket alkothatnak, és ezért különféle olajos anyagokat képesek magukba felvenni. Ezen tulajdonságok alapján az említett és elágazó CD-k széles körben alkalmazást nyernek az élelmiszeripar, a kozmetikai ipar és a gyógyszeripar területén.
Különösen a gyógyszeripar területén érdemel figyelmet, hogy csekély oldhatóságú hatóanyagok oldhatósága elágazó láncú CD-kel komplex vegyületté alakítva megnövelhető, ezáltal a hatóanyagok biológiai hozzáférhetősége megnő.
Hatóanyagok káros mellékhatásainak csökkentésére számos vizsgálatot folytattak sajátos sejtfelismerő szacharidok tulajdonságai terén abból a célból, hogy hatóanyag-szállító rendszerekben a megcélzott sejtekhez hatóanyagok vivőanyagainak szenzoraiként használhatók legyenek. Különösen ismert a galaktóznak a máj szövetekhez mutatott affinitása, valamint az, hogy a mannóz affinitása a máj parenchyma sejtjeihez és nemparenchyma sejtjeihez és makrofágokhoz nagy.
Enzim átglikozilezését és kondenzációs reakcióját használva előállítottunk olyan galaktozil-CD-ket és mannozil-CD-ket, amelyekben a CD-gyűrű glükozilcsoportjához galaktozil- vagy mannozilcsoport van kötve. Ezenkívül előállítottunk olyan elágazó láncú galaktozil-CD-ket és mannozil-CD-ket, amelyekben az elágazó láncú CD-gyűrű oldalláncában a glükozilcsoporthoz galaktozil- vagy mannozilcsoport van kötve.
Az N-acetil-glükózamin és dezacetilezett származéka, a glükózamin azok a szacharidok, amelyek a rákok, homárok és hasonló állatok páncéljának alapvető komponensét jelentő kitint alkotják. Ezek azok az alapvető szacharidcsoportok, amelyek a sejtfelismerésben fontos szerepet játszó különböző szacharidok glükoláncait alkotják.
Hasonlóképpen az N-acetil-glükózamin egyik analógja, az N-acetil-galaktózamin is alapvető szacharidcsoport, amely a sejtfelismerésben fontos szerepet játszó különböző szacharidok glikoláncait alkotja.
CD-k zárványkomplexeit képezve és az N-acetíl-glükózaminok és glükózaminok fenti tulajdonságait hasznosítva kísérleteket tettünk a CD-gyűrűhöz kapcsolt Nacetil-glükóz-aminil-csoportot tartalmazó N-acetil-glükóz-aminil-CD-k előállítására azok hatóanyag-szállító rendszerekben történő alkalmazása és kevéssé oldható hatóanyagok szolubilizálása céljából.
Előzőleg megállapítottuk, hogy lizozin és egyéb Nacetil-glükózaminidázok hatékonyan alkalmazhatók Nacetil-kito-oligoszacharidokból a β-kötés átvitele útján az elágazó CD-gyűrű elágazó oldalláncában lévő hidroxilcsoporthoz kapcsolt N-acetil-glükóz-aminil-csoportot tartalmazó N-acetil-glükóz-aminil-(elágazó láncú)-CD-k előállítása során [8-325 304 (325 304/1996) számú japán közrebocsátást irat].
A fentiekben tárgyalt eljárás hátránya, hogy a szacharidot leadó anyagként használt N-acetil-kito-oligoszacharidok drágák.
Azonkívül - bár lizozin és az eljárásban használt egyéb N-acetil-glükózaminidáz kölcsönhatásba léphet az akceptorral - az N-acetil-glükóz-aminil-csoport az elágazó CD oldalláncához kapcsolódik, azok nem idézik elő ilyen N-acetil-glükóz-aminil-csoport közvetlen kapcsolódását nem elágazó láncú α-, β- és γCD-hez.
További kutatásaink során megállapítottuk, hogy az N-acetil-hexózaminidázok hatékonyan használhatók Nacetil-glükóz-aminil-CD vagy N-acetil-galaktóz-aminilCD N-acetil-glükózamin vagy N-acetil-galaktózamin és valamely CD keverékéből történő előállítása során. A találmány ezen a felismerésen alapszik.
A fentiek alapján a találmány tárgya eljárás elágazó láncú ciklodextrinek és sóik előállítására, amelyekben a ciklodextringyűrű hidroxilcsoportjához β-kötéssel kapcsolódó N-acetil-galaktóz-aminil-csoport, glükóz-aminil-csoport, N-acetil-galaktóz-aminil-csoport vagy galaktóz-aminil-csoport van.
