HU211055B - Method for producing rebeccamycin analogs and pharmaceutical compositions containing them - Google Patents

Method for producing rebeccamycin analogs and pharmaceutical compositions containing them Download PDF

Info

Publication number
HU211055B
HU211055B HU91716A HU71691A HU211055B HU 211055 B HU211055 B HU 211055B HU 91716 A HU91716 A HU 91716A HU 71691 A HU71691 A HU 71691A HU 211055 B HU211055 B HU 211055B
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
preparation
compounds
priority
formula
cultured
Prior art date
Application number
HU91716A
Other languages
English (en)
Other versions
HU910716D0 (en
HUT61601A (en
Inventor
James Andrew Matson
Kin Sing Lam
Salvatore Forenza
Daniel R Schroeder
Jaqueline Mattei
Original Assignee
Bristol Myers Squibb Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Bristol Myers Squibb Co filed Critical Bristol Myers Squibb Co
Publication of HU910716D0 publication Critical patent/HU910716D0/hu
Publication of HUT61601A publication Critical patent/HUT61601A/hu
Publication of HU211055B publication Critical patent/HU211055B/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/044—Pyrrole radicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/26—Preparation of nitrogen-containing carbohydrates
    • C12P19/28—N-glycosides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Ceramic Products (AREA)

Description

A találmány tárgya eljárás az (I) képletű, tumorellenes rebekkamicin új analógjainak előállítására. Közelebbről a találmány tárgya eljárás a (Π) és (III) általános képletű - ahol X] és X2 jelentése egymástól függetlenül fluor- vagy hidrogénatom, feltéve, hogy egyidejűleg nem lehet mindkettő jelentése hidrogénatom rebekkamicin-analógok és gyógyászati szempontból alkalmazható sóik előállítására.
A 4 487 925 és a 4 552 842 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmak írják le a rebekkamicinnek (rebeccamycin) nevezett tumorellenes hatóanyagot, az 5'-metil és az 5',2',3,6-tetraacetát-származékait, illetve a rebekkamicin Nocardia aerocolonigenes, előnyösen a Nocardia aerocolonigenes ATCC 39 243 törzs vagy annak rebekkamicint termelő mutánsának asszimilálható szén- és nitrogénforrást tartalmazó vizes tápközegben, süllyesztett aerob tenyésztésével történő előállítását. Újabban a Nocardia aerocolonigenes ATCC 39 243 törzset Saccharothrix aerocolonigenes ATCC 39 243 törzsnek határozták meg [Bush és munkatársai, J. Antibiotics, 40: 668-678 (1987)]. A fermentáció főterméke az (I) képletű rebekkamicin.
A (II) és (III) általános képletű vegyületeket úgy állítjuk elő, hogy a rebekkamicint termelő Saccharothrix aerocolinigenes törzset a megfelelő triptofán-analóg jelenlétében tenyésztjük.
Felismertük, hogy ha a 4 487 925 és a 4 552 842 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalomban leírt fermentációt bizonyos triptofán-analógok jelenlétében végezzük, értékes, tumorellenes hatású rebekkamicin-analógokhoz jutunk. Ezeket a (II) és a (III) általános képlettel - ahol X, és X2 jelentése fluor- vagy hidrogénatom, feltéve, hogy X, és X2 jelentése egyidejűleg nem hidrogénatom - írhatjuk le.
A jelen találmány szerinti előnyös vegyületeket a (IV), (V), (VI), (VII), (VIII), (IX), (X) és (XI) képletű termékek.
A találmány szerinti eljárásban triptofán-analógot adunk a rebekkamicin fermentációs közegéhez, ami beépülve a rebekkamicin szerkezetébe a megfelelő rebekkamicin-analógot eredményezi.
A (IV)-(IX) képletű vegyületeket úgy állítjuk elő, hogy a rebekkamicint termelő Saccharothrix aerocolonigenes törzset DL-4-fluor-triptofán, DL-5-fluor-triptofán, DL-6-fluor-triptofán vagy DL-7-fluor-triptofán jelenlétében tenyésztjük. Az előnyös törzs a Saccharothrix aerocolinigenes, ami a 4 487 925 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalomban Nocardia aerocolonigenes C 38 383-RK-2 (ATCC 39 243) törzsként szerepel. Ezt a törzset egy Panamában gyűjtött talajmintából izolálták. A C 38 383-RK-2 törzset az Amerikai Torzsgyűjteményben helyezték el (American Type Culture Collection, Rockville, Maryland) ATCC 39 243 számon 1987-ben. A C 38 383-RK-2 törzset liofilizáló csövekben és mélyhűtve a BristolMyers Squibb Co. Pharmaceutical Research and Development Division Culture Collection-ban is elhelyezték (5 Research Parkway, Wallingford, Connecticut 06492).
A C 38 383-RK-2 (ATCC 39 243) törzs rendszertani leírását részletesen a 4 487 925 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalomban és a J. Antibiotics, 40: 668-678 (1987) cikkben találjuk meg. A törzs új rendszertani neve Saccharothrix aerocolonigenes lett.
Nyilvánvaló, hogy a találmány nem korlátozódik kizárólag a különösen előnyös ATCC 39 243 törzsre vagy annak leírásával megegyező mikroorganizmusokra, hanem kiterjed különösen azokra a rebekkamicint termelő törzsekre vagy mutánsokra, amelyeket a szokásos eljárásokkal - röntgen-besugárzás, UV-kezelés, nitrogén-mustárral való kezelés, fágkezelés stb. - állíthatunk elő.
A találmány gyakorlati kivitelezésekor a C 3 883— RK-2 (ATCC 39 243) törzs tulajdonságaival rendelkező törzset vagy annak mutánsát vagy variánsát olyan szokásos vizes tápközegben tenyésztjük, ami megfelelő triptofán-analógot tartalmaz. A (VI) és (X) vegyületek optimális termeléséhez a táptalajt DL-4-fluor-triptofánnal kell kiegészíteni. A (IV) és (IX) vegyületek előállításához DL-5-fluor-triptofánt, az (V) és (VIII) vegyületek előállításához DL-6-fluor-triptofánt és a (VII) és (XI) vegyületek előállításához DL-7-fluortriptofánt adunk a táptalajhoz. A mikroorganizmust az Aotinomycetes-ek tenyésztéséhez használt ismert táptalajkomponensű közegben tenyésztjük. Ezek szerint a táptalaj szénforrásként szacharózt, laktózt, glükózt, ramnózt, fruktózt, glicerint vagy oldható keményítőt tartalmazhat. Az asszimilálható nitrogénforrások halliszt, pepton, földimogyoróliszt, gyapotmagliszt, kukoricalekvár, aminosavak vagy ammóniumsók lehetnek. A táptalaj szervetlen sókat is tartalmazhat, melyek nátrium-. kálium-, ammónium-, kalcium-, foszfát-, szulfát-, nitrát-, karbonátionokat szolgáltatnak. Ha szükséges nyomelemeket - réz, mangán, vas, cink stb. - is adhatunk a táptalajhoz, vagy ezeket az elemeket a táptalaj alkotórészei szennyezésként tartalmazzák. A nagyobb mennyiségű antibiotikum előállításához süllyesztett aerob tenyészetet használunk, noha kisebb mennyiség előállítása felszíni kultúrákban és üveg edényekben is történhet. Az Aktinomycetes-ek tenyésztéséhez használt általános eljárások a jelen találmányhoz is alkalmazhatók.
