NO179555B - Fremgangsmåte til fremstilling av terapeutisk aktive rebeccamycinanaloger - Google Patents
Fremgangsmåte til fremstilling av terapeutisk aktive rebeccamycinanaloger Download PDFInfo
- Publication number
- NO179555B NO179555B NO910855A NO910855A NO179555B NO 179555 B NO179555 B NO 179555B NO 910855 A NO910855 A NO 910855A NO 910855 A NO910855 A NO 910855A NO 179555 B NO179555 B NO 179555B
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- rebeccamycin
- compound
- formula
- fluorotryptophan
- culture
- Prior art date
Links
- INSACQSBHKIWNS-QZQSLCQPSA-N rebeccamycin Chemical class O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](OC)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C2=C3N=C4[C](Cl)C=CC=C4C3=C3C(=O)NC(=O)C3=C2C2=CC=CC(Cl)=C21 INSACQSBHKIWNS-QZQSLCQPSA-N 0.000 title claims abstract description 27
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 16
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 13
- 241000970318 Lechevalieria aerocolonigenes Species 0.000 claims abstract description 18
- ZGCSNRKSJLVANE-UHFFFAOYSA-N Aglycone-Rebeccamycin Natural products N1C2=C3NC4=C(Cl)C=CC=C4C3=C(C(=O)NC3=O)C3=C2C2=C1C(Cl)=CC=C2 ZGCSNRKSJLVANE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 16
- QEHOIJJIZXRMAN-UHFFFAOYSA-N Rebeccamycin Natural products OC1C(O)C(OC)C(CO)OC1N1C2=C3NC4=C(Cl)C=CC=C4C3=C3C(=O)NC(=O)C3=C2C2=CC=CC(Cl)=C21 QEHOIJJIZXRMAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 16
- 229960005567 rebeccamycin Drugs 0.000 claims abstract description 16
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims abstract description 6
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical class C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 claims abstract description 5
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 24
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 13
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 6
- INPQIVHQSQUEAJ-UHFFFAOYSA-N 5-fluorotryptophan Chemical compound C1=C(F)C=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 INPQIVHQSQUEAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- YMEXGEAJNZRQEH-UHFFFAOYSA-N 6-Fluoro-DL-tryptophan Chemical compound FC1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 YMEXGEAJNZRQEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 4
- JSKFWUPVIZYJMR-UHFFFAOYSA-N 1,11-dichloro-6-[2-(diethylamino)ethyl]-12-(4-o-methylhexopyranosyl)-12,13-dihydro-5h-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]carbazole-5,7(6h)-dione Chemical compound O=C1N(CCN(CC)CC)C(=O)C(C2=C3[CH]C=CC(Cl)=C3NC2=C23)=C1C2=C1C=CC=C(Cl)[C]1N3C1OC(CO)C(OC)C(O)C1O JSKFWUPVIZYJMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N Fluorine Chemical compound FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 claims description 2
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 19
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 abstract description 10
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 abstract description 10
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 abstract description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 65
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 35
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 31
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N DMSO Substances CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 11
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 10
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 8
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 7
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 7
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 7
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 6
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 6
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 6
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 6
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 6
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 6
- 238000002211 ultraviolet spectrum Methods 0.000 description 6
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 5
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 5
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 5
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 5
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 4
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 4
- 239000000287 crude extract Substances 0.000 description 4
- IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N dihydroxy(oxo)silane Chemical compound O[Si](O)=O IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 4
- OAYLNYINCPYISS-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;hexane Chemical compound CCCCCC.CCOC(C)=O OAYLNYINCPYISS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 4
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000005033 Fourier transform infrared spectroscopy Methods 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 3
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 3
- 239000012156 elution solvent Substances 0.000 description 3
- 238000004992 fast atom bombardment mass spectroscopy Methods 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 3
- 231100000956 nontoxicity Toxicity 0.000 description 3
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 3
- 239000013587 production medium Substances 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ADMHYWIKJSPIGJ-UHFFFAOYSA-N 2-amino-3-(7-fluoro-1h-indol-3-yl)propanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1F ADMHYWIKJSPIGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DEBQMEYEKKWIKC-UHFFFAOYSA-N 2-azaniumyl-3-(4-fluoro-1h-indol-3-yl)propanoate Chemical compound C1=CC(F)=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 DEBQMEYEKKWIKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000030453 Drug-Related Side Effects and Adverse reaction Diseases 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- 206010070863 Toxicity to various agents Diseases 0.000 description 2
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 2
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 2
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- UREBWPXBXRYXRJ-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;methanol Chemical compound OC.CCOC(C)=O UREBWPXBXRYXRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 2
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical class CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 2
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 2
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 2
- GQYKSISLCPUNJT-BDVNFPICSA-N (2r,3r,4r,5r)-2,3,5,6-tetrahydroxy-4-methoxyhexanal Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](OC)[C@H](O)[C@@H](O)C=O GQYKSISLCPUNJT-BDVNFPICSA-N 0.000 description 1
- YYGJQPKPUWCRIM-JTQLQIEISA-N (2s)-2-(fluoroamino)-3-(1h-indol-3-yl)propanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@@H](C(=O)O)NF)=CNC2=C1 YYGJQPKPUWCRIM-JTQLQIEISA-N 0.000 description 1
- 229910000619 316 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000186361 Actinobacteria <class> Species 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017060 Arachis glabrata Nutrition 0.000 description 1
- 244000105624 Arachis hypogaea Species 0.000 description 1
- 235000010777 Arachis hypogaea Nutrition 0.000 description 1
- 235000018262 Arachis monticola Nutrition 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- FKLJPTJMIBLJAV-UHFFFAOYSA-N Compound IV Chemical compound O1N=C(C)C=C1CCCCCCCOC1=CC=C(C=2OCCN=2)C=C1 FKLJPTJMIBLJAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011765 DBA/2 mouse Methods 0.000 description 1
- ZAFNJMIOTHYJRJ-UHFFFAOYSA-N Diisopropyl ether Chemical compound CC(C)OC(C)C ZAFNJMIOTHYJRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 235000019733 Fish meal Nutrition 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N L-rhamnopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N L-rhamnose Natural products CC(O)C(O)C(O)C(O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 208000008342 Leukemia P388 Diseases 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- UMQAIKKJIZYHQC-UHFFFAOYSA-M Milling yellow 3G Chemical compound ClC=1C=CC(=C(C=1)S(=O)(=O)[O-])N1N=C(C(=C1O)N=NC1=CC=C(C=C1)OS(=O)(=O)C1=CC=C(C=C1)C)C.[Na+] UMQAIKKJIZYHQC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000845082 Panama Species 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000004809 Teflon Substances 0.000 description 1
- 229920006362 Teflon® Polymers 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 1
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000000118 anti-neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- RBHJBMIOOPYDBQ-UHFFFAOYSA-N carbon dioxide;propan-2-one Chemical compound O=C=O.CC(C)=O RBHJBMIOOPYDBQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000002577 cryoprotective agent Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 1
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 1
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 239000000890 drug combination Substances 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000004467 fishmeal Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000007429 general method Methods 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 230000005917 in vivo anti-tumor Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 238000009655 industrial fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000010699 lard oil Substances 0.000 description 1
- WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L manganese(2+);methyl n-[[2-(methoxycarbonylcarbamothioylamino)phenyl]carbamothioyl]carbamate;n-[2-(sulfidocarbothioylamino)ethyl]carbamodithioate Chemical compound [Mn+2].[S-]C(=S)NCCNC([S-])=S.COC(=O)NC(=S)NC1=CC=CC=C1NC(=S)NC(=O)OC WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 231100000682 maximum tolerated dose Toxicity 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 238000012924 normal-phase thin-layer chromatography Methods 0.000 description 1
- QNXIYXGRPXRGOB-UHFFFAOYSA-N oxolane;propan-2-one Chemical compound CC(C)=O.C1CCOC1 QNXIYXGRPXRGOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 235000020232 peanut Nutrition 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- -1 rebeccamycin compound Chemical class 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000012827 research and development Methods 0.000 description 1
- 238000011894 semi-preparative HPLC Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 229920002545 silicone oil Polymers 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 239000002195 soluble material Substances 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008174 sterile solution Substances 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 229910021653 sulphate ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- 229960004799 tryptophan Drugs 0.000 description 1
- 241001446247 uncultured actinomycete Species 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
- C07H19/044—Pyrrole radicals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/26—Preparation of nitrogen-containing carbohydrates
- C12P19/28—N-glycosides
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Ceramic Products (AREA)
Description
Den foreliggende oppfinnelse vedrører en fremgangsmåte til fremstilling av terapeutisk aktive rebeccamycin-analoger med formelen
hvor X-^ og X2 er fluor, eller et farmasøytisk akseptabelt syreaddisjonssalt derav.