A találmány szerinti eljárás abban áll, hogy ciklodextrint és N-acetil-glükózamint vagy N-acetil-galaktózamint tartalmazó oldatot egy N-acetil-hexózaminidázzal reagáltatunk, és kívánt esetben a kapott terméket dezacetilezzük.
A leíráshoz csatolt rajzok közül az 1. ábra az 1. példa szerinti reakcióelegy amid típusú oszlopon való átbocsátásakor felvett HPLC-diagramja.
A 2. ábra az 1. példa szerinti reakcióelegy fordított fázisú oszlopon való átbocsátásakor felvett HPLC-diagramja.
A 3. ábra az 1. példa szerinti A reakciótermék FAB-MS spektrumát mutatja.
A 4. ábra az 1. példa szerinti A reakciótermék 13C-NMR-spektrumát mutatja; az ábrán
- C CD-gyűrűt alkotó glükóz szénatomjától származójelet tüntet fel;
- C’ GlcNAc-hoz kapcsolt glükóz szénatomjától származó jelet tüntet fel;
HU 223 005 ΒΙ
- N GlcNAc oldallánc szénatomjától származó jelet tüntet fel.
Az 5. ábra a 2. példa szerinti reakcióelegy amid típusú oszlopon való átbocsátásakor felvett HPLC-diagramja.
A 6. ábra a 3. példa szerinti reakcióelegy amid típusú oszlopon való átbocsátásakor felvett HPLC-diagramja.
A 7. ábra a 4. példa szerinti reakcióelegy amid típusú oszlopon való átbocsátásakor felvett HPLC-diagramja.
A 8. ábra a 4. példa szerinti reakcióelegy fordított fázisú oszlopon való átbocsátásakor felvett HPLC-diagramja.
A 9. ábra a 4. példa szerinti G reakciótermék 13C-NMR-spektrumát mutatja; az ábrán
- C CD-gyűrűt alkotó glükóz szénatomjától származójelet tüntet fel;
- C’ GalNAc-hoz kapcsolt glükóz szénatomjától származó jelet tüntet fel;
- N GalNAc oldallánc szénatomjától származó jelet tüntet fel.
A továbbiakban a találmányt részletesen ismertetjük. A találmány szerinti eljárással előállítható valamennyi elágazó láncú CD új vegyület. E vegyületekre példaként felhozhatók többek között: 6-O-fl-D-N-acetilglükóz-aminil-oc-CD, 6-O-p-D-N-acetil-glükóz-amínilβ-CD, 6-O-P-D-N-acetil-glükóz-aminil-y-CD, ό-Ο-β-DN-acetil-galaktóz-aminil-oc-CD, 6-O-fl-D-N-acetilgalaktóz-aminil^-CD, 6-OJ-D-N-acetil-galaktózaminil-y-CD, 6-O^-D-glükóz-aminil-oc-CD, ό-Ο-β-Dglükóz-aminilJCD, ó-O-p-D-glükóz-aminil-y-CD, 6Ο-β-D-galaktóz-aminil-oc-CD, 6-O-fl-D-galaktóz-amiηϋ-β-CD, ó-O^-D-galaktóz-aminil-y-CD, 3-Ο-β-ϋ-Νacetil-glükóz-aminil-x-CD, 3-OJ-D-N-acetil-glükózaminil-p-CD, 3-O^-D-N-acetil-glükóz-aminil-y-CD, 3Ο-β-D-N-acetil-galaktóz-aminil-oc-CD, 3-OJD-N-acetil-galaktóz-aminilJ-CD, 3-O^-D-N-acetil-galaktózaminil-y-CD, 3-O^-D-glükóz-aminil-ac-CD, 3-Ο-β-ϋglükóz-aminil^-CD, 3-OJD-glükóz-aminil-y-CD, 3Ο-β-D-galaktóz-aminil-x-CD, 3-OJ-D-galaktóz-amiηϋ-β-CD, 3-OJD-galaktóz-aminil-y-CD, 2-Ο-β-ϋ-Νacetil-glükóz-aminil-oc-CD, 2-OJ-D-N-acetil-glükózaminil-fl-CD, 2-OJD-N-acetil-glükóz-aminil-y-CD, 2Ο-β-D-N-acetil-galaktóz-aminil-oc-CD, 2-O^-D-N-acetil-galaktóz-aminil-p-CD, 2-OJ-D-N-acetil-galaktózaminil-y-CD, 2-O^-D-glükóz-aminil-oc-CD, 2-Ο-β-ϋglükóz-aminil^-CD, 2-OJD-glükóz-aminil-y-CD, 2Ο-β-D-galaktóz-aminil-oc-CD, 2-OJD-galaktóz-amiηΐΙ-β-CD és 2-O-fl-D-galaktóz-aminil-y-CD.
Jellegzetes vegyületek szerkezeti képletét mutatják be az (1)-(12) általános képletek, ahol n értéke 5-től 7ig teqedő szám.
