CZ279307B6 - Rebeccamycinový analog, způsob jeho přípravy a farmaceutický prostředek, který ho obsahuje - Google Patents
Rebeccamycinový analog, způsob jeho přípravy a farmaceutický prostředek, který ho obsahuje Download PDFInfo
- Publication number
- CZ279307B6 CZ279307B6 CS91586A CS58691A CZ279307B6 CZ 279307 B6 CZ279307 B6 CZ 279307B6 CS 91586 A CS91586 A CS 91586A CS 58691 A CS58691 A CS 58691A CZ 279307 B6 CZ279307 B6 CZ 279307B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- rebeccamycin
- formula
- analog
- fluorotryptophan
- pharmaceutically acceptable
- Prior art date
Links
- INSACQSBHKIWNS-QZQSLCQPSA-N rebeccamycin Chemical class O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](OC)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C2=C3N=C4[C](Cl)C=CC=C4C3=C3C(=O)NC(=O)C3=C2C2=CC=CC(Cl)=C21 INSACQSBHKIWNS-QZQSLCQPSA-N 0.000 title claims abstract description 37
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 15
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 21
- 241000970318 Lechevalieria aerocolonigenes Species 0.000 claims abstract description 16
- ZGCSNRKSJLVANE-UHFFFAOYSA-N Aglycone-Rebeccamycin Natural products N1C2=C3NC4=C(Cl)C=CC=C4C3=C(C(=O)NC3=O)C3=C2C2=C1C(Cl)=CC=C2 ZGCSNRKSJLVANE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 15
- QEHOIJJIZXRMAN-UHFFFAOYSA-N Rebeccamycin Natural products OC1C(O)C(OC)C(CO)OC1N1C2=C3NC4=C(Cl)C=CC=C4C3=C3C(=O)NC(=O)C3=C2C2=CC=CC(Cl)=C21 QEHOIJJIZXRMAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 15
- 229960005567 rebeccamycin Drugs 0.000 claims abstract description 15
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 15
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims abstract description 14
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical class C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 claims abstract description 9
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 6
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims abstract description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 14
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 10
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 10
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 9
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 8
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 7
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 claims description 6
- INPQIVHQSQUEAJ-UHFFFAOYSA-N 5-fluorotryptophan Chemical group C1=C(F)C=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 INPQIVHQSQUEAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- YMEXGEAJNZRQEH-UHFFFAOYSA-N 6-Fluoro-DL-tryptophan Chemical group FC1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 YMEXGEAJNZRQEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 claims description 5
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N Fluorine Chemical compound FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- ADMHYWIKJSPIGJ-UHFFFAOYSA-N 2-amino-3-(7-fluoro-1h-indol-3-yl)propanoic acid Chemical group C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1F ADMHYWIKJSPIGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- DEBQMEYEKKWIKC-UHFFFAOYSA-N 2-azaniumyl-3-(4-fluoro-1h-indol-3-yl)propanoate Chemical group C1=CC(F)=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 DEBQMEYEKKWIKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 3
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 2
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 claims description 2
- JSKFWUPVIZYJMR-UHFFFAOYSA-N 1,11-dichloro-6-[2-(diethylamino)ethyl]-12-(4-o-methylhexopyranosyl)-12,13-dihydro-5h-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]carbazole-5,7(6h)-dione Chemical compound O=C1N(CCN(CC)CC)C(=O)C(C2=C3[CH]C=CC(Cl)=C3NC2=C23)=C1C2=C1C=CC=C(Cl)[C]1N3C1OC(CO)C(OC)C(O)C1O JSKFWUPVIZYJMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 claims 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 claims 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 abstract description 12
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 abstract description 12
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 53
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 32
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 21
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N DMSO Substances CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 14
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 11
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 10
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 9
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 8
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 8
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 6
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 6
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 6
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 6
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 6
- 238000002211 ultraviolet spectrum Methods 0.000 description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 5
- 230000002338 cryopreservative effect Effects 0.000 description 5
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 5
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 5
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 5
- 238000003817 vacuum liquid chromatography Methods 0.000 description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 4
- IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N dihydroxy(oxo)silane Chemical compound O[Si](O)=O IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 4
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 4
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 4
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 4
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 4
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 4
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 4
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 4
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 3
- 238000005033 Fourier transform infrared spectroscopy Methods 0.000 description 3
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 3
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 3
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 3
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 3
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N methyl 1-acetylthieno[3,2-c]pyrazole-5-carboxylate Chemical compound CC(=O)N1N=CC2=C1C=C(C(=O)OC)S2 XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 3
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 3
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 3
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 3
- 241000186361 Actinobacteria <class> Species 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000030453 Drug-Related Side Effects and Adverse reaction Diseases 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 206010070863 Toxicity to various agents Diseases 0.000 description 2
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 2
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 2
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 2
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 2
- 239000000287 crude extract Substances 0.000 description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 2
- 239000012156 elution solvent Substances 0.000 description 2
- OAYLNYINCPYISS-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;hexane Chemical compound CCCCCC.CCOC(C)=O OAYLNYINCPYISS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004992 fast atom bombardment mass spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 2
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical class CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- -1 rebeccamycin compound Chemical class 0.000 description 2
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- YYGJQPKPUWCRIM-JTQLQIEISA-N (2s)-2-(fluoroamino)-3-(1h-indol-3-yl)propanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@@H](C(=O)O)NF)=CNC2=C1 YYGJQPKPUWCRIM-JTQLQIEISA-N 0.000 description 1
- RMTFNDVZYPHUEF-XZBKPIIZSA-N 3-O-methyl-D-glucose Chemical compound O=C[C@H](O)[C@@H](OC)[C@H](O)[C@H](O)CO RMTFNDVZYPHUEF-XZBKPIIZSA-N 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017060 Arachis glabrata Nutrition 0.000 description 1
- 244000105624 Arachis hypogaea Species 0.000 description 1
- 235000010777 Arachis hypogaea Nutrition 0.000 description 1
- 235000018262 Arachis monticola Nutrition 0.000 description 1
- DMCIFDWHFNASDP-OTUWWBTESA-L C([O-])([O-])=O.[Ca+2].N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)O Chemical compound C([O-])([O-])=O.[Ca+2].N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)O DMCIFDWHFNASDP-OTUWWBTESA-L 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZAFNJMIOTHYJRJ-UHFFFAOYSA-N Diisopropyl ether Chemical compound CC(C)OC(C)C ZAFNJMIOTHYJRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100369915 Drosophila melanogaster stas gene Proteins 0.000 description 1