De fremstilte forbindelser har antineoplastiske egenskaper.
I US patentskrift nr. 4.487.925 og 4.552.842 beskrives antitumormidlet benevnt rebeccamycin og 5'-metyl- og 5', 2', 3'',6''-tetraacetatderivatene derav, samt en fremgangsmåte til fremstilling av midlet ved å dyrke en rebeccamycin-produserende stamme av Nocardia aerocolonigenes, fortrinnsvis Nocardia aerocolonigenes ATCC 39243, eller en rebeccamycin-produserende mutant derav i et vandig næringsmedium inneholdende assimiler-bare karbon- og nitrogenkilder under submerse aerobe betingelser, inntil en betraktelig mengde rebeccamycin er blitt produsert. Nylig ble Nocardia aerocolonigenes, ATCC 39243 reklassifisert som Saccharothrix aerocolonigenes ATCC 39243 (Bush et al., J. Antibiotics, Vol 40, p. 668-678, 1987).
Fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen kjennetegnes ved at rebeccamycin-produserende Saccharothrix aerocolonigenes ATCC 39243 eller mutanter derav med de samme vesentlige morfologiske og biokjemiske egenskaper, dyrkes i et vandig næringsmedium i nærvær av en DL-fluortryptofan-analog, inntil en betydelig mengde av den ønskede rebeccamycin-analog er blitt produsert av organismen i dyrkningsmediet, og fra dyrkningsmediet utvinnes det ønskede rebeccamycinderivat i en praktisk talt ren form.
Fig. 1 viser IR-spektret for forbindelsen med formel
(IV) .
Fig. 2 viser <1>H-NMR-spektret for forbindelsen med formel
(IV) .
Fig. 3 viser 1 -LoJC-NMR-spektret for forbindelsen med formel
(IV) .
Fig. 4 viser IR-spektret for forbindelsen med formel (V) . Fig. 5 viser <1>H-NMR-spektret for forbindelsen med formel
(V) .
Fig. 6 viser <±J>C-NMR-spektret for forbindelsen med formel
(V) .
Fig. 7 viser IR-spektret for forbindelsen med formel
(VIII).
Fig. 8 viser <1>H-NMR-spektret for forbindelsen med formel
(VIII) .
Fig. 9 viser i -"-^"3C-NMR-spektret for forbindelsen med formel
(VIII).
Fig. 10 viser massespektret for forbindelsen med formel
(IV) .
Fig. 11 viser UV-spektret for forbindelsen med formel
(IV) .
Fig. 12 viser massespektret for forbindelsen med formel
(V) .
Fig. 13 viser UV-spektret for forbindelsen med formel
(V) .
Fig. 14 viser massespektret for forbindelsen med formel
(VIII).
Fig. 15 viser UV-spektret for forbindelsen med formel
(VIII).
I US patentskrift nr. 4.487.925 og 4.552.842 beskrives fremstillingen og isoleringen av antitumor-midlet benevnt rebeccamycin (formel I)
Ovennevnte rebeccamycin-forbindelse er den vesentligste komponent ved fermenteringen av den rebeccamycin-produserende stamme Saccharothrix aerocolonigenes.
Ifølge den foreliggende oppfinnelse har det nå vist seg, at fermenteringsmetoden som er beskrevet i US patentskrift nr. 4.487.925 og 4.552.842 kan utføres i nærvær av visse tryptofan-analoger til fremstilling av hittil ukjente analoger av rebeccamycin med verdifulle antitumor-egenskaper.
Et foretrukket eksempel på forbindelsene fremstilt ifølge den foreliggende oppfinnelse er forbindelsen med strukturformelen (IV)
Et annet foretrukket eksempel på forbindelsene fremstilt ifølge den foreliggende oppfinnelse er forbindelsen med strukturformelen (V) Et ytterligere foretrukket eksempel på forbindelsene fremstilt ifølge den foreliggende oppfinnelse er forbindelsen med strukturformelen (VI)
Et ytterligere foretrukket eksempel på forbindelsene fremstilt ifølge den foreliggende oppfinnelse er forbindelsen med strukturformelen (VII) Et ytterligere foretrukket eksempel på forbindelsene fremstilt ifølge den foreliggende oppfinnelse er forbindelsen med strukturformelen (VIII)
Et ytterligere foretrukket eksempel på forbindelsene fremstilt ifølge den foreliggende oppfinnelse er forbindelsen med strukturformelen (IX)
Et ytterligere foretrukket eksempel på forbindelsene fremstilt ifølge den foreliggende oppfinnelse er forbindelsen med strukturformelen (X) Enda et foretrukket eksempel på forbindelsene fremstilt ifølge den foreliggende oppfinnelse er forbindelsen med strukturformelen (XI)
En mer omfattende beskrivelse av fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen er anført nedenfor og i de etterfølgende eksempler .