A találmány szerinti elágazó láncú CD-ket oly módon állítjuk elő, hogy ciklodextrint és N-acetil-glükózamint vagy N-acetil-galaktózamint tartalmazó oldatot egy N-acetil-hexózaminidázzal reagáltatunk, és kívánt esetben a kapott terméket dezacetilezzük.
A dezacetilezést bármilyen ismert eljárással lefolytathatjuk, így a terméket reagáltathatjuk lúgos oldattal [Sannan, T., Kurita, K., Iwakura, Y.: Makromol. Chem., 177, 3589-3600 (1976)], vagy kezelhetjük ioncserélő gyanta alkalmazásával.
Alapvetően bármilyen a-CD, β-CD és γ-CD használható a találmány szerinti eljárás kiindulási anyagaként. Alkalmazhatunk továbbá elágazó láncú helyettesítőt tartalmazó bármilyen CD-t, amely lehet glükozilCD, maltozil-CD, mannozil-CD vagy galaktozil-CD, amelyekben a helyettesítő a-l,6-kötéssel kapcsolódik a CD-gyűrű hidroxilcsoportjához. E vegyületek elegyét is alkalmazhatjuk.
Kívánatos, hogy a találmány megvalósításához használt N-acetil-glükózamin és N-acetil-galaktózamin nagy tisztaságú legyen. Alkalmazhatunk azonban oligoszacharidokat tartalmazó fenti vegyületeket is.
A találmány értelmében N-acetil-hexózaminidázként bármilyen enzimet alkalmazhatunk, feltéve, hogy az az N-acetil-glükózamint vagy N-acetil-galaktózamint és CD-t tartalmazó oldatra a két vegyület közötti kondenzációt kiváltva hat, vagy a hidrolízis ellenében azok reakcióját enzimatikusan katalizálja, és ezáltal az N-acetilglükóz-aminil- vagy N-acetil-galaktóz-aminil-csoportot β-kötéssel a CD-hez kapcsolva a kívánt N-acetil-glükóz-aminil-CD-t vagy N-acetil-galaktóz-aminil-CD-t eredményezi. Ilyen enzimekre példaként említhetők az N-acetil-hexózaminidázok, az N-acetil-glükózaminidázok és az N-acetil-galaktózaminidázok.
A találmányhoz használható ilyen enzimek széles körben előfordulnak a természetben. Többek között ismert növényi eredetű N-acetil-hexózaminidáz, amely babból (Canavalia ensiformis) extrahálható; állati eredetű N-acetil-glükózaminidáz, amely boqúveséből extrahálható, valamint a mikroorganizmuseredetű N-acetilglükózaminidáz, amelyet Aspergillus niger termel. Ismert továbbá állati eredetű N-acetil-galaktózaminidáz, amely trombitacsigából vonható ki, valamint a mikroorganizmuseredetű N-acetil-galaktózaminidáz, amely kinyerhető Acremonium mikrobákból.
A találmány szerinti reakcióelegyben kívánatos, hogy a CD-t és N-acetil-glükózamint vagy N-acetilgalaktózamint tartalmazó oldatban (vizes oldatban vagy szuszpenzióban) a CD-koncentráció 1 -40 tömeg%, míg az N-acetil-glükózamin vagy N-acetil-galaktózamin koncentrációja 5-50 tömeg% legyen. Az ilyen oldatban az N-acetil-glükózamin vagy N-acetil-galaktózamin CDhez viszonyított tömegaránya alkalmasan az 1/10-50/1, előnyösen az 1/1—5/1 tartományban van.
A reakcióelegy pH-ja 3 és 10 között, előnyösen 4 és 7 között van; a reakció hőmérséklete 20 °C és 70 °C között, előnyösen 40 °C és 60 °C között lehet.
A reakcióidővel szoros összefüggésben az enzim mennyiségét úgy választjuk meg, hogy a reakció 5-200 h, előnyösen 10-50 h alatt lejátszódjon, ezek az értékek azonban nem korlátozó jellegűek.
A dezacetilezést az előzőekben említett bármelyik eljárással lefolytathatjuk. így az N-acetil-glükóz-aminil-CD-t vagy N-acetil-galaktóz-aminil-CD-t kezelhetjük lúgos oldattal. E kezelés körülményeit illetően a szokásos eljárásokéra utalunk. A dezacetilezés reakcióelegyében az N-acetil-glükóz-aminil-CD vagy N-ace3
HU 223 005 Bl til-galaktóz-aminil-CD koncentrációja 0,1-50 vegyes%, előnyösen 0,5-10 vegyes% lehet.