- 235000019733 Fish meal Nutrition 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N L-rhamnopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N L-rhamnose Natural products CC(O)C(O)C(O)C(O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UMQAIKKJIZYHQC-UHFFFAOYSA-M Milling yellow 3G Chemical compound ClC=1C=CC(=C(C=1)S(=O)(=O)[O-])N1N=C(C(=C1O)N=NC1=CC=C(C=C1)OS(=O)(=O)C1=CC=C(C=C1)C)C.[Na+] UMQAIKKJIZYHQC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000845082 Panama Species 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 102100029365 Piwi-like protein 2 Human genes 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000004809 Teflon Substances 0.000 description 1
- 229920006362 Teflon® Polymers 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MJOQJPYNENPSSS-XQHKEYJVSA-N [(3r,4s,5r,6s)-4,5,6-triacetyloxyoxan-3-yl] acetate Chemical class CC(=O)O[C@@H]1CO[C@@H](OC(C)=O)[C@H](OC(C)=O)[C@H]1OC(C)=O MJOQJPYNENPSSS-XQHKEYJVSA-N 0.000 description 1
- YJGNZVVNOURNJV-UHFFFAOYSA-K [Mg+2].[K+].OP(O)([O-])=O.[O-]S([O-])(=O)=O Chemical compound [Mg+2].[K+].OP(O)([O-])=O.[O-]S([O-])(=O)=O YJGNZVVNOURNJV-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 1
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 1
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 1
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 1
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000000118 anti-neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 239000000890 drug combination Substances 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- UREBWPXBXRYXRJ-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;methanol Chemical compound OC.CCOC(C)=O UREBWPXBXRYXRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 239000004467 fishmeal Substances 0.000 description 1
- 125000001153 fluoro group Chemical group F* 0.000 description 1
- 238000007429 general method Methods 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 235000012907 honey Nutrition 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 230000005917 in vivo anti-tumor Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L manganese(2+);methyl n-[[2-(methoxycarbonylcarbamothioylamino)phenyl]carbamothioyl]carbamate;n-[2-(sulfidocarbothioylamino)ethyl]carbamodithioate Chemical compound [Mn+2].[S-]C(=S)NCCNC([S-])=S.COC(=O)NC(=S)NC1=CC=CC=C1NC(=S)NC(=O)OC WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 231100000682 maximum tolerated dose Toxicity 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 239000012092 media component Substances 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 235000020232 peanut Nutrition 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000013587 production medium Substances 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000012827 research and development Methods 0.000 description 1
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000011894 semi-preparative HPLC Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 229920002545 silicone oil Polymers 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002195 soluble material Substances 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 1
- 239000008174 sterile solution Substances 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 1
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
- C07H19/044—Pyrrole radicals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/26—Preparation of nitrogen-containing carbohydrates
- C12P19/28—N-glycosides
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Ceramic Products (AREA)
Abstract
Přidání určitých tryptofanových analogů do kultivačního prostředí v průběhu fermentace rebeccamycin produkujícího kmene Saccharothrix aerocolonigenes vede k produkci nových analogů rebeccamycinu s výhodnými vlastnostmi při ošetřování nádorových onemocnění savců.ŕ
Description
Rebeccamycinový analog, způsob jeho přípravy a farmaceutický prostředek, který ho obsahuje
Oblast techniky
Vynález se týká nových analogů rebeccamycinu, které mají antineoplastické vlastnosti a působí protinádorově. Vynález se také týká způsobu jejich přípravy a farmaceutických prostředků, které je obsahují.
Dosavadní stav techniky
Americké patentové spisy číslo 4 487925 a 4 552842 popisují protinádorový prostředek, označovaný jako rebeccamycin a jeho 5',2',3'',6''-tetraacetátové deriváty a způsob výroby tohoto prostředku kultivací kmenů produkujících rebeccamycin Nocardia aerocolonigenes, s výhodou Nocardia aerocolonigenes ATCC 39243 nébo mutantu, produkujícího rebeccamycin ve vodném živném prostředí obsahujícím asimilovatelné zdroje uhlíku a dusíku za kultivace v aerobních podmínkách až do produkce dostatečného množství rebeccamycinu. Nejnověji Nocardia aerocolonigenes ATCC 39243 bylo překlasifikování jako Sáccharothrix aerocolonigenes ATCC 39243 /Bush a kol., J. Antibiotics, 40, str. 668 až 678, 1987/.
Podstata vynálezu
Podstatou vynálezu jsou nové analogy protinádorového činidla, označovaného jako rebeccamycin, obecného vzorce A
kde znamená Xj a X2 na sobě nezávisle atom fluoru nebo vodíku za podmínky, že Χχ a X2 neznamenají současně oba atom vodíku, a X3 hydroxyskupinu nebo methoxyskupinu a jeho farmaceuticky vhodné adiční soli s kyselinou.
-1CZ 279307 B6
kde znamená Xj a X2 na sobě nezávisle atom fluoru nebo vodíku za podmínky, že Xj a X2 neznamenají současně oba atom vodíku.
-2CZ 279307 B6
Sloučeniny obecného vzorce II a III se produkují dodáváním vhodného tryptofanového analogu do kultur kmenu Saccharothrix aerocolonigenes, produkujícího rebeccamycin.
Vynález blíže objasňuje následující popis a připojené výkresy, kde na obr. 1 je IČ spektrum sloučeniny vzorce IV, na obr. 2 je 1H-NMR pro sloučeniny vzorce IV, na obr. 3 je 13C-NMR pro sloučeninu vzorce IV, na obr. 4 je IČ spektrum pro sloučeninu vzorce V, na obr. 5 je 3H-NMR pro sloučeninu vzorce V, na obr. 6 je 13C-NMR pro sloučeninu vzorce V, na obr. 7 je IČ spektrum pro sloučeninu vzorce VIII, na obr. 8 je 1H-NMR pro sloučeninu vzorce VIII, na obr. 9 je 13C-NMR pro sloučeninu vzorce VIII, na obr. 10 je hmotové spektrum sloučeniny vzorce IV, na obr. 11 je UV spektrum sloučeniny vzorce IV, na obr. 12 je hmotové spektrum sloučeniny vzorce V, na obr. 13 je UV spektrum sloučeniny vzorce V, na obr. 14 je hmotové spektrum sloučeniny vzorce VIII a na obr. 15 je UV spektrum sloučeniny vzorce VIII.
Americké patentové spisy číslo 4 487925 a 4 552842 popisují produkci a izolaci protinádorově účinné látky označované jako rebeccamycin obecného vzorce I
Tato rebeccamycinová sloučenina je hlavní složkou fermentace kmenu Saccharothrix aerocolonigenes produkujícího rebeccamycin.
Nyní se s překvapením zjistilo, že fermentační proces, popsaný v amerických patentových spisech číslo 4 487925 a 4 552842 se může provádět v přítomnosti určitých tryptofanových analogů, čímž je možno připravit nové analogy rebeccamycinu s hodnotnými protinádorovými vlastnostmi. Rebeccamycinové analogy podle vynálezu mají obecný vzorec II a III
-3CZ 279307 B6
OH
kde znamená Xj a X2 atom fluoru nebo vodíku za podmínky, že Xj a X2 neznamenají současně atom vodíku. Vynález zahrnuje také jejich farmaceuticky vhodné adiční soli s kyselinami.
Výhodnými příklady sloučenin podle vynálezu jsou sloučeniny vzorce IV
-4CZ 279307 B6
Jinými výhodnými příklady sloučenin podle vynálezu jsou sloučeniny vzorce V, VI, VII , VIII , IX, X a XI.
/VI/
OH
OH /VII/
/Vlil/
-6CZ 279307 B6 /IX/
/XI/
-7CZ 279307 B6
Při způsobu podle vynálezu se tryptofanOvý analog přidává do rebeccamycinového fermentačního prostředí a zavádí se v průběhu fermentace do rebeccamycinové struktury za vytváření odpovídájícího rebeccamycinového analogu.
Sloučeniny vzorce IV až XI se produkují kultivací kmene Saccharothrix aerocolonigenes produkujícího rebeccamycin s DL-4fluortryptofanem, DL-5-fluortryptofanem, DL-6-fluortryptofanem nebo s DL-7-fluortryptofanem. Výhodným produkčním organismem je nový kmen Saccharothrix aerocolonigenes, původně označovaný jako Nocardia aerocolonigenes kmen C38,383 RK2 /ATCC 39243/ v americkém patentovém spise číslo 4 487925. Nověji byl tento kmen překlásifikován na Saccharothrix aerocolonigenes /Busch a kol., J. Antibiotics 40, str. 668 až 678, 1987/ a je zde označován jakožto Saccharothrix aerocolonigenes kmen C38,383-RK2 /ATCC 39243/. Tento kmen byl izolován ze vzorku půdy, sebraného v Panamě. Biologicky čistá kultura kmene C 38,383-RK2 je uložena ve sbírce Američan Type Culture Collection, Rockville, Maryland a je uchovávána se stálou sbírkou mikroorganismů jakožto ATCC 39243. Tato kultura, označená jako C 38,383-RK2 je také uchovávána jakožto spící kultura v lyofilizovaných zkumavkách a v kryogenních fiolách ve sbírce Bristol-Myers Squibb Co. Pharmaceutical Research and Development Division Culture Collection, 5 Research Parkway, Wallingford, Connectlcut 06492.