Fremstilling av antibiotika
Forbindelsene med formel (IV)-(XI) ble fremstilt ved å dyrke en rebeccamycin-produserende stamme av Saccharothrix aerocolonigenes med DL-4-fluortryptofan, DL-5-fluortryptofan, DL-6-fluortryptofan eller DL-7-fluortryptofan. Den foretrukne produserende organisme er en hittil ukjent stamme av Saccharothrix aerocolonigenes, tidligere benevnt Nocardia aerocolonigenes stamme C38.383-RK2 (ATCC 39243) i US patentskrift nr. 4.4 87.925. Nylig ble denne stamme reklassifisert som Saccharothrix aerocolonigenes (Bush et al., J. Antibiotics Vol 40, p. 668-678, 1987) og benevnes i det foreliggende Saccharothrix aerocolonigenes stamme C38.383-RK2 (ATCC 39243). Denne stamme ble isolert fra en jordprøve oppsamlet i Panama. En biologisk ren kultur av stamme C38.383-RK2 er blitt deponert hos American Type Culture Collection, Rockville, Maryland og tilføyet til deres permanente samling av mikroorganismer som ATCC 39243. Denne kultur, benevnt C38.383-RK2, ble opprettholdt også som en hvilende kultur i lyofile reagensglass og kryogene glass i Bristol-Myers Squibb Co. Pharmaceutical Research and Development Division Culture Collection, 5, Research Parkway, Wallingford, Connecticut 06492.
De taksionomiske undersøkelser av stamme C38.383-RK2 (ATCC 39243) er blitt beskrevet i detaljer i US patentskrift nr. 4.487.925 og i J. Antibiotics, Vol 40, p. 668-678, 1987. Stammen er blitt klassifisert som en hittil ukjent stamme av Saccharothrix aerocolonigenes.
Ved utførelse av den omtalte fremgangsmåte ble en rebeccamycin-produserende stamme av Saccharothrix aerocolonigenes med de identifiserende karakteristika for stamme C38.383-RK2 (ATCC 39243) eller en mutant eller variant derav, dyrket i et konven-sjonelt vandig næringsmedium supplert med en hensiktsmessig tryptofan-analog. Til optimal produksjon av forbindelsen med formlene (VI) og (X) bør mediet være supplert med DL-4-fluor-tryptof an. Til optimal produksjon av forbindelsene med formlene (IV) og (IX) bør mediet være supplert med DL-5-fluortryptofan. Til optimal produksjon av forbindelsene med formlene (V) og (VIII) bør mediet være supplert med DL-6-fluortryptofan. Til optimal produksjon av forbindelsene med formlene (VII) og (XI) bør mediet være supplert med DL-7-fluortryptofan. Organismen ble dyrket i et næringsmedium inneholdende kjente næringskilder for actinomyceter. Organismen ble således dyrket i et næringsmedium inneholdende en assimilerbar karbonkilde, såsom sakkar-ose, laktose, glukose, rhamnose, fruktose, glyserol eller løselig stivelse. Mediet bør også inneholde en assimilerbar nitrogenkilde, såsom fiskemel, pepton, jordnøttemel, bomulls-frømel, maisvæske, aminosyrer eller ammoniumsalter. Uorganiske næringssalter kan også inkorporeres i mediet til frembringelse av natrium, kalium, ammonium, kalsium, fosfat, sulfat, nitrat, karbonat eller lignende ioner. Sporelementer, såsom kobber, mangan, jern, sink, etc, blir om ønskelig tilsatt til mediet, eller de kan være til stede som urenheter i andre bestanddeler i mediet. Submerse aerobe betingelser blir fortrinnsvis.anvendt til fremstilling av store mengder antibiotikum, selv om over-flatekulturer og flasker også kan anvendes til fremstilling av begrensede mengder. De kjente metoder, som anvendes ved dyrkning av andre actinomycetarter, er anvendbare ved den foreliggende oppfinnelse.
Fremstilling av antibiotika ifølge den foreliggende oppfinnelse kan skje ved en hvilken som helst temperatur, som bidrar til tilfredsstillende vekst av den produserende organisme, f.eks. 18-39°C, og blir hensiktsmessig utført ved en temperatur på ca. 28°C. Fermenteringen kan utføres i kolber eller i laboratorie- eller industrifermenteringsapparater av forskjellig kapasitet.
Ved anvendelse av tankfermentering er det ønskelig å fremstille et vegetativt inokulum i et næringsmedium ved å inokulere et lite volum av dyrkningsmediet med en skråstivnet agar, en kryokonservert kultur eller en lyofilisert kultur av den produserende organisme. Etter oppnåelse av et levedyktig og aktivt inokulum på denne måte, blir det overført aseptisk til den med produksjonsmedium påfylte fermenteringstank til fremstilling av antibiotikummet i stor skala. Det medium, hvori det vegetative inokulum blir dyrket, kan være identisk med eller forskjellig fra det medium, som blir anvendt i tanken, så lenge det er et sådant medium, hvori god vekst av den produserende organisme blir oppnådd, og det blir supplert med en passende fluortryptofananlegg. Ytterligere omrøring kan frembringes med en mekanisk omrører. Antiskummidler, såsom spekkolje eller silikonolje, kan om nødvendig tilsettes . Antibiotikumproduks jon blir overvåket ved høytrykks-væskekromatografi eller ved en konvensjonell biologisk prøve. Vanligvis blir optimal produksjon av antibiotika oppnådd etter inkubering i ca. 6 dager.
Isolering og rensning av de således oppnådde derivater kan utføres ved konvensjonelle kromatografiske metoder.
Fysiske og kjemiske egenskaper
Forbindelsene med formlene (IV), (V) og (VIII) har følgende fysiske og kjemiske egenskaper:
Forbindelse med formelen ( IV):
Beskrivelse: lysegult, amorft faststoff. Molekylformel: C2gH1gF2N307.
Molekylvekt: 523,454.
Massespektrum: "Kratos MS 25"-massespektrometer. FABMS 524 (M + H)<+>, 361 (M-162, tap av glukose).
Ultrafiolett spektrum: Hewlett Packard "845 A Diode Array"-spektrofotometer. Konsentrasjon 1,0 mg/100 ml MeOH. Nøytral Xmax nm (E 1%/1 cm): 405, 322 (457), 288, 277, 259, 230
(348) .
Infrarødt spektrum: Perkin-Elmer "1800 FTIR"-spektro-meter. KBr pellet (cm<-1>): 3340, 2915, 1752, 1708, 1628, 1591, 1484, 1462, 1392, 1331, 1292, 1247, 1191, 1112, 1081, 1052, 947, 904, 795, 762, 752, 752, 511.
360 MHz <1>H-NMR: Bruker modell "AM-3000"-spektrometer. Dobbel karbon proton probe, 5 mm. Løsningsmiddel dg-DMSO. Iakttatte kjemiske skift (ppm): 11,76 (s, 1H), 11,23 (s, 1H), 8,85 (dd, 1H) , 8,77 (dd, 1H) , 8,01 (dd, 1H) , 7,68 (dd, 1H) , 7,46 (m, 2H) , 6,29 (d, 1H) , 6,12 (t, 1H) , 5,45 (d, 1H) , 5,17 (d, 1H), 4,95 (d, 1H) , 4,07 (d, 1H) , 3,95 (m, 2H), 3,81 (d, 1H) , 3,59 (m, 2H) . 90 MHz <13>C-NMR: Bruker modell "AM-3000"-spektrometer. Proton dekoplet spektrum. Dobbel karbon-proton probe, 5 mm. Løsningsmiddel dg-DMSO. Iakttatte kjemiske skift (ppm): 170,9, 170, 8, 157, 0 (d), 157,0 (d) , 138, 6, 137,2, 130,7, 129,2, 121,7(d), 121,4(d), 121,3, 119,6, 116,6, 115,1, 115,0 (d) , 114, 6(d), 113,3(d), 113,2(d), 109,1 (d) , 109,1 (d) , 84, 8, 78,7, 76,5, 73,2, 67, 6, 58, 3.
Løselighet: Løselig i DMSO, DMF, THF, aceton, EtOAc, MeOH.
Tynnsjiktskromatografi (Rf-verdier): normal fase (silikagel 60), EtOAc: 0,10, EtOAc-MeOH (9:1 på volumbasis) : 0,41. Reversfase (C18), <0,>1 M NH4OAc-MeOH-CH3CN (2:4:4 på volumbasis) : 0,67.
Forbindelse med formelen ( V)
Beskrivelse: lysegult, amorft faststoff. Molekylformel: C2<gH1gF>2<N>3<0>7.
Molekylvekt: 523,454..
Massespektrum: "Kratos MS 25"-massespektrometer. FABMS 524 (M + H)<+>, 361 (M-162, tap av glukose).
Ultrafiolett spektrum: Hewlet Packard "8452A Diode Array"-spektrofotometer. Konsentrasjon 1,0 mg/100 ml MeOH. Nøytral kax nm (E 1%/1 cm): 398 (60), 316 (640), 280 (259), 256 (313), 226 (526), 204 (497).
Infrarødt spektrum: Perkin-Elmer "1800 FTIR"-spektro-meter. KBr-pellet (cm<-1>): 3324, 2927, 1745, 1701, 1623, 1580, 1491, 1471, 1452, 1412, 1384, 1330, 1233, 1172, 1116, 1075, 1048, 1016, 963, 916, 829, 764, 745, 646, 635, 617, 498, 490.
360 MHz <1>H-NMR: Bruker modell "AM-3000"-spektrometer. Dobbelt karbon-proton probe, 5 mm. Løsningsmiddel dg-DMSO. Observerte kjemiske skift (ppm): 11,77 (s, 1H),.11,18 (s, 1H) , 9,12 (dd, 1H) , 9,05 (dd, 1H) , 7,85 (dd, 1H) , 7,43 (dd, 1H) , 7,23 (t, 2H) , 6,26 (d, 1H) , 6,24 (s, 1H) , 5,31 (d, 1H) , 5,04 (d, 1H) , 3,98 (m, 2H) , 3,87 (m, 1H) , 3,66 (s, 2H) . 90 MHz <13>C-NMR: Bruker modell "AM-3000"-spektrometer. Proton dekoblet spektrum. Dobbel karbon-proton probe, 5 mm. Løsningsmiddel dg-DMSO. Observerte kjemiske skift (ppm): 170,8, 170,7, 161,8(d), 161, 8(d), 143,2 (d) , 141, 5 (d) , 130, 1, 128,7, 126,0(d), 125,9(d), 120,9, 119,3, 118,2, 118,1, 117,7, 116,5, 108,8(d), 108,6(d), 98,9(d), 98,3(d), 84, 7, 78, 6, 76,5, 73, 1, 67,5, 58,3.
Løselighet: Løselig i DMSO, DMF, THF, MeOH, aceton, EtOAc.
Tynnsjiktskromatografi (Rf-verdier): normal fase (silikagel 60), EtOAc: 0,40. EtOAC-MeOH (9:1 på volumbasis): 0,63. Reversfase (C18), 0,1 M NH4OAc-MeOH-CH3CN (2:4:4 på volumbasis) : 0,60.
Forbindelse med formel ( VIII)
Beskrivelse: lysegult, amorft faststoff. Molekylformel: C27H2i<F>2N3°7.
Molekylvekt: 537,481.
Massespektrum: "Kratos MS 25"-massespektrometer. FABMS 538 (M + H)<+>, 361 (M-176, tap av 4-O-metylglukose).
Ultrafiolett spektrum: Hewlet Packard "8452A Diode Array"-spektrofotometer. Konsentrasjon 1,2 mg/100 ml MeOH. Nøytral Xmax nm (E 1%/1 cm): 398(103), 316(1050), 280(387), 256 (454) , 228 (780) .
Infrarødt spektrum: Perkin-Elmer "1800 FTIR".-spektro-meter. KBr-pellet (cm<-1>): 3324, 2938, 1747, 1703, 1623, 1580, 1491, 1471, 1452, 1412, 1384, 1330, 1233, 1172, 1140, 1116, 1087, 1054, 963, 918, 828, 764, 646, 635, 618, 498.
360 MHz ^-H-NMR: Bruker modell "AM-3000"-spektrometer. Dobbel karbon-proton probe, 5 mm. Løsningsmiddel dg-DMSO. Observerte kjemiske skift (ppm): 11,77 (s, 1H) , 11,18 (s, 1H) , 9,12 (dd, 1H), 9,05 (dd, 1H) , 7,88 (dd, 1H) , 7,41 (dd, 1H) , 7,23 (m, 2H) , 6,25 (d, 1H) , 6,24 (s, 1H) , 5,36 (dd, 1H) , 5,31 (d, 1H) , 5,04 (d, 1H) , 3,97 (m, 2H) , 3, 60-3, 95 (m, 4H) . 90 MHz <13>C-NMR: Bruker modell "AM-3000"-spektrometer. Proton dekoplet spektrum. Dobbel karbon-proton probe, 5 mm. Løsningsmiddel dg-DMSO. Observerte kjemiske skift (ppm): 170,8, 170,7, 161, 8 (d) , 161,7(d), 143, l'(d) , 141, 5 (d) , 130, 1, 128,7, 126,0(d), 125,9(d), 120,9, 119,4, 118,2, 118,1, 117,7, 116,5, 108,8(d), 108,6(d), 98,7(d), 98,3(d), 84, 4, 77, 2, 77,2, 76,2, 73,2, 59, 9, 58,5.
Løselighet: Løselig i DMSO, DMF, THF, aceton, EtOAc, MeOH.