A dezacetilezéshez használt lúgos oldat előnyösen nátrium-hidroxid-oldat, a találmány szerinti eljárás azonban nincs erre az anyagra korlátozva. Bármilyen lúgos kémhatású anyagot használhatunk, amellyel a szándékolt dezacetilezést lefolytathatjuk.
A reakció-hőmérséklet, valamint a lúgos oldat típusa és koncentrációja kölcsönösen befolyásolják egymást. Ezért - nem korlátozó jelleggel - 0,1-50 vegyes% koncentrációjú nátrium-hidroxid-oldatot, 10-100 °C reakció-hőmérsékletet és 0,1-120 h reakcióidőt alkalmazunk.
A dezacetilezést követően a reakcióelegyet hozzácsepegtetett savval semlegesítjük, majd sómentesítjük, és a kívánt terméket adott esetben tisztítjuk.
Az előzőekben ismertetett eljárás szerint kapott reakcióelegyet a termék ffakcionálására és tisztítására oszlopkromatográfiás vagy HPLC-eljárással kezeljük. A termék molekulatömegét FAB-MS, szerkezetét magmágnesesrezonancia- (NMR) eljárás útján határozzuk meg. Az eredmények igazolják, hogy a kapott termékek a fenti (1)-(12) általános képletű vegyületekhez hasonló elágazó láncú CD-k.
A következőkben a találmányt nem korlátozó jellegű példákkal szemléltetjük.
1. példa (1) Kondenzáltatás
1,11 g N-acetil-glükózamint és 1,22 g oc-CD-t tartalmazó 5 ml (5,0 pH-jú) 20 mmol/1 koncentrációjú citrátpufferhez 50 U babból kivont N-acetil-hexózaminidázt adunk, majd az elegyet 72 órán át 45 °C hőmérsékleten reagáltatjuk.
A reakcióelegy egy részét amid típusú oszlopon (Amidé-80 kereskedelmi nevű termék, gyártó cég: Toso Corp.) HPLC és fordított fázisú oszlopon (ODSAQ303 kereskedelmi nevű termék, gyártó cég: YMC Co.) lefolytatott kromatográfiás eljárással elemezzük. A kapott adatokat az 1. és 2. ábrákon tüntetjük fel.
A reakció lefolyása után az enzimet hőhatással inaktiváljuk, és a kapott oldatot fordított fázisú oszlopon lefolytatott HPLC útján kezeljük, ennek során 100 mg elsődleges A reakcióterméket és 5 mg másodlagos B reakcióterméket választunk el.
(2) Szerkezeti elemzés
A fenti (1) lépésben elválasztott elsődleges A termék FAB-MS elemzés útján megállapított molekulatömege 1175 (lásd a 3. ábrát). Az A termék 13C-NMR-elemzése azt mutatja, hogy a 6-0-P-D-N-acetil-glükóz-aminil-ocCD [az előzőekben említett (1) általános képletű vegyület, amely képletben n értéke 5], ahol az N-acetil-glükózaminil-csoport az oc-CD-gyűrű 6-os helyzetű primer hidroxilcsoportjához β-kötéssel kapcsolódik (lásd a 4. ábrát).
A másodlagos B termék FAB-MS elemzéssel megállapított molekulatömege 1175. A B termék egy kis hányadát (5,0 pH-jú) 20 mmol/1 koncentrációjú citrátpufferben feloldjuk, N-acetil-hexózaminidázzal kezeljük, majd HPLC útján elemezzük.
A fenti kezelés eredményeként a B termék 1:1 mólarányban N-acetil-glükózaminná és <x-CD-vé bomlik.
Ez igazolja, hogy a B termék olyan izomer [a fentiekben említett (5) vagy (9) általános képletű vegyület, amely képletben n értéke 5], amelyben az N-acetil-glükóz-aminil-csoport az oc-CD-gyűrű szekunder hidroxilcsoportjához β-kötéssel kapcsolódik.
2. példa (1) Kondenzáltatás
1,11 g N-acetil-glükózamint és 0,567 g β-CD-t tartalmazó 5 ml (5,0 pH-jú) 20 mmol/1 koncentrációjú citrátpufferhez 50 U az 1. példában használt N-acetil-hexózaminidázt adunk, majd az elegyet 72 órán át 45 °C hőmérsékleten reagáltatjuk. A reakcióelegy egy részét amid típusú oszlopon HPLC útján elemezzük. A kapott adatokat az 5. ábrán tüntetjük fel.
A reakció lefolyása után az enzimet hőhatással inaktiváljuk, és a kapott oldatot fordított fázisú oszlopon lefolytatott HPLC útján kezeljük, ennek során 40 mg elsődleges C reakcióterméket és 3 mg másodlagos D reakcióterméket választunk el.