Az antibiotikum tenyésztése bármely hőfokon történhet, ahol a mikroorganizmus növekszik, azaz 1839 °C-on, előnyösen 28 ’C hőmérsékleten. A fermentációt végezhetjük edényekben, laboratóriumi körülmények között vagy különféle méretű ipari fermentorokban.
Ha tankfermentációt alkalmazunk, kívánatos a tápközegben vegetatív oltóanyagot készíteni egy kisebb térfogatú táptalajt beoltva ferdeagaros tenyészettel, mélyhűtött állapotban tartott tenyészettel vagy a termelő mikroorganizmus fagyasztva szárított kultúrájával. Az életképes, aktív oltóanyagot aszeptikus körülmények között bevisszük a termelő táptalajjal megtöltött fermentorba. Az oltóanyag elkészítéséhez és a termeléshez használt tápközeg összetétele lehet azonos vagy különböző. A termelő táptalajt a megfelelő fluor-triptofánnal egészítjük ki. A kevertetés mechanikus keverőlapátokkal oldható
HU 211 055 Β meg. Ha szükséges, habzásgátlót - sertészsír vagy szilikonolaj - adhatunk a fermentléhez. Az antibiotikum termelődését HPLC analízissel vagy a szokásos biológiai vizsgálattal követhetjük nyomon. Az antibiotikum optimális termelése általában hat napig tart.
Az így kapott származékok kinyerése és tisztítása a szokásos kromatográfiás eljárásokkal történik.
A (IV) képletű vegyület fizikai és kémiai tulajdonságai:
Megjelenés: élénksárga, amorf szilárd anyag. Molekulaképlet: C26H19F2N3O7 Molekulasúly: 523,454
Tómegspektrum: Kratos MS 25 tömegspektrométer.
FABMS 524 (M++H)+, 361 (M-152, glükóz nélkül). UV-spektrum: Hewlett Packard 845 A diódé array spektrométer. Koncentráció: 1,0 mg/100 ml metanolban.
Semleges (E 1%/1 cm): 405, 322 (457), 288, 259, 230 (348) nm.
IR-spektrum: Perkin Elmer 1800 FTIR spektrométerKBr pasztillában: 3340, 2915, 1752, 1708, 1628, 1591. 1484, 1462, 1392, 1331, 1292, 1247, 1191, 1112,1081,1052,947,904,795,762, 752,511 cm-'.
'H-NMR-spektrum, 360 MHz: Bruker Model AM3000 spektrométer d6-DMSO-ban: 11,76 (s, 1H), 11,23 (s, 1H), 8,85 (dd, 1H), 8,77 (dd, 1H), 8,01 (dd, 1H), 7,68 (dd, 1H), 7,46 (m, 2H), 6,29 (d, 1H), 6,12 (t, 1H), 5,45 (d, 1H), 5,17 (d, 1H), 4,95 (d, 1H), 4,07 (d, 1H), 3,95 (m, 2H), 3,81 (d, 1H), 3,59 (m, 2H) ppm.
13C-NMR-spektrum. 90 MHz: Bruker Model AM3000 spektrométer d6-DMSO oldószerben: 170,9, 170,8. 157,0 (d), 157,0 (d), 138,6, 137,2, 130,7, 129,2, 121,7 (d), 121,4 (d), 121,3, 119,6, 116,6, 115,1, 115,0 (d), 114,6 (d), 113,3 (d), 113,2 (d), 109,1 (d), 109,1 (d), 84,8, 78,7, 76,5, 73,2, 67,6, 58,3 ppm.
Oldékonyság: oldódik dimetil-szulfoxidban (DMSO), dimetil-formamidban (DMF), tetrahidrofuránban (THF), acetonban, etil-acetátban, metanolban.
Vékonyréteg-kromatográfia: R7-értékek. Normál fázisú (szilikagél 60); etil-acetát: 0,10; etil-acetát/metanol 9:1 (térf.): 0,41; Fordított fázisú (C18); 0,1 M ammónium-acetát/metanol/acetonitril, 2:4:4 (térf.): 0,67.
(V) képletű vegyület fizikai és kémiai tulajdonságai:
Megjelenés: élénksárga, amorf szilárd anyag. Molekulaképlet: G2&H|9F2N3O7 Molekulasúly: 523,454
Tömegspektrum: Kratos MS25 tömegspektrométer. FABMS 524 (M+H)+, 361, (M-162, glükóz nélkül).
UV-spektrum: Hewlett Packard 8452A diódé array spektrométer.
Koncentráció: 1,0 mg/100 ml metanol. Neutrális (E: 1%/cm): 398 (60), 280 (259), 256 (313), 226 (526), 204 (497) nm.
IR-spektrum: Perkin Elmer 1800 FTIR spektrométer; KBr pasztillában: 3324, 2938, 1747, 1703, 1623,
1580, 1491, 1471, 1452, 1412, 1384, 1330, 1233, 1172, 1140, 1116, 1087, 1054, 963, 918, 828, 764, 649, 635,618,498 cm*1.
’H-NMR, 360 MHz: Bruker Model AM-3000 spektrométer d6-DMSO oldószerben: 11,77 (s, 1H), 11,18 (s, 1H), 9,12 (dd, 1H), 9,05 (dd, 1H), 7,85 (dd, 1H), 7,43 (t, 2H),6,26(d, lH),6,24(s, 1H), 5,31 (d, 1H), 5,04 (d, 1H), 3,98 (m, 2H), 3,87 (m, 1H), 3,66 (s, 2H) ppm.
13C-NMR, 90 MHz: Bruker Model AM-3000 spektrométer d6-DMSO oldószerben: 170,8, 170,7, 161,8 (d), 161,8 (d), 143,2 (d), 141,5 (d), 130,1, 128,7, 126,0 (d), 125,9 (d), 120,9, 119,3, 118,2, 118,1,
117.7, 116,5, 108,8 (d), 108,6 (d), 98,9 (d), 98,3 (d),
84.7, 78,6, 76,5, 73,1,67,5, 58,3 ppm.
Oldhatóság: oldódik DMSO-ban, DMF-ban, THF-ban, metanolban, acetonban, etil-acetátban.
Vékonyréteg-kromatográfia, Rrértékek: normál fázisú (szilikagél 60): etil-acetát: 0,40; etil-acetát/metanol, 9:1 (térf.): 0,63; fordított fázisú (C18). 0,1 M ammónium-acetát/metanol/acetonitril, 2:4:4 (térf.): 0,60. VIII. képletű vegyület fizikai és kémiai tulajdonságai: Megjelenés: élénksárga, amorf szilárd anyag. Molekulaképlet: C27H2]F2N3O7
Molekulasúly: 537,481
Tómegspektrum: Krats MS25 tömegspektrométer. FABMS 538 (M+H)+, 361 (M-176), 4-0-metil-glükóz nélkül).
UV-spektrum: Hewlett Packard 8452A diódé array spektrométer. Koncentráció 1,2 mg/100 ml metanol. Neutrális (E 1%/1 cm): 398 (103), 316 (1050), 280 (387), 256 (454), 226 (780) nm.
IR-spektrum: Perkin Elmer 1800 FTIR spektrométer. KBr pasztillában: 3324, 2938, 1747, 1703, 1623, 1580, 1491. 1471, 1452, 1412, 1384, 1330, 1233, 1172, 1140, 1116, 1087, 1054, 963, 918, 828, 764, 649, 635,618,498 cm*1.
’H-NMR, 360 MHz: Bruker Model AM-3000 spektrométer. d6-DMSO oldószerben: 11,77 (s, 1H), 11,18 (s, 1H), 9,12 (dd, 1H), 9,05 (dd, 1H), 7,88 (dd, 1H), 7,41 (dd, 1H), 7,23 (m, 2H), 6,25 (d, 1H), 6,24 (s, 1H), 5,36 (dd, 1H), 5,31 (d, 1H), 5,04 (d, 1H), 3,97 (m, 2H), 3,60-3,95 (m, 4H) ppm.