Taxonomické studie kmenu C38,383-RK2 (ATCC 39243/ jsou podrobně popsány v americkém spise číslo 4 489925 a v J. Antibiotics 40, str. 668 až 678, 1987. Kmen označen jako nový kmen Saccharothrix aerocolonigenes.
Vynález ovšem není omezen na jeden určitý výhodný kmen ATCC 3 9 243 nebo na organismy plně popsané v tomto spise. Týká se zvláště jiných rebeccamycin produkujících kmenů nebo mutantů popsaných organismů, které se mohou produkovat běžnými způsoby, jako je ozáření rentgenovými paprsky, ultrafialovými paprsky, zpracování chemikáliemi a podobně.
Při způsobu podle vynálezu se rebeccamycin produkující kmen Saccharothrix aerocolonigenes, mající identifikační charakteristiky kmene C38,383-RK2 (ATCC 39243) nebo jeho mutant nebo variant kultivující ve vodném běžném živném prostředí doplněném vhodným triptofanovým analogem. Pro optimální produkci sloučeniny vzorce VI a X má být živné prostředí doplněno DL-4-fluortryptofanem. Pro optimální produkci sloučenin vzorce IV a IX má být živné prostředí doplněno DL-5-fluortryptofanem. Pro optimální produkci sloučenin vzorce V a VIII, má být živné prostředí doplněno DL-6-fluortryptofanem. Pro optimální produkci sloučeniny VII a XI má být živné prostředí doplněno DL-7-fluortryptofanem. Organismus roste v živném prostředí obsahujícím známé zdroje živin pro actinomycetes. Organismus tedy roste v živném prostředí obsahujícím asimilovatelný zdroj uhlíku, jako je sacharosa, laktoda, glukosa, rhamnosa, fruktosa, glycerol nebo rozpustný škrob. Živné prostředí má také obsahovat asimilovatelný zdroj dusíku, jako je rybí moučka, pepton, podzemnicová moučka, moučka bavlníkových semen, kukuřičná půda, aminokyseliny nebo amoniové soli. Do živného prostředí se také mohou vnášet živné anorganické soli, aby docházelo k vytváření iontů sodíku, draslíku, amonia, vápníku, fosfátu, sulfátu, nitrátu, karbonátu a podobných iontů. Do živného
-8CZ 279307 B6 prostředí se popřípadě mohou přidávat stopové prvky, například med, mangan, železo a zinek, nebo mohou být přítomny jako nečistoty jiných složek živného prostředí. S výhodou se používá submerzních aerobních podmínek pro výrobu velkého množství antibiotik, jakkoliv se pro výrobu omezených množství může používat povrchových kultur a baněk. Pro způsob podle vynálezu se může používat obecných postupů běžných pro kultivaci jiných actinomycetes.
Způsob výroby antibiotik podle vynálezu se může provádět za jakékoliv teploty, vedoucí k dostatečnému růstu produkčního organismu., například se běžně používá teploty 18 až 39 ”C a nejvhodnější teplota je přibližně 28 °C. Fermentace se může provádět v baňkách nebo v laboratorních nebo v průmyslových fermentátorech o různé kapacitě.
Pokud se používá fermentace v nádrži, je žádoucí produkovat vegetativní inoculum V živné půdě inokulací malého objemu kultivačního prostředí kryopreservativní kulturou nebo lyofilizovanou kulturou produkčního organismu, šikmo uloženou ve zkumavce. Po získání životaschopného a aktivního inokula tímto způsobem, převede se inokulum asepticky do fermantační nádoby, vybavené živným prostředím pro provozní výrobu antibiotika podle vynálezu. Prostředí, ve kterém vegetativní inokulum roste, může být stejné nebo odlišné od prostředí v nádobě, pokud se dosahuje dobrého růstu produkčního mikroorganismu a je doplněno vhodným fluortryptofanem. Dalšího míchání se může dosahovat mechanickým míchadlem. Popřípadě se mohou přidávat protipěnící přísady, jako je vepřový tuk nebo silikonový olej. Produkce antibiotika je monitorována vysoce výkonnou kapalinovou chromatografii nebo běžnými biologickými zkouškami. Obecně se optimální produkce antibiotik způsobem podle vynálezu dosahuje po inkubaci po dobu 6 dní. Isolace a čištění takto získaných derivátů se může provádět o sobě známými běžnými chromatografickými způsoby.
Fyzikální a chemické vlastnosti:
Sloučeniny vzorce IV, V a VIII mají následující fyzikální a chemické vlastnosti:
Sloučenina obecného vzorce IV popis: jasně žlutá amorfní pevná látka molekulární vzorec: C26H19F2N3°7 molekulární hmotnost: 523454 hmotové spektrum: hmot, spektrometr Kratos MS 25 FABMS 524 (M+ + H)+, 361 (M-162, ztráta glukosy).
ultrafialové spektrum: spektrofotometr Diodě Array Hewlett Packard 845 A; koncentrace 1,0 mg/100 ml MeOH, neutrální max nm (E 1 %/l cm): 405, 322 (457), 288, 277, 259, 230 (348) infračervené spektrum: spektrometr Perkin-Elmer 1800 FTÍR; KBr peleta (cm-1): 3340, 2915, 1752, 1708, 1628, 1591, 1484,
1462, 1392, 1331, 1292, 1247, 1191, 1112, 1081, 1052, 947,
904, 795, 762, 752, 752, 511
360 MHz 1H-NMR: spektrometr Bruker Model AN-3000; duální sonda na měření 1H a 13C, 5 mm, rozpouštědlo dg-DMSO; pozorované
-9CZ 279307 B6 chemické posuny (ppm) 11,76 (s, 1H), 11,23 (s, 1H), 8,85 (dd, 1H), 8,77 (dd, 1H), 8,01 (dd, 1H), 7,86 (dd, 1H) , 7,46 (m, 2H), 6,29 (d, 1H) , 6,12 (t, 1H) , 5,45 (d, 1H) , 5,17 (d,
1H), 4,95 (d, 1H), 4,07 (d, 1H), 3,95 (m, 2H), 3,81 (d,
1H), 3,59 (m, 2H).