(2) Szerkezeti elemzés
A fenti (1) lépésben elválasztott elsődleges C termék FAB-MS elemzés útján megállapított molekulatömege 1337. Az 1. példában közölt adatoknak megfelelően a C termék olyan vegyület [az előzőekben említett (1) általános képletű vegyület, amely képletben n értéke 6], ahol az N-acetil-glükóz-aminil-csoport a β-CDgyűrű 6-os helyzetű primer hidroxilcsoportjához βkötéssel kapcsolódik.
A másodlagos D termék FAB-MS elemzéssel megállapított molekulatömege 1337. A D termék egy kis hányadát (5,0 pH-jú) 20 mmol/1 koncentrációjú citrátpufferben feloldjuk, N-acetil-hexózaminidázzal kezeljük, majd HPLC útján elemezzük.
A fenti kezelés eredményeként a D termék 1:1 mólarányban N-acetil-glükózaminná és β-CD-vé bomlik. Ennek megfelelően az 1. példa adataira hivatkozva a D termék olyan vegyület [a fentiekben említett (5) vagy (9) általános képletű vegyület, amely képletben n értéke 6], amelyben az N-acetil-glükóz-aminil-csoport a βCD-gyűrű szekunder hidroxilcsoportjához β-kötéssel kapcsolódik.
3. példa (1) Kondenzáltatás
1,11 g N-acetil-glükózamint és 1,62 g γ-CD-t tartalmazó 5 ml (5,0 pH-jú) 20 mmol/1 koncentrációjú citrátpufferhez 50 U az 1. példában használt N-acetil-hexózaminidázt adunk, majd az elegyet 72 órán át 45 °C hőmérsékleten reagáltatjuk. A reakcióelegy egy részét amid típusú oszlopon HPLC útján elemezzük. A kapott adatokat a 6. ábrán tüntetjük fel.
A reakció lefolyása után az enzimet hőhatással inaktiváljuk, és a kapott oldatot fordított fázisú oszlopon lefolytatott HPLC útján kezeljük, ennek során 200 mg elsődleges E reakcióterméket és 6 mg másodlagos F reakcióterméket választunk el.
(2) Szerkezeti elemzés
A fenti (1) lépésben elválasztott elsődleges E termék FAB-MS elemzés útján megállapított molekulatö4
HU 223 005 Bl mege 1499. Az 1. példában közölt adatoknak megfelelően az E termék olyan vegyület [az előzőekben említett (1) általános képletű vegyület, amely képletben n értéke 7], ahol az N-acetil-glükóz-aminil-csoport a γ-CDgyűrű 6-os helyzetű primer hidroxilcsoportjához βkötéssel kapcsolódik.
A másodlagos F termék FAB-MS elemzéssel megállapított molekulatömege 1499. Az F termék egy kis hányadát (5,0 pH-jú) 20 mmol/1 koncentrációjú citrátpufferben feloldjuk, N-acetil-hexózaminidázzal kezeljük, majd HPLC útján elemezzük.
A fenti kezelés eredményeként az F termék 1:1 mólarányban N-acetil-glükózaminná és γ-CD-vé bomlik. Ennek megfelelően az 1. példa adataira hivatkozva az F termék olyan vegyület [a fentiekben említett (5) vagy (9) általános képletű vegyület, amely képletben n értéke 7], amelyben az N-acetil-glükóz-aminil-csoport a γCD-gyűrű szekunder hidroxilcsoportjához β-kötéssel kapcsolódik.
4. példa (1) Kondenzáltatás
1,11 g N-acetil-galaktózamint és 1,22 g oc-CD-t tartalmazó 5 ml (5,0 pH-jú) 20 mmol/1 koncentrációjú citrátpufferhez 50 U az 1. példában használt N-acetil-hexózaminidázt adunk, majd az elegyet 72 órán át 45 °C hőmérsékleten reagáltatjuk. A reakcióelegy egy részét amid típusú oszlopon és fordított fázisú oszlopon HPLC útján elemezzük. A kapott adatokat a 7. és 8. ábrákon tüntetjük fel.
A reakció lefolyása után az enzimet hőhatással inaktiváljuk, és a kapott oldatot fordított fázisú oszlopon lefolytatott HPLC útján kezeljük, ennek során 83 mg elsődleges G reakcióterméket és 5 mg másodlagos H reakcióterméket választunk el.
(2) Szerkezeti elemzés
A fenti (1) lépésben elválasztott elsődleges G termék FAB-MS elemzés útján megállapított molekulatömege 1175. A 13C-NMR-elemzés szerint a G termék olyan vegyület [az előzőekben említett (2) általános képletű vegyület, amely képletben n értéke 5], ahol az N-acetil-galaktóz-aminil-csoport az «-CD-gyűrű 6-os helyzetű primer hidroxilcsoportjához β-kötéssel kapcsolódik.