13C-NMR, 90 MHz: Bruker Model AM-3000 spektrométer. d^-DMSO oldószerben: 170,8, 170,7, 161,8 (d), 161,7 (d), 143,1 (d), 141,5 (d), 130,1, 128,7, 126,0 (d), 125,9 (d), 120,9, 119,4, 118,2, 118,1,
117.7, 116,5, 108,8 (d), 108,6 (d), 98,7 (d), 98,3 (d), 84,4, 77,2, 77,2, 76,2, 73,2, 59,9, 58,5 ppm.
Oldékonyság: oldódik DMSO-ban, DMF-ben, THFben, acetonban, etil-acetátban, metanolban.
Vékonyréteg-kromatográfia: Rrértékek: normál fázisú (szilikagél 60); etil-acetát: 0,72; etil-acetát/metanol, 9:1 (térf.): 0,89; fordított fázisú (C18); 0,1 M ammónium-acetát/metanol/acetonitril, 2:4:4 (térf.): 0,59. A találmány példavegyületeinek in vivő tumorellenes hatását transzplantált egér P388 leukémiával szemben vizsgáljuk (1—III. táblázat). CDF, egérbe intraperitoneálisan 106 P388 leukémia sejtet ültetünk. A sejteket az egérfélék transzplantálható leukémiáját hordozó DBA/2 do3
HU 211 055 Β nor egérből nyerjük. A tumor beültetése utáni első napon a CDF) egereket intraperitoneálisan sóoldattal (kontroll állatok) vagy a (IV), (V) vagy (VIII) képletű hatóanyagokat tartalmazó készítményekkel kezeljük. Az állatokat naponta megvizsgáljuk és feljegyezzük a pusztulásukat. A hatóanyag toxicitásának jellemzéséül mindegyik csoportnál meghatározzuk a testsúly átlagos változását (a leukémia beültetésétől a kezelés utolsó napjáig számítva). Mindegyik csoportnál feljegyezzük a tumorbeültetés utáni 5. napon az életben lévő egerek számát, mint a hatóanyag-toxicitás további jellemzőjét. Nem beszélünk terápiás eredményről, ha a kezelt csoportból az 5. napra egynél több állat elpusztul. Mindegyik kezelt csoport 4-6 állatból áll, a kontrollcsoport 10 egeret tartalmaz. Ugyancsak feljegyezzük - ha van ilyen - a 30. napot (a kísérlet utolsó napját) túlélő egerek számát.
A terápiás hatást úgy fejezzük ki, hogy meghatározzuk a (IV), (V) vagy (VIII) vegyülettel kezelt egerek átlagos túlélési idejét a párhuzamos kontroll állatokhoz viszonyítva. A kezelt állatok átlagos túlélési idejét osztva a kontroll állatok túlélési idejével és a kapott értékeket szorozva százzal, megkapjuk az ún. T/C százalékot (kezelt/kontroll). Amennyiben ez az érték >125% az eredményt pozitívnak tekintjük és az élethossz megnövekedéséről beszélünk.
Amint azt az I. táblázat adatai mutatják, a (IV) vegyület hatásos a P388 leukémiával szemben 1090 mg/kg dózistartományban. A legjobb eredményt 30 mg/kg dózisnál érjük el, ahol a T/C-érték 175%. Toxicitást még a vizsgált legmagasabb dózisnál (90 mg/kg) sem tapasztalunk.
A II. táblázat adatai szerint az (V) vegyület ugyancsak hatásos a P388 leukémiával szemben 0,8102,4 mg/kg dózistartományban. A legjobb hatást a
102,4 mg/kg dózisnál érjük el, ahol a T/C-érték 178%. Toxicitást még a megvizsgált legmagasabb dózisnál (102,4 mg/kg) sem tapasztalunk.
A III. táblázat adatai a (VIII) vegyület P388 leukémiával szembeni hatásosságot bizonyítja 0,8102,4 mg/kg dózistartományban. A legjobb eredményt 51,2 mg/kg dózisnál érjük el, ahol a T/C-érték 206%. Toxicitást a legmagasabb megvizsgált dózisnál (102,4 mg/kg) sem észlelünk.
/. táblázat
A (IV) vegyület hatása a P388 leukémiára3 (1 napos kezelés)
Dózis, ip· Átlagos túlélési idő (nap) T/C % Átlagos testsúly- változás (g) Élő állatok száma
5. nap 10. nap
90 16,5 165 -0,9 4/4 0/4
30 17,5 175 0,6 4/4 0/4
10 14,5 145 0,7 4/4 0/4
Kontroll 10,0 100 10/10 0/10
a Az egerekbe ΙΟ6 P388 leukémia sejtel ültettünk be, a (IV) vegyülettel való kezelés egy nappal később kezdődik. A kontrol) állatokba sóoldatot injektálunk.
II. táblázat
Az (V) vegyület hatása a P388 leukémiára3
Dózis, >P· Átlagos túlélési idő (nap) T/C % Átlagos testsúly- változás (g) Élő állatok száma
5. nap 10. nap
102,4 16,0 178 -0,1 6/6 0/6
51,2 15,0 167 -0,2 6/6 0/6
25,6 14,5 161 -0,2 6/6 0/6
12,8 15,0 167 0,8 6/6 0/6
6,4 15,0 167 -1,1 6/6 0/6
3,2 14,0 156 0,0 6/6 0/6
1,6 14,0 156 -0,7 6/6 0/6
0,8 13,0 144 0,1 6/6 0/6
Kontroll 9,0 100 1,3 10/10 0/10
a Az egerekbe ΙΟ6 P388 leukémia sejtet ültettünk be, az (V) vegyülettel való kezelés egy nappal később kezdődik. A kontroll állatokba sóoldatot injektálunk.
///. táblázat
A (Vili) vegyület hatása P388 leukémiára3
Dózis, iP· Átlagos túlélési idő (nap) T/C % Átlagos testsúly- változás (g) Élő állatok száma
5. nap 10. nap
102,4 14,5 161 0,2 6/6 0/6
51,2 18.5 206 0,3 6/6 0/6
25,6 14,0 156 0,1 6/6 0/6
12,8 14,5 161 -0,1 6/6 0/6
6,4 16.0 178 0,1 6/6 0/6
3,2 16.5 183 -0,3 6/6 0/6
1,6 14,0 156 -0,1 6/6 0/6
0,8 14,0 156 -0,4 6/6 0/6
Kontroll 9,0 100 1,3 10/10 0/10
a Az egerekbe ΙΟ6 P388 leukémia sejtet ültettünk be, a (Vili) vegyülettel való kezelés egy nappal később kezdődik. A kontroll állatokba sóoldatot injektálunk.
A találmány oltalmi köre kiterjed azoknak a gyógyszerkészítményeknek az előállítására is, melyek a találmány szerinti rebekkamicin-analógot vagy annak gyógyászati szempontból alkalmazható savaddíciós sóját hatásos tumorgátló mennyiségben tartalmazzák hatóanyagként a gyógyászati szempontból alkalmazható vivőanyagok vagy hígítók mellett.
Foglalkozik továbbá a találmány azzal az eljárással, mely rosszindulatú tumorok kezelésére alkalmazható (elsősorban emlősöknél). Az eljárás abból áll, hogy a beteg szervezetbe az antibiotikum vagy gyógyászati szempontból alkalmazható savaddíciós sójának tumorgátló mennyiségét juttatjuk be.
A készítmények lehetnek orális adagolásra szánt szi4
HU 211 055 Β lárd állapotban - például tabletta, kapszula, pirula, por, granulátum - vagy folyékony állapotban szájon át való adagoláshoz - például oldat, szuszpenzió, szirup, elixír vagy parenterális bejuttatáshoz, például steril oldat, szuszpenzió vagy emulzió alakjában. Előállítható a készítmény olyan steril szilárd formában is, melyet közvetlenül a felhasználás előtt steril vízben, fiziológiás sóoldatban vagy más steril injektálható közegben oldunk.