MHz 13C-NMR: spektrometr Bruker Model AM-3000; protonové dekuplované spektrum: duální sonda na měření 1H a 13C, 5 mm, rozpouštědlo dg-DMSO; pozorované chemické posuny (ppm): 170,9, 170,8, 157, 0 (d), 157,0 (d), 138,6, 137,2, 130,7, 129, 2, 121,7 (d), 121,4 (d), 121,3, 119,6, 116,6, 115,1, 115,0 (d), 114,6 (d), 113,3 (d), 113,2 (d), 109,1 (d),109,1 (d), 84,8, 78,7, 76,5, 73,2, 67,6, 58,3 rozpustnost: rozpustná v DMSO, DMF, THF, acetonu, EtOAc, MeOH, chromatografie v tenké vrstvě (hodnoty Rf): normální fáze (silikagel 60); EtoAc: 0,10. EtoAc-MeOH (9:1 objem/objem): 0,41. Reverzní fáze (C18), 0,1 M NH4OAc-MeOH-CH3CN (2:4:4 objem/objem/:0,67
Sloučenina vzorce V popis: jasně žlutá amorfní pevná látka molekulární vzorec: C26H19F2N3°7 molekulární hmotnost: 523454 hmotové spektrum: hmot, spektrometr Kratos MS 25 FAMBS 524 (M+ + H)+, 361 (M-162, ztráta glukosy) ultrafialové spektrum: spektrofotometr Diodě Array Hewlett Packard 8542A; koncentrace 1,0 mg/100 ml MeOH, neutrální max nm (Ε 1 %/l cm): 398 (60), 316 (640), 280 (259), 256 (313),
226 (526) , 204 (497) infračervené spektrum: spektrometr Perkin-Elmer 1800 FTIR; KBr peleta (cm-1): 3324, 2927, 1745, 1701, 1623, 1580, 1491,
1471, 1452, 1412, 1384, 1330, 1233, 1172, 1116, 1075, 1048,
1016, 963, 916,'829, 764, 745, 646, 635, 617, 498, 490
360 MHz 1H-NMR: spektrometr Bruker Model AN-3000; duální sonda na měření 1H a 13C, 5 mm, rozpouštědlo dg-DMSO; pozorované chemické posuny (ppm) 11,77 (s, 1H), 11,18 (s, 1H), 9,12 (dd,lH), 9,05 (dd, 1H), 7,85 (dd, 1H), 7,43 (dd, 1H), 7,23 (t, 2H), 6,26 (d, 1H), 6,24 (s, 1H), 5,31 (d, 1H), 5,04 (d, 1H), 3,98 (m, 2H), 3,87 (m, 1H), 3,66 (s, 2H).
MHz 13C-NMR: spektrometr Bruker Model AM-3000; protonové dekuplované spektrum; duální sonda na měření 1H a 13C, 5 mm, rozpouštědlo dg-DMSO; pozorované chemické posuny (ppm):
170,8, 170,7, 161,8 (d), 161,8 (d), 143,2 (d) , 141,5 (d) ,
130.1, 128,7, 126,0 (d), 125,9 (d), 120,9, 119,3, 118,2,
118.1, 117,7, 116,5, 108,8 (d), 108,6 (d), 98,9 (d), 98,3 (d), 84,7, 78,6, 76,5, 73,1, 67,5, 58,3 rozpustnost: rozpustná v DMSO, DMF, THF, acetonu, EtOAc, MeOH chromatografie v tenké vrstvě (hodnoty Rf): normální fáze (silikagel 60); EtoAc: 0,40. EtoAc-MeOH (9:1 objem/objem): 0,63. Reverzní fáze (C18), 0,1 M NH4OAc-MeOH-CH3CN (2:4:4 objem/objem/: 0,60.
-10CZ 279307 B6
Sloučenina vzorce VIII popis: jasně žlutá amorfní pevná látka molekulární vzorec: C27H21F2N3°7 molekulární hmotnost: 537481 hmotové spektrum: hmot, spektrometr Kratos MS 25 FABMS 538 (M+ + H) + , 361 (M-176, ztráta 4-0 methylglukosy) ultrafialové spektrum: spektrofotometr Diodě Array Hewlett Packard 8452A: koncentrace 1/2 mg/100 ml MeOH, neutrální max nm (E 1 %/l cm): 398 (103), 316 (1050), 280 (387), 256 (454),
228 (780) infračervené spektrum: spektrometr Perkin-Elmer 1800 FTIR: KBr peleta (cm-1): 3324, 2938, 1747, 1703, 1623, 1580, 1491,
1471, 1452, 1412, 1384, 1330, 1233, 1172, 1140, 1116, 1087,
1054, 963, 918, 828, 764, 649, 635, 618, 498
360 MHz 1H-NMR: spektrometr Bruker Model AN-3000:duální sonda na měření 1H a 130, 5 mm, rozpouštědlo dg-DMSO: pozorované chemické posuny (ppm) 11,77 (s, 1H), 11,18 (s, 1H), 9,12 (dd,
1H), 9,05 (dd, 1H), 7,88 (dd, 1H), 7,41 (dd, 1H), 7,23 (m, 2H), 6,25 (d, 1H), 6,24 (s, 1H), 5,36 (dd, 1H), 5,31 (d,
1H), 5,04 (d, 1H), 3,97 (m, 2H), 3-60 - 3,95 (m, 4H)
MHz 13C-NMR: spektrometr Bruker Model AM-3000; protonové dekuplované spektrum: duální sonda 1H a 13C, 5 mm, rozpouštědlo d6-DMSO; pozorované chemické posuny (ppm): 170,8,
170.7, 161,8 (d), 161,7 (d), 143,1 (d), 141,5 (d), 130,1,
128.7, 126,0 (d), 125,9 (d), 120,9, 119,4, 118,2, 118,1,
117.7, 116,5, 108,8 (d), 108,6 (d), 98,7 (d), 98,3 (d),
84,8, 77,2, 76,2, 73,2, 59,9, 58,5 ppm rozpustnost: rozpustná v DMSO, DMF, THF, acetonu, EtOAc, MeOH chromatografie v tenké vrstvě (hodnoty Rf): normální fáze (silikagel 60); EtOAc: 0,72, EtOAc-MeOH (9:1 objem/objem): 0,89. Reverzní fáze (Clg), 0,1 M NH4OAc-MeOH-CH3CN (2:4:4 objem/objem/:0,59
Biologické vlastnosti
Reprezentativní sloučeniny podle vynálezu se zkouší se zřetelem na transplantovanou leukémii P388 myší ke stanovení in vivo protinádorové účinnosti (tabulky I až III). CDFj myši se implantuji intraperitioneálně (ip) 10 buněk P388 leukemie, získaných od DBA/2 donorové myši mající transplantovatelnou leukémii myší. CDF^ leukemická myš se ošetří ip bud’ fyziologickým roztokem (kontrolní myš), nebo dávkou sloučeniny vzorce IV, V a VIII jednou jeden den po inokulaci tumoru. Tyto myši se potom denně pozorují a jejich uhynutí se zaznamenává. U všech myší se stanovují změny střední tělesné hmotnosti (ode dne implantace leukemie až po den posledního ošetření), jako prostředek reflektující toxicitu drogy. Zaznamenávají se živé myši v každé skupině 5 dní po implantaci tumoru jako další prostředek pro posouzení toxicity drogy. Žádný . terapeutický výsledek se nepovažuje za významný, jestliže více než 1 myš v ošetřované skupině je 5. den uhynulá. Každá ošetřovaná skupina sestává ze 4 až 6 myší; kon
-11CZ 279307 B6 trolní skupina zahrnuje 10 myší. Zaznamenává še také případný počet myší, které přežijí do 30. dne (od prvního dne zkoušky).
Hodnotí se terapeutická účinnost stanovením střední doby přežití (MST) myši, ošetřené sloučeninou vzorce IV, V a VIII a porovnává se s MST paralelní kontrolní skupiny myší. Toto porovnání se provádí dělením MST ošetřené skupiny MST, neošetřené skupiny MST a násobením stem, čímž se získá parametr, nazývaný procentová T/C hodnota. Procentová T/C hodnota větší než nebo rovná 125 % se považuje na významný vzrůst doby života a tedy za aktivní výsledek.