A másodlagos H termék FAB-MS elemzéssel megállapított molekulatömege 1175. A H termék egy kis hányadát (5,0 pH-jú) 20 mmol/1 koncentrációjú citrátpufferben feloldjuk, N-acetil-hexózaminidázzal kezeljük, majd HPLC útján elemezzük. A fenti kezelés eredményeként a H termék 1:1 mólarányban N-acetil-galaktózaminná és oc-CD-vé bomlik. Ez igazolja, hogy a H termék olyan vegyület [a fentiekben említett (6) vagy (10) általános képletű vegyület, amely képletben n értéke 5], amelyben az N-acetil-galaktóz-aminil-csoport az «-CD-gyűrű szekunder hidroxilcsoportjához β-kötéssel kapcsolódik.
5. példa
Az 1. példa szerint kapott 25 mg N-acetil-glükózaminil-oc-CD-t [a fenti (1) általános képletű vegyületet, amely képletben n értéke 5] 20 tömeg%-os nátrium-hidroxid-oldatban oldva 1 tömeg%-os oldatot állítunk elő, amelyet 80 °C hőmérsékleten 3 órán át reagáltatunk.
A reakció lefolyása után a reakcióelegyet cseppenként hozzáadott tömény sósavval semlegesítjük. Ezt követően a reakcióelegyet sómentesítjük, ehhez Microacilizer Gl típusú berendezést (gyártó cég: Asahi Chemical Industry Co.) használunk. Ennek során 20 mg dezacetilezett terméket, azaz olyan vegyületet kapunk, amelyben az oc-CD-gyűrű 6-os helyzetű hidroxilcsoportjához a glükóz-aminil-csoport β-kötéssel kapcsolódik [a fenti (3) általános képletű vegyület, amely képletben n értéke 5].
6. példa
A 4. példa szerint kapott 25 mg N-acetil-galaktózaminil-oc-CD-t [a fenti (2) általános képletű vegyületet, amely képletben n értéke 5] 20 tömeg%-os nátrium-hidroxid-oldatban oldva 1 tömeg%-os oldatot állítunk elő, amelyet 80 °C hőmérsékleten 3 órán át reagáltatunk.
A reakció lefolyása után a reakcióelegyet cseppenként hozzáadott tömény sósavval semlegesítjük. Ezt követően a reakcióelegyet sómentesítjük, ehhez Microacilizer Gl típusú berendezést (gyártó cég: Asahi Chemical Industry Co.) használunk. Ennek során 20 mg dezacetilezett terméket, azaz olyan vegyületet kapunk, amelyben az oc-CD-gyűrű 6-os helyzetű hidroxilcsoportjához a galaktóz-aminil-csoport β-kötéssel kapcsolódik [a fenti (4) általános képletű vegyület, amely képletben n értéke 5].
Amint a leírásban részletesen ismertettük, a találmány útján enzimatikus kondenzációt használva hatékonyan előállíthatok új elágazó láncú CD-k, amelyekben a CD-gyűrű hidroxilcsoportjához β-kötéssel N-acetil-glükóz-aminil-csoport vagy N-acetil-galaktóz-aminil-csoport kapcsolódik. Ezen elágazó láncú CD-k dezacetilezése hatásos eljárás, amellyel új elágazó láncú CD-ket kapunk, amelyekben a CD-gyűrű hidroxilcsoportjához βkötéssel glükóz-aminil- vagy galaktóz-aminil-csoport kapcsolódik.
A találmány szerinti ezen új, elágazó láncú CD-k várhatóan széles körben alkalmazhatók nemcsak a gyógyszeripar, hanem az élelmiszeripar és a kozmetikai ipar területén is.
A fenti leírásban a találmányt részletesen ismertettük jellegzetes kiviteli alakokra hivatkozva. Szakember azok számos módosítását és változatát valósíthatja meg anélkül, hogy a találmány szellemétől és oltalmi körétől eltérne.
Hivatkozásunk útján az 1996. július 11-én bejelentett 199 534/1996 számú japán szabadalmi bejelentés teljes terjedelmét beépítjük ezen leírásba.
Claims (8)
1. Eljárás elágazó láncú ciklodextrinek és sóik előállítására, ahol a ciklodextringyűrű hidroxicsoportjához β-kötéssel N-acetil-glükóz-aminil-csoport, glükóz-ami5
HU 223 005 Bl nil-csoport, N-acetil-galaktóz-aminil-csoport és/vagy galaktóz-aminil-csoport kapcsolódik, azzal jellemezve, hogy az α-, β- vagy γ-ciklodextrint és N-acetil-glükózamint vagy N-acetil-galaktózamint tartalmazó oldatot egy N-acetil-hexózaminidázzal reagáltatjuk, majd 5 kívánt esetben a kapott terméket dezacetilezzük.