A rebekkamicin-analóg tényleges dózisa függ a felhasználandó vegyülettől, a készítménytől, az alkalmazás módjától, a kezelendő betegségtől, a beteg állapotától. A szakemberek előtt ismeretesek azok a tényezők, melyek a dózis nagyságát befolyásolják, így például a beteg kora, testsúlya, neme, étrendje, az adagolás időtartama, a kiürülés sebessége, a beteg állapota, gyógyszerkombinációk, érzékenység, a betegség súlyossága. Az adagolás történhet folyamatosan vagy periodikusan figyelembe véve a maximálisan elviselhető dózist. Az optimális adagolás sebességet a szakember könnyen megállapíthatja a szokásos dozírozási vizsgálatok segítségével.
Az elmondottak szemléltetésére az alábbiakban példákat adunk meg. A példák kizárólag szemléltető célzatúak és a találmány oltalmi körét nem korlátozzák.
1. példa
Mélyhűtve tartott Saccharothrix aemcolonigenes
C 38 383-RK-2 (ATCC 39 243) tenyészet
A Saccharothrix erocolonigenes C 38 383-RK-2 törzset -80 °C hőmérsékleten tartjuk Revco mélyhűtőben. A mélyhűtőben való tartáshoz a C 38 383-RK-2 törzset kémcsőben lévő ferdeagarra oltjuk be. A ferdeagar összetétele;
dextróz 4,0 g
élesztőkivonat 4,0 g
malátakivonat 10,0 g
kalcium-karbonát 1,5 g
agar 15 g
ionmentes vízzel feltöltve 1 literre.
A ferdeagaros csövet 28 °C hőmérsékleten tartjuk
7-10 napon át. A vegetatív tenyészet előállításához a ferdeagar felületéről a tenyészetet 500 ml Erlenmeyer lombikban lévő 100 ml steril tápközegbe visszük. A vegetatív tenyészet tápközegének összetétele;
Cerelose (Corn Products) 30 g
Pharmamedia (Traders Oil Mill Co.) 10 g
Nutrisoy (Archer Daniels Midland
Co.) 10g
Kálium-karbonát 3g
ionmentes vízzel felöltve 1 literre.
A vegetatív tenyészetet 28 ’C hőmérsékleten rázatjuk körkörös rázógépen 250 percenkénti fordulatszámmal 48 órán át. A vegetatív tenyészetet azonos térfogatú védőoldattal keveijük össze, melynek összetétele: szacharóz lOOg glicerin 200 g ionmentes vízzel felöltve 1 literre.
4-4 ml-t ebből a keverékből átviszünk steril kriogén csőbe (5 ml térfogatú, Corning), és szárazjeges acetonban lefagyasztjuk. A lefogyasztott vegetatív tenyészetet -80 ’C hőmérsékleten tartjuk Revco mélyhűtőben.
2. példa
Vegetatív Saccharothrix aerocolonigenes
C 38 383-RK-2 (ATCC 39 243) tenyészet előállítása ml mélyhűtve tartott tenyészetet 500 ml-es Erlenmeyer lombikba viszünk, ami 100 ml steril táptalajt tartalmaz. A táptalaj összetétele megegyezik az 1. példában a vegetatív tenyészet elkészítéséhez használt táptalaj összetételével. A vegetatív tenyészetet körkörös rázógépen rázatjuk 250 percenkénti fordulatszámmal 28 ’C hőmérsékleten 48 órán át.
3. példa (IV) képletű vegyület előállítása
A 2. példában leírtak szerint nyert vegetatív tenyészet 3 milliliterével beoltunk egy 500 ml-es Erlenmeyer lombikban lévő 100 ml termelő táptalajt, melynek összetétele:
Staclipse J-UB keményítő (A. E. Staley) 10 g kálium-dihidrogén-foszfát 2 g magnézium-szulfát 1 g
L-treonin 2,5 g kalcium-karbonát 2 g ionmentes vízzel feltöltve 1 literre.
A termelő tenyészetet 28 ’C hőmérsékleten rázatjuk körkörös rázógépen percenként 250-es fordulatszámmal, 48 órás fermentálás után DL-5-fluor-triptofánt adunk a tenyészethez 1 mg/ml végkoncentrációban. A tenyészetet 28 ’C hőmérsékleten inkubáljuk és rázatjuk 250 percenkénti fordulatszámmal 4 napon keresztül. A (IV) képletű vegyület termelődését HPLC analízissel követjük nyomon. Az optimális 23-32 mg/ml koncentrációt általában a 6. napon érjük el (azaz 4 nappal a DL-5-fluor-triptofán hozzáadása után).
4. példa (V) és (Vili) képletű vegyület előállítása A 2. példában leírtak szerint nyert vegetatív tenyészet 3 milliliterével beoltunk egy 500 ml-es Erlenmeyer lombikban lévő 100 ml termelő táptalajt, melynek összetételét a 3. példában ismertettük. A termelő tenyészetet 28 ’C hőmérsékleten inkubáljuk és rázatjuk percenként 250 fordulatszámmal. 48 órás fermentálás után DL-6-fluor-triptofánt adunk a tenyészethez 1 mg/ml végkoncentrációban. A tenyészetet 28 ’C hőmérsékleten inkubáljuk és 250 percenkénti fordulatszámmal rázatjuk 4 napon át. Az (V) és (VIII) vegyületek termelődését HPLC analízissel követjük nyomon. Az (V) és (VIII) vegyület optimális 36-58 pg/ml, illetve 31-42 pg/ml koncentrációját általában a fermentáció 6. napján (azaz a DL-6-fluor-triptofán adagolását követő 4. napon) érjük el.
5. példa
A (ÍV), (V) és (Vili) képletű vegyületek kinyerése és tisztítása
a) Általános módszerek
Használat előtt az oldószereket nem desztilláljuk. A metanol, aceton, etil-acetát, izopropil-éter, kloroform,
HU 211 055 Β tetrahidrofurán, etil-éter és hexán ÁCS reagens tisztasági fokú. A HPLC-hez használt vizet Barnstead Nanopure II készüléken ionmentesítjük. A HPLC-hez használt tetrahidrofurán, metanol és acetonitril B&J Brand HPLC minőségű oldószer. Az ammónium-acetát Fisher HPLC minőségű.
A normál fázisú vékonyréteg-kromatográfiát (TLC) Silicagel 60, F-254 lemezen végezzük (EM Reagensts, Cat.# 5765, 5x10 cm, 0,25 mm vastagságú). A fordított fázisú TLC-hez Whatman MKClg lemezeket használunk (Cat.# 4803-110, 0,2 mm vastagságú). A lemezeket tetővel ellátott Whatman hengeres kádakban fejlesztjük ki 10 ml eluensben. A rebekkamicin-analógok normál fénynél sárga fotókként láthatók, 254 és 366 nm-es ultraibolyafényben sárgán fluoreszkálnak.
A teljes fermentléhez Dicalite (Gregeo Inc., USA) szűrési adalékot adunk. Rövid kevertetés után a fermentlevet vagy Buchner-tölcséren vagy Tolhurst-féle centrifugális szűrőberendezésben (Model, B15, Ametek, Inc.) szűrjük. A szűrletet eldobjuk. A kiszűrt micéliumot tetrahidrofuránban vagy tetrahidrofurán/aceton elegyében kevertetjük egy órán át, szűrjük és a Dicalite-t addig áztatjuk további acetonban, amíg az UVfényben sárgán már nem fluoreszkál. Az egyesített szűrleteket csökkentett nyomáson bepároljuk nyers extraktumot nyerve.