Jak je ukázáno v tabulce I, je sloučenina vzorce IV aktivní se zřetelem na P388 leukémii v dávce 10 až 90 mg/kg. Nej lepších výsledků se dosahuje při dávce 30 mg/kg, která vede k procentové hodnotě T/C 175 %. Toxicita se nepozoruje ani při dávce nejvyšší zkoušené dávce (90 mg/kg)
Jak je zřejmé z tabulky II, je sloučenina vzorce V účinná se zřetelem na P388 leukémii v dávce 0,8 až 102,4 mg/kg. Nejlepších výsledků se dosahuje při dávce 102,4 mg/kg, jak je vyjádřeno výsledkem procentové hodnoty T/C 178 %. Toxicita není pozorována ani při nejvyšší dávce (102,4 mg/kg).
Jak je zřejmé z tabulky III je sloučenina vzorce VIII účinná proti P388 leukémii v dávkách 0,8 až 102,4 mg/kg. Nejlepších výsledků se dosahuje při dávce 51,2 mg/kg, přičemž jsou vyjádřeny procentovou hodnotou T/C 206 %. Toxicita se nepozoruje ani při největší zkoušené dávce (102,4 mg/kg).
Tabulka I
Vliv sloučeniny vzorce IV na P388 leukemiia (den 1 ošetření)
| Dávka, ip | Střední doba | T/C | Změna střední | Počet | přežilých |
| mg/kg/inj. | . přežití | % | hmotnosti | myši | |
| dny | g | 5 .den | 3 0.den | ||
| 90 | 16,5 | 165 | - 0,9 | 4/4 | 0/4 |
| 30 | 17,5 | 175 | 0,6 | 4/4 | 0/4 |
| 10 | 14,5 | 145 | 0,7 | 4/4 | 0/4 |
| kontrolní | 10,0 | 100 | 10/10 | 0/10 |
Myším implantováno 10 buněk P388 leukemie a ošetřování sloučeninou vzorce IV začalo další den. Kontrolním myším se vstříkl fyziologický roztok.
V následující tabulce II má poznámka a) tento význam:
aMyším implantováno 106 buněk P388 leukemie a ošetřováni sloučeninou vzorce v začalo den po ošetření. Kontrolním myším se vstříkl fyziologický roztok.
-12CZ 279307 B6
Tabulka II
Vliv sloučeniny vzorce V na P3 88 leukémii3 (den 1 ošetření)
| Dávka, ip mg/kg/inj. | Střední doba přežití dny | T/C % | Změna střední hmotnosti g | Počet přežilých myší | |
| 5 .den | 30.den | ||||
| 102,4 | 16,0 | 178 | - 0,1 | 6/6 | 0/6 |
| 51,2 | 15,0 | 167 | - 0,2 | 6/6 | 0/6 |
| 25,6 | 14,5 | 161 | - 0,2 | 6/6 | 0/6 |
| 12,8 | 15,0 | 167 | 0,8 | 6/6 | 0/6 |
| 6,4 | 15,0 | 167 | ~ 1,1 | 6/6 | 0/6 |
| 3,2 | 14,0 | 156 | 0,0 | 6/6 | 0/6 |
| 1,6 | 14,0 | 156 | -0,7 | 6/6 | 0/6 |
| 0,8 | 13,0 | 144 | 0,1 | 6/6 | 0/6 |
| kontrolní | 9,0 | 100 | 1,3 | 10/10 | 0/10 |
Tabulka III
Vliv sloučeniny vzorce VIII na P388 leukémii3 (den 1 ošetření)
| Dávka, ip mg/kg/inj. | Střední doba přežití dny | T/C % | Změna střední hmotnosti g | Počet přežilých myší | |
| 5 .den | 30.den | ||||
| 102,4 | 14,5 | 161 | 0,2 | 6/6 | 0/6 |
| 51,2 | 18,5 | 206 | 0,3 | 6/6 | 0/6 |
| 25,6 | 14,0 | 156 | 0,1 | 6/6 | 0/6 |
| 12,8 | 14,5 | 161 | - 0,1 | 6/6 | 0/6 |
| 6,4 | 16,0 | 178 | 0,1 | 6/6 | 0/6 |
| 3,2 | 16,5 | 183 | - 0,3 | 6/6 | 0/6 |
| 1,6 | 14,0 | 156 | - 0,1 | 6/6 | 0/6 |
| 0,8 | 14,0 | 156 | - 0,4 | 6/6 | 0/6 |
| kontrolní | 9,0 | 100 | 1,3 | 10/10 | 0/10 |
aMyším implantováno 106 buněk P388 leukemie a ošetřování sloučeninou vzorce VIII začalo den po ošetření. Kontrolním myším se vstříkl fyziologický roztok.
Vynález se také týká farmaceutických prostředků, které obsahují účinné, růst nádoru inhibující množství analogu rebeccamycinu podle vynálezu nebo jeho farmaceuticky vhodné adiční soli s kyselinou spolu s inertním, farmaceuticky vhodným nosičem nebo ředidlem.
Vynález se také týká způsobu farmaceutického ošetřování zvířat (s výhodou savců) s maligním nádorem, podle kterého se podává ošetřovanému zvířeti účinná, nádor inhibující dávka antibiotika
-13CZ 279307 B6 podle vynálezu nebo jeho farmaceuticky vhodné adiční soli s kyselinou.
Jako příklady vhodných farmaceutických prostředků se uvádějí pevné prostředky pro orální podávání, jako jsou tablety, kapsle, pilulky, prášky nebo granule, kapalné prostředky, pro orální podávání, jako jsou roztoky, suspenze, sirupy a elixíry a přípravky pro parenterální podávání, jako jsou sterilní roztoky, suspenze nebo emulze. Farmaceutické prostředky se také mohou vyrábět ve formě sterilních pevných látek, které se mohou rozpouštět ve sterilní vodě, ve fyziologickém roztoku nebo v jiném sterilním vstřikovatelném prostředí bezprostředně před použitím.
Případná výhodná dávkovači forma rebeccamycinových analogů podle vynálezu se řídí příslušnou používanou sloučeninou, jeho dávkovači formou, způsobem podávání a stavem ošetřovaného jedince. Četné faktory mohou modifikovat působení drogy, takže pracovník v oboru musí brát zřetel například na věk, tělesnou hmotnost, pohlaví, dietu, dobu podávání, míru vylučování, stav ošetřovaného jedince, kombinaci drog, reakční citlivost a závažnost onemocnění. Podávání je možné kontinuální nebo periodické při maximální tolerované dávce. Optimální míra podávání pro danou řadu podmínek je pracovníkem v oboru snadno stanovitelná za použití běžných testů podávačích dávek.
Následující praktické příklady vynález objasňují, nijak jej však neomezují.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Příprava kryopreservativni kultury Sacčharothrix aerocolonigenes kmenu C38,383-RK2 (ATCC 39243)
Saccharothrix aerocolonigenes kmen C38,383-RK2 se udržuje jako kryopreservativni kultura skladovaná při teplotě -80 °C v ultraní.zkoteplotním mrazáku Revco. Pro přípravu této kryopreservativní kultury se kmen C38,383-RK2 převede ve zkumavce na šikmých kvasnicosladinkovýfch agarech doplněných uhličitanem vápenatým a majících toto složeni:.
dextrosa 4,0g kvasnicový extrakt 4,0g sladinkový extrakt 10,0g uhličitan vápenatý 1,5g agar 15,0g demineralizovaná voda q.s. do 1 litru
Agarové šikmé vrstvy se inkubují při teplotě 28 °C po dobu 7 až 10 dní. Připraví se vegetativní kultura přenesením povrchového růstu ze šikmé kultury do Erlenmayerovy baňky o obsahu 500 ml, obsahující 100 ml sterilního vegetativního prostředí o složeni:
-14CZ 279307 B6
Cerelosa (kukuřičný produkt) 30 g
Pharmamedia (Trades Oil Milí Co.) 10 g
Nutrisoy (Trades Oil Milí Co.) 10 g uhličitan vápenatý 3 g demineralizovaná voda g.s do 1 litru
Tato vegetativní kultura se inkubuje při teplotě 28 °C po dobu 48 hodin na rotační třepačce za počtu otáček 250/min. Vegetativní kultura se smísí se stejným objemem kryoprotekčního roztoku o složení:
sacharosa 100 g glycérol 200 g demineralizovaná voda g.s. do 1 litru
Podíly po 4 ml této směsi se převedou do sterilní kryogenní zkumavky (o kapacitě 5 ml, Corning) a zmrazí se v suché lázni acetonu a ledu. Zmrazené vegetativní kultury se potom skladují při teplotě - 80 °C v ultranízkoteplotním mrazáku Revco.