2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az oldatban a ciklodextrin koncentrációja 1-40 tömeg%.
3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás, azzal jel- 10 lemezve, hogy az N-acetil-galaktózamin koncentrációja az oldatban 5-50 tömeg%.
4. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az N-acetil-glükózaminnak vagy N-acetil-galaktózaminnak a ciklodextrinhez viszonyított tömegaránya 1:10 és 50:1 közötti érték.
5. Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a reakcióelegy pH-ja 3 és 10 közötti érték.
6. Az 1-5. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a reakció hőmérséklete 20 °C és 70 °C közötti.
7. Az 1-6. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy elvégezzük a dezacetilezést.
8. A 7. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az N-acetil-glükózamin-ciklodextrin vagy N-acetil-galaktózamin-ciklodextrin dezacetilezését lúgos oldattal végezzük.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP19953496A JP3865436B2 (ja) | 1996-07-11 | 1996-07-11 | 分岐シクロデキストリンの製造方法 |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HU9701186D0 HU9701186D0 (en) | 1997-09-29 |
| HUP9701186A2 HUP9701186A2 (hu) | 1998-03-02 |
| HUP9701186A3 HUP9701186A3 (en) | 1999-04-28 |
| HU223005B1 true HU223005B1 (hu) | 2004-03-01 |
Family
ID=16409440
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU9701186A HU223005B1 (hu) | 1996-07-11 | 1997-07-11 | Eljárás elágazó láncú ciklodextrinek előállítására |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5763598A (hu) |
| EP (1) | EP0818469B1 (hu) |
| JP (1) | JP3865436B2 (hu) |
| KR (1) | KR100407043B1 (hu) |
| AU (1) | AU686535B1 (hu) |
| CA (1) | CA2210041C (hu) |
| DE (1) | DE69720604T2 (hu) |
| HU (1) | HU223005B1 (hu) |
Families Citing this family (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6683100B2 (en) | 1999-01-19 | 2004-01-27 | Novartis Ag | Organic compounds |
| US6194181B1 (en) | 1998-02-19 | 2001-02-27 | Novartis Ag | Fermentative preparation process for and crystal forms of cytostatics |
| JP4497592B2 (ja) * | 1999-09-10 | 2010-07-07 | 株式会社横浜国際バイオ研究所 | アミノ糖を分岐側鎖に有するシクロデキストリン、その製造法並びにその利用 |
| WO2002072594A1 (fr) | 2001-03-09 | 2002-09-19 | Kabushiki Kaisha Hayashibara Seibutsu Kagaku Kenkyujo | Tetrasaccharide cyclique ramifie et procede de production correspondant |
| DE10200405A1 (de) | 2002-01-08 | 2002-08-01 | Zimmer Ag | Spinnvorrichtung und -verfahren mit Kühlbeblasung |
| DE10204381A1 (de) | 2002-01-28 | 2003-08-07 | Zimmer Ag | Ergonomische Spinnanlage |
| FR2839313B1 (fr) * | 2002-05-03 | 2006-04-07 | Chelator | Nouveaux derives de cyclodextrines, leur procede de preparation et leurs applications |
| US6740509B2 (en) * | 2002-05-22 | 2004-05-25 | Ikuko Ishii Karakasa | Method for the production of mucin-type glycopeptide |
| US20070160593A1 (en) * | 2003-08-26 | 2007-07-12 | Seikagaku Corporation | Sugar chain-cleaving agent |
| DE102004024030A1 (de) | 2004-05-13 | 2005-12-08 | Zimmer Ag | Lyocell-Verfahren mit polymerisationsgradabhängiger Einstellung der Verarbeitungsdauer |
Family Cites Families (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS623795A (ja) * | 1985-06-28 | 1987-01-09 | Tokuyama Soda Co Ltd | 分枝状シクロデキストリンの製造方法 |
| DE3810737A1 (de) * | 1988-03-30 | 1989-10-12 | Macherey Nagel Gmbh & Co Kg | Substituierte cyclodextrine |
| AU7453191A (en) * | 1990-03-02 | 1991-09-18 | Australian Commercial Research & Development Limited | Cyclodextrin compositions and methods for pharmaceutical and industrial applications |