A vákuum-folyadékkromatográfiás (VLC) készülék egy M porozitású, beépített, zsugorított üvegszűrőt tartalmazó Buchner-tölcsérből (Kontes, Art.# K-954 100) áll, ami egy oldalágon csatlakozik a vákuumhoz és lent egy 24/40 csatlakozáson keresztül a szedőedényhez. Először a legkevésbé poláris eluáló oldószert szívjuk vákuummal keresztül egy 5 cm vastag tömör adszorbenságyat képezve. A szétválasztandó anyagot előadszorbeáljuk az adszorbensre és zagyként visszük a tölcsérre, vagy a legkevésbé poláris oldószerben oldva visszük fel. Lépcsőzetes gradiens elúciót alkalmazunk, ahol növekvő polaritással, előre meghatározott térfogatú oldószerekkel eluálunk. Minden eluensadag után szárazra szívatjuk a tölcsért. Az egyes frakciókat betöményítjük és a TLC analízis eredményei alapján egyesítjük.
A méret-kizárásos kromatográfiához használt készülék alkotórészei: oldószerellenálló teflonnal és tányérokkal ellátott Glenco oszlop (2,5x100 cm); Fluid Metering, Inc., FMI laboratóriumi pumpa (Model RPG150); Glenco üveg szedőedény (500 ml); Isco Model 328 frakciószedő. Az oszlopokat az eluensben előduzzasztott Sephadex LH-20 (Pharmacia) töltettel töltjük. Az oldószert lefelé menő irányban visszük az oszlopra a laboratóriumi pumpával beállított sebességgel.
A félpreparatív HPLC rendszer alkotórészei: Waters Associates Model 590 Solvent Delivery System pumpa; Knauer model 87 detektor, változtatható hullámhosszú; Waters Associates Model SR-240 Strip Chart írókészülék; Whatman Partisii 10 ODS-3 oszlop (10 mmx50 cm); 316 típusszámú rozsdamentes acélkapilláris (0,23 mm belső átmérő).
b) A (IV) vegyület kinyerése és tisztítása literes teljes fermentlevet Dicalite-tel megszűrünk és a kiszűrt micéliumot 2 liter tetrahidrofuránban kevertetjük 1 órán át. Újabb szűrés és további tetrahidrofurános áztatás (1 literben) után az egyesített szűrleteket csökkentett nyomáson betöményítjük, 4,5 g nyers extraktumot nyerve. Az extraktumot 6,5 g Lichroprep Si 60 szilikagélre (EM Science, Art. 9336, 15-25 mikron) adszorbeáltatjuk, és rávisszük egy 60 ml-es VLC tölcsérre, ami további 24,5 g szilikagélt tartalmaz. Hexán/etil-acetát gradiens elúciót alakítunk ki (200 ml-es frakciókkal), amit 200 ml-es tetrahidrofurános mosás követ. A tetrahidrofurános frakció maradékát 4 ml tetrahidrofuránban oldjuk és olyan 160 g Sephadex LH20 gyantából készült oszlopra visszük, amit előzőleg tetrahidrofuránnal ekvilibráltunk (oszlopmagasság 90 cm, térfogat 430 ml). Áramlási sebesség: 3,75 ml/perc. Szemmel látható, hogy a második oszloptérfogatnyi eluens első negyedében egy sárga sáv eluálódik le (62 mg). A végső tisztítást fordított fázisú (C]8) HPLC-vel végezzük 4 ml/perc áramlási sebességnél; az eluens: 0,1 ammónium-acetát/tetrahidrofurán, 60:40. A detektálást 320 nm-en végezzük. 39. percnél eluálódik a főtermék (23 mg), ami a (IV) vegyületnek felel meg.
c) Az (V) és a (VIII) vegyület kinyerése és tisztítása liter teljes fermentlevet Dicalite-tal leszűrünk. A kiszűrt micéliumot 2 liter tetrahidrofuránban kevertetjük 45 percen át, majd szűrjük, és újabb 1,5 liter tetrahidrofuránban áztatjuk. A szűrletet csökkentett nyomáson bepárolva, 3,39 g nyers extraktumot kapunk. Az extraktumot ötször 50 ml tetrahidrofuránban digeráljuk, az oldatokat egyesítjük és bepároljuk, 0,74 g tetrahidrofuránban oldódó anyagot kapva. Ez az anyag tartalmazza a sárgán fluoreszkáló anyagok főtömegét. A tetrahidrofuránban oldódó anyagot 2 g Silica Gél H adszorbensen (Merck, 10-40 mikron) adszorbeáltatjuk és 30 ml-es VLC tölcsérre visszük, ami további 11 g Silica Gél H-t tartalmaz. Hexán/etil-acetát rendszerrel lépcsőzetes gradienselúciót végzünk, az egyes frakciók 100 ml térfogatúak. A két fő rebekkamicin-analóg ily módon világosan elválasztható egymástól. A kevésbé poláris sárga sáv (141 mg) hexán/etil-acetát, 1:1 elegy nél eluálódik, a polárisabb analóg (105 mg) a hexán/etil-acetát, l:3elegynél.
A polárisabb analógot (105 mg) 2 ml tetrahidrofuránban oldjuk, és 160 g Sephadex LH-20 gyantából készített oszlopra visszük (90 cm magas, 430 ml térfogatú), amit előzetesen THF-ban duzzasztottunk. Az áramlási sebesség 4 ml/perc. A fő sárga sáv az 1.25 oszloptérfogatnál eluálódik jól láthatóan. Az így lejövő anyag az (V) képletű anyagnak felel meg (77 mg).
A kevésbé poláris anyagot (141 mg) 2 ml metanolban oldjuk és 110 g Sephadex LH-20 gyantából készített oszlopra visszük (80 cm oszlopmagasság, 400 ml oszloptérfogat), amit előzőleg metanolban duzzasztottunk. Az áramlási sebesség 3,5 ml/perc. A négyszeres oszloptérfogatnál eluálódó sárga fősáv tartalmazza a (VIII) vegyületet (70 mg).
A leírásban az előzőekben megadott módszerrel rebekkamicin hatását vizsgáltuk különböző dózisokban
HU 211 055 Β egerek átlagos túlélési idejének növekedésére. Az alábbi eredményeket kaptuk:
IV. táblázat
Rebekkamicin hatása a P388 leukémiára
Dózis (mg/kg) Egerek élettartama (T/C %)
Rebekkamicin 300 155
200 155
100 145
50 145
Az alábbi adatok mutatják, hogy a rebekkamicin a túlélési időt 55%-kal növeli. Az (I) táblázatban szereplő adatok szerint a (IV) képletű vegyület 75%-os túlélési időnövekedést eredményez. Ezen kívül a (IV) képletű vegyület növelt hatékonyságú, mivel 10 mg/kg dózisban is hatékony, szemben a fenti 50 mg/kg-mal.
További, ugyancsak a leírásban leírtak szerint, azonban rebekkamicinnel végzett kísérletek az alábbi eredményeket adták:
V. táblázat
Rebekkamicin hatása a P388 leukémiára
Dózis (mg/kg)* Átlagos túlélési idő T/C (%) Átlagos testsúly- változás Élő állatok száma 5. nap
Rebek- kamicin 300 15,5 172 -1,4 6/6
200 15,0 167 -0,7 6/6
100 14,5 161 -0,5 6/6
50 13,0 144 -0,6 6/6
* Rebekamicin hatása a P388 leukémiára
A (II) és (III) táblázatokból látható, hogy az (V) és (VIII) képletű vegyületek 62,5-szörös aktivitás növekedéssel rendelkeznek (a legalacsonyabb hatékony dózis 0,8 mg/kg, az 50 mg/kg rebekkamicinnel szemben). Ezenkívül a (VIII) képletű vegyület az élettartamot körülbelül 30%-kal növeli.