Příklad 2
Příprava vegetativní kultury S.accharothrix aerocolonigenes kmen C38,383-RK2 (ATCC 39243)
Připravuje se vegetativní kultura převedením 4 ml kryopreservativní kultury do Erlenmayerovy baňky o obsahu 500 ml, obsahující 100 ml sterilního vegetativního prostředí, stejného složení, jako je uvedeno pro vegetativní prostředí podle příkladu 1. Vegetativní kultura se inkubuje při teplotě 28 C po dobu 48 hodin v rotační třepačce při počtu otáček 250/min.
Příklad 3
Příprava sloučeniny vzorce IV . 3 ml vegetativní Erlenmayerovy baňky o produkčního prostředí o škrob Staclipse J-UB (A.E. kaliumdihydrogenfos forečnan síran hořečnatý
L-threonin uhličitan vápenatý demineralizovaná voda g.s.
kultury podle obsahu 500 složení;
Staley) příkladu 2 se naočkuje do ml obsahující vždy 100 ml g
g g
2,5 g g
do 1 litru
Produkční kultura se inkubuje při teplotě 28 °C na rotační třepačce o počtu otáček 250/min. Po 48 hodinách fermentace se do kultury přidá DL-5-fluortryptofan do konečné koncentrace 1 mg/ml. Kultura se inkubuje při teplotě 28 “C a protřepává se za počtu otáček 250/min po dobu dalších 4 dnů. Produkce sloučeniny vzorce IV se monitoruje chromatografii HPLC. Optimální produkce sloučeniny vzorce IV se při koncentraci 23 až 32 mg/ml obecně dosahuje 6. den fermentace (to znamená 4 dny po přidání DL-5-fluortryptofanu).
-15CZ 279307 B6
Příklad 4
Příprava sloučeniny vzorce V a vzorce VIII ml vegetativní kultury podle příkladu 2 se naočkuje do Erlenmayerovy baňky o obsahu 500 ml obsahující vždy 100 ml produkčního prostředí stejného složení jako podle příkladu 3.
Produkční kultura se inkubuje při teplotě 28 °C na rotační třepačce o počtu otáček 250/min. Po 48 hodinách fermentace se přidá DL-6-fluortryptofan do kultury po konečnou koncentraci 1 mg/ml. Kultura se inkubuje při teplotě 28 °C a za protřepávání při počtu otáček 250/min po dobu dalších 4 dnů. Produkce sloučenin vzorce V a vzorce VIII se monitoruje chromatografií HPLC. Optimální produkce sloučeniny vzorce V a vzorce VIII se získá obecně 6. den fermentace (to je 4 dny po přidání DL-6-fluortryptofanu) při koncentraci 36 až 58 μg/ml a 31 až 42 μg/ml.
Příklad 5
Izolace a čištění sloučenin vzorce IV, V a VIII
a) Obecný způsob
Rozpouštědla se neredistilují před použitím. Methanol, aceton. ethylacetát, isopropylether, chloroform, tetrahydrofuran, ethylether a hexany jsou reagenciemi čistoty ACS. Vodou pro chromatografii HPLC je vodovodní demineralizovaná voda ze systému Bernstead Nonopure II. Tetrahydrofuran, methanol a acetonitril pro chromatografii HPLC jsou rozpouštědly B and J Brand HPLC čistoty. Amoniumacetát je produkt čistoty Fisher HPLC.
Používá se normálního fázového chromatografu v tenké vrstvě a chromatografie se provádí na silikagelu 60, na destičkách F-254 (EM reagencie, katalogové číslo 5765, 5 x 10 cm při tloušťce 0,25 mm). Reverzní fázová chromatografie v tenké vrstvě se provádí na destičkách Whatman MKC18 (katalogové číslo 4803-110 o tloušťce 0,2 mm). Destičky se vyvíjejí ve Watmanových válcových nádobách s víčkem a s 10 ml elučního činidla. Rebeccamycinové analogy jsou patrné jako žluté zóny při normálním světle nebo jako žlutě fosforeskující zóny v ultrafialovém světle 254 nm nebo 3 6 6 nm.
Do veškeré živné půdy se přidá Dicalite (speed plus) filtrační pomocná přísada. Po krátkém zamíchání živné půdy se provede filtrace ve velké Buchnerově nálevce nebo na odstředivé filtrační jednotce Tolhurst Centerslung (Model 1B15, Ametex, lne.). Filtráty se vyhodí. Miceliální rohož se rozmíchá v tetrahyfrofuranu nebo ve směsi tetrahydrofuranu a acetonu v průběhu jedné hodiny, zfiltruje se a Dicalite se dále propláchne acetonem až již nepozoruje žlutá fluorescence v ultrafialovém světle. Spojené filtráty se zkoncentrují za sníženého tlaku, čímž se získají žluté.extrakty.
-16CZ 279307 B6
Vakuová jednotka pro kapalinovou chromatografii (VLC) sestává z Bůchnerovy nálevky (Kontes, druh číslo K-954100) obsahující připevněný kotouč ze slinutého skla (porozity M) s postranním hadicovým napojením na vakuum a nižším 24/40 spojem pro upevnění příjmových baněk. Zpočátku se alespoň polární eluční rozpouštědla prolévají za vakua k vytvoření utěsněné absorpční vrstvy o výšce 5 cm. Vzorky se předadsorbuji na adsorbentu a na nálevku se vnesou ve formě suspenze nebo se použijí v roztoku alespoň polárního elučního rozpouštědla. Nastavují se gradienty přičemž předem stase vzrůstající polaritou tvoří frakce.
sucha se na noveně objemy eluantu Nálevka se odsaje do zkoncentruj i a spoj i vrstvé.
po každém objemu eluantu. Frakce se bázi analyzy chromatografií v tenké
Chromatografická (2,5 vnitřní průměr odolnými proti rozpouštědlu; průtokoměr lne. padlo (Model RP-G150) skleněný tor frakcí Isco LH-20 (Pharmacia) přebobtnalým v elučním tědlo se zavádí, řízenou laboratorním čerpadlem.
aparatura je následující: sloupec Glenco x 100 cm) vybavený teflonem a destičkami FMI laboratorní čerreservoir Glenco (500 ml), kolekModel 328. Sloupce jsou vyplněny Sephadexem rozpouštědle. Rozpoušaby ze shora postupovalo sloupcem rychlostí
Pro kontrolu polopreparativního HPLC systému se používá těchto složek: čerpadlo rozpouštědla typu Waters Associates Model 590; detektor vlnové délky Knauer Model 87; záznamové zařízení Waters Associates model SR-204; sloupec Whatman Partisil 10 ODS-3 (10 mm x 50 cm); nerezavějící potrubí z oceli 316 (o vnitřním průměru 0,23mm).