| DE4204315A1 (de) * | 1992-02-13 | 1993-08-19 | Consortium Elektrochem Ind | Cyclodextringlycoside und verfahren zu ihrer herstellung |
| JP3078923B2 (ja) * | 1992-04-08 | 2000-08-21 | 塩水港精糖株式会社 | 新規分岐シクロデキストリンおよびその製造方法 |
| FR2714067B1 (fr) * | 1993-12-22 | 1996-01-12 | Commissariat Energie Atomique | Nouveaux dérivés de cyclodextrines, utilisables en particulier pour solubiliser des composés chimiques hydrophobes tels que des médicaments, et leur procédé de préparation. |
| FR2715307B1 (fr) * | 1994-01-25 | 1996-04-05 | Commissariat Energie Atomique | Procédé de solubilisation dans un milieu aqueux d'agents antitumoraux de la famille du taxol, et cyclodextrines ramifiées utilisables pour cette solubilisation. |
| FR2716200B1 (fr) * | 1994-02-11 | 1996-04-26 | Commissariat Energie Atomique | Procédé de préparation de cyclomaltooligosaccharides ramifiés, en particulier de cyclodextrines ramifiées. |
| JPH07275698A (ja) * | 1994-04-06 | 1995-10-24 | Nakano Vinegar Co Ltd | クロマトグラフィー用または蛋白質固定化用担体 |
| JPH08173181A (ja) * | 1994-12-21 | 1996-07-09 | Ensuiko Sugar Refining Co Ltd | ヘテロ分岐シクロデキストリンの製造方法 |
| JP3816554B2 (ja) * | 1995-05-30 | 2006-08-30 | 塩水港精糖株式会社 | 新規分岐シクロデキストリンおよびその製造方法 |
-
1996
- 1996-07-11 JP JP19953496A patent/JP3865436B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
1997
- 1997-06-16 US US08/876,979 patent/US5763598A/en not_active Expired - Lifetime
- 1997-06-18 AU AU24977/97A patent/AU686535B1/en not_active Ceased
- 1997-06-30 KR KR1019970029294A patent/KR100407043B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1997-07-10 CA CA002210041A patent/CA2210041C/en not_active Expired - Fee Related
- 1997-07-10 DE DE69720604T patent/DE69720604T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1997-07-10 EP EP97111747A patent/EP0818469B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1997-07-11 HU HU9701186A patent/HU223005B1/hu not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| HUP9701186A3 (en) | 1999-04-28 |
| DE69720604D1 (de) | 2003-05-15 |
| HU9701186D0 (en) | 1997-09-29 |
| CA2210041A1 (en) | 1998-01-11 |
| EP0818469B1 (en) | 2003-04-09 |
| HUP9701186A2 (hu) | 1998-03-02 |
| KR980009285A (ko) | 1998-04-30 |
| JP3865436B2 (ja) | 2007-01-10 |
| JPH1025305A (ja) | 1998-01-27 |
| AU686535B1 (en) | 1998-02-05 |
| US5763598A (en) | 1998-06-09 |
| EP0818469A2 (en) | 1998-01-14 |
| CA2210041C (en) | 2005-07-05 |
| KR100407043B1 (ko) | 2004-05-31 |
| EP0818469A3 (en) | 1998-08-05 |
| DE69720604T2 (de) | 2003-12-04 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Monsan et al. | Enzymatic synthesis of oligosaccharides | |
| HU223005B1 (hu) | Eljárás elágazó láncú ciklodextrinek előállítására | |
| JP3078923B2 (ja) | 新規分岐シクロデキストリンおよびその製造方法 | |
| JP5054970B2 (ja) | 新規なシクロデキストリン誘導体、それらの製造方法、および薬理学的に活性な物質を可溶化するためのそれらの使用 | |
| EP0565106B1 (en) | Method of preparing branched cyclodextrin | |
| JP3816554B2 (ja) | 新規分岐シクロデキストリンおよびその製造方法 | |
| JP3122203B2 (ja) | 新規ヘテロ分岐シクロデキストリンおよびその製造方法 | |
| JP3552732B2 (ja) | 新規な分岐シクロデキストリン | |
| JP3086076B2 (ja) | 新規ガラクトシル−分岐シクロデキストリン | |
| JP2863262B2 (ja) | 分岐シクロデキストリンの側鎖部分にα―結合でガラクトシル基を転移結合させた新規ヘテロ分岐シクロデキストリン及びその製造方法 | |
| JP3655325B2 (ja) | マンノシル−シクロデキストリンの新規製造方法 | |
| JP2863263B2 (ja) | 分岐シクロデキストリンの側鎖部分にβ―結合でガラクトシル基を転移結合させた新規ヘテロ分岐シクロデキストリン及びその製造方法 | |
| JP3637086B2 (ja) | マンノシル−シクロデキストリンの製法 | |
| JP3637085B2 (ja) | マンノシル−シクロデキストリンの製造方法 | |
| JPH08173181A (ja) | ヘテロ分岐シクロデキストリンの製造方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| HFG4 | Patent granted, date of granting |
Effective date: 20031216 |
|
| MM4A | Lapse of definitive patent protection due to non-payment of fees |