Claims (7)

  1. SZABADALMI IGÉNYPONTOK
    1. Eljárás a (II) és (III) általános képletű - ahol
    X, és X2 jelentése egymástól függetlenül fluoratom vagy hidrogénatom, feltételezve, hogy X| és X2 közül legalább az egyik jelentése hidrogénatomtól eltérő rebekkamicin-analógok vagy gyógyászati szempontból alkalmazható savaddíciós sóik előállítására, azzal jellemezve, hogy rebekkamicint termelő Saccharothrix aerocolonigenes törzset triptofán-analóg jelenlétében vizes tápközegben tenyésztünk, amíg jelentős mennyiségű kívánt rebekkamicin-analóg termelődik, majd a kívánt származékot kinyerjük, kívánt esetben tisztítjuk és savaddíciós sót képzünk. (Elsőbbsége: 1990. 03. 06.)
  2. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy rebekkamicint termelő törzsként a Saccharothrix aerocolinigenes ATCC 39 243 törzset tenyésztjük. (Elsőbbsége: 1991.02. 05.)
  3. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás a (VI) és (X) képletű vegyületek előállítására, azzal jellemezve, hogy triptofán-analógként DL-4-fluor-triptofán jelenlétében tenyésztünk. (Elsőbbsége: 1991.02. 05.)
  4. 4. Az 1. igénypont szerinti eljárás a (IV) és (IX) képletű vegyületek előállítására, azzal jellemezve, hogy triptofán-analógként DL-5-fluor-triptofán jelenlétében tenyésztünk. (Elsőbbsége: 1991.02. 05.)
  5. 5. Az 1. igénypont szerinti eljárás az (V) és (VIII) képletű vegyületek előállítására, azzal jellemezve, hogy triptofán-analógként DL-6-fluor-triptofán jelenlétében tenyésztünk. (Elsőbbsége: 1991.02. 05.)
  6. 6. Az 1. igénypont szerinti eljárás a (VII) és (XI) képletű vegyületek előállítására, azzal jellemezve, hogy triptofán-analógként DL-7-fluor-triptofán jelenlétében tenyésztünk. (Elsőbbsége: 1991. 02. 05.)
  7. 7. Eljárás - főként tumorellenes hatású - gyógyszerkészítmény előállítására, azzal jellemezve, hogy az 1. igénypont szerinti rebekkamicin-analógok legalább egyikének tumorgátló mennyiségét gyógyászati szempontból alkalmazható, lényegében nem-toxikus hordozó vagy adalékanyagokkal összekeverve gyógyszerkészítménnyé alakítjuk. (Elsőbbsége: 1990. 03. 06.)
HU91716A 1990-03-06 1991-03-05 Method for producing rebeccamycin analogs and pharmaceutical compositions containing them HU211055B (en)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US48943090A 1990-03-06 1990-03-06
US64875191A 1991-02-05 1991-02-05