Tynnsjiktskromatografi (Rf-verdier): normal fase (silikagel 60), EtOAc: 0,72, EtOAc-MeOH (9:1 på volumbasis): 0,89. Reversfase (C18), 0,1 M NH4OAc-MeOH-CH3CN (2:4:4 på volumbasis) : 0,59.
Biologiske egenskaper
Representative forbindelser fremstilt ifølge den foreliggende oppfinnelse ble utprøvet overfor transplantert muse-leukemi P388 for å bestemme in vivo antitumoraktivitet (tabell 1-3) . CDF-j^-mus ble implantert intraperitonealt (ip) med 10^ P388 leukemiceller oppnådd fra DBA/2 donormus, som bærer denne transplanterbare murine leukemi. De leukemiske CDF^-mus ble behandlet intraperitonealt med enten saltvann (kontrollmus) eller doser av forbindelsen med formlene (IV), (V) og (VIII) én gang på dag 1 etter tumor-inokulering. Disse dyr ble iakttatt daglig, og deres død ble registrert. Endringer i gjennomsnitt-lig legemsvekt (fra dagen for leukemi-implantering til dagen for den siste behandling) ble bestemt for alle grupper som en måte til å avspeile legemiddel-toksisitet. Antallet av over-levende mus i hver gruppe på dag 5 etter tumor-implantering ble registrert som en ytterligere måte til bestemmelse av legemiddel-toksisitet. Et terapeutisk resultat ble betraktet ikke som betydningsfullt, hvis mer enn 1 mus pr. behandlingsgruppe var død på dag 5. Hver behandlingsgruppe bestod av 4-6 mus, kontrollgrupper omfattet 10 mus. Antallet av eventuelt over-levende mus på dag 30 (siste forsøksdag) ble også registrert.
Den terapeutiske virkning ble vurdert ved å bestemme den gjennomsnittlige overlevelsestid (MST) for mus behandlet med forbindelsen med formlene (IV), (V) og (VIII) og sammenligne denne med MST for tilsvarende kontrollmus. Denne sammenligning ble foretatt ved å dividere MST for førstnevnte med MST for sistnevnte og multiplisere med 100 til oppnåelse av en para-meter benevnt % T/C-verdi. En % T/C på >125% ble betraktet som en signifikant stigning i levetid og derfor som indikasjon på aktivitet.
Som vist i tabell la er forbindelsen med formel (IV) aktiv overfor P388 leukemi ved dosenivåer i området fra 10-90 mg/kg. Den beste virkning ble oppnådd ved en dose på 30 mg/kg, hvorved en % T/C på 175% ble oppnådd. Det ble ikke observert toksisitet selv ved den høyeste utprøvde dose (90 mg/kg).
Som vist i tabell lb bevirker rebeccamycin økning i levetid, % T/C, på 155, som ble oppnådd ved en mye høyere dose enn med forbindelsen (IV). Det fremgår av tabellene la og lb at laveste utprøvde dose av forbindelsen (IV) 100 mg/kg, frembrakte % T/C på 145 mens laveste utprøvde dose av rebeccamycin, 50 mg/kg frembrakte % T/C på 145. Forbindelsen IV har følgelig mye større styrke.
Som vist i tabell 2 er forbindelsen med formel (V) aktiv overfor P388 leukemi ved dosenivåer i området fra 0,8-102,4 mg/kg. Den beste virkning ble oppnådd ved en dose på 102,4 mg/kg, hvorved en % T/C på 178% ble oppnådd. Det ble ikke observert toksisitet selv ved den høyeste utprøvde dose (102,4 mg/kg).
Som vist i tabell 3 er forbindelser med formel (VIII) aktive overfor P388 leukemi ved dosenivåer i området fra 0,8-102,4 mg/kg. Den beste virkning ble oppnådd ved en dose på 51,2 mg/kg, hvorved en % T/C på 206% ble oppnådd. Det ble ikke observert toksisitet selv ved den høyest utprøvde dose (102,4 mg/kg).
Av tabellene 2-4 fremgår det at forbindelsene med formlene (V) og (VIII) har mye høyere styrke enn rebeccamycin (% T/C på 144 ved henholdsvis 0,8 mg av forbindelsen med formelen (V) og 50 mg av rebeccamycin og % T/C på 156 ved 0,8 mg av forbindelsen med formelen (VIII)). Økningen i overlevelsestid er også bedre for forbindelsen med formlene (V) og (VIII).
De ved fremgangsmåten ifølge den foreliggende oppfinnelse fremstilte rebeccamycin-analoger eller et farma-søytisk akseptabelt syreaddisjonssalt derav kan anvendes i farmasøytiske preparater i kombinasjon med en inert farma-søytisk akseptabel bærer eller diluent.
De omtalte rebeccamycin-analoger, farmasøytisk aksep-table syreaddisjonssalter derav eller farmasøytiske preparater inneholdende disse ble anvendt ved terapeutisk behandling av en dyrevert (fortrinnsvis et pattedyr), som er påvirket av en malign tumor, hvorved man til en slik vert administrerer en virksom tumor-inhiberende dose av de omtalte analoger, salter eller preparater.
Eksempler på egnede preparater omfatter faste preparater til oral administrering, såsom tabletter, kapsler, piller, pulvere og granulater, flytende preparater til oral administrering, såsom løsninger, suspensjoner, siruper og eliksirer, og preparater til parenteral administrering, såsom sterile løsninger, suspensjoner eller emulsjoner. De kan også fremstilles i form av sterile, faste preparater, som kan løses i sterilt vann, fysiologisk saltvann eller et annet sterilt injiserbart medium umiddelbart før anvendelse.
Det vil være åpenbart, at den faktisk foretrukne dose av rebeccamycin-analoger fremstilt ifølge den foreliggende oppfinnelse vil variere med hensyn til den særlige forbindelse, som anvendes, det særlige preparat som formuleres, administreringsmåten og den særlige situs, vert og sykdom, som skal behandles. Mange faktorer, som modifiserer virkningen av legemidlet vil bli tatt i betraktning av fagmannen, f.eks. alder, legemsvekt, kjønn, kost, tidspunkt for administrering, utskillelseshastigheten, vertens tilstand, legemiddelkombinasjoner, reaksjonsfølsomhet og sykdommens alvor. Administrering kan utføres kontinuerlig eller periodisk innenfor den maksimalt tolererte dose. Optimale administreringsfrekvenser under gitte betingelser kan lett konstateres av fagmannen ved anvendelse av konvensjonelle dosebestemmelsesforsøk.
Den foreliggende oppfinnelse skal belyses ved hjelp av de etterfølgende eksempler, som ikke har til formål å be-grense oppfinnelsens omfang.
Eksempel 1
Fremstilling av en kryokonservert kultur av Saccharothrix aerocolonigenes stamme C38. 383- RK2 ( ATCC 39243)
Saccharothrix aerocolonigenes stamme C38.383-RK2 ble oppbevart som en kryokonservert kultur ved -80°C i en "Revco"-ultralavtemperaturfryser. Til fremstilling av en kryokonservert kultur ble stamme C38.383-RK2 overført i reagensglass til skråagar av gjær-maltekstraktagar supplert med CaC03 og bestående av
Skråagaren ble inkubert ved 28°C i 7-10 dager. En vegetativ kultur ble fremstilt ved å overføre overflate-veksten fra skråagarkulturen til en 500 ml erlenmeyerkolbe inneholdende 100 ml av et sterilt vegetativt medium bestående av
Denne vegetative kultur ble inkubert ved 28°C i 48 timer på en rotasjonsrører innstilt til 250 omdr./minutt. Den vegetative kultur ble blandet med et tilsvarende volum av en kryobeskyttende løsning bestående av 4 ml porsjoner av denne blanding ble overført til sterile kryogene reagensglass (5 ml kapasitet, Corning) og ble nedfrosset i et tørris-acetonbad. De frosne vegetative kulturer ble deretter oppbevart ved -80°C i en "Revco"-ultralavtemperaturfryser.
Eksempel 2
Fremstilling av en vegetativ kultur av Saccharothrix aerocolonigenes stamme C38. 383- RK2 ( ATCC 39243)
En vegetativ kultur ble fremstilt ved å overføre 4 ml av den kryokonserverte kultur til en 500 ml erlenmeyerkolbe inneholdende 100 ml av et steril vegetativt medium med samme sammensetning som det vegetative medium beskrevet i eksempel 1. Den vegetative kultur ble inkubert ved 28°C i 48 timer på en rotasjonsrører som var innstilt til 250 omdr./minutt.
Eksempel 3
Fremstilling av en forbindelse med formel ( IV)
3 ml av den vegetative kultur fremstilt slik som beskrevet ved fremgangsmåten i eksempel 2 ble inokulert i 500 ml erlenmeyerkolber, som hver særlig inneholdt 100 ml produksjonsmedium bestående av
Produksjonskulturen ble inkubert ved 28°C på en rota-sjonsrører som var innstilt til 250 omdr./minutt. Etter fermentering i 48 timer ble DL-5-fluortryptofan tilsatt til kulturen i en sluttkonsentrasjon på 1 mg/ml. Kulturen ble inkubert ved 28°C og rystet ved 250 omdr./minutt i ytterligere 4 dager. Fremstilling av forbindelsen med formel (IV) ble overvåket ved HPLC. Optimal fremstilling av forbindelsen med formel (IV) i en konsentrasjon på 23-32 mg/ml ble vanligvis oppnådd etter 6 dagers fermentering (dvs. 4 dager etter tilsetningen av DL-5-fluortryptofan).
Eksempel 4
Fremstilling av forbindelsen med formel ( V) og ( VIII)
3 ml av den vegetative kultur som var fremstilt slik som beskrevet ved fremgangsmåten i eksempel 2 ble inokulert i 500 ml erlenmeyerkolber som hver inneholdt 100 ml av et produksjonsmedium med samme sammensetning som beskrevet i eksempel 3. Produksjonskulturen ble inkubert ved 28°C på en rotasjonsrører som var innstilt til 250 omdr./minutt. Etter fermentering i 48 timer ble DL-6-fluortryptofan tilsatt til kulturen i en sluttkonsentrasjon på 1 mg/ml. Kulturen inkuberte ved 28°C og rystet ved 250 omdr./minutt i ytterligere 4 dager. Fremstilling av forbindelsene med formel (V) og (VIII) ble overvåket ved HPLC. Optimal fremstilling av forbindelsen med formlene (V) og (VIII) ble vanligvis oppnådd etter 6 dagers fermentering (dvs. 4 dager etter tilsetningen av DL-6-fluortryptofan) i en konsentrasjon på henholdsvis
3 6-58 ug/ml og 31-42 ug/ml.
Eksempel 5
Isolering og rensning av forbindelser med formlene ( IV), ( V) og ( VIII)
a) Generell metode
Løsningsmidler ble ikke redestillert før anvendelse.
Metanol, aceton, etylacetat, isopropyleter, kloroform, tetrahydrofuran, etyleter og heksaner var av ACS-reagenskvalitet. Vann til HPLC refererte til lokalt deionisert vann fra et Barnstead "Nanopure II"-system. Tetrahydrofuran, metanol og acetonitril til anvendelse ved HPLC var løsningsmidler av B & J Brand HPLC kvalitet. Ammoniumacetat var av Fischer HPLC kvalitet.
Normal fase tynnsjiktskromatografi (tic) ble utført på silikagel 60, "F-254"-plater (EM Reagents, kat. nr. 57 65, 5 x 10 cm, med en tykkelse på 0,25 mm). Reversfase tic ble utført med Whatman "MKC18"-plater (kat. nr. 4803-110, 0,2 mm tykke). Plater ble utviklet i Whatman sylindriske glass med lokk og 10 ml elueringsmiddel. Rebeccamycin-analoger var synlige som gule soner i normalt lys eller som gule fluorescerende soner i 254 nm eller 366 nm ultrafiolett lys.
Til de fullstendige næringsmedier ble "Dicalite"-filterhjelpemiddel ("speed plus") tilsatt. Etter kort om-røring ble næringsmediene filtrert på store Buchner-trakter eller på en Tolhurst "Centerslung Centrifugal Filter Unit"
(modell 1B15, Ametek, Inc.). Filtratene ble kastet. Myce-liemasser ble omrørt i THF eller THF-acetonblandinger i 1 time, filtrert, og "Dicalite"-filterhjelpemidlet ble skylt ytterligere med aceton, inntil det ikke lengre ga gul fluorescence under UV lys. De kombinerte filtrater ble konsentrert ved redusert trykk til oppnåelse av råekstrakter.
Et vakuumvæskekromatografisk (VLC) apparat besto av en Buchner trakt (Kontes, art. nr. K-954100) inneholdende en fastgjort sintret glasskive (M porøsitet), en sideslangefor-bindelse til vakuum og en nedre 24/40 forbindelse til til-slutning av oppsamlingskolber. Innledningvis ble de minst polare elueringsløsningsmidler trukket igjennom under vakuum til dannelse av et tettpakket adsorberende sjikt med en høyde på 5 cm. Prøver ble pre-adsorbert på adsorberende materiale og overført til trakter som oppslemminger eller overført i en løsning av det minst polare elueringsløsningsmiddel. Trinnvise gradientelueringer ble utført, hvor forutbestemte volumer av elueringsmidler med stigende polaritet utgjorde fraksjonene. Trakten ble sugd tørr etter hvert volum elueringsmiddel. Fraksjonene ble konsentrert og kombinert på basis av tynnsjiktskromatografianalyse.
Et apparat til fraskillingskromatografi besto av følgende: En Glenco-kolonne (2,5 innvendig diameter x 100 cm) utstyrt med løsningsmiddelresistent teflon og plater; Fluid Metering, Inc. FMI laboratoriepumpe (modell "RP-G150"), Glenco glassreservoar (500 ml), Isco modell "328"-frak-sjonsoppsamler. Kolonner ble oppslemmingspakket med Sephadex, LH-20 (Pharmacia) forsvellet i elueringsløsningsmidlet. Løsningsmidlet ble avlevert på en nedadrettet måte gjennom kolonnen ved en hastighet som ble kontrollert med labora-toriepumpen.
Følgende komponenter ble anvendt til oppbygging av et semi-preparativt HPLC-system: Waters Associates model "590 Solvent Delivery System"-pumpe, Knauer modell 87 detektor med variabel bølgelengde, Waters Associates modell "SR-204 Strip Chart"-skriver, Whatman, Partisil 10 ODS-3-kolonne (10 mm x 50 cm), 316 rustfritt stålrørssystem (0,23 mm innvendig diameter) .
b) Isolering og rensning av forbindelsen med formel ( IV)
Hele næringsmediumet (5 1) ble filtrert med
"Dicalite"- filterhjelpemiddel, og myceliemassen ble ekstra-hert ved omrøring i THF (2 1) il time. Etter ytterligere filtrering og en ytterligere THF-skylling (1 1) ble de kombinerte filtrater konsentrert under redusert trykk til oppnåelse av 4,5 g råekstrakt. Ekstrakten ble adsorbert på 6,5 g "Lichroprep Si 60" silikagel (EM Science, Art. 9336, 15-25 |im) og ble overført til en 60 ml VLC-trakt inneholdende ytterligere 24,5 g silikagel. En trinnvis gradienteluering med heksan-etylacetat ble utført (200 ml volumer) etterfulgt av en vasking med 200 ml volum THF-væske. THF-vaskingen (156 mg) ble løst i 4 ml THF og overført til en kolonne inneholdende 160 g Sephadex, LH-20 ekvilibrert med THF (sjikt-høyde 90 cm, sjiktvolum 430 ml). Strømningshastighet 3,75 ml/minutt. Som det kunne bestemmes visuelt ble et stort gult bånd (62 mg) eluert i den første fjerdedel av det andre sjiktvolum. Endelig rensing ble utført ved reversfase (C18) HPLC-kromatografi ved en strømningshastighet på 4 ml/minutt
(0,1 M NH4OAc-THF 60*40). Påvisning skjedde ved 320 nm. Hovedanalogen (23 mg) , benevnt forbindelsen med formel (IV), eluerte etter 39 minutter.
c) Isolering og opprensninq av forbindelsene med formlene ( V) og ( VIII)
Hele næringsmediumet (2 1) ble filtrert under anvendelse av "Dicalite"-filterhjelpemiddel. Etter omrøring i THF (2 1) i 45 minutter, ble myceliemassen filtrert og skylt med et ytterligere volum THF (1,5 1). Filtratet ble konsentrert under redusert trykk til oppnåelse av 3,39 g råekstrakt. Råekstrakten ble triturert med fem 50 ml volumer THF, som ble kombinert og konsentrert til oppnåelse av 0,74 g THF-løselig rest. Denne masse inneholdt størstedelen av de gule fluorescerende materialer. Det THF-løselige materiale ble adsorbert på 2 g silikagel H (Merck, 10-40 |im) og overført til en 30 ml VLC-trakt inneholdende ytterligere 11 g silikagel H. En trinnvis gradienteluering med heksan-etylacetat ble utført under anvendelse av 100 ml volumer elueringsmiddel. De to hovedanaloger av rebeccamycin ble separert rent på denne måte. Den mindre polare gule sone (141 mg) ble eluert med heksan-etylacetat (1:1), og den mer polare analog (105 mg) ble eluert med heksan-etylacetat (1:3).
Den mer polare analog (105 mg) ble løst i 2 ml THF og overført til en kolonne inneholdende 160 g Sephadex,LH-20 (sjikthøyde 90 cm, sjiktvolum 430 ml), som var pre-svellet 1 THF. Strømningshastigheten var 4 ml/minutt. Det gule hoved-bånd ble eluert ved 1,25 sjiktvolumer, hvilket kunne bestemmes visuelt, til oppnåelse av forbindelsen med formel (V)
(77 mg) .
Den mindre polare analog fra VLC (141 mg) ble løst i 2 ml MeOH og overført til en kolonne inneholdende 110 g Sephadex, LH-20, som var pre-svellet i MeOH (sjikthøyde 80 cm, sjiktvolum 400 ml). Strømningshastigheten var 3,5 ml/ minutt. Den gule hovedsone ble eluert ved avslutningen av det fjerde sjiktvolum til oppnåelse av forbindelsen med formel (VIII) (70 mg).
Claims (3)
1. Fremgangsmåte til fremstilling av terapeutisk aktive rebeccamycin-analoger med formelen
hvor X-j_ og X2 er fluor, eller et farmasøytisk akseptabelt syreaddisjonssalt derav, karakterisert ved at rebeccamycin-produserende Saccharothrix aerocolonigenes ATCC 39243 eller mutanter derav med de samme vesentlige morfologiske og biokjemiske egenskaper, dyrkes i et vandig næringsmedium i nærvær av en DL-fluortryptofan-analog, inntil en betydelig mengde av den ønskede rebeccamycin-analog er blitt produsert av organismen i dyrkningsmediet, og fra dyrkningsmediet utvinnes det ønskede rebeccamycinderivat i en praktisk talt ren form.
2. Fremgangsmåte i samsvar med krav 1, karakterisert ved at tryptofan-analogen som anvendes er DL-5-fluortryptofan.
3. Fremgangsmåte i samsvar med krav 1, karakterisert ved at tryptofan-analogen som anvendes er DL-6-fluortryptofan.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US48943090A | 1990-03-06 | 1990-03-06 | |
| US64875191A | 1991-02-05 | 1991-02-05 |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO910855D0 NO910855D0 (no) | 1991-03-05 |
| NO910855L NO910855L (no) | 1991-09-09 |
| NO179555B true NO179555B (no) | 1996-07-22 |
| NO179555C NO179555C (no) | 1996-10-30 |
Family
ID=27049711
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO910855A NO179555C (no) | 1990-03-06 | 1991-03-05 | Fremgangsmåte til fremstilling av terapeutisk aktive rebeccamycinanaloger |
Country Status (22)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5468849A (no) |
| EP (1) | EP0450327B1 (no) |
| JP (1) | JPH0780899B2 (no) |
| KR (1) | KR940005657B1 (no) |
| AT (1) | ATE138926T1 (no) |
| AU (1) | AU623050B2 (no) |
| CY (1) | CY1941A (no) |
| CZ (1) | CZ279307B6 (no) |
| DE (1) | DE69119964T2 (no) |
| DK (1) | DK0450327T3 (no) |
| ES (1) | ES2088439T3 (no) |
| FI (1) | FI102376B1 (no) |
| GR (1) | GR3020163T3 (no) |
| HK (1) | HK181496A (no) |
| HU (1) | HU211055B (no) |
| IE (1) | IE910737A1 (no) |
| IL (1) | IL97233A (no) |
| NO (1) | NO179555C (no) |
| PT (1) | PT96943B (no) |
| SG (1) | SG63555A1 (no) |
| TW (1) | TW232698B (no) |
| YU (1) | YU39391A (no) |
Families Citing this family (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| NZ245203A (en) * | 1991-11-29 | 1997-07-27 | Banyu Pharma Co Ltd | 5h-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]carbazole-5,7(6h)-dione derivatives substituted in position-13 by a pentose or hexose group; corresponding indolo-furano(anhydride)intermediates |
| US5437996A (en) * | 1992-11-24 | 1995-08-01 | Banyu Pharmaceutical Co., Ltd. | Microtetraspora strain for preparation of indolopyrrolocarbazole derivatives |
| US5589365A (en) * | 1991-11-29 | 1996-12-31 | Banyu Pharmaceutical Co., Ltd. | Process for producing glycosylated indolopyrrolocarbazole derivatives by culturing certain microorganisms |
| AU685389B2 (en) * | 1992-03-20 | 1998-01-22 | Wellcome Foundation Limited, The | Further indole derivatives with antiviral activity |
| JP3603322B2 (ja) * | 1992-12-14 | 2004-12-22 | 萬有製薬株式会社 | インドロピロロカルバゾール誘導体の製造法 |
| US5861293A (en) * | 1994-06-13 | 1999-01-19 | Banyu Pharmaceutical Co., Ltd. | Gene encoding glycosyltransferase and its uses |
| DK0971717T3 (da) * | 1996-08-22 | 2002-03-25 | Bristol Myers Squibb Co | Cytotoksiske aminosukker- og relaterede sukkerderivater af indolopyrrolocarbazoler |
| US6653290B2 (en) * | 2000-10-06 | 2003-11-25 | Bristol-Myers Squibb Company | Tumor proliferation inhibitors |
| US6610727B2 (en) | 2000-10-06 | 2003-08-26 | Bristol-Myers Squibb Company | Anhydro sugar derivatives of indolocarbazoles |
| US6677450B2 (en) | 2000-10-06 | 2004-01-13 | Bristol-Myers Squibb Company | Topoisomerase inhibitors |
| US6855698B2 (en) * | 2001-03-22 | 2005-02-15 | Bristol-Myers Squibb Company | Topoisomerase I selective cytotoxic sugar derivatives of indolopyrrolocarbazoles |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4487925A (en) * | 1983-01-28 | 1984-12-11 | Bristol-Myers Company | Rebeccamycin and process for its preparation |
| US4552842A (en) * | 1983-01-28 | 1985-11-12 | Bristol-Myers Company | Process for producing rebeccamycin |
| US4524145A (en) * | 1984-09-04 | 1985-06-18 | Bristol-Myers Company | 4'-Deschlororebeccamycin pharmaceutical composition and method of use |
| US4567143A (en) * | 1984-09-04 | 1986-01-28 | Bristol-Myers Company | Process for preparing 4'-deschlororebeccamycin |
| US4785085A (en) * | 1986-11-21 | 1988-11-15 | Bristol-Myers Company | Rebeccamycin analogs |
| US4808613A (en) * | 1986-11-21 | 1989-02-28 | Bristol-Myers Company | Rebeccamycin derivative containing pharmaceutical composition |
-
1991
- 1991-02-14 IL IL9723391A patent/IL97233A/en unknown
- 1991-03-01 FI FI911047A patent/FI102376B1/fi not_active IP Right Cessation
- 1991-03-04 TW TW080101707A patent/TW232698B/zh active
- 1991-03-05 NO NO910855A patent/NO179555C/no unknown
- 1991-03-05 HU HU91716A patent/HU211055B/hu not_active IP Right Cessation
- 1991-03-05 KR KR1019910003548A patent/KR940005657B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1991-03-05 IE IE073791A patent/IE910737A1/en not_active IP Right Cessation
- 1991-03-05 AU AU72616/91A patent/AU623050B2/en not_active Ceased
- 1991-03-05 SG SG1996002071A patent/SG63555A1/en unknown
- 1991-03-05 AT AT91103316T patent/ATE138926T1/de not_active IP Right Cessation
- 1991-03-05 EP EP91103316A patent/EP0450327B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1991-03-05 JP JP3038752A patent/JPH0780899B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1991-03-05 DE DE69119964T patent/DE69119964T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1991-03-05 DK DK91103316.5T patent/DK0450327T3/da active
- 1991-03-05 PT PT96943A patent/PT96943B/pt not_active IP Right Cessation
- 1991-03-05 ES ES91103316T patent/ES2088439T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1991-03-06 CZ CS91586A patent/CZ279307B6/cs unknown
- 1991-03-06 YU YU39391A patent/YU39391A/sh unknown
-
1994
- 1994-03-21 US US08/216,075 patent/US5468849A/en not_active Expired - Fee Related
-
1996
- 1996-06-06 GR GR960401487T patent/GR3020163T3/el unknown
- 1996-09-26 HK HK181496A patent/HK181496A/xx not_active IP Right Cessation
-
1997
- 1997-05-16 CY CY194197A patent/CY1941A/xx unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0349061B1 (en) | Immunosuppressant agent | |
| US4981792A (en) | Immunosuppressant compound | |
| JP2917305B2 (ja) | Ｆｒ−９０１１５５物質およびその生産法 | |
| US4987139A (en) | FK-520 microbial transformation product | |
| JPH0320279A (ja) | 新規免疫抑制剤 | |
| NO179555B (no) | Fremgangsmåte til fremstilling av terapeutisk aktive rebeccamycinanaloger | |
| US4975372A (en) | Microbial transformation product of L-683,590 | |
| EP0445736A1 (en) | Rebeccamycin analog and pharmaceutical composition containing it | |
| KR100611265B1 (ko) | 신규 뎁시펩티드 화합물 | |
| US5158938A (en) | Rebeccamycin | |
| US5344823A (en) | Antitumor antibiotic BMY-41219 | |
| US5290772A (en) | Immunosuppressant agent | |
| EP0403242A1 (en) | New L-683,590 microbial transformation product | |
| CA2037783C (en) | Rebeccamycin analogs by tryptophan analogs feeding | |
| US4994271A (en) | BMY-40800 antitumor antibiotics | |
| US5268370A (en) | Microbial transformation product of L-679,934 | |
| US5036010A (en) | BMY-40800 antitumor antibiotics | |
| EP0378317A2 (en) | Microbial transformation product of L-679,934 | |
| EP0378320A2 (en) | Microbial transformation product | |
| WO2006123966A1 (fr) | Souche streptomyces virginiae 325 a, producteur d'oligomycine sc - ii |