b) Izolace a čistění sloučeniny vzorce IV
Veškeré živné prostředí (5 litrů) se zfiltruje s Dicalitem a myceliální rohož se extrahuje mícháním v tetrahydrofuranu (2 litry ) po dobu 1 hodiny. Po opětovném zfiltrování a opětovném propláchnutí tetrahydrofuranem (1 litr) se spojené filtráty zkoncentřují za sníženého tlaku, čímž se získá 4,5 g surového extraktu. Extrakt se absorbuje na 6,5 g silikagelu Lichroprep Si 60 (EM Science, druh 9336, 15 až 25 mikrometry) a vnese se na 60 ml VLC nálevku obsahující přídavně 24,5 g silikagelu. Proplachuje se systémem hexan-ethylcetát (200 ml objemy) a potom se propláchne 200 ml tetrahydrofuranu. Tetrahydrofuranový výluh (156 mg) se rozpustí v 4 ml tetrahydrofuranu a vnese se na sloupec obsahující 160 g Sephadexu LH-20 vyváženého tetrahydrofuranem (výška vrstvy 90 cm, objem vrstvy 430 ml). Průtoková rychlost je 3,75 ml/min. Jak je možno vizuálně posoudit hlavní žlutý pás (62 mg) se eluuje v první čtvrtině z druhého objemu vrstvy. Konečné čištění se provádí reverzní fázovou (C18) HPLC chromatografii s průtokovou rychlostí 4 ml/min (0,1 M NH4OCa-THP (60 až 40). Detekuje je při 320 nm. Eluantem při 39 minutách je hlavní analog (23 mg) označený jako sloučenina vzorce IV.
-17CZ 279307 B6
c) Izolace a čištění sloučeniny vzorce V a vzorce VIII
Veškerá živná půda (2 litry) se zfiltruje za použití filtrační pomocné látky Dicalit. Myceliální rohož po promíchání v tetrahydrofuranu (2 litry) v průběhu 45 minut, zfiltruje se a propláchne se dalším množstvím (1,5 litru) tetrahydrofuranu. Filtrát se zkoncentruje za sníženého tlaku, čímž se získá 3,39 g surového produktu. Surový extrakt se trituruje pětkrát vždy 50 ml tetrahydrofuranu, získané objemy se spojí a koncentrují se, čímž se získá 0,74 g v tetrahydrofuranu nerozpustného zbytku. Tato hmota obsahuje žlutý fosforeskující materiál. V tetrahydrofuranu rozpustný materiál se adsorbuje na 2 g silikagelu H (Měrek, 10 až 40 mikrometrů) a vnese se do 30 ml VLC nálevky, obsahující přídavných 11 g silikagelu H. Hexan-ethylacetátový postupný gradient se používá se 100 ml objemu elučního činidla. Dva hlavní rebeccamycinové analogy se tímto čistým způsobem oddělí. Méně polární žlutá zóna (141 mg) se eluuje hexa-ethylacetátem (1 : 1) a polárnější analog (105 mg) systémem hexa-ethylacetát (1 : 3).
Polárnější analog (105 mg) se rozpustí v 2 ml tetrahydrofuranu a vnese se na sloupec obsahující 160 g Sephadexu LH-20 ( výška vrstvy 90 cm, objem vrstvy 430 ml) přebobtnalého v tetrahydrofuranu. Rychlost toku je 4 ml/min. Hlavní žlutý pás, eluovaný v 1,25 objemu vrstvy se vizuálně určuje jako žádaná sloučenina vzorce V (77 mg).
Méně polární analog z vakuové kapalinové chromatografie (VLC) (141 mg) se rozpustí ve 2 ml methanolu a vnese se na sloupec obsahující 110 g Sephadexu LH-20, přebobtnalého v methanolu (výška vrstvy je 80 cm, objem vrstvy je 400 ml). Rychlost toku je 3,5 ml/min. Hlavní žlutá zóna eluovaná na konci vede k získání sloučeniny vzorce VIII (v množství 70 mg).
Claims (15)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Rebeccamycinový analog obecného vzorce A /A/ kde znamená X3 a X2 na sobě nezávisle atom fluoru nebo vodíku za podmínky, že X-j_ a X2 neznamenají současně oba atom vodíku, a X3 hydroxyskupinu nebo methoxyskupinu a jeho farmaceuticky vhodné adiční soli s kyselinou.
- 2. Rebeccamycinový analog podle nároku 1 obecného vzorce II-19CZ 279307 B6 kde znamená X-j_ a X2 na soně nezávisle atom fluoru nebo vodíku za podmínky, že X·^ a X2 neznamenají současně oba atom vodíku a jeho farmaceuticky vhodné adiční soli s kyselinou.
- 3. Rebeccamycinový analog podle nároku 2 obecného vzorce III kde znamená X-p a X2 na sobě nezávisle atom fluoru nebo atom vodíku za podmínky, že X1 a X2 neznamenají současně atom vodíku a jeho farmaceuticky vhodné adiční soli s kyselinou.
- 4. Rebeccamycinový analog podle nároku 2 obecného vzorce IV-20CZ 279307 B6
- 5. Rebeccamycinový analog podle nároku 2 obecného vzorce V
- 6.Rebeccamycinový analog podle nároku 2 obecného vzorce VI /VI/
- 7. Rebeccamycinový analog podle nároku2 obecného vzorce VII /VII/ podle nároku3 obecného vzorce VIII /Vlil/9.Rebeccamycinový analog podle nároku 3 obecného vzorce IX /IX/
- 10.Rebeccamycinový analog podle nároku 3 obecného vzorce X-23CZ 279307 B6
- 11.Rebeccamycinový analog podle nároku 3 obecného vzorce XI /XI/
- 12.Způsob přípravy rebeccamycinového analogu podle nároku 1 až 11 a jeho farmaceuticky vhodné adiční soli s kyselinou, vyznačující se tím, že se kultivuje rebeccamycin produkující kmen Saccharothrix aerocolonigenes ATCC 39243 ve vodném živném prostředí v přítomnosti tryptofanového analogu až do vytvoření podstatného množství žádaného rebeccamycinového analogu používaným organismem v kultivačním prostředí a žádaný rebeccamycinový derivát se z kultivačního prostředí získá v čisté formě.
- 13.Způsob podle nároku 12, že tryptofanovým analogem vyznačuj ící je DL-4-fluortryptofan.t í m,
- 14.Způsob podle nároku 12, že tryptofanovým analogem vyznačující s je DL-5-fluortryptofan.tím,
- 15.Způsob podle nároku 12, že tryptofanovým analogem vyznačující je DL-6-fluortryptofan.tím,
- 16.Způsob podle nároku 12, že tryptofanovým analogem vyznačuj ící je DL-7-fluortryptofan.
- 17.Farmaceutický prostředek pro terapeutické ošetřování savců s nádorovým onemocněním citlivým na rebeccamycinový analog podle nároků 1 až 11,vyznačující se tím, že obsahuje účinné, nádor inhibující množství alespoň jednoho rebeccamycinového derivátu podle nároků 1 až 11 spolu s farmaceuticky vhodným, netoxickým nosičem nebo excipientem.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US48943090A | 1990-03-06 | 1990-03-06 | |
| US64875191A | 1991-02-05 | 1991-02-05 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS9100586A2 CS9100586A2 (en) | 1991-10-15 |
| CZ279307B6 true CZ279307B6 (cs) | 1995-04-12 |
Family
ID=27049711
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS91586A CZ279307B6 (cs) | 1990-03-06 | 1991-03-06 | Rebeccamycinový analog, způsob jeho přípravy a farmaceutický prostředek, který ho obsahuje |
Country Status (22)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5468849A (cs) |
| EP (1) | EP0450327B1 (cs) |
| JP (1) | JPH0780899B2 (cs) |
| KR (1) | KR940005657B1 (cs) |
| AT (1) | ATE138926T1 (cs) |
| AU (1) | AU623050B2 (cs) |
| CY (1) | CY1941A (cs) |
| CZ (1) | CZ279307B6 (cs) |
| DE (1) | DE69119964T2 (cs) |
| DK (1) | DK0450327T3 (cs) |
| ES (1) | ES2088439T3 (cs) |
| FI (1) | FI102376B1 (cs) |
| GR (1) | GR3020163T3 (cs) |
| HK (1) | HK181496A (cs) |
| HU (1) | HU211055B (cs) |
| IE (1) | IE910737A1 (cs) |
| IL (1) | IL97233A (cs) |
| NO (1) | NO179555C (cs) |
| PT (1) | PT96943B (cs) |
| SG (1) | SG63555A1 (cs) |
| TW (1) | TW232698B (cs) |
| YU (1) | YU39391A (cs) |
Families Citing this family (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5437996A (en) * | 1992-11-24 | 1995-08-01 | Banyu Pharmaceutical Co., Ltd. | Microtetraspora strain for preparation of indolopyrrolocarbazole derivatives |
| NZ245203A (en) * | 1991-11-29 | 1997-07-27 | Banyu Pharma Co Ltd | 5h-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]carbazole-5,7(6h)-dione derivatives substituted in position-13 by a pentose or hexose group; corresponding indolo-furano(anhydride)intermediates |
| US5589365A (en) * | 1991-11-29 | 1996-12-31 | Banyu Pharmaceutical Co., Ltd. | Process for producing glycosylated indolopyrrolocarbazole derivatives by culturing certain microorganisms |
| CA2130836A1 (en) * | 1992-03-20 | 1993-09-30 | Martin J. Slater | Further indole derivatives with antiviral activity |
| JP3603322B2 (ja) * | 1992-12-14 | 2004-12-22 | 萬有製薬株式会社 | インドロピロロカルバゾール誘導体の製造法 |
| USRE37206E1 (en) * | 1994-06-13 | 2001-06-05 | Banyu Pharmaceutical Co, Ltd | Gene encoding glycosyltransferase and its uses |
| CN1097460C (zh) * | 1996-08-22 | 2003-01-01 | 布里斯托尔-迈尔斯斯奎布公司 | 吲哚并吡咯并咔唑的细胞毒的氨基糖及相关的糖衍生物 |
| US6677450B2 (en) | 2000-10-06 | 2004-01-13 | Bristol-Myers Squibb Company | Topoisomerase inhibitors |
| US6610727B2 (en) | 2000-10-06 | 2003-08-26 | Bristol-Myers Squibb Company | Anhydro sugar derivatives of indolocarbazoles |
| US6653290B2 (en) | 2000-10-06 | 2003-11-25 | Bristol-Myers Squibb Company | Tumor proliferation inhibitors |
| JP2004534006A (ja) | 2001-03-22 | 2004-11-11 | ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニー | インドロピロロカルバゾール化合物のトポイソメラーゼｉ選択的細胞毒シュガー誘導体 |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4487925A (en) | 1983-01-28 | 1984-12-11 | Bristol-Myers Company | Rebeccamycin and process for its preparation |
| US4552842A (en) * | 1983-01-28 | 1985-11-12 | Bristol-Myers Company | Process for producing rebeccamycin |
| US4567143A (en) * | 1984-09-04 | 1986-01-28 | Bristol-Myers Company | Process for preparing 4'-deschlororebeccamycin |
| US4524145A (en) * | 1984-09-04 | 1985-06-18 | Bristol-Myers Company | 4'-Deschlororebeccamycin pharmaceutical composition and method of use |
| US4785085A (en) * | 1986-11-21 | 1988-11-15 | Bristol-Myers Company | Rebeccamycin analogs |
| US4808613A (en) * | 1986-11-21 | 1989-02-28 | Bristol-Myers Company | Rebeccamycin derivative containing pharmaceutical composition |
-
1991
- 1991-02-14 IL IL9723391A patent/IL97233A/en unknown
- 1991-03-01 FI FI911047A patent/FI102376B1/fi not_active IP Right Cessation
- 1991-03-04 TW TW080101707A patent/TW232698B/zh active
- 1991-03-05 EP EP91103316A patent/EP0450327B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1991-03-05 AT AT91103316T patent/ATE138926T1/de not_active IP Right Cessation
- 1991-03-05 DK DK91103316.5T patent/DK0450327T3/da active
- 1991-03-05 JP JP3038752A patent/JPH0780899B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1991-03-05 IE IE073791A patent/IE910737A1/en not_active IP Right Cessation
- 1991-03-05 NO NO910855A patent/NO179555C/no unknown
- 1991-03-05 HU HU91716A patent/HU211055B/hu not_active IP Right Cessation
- 1991-03-05 ES ES91103316T patent/ES2088439T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1991-03-05 SG SG1996002071A patent/SG63555A1/en unknown
- 1991-03-05 DE DE69119964T patent/DE69119964T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1991-03-05 KR KR1019910003548A patent/KR940005657B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 1991-03-05 PT PT96943A patent/PT96943B/pt not_active IP Right Cessation
- 1991-03-05 AU AU72616/91A patent/AU623050B2/en not_active Ceased
- 1991-03-06 CZ CS91586A patent/CZ279307B6/cs unknown
- 1991-03-06 YU YU39391A patent/YU39391A/sh unknown
-
1994
- 1994-03-21 US US08/216,075 patent/US5468849A/en not_active Expired - Fee Related
-
1996
- 1996-06-06 GR GR960401487T patent/GR3020163T3/el unknown
- 1996-09-26 HK HK181496A patent/HK181496A/en not_active IP Right Cessation
-
1997
- 1997-05-16 CY CY194197A patent/CY1941A/xx unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4981792A (en) | Immunosuppressant compound | |
| EP0349061A2 (en) | Immunosuppressant agent | |
| JP2917305B2 (ja) | Ｆｒ−９０１１５５物質およびその生産法 | |
| EP1751272B1 (en) | Production of tacrolimus (fk-506) using new streptomyces species | |
| JPH03215428A (ja) | Ｂｍｙ―４１９５０抗腫瘍抗生物質 | |
| US4987139A (en) | FK-520 microbial transformation product | |
| JPH0320279A (ja) | 新規免疫抑制剤 | |
| CZ279307B6 (cs) | Rebeccamycinový analog, způsob jeho přípravy a farmaceutický prostředek, který ho obsahuje | |
| US4975372A (en) | Microbial transformation product of L-683,590 | |
| CA2037596C (en) | Rebeccamycin analog by bromide precursor feeding | |
| EP0161849A2 (en) | Cl-1724 antibiotic-antitumour compounds, pharmaceutical compositions comprising the compounds and a novel microorganism for producing the compounds | |
| US5158938A (en) | Rebeccamycin | |
| RU2228337C2 (ru) | Ванкорезмицин (варианты), его использование, штамм amycolatopsis вида hil-006734 для его получения | |
| US5344823A (en) | Antitumor antibiotic BMY-41219 | |
| US5290772A (en) | Immunosuppressant agent | |
| EP0396400A1 (en) | Microbial transformation product | |
| CA2037783C (en) | Rebeccamycin analogs by tryptophan analogs feeding | |
| US5268370A (en) | Microbial transformation product of L-679,934 | |
| US5270187A (en) | Microbial transformation product | |
| EP0378317A2 (en) | Microbial transformation product of L-679,934 | |
| US5811440A (en) | Antitumor antibiotic BMS-199687 | |
| CZ20022826A3 (cs) | Pluraflaviny a jejich deriváty, způsob jejich přípravy a jejich pouľití | |
| CA2007679A1 (en) | Microbial transformation product |