Publications (3)

Publication Number Publication Date
HU910716D0 HU910716D0 (en) 1991-09-30
HUT61601A HUT61601A (en) 1993-01-28
HU211055B true HU211055B (en) 1995-10-30

Family

ID=27049711

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU91716A HU211055B (en) 1990-03-06 1991-03-05 Method for producing rebeccamycin analogs and pharmaceutical compositions containing them

Country Status (22)

Country Link
US (1) US5468849A (hu)
EP (1) EP0450327B1 (hu)
JP (1) JPH0780899B2 (hu)
KR (1) KR940005657B1 (hu)
AT (1) ATE138926T1 (hu)
AU (1) AU623050B2 (hu)
CY (1) CY1941A (hu)
CZ (1) CZ279307B6 (hu)
DE (1) DE69119964T2 (hu)
DK (1) DK0450327T3 (hu)
ES (1) ES2088439T3 (hu)
FI (1) FI102376B1 (hu)
GR (1) GR3020163T3 (hu)
HK (1) HK181496A (hu)
HU (1) HU211055B (hu)
IE (1) IE910737A1 (hu)
IL (1) IL97233A (hu)
NO (1) NO179555C (hu)
PT (1) PT96943B (hu)
SG (1) SG63555A1 (hu)
TW (1) TW232698B (hu)
YU (1) YU39391A (hu)

Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5437996A (en) * 1992-11-24 1995-08-01 Banyu Pharmaceutical Co., Ltd. Microtetraspora strain for preparation of indolopyrrolocarbazole derivatives
NZ245203A (en) * 1991-11-29 1997-07-27 Banyu Pharma Co Ltd 5h-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]carbazole-5,7(6h)-dione derivatives substituted in position-13 by a pentose or hexose group; corresponding indolo-furano(anhydride)intermediates
US5589365A (en) * 1991-11-29 1996-12-31 Banyu Pharmaceutical Co., Ltd. Process for producing glycosylated indolopyrrolocarbazole derivatives by culturing certain microorganisms
WO1993018766A1 (en) * 1992-03-20 1993-09-30 The Wellcome Foundation Limited Further indole derivatives with antiviral activity
JP3603322B2 (ja) * 1992-12-14 2004-12-22 萬有製薬株式会社 インドロピロロカルバゾール誘導体の製造法
USRE37206E1 (en) * 1994-06-13 2001-06-05 Banyu Pharmaceutical Co, Ltd Gene encoding glycosyltransferase and its uses
IL127918A0 (en) * 1996-08-22 1999-11-30 Bristol Myers Squibb Co Novel amino sugar and related sugar derivatives of indolylopyrrolocarbazoles their use as antitumor agents and pharmaceutical formulations
US6677450B2 (en) 2000-10-06 2004-01-13 Bristol-Myers Squibb Company Topoisomerase inhibitors
US6610727B2 (en) 2000-10-06 2003-08-26 Bristol-Myers Squibb Company Anhydro sugar derivatives of indolocarbazoles
US6653290B2 (en) 2000-10-06 2003-11-25 Bristol-Myers Squibb Company Tumor proliferation inhibitors
HUP0400265A2 (hu) * 2001-03-22 2004-08-30 Bristol-Myers Squibb Co. Indolopirrolokarbazolok topoizomeráz 1 szelektív citotoxikus cukorszármazékai és alkalmazásuk gyógyszerkészítmények előállítására

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4552842A (en) 1983-01-28 1985-11-12 Bristol-Myers Company Process for producing rebeccamycin
US4487925A (en) 1983-01-28 1984-12-11 Bristol-Myers Company Rebeccamycin and process for its preparation
US4567143A (en) * 1984-09-04 1986-01-28 Bristol-Myers Company Process for preparing 4'-deschlororebeccamycin
US4524145A (en) * 1984-09-04 1985-06-18 Bristol-Myers Company 4'-Deschlororebeccamycin pharmaceutical composition and method of use
US4808613A (en) * 1986-11-21 1989-02-28 Bristol-Myers Company Rebeccamycin derivative containing pharmaceutical composition
US4785085A (en) * 1986-11-21 1988-11-15 Bristol-Myers Company Rebeccamycin analogs

Also Published As

Publication number Publication date
FI911047A (fi) 1991-09-07
CZ279307B6 (cs) 1995-04-12
FI911047A0 (fi) 1991-03-01
TW232698B (hu) 1994-10-21
DE69119964T2 (de) 1997-02-06
KR910016934A (ko) 1991-11-05
AU7261691A (en) 1991-09-12
GR3020163T3 (en) 1996-09-30
SG63555A1 (en) 1999-03-30
IL97233A (en) 1995-03-30
CY1941A (en) 1997-05-16
HK181496A (en) 1996-10-04
NO910855D0 (no) 1991-03-05
EP0450327B1 (en) 1996-06-05
CS9100586A2 (en) 1991-10-15
DE69119964D1 (de) 1996-07-11
IE910737A1 (en) 1991-09-11
IL97233A0 (en) 1992-05-25
NO179555C (no) 1996-10-30
FI102376B (fi) 1998-11-30
KR940005657B1 (ko) 1994-06-22
AU623050B2 (en) 1992-04-30
YU39391A (sh) 1994-01-20
ES2088439T3 (es) 1996-08-16
NO179555B (no) 1996-07-22
PT96943A (pt) 1991-10-31
US5468849A (en) 1995-11-21
NO910855L (no) 1991-09-09
FI102376B1 (fi) 1998-11-30
EP0450327A1 (en) 1991-10-09
DK0450327T3 (da) 1996-06-24
HU910716D0 (en) 1991-09-30
PT96943B (pt) 1998-07-31
JPH0789981A (ja) 1995-04-04
HUT61601A (en) 1993-01-28
JPH0780899B2 (ja) 1995-08-30
ATE138926T1 (de) 1996-06-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US4981792A (en) Immunosuppressant compound
EP0349061B1 (en) Immunosuppressant agent
EP0238011B1 (en) Polycyclic condensed amino sugar derivatives with anti-tumor and anti-bacterial activity, produced by streptomyces
CZ390592A3 (en) Process for preparing 4,5-dihydrogendanamycin and hydroquinone thereof and the use of such compounds
JP2917305B2 (ja) Ｆｒ−９０１１５５物質およびその生産法
EP0388153A2 (en) Immunosuppressant agent
HU211055B (en) Method for producing rebeccamycin analogs and pharmaceutical compositions containing them
KR100659680B1 (ko) 항생 물질 카프라자마이신류 및 그 제조법
EP0378321A2 (en) Microbial transformation product of L-683-590
CA2037596C (en) Rebeccamycin analog by bromide precursor feeding
US5158938A (en) Rebeccamycin
US5290772A (en) Immunosuppressant agent
US5326754A (en) Antitumor antibiotic BMY-41219
EP0420552B1 (en) New antifungal antibiotic, and the production and uses of same
US5281417A (en) Antitumor process employing novel fermentate of an Actinomadura strain
EP0387860A2 (en) Antitumor antibiotic BMY-41339
EP0818464B1 (en) Methylsulfomycin l, a process for its production and its use
EP0396400A1 (en) Microbial transformation product
CA2037783C (en) Rebeccamycin analogs by tryptophan analogs feeding
JPH04368388A (ja) ダイネマイシンｃ抗腫瘍抗生物質
JPH0570470A (ja) 生理活性物質カンレマイシンｃ、その製造法及びその薬学的用途
JP2002241394A (ja) 新規カプラマイシン類縁体
JPH04120087A (ja) 新規抗腫瘍性抗生物質ｓｆ２５８７ｃ物質およびその製造法
JPH059189A (ja) 制癌性物質サイトブラスチンおよびその製造法

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of definitive patent protection due to non-payment